CN105753999A

CN105753999A - 一种超低温提取银耳多糖的方法

Info

Publication number: CN105753999A
Application number: CN201610217251.4A
Authority: CN
Inventors: 郑端子; 张朝群; 沈学三; 彭生生
Original assignee: GUANGZHOU MEICHI COSMETICS Co Ltd
Current assignee: GUANGZHOU MEICHI COSMETICS Co Ltd
Priority date: 2016-04-08
Filing date: 2016-04-08
Publication date: 2016-07-13

Abstract

本发明公开了一种超低温提取银耳多糖的方法，其包括以下步骤：1）对银耳干品进行粉碎，加水浸泡，得到银耳混浊液；2）对银耳混浊液进行速冻结冰，再进行深冷粉碎，再室温解冻，重复上述操作3～5次；3）超声，过滤，收集滤液，离心，对上清液进行浓缩，得到浓缩液；4）在浓缩液中加入醇，进行醇沉，抽滤，收集沉淀，洗涤，干燥，得银耳多糖。本发明的方法用较低的温度提取银耳多糖，以速冻和解冻方式破坏胞壁结构，提高多糖产率，银耳多糖不易被破坏，工艺条件简单易行，设备费用成本较低，辅以短时间超声，提高了粗多糖产率，在保证银耳多糖产率及质量的前提下，降低了生产成本，便于工业化大规模生产。

Description

一种超低温提取银耳多糖的方法

技术领域

本发明涉及一种超低温提取银耳多糖的方法。

背景技术

银耳，食用菌之一，又名白木耳、雪耳、银耳子等，真菌类银耳科银耳属，有“菌中之冠”的美称。自古银耳有极高的食用价值及药用价值，近年来，由于其抗衰老及保湿作用显著，银耳在化妆品领域的应用也越来越广泛。银耳的活性成分主要为银耳多糖，银耳多糖可占其干基组成的60%～70%，主要存在于小纤维，网状结构交织的基质中。银耳多糖可以被认为是一种植物源性类透明质酸物质，分子量达到100～130万，是迄今为止化妆品原料界中唯一的分子量能够达到100万以上的植物来源的保湿剂。其主链结构是由α-（1→3）-糖苷键连接的甘露聚糖，主链的2，4，6位上连接有葡萄糖、木糖、岩藻糖及普通糖醛酸等残基组成的侧链，其活性中心是α-（1→3）-甘露聚糖结构。银耳多糖主要包括酸性杂多糖、中性杂多糖、胞壁多糖、胞外多糖和酸性低聚糖五种，不含核酸、蛋白质类物质。

目前，人们常使用的提取、纯化银耳多糖的方法包括以下几种：

1）热水浸提法：主要是针对胞外多糖的提取，以水为溶剂，高温高压条件下使银耳多糖溶于水中；

2）碱浸提法：利用碱液对银耳子实体细胞壁的破坏，使得胞壁多糖相对比较容易溶出，从而提高银耳多糖提取率；

3）酶法逆向提取银耳多糖：选用专一性酶清除蛋白质和脂类物质，清除非糖性物质，最后获取银耳多糖；

4）超临界CO₂萃取技术提取法：以超临界CO₂流体为载体对银耳子实体混合物中的多糖成分进行萃取和分离的新型技术；

5）微波提取法：以高频微波场下，用特定溶剂提取银耳多糖；

6）超声波提取法：利用超声波的空化效应（液体中的微小泡核在超声作用下被激活而振动、生长、收缩乃至气泡急剧崩溃闭合等一系列过程）增加溶剂穿透力，提高银耳多糖的溶出速度和溶出率；

