CN112442135A - 一种银耳多糖提取工艺及其在护肤品中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种银耳多糖提取工艺及其在护肤品中的应用，包括以下步骤：D1制备银耳粉，D2初次浸提，D3冷冻干燥，D4干燥的银耳残渣复水，D5最终浸提，D6过滤纯化，D7提纯精制：将D6中所得上层多糖溶液浓缩至接近饱和，经醇沉、离心、洗涤、干燥后，得到银耳多糖。利用上述方法制备的银耳多糖在护肤品种的应用。本发明银耳粉末吸水膨胀，经冷冻，细胞内的水分形成冰渣，反复的复水冷冻，使细胞中的冰晶刺破细胞壁，达到破碎细胞壁的作用，使细胞壁以及细胞壁内的多糖成分溶解出来，采用冷冻干燥的方式干燥银耳粉末，复水快，提高提取率，且保证多糖物质不受酸碱、高温的破坏，保证提取质量，成本低适合工业化生产。

Description

一种银耳多糖提取工艺及其在护肤品中的应用
技术领域
本发明涉银耳多糖提取工艺技术领域，具体涉及一种银耳多糖提取工艺及其在护肤品中的应用。
背景技术
银耳多糖占银耳干重的60％以上，其主链结构是由α-(1→3)糖苷键连接的甘露聚糖，支链由葡萄糖醛酸和木糖组成。具有改善机体免疫功能及提升白细胞的作用。可显著提高实验动物网状内皮细胞的吞噬功能，有促进非特异性免疫作用，提高免疫球蛋白、血清总补体的水平，银耳多糖具有一定的清除羟基自由基的能力。银耳多糖可作为抗衰老成分应用到化妆品中，通过抑制细胞脂质的过氧化反应，从而防止皮肤的老化，银耳多糖可以吸取大量的水分，无论在低湿度还是在高湿度条件下都具有相同的高保湿性。银耳多糖应用于护肤类化妆品，具有修复表皮、增加表皮含水量的功能，提高角质层水分含量，并且给皮肤柔软的感觉；提高了皮肤电导率积分值，提高皮肤的保水能力；降低了水释放常数，表明产品能提高皮肤的屏障功能，防止水分从皮肤的蒸发，起到润泽肌肤、抗衰养颜的作用。
目前银耳多糖的提取方法有热水浸提法、酶解提取法、酸浸提法、碱浸提法、超声波提取法、微波提取法、和亚临界水萃取法，提取效果最好的是酶法浸提，其次是碱浸提，其中热水浸提的方法最简单，但是在提取过程中，银耳具有较强的吸水性，简单的热水浸提，浪费水资源，且提取率不高，仅为3％左右；酸浸提、碱浸提可以提取热水浸提法无法提到的多糖，但是酸法提取时，多糖易酸解，碱法浸提时，会破坏多糖的结构；酶法浸提的提取效果最好，提取率在20左右，但是成本高，不适于工业化提取。所以需要不断探究寻找更好的提取方案，以适应工业需要。
发明内容
为克服所述不足，本发明的目的在于提供一种银耳多糖提取工艺及其在护肤品中的应用。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种银耳多糖提取工艺，包括以下步骤：
D1制备银耳粉：选用干净无病害的银耳干品，研磨成粉末；
D2初次浸提：将步骤D1所得银耳粉末，加入去离子水，料液比为1:(10-20)g/mL，常温浸提40-60min，银耳粉末吸水膨胀，粗滤、离心，得到溶解在常温水中的初级多糖浸提液、膨胀的复水银耳残渣；
D3冷冻干燥：将步骤D2所得复水银耳残渣放入冰箱中冷冻12-24H，取出后放入冷冻干燥机内冷冻干燥，得到干燥的银耳残渣；
