CN105560779A - 防治非酒精性脂肪性肝病的复方制剂及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种防治非酒精性脂肪性肝病的复方制剂，其创新点在于，由下列重量份的原料药制成：绞股蓝15～60份、黄芪15～45份、当归10～30份、虎杖15～45份、浙贝母6～12份。本发明复方制剂可采用常规方法制成片剂、颗粒剂、胶囊或口服液。药效学显示，本发明复方制剂具有显著预防和改善非酒精性脂肪肝的肝脂肪变性和降低血清转氨酶的作用。

Description

防治非酒精性脂肪性肝病的复方制剂及其用途

技术领域

本发明属于中医药研究开发利用领域，具体涉及用于预防和治疗NAFLD的中药复方制剂及其用途。

背景技术

非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholicfattyliverdisease,NAFLD)概括了从单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholicsteatohepatitis,NASH)到肝纤维化甚至肝硬化的一类疾病。随着肥胖和糖尿病的流行，NAFLD的发病率快速上升，成为引起慢性肝病最主要的发病因素之一。西方人群中，NAFLD的发病率在25～30％，在肥胖和糖尿病人中高达80％，成为引起肝酶异常的首要原因。在我国，由于饮食结构和生活方式的改变，NAFLD的发病率也逐渐上升，已成为仅次于病毒性肝病的第二大肝病。目前NAFLD的具体发病机制还不十分清楚，其形成主要由于进食过多脂肪或脂肪代谢障碍，导致甘油三酯(triglycerides,TG)在肝细胞内积聚。Day等提出的以氧应激和脂质过氧化为轴心的“二次打击”学说似乎可以解释其复杂的发病机理，在学术界较为流行。在NAFLD形成的“二次打击”中，第一次打击是肝脏内脂肪的积聚，尤其是脂肪酸和TG，形成单纯性脂肪肝；第二次打击氧化应激和脂质过氧化导致脂肪变的肝脏发生炎症、坏死和纤维化，发展为NASH。

中国专利CN101919986A公开了一种治疗非酒精性脂肪性肝病的中药组合物,该组合物是由以下重量份的原料药制成:丹参10～20份,葛根10～20份,垂盆草20～40份,女贞子10～20份、白术10～20份、片姜黄5～15份。

中国专利CN102883721A于2013-01-16公开了一种用于预防和治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的药物组合物，其包含选自式1表示的化合物1、西格列汀、维格列汀、利拉利汀或它们的药学可接受的盐的活性成分。

中国专利CN103800352A于2014-05-21公开了一种抗非酒精性脂肪性肝病的中药有效成分复方制剂，由栀子苷和绿原酸2种成分组成。

NAFLD尚无疗效理想的治疗药物，目前大批治疗NAFLD的药物，可调节脂代谢、抗氧化、改善IR等，或多或少显示出一定治疗作用，但尚无完全有效、作用肯定的药物可供临床使用，且这些药物长期服用存在一定毒性，因此患者很难长期坚持，且停药后易反复发作。

发明内容

针对现有技术的上述不足，根据本发明的实施例，希望提出一种具有较好降脂效果，具有显著预防和改善非酒精性脂肪肝的肝脂和血清转氨酶的作用，并且疗效确切的防治非酒精性脂肪性肝病的复方制剂。

本发明基于中医药防治脂肪肝的临床实践和扎实工作基础，以改善脂肪肝脂质积聚和肝损伤为药效指标，通过对脂肪肝病机辩证分析及对中草药药效的梳理筛选，组合出本发明配伍复方。

根据实施例，本发明提供的一种防治非酒精性脂肪性肝病的复方制剂，其创新点在于，由下列重量份的原料药制成：绞股蓝15～60份、黄芪15～45份、当归10～30份、虎杖15～45份、浙贝母6～12份。

根据一个实施例，本发明前述防治非酒精性脂肪性肝病的复方制剂中，优选的原料药的重量份分别为：绞股蓝40份、黄芪30份、当归15份、虎杖20份、浙贝母9份。

根据一个实施例，本发明前述防治非酒精性脂肪性肝病的复方制剂中，所述复方制剂为片剂、颗粒剂、胶囊或口服液。

根据一个实施例，本发明前述防治非酒精性脂肪性肝病的复方制剂中，所述的非酒精性脂肪性肝病为肝脏脂肪积聚及肝损伤。

本发明的中药复方可以采用中药制剂的常规方法制备成任何一种药剂学上所说的剂型，如汤剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或口服液。

