CN105954085A - 无汞苏木素染色液 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种无汞苏木素染色液，其由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000～1500份，丙三醇70‑100份，以及1～2％的高碘酸水溶液40～60份，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素6～8g/L，硫酸铝钾40～60g/L以及柠檬酸3～6g/L。本发明所述的无汞苏木素染色液染色时间短，染色效果好。所染色处理的细胞，其细胞核染色清晰，染色质、核膜及核仁结构清晰。
Description
技术领域
本发明属于病理学实验技术领域，涉及体外诊断试剂，尤其涉及一种无汞苏木素染色液。
背景技术
组织病理学的诞生已有150多年的历史，在所有的医院，只要有手术，均由医院病理科对手术组织样本作出组织病理学诊断。
常规石蜡包埋HE染色制片是当前用以处理组织样本的最基本技术，它是病理诊断方法学的基础，也是许多新方法、新技术优劣的评定参照标准。传统的方法是将组织样本放置处理液的缸中，依次倒入或调入不同处理液，样本依次在每个试剂中按规定浸泡不同时间完成处理切片、染色、封片等，全程需要30多个步骤。整个过程大量使用甲醛、二甲苯、氧化汞、氨水有毒害化学试剂，病理技术人员长期置身于有毒环境，且试剂排放严重污染环境。并且所用的试剂宽容度差，操作复杂，试剂消耗量大，病理制片优质片低(全国统计在40～70％)，影响诊断。同时绝大数医院自行配试剂，缺乏统一标准。因此病理行业组织标本处理液用品的标准化生产、无毒化、社会化供求，是行业发展的必然趋势。
苏木素是一种天然染料，其作为单一的染色是不行的，它染色力弱，必须具备两个条件才能具有强的染色力。一是产生有效成分苏木红，二是加入媒染剂。苏木红的产生需经氧化才能获得，获得苏木红有两种方法，一是天然成熟，苏木素与其它试剂混合好后，暴露于阳光或亮处，在自然光的作用下，慢慢地氧化成熟，但时间较长，一般需八周左右。二是加入化学试剂促进成熟，如加入氧化汞或碘酸钠促使苏木素成熟。
Harris氏苏木素为当前最广泛使用的染液，由于它染色时间短，效果好，很受使用者的欢迎。但是其中用到的氧化汞是公认的剧毒有害化学品，并且其配置方法有诸多注意事项，不易于控制。
因此，研发无汞苏木素染色液，替代氧化汞氧化工艺用于病理学实验具有重要的意义。
发明内容
本发明设计开发了一种染色时间短、染色效果好的无汞苏木素染色液。
本发明提供的技术方案为：
一种无汞苏木素染色液，其由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000～1500份，丙三醇70-100份，以及1～2％的高碘酸水溶液40～60份，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素6～8g/L，硫酸铝钾40～60g/L以及柠檬酸3～6g/L。
优选的是，所述的无汞苏木素染色液中，其由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000份，丙三醇80份以及1％的高碘酸水溶液60份，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素7g/L，硫酸铝钾50g/L以及柠檬酸5g/L。
优选的是，所述的无汞苏木素染色液中，所述添加组分还包含碳纳米颗粒，碳纳米颗粒的粒径为10～100nm，碳纳米颗粒相对于混合溶液的质量百分数为0.005～0.009％。
优选的是，所述的无汞苏木素染色液中，所述添加组分还包含碳纳米颗粒，碳纳米颗粒的粒径为40～100nm，碳纳米颗粒相对于混合溶液的质量百分数为0.009％。
本发明所述的无汞苏木素染色液染色时间短，染色效果好。所染色处理的细胞，其细胞核染色清晰，染色质、核膜及核仁结构清晰。本发明所述的无汞型环保苏木素染色液可满足常规病理诊断、免疫组织化学诊断技术、分子生物学诊断技术要求，染色处理的组织效果优于传统技术，可完全替代氧化汞作为氧化剂工艺应用于相关的病理学实验。
附图说明
图1为采用本发明所述的无汞苏木素染色液染色的肠组织染色显微照片(放大倍数为200倍)。
图2为采用本发明所述的无汞苏木素染色液染色的肝组织染色显微照片(放大倍数为200倍)。
具体实施方式
下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
本发明提供一种无汞苏木素染色液，其由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000～1500份，丙三醇70-100份，以及1～2％的高碘酸水溶液40～60份，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素6～8g/L，硫酸铝钾40～60g/L以及柠檬酸3～6g/L。
本发明提供的无汞苏木素染色液采用非汞氧化工艺配制，其中优化了媒染剂硫酸铝钾的剂量，降低了溶液体系中过高的无效溶质浓度；并且优选了溶液的反应温度和氧化剂的浓度，避免了传统配制方法中色元分子过度氧化造成的产生氧化膜现象；进一步使用高碘酸为氧化剂，避免氧化反应时金属离子的产生，由于无晶核形成使溶液结晶和溶胶化问题得以解决。经组织切片染色实验证明，细胞核染色清晰，染色质、核膜及核仁结构清晰。
该实施例中无汞苏木素染色液的配制过程，包括如下步骤：
1)按比例量取各组分；
2)将硫酸铝钾水溶液加热至摄氏90～95度，其中，硫酸铝钾水溶液的浓度为5％；
3)加入苏木素无水乙醇溶液，混匀，加热至溶液沸腾，其中，苏木素无水乙醇溶液的浓度为5％；
4)再加入高碘酸溶液，混匀，煮沸5～10分钟，其中，高碘酸水溶液的浓度为1％；