D4干燥的银耳残渣复水：将步骤D3所得干燥的银耳残渣加入去离子水，料液比1：(10-15)g/mL，水温50-70℃下浸提40-60min,银耳粉末吸水膨胀，粗滤、离心，得到多糖浸提液、膨胀的复水银耳残渣，重复步骤D3、D4至少3次；
D5最终浸提：合并所得多糖浸提液，并将最后干燥的银耳残渣放入浸提液中，水温50-70℃浸提40-60min，粗滤、离心，弃掉杂质，留最终浸提液；
D6过滤纯化：将步骤D5所得最终浸提液经微滤、减压浓缩，浓缩液加入sevage试剂，充分搅拌，静止分层，去除蛋白质，收集上层多糖溶液；
D7提纯精制：将D6中所得上层多糖溶液浓缩至接近饱和，经醇沉、离心、洗涤、干燥后，得到银耳多糖。
具体地，所述步骤D1中银耳粉末的粒径为80-100目。
具体地，所述步骤D3中的冷冻前用至少两层纱布将复水银耳残渣包裹起来，再放入冷冻中，保证冷冻干燥过程中。
具体地，所述步骤D6中微滤过程为：首先将步骤D5中得到的最终浸提液依次经过200目、400目的滤布过滤，然后经过0.1至1μμm的微滤器进行过滤。
具体地，所述sevage试剂为氯仿：正丁醇体积比为(4-6)：1，氯仿的加入量为浓缩液的1/4至3/4，弃掉中间蛋白层，回收下层sevage试剂，收集上层多糖多糖溶液，重复操作2-4次。
具体地，所述步骤D7中醇沉过程为，加入上层多糖溶液浓缩后体积的2-5倍的乙醇，乙醇浓度为95％-100％wt，静置分层、离心，沉淀物用乙醇洗涤2-3次后，真空干燥或者冷冻干燥。
一种银耳多糖提取在护肤品中的应用，利用上述方法制备的银耳多糖在护肤品种的应用。
本发明具有以下有益效果：本发明银耳粉末吸水膨胀，经冷冻，细胞内的水分形成冰渣，反复的复水冷冻，使细胞中的冰晶刺破细胞壁，达到破碎细胞壁的作用，使细胞壁以及细胞壁内的多糖成分溶解出来，采用冷冻干燥的方式干燥银耳粉末，能在保证银耳粉末中多糖成分不受影响的情况下，快速干燥，因为被干燥物料含有的水分是在冻结状态下直接蒸发的，故在干燥过程中，水汽不带动可溶性物质移向物料表面，不会在物料表面沉积盐类或者糖类，即在物料表面不会形成硬质薄皮，亦不存在因中心水分移向物料表面时对细胞或纤维产生的张力，不会使物料干燥后因收缩引起变形，故极易吸水恢复原状，且干燥后的银耳粉复水快，溶出部分糖分后，再次冷冻-冷冻干燥，多次浸提，能够有效提出银耳粉末中的多糖成分，提高提取率，且保证多糖物质不受酸碱、高温的破坏，保证提取质量，成本低适合工业化生产。
具体实施方式
现在对本发明作进一步详细的说明。
实施例1
一种银耳多糖提取工艺，包括以下步骤：
D1制备银耳粉：选用干净无病害的银耳干品，研磨成粉末，粒径为80-100目；
D2初次浸提复干：取100g步骤D1所得银耳粉末，加入1000mL去离子水，料液比为1:10，常温浸提60min，银耳粉末吸水膨胀，用200目滤布粗滤，经4000r/min离心5min，得到溶解在常温水中的初级多糖浸提液和膨胀的复水银耳残渣；
D3冷冻干燥：将步骤D2所得复水银耳残渣包在纱布中，放入冰箱中冷冻12H，至完全冰冻，取出后放入冷冻干燥机内冷冻干燥，得到干燥的银耳残渣；
D4干燥的银耳残渣复水：将步骤D3所得干燥的银耳残渣加入1000mL去离子水中，水温50℃下浸提40min,银耳粉末吸水膨胀，用200目滤布粗滤，经4000r/min离心5min，得到多糖浸提液、膨胀的复水银耳残渣，重复步骤D3、D4至少3次；
