CN105287682A - 一种蒲公英提取物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种蒲公英提取物的制备方法，包括以下步骤：水提取、减压浓缩、醇沉、调节pH值、大孔树脂纯化、浓缩和干燥等。本发明工艺简单易操作，所用大孔树脂可再生利用，制备成本低且环境污染小；使用乙醇溶液作为提取、洗脱溶剂，安全性高，廉价易得，生产成本低；所得的蒲公英提取物中总黄酮、咖啡酸含量高、成分全，不仅含黄酮类、酚酸类有效成分，也含香豆素和酯类等成分，其中总黄酮含量由药材中的2％提高到50％以上，咖啡酸含量由0.02％提高到0.8％以上。

Description

一种蒲公英提取物的制备方法

技术领域

本发明涉及一种蒲公英提取物的制备方法，属于中药领域。

背景技术

蒲公英为菊科植物蒲公英TaraxacummongolicumHand.-Mazz.、碱地蒲公英TaraxacumborealisinenseKitm.或同属数种植物的干燥全草，全国各地均有分布。春至秋季花初开时采挖，除去杂质，洗净，晒干，鲜用或生用。蒲公英是临床常用中药，《本草备要》谓之“专治痈肿、疗毒，亦为通淋妙品”，古方记载蒲公英为“解热凉血之要药”、“至贱而有大功”。蒲公英味苦、甘，性寒，归肝、胃经。有清热解毒，消肿散结，利尿通淋之功效，用于乳痈、肺痈、肠痈、痄腮、瘰病，疔疮肿毒，目赤，咽痛，湿热黄疽，热淋涩痛，蛇虫咬伤等。蒲公英的主要有效成分为黄酮类、酚酸类、香豆素类、酯类、维生素及矿物质等。现代药理学研究表明，蒲公英对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌及卡他球菌具有较强的抑制作用，还有利胆、保肝、抗内毒素及利尿等作用。

中药的作用特点之一就是多成分起作用，蒲公英中多种成分如黄酮、酚酸等皆有明显的药效作用。目前，针对蒲公英药效成分的分离、纯化主要以单一成分做指标，例如中国专利CN103070899A提供了一种蒲公英总黄酮的分离纯化方法，具体包括甲醇回流提取、浓缩、调节pH、大孔树脂柱分离、硅胶层析柱分离等步骤，制备了含量在96％以上的总黄酮；但该方法使用85％-100％甲醇提取，再用甲醇、丙酮及其混合溶液作为洗脱剂进行分离、纯化，容易造成提取物中毒性溶剂残留，且该方法同时使用了大孔树脂柱和硅胶层析柱进行分离、纯化，操作步骤繁多，不适合大生产。中国专利CN103494858A公开了一种蒲公英总黄酮的大孔树脂富集方法，包括石油醚脱脂、乙醇回流提取、浓缩、调节pH、大孔树脂柱分离纯化等步骤，获得了含量在60％以上的总黄酮，但该方法提取前用石油醚脱脂，易造成有机溶剂的残留，不适于大生产。李喜凤等对蒲公英中有机酸类成分的提取工艺进行了研究，结果表明，蒲公英中有机酸最佳提取条件为：80％的乙醇，料液比为1:40，水浴回流1.5小时，各有机酸的提取率均较高；但该方法并没有提供进一步分离纯化有机酸的方法，且该方法仅以有机酸作为评价指标，并没有涉及蒲公英总类成分的提取、分离(李喜凤，郝哲，邱天宝，等.蒲公英中有机酸类成分的提取工艺研究[J].中成药，2011，33(2)：262-265.)。

以上都是关于蒲公英中黄酮类和酚酸类成分的提取、分离，但有关蒲公英总有效成分提取物的提取、纯化研究却甚少。虽然总黄酮和酚酸是蒲公英的药效成分之一，但仅以总黄酮或总酚酸作为指标，并不能全面体现蒲公英提取物药效作用。

鉴于现有技术的不足，有必要发明一种新的制备蒲公英提取物的方法，使之既能简化操作过程，在最大程度上少用或不用有害溶剂，适合工业化大生产，又能提高提取物中多种药效成分的含量。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有提取、纯化工艺的不足，提供一种简单、有效的制备蒲公英提取物的方法。