本发明复方药物理论依据为：中医认为，痰、湿、瘀、热、肝郁是脂肪肝的主要表现形式，本发明的五种原料药中，绞股蓝有益气健脾、清热化痰的功效；黄芪性微温，归肝、脾、肺、肾经，有补脾益气的作用；当归补血活血，通经活络，内达脏腑而化瘀滞；虎杖清利湿热，又能通畅血脉、散瘀滞、化痰解毒，引湿热瘀浊从大小便分消；浙贝母清热化痰，开郁散结，为佐药。诸药并用，具有健脾益气、理气活血、清热利湿、消痰散瘀的功效。

中药组分研究显示，本发明中的五种原料药中包含的绞股蓝皂苷、白藜芦醇、黄连素等具有较好的降脂效果。随后的实施例和试验例将证明，本发明复方制剂可改善MCD饮食及高脂饮食诱导的NAFLD模型小鼠肝组织中脂质积聚、炎性浸润等病理改变，下调血清转氨酶，减轻肝损伤，该药物还能有效调控NAFLD进展中重要的细胞因子TNF-α、Resistin和PAI-1水平。由此，表明本发明复方制剂可用于伴有较严重的肝脏脂肪变性、炎症坏死等病理改变非酒精性脂肪性肝病的预防和治疗。

附图说明

图1为本发明对MCD诱导的NAFLD小鼠肝脏组织病理学的作用图(HE染色，200×)。

图2为本发明对MCD诱导的NAFLD小鼠肝脏组织脂质积聚的作用图(油红O染色，200×)。

图3为本发明对MCD诱导的NAFLD小鼠肝脏组织甘油三脂含量的影响图(与正常组比较，***P<0.001；与模型组比较，#P<0.05)。

图4为本发明对高脂饮食诱导的NAFLD小鼠肝脏组织病理学的作用图(HE染色，200×)。

图5为本发明对高脂饮食诱导的NAFLD小鼠肝脏组织脂质积聚的作用图(油红O染色，200×)。

图6为本发明对高脂饮食诱导的NAFLD小鼠肝脏组织甘油三脂含量的影响图(与正常组比较，*P<0.05；与模型组比较，#P<0.05)。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等效变化和修饰同样落入本发明权利要求所限定的范围。

实施例1

按以下重量称取原料药：绞股蓝30g、黄芪20g、当归10g、虎杖30g、浙贝母6g，按照常规工艺制备成汤剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或口服液。

实施例2

按以下重量称取原料药：绞股蓝40g、黄芪30g、当归15g、虎杖20g、浙贝母9g，按照常规工艺制备成汤剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或口服液。

实施例3

按以下重量称取原料药：绞股蓝50g、黄芪15g、当归30g、虎杖15g、浙贝母10g，按照常规工艺制备成汤剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或口服液。

实施例4

按以下重量称取原料药：绞股蓝55g、黄芪40g、当归25g、虎杖35g、浙贝母9g，按照常规工艺制备成汤剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或口服液。

实施例5

按以下重量称取原料药：绞股蓝20g、黄芪25g、当归30g、虎杖30g、浙贝母6g，按照常规工艺制备成汤剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或口服液。

本发明以下试验例采用实施例1-5制得的颗粒剂进行。

实验例1

本发明对胆碱蛋氨酸缺乏饮食诱导的小鼠NAFLD的预防作用

利用蛋氨酸‐胆碱缺乏(MethionineandCholineDeficient，MCD)饲料饲养C57BL/6小鼠6周，药物组同时予以本发明药物干预(随机选取实施例1‐7制得的制剂，由上海中医药大学附属龙华医院药剂科配制)。实验结果中肝组织HE染色及油红O染色显示，NAFLD模型组肝组织出现弥漫性肝细胞脂肪变性并伴有炎性细胞和坏死灶，本发明组中有显著改善(图1、图2)。肝脏甘油三脂(triglyceride，TG)含量在模型组升高，在本发明组小鼠中含量有显著下调(图3)。检测血清转氨酶以明确肝功能情况，MCD诱导的NAFLD模型组血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性水平，均比正常对照组有显著升高，出现明显肝损伤，本发明复方药物的干预使两个转氨酶水平都有所改善，尤其显著下调AST(表1)。细胞因子在NAFLD发生发展中发挥重要作用，其中的肿瘤坏死因子‐α(TNF‐α)、抵抗素(Resistin)、纤溶酶原激活物抑制因子‐1(plasminogenactivatorinhibitor‐1，PAI‐1)持续参与肝脏脂质积聚和炎症进展，其水平也可显示脂肪肝的严重程度。在MCD诱导的NAFLD模型小鼠中，血清中这三种因子含量均非常显著升高，本发明干预使TNF‐α和抵抗素下调、血清PAI‐1有下降趋势。另外，肝组织表达TNF‐α和PAI‐1的mRNA水平(以β‐actin为内参照的相对水平)有显著增加，本发明使其表达接近正常组(表2)。

