CN105815109A - 一种赤芝菌种培养方法 - Google Patents

一种赤芝菌种培养方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105815109A
CN105815109A CN201510012652.1A CN201510012652A CN105815109A CN 105815109 A CN105815109 A CN 105815109A CN 201510012652 A CN201510012652 A CN 201510012652A CN 105815109 A CN105815109 A CN 105815109A
Authority
CN
China
Prior art keywords
ganoderma lucidum
leyss
karst
hypha
strain
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201510012652.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105815109B (zh
Inventor
谢春芹
曹正
凡军民
谢正林
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry
Original Assignee
Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry filed Critical Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry
Priority to CN201510012652.1A priority Critical patent/CN105815109B/zh
Publication of CN105815109A publication Critical patent/CN105815109A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105815109B publication Critical patent/CN105815109B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Mushroom Cultivation (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种赤芝菌种培养方法，包括如下步骤：（1）选择子实体典型、色质纯、菇形正、无病虫害的单朵芝菌袋；（2）用消毒液擦拭栽培袋；（3）用刀片去掉栽培袋中下部0.5cm见方的袋膜；（4）通过步骤（3）切出的切口，用接种针挑取栽培基质中的菌丝接入到试管中；（5）将步骤（4）得到的试管在避光，温度25-28℃培养2-3天，选取菌丝生长健壮的试管，挑取边缘的新生菌丝转接到新的培养基上培养所获的纯菌丝体，即作为赤芝再生产用菌种；（6）将步骤（5）所得的菌种按常规菌种生产程序和方法，制作再生母种、原种。本发明分离得到的菌丝生长较快，抗性强，成菇率高，丰产性好。