本发明的目的是通过以下方式实现的。

本发明蒲公英提取物的制备方法包括：水提醇沉、过滤浓缩、调节pH值、大孔树脂纯化和浓缩、干燥等步骤。

进一步，本发明所涉及的一种蒲公英提取物的制备方法包括以下步骤：

1)取蒲公英药材，水提取，滤过，合并滤液，减压浓缩，得浓缩液；

2)步骤1)浓缩液加乙醇至含醇量为40％-70％，静置、过滤、减压浓缩、回收乙醇，得浓缩液；

3)步骤2)浓缩液加水稀释至相当于1-3倍药材重量，调节pH为2-6，加于预处理好的大孔树脂柱上进行吸附，先以1-3BV/h的流速用1-3BVpH＝3-7的稀盐酸溶液洗脱，再以2-3BV/h的流速用1-3BV纯水洗脱，弃去洗脱液，然后以1-4BV/h的流速用1-3BV40％-60％乙醇洗脱，最后以2-4BV/h的流速用1-3BV60％-80％的乙醇洗脱；

4)合并步骤3)醇洗脱液，浓缩，干燥，得蒲公英提取物。

优选地，步骤1)所述水提取加水量为8-12倍药材重量，提取次数为3次，每次1小时。

优选地，步骤2)所述浓缩液的乙醇含量为70％。

优选地，步骤3)所述的大孔树脂为HPD-826、HPD-750、HPD-100、D-101和AB-8中的一种，最优为HPD-750。

优选地，步骤3)所述浓缩液加水稀释至相当于3倍药材重量并调节pH为3-5，除杂用稀盐酸溶液pH为3-5，洗脱用乙醇溶液的浓度分别为40％和70％。

与现有技术比较，本发明蒲公英提取物制备方法具有以下显著的进步：

1、操作简单，条件可控，具良好的可重复性，所用大孔树脂可重复利用，制备成本低且不污染环境，适合工业化生产。

2、本发明使用水提取，药效成分提取率高，其中总黄酮提取率高于醇提法；所用提取及洗脱溶剂为水或乙醇，廉价易得，所得提取物无有害溶剂残留，药物安全性高；

3、与现有蒲公英有效成分提取纯化方法相比较，用本发明方法制备的蒲公英提取物药效成分更全，不仅含有黄酮类、酚酸类成分，也保留了香豆素类、酯类等成分，可最大程度保证蒲公英药材的原有功效，且降低了服用量，利于制剂及提高了患者用药的顺应性。

4、与现有的蒲公英有效成分制备方法相比较，用本发明方法制备的蒲公英提取物中总黄酮含量由药材中2％提高到50％以上，咖啡酸含量由药材中0.02％提高到0.8％以上。

具体实施方式

以下通过蒲公英有效成分提取物抗炎作用和抗病毒试验例及蒲公英提取物制备的具体实施方式对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。

实施例1蒲公英提取物抗炎作用试验

1、试验目的

采用二甲苯所致小鼠耳廓肿胀试验模型研究蒲公英提取物抗炎作用

2、试验材料

2.1、受试药品

蒲公英提取物，批号：20110615(以本发明最佳实施例6所得的蒲公英提取物)，棕黑色粉末，气香味苦、质地干脆，难溶于水和乙醇。

2.2、阳性对照药

999皮炎平(复方醋酸地塞米松乳膏)，华润三九医药股份有限公司产品；

适应症：用于局限性瘙痒症、神经性皮炎、接触性皮炎、脂溢性皮炎以及慢性湿疹；

批号：国药准字H44024170，生产日期：2011.11.13，有效期：2013.09.01；

性状：白色乳膏，有樟脑的特异芳香；

规格：20g/15毫克；

用法用量：外用，一日1～2次，取少量涂于患处，并轻揉片刻。

2.3、剂量设计

2.3、复方醋酸地塞米松乳膏(999皮炎平)