表1本发明对MCD诱导的NAFLD小鼠转氨酶活性的影响(n＝8)

注：与正常组比较，**P<0.01；与模型组比较，#P<0.05

表2本发明对MCD诱导的NAFLD小鼠细胞因子水平的影响(n＝5)

注：与正常组比较，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；与模型组比较，#P<0.05；##P<0.01

实验例2

本发明对高脂饮食诱导的NAFLD的治疗作用

雄性C57BL/6J小鼠用高脂饲料(60％kcal％fat)饲养18周，建立了NAFLD模型，然后药物组高脂饲养同时予以本发明(随机选取实施例1‐7制得的制剂，由上海中医药大学附属龙华医院药剂科配制)干预4周，对照组予以普通饲料(10％kcal％fat)。对肝组织行HE染色及油红O染色显示，NAFLD模型组肝组织出现弥漫性肝细胞脂肪变性，伴有局灶性炎性细胞和坏死，本发明的干预使其有显著改善(图4、图5)。肝脏甘油三脂(triglyceride，TG)含量在模型组升高，在本发明组小鼠中含量有显著下调(图6)。高脂饮食诱导的NAFLD模型组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性水平，比正常对照组有显著升高，出现肝损伤，本发明的干预使ALT有明显改善(表3)。在高脂饮食诱导的NAFLD模型小鼠中，血清中细胞因子抵抗素(Resistin)含量显著升高，本发明干预对其有明显下调作用。模型小鼠PAI-1含量较正常组有升高趋势，本发明干预使其趋向正常。血清TNF-α由于含量较低未能测出，但其在模型组小鼠肝组织中的表达水平较正常组明显上调(以β-actin为内参照的相对水平)，本发明干预对其有明显下调作用(表4)。

表3本发明对高脂饮食诱导的NAFLD小鼠转氨酶活性的影响(n＝8)

注：与正常组比较，*P<0.05；与模型组比较，^#P<0.05

表4本发明对高脂饮食诱导的NAFLD小鼠细胞因子水平的影响(n＝5)

注：与正常组比较，**P<0.01；与模型组比较，^#P<0.05

结论

综上所述，本发明制备的药物可改善MCD饮食及高脂饮食诱导的NAFLD模型小鼠肝组织中脂质积聚、炎性浸润等病理改变，下调血清转氨酶，减轻肝损伤，该药物还能有效调控NAFLD进展中重要的细胞因子TNF-α、Resistin和PAI-1水平。结果表明该药物可用于伴有肝脏脂肪变性、炎症坏死等病理改变的非酒精性脂肪性肝病的预防和治疗。

Claims (10)

1.一种防治非酒精性脂肪性肝病的复方制剂，其特征在于，由下列重量份的原料药制成：绞股蓝15～60份、黄芪15～45份、当归10～30份、虎杖15～45份、浙贝母6～12份。

2.根据权利要求1所述的防治非酒精性脂肪性肝病的复方制剂，其特征在于，原料药的重量份分别为：绞股蓝40份、黄芪30份、当归15份、虎杖20份、浙贝母9份。

3.根据权利要求1所述的防治非酒精性脂肪性肝病的复方制剂，其特征在于，原料药的重量份分别为：绞股蓝30份、黄芪20份、当归10份、虎杖30份、浙贝母6份。

4.根据权利要求1所述的防治非酒精性脂肪性肝病的复方制剂，其特征在于，原料药的重量份分别为：绞股蓝50份、黄芪15份、当归30份、虎杖15份、浙贝母10份。

5.根据权利要求1所述的防治非酒精性脂肪性肝病的复方制剂，其特征在于，原料药的重量份分别为：绞股蓝55份、黄芪40份、当归25份、虎杖35份、浙贝母9份。

6.根据权利要求1所述的防治非酒精性脂肪性肝病的复方制剂，其特征在于，原料药的重量份分别为：绞股蓝20份、黄芪25份、当归30份、虎杖30份、浙贝母6份。

7.根据权利要求1-6中任何一项所述的防治非酒精性脂肪性肝病的复方制剂其特征在于，所述复方制剂为汤剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或口服液。

8.根据权利要求1-6中任何一项所述的防治非酒精性脂肪性肝病的复方制剂，其特征在于，所述的非酒精性脂肪性肝病为肝脏脂肪积聚及肝损伤。

9.权利要求1-6中任何一项所述的复方制剂在制备治疗非酒精性脂肪性肝病的药物中的用途。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，非酒精性脂肪性肝病为肝脏脂肪积聚及肝损伤。