Description

一种赤芝菌种培养方法
技术领域
本发明属于农业技术领域，尤其涉及一种赤芝菌种培养方法。
背景技术
灵芝(GanodermaLucidumKarst)外形呈伞状，菌盖肾形、半圆形或近圆形，为多孔菌科真菌灵芝的子实体。灵芝药用在我国已有2000多年的历史，被历代医药家视为滋补强壮、扶正固本的神奇珍品。具有补气安神、止咳平喘的功效，用于眩晕不眠、心悸气短、虚劳咳喘。
目前，已知灵芝属(Ganoderma)真菌约100余种，分布最广的为赤芝(G.lu-cidum)，其次为紫芝(G.japonicum)，还有树舌(G.applana-tum)、松杉灵芝(G.tsugae)和簿树芝(G.capense)等均供药用。经药理研究证明，灵芝有多方面的生物活性。主含氨基酸、多肽、蛋白质、真菌溶菌酶(fungallysozyme)，以及糖类(还原糖和多糖)、麦角甾醇、三萜类、香豆精甙、挥发油、硬脂酸、苯甲酸、生物碱、维生素B2及C等；孢子还含甘露醇、海藻糖(trehalose)。《本经》中记载赤芝，味苦平。主胸中结，益心气，补中，增慧智，不忘。久食，轻身不老，延年神仙。
赤芝为灵芝属中的代表种，菌盖一般可达5CM*10CM-12CM*20CM厚度达1-2CM，红褐色稍内卷，菌肉黄白色。菌柄侧生，高达5--10CM，色与菌盖相同，子实体蜂巢状，菌盖下面有菌管层，菌管长约1CM，菌管内壁为子实层，着生担子，担孢子子卵型，大小8.5-11.5um*5-6.5um之间。
2012年，国内灵芝人工栽培产地已遍布大江南北各省，南方的闽浙、两广、云贵等省依旧是灵芝主要产区，北方的山东、吉林和大兴安岭等地区也有相当大的灵芝产量，西南地区的新疆、西藏等省已经成为灵芝种植产区的后起之秀。
在生产中灵芝菌种的提纯、复壮一般是分离子实体幼嫩边缘部分和原基进行纯化培养，虽然此方法操作简便，但分离的菌种菌丝生长缓慢，在PDA母种斜面试管培养基上需10-12天才能长满；且抗性差，成菇率低。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明提供一种菌丝生长较快，抗性强，成菇率高，丰产性好的赤芝菌种培养方法。
为达到上述目的，本发明是通过以下的技术方案来实现的。
一种赤芝菌种培养方法，所述方法包括如下步骤：
(1)选择子实体典型、色质纯、菇形正、无病虫害的单朵赤芝菌培养袋；
(2)用消毒液擦拭栽培袋；
(3)用刀片切去栽培袋中下部0.5cm见方的袋膜；
(4)通过步骤(3)切出的切口，用接种针挑取培养料中的菌丝接入到试管中；
(5)将步骤(4)得到的试管在避光，温度25-28℃培养2-3天，选取菌丝生长健壮的试管，挑取边缘的新生菌丝转接到新的培养基上培养所获的纯菌丝体，即作为赤芝再生产用菌种；
(6)将步骤(5)所得的菌种按常规菌种生产程序和方法，制作再生母种、原种。
所述使用的工具、容器均用消毒液灭菌，各部操作均为无菌作业。
所述消毒液为3-5％的高锰酸钾溶液。
所述步骤(4)中挑取米粒大小带有菌丝的培养基质接入到试管中。同一菌袋子实体的不同分离部位的菌种，经转管，接入到相同PDA平皿培养基中，在相同的条件下培养，由基质中分离获得的菌种菌丝在日生长量、菌丝活力、抗性、长势方面均明显优于其它部位分离的菌种。由基质中分离获得的菌种菌丝长满菌袋较快，子实体菌盖最大，但菌盖比较薄，是由于温度高子实体生长较快，在栽培中若降低温度至25-28℃，即可使菌盖加厚，生物转化率最高，说明在相同条件下，基质中分离的菌种菌丝分解与利用基质中的营养较强。
有益效果：与现有技术相比，本发明的优点在于：分离得到的菌丝生长较快，抗性强，成菇率高，丰产性好。
附图说明
图1供赤芝菌种分离的栽培菌袋；
图2原基和基质分离法；
图34个分离部位菌种菌丝；
图4相同条件下4个分离部位菌丝在PDA平板培养基在生长情况；
图5基质分离法培养的菌种栽培所获得的赤芝1号子实体；
图6基质分离法培养的菌种栽培所获得的赤芝1号子实体局部放大图。
具体实施方式
下面结合实例对本发明作进一步的详细说明。
一种赤芝菌种培养方法，所述方法包括如下步骤：
1.在赤芝栽培棚内选择子实体典型、色质纯、菇形正、无病虫害的单朵芝菌培养袋。该菌袋来源于江苏食用菌研究所生产基地，菌种为赤芝1号。
2.用3-5％的高锰酸钾溶液擦拭栽培袋的表面；
3.将栽培袋移入到接种箱或超净工作台内，用灭菌过的解剖刀或单刀片去掉袋子中下部0.5cm见方的袋膜；
4.用消毒过的接种针去掉表面老菌丝，在培养料内挑取米粒大小带有菌丝的培养基，通过酒精灯火焰的无菌区接入到斜面试管的中央；
5.在避光，温度25℃培养2-3天，选取无污染、菌丝生长健壮的试管，在无菌条件下，挑取边缘的新生菌丝转接到新的斜面培养基上培养所获的纯菌丝体，即作为赤芝再生产用菌种；
将不同分离部位(菌管、基质、子实体边缘幼嫩组织、子实体原基)的菌种菌丝接种到PDA平板培养基上，在相同的条件下，比较不同分离部位的菌丝生长情况，通过定期测量菌种菌丝萌发的时间，菌丝的日生长速度，观察菌丝的长势、统计菌丝生长中的污染情况，如表1.
表1赤芝不同分离部位菌种菌丝生长情况