D5最终浸提：合并所得多糖浸提液，并将最后干燥的银耳残渣放入浸提液中，水温50℃浸提60min，用200目滤布粗滤，经4000r/min离心，弃掉杂质，留最终浸提液；
D6过滤纯化：步骤D5中得到的最终浸提液依次经过200目、400目的滤布过滤，然后经过0.1至1μm的微滤器进行过滤，减压浓缩，浓缩液加入sevage试剂(正丁醇体积比为4：1)，氯仿的加入量为浓缩液的1/4，弃掉中间蛋白层，回收下层sevage试剂，收集上层多糖多糖溶液，重复操作4次，充分搅拌，静止分层，去除蛋白质，收集上层多糖溶液；
D7提纯精制：将D6中所得上层多糖溶液浓缩至接近饱和，加入上层多糖溶液浓缩后体积的2倍的乙醇，乙醇浓度为95％wt，静置分层，8000r/min离心10min，沉淀物用乙醇洗涤2次后，真空干燥或者冷冻干燥，得到15.3g银耳多糖粉末，经硫酸-苯酚法测定后，测得多糖含量为95.3％。
此方法制备的银耳多糖应用于护肤类化妆品，具有修复表皮、增加表皮含水量的功能，防止水分从皮肤的蒸发，起到润泽肌肤、抗衰养颜的作用。
实施例2
一种银耳多糖提取工艺，包括以下步骤：
D1制备银耳粉：选用干净无病害的银耳干品，研磨成粉末，粒径为80-100目；
D2初次浸提复干：取100g步骤D1所得银耳粉末，加入1400mL去离子水，料液比为1:14，常温浸提50min，银耳粉末吸水膨胀，用200目滤布粗滤，经4000r/min离心，得到溶解在常温水中的初级多糖浸提液和膨胀的复水银耳残渣；
D3冷冻干燥：将步骤D2所得复水银耳残渣包在纱布中，放入冰箱中冷冻18H，至完全冰冻，取出后放入冷冻干燥机内冷冻干燥，得到干燥的银耳残渣；
D4干燥的银耳残渣复水：将步骤D3所得干燥的银耳残渣加入1300mL去离子水中，水温60℃下浸提60min,银耳粉末吸水膨胀，用200目滤布粗滤，经4000r/min离心，得到多糖浸提液、膨胀的复水银耳残渣，重复步骤D3、D4至少3次；
D5最终浸提：合并所得多糖浸提液，并将最后干燥的银耳残渣放入浸提液中，水温60℃浸提50min，用200目滤布粗滤，经4000r/min离心，弃掉杂质，留最终浸提液；
D6过滤纯化：步骤D5中得到的最终浸提液依次经过200目、400目的滤布过滤，然后经过0.1至1μm的微滤器进行过滤，减压浓缩，浓缩液加入sevage试剂(正丁醇体积比为5：1)，氯仿的加入量为浓缩液的1/2，弃掉中间蛋白层，回收下层sevage试剂，收集上层多糖多糖溶液，重复操作3次，充分搅拌，静止分层，去除蛋白质，收集上层多糖溶液；
D7提纯精制：将D6中所得上层多糖溶液浓缩至接近饱和，加入上层多糖溶液浓缩后体积的3倍的乙醇，乙醇浓度为100％wt，静置分层，8000r/min离心，沉淀物用乙醇洗涤2次后，真空干燥或者冷冻干燥，得到16.7g银耳多糖粉末，经硫酸-苯酚法测定后，测得多糖含量为97.2％。
此方法制备的银耳多糖应用于护肤类化妆品，具有修复表皮、增加表皮含水量的功能，防止水分从皮肤的蒸发，起到润泽肌肤、抗衰养颜的作用。
实施例3
一种银耳多糖提取工艺，包括以下步骤：
D1制备银耳粉：选用干净无病害的银耳干品，研磨成粉末，粒径为80-100目；
