CN105724253B - 一种蒜香藤的组织培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于生物组织培养技术领域,尤其是一种蒜香藤的组织培养方法。一种蒜香藤的组织培养方法,包括以下步骤:外植体的消毒灭菌、继代增殖、生根培养和炼苗移栽。本发明的方法具有繁殖速度快、繁殖系数大,繁殖后代整齐一致,能保持原有品种的优良性状,不受季节的限制的优点。
Description
技术领域
本发明属于生物组织培养技术领域,尤其是一种蒜香藤的组织培养方法。
背景技术
蒜香藤(Pseudocalymma alliaceum(Lam.)Sandwith)又名紫铃藤、张氏紫薇,为紫葳科蒜香藤属多年生常绿藤本花卉,花期全年,一年能开多次花,一般在夏末初秋的9~10月开花最旺。因花、叶在搓揉之后会有浓浓的大蒜香味而被名为蒜香藤。原产于热带美洲,现热带地区有栽培。蒜香藤在园林绿化上应用较广。可地栽、盆栽,也可作为篱笆、围墙美化或凉亭、棚架装饰之用,还可做阳台的攀援花卉或垂吊花卉,绿化效果极佳,是难得的垂直绿化植物之一。此外由于其具有浓郁的蒜香,也可用于烹饪。其根、茎、叶均可入药,可治疗伤风、发热、咽喉肿痛等呼吸道疾病。
蒜香藤的生态适应性广,扦插繁殖容易,具有广阔的发展前景。蒜香藤繁殖一般以扦插繁殖为主,而组织培养技术具有繁殖速度快、繁殖系数大,繁殖后代整齐一致,能保持原有品种的优良性状,不受季节的限制等优点,已广泛应用各种观赏植物中,目前尚未见有应用于蒜香藤上。
公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解,而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
发明内容
针对现有技术的不足,本发明提供一种蒜香藤的组织培养方法。
本发明是通过以下技术方案来实现的:
一种蒜香藤的组织培养方法,包括以下步骤:
(1)外植体的消毒灭菌:以带芽茎段为外植体,洗衣粉浸泡8-10min后用自来水冲洗,在超净工作台上,先用75%酒精拭擦茎段,无菌水冲洗3次,再用0.1%升汞处理8-12min,无菌水冲洗3次,接入MS培养基培养15d;
(2)增殖培养:将萌发的新芽切取下来,接在增殖培养基中25d;
(3)生根培养:当增殖出的小苗长至2.0-2.5cm时,转接于生根培养基中21-25d;
(4)炼苗移栽:将生根小苗在室温外炼苗1-2d,然后打开瓶盖再炼苗1-2d,洗净培养基,在50%多菌灵可湿性粉剂800-1000倍溶液中浸泡10min后移栽到基质中;浇透定根水,以后早晚浇水1次。
作为优选,步骤(2)中的继代增殖培养基为WPM+6-BA 0.5-1.5mg/L+NAA 0.05-0.1mg/L。
作为优选,步骤(3)中的生根培养基为WPM+IBA 0.1-0.3mg/L。
作为优选,所述的WPM的配制方法为:配置1000mL WPM培养基,称取WPM培养基固体粉末2.14g,另取硝酸钙0.56g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,蔗糖为20g/L,琼脂3.5-4.0g/L,PH为5.8-6.0。
作为优选,步骤(4)中的基质是由泥炭和珍珠岩组成,二者的体积比为2:1。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
1.本发明的方法具有繁殖速度快、繁殖系数大的优点。
2.本发明的方法具有繁殖后代整齐一致,能保持原有品种的优良性状的优点。
3.本发明的方法具有不受季节的限制的优点。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的具体实施方式进行详细描述,但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。
除非另有其它明确表示,否则在整个说明书和权利要求书中,术语“包括”或其变换如“包含”或“包括有”等等将被理解为包括所陈述的元件或组成部分,而并未排除其它元件或其它组成部分。
实施例1:
一种蒜香藤的组织培养方法,包括以下步骤:
(1)外植体的消毒灭菌:以带芽茎段为外植体,洗衣粉浸泡8min后用自来水冲洗,在超净工作台上,先用75%酒精拭擦茎段,无菌水冲洗3次,再用0.1%升汞处理8min,无菌水冲洗3次,接入MS培养基培养15d;
(2)增殖培养:将萌发的新芽切取下来,接在增殖培养基中25d;增殖培养基为WPM+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L;
(3)生根培养:当增殖出的小苗长至2.0cm时,转接于生根培养基中培养21d;生根培养基为WPM+IBA 0.1mg/L;所述的WPM配制方法为:配置1000mL WPM培养基,称取WPM培养基固体粉末2.14g,另取硝酸钙0.56g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,蔗糖为20g/L,琼脂3.5g/L,PH为5.8;