5)迅速将溶液移至冷水内降温至室温后，加入柠檬酸混匀即可。
在一个优选的实施例中，所述的无汞苏木素染色液中，其由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000份，丙三醇80份以及1％的高碘酸水溶液60份，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素7g/L，硫酸铝钾50g/L以及柠檬酸5g/L。
在一个优选的实施例中，所述的无汞苏木素染色液中，所述添加组分还包含碳纳米颗粒，碳纳米颗粒的粒径为10～100nm，碳纳米颗粒相对于混合溶液的质量百分数为0.005～0.009％。
碳纳米颗粒有助于提高苏木素的稳定性，延长染色液的储藏时间；可以避免出现苏木红过度氧化的情况；另外，碳纳米颗粒更有助于苏木红附着于细胞内须染色的部分上，并使着色稳定；而且碳纳米颗粒还可以完全避免苏木素结晶，从而提高染色的质量。
该实施例中无汞苏木素染色液的配制过程，包括如下步骤：
1)按比例量取各组分；
2)将硫酸铝钾水溶液加热至摄氏90～95度，其中，硫酸铝钾水溶液的浓度为5％；
3)加入苏木素无水乙醇溶液，混匀，加热至溶液沸腾，其中，苏木素无水乙醇溶液的浓度为5％；
4)再加入高碘酸溶液，混匀，煮沸5～10分钟，其中，高碘酸水溶液的浓度为1％；
5)迅速将溶液移至冷水内降温至室温后，加入柠檬酸和碳纳米颗粒混匀即可。
在一个优选的实施例中，所述的无汞苏木素染色液中，所述添加组分还包含碳纳米颗粒，碳纳米颗粒的粒径为40～100nm，碳纳米颗粒相对于混合溶液的质量百分数为0.009％。
为了进一步说明本发明技术方案，以下提供四个实施例。
实施例一
本实施例中，无汞苏木素染色液由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000mL，丙三醇70mL，以及1％的高碘酸水溶液40mL，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素6g/L，硫酸铝钾40g/L以及柠檬酸3g/L。
应用该实施例的染色液染色时间仅需6min，染色液可以持续使用一年半。经组织切片染色实验证明(请看图1和图2)，细胞核染色清晰，染色质、核膜及核仁结构清晰。
实施例二
本实施例中，无汞苏木素染色液由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1500mL，丙三醇100mL，以及2％的高碘酸水溶液60mL，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素8g/L，硫酸铝钾60g/L以及柠檬酸6g/L。
应用该实施例的染色液染色时间仅需5min，染色液可以持续使用一年半。经组织切片染色实验证明，细胞核染色清晰，染色质、核膜及核仁结构清晰。
实施例三
本实施例中，无汞苏木素染色液由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000mL，丙三醇80mL以及1％的高碘酸水溶液60mL，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素7g/L，硫酸铝钾50g/L，柠檬酸5g/L以及碳纳米颗粒，碳纳米颗粒的粒径为10～100nm，碳纳米颗粒相对于混合溶液的质量百分数为0.005％。
应用该实施例的染色液染色时间仅需3min，染色液可以持续使用两年。经组织切片染色实验证明，细胞核染色清晰，染色质、核膜及核仁结构清晰。
实施例四
本实施例中，无汞苏木素染色液由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000mL，丙三醇80mL以及1％的高碘酸水溶液60mL，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素7g/L，硫酸铝钾50g/L，柠檬酸5g/L以及碳纳米颗粒，碳纳米颗粒的粒径为40～100nm，碳纳米颗粒相对于混合溶液的质量百分数为0.009％。
应用该实施例的染色液染色时间仅需2min，染色液可以持续使用两年。经组织切片染色实验证明，细胞核染色清晰，染色质、核膜及核仁结构清晰。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。
Claims (4)
1.一种无汞苏木素染色液，其特征在于，其由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000～1500份，丙三醇70-100份，以及1～2％的高碘酸水溶液40～60份，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素6～8g/L，硫酸铝钾40～60g/L以及柠檬酸3～6g/L。
2.如权利要求1所述的无汞苏木素染色液，其特征在于，其由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000份，丙三醇80份以及1％的高碘酸水溶液60份，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素7g/L，硫酸铝钾50g/L以及柠檬酸5g/L。
3.如权利要求2所述的无汞苏木素染色液，其特征在于，所述添加组分还包含碳纳米颗粒，碳纳米颗粒的粒径为10～100nm，碳纳米颗粒相对于混合溶液的质量百分数为0.005～0.009％。
4.如权利要求3所述的无汞苏木素染色液，其特征在于，所述添加组分还包含碳纳米颗粒，碳纳米颗粒的粒径为40～100nm，碳纳米颗粒相对于混合溶液的质量百分数为0.009％。
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