7）膜分离技术：以选择性透过膜为分离介质，在膜两侧施加电位差，化学位差，压力差等推动力，根据筛分原理使银耳多糖选择性透过膜，实现提纯和浓缩；

8）色谱分离技术：依靠粗多糖中各组分的物化性质的差异，及其在两相之间分布和流动速度的差异而达到分离提纯银耳多糖的目的。

然而，以上方法都存在各自的缺点，限制了银耳多糖的大规模应用，例如：

1）热水浸提法：胞外多糖的含量低，提取量非常有限的，这种方法的提取效率非常低，且高温极易破坏多糖活性结构，银耳多糖容易水解，对其功效产生不可预知的影响；

2）碱浸提法：碱液容易破坏银耳多糖的空间结构和活性；

3）酶法逆向提取银耳多糖：酶的选择上难度大，反应条件苛刻，成本高，工业大生产化不现实；

4）超临界CO₂萃取技术提取法：该技术参与提取过程涉及较高压力，大规模工业化应用时其对生产技术要求较高，设备费用高昂；

5）微波提取法：高频微波作用下，多糖提取过程较为剧烈，容易导致局部温度过高，对多糖的生物活性会有一定的影响，同时微波提取对提取溶剂也有选择性，需要溶剂必须是透明或半透明的；

6）超声波提取法：由于长时间超声致多糖链的降解，易导致多糖具有低分子量化趋势；

7）膜分离技术：活性多糖一般属于大分子化合物，很多还具有黏性，在膜分离操作过程中容易造成膜的污染和膜孔堵塞；

8）色谱分离技术：天然植物组成极其复杂，单靠一种色谱分离技术不能很好满足生产和实验的需要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种超低温提取银耳多糖的方法。