D2初次浸提复干：取100g步骤D1所得银耳粉末，加入1600mL去离子水，料液比为1:16，常温浸提60min，银耳粉末吸水膨胀，用200目滤布粗滤，经4000r/min离心，得到溶解在常温水中的初级多糖浸提液和膨胀的复水银耳残渣；
D3冷冻干燥：将步骤D2所得复水银耳残渣包在纱布中，放入冰箱中冷冻24H，至完全冰冻，取出后放入冷冻干燥机内冷冻干燥，得到干燥的银耳残渣；
D4干燥的银耳残渣复水：将步骤D3所得干燥的银耳残渣加入1500mL去离子水中，水温70℃下浸提50min,银耳粉末吸水膨胀，用200目滤布粗滤，经4000r/min离心，得到多糖浸提液、膨胀的复水银耳残渣，重复步骤D3、D4至少3次；
D5最终浸提：合并所得多糖浸提液，并将最后干燥的银耳残渣放入浸提液中，水温70℃浸提50min，用200目滤布粗滤，经4000r/min离心，弃掉杂质，留最终浸提液；
D6过滤纯化：步骤D5中得到的最终浸提液依次经过200目、400目的滤布过滤，然后经过0.1至1μm的微滤器进行过滤，减压浓缩，浓缩液加入sevage试剂(正丁醇体积比为6：1)，氯仿的加入量为浓缩液的3/4，弃掉中间蛋白层，回收下层sevage试剂，收集上层多糖多糖溶液，重复操作4次，充分搅拌，静止分层，去除蛋白质，收集上层多糖溶液；
D7提纯精制：将D6中所得上层多糖溶液浓缩至接近饱和，加入上层多糖溶液浓缩后体积的4倍的乙醇，乙醇浓度为100％wt，静置分层，8000r/min离心，沉淀物用乙醇洗涤3次后，真空干燥或者冷冻干燥，得到15.8g银耳多糖粉末，经硫酸-苯酚法测定后，测得多糖含量为94.3％。
此方法制备的银耳多糖应用于护肤类化妆品，具有修复表皮、增加表皮含水量的功能，防止水分从皮肤的蒸发，起到润泽肌肤、抗衰养颜的作用。
实施例4
一种银耳多糖提取工艺，包括以下步骤：
D1制备银耳粉：选用干净无病害的银耳干品，研磨成粉末，粒径为80-100目；
D2初次浸提复干：取100g步骤D1所得银耳粉末，加入2000mL去离子水，料液比为1:14，常温浸提50min，银耳粉末吸水膨胀，用200目滤布粗滤，经4000r/min离心，得到溶解在常温水中的初级多糖浸提液和膨胀的复水银耳残渣；
D3冷冻干燥：将步骤D2所得复水银耳残渣包在纱布中，放入冰箱中冷冻18H，至完全冰冻，取出后放入冷冻干燥机内冷冻干燥，得到干燥的银耳残渣；
D4干燥的银耳残渣复水：将步骤D3所得干燥的银耳残渣加入1300mL去离子水中，水温60℃下浸提60min,银耳粉末吸水膨胀，用200目滤布粗滤，经4000r/min离心，得到多糖浸提液、膨胀的复水银耳残渣，重复步骤D3、D4为5次；
D5最终浸提：合并所得多糖浸提液，并将最后干燥的银耳残渣放入浸提液中，水温60℃浸提50min，用200目滤布粗滤，经4000r/min离心，弃掉杂质，留最终浸提液；
D6过滤纯化：步骤D5中得到的最终浸提液依次经过200目、400目的滤布过滤，然后经过0.1至1μm的微滤器进行过滤，减压浓缩，浓缩液加入sevage试剂(正丁醇体积比为5：1)，氯仿的加入量为浓缩液的1/2，弃掉中间蛋白层，回收下层sevage试剂，收集上层多糖多糖溶液，重复操作3次，充分搅拌，静止分层，去除蛋白质，收集上层多糖溶液；
D7提纯精制：将D6中所得上层多糖溶液浓缩至接近饱和，加入上层多糖溶液浓缩后体积的5倍的乙醇，乙醇浓度为98％wt，静置分层，8000r/min离心，沉淀物用乙醇洗涤2次后，真空干燥或者冷冻干燥，得到17.1g银耳多糖粉末，经硫酸-苯酚法测定后，测得多糖含量为96.1％。