由表1可见，同一菌袋子实体的不同分离部位的菌种，经转管，接入到相同PDA平皿培养基中，在相同的条件下培养，结果表明，由基质中分离获得的菌种菌丝在日生长量、菌丝活力、抗性、长势方面均明显优于其它部位分离的菌种。
6.该菌种按常规菌种生产程序和方法，制作再生母种、原种，并进行栽培出菇试验，通过出菇验证该方法分离的菌菌种即为赤芝1号。
该方法分离培养的赤芝1号菌种，在相同的条件下与其它方法分离培养的赤芝1号菌种进行栽培与出菇性状比较，其步骤与结果如下：
1)培养料，以重量百分比计：棉籽壳53％，木屑25％，玉米芯30％，石膏粉1％，石灰1％；上述培养料与水的重量比为1：1.2；
2)拌料：先将难溶于水的主料与辅料干拌匀，再将易溶于水的辅料溶解于水中，制成母液，拌料时边加母液边搅拌，直至将培养料的含水量调到适宜含水量为宜(65％左右)；
3)调节PH值：赤芝的pH值为7.0左右；
4)装袋：采用装袋机装袋，每袋湿料重0.85kg左右，每种分离方法的菌种各装20袋，记录下每袋湿料的准确重量，并贴好标签。
5)灭菌：培养料装好后，采用高压蒸汽灭菌，压力为1.4～1.5kg/cm2,温度为126℃左右，维持1.5h。
6)冷却、接种：灭菌结束后移入冷却室内冷却至30℃以下，在超净工作台内进行接种，用接种镊将栽培培养料中央的洞穴扩大，取2勺原种迅速放入栽培培养料料面和穴内；
7)菌丝培养：将接种好的栽培袋移入至培养室内，培养室的条件为：室温20-22℃，空气相对温度60-70％，保持黑暗，第一周每日早晚各通风1次，每次8-10分钟；两周后每日早、中、晚各通风1次，每次10-15分钟；经25-30天培养菌丝即长满袋。
8)出菇管理：将长满菌丝的栽培袋，拔掉塞子，用消毒过的镊子去掉料面的老菌皮，移入至出菇室内，出菇室的条件为：室温28-32℃，空气相对温度85-95％，给予一定的散射光，每日通风3-4次，每次20-30分钟。
在相同的培养条件下通过比较不同分离部位(菌管、基质、子实体边缘幼嫩组织、子实体原基)上的菌种生长情况，结果表明该方法(栽培基质中分离的菌种)分离、纯化的菌种在菌丝生长、出菇性状上均优于常用的其它3种分离部位所获的菌种，如表2.
表2赤芝不同分离部位菌种生长发育情况
由表2可见，同一菌袋子实体的不同分离部位的菌种，在相同的栽培条件下培养，结果表明，由基质中分离获得的菌种菌丝长满菌袋较快，子实体菌盖最大，但菌盖比较薄，是由于温度高子实体生长较快，在栽培中若降低温度至25-28℃，即可使菌盖加厚，生物转化率最高，说明在相同培养条件下，基质中分离的菌种菌丝分解与利用基质中的营养较强。
通过以上栽培出菇试验可见，基质中分离的菌种无论是菌丝的日生长量、抗污染性，还是子实体的产量均明显优于常用的其它3种分离部位的菌种。
本发明按照上述实施例进行了说明，应当理解，上述实施例不以任何形式限定本发明，凡采用等同替换或等效变换方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种赤芝菌种培养方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
（1）选择子实体典型、色质纯、菇形正、无病虫害的单朵赤芝菌培养袋；
（2）用消毒液擦拭栽培袋；
（3）用刀片切去栽培袋中下部0.5cm见方的袋膜；
（4）通过步骤（3）切出的切口，用接种针挑取栽培基质中的菌丝接入到试管中；
（5）将步骤（4）得到的试管在避光，温度25-28℃培养2-3天，选取菌丝生长健壮的试管，挑取边缘的新生菌丝转接到新的培养基上培养所获的纯菌丝体，即作为赤芝再生产用菌种；
（6）将步骤（5）所得的菌种按常规菌种生产程序和方法，制作再生母种、原种。
2.根据权利要求1所述的一种赤芝菌种培养方法，其特征在于，所述使用的工具、容器均用消毒液灭菌，各部操作均为无菌作业。
3.根据权利要求1、2所述的一种赤芝菌种培养方法，其特征在于，所述消毒液为3-5%的高锰酸钾溶液。
4.根据权利要求1所述的一种赤芝菌种培养方法，其特征在于，所述步骤（4）中挑取米粒大小带有菌丝的培养基质接入到试管中。
5.根据权利要求4所述的一种赤芝菌种培养方法，其特征在于，所述步骤（4）中挑取带有菌丝的培养基质前先去掉表面老菌丝。
CN201510012652.1A 2015-01-09 2015-01-09 一种赤芝菌种培养方法 Active CN105815109B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510012652.1A CN105815109B (zh) 2015-01-09 2015-01-09 一种赤芝菌种培养方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510012652.1A CN105815109B (zh) 2015-01-09 2015-01-09 一种赤芝菌种培养方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105815109A true CN105815109A (zh) 2016-08-03
CN105815109B CN105815109B (zh) 2018-12-18