本发明所采取的技术方案是：

一种超低温提取银耳多糖的方法，包括以下步骤：

1)对银耳干品进行粉碎，加水浸泡，得到银耳混浊液；

2)对银耳混浊液进行速冻结冰，再进行深冷粉碎，再室温解冻，重复上述操作3～5次；

3)超声，过滤，收集滤液，离心，对上清液进行浓缩，得到浓缩液；

4)在浓缩液中加入醇，进行醇沉，抽滤，收集沉淀，洗涤，干燥，得银耳多糖。

步骤1）所述粉碎为超微粉碎，银耳干品经超微粉碎后粒径为25～55μm。

步骤1）中银耳干品、水的体积比为1：（50～70）。

步骤1）所述浸泡的温度为50～70℃，浸泡时间为2～3h。

步骤2）所述速冻结冰的温度为-70～-60℃，时间为3～7min。

步骤2）所述深冷粉碎为加液氮进行粉碎。

步骤3）所述超声的时间为20～30min。

步骤3）所述浓缩的温度为85～90℃。

步骤4）所述浓缩液、醇的体积比为1：（3～5）。

步骤4）所述醇为无水乙醇。

本发明的有益效果是：

1）本发明的方法采用的是低温提取，避免了高温提取对多糖结构的破坏，最大程度地保证了银耳多糖的质量；

2）本发明的方法以速冻和解冻的方式来破坏细胞壁的结构，促进了胞壁多糖的溶出，提高了银耳多糖的产率；

3）本发明的方法工艺简单，设备费用成本较低，生产成本低，适合工业化大生产；

4）本发明的方法所选用的溶剂为水与乙醇，乙醇可以回收，产物无污染物，避免对环境造成破坏。

附图说明

图1为本发明的方法的工艺流程图。

具体实施方式

一种超低温提取银耳多糖的方法，包括以下步骤：

1)对银耳干品进行粉碎，加水浸泡，得到银耳混浊液；

优选的，步骤1）所述粉碎为超微粉碎，银耳干品经超微粉碎后粒径为25～55μm。

优选的，步骤1）中银耳干品、水的体积比为1：（50～70）。

优选的，步骤1）所述浸泡的温度为50～70℃，浸泡时间为2～3h。

优选的，步骤2）所述速冻结冰的温度为-70～-60℃，时间为3～7min。

优选的，步骤2）所述深冷粉碎为加液氮进行粉碎。

优选的，步骤3）所述超声的时间为20～30min。

优选的，步骤3）所述浓缩的温度为85～90℃。

优选的，步骤3）所述浓缩是指将上清液的体积浓缩至初始体积的1/6～1/4。

优选的，步骤4）所述浓缩液、醇的体积比为1：（3～5）。

优选的，步骤4）所述醇为无水乙醇。

下面结合具体实施例对本发明作进一步的解释和说明。

实施例1：

1）对银耳干品进行超微粉碎，加入50倍体积的蒸馏水，60℃保温浸泡2h，使银耳干粉充分吸收水分，得到银耳混浊液；

2）将银耳混浊液分格并置于超低温冰箱，零下60℃速冻结冰，5min后取出，加液氮进行粉碎，再室温解冻，重复上述操作5次；

3）将溶液于80℃保温3h，再超声25min，用纱布过滤，合并滤液，离心，弃去残渣，上清液于85℃浓缩至上清液初始体积的1/5，得到浓缩液；

4）在浓缩液中加4倍体积的无水乙醇，沉淀过夜，抽滤，收集沉淀，用无水乙醇洗涤，真空干燥，得到银耳多糖。其工艺流程图如图1所示。

经测试，银耳多糖的提取率为48.33%。

实施例2：

1）对银耳干品进行超微粉碎，加入70倍体积的蒸馏水，50℃保温浸泡3h，使银耳干粉充分吸收水分，得到银耳混浊液；

2）将银耳混浊液分格并置于超低温冰箱，零下70℃速冻结冰，3min后取出，加液氮进行粉碎，再室温解冻，重复上述操作3次；

3）将溶液于85℃保温2h，再超声30min，用纱布过滤，合并滤液，离心，弃去残渣，上清液于90℃浓缩至上清液初始体积的1/4，得到浓缩液；

4）在浓缩液中加3倍体积的无水乙醇，沉淀过夜，抽滤，收集沉淀，用无水乙醇洗涤，真空干燥，得到银耳多糖。其工艺流程图如图1所示。

经测试，银耳多糖的提取率为47.64%。

实施例3：

1）对银耳干品进行超微粉碎，加入60倍体积的蒸馏水，70℃保温浸泡2h，使银耳干粉充分吸收水分，得到银耳混浊液；

2）将银耳混浊液分格并置于超低温冰箱，零下65℃速冻结冰，4min后取出，加液氮进行粉碎，再室温解冻，重复上述操作4次；

3）将溶液于80℃保温3h，再超声20min，用纱布过滤，合并滤液，离心，弃去残渣，上清液于85℃浓缩至上清液初始体积的1/6，得到浓缩液；

4）在浓缩液中加5倍体积的无水乙醇，沉淀过夜，抽滤，收集沉淀，用无水乙醇洗涤，真空干燥，得到银耳多糖。其工艺流程图如图1所示。

经测试，银耳多糖的提取率为48.36%。

对比例1：

高温提取法：

1）将银耳干粉和40倍体积的水混合，于100℃处理3小时，过滤，收集滤液，滤渣加20倍体积的水，于100℃处理3小时，过滤收集滤液。

2）将滤液合并，浓缩至滤液初始体积的1/5，加4倍体积的乙醇沉淀过夜，抽滤，收集沉淀，用乙醇洗涤沉淀，干燥，得到银耳多糖。

经测试，银耳多糖的提取率为19.82%。

对比例2：

高温高压提取法：

1）将银耳干粉和60倍体积的水混合，在110℃、0.8MPa条件下处理2小时，过滤，收集滤液，滤渣加20倍体积的水，在110℃、0.8MPa条件下处理2小时，过滤收集滤液；

经测试，银耳多糖的提取率为24.60%。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种超低温提取银耳多糖的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1）对银耳干品进行粉碎，加水浸泡，得到银耳混浊液；

2）对银耳混浊液进行速冻结冰，再进行深冷粉碎，再室温解冻，重复上述操作3～5次；

3）超声，过滤，收集滤液，离心，对上清液进行浓缩，得到浓缩液；

4）在浓缩液中加入醇，进行醇沉，抽滤，收集沉淀，洗涤，干燥，得银耳多糖。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1）所述粉碎为超微粉碎，银耳干品经超微粉碎后粒径为25～55μm。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤1）中银耳干品、水的体积比为1：（50～70）。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤1）所述浸泡的温度为50～70℃，浸泡时间为2～3h。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：步骤2）所述速冻结冰的温度为-70～-60℃，时间为3～7min。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：步骤2）所述深冷粉碎为加液氮进行粉碎。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤3）所述超声的时间为20～30min。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：步骤3）所述浓缩的温度为85～90℃。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：步骤4）所述浓缩液、醇的体积比为1：（3～5）。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：步骤4）所述醇为无水乙醇。