CN103571909A - 巴氏染色液及其使用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种巴氏染色液及其使用方法，巴氏染色液由A液、B液和95％乙醇组成，A液为改良苏木素染色液，B液由磷钨酸、黄色伊红、亮绿配制而成；主要是所述改良苏木素染色液的配制方法为：将苏木色精溶于95％乙醇，钾明矾溶于100℃沸水中，两者混合加入氧化剂至少搅拌50分钟，加入冰乙酸，再至少搅拌50分钟；B液的配制方法为：将0.2％～0.6％磷钨酸溶液、黄色伊红溶液、亮绿溶液按95～97％、1.5～2.5％、1.5～2.5％的质量百分比混合。使用时将涂片在95％乙醇中固定，加相应数量的A液和B液在特定环境里冲洗即可。具有成本低、颜色艳丽、对比清晰、着色稳定、配制简单、操作方便，易于各类医疗单位推广使用等优点。适用于阴道涂片雌激素水平、宫颈涂片和痰涂片分化差的小角化细胞癌显示诊断。
Description
技术领域
本发明属于体外诊断试剂及试剂的使用方法，尤其是关于一种用于脱落细胞染色的巴氏染色液及其使用方法。本发明适用于阴道涂片雌激素水平、宫颈涂片和痰涂片分化差的小角化细胞癌显示诊断。
背景技术
巴氏染色法是应用较多的用于脱落细胞染色的方法，也是目前病理切片和脱落细胞染色中较好较常用的染色方法。其染色试剂包含苏木素染色液、橙黄G6染色液、亮绿、俾氏麦褐、黄色伊红、饱和碳酸锂、磷钨酸、无水乙醇、95％乙醇、80％乙醇、70％乙醇、50％乙醇、0.25％或0.5％盐酸等多种试剂。巴氏染色结果细胞透明度好，结构清晰，涂片色彩丰富、鲜艳。但是，巴氏染色液多数用95％乙醇配制，试剂种类多，成本高，染色液配制麻烦，染色步骤繁琐，染色液易陈旧，染色效果不稳定，在基层医疗单位推广困难。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术存在的缺点，提供一种成本低、染色液配制方便、染色步骤简单、染色效果稳定、易在基层医疗单位推广应用的巴氏染色液及其使用方法。
本发明的巴氏染色液由A液、B液和95％乙醇组成，A液为改良苏木素染色液，B液由磷钨酸、黄色伊红、亮绿配制而成；主要是所述改良苏木素染色液的配制方法为：将苏木色精溶于95％乙醇，钾明矾溶于100℃沸水中，两者混合加入氧化剂至少搅拌50分钟，加入冰乙酸，再至少搅拌50分钟；B液的配制方法为：将0.2％～0.6％磷钨酸溶液、黄色伊红溶液、亮绿溶液按95～97％、1.5～2.5％、1.5～2.5％的质量百分比混合。
本发明巴氏染色液的使用方法可以采取滴染和浸染方式，具体操作方法为在室温条件下按如下步骤操作：
a、取自然干燥涂片或涂片未干时放入95％乙醇中固定；
b、滴染时，加A液4～6滴，染6～10分钟，用75％乙醇冲洗；
c、加B液4～6滴，染2～4分钟，水洗，镜检；
若采用浸染方式，用清水冲洗，清除多余染料，在75％乙醇中浸1～2分钟，滴去多余乙醇后放入B液中染2～4分钟，水洗，镜检。
本发明与现有技术相比的有益效果是成本低、颜色艳丽、对比清晰、着色稳定、配制简单、操作方便，易于各类医疗单位推广使用。
具体实施方式
本发明巴氏染色液由A液、B液和95％乙醇组成，A液为改良苏木素染色液，B液由磷钨酸、黄色伊红、亮绿配制而成；主要是改良苏木素染色液的配制方法为：将苏木色精溶于95％乙醇，钾明矾溶于100℃沸水中，两者混合加入氧化剂至少搅拌50分钟，最好搅拌一小时，加入冰乙酸，再至少搅拌50分钟，最好搅拌一小时；B液的配制方法为：将0.2％～0.6％磷钨酸溶液、黄色伊红溶液、亮绿溶液按95～97％、1.5～2.5％、1.5～2.5％的质量百分比混合。如果0.2％～0.6％磷钨酸溶液占95％，则黄色伊红溶液和亮绿溶液各占2.5％；如果0.2％～0.6％磷钨酸溶液占97％，则黄色伊红溶液和亮绿溶液各占1.5％。
本发明巴氏染色液的使用方法可以采取滴染和浸染方式，具体操作方法为在22℃室温条件下按如下步骤操作：
a、取自然干燥涂片或涂片未干时放入95％乙醇中固定。
b、滴染时，加A液4～6滴，染6～10分钟，用75％乙醇冲洗。染色时间的长短，根据使用环境温度确定，使用时环境温度越高染时间越短，使用时环境温度越低染时间越长。
c、加B液4～6滴，染2～4分钟，水洗，镜检。染色时间的长短，根据使用环境温度确定，使用时环境温度越高染时间越短，环境温度越低染时间越长。
若采用浸染方式，先用清水冲洗，清除多余染料，再在75％乙醇中浸1～2分钟，滴去多余乙醇后放入B液染2～4分钟，水洗，镜检。
Claims (2)
1.一种巴氏染色液，由A液、B液和95％乙醇组成，A液为改良苏木素染色液，B液由磷钨酸、黄色伊红、亮绿配制而成；主要是所述改良苏木素染色液的配制方法为：将苏木色精溶于95％乙醇，钾明矾溶于100℃沸水中，两者混合加入氧化剂至少搅拌50分钟，加入冰乙酸，再至少搅拌50分钟；B液的配制方法为：将0.2％～0.6％磷钨酸溶液、黄色伊红溶液、亮绿溶液按95～97％、1.5～2.5％、1.5～2.5％的质量百分比混合。
2.一种权利要求1所述的巴氏染色液的使用方法，其特征是在室温条件下按如下步骤操作：
a、取自然干燥涂片或涂片未干时放入95％乙醇中固定；
b、滴染时，加A液4～6滴，染6～10分钟，用75％乙醇冲洗；
c、加B液4～6滴，染2～4分钟，水洗，镜检；
若采用浸染方式，用清水冲洗，清除多余染料，在75％乙醇中浸1～2分钟，滴去多余乙醇后放入B液中染2～4分钟，水洗，镜检。
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