Family

ID=56514908

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510012652.1A Active CN105815109B (zh) 2015-01-09 2015-01-09 一种赤芝菌种培养方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105815109B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107548886A (zh) * 2017-09-27 2018-01-09 乐山市金口河区大瓦山食用菌种植专业合作社 一种食用菌的种植方法
CN114223463A (zh) * 2022-01-04 2022-03-25 广东省科学院生物与医学工程研究所 一种快速检测灵芝出菇性能的方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH11155366A (ja) * 1997-11-28 1999-06-15 Takashi Maeda 霊芝その他の茸類の栽培装置及びその栽培方法
CN101485262A (zh) * 2009-02-19 2009-07-22 北京林业大学 桑黄的人工栽培方法
CN102301913A (zh) * 2011-07-11 2012-01-04 广东省微生物研究所 一种桂南灵芝子实体的人工栽培方法
CN103081720A (zh) * 2012-12-21 2013-05-08 孙思伦 一种白色野生灰树花的分离培养与栽培方法
CN103688747A (zh) * 2013-12-11 2014-04-02 吉林农业大学 一种巨型灵芝栽培方法
CN103733874A (zh) * 2013-10-21 2014-04-23 深圳市新华南方生物科技股份有限公司 一种灵芝仿野生栽培方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH11155366A (ja) * 1997-11-28 1999-06-15 Takashi Maeda 霊芝その他の茸類の栽培装置及びその栽培方法
CN101485262A (zh) * 2009-02-19 2009-07-22 北京林业大学 桑黄的人工栽培方法
CN102301913A (zh) * 2011-07-11 2012-01-04 广东省微生物研究所 一种桂南灵芝子实体的人工栽培方法
CN103081720A (zh) * 2012-12-21 2013-05-08 孙思伦 一种白色野生灰树花的分离培养与栽培方法
CN103733874A (zh) * 2013-10-21 2014-04-23 深圳市新华南方生物科技股份有限公司 一种灵芝仿野生栽培方法
CN103688747A (zh) * 2013-12-11 2014-04-02 吉林农业大学 一种巨型灵芝栽培方法

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107548886A (zh) * 2017-09-27 2018-01-09 乐山市金口河区大瓦山食用菌种植专业合作社 一种食用菌的种植方法
CN114223463A (zh) * 2022-01-04 2022-03-25 广东省科学院生物与医学工程研究所 一种快速检测灵芝出菇性能的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN105815109B (zh) 2018-12-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103283485B (zh) 一种灵芝的栽培方法
CN103087927B (zh) 一种促进带叶兜兰种子共生萌发的真菌及其应用
CN112725191B (zh) 一株促进兰科种子萌发的膨大革孔菌菌株及其应用
CN104195056B (zh) 一种二型伞霉及其在铁皮石斛促生、抗旱中的应用
CN104488565A (zh) 一种西藏白肉灵芝栽培方法
KR20200025135A (ko) 배암차즈기 추출액을 이용한 기능성 동충하초 자실체의 재배방법
CN111937680B (zh) 一种卵孢小奥德蘑新菌种及其人工栽培方法和用途
CN105724049A (zh) 一种桑树寄生的桑黄菌种返野生环境复壮培养方法
CN108260470B (zh) 一种提高松茸菌根化育苗的方法
CN1872995A (zh) 菌根真菌诱导子提高液体培养铁皮石斛原球茎质量的方法
CN1720785A (zh) 桑黄人工高产栽培方法及桑黄子实体的应用
CN105815109B (zh) 一种赤芝菌种培养方法
CN101375689B (zh) 一种黑平菇提取物及其制备方法与应用
CN105532265A (zh) 野生干巴菌培养及原生态种植方法
CN112442449B (zh) 枝瑚菌原种培养基及其应用以及枝瑚菌原种及其培养方法
CN114317281B (zh) 一种高产灵芝菌株及其分子标记方法和人工栽培方法
CN105706733A (zh) 一种槐栓菌的代料栽培方法
CN114766285B (zh) 一种白肉灵芝菌株l4495及其栽培方法与应用
CN109220514B (zh) 一种野生新食用菌的分离及其人工驯化栽培方法
CN105557307A (zh) 利用中药栽培灵芝的方法
CN116496909A (zh) 一种内生真菌柄孢壳菌及其在铁皮石斛栽培中的应用
CN110892847B (zh) 一种漏斗大孔菌的人工栽培方法
CN106489524A (zh) 一种桑黄菌种复壮的方法
CN105613038B (zh) 朱红栓菌栽培方法
CN114317279A (zh) 一种分离黑乳菇伴生真菌齿梗孢霉菌的优质培养基配方

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant