CN105707471A - 一种螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂及其应用。该添加剂以螺旋藻为氨基酸小肽源,首先通过反复冻融加超声破碎的方法提取螺旋藻蛋白,接着酶解螺旋藻蛋白并将酶解液依次与微量元素无机盐、植物类饲料混合,烘干即得螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂。充分利用易繁殖的螺旋藻,安全,成本低,适口性好,提高动物对微量元素利用率的同时增强其免疫力,降低了粪便重金属残留量大对环境造成的污染。
Description
技术领域
本发明属于饲料添加剂技术领域,具体是一种螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂及其应用。
背景技术
微量元素是动物体必需的营养要素之一,直接或间接地参与到机体几乎所有的生理和生化过程。虽然微量元素在动物饲料中的含量极少,但是它们在动物的生长发育、生产繁殖以及抵抗疾病等方面都发挥着非常重要的作用。
微量元素作为饲料添加剂的研究和应用一直是动物营养领域研究的热点课题之一。目前,市场上的微量元素饲料添加剂主要有微量元素无机盐、微量元素简单有机酸盐和微量元素氨基酸螯合物,但是前两种微量元素添加剂稳定性差,易受体内pH值、无机离子、有机大分子等拮抗影响;对动物胃肠刺激性大,会破坏饲料中的其它营养成分;消化吸收率低,排放的粪便重金属含量高,对环境污染大。微量元素氨基酸螯合物克服了前两代微量元素添加剂的缺点,但是由于氨基酸来源少,成本高,制备技术不够成熟,其应用受到限制。
发明内容
针对现有技术,本发明的目的是提供一种螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂及其应用,旨在以低廉的价格获得大量安全稳定、易吸收及适口性好的氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂,提高动物对微量元素的吸收利用率,减少环境污染。
实现上述发明目的,本发明的技术方案如下:
一种螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂,所述螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂的制备方法包括以下步骤:
a.取20-50份螺旋藻粉于蒸馏水中,搅拌均匀至终浓度为15%~20%(W/V)后在﹣16℃和45℃反复冻融5次,然后在600W的超声功率下超声10s间隔15s,共超声90次,随后将获得的溶液于4℃、6000r/min离心40min,得到螺旋藻蛋白上清液;
b.于上述螺旋藻蛋白上清液中加入2%~4.5%的植物蛋白酶或中性蛋白酶进行水解反应,期间每隔40-50min搅拌一次;
所述植物蛋白酶或中性蛋白酶水解的pH值为5.5~8.0;
所述植物蛋白酶或中性蛋白酶水解的温度为45℃~65℃;
所述植物蛋白酶或中性蛋白酶水解的时间分别为4h、9h;
c.将螺旋藻蛋白上清液的水解产物置于98℃恒温箱中保持25min,使酶失活,然后在3500r/min离心30min,收集澄清提取物,即得螺旋藻氨基酸小肽混合物;
d.按重量份称取微量元素无机盐6-15份,将其用1-60℃的水完全溶解后倒入螺旋藻氨基酸小肽混合物中,搅拌均匀后放入恒温箱中反应2.5-5小时,期间每隔35-50min搅拌一次,即得螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物;
e.按重量份称取植物类饲料6-15份,粉碎,过40-60目筛,将筛下物加入到螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物中,充分搅拌后放入100-120℃的烘干机直至内部水分含量低于15%,然后粉粹至粒度为80目,即得本发明螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂。
螺旋藻是蓝藻门颤藻科螺旋藻属的一类低等原核生物,喜碱性环境,不易受杂藻、菌物及原生动物污染,易养殖。具有防病毒、抗癌、抗氧化和增强免疫等生理功能,营养丰富,其中蛋白质是其最主要的营养成分,高达干重的60%~70%,是目前已知植物中蛋白质含量最高的一种。同时螺旋藻对钙、锌、铁、碘等微量元素具有很强的富集能力,对锗和硒的有机化程度高达94.8%和93.5%。螺旋藻蛋白质中很多生物活性肽常以非活性状态存于其中,并且在加工过程中螺旋藻蛋白质易变性,若将其水解,不仅可以提高它的溶解性能,而且能释放出隐藏于其中的活性肽,发挥比原有蛋白更多的生物活性。
进一步的,所述螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂的制备方法中步骤d的微量元素无机盐为硝酸硒、硝酸锰或硝酸亚铁。
进一步的,所述螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂的制备方法中步骤e的植物类饲料为甘薯粉、米糠或椰子粕(饼)。
本发明的另一个技术方案为提供上述螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂在饲料中的应用。
进一步的,所述饲料为鸭饲料、鸡饲料或鹅饲料。
本发明提供的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物可以借助小分子肽依赖于肠粘膜细胞膜上的载体蛋白的主动运输而被吸收利用,这种方式是机体吸收金属离子的主要形式,吸收快、不易饱和、耗能低,且不与氨基酸的吸收相竞争,同时小肽本身易消化吸收,能加快动物生长,提高动物的免疫力和抗应急能力。
与现有技术相比,本发明技术方案的有益效果为:
1.利用易繁殖的螺旋藻作为氨基酸小肽源,成本低,安全性好。
2.螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物具有氨基酸特有的香味,适口性好。
3.食用螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物饲料添加剂能提高动物对微量元素的吸收利用率,降低粪便高金属残留量对环境造成的污染。
4.食用螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物饲料添加剂能提高动物的免疫力。
5.将螺旋藻蛋白质酶解成氨基酸小肽,克服螺旋藻蛋白质在加工过程中易变性的问题,促进螺旋藻蛋白质的利用率。
具体实施方式
下面结合实施例详述本发明。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
下述螺旋藻粉购于购于河南盛之德商贸有限公司,超声波破碎仪购于深圳市欣禾兴电子有限公司,离心机购于上海化工机械厂有限公司,蛋白酶购于郑州荔诺生物科技有限公司,恒温箱购于东莞市剑乔试验设备有限公司,烘干机购于广州东奥电气有限公司。
实施例1
a.取20份螺旋藻粉于蒸馏水中,搅拌均匀至终浓度为15%(W/V)后在﹣16℃和45℃反复冻融5次,然后在600W的超声功率下超声10s间隔15s,共超声90次,随后将获得的溶液于4℃、6000r/min离心40min,得到螺旋藻蛋白上清液;
b.调节上述螺旋藻蛋白上清液pH值至5.5,升温至45℃,加入2%的植物蛋白酶水解4h,期间每隔40min搅拌一次;
c.将螺旋藻蛋白上清液的水解产物置于98℃恒温箱中保持25min,使酶失活,然后在3500r/min离心30min,收集澄清提取物,即得螺旋藻氨基酸小肽混合物;
d.按重量份称取微量元素无机盐硝酸硒6份,将其用1℃的水完全溶解后倒入螺旋藻氨基酸小肽混合物中,搅拌均匀后放入恒温箱中反应2.5h,期间每隔35min搅拌一次,即得螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物;
e.按重量份称取甘薯粉6份,粉碎,过40目筛,将筛下物加入到螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物中,充分搅拌后放入100℃的烘干机直至内部水分含量低于15%,然后粉粹至粒度为80目,即得本发明螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂。
实施例2
a.取35份螺旋藻粉于蒸馏水中,搅拌均匀至终浓度为17%(W/V)后在﹣16℃和45℃反复冻融5次,然后在600W的超声功率下超声10s间隔15s,共超声90次,随后将获得的溶液于4℃、6000r/min离心40min,得到螺旋藻蛋白上清液;
b.调节上述螺旋藻蛋白上清液pH值至7.8,升温至55℃,加入3.2%的中性蛋白酶水解9h,期间每隔45min搅拌一次;
c.将螺旋藻蛋白上清液的水解产物置于98℃恒温箱中保持25min,使酶失活,然后在3500r/min离心30min,收集澄清提取物,即得螺旋藻氨基酸小肽混合物;
d.按重量份称取微量元素无机盐硝酸锰10份,将其用30℃的水完全溶解后倒入螺旋藻氨基酸小肽混合物中,搅拌均匀后放入恒温箱中反应3.8h,期间每隔40min搅拌一次,即得螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物;
e.按重量份称取米糠10份,粉碎,过50目筛,将筛下物加入到螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物中,充分搅拌后放入110℃的烘干机直至内部水分含量低于15%,然后粉粹至粒度为80目,即得本发明螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂。
实施例3
a.取50份螺旋藻粉于蒸馏水中,搅拌均匀至终浓度为20%(W/V)后在﹣16℃和45℃反复冻融5次,然后在600W的超声功率下超声10s间隔15s,共超声90次,随后将获得的溶液于4℃、6000r/min离心40min,得到螺旋藻蛋白上清液;
b.调节上述螺旋藻蛋白上清液pH值至8.0,升温至65℃,加入4.5%的中性蛋白酶水解9h,期间每隔50min搅拌一次;
c.将螺旋藻蛋白上清液的水解产物置于98℃恒温箱中保持25min,使酶失活,然后在3500r/min离心30min,收集澄清提取物,即得螺旋藻氨基酸小肽混合物;
d.按重量份称取微量元素无机盐硝酸亚铁15份,将其用60℃的水完全溶解后倒入螺旋藻氨基酸小肽混合物中,搅拌均匀后放入恒温箱中反应5h,期间每隔50min搅拌一次,即得螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物;
e.按重量份称取椰子粕15份,粉碎,过60目筛,将筛下物加入到螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物中,充分搅拌后放入120℃的烘干机直至内部水分含量低于15%,然后粉粹至粒度为80目,即得本发明螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂。
含实施1制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂的鸭饲料:玉米60.7%、麸皮12.8%、豆粕13.2%、棉籽饼3.5%、菜籽饼3.5%、鱼粉3.5%、石粉0.4%、骨粉1.6%、食盐0.3%、0.5%实施1制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂。
普通鸭饲料:玉米60.7%、麸皮12.8%、豆粕13.2%、棉籽饼3.5%、菜籽饼3.5%、鱼粉3.5%、石粉0.4%、骨粉1.6%、食盐0.3%、0.5%甘薯粉与硝酸硒的混合物。
实施例4
随机挑选品种、大小、食性相同的鸭30只,分成2组,早晚分别喂食含实施1制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂的鸭饲料和普通鸭饲料,待鸭取食完后,分别称量鸭饲料的剩余量,连续称量14次即1周,取平均值,结果见表1。
表1鸭饲料剩余量统计表
