CN108414328A - 一种改良型苏木精染色液试剂、制备方法和染色方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种改良型苏木精染色液试剂、制备方法和染色方法，锁色染色液试剂每150ml的蒸馏水中包括以下组份：苏木素1.0±0.1g；无水乙醇25±5ml；硫酸铝铵5±1g；硫酸铬钾；5±1g；甘油25±5ml；冰醋酸5±1ml；碘酸钠0.2±0.1g。本发明染色迅速且十分清晰,色彩与目前通用的Harris氏染色液相同,并具有安全可靠等优点,具有强的推广使用价值。
Description
技术领域
本发明属于涉及组织学、细胞学、病理学和临床病例检测学，尤其涉及细胞核染色的苏木精染色液改良技术。
背景技术
苏木精是一种组织学细胞核染色的常用染色剂，经过特定染色程序之后，能够使细胞核染成蓝色。人们多习惯于使用Harris氏苏木精染色液，该染色液的优点是染色清晰、色彩美观,但其具有很多缺点，包括媒染剂析出结晶多、液面出现亮膜,易污染切片,氧化程度也不易控制,尤其是配方中含有剧毒品氧化汞。因此需要一种染色迅速，色彩清洗，且更安全环保的染色液试剂。
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提供一种改良型苏木精染色液试剂、制备方法和染色方法，染色迅速且十分清晰,色彩与目前通用的Harris氏染色液相同,并具有安全可靠等优点,具有强的推广使用价值。
为实现以上的技术目的，本发明将采取以下的技术方案：一种改良型苏木精染色液试剂，每150ml的蒸馏水中包括以下组份：
作为优选，每150ml的蒸馏水中包括以下组份：
本发明还提供了一种上述改良型苏木精染色液试剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将1g的苏木素溶于无水乙醇中形成苏木素的乙醇溶液，备用；
(2)将5g的硫酸铝铵和5g的硫酸铬钾溶于蒸馏水中，搅拌溶解，并与步骤(1)得到的苏木素的乙醇溶液进行混合；
(3)在混合液中继续加入碘酸钠，并搅拌氧化3～5min，接着在氧化后的混合液中继续依次加入5ml的冰醋酸和25ml的甘油，并搅拌均匀，静置3h以上，完成。
本发明还提供了一种改良型苏木精染色液试剂的染色方法，包括以下步骤：
首先，将待检测样本的石蜡切片经过脱蜡，并复水至70％酒精；然后将复水后的样本经过上述苏木精染色液试剂进行染色4～6min，接着再用70％的酒精清洗掉余液；接着用自来水冲洗蓝化20～40min，蓝化后的切片再经过1％的盐酸分色，接着用伊红复染液染色数秒，并进行脱水，最后利用中性树脂胶封片
根据以上的技术方案，相对于现有技术，本发明具有以下的优点：减少淬火变形量，降低后续校形和精加工的成本；有效控制变形散差，提升装配精度及服役寿命；改善生产现场的操作环境，减少对环境的污染和危害。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。
本发明实施例中的改良型苏木精染色液试剂，配置所需试剂如下：
将1.0g苏木素溶于25ml无水乙醇中，另将5g硫酸铝铵和5g硫酸铬钾溶于150ml蒸馏水中。再将两溶液混合，加入碘酸钠后搅拌3-5min。将氧化后的混合试剂依次加入5ml冰醋酸，25ml甘油，搅拌均匀。静置2-3h后，即可使用。
在常规H&E染色中，常规法制作的石蜡切片,常规法脱蜡并复水至70％酒精后,用特制苏木精染色液染色4～6min，再用70％酒精洗去余液，自来水冲洗蓝化20～40min,蓝化的切片，经1％盐酸酒精分分色后，用伊红复染液染色数秒，常规常规法脱水后，中性树脂胶封片。
本发明的创新点在于：调整了苏木素与金属盐媒染剂(硫酸铝铵和硫酸铬钾)之间的配比，使用碘酸钠代替氧化汞作为氧化剂，加热条件下对苏木素进行氧化，使其成为能够对组织着色的苏木精，氧化后加入的乙酸和甘油作为促染剂和稳定增稠剂，能降低染色液结晶成膜，并污染切片的可能。本发明着色迅速，常温下镜需染色4～6min，而Harris则需要15min以上。本发明配置简单方便，无需煮沸和过滤，用碘酸钠代替氧化汞，更安全，避免废弃液对环境的污染。而且Harris配方中，210ml溶液用0.9g苏木精，煮沸和过滤后,净剩约为180ml。而特制苏木精染液中,210ml用苏木精1.0g,染液不受损失。特制苏木精染液配好后即可使用,近期内液面不形成亮膜,也不出现结晶；远期即使出现上述现象也很轻微,不易污染切片。。
Claims (4)
1.一种改良型苏木精染色液试剂，其特征在于每150ml的蒸馏水中包括以下组份：
2.根据权利要求1所述改良型苏木精染色液试剂，其特征在于：每150ml的蒸馏水中包括以下组份：
3.一种权利要求1或2所述改良型苏木精染色液试剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)将1g的苏木素溶于无水乙醇中形成苏木素的乙醇溶液，备用；
(2)将5g的硫酸铝铵和5g的硫酸铬钾溶于蒸馏水中，搅拌溶解，并与步骤(1)得到的苏木素的乙醇溶液进行混合；
(3)在混合液中继续加入碘酸钠，并搅拌氧化3～5min，接着在氧化后的混合液中继续依次加入5ml的冰醋酸和25ml的甘油，并搅拌均匀，静置3h以上，完成。
4.一种改良型苏木精染色液试剂的染色方法，其特征在于包括以下步骤：
首先，将待检测样本的石蜡切片经过脱蜡，并复水至70％酒精；然后将复水后的样本经过权利要求1或2所述苏木精染色液试剂进行染色4～6min，接着再用70％的酒精清洗掉余液；接着用自来水冲洗蓝化20～40min，蓝化后的切片再经过1％的盐酸分色，接着用伊红复染液染色数秒，并进行脱水，最后利用中性树脂胶封片。
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