(4)炼苗移栽:将生根小苗在室温外炼苗1d,然后打开瓶盖再炼苗1d,洗净培养基,在50%多菌灵可湿性粉剂800倍溶液中浸泡10min后移栽到基质中;浇透定根水,以后早晚浇水1次;基质是由泥炭和珍珠岩组成,二者的体积比为2:1。
实施例2:
一种蒜香藤的组织培养方法,包括以下步骤:
(1)外植体的消毒灭菌:以带芽茎段为外植体,洗衣粉浸泡10min后用自来水冲洗,在超净工作台上,先用75%酒精拭擦茎段,无菌水冲洗3次,再用0.1%升汞处理12min,无菌水冲洗3次,接入MS培养基培养15d;
(2)增殖培养:将萌发的新芽切取下来,接在增殖培养基中25d;增殖培养基为WPM+6-BA 1.5mg/L+NAA 0.1mg/L;
(3)生根培养:当增殖出的小苗长至高2.5cm时,转接于生根培养基中培养25d;生根培养基为WPM+IBA 0.3mg/L;所述的WPM配制方法为:配置1000mL WPM培养基,称取WPM培养基固体粉末2.14g,另取硝酸钙0.56g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,蔗糖为20g/L,琼脂4.0g/L,PH为6.0;
(4)炼苗移栽:将生根小苗在室温外炼苗2d,然后打开瓶盖再炼苗2d,洗净培养基,在50%多菌灵可湿性粉剂1000倍溶液中浸泡10min后移栽到基质中;浇透定根水,以后早晚浇水1次;基质是由泥炭和珍珠岩组成,二者的体积比为2:1。
实施例3:
一种蒜香藤的组织培养方法,包括以下步骤:
(1)外植体的消毒灭菌:以带芽茎段为外植体,洗衣粉浸泡9min后用自来水冲洗,在超净工作台上,先用75%酒精拭擦茎段,无菌水冲洗3次,再用0.1%升汞处理10min,无菌水冲洗3次,接入MS培养基培养15d;
(2)增殖培养:将萌发的新芽切取下来,接在增殖培养基中25d;增殖培养基为WPM+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.08mg/L;
(3)生根培养:当增殖出的小苗长至高2.3cm时,转接于生根培养基中培养23d;生根培养基为WPM+IBA 0.2mg/L;所述的WPM配制方法为:配置1000mL WPM培养基,称取WPM培养基固体粉末2.14g,另取硝酸钙0.56g,加热溶解于1000mL蒸馏水中,蔗糖为20g/L,琼脂3.8g/L,PH为5.9;
(4)炼苗移栽:将生根小苗在室温外炼苗1d,然后打开瓶盖再炼苗2d,洗净培养基,在50%多菌灵可湿性粉剂900倍溶液中浸泡10min后移栽到基质中;浇透定根水,以后早晚浇水1次;基质是由泥炭和珍珠岩组成,二者的体积比为2:1。
分别采用实施例1-3中所述的蒜香藤的组织培养方法对蒜香藤进行组织培养,对得到蒜香藤苗的生根率、移栽成活率及生长情况等生长性能进行测定,测定结果见表1。
表1本发明的方法得到的蒜香藤苗的生长性能测定
从表1可以看出,采用本发明的组织培养方法得到的蒜香藤苗的生根率均大于92%,移栽成活率均为100%,嫁接苗的长势好,健壮。
前述对本发明的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本发明限定为所公开的精确形式,并且很显然,根据上述教导,可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本发明的特定原理及其实际应用,从而使得本领域的技术人员能够实现并利用本发明的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择和改变。本发明的范围意在由权利要求书及其等同形式所限定。
Claims (2)
1.一种蒜香藤的组织培养方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)外植体的消毒灭菌:以带芽茎段为外植体,洗衣粉浸泡8-10 min后用自来水冲洗,在超净工作台上,先用75%酒精拭擦茎段,无菌水冲洗3次,再用0.1%升汞处理8-12 min,无菌水冲洗3次,接入MS培养基培养15 d;
(2)增殖培养:将萌发的新芽切取下来,接在增殖培养基中25 d;
(3)生根培养:当增殖出的小苗长至2.0-2.5 cm时,转接于生根培养基中21-25 d;
(4)炼苗移栽:将生根小苗在室外炼苗1-2 d,然后打开瓶盖再炼苗1-2 d,洗净培养基,在50%多菌灵可湿性粉剂800-1000倍溶液中浸泡10 min后移栽到基质中;浇透定根水,以后早晚浇水1次;
步骤(2)中的增殖培养基为改良WPM+6-BA 0.5-1.5 mg/L+NAA 0.05-0.1 mg/L;
步骤(3)中的生根培养基为改良WPM+IBA 0.1-0.3 mg/L;
所述的改良WPM的配制方法为:配置1000 mL WPM改良培养基,称取WPM培养基固体粉末2.14 g,另取硝酸钙0.56 g,加热溶解于1000 mL蒸馏水中,蔗糖为20 g/L,琼脂3.5-4.0 g/L,pH为5.8-6.0。
2.根据权利要求1所述的蒜香藤的组织培养方法,其特征在于,步骤(4)中的基质是由泥炭和珍珠岩组成,二者的体积比为2:1。
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