此方法制备的银耳多糖应用于护肤类化妆品，具有修复表皮、增加表皮含水量的功能，防止水分从皮肤的蒸发，起到润泽肌肤、抗衰养颜的作用。
本发明不局限于所述实施方式，任何人应得知在本发明的启示下作出的结构变化，凡是与本发明具有相同或相近的技术方案，均落入本发明的保护范围之内。
本发明未详细描述的技术、形状、构造部分均为公知技术。

Claims (9)

1.一种银耳多糖提取工艺，其特征在于：包括以下步骤：
D1制备银耳粉：选用干净无病害的银耳干品，研磨成粉末；
D2初次浸提：将步骤D1所得银耳粉末，加入去离子水，银耳粉末吸水膨胀，粗滤、离心，得到溶解在常温水中的初级多糖浸提液、膨胀的复水银耳残渣；
D3冷冻干燥：将步骤D2所得复水银耳残渣放入冰箱中冷冻12-24H，取出后放入冷冻干燥机内冷冻干燥，得到干燥的银耳残渣；
D4干燥的银耳残渣复水：将步骤D3所得干燥的银耳残渣加入去离子水，银耳粉末吸水膨胀，粗滤、离心，得到多糖浸提液、膨胀的复水银耳残渣，重复步骤D3、D4至少3次；
D5最终浸提：合并所得多糖浸提液，并将最后干燥的银耳残渣放入浸提液中，水温50-70℃浸提40-60min，粗滤、离心，弃掉杂质，留最终浸提液；
D6过滤纯化：将步骤D5所得最终浸提液经微滤、减压浓缩，浓缩液加入sevage试剂，充分搅拌，静止分层，去除蛋白质，收集上层多糖溶液；
D7提纯精制：将D6中所得上层多糖溶液浓缩至接近饱和，经醇沉、离心、洗涤、干燥后，得到银耳多糖。
2.根据权利要求1所述的一种银耳多糖提取工艺，其特征在于：所述步骤D1中银耳粉末的粒径为80-100目。
3.根据权利要求1所述的一种银耳多糖提取工艺，其特征在于：所述步骤D1中料液比为1:(10-20)g/mL，常温浸提40-60min。
4.根据权利要求1所述的一种银耳多糖提取工艺，其特征在于：所述步骤D4中料液比1：(10-15)g/mL，水温50-70℃下浸提40-60min。
5.根据权利要求1所述的一种银耳多糖提取工艺，其特征在于：所述步骤D3中的冷冻前用至少两层纱布将复水银耳残渣包裹起来，再放入冷冻中，保证冷冻干燥过程中。
6.根据权利要求1所述的一种银耳多糖提取工艺，其特征在于：所述步骤D6中微滤过程为：首先将步骤D5中得到的最终浸提液依次经过200目、400目的滤布过滤，然后经过0.1至1μμm的微滤器进行过滤。
7.根据权利要求1所述的一种银耳多糖提取工艺，其特征在于：所述sevage试剂为氯仿：正丁醇体积比为(4-6)：1，氯仿的加入量为浓缩液的1/4至3/4，弃掉中间蛋白层，回收下层sevage试剂，收集上层多糖多糖溶液，重复操作2-4次。
8.根据权利要求1所述的一种银耳多糖提取工艺，其特征在于：所述步骤D7中醇沉过程为，加入上层多糖溶液浓缩后体积的2-5倍的乙醇，乙醇浓度为95％-100％wt，静置分层、离心，沉淀物用乙醇洗涤2-3次后，真空干燥或者冷冻干燥。
9.一种银耳多糖提取在护肤品中的应用，其特征在于:利用权利要求1-8中任一项工艺制得的银耳多糖在护肤品种的应用。
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