从表1可知普通鸭饲料的平均剩余量202g,远大于含实施例1制得添加剂鸭饲料的剩余量53g,说明含实施1制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂的鸭饲料具有更好的适口性。
含实施2制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂的鸡饲料:玉米58.5%,粗蛋白13.5%,麸皮3.0%,豆粕14.0%,鱼粉2.0%,玉米蛋白粉4.0%,酵母粉2.0%,磷酸氢钙1.2%,石粉1.0%,食盐0.3%,0.5%含实施2制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂。
普通鸡饲料:玉米60.7%、麸皮12.8%、豆粕13.2%、棉籽饼3.5%、菜籽饼3.5%、鱼粉3.5%、石粉0.4%、骨粉1.6%、食盐0.3%、0.5%米糠与硝酸锰的混合物。
实施例5
随机挑选品种、大小、食性相同的鸡30只,分成2组,早晚分别喂食含实施2制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂的鸡饲料和普通鸡饲料,每天收集鸡粪检测其微量元素锰的残留量,连续检测10次,取平均值,结果见表2。
表2鸡粪中微量元素锰残留量统计表
从表2可知喂食含实施例2所得添加剂的鸡饲料的锰残留量10.52ppm远低于喂食普通鸡饲料的锰残留量45.17ppm,表明用螺旋藻氨基酸小肽螯合微量元素,能提高鸡对微量元素的利用率,减少微量元素的粪便残留。
实施例6
含实施3制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂的鹅饲料:秸秆生物饲料70%,骨粉1%,豆饼5%,鱼粉3.1%,玉米粉15%,麸皮3.5%,食盐0.4%,贝壳粉2%,含实施3制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂1%。
普通饲料:秸秆生物饲料70%,骨粉1%,豆饼5%,鱼粉3.1%,玉米粉15%,麸皮3.5%,食盐0.4%,贝壳粉2%,椰子柏与硝酸亚铁的混合物1%。
随机挑选品种、大小、食性相同的鹅30只,分成2组,早晚分别喂食含实施3制得的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂的鸭饲料和普通鹅饲料,喂食半年,期间统计各组鹅生病的次数。
表3半年内鹅生病次数统计表
从表3可知喂食含实施例3制得添加剂鹅饲料的鹅半年内才生病1次,而喂食普通鹅饲料的鹅半年内却生病了4次,由此可见含本发明螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂的饲料能够提高动物的免疫力。
以上实施例仅仅是本发明的两个实施例,但本发明并非局限于此。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出任何创造性劳动的前提下所得到的所有其它实施方式,都属于本发明所保护的范围。
Claims (5)
1.一种螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂,其特征在于,所述螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂的制备方法包括以下步骤:
a.取20-50份螺旋藻粉于蒸馏水中,搅拌均匀至终浓度为15%~20%(W/V)后在﹣16℃和45℃反复冻融5次,然后在600W的超声功率下超声10s间隔15s,共超声90次,随后将获得的溶液于4℃、6000r/min离心40min,得到螺旋藻蛋白上清液;
b.于上述螺旋藻蛋白上清液中加入2%~4.5%的植物蛋白酶或中性蛋白酶进行水解反应,期间每隔40-50min搅拌一次;
所述植物蛋白酶或中性蛋白酶水解的pH值为5.5~8.0;
所述植物蛋白酶或中性蛋白酶水解的温度为45℃~65℃;
所述植物蛋白酶或中性蛋白酶水解的时间分别为4h、9h;
c.将螺旋藻蛋白上清液的水解产物置于98℃恒温箱中保持25min,使酶失活,然后在3500r/min离心30min,收集澄清提取物,即得螺旋藻氨基酸小肽混合物;
d.按重量份称取微量元素无机盐6-15份,将其用1-60℃的水完全溶解后倒入螺旋藻氨基酸小肽混合物中,搅拌均匀后放入恒温箱中反应2.5-5小时,期间每隔35-50min搅拌一次,即得螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物;
e.按重量份称取植物类饲料6-15份,粉碎,过40-60目筛,将筛下物加入到螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物中,充分搅拌后放入100-120℃的烘干机直至内部水分含量低于15%,然后粉粹至粒度为80目,即得本发明螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂。
2.根据权利要求1所述的螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂,其特征在于,所述螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂的制备方法中步骤d的微量元素无机盐为硝酸硒、硝酸锰或硝酸亚铁。
3.根据权利要求1所述一种螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂,其特征在于,所述螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂的制备方法中步骤e的植物类饲料为甘薯粉、米糠或椰子粕(饼)。
4.根据权利要求1-3任一项所述螺旋藻氨基酸小肽微量元素螯合物添加剂在饲料中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述饲料为鸭饲料、鸡饲料或鹅饲料。
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