按照说明书提供的用法用量，本品临床外用，一日1～2次，取少量涂于患处，轻揉片刻。本试验采用每日在小鼠右耳壳正反两面均匀涂抹(每鼠每日用量为0.1ml)。

2.3.3、蒲公英提取物

根据使用剂量预试验结果，采用55mg/kg体重、45mg/kg体重、35mg/kg体重三种剂量给药，一半灌胃给药，一半涂抹耳部给药，灌胃给药部分三个剂量依次取55mg/kg体重、45mg/kg体重、35mg/kg提取物溶于0.5％羧甲基纤维素中配成20ml给药液；涂抹给药部分三个剂量依次取27.5mg、22.5mg、17.5mg提取物溶于3％羧甲基纤维素中配成10ml给药膏，置冰箱4℃冷藏备用。

2.4、动物

ICR小鼠(SPF/VAF级)，体重20±2g，雌雄兼用，北京市维通利华有限责任公司提供。试验动物100只，动物许可证：SCXK(京)2009-0004。

2.5、试验试剂

二甲苯C6H4(CH3)2，分析纯，含量不少于80.0％，批号：20101104，中国人民解放军第九零六六工厂生产。

2.6、试验仪器

A2型生物安全柜，MSC1.8型，德国Thermo公司；动物脏器电子天平，AR1140型，美国Chaus公司；IVC小鼠饲养笼，苏州教学笼具厂。

2.7、试验场所

中国中医科学院中药研究所ABSL-2生物安全试验室。

3、方法及结果

3.1、试验方法

体重20±2g小鼠50只，随机分为5组，分别为模型对照组、阳性对照组、蒲公英大剂量组、蒲公英中剂量组、蒲公英小剂量组。

各给药组前2d将药物按等效剂量一半涂抹于耳部，一半灌胃给药。第3d只灌胃给药，不涂抹药。末次给药30min后，以二甲苯棉球，在小鼠右耳壳正反两面均匀涂抹(每鼠二甲苯用量为0.1ml)，1h后将动物颈椎断裂，沿耳廓基线剪下两耳对齐，用打孔器冲下圆耳片(直径7mm)，用分析天枰称重，以两耳重量差值为炎症肿胀度，依下式计算用药组的肿胀抑制率：

肿胀抑制率：(模型对照组肿胀度均值-用药组肿胀度均值)/模型对照组肿胀度均值×100％

3.2、试验结果

表1对二甲苯致小鼠耳壳肿胀模型的影响(重复试验)

注：与模型对照组比较，**P<0.01，*P<0.05

表1结果显示：各提取物给药组对小鼠耳肿胀均有不同程度的减轻作用，蒲公英大剂量组、中剂量组和小剂量组与模型对照组比较具有极显著性差异(P<0.01)。

实施例2蒲公英提取物抗病毒试验

一、实验药物及浓度

蒲公英提取物，批号：20110615(以本发明最佳实施例6所得的蒲公英提取物)，棕黑色粉末，气香味苦、质地干脆，难溶于水和乙醇。根据试验需要配制成相应浓度。

二、实验方法：

鸡胚发育到10日龄，在气室边缘打孔注射100ul病毒悬液；放入35℃培养箱孵化2小时；再打孔注射100ul实验药物，放入孵化箱孵化48小时,然后放入4℃冰箱过夜，次日收取尿囊液测定血凝滴度。

三、红细胞凝集试验

注：上表中NS是用于二倍比稀释尿囊液的，稀释后的体积是25ul。

四、实验结果：

五、结论：

滴度：A(267.3)、B(276)、C(阴性对照)、D(空白对照)。由试验结果可得抗病毒效果：病毒对照>蒲公英>阴性对照、空白对照。

实验所用的药物并不能完全杀死病毒，但是与病毒对照组相比较有一定程度的抗病毒作用，蒲公英抗病毒效果明显。

实施例3蒲公英提取物的制备

1)蒲公英提取物的制备

取蒲公英药材6kg，用9倍量水提取2次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至密度为1.15g/ml，放冷，加乙醇至含醇量为40％，静置24小时，滤过，回收乙醇，将浓缩液加水稀释至相当于药材重量的1倍，调节pH为2，以1.5BV/h流速加于预处理好的HPD-750型大孔树脂柱上，上样量为2倍树脂床体积，先以1BV/h的流速用1BVpH＝3稀盐酸溶液洗脱，弃去，再以2BV/h的流速用1BV纯水洗脱，弃去，然后以1BV/h的流速用1BV40％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，最后以2BV/h的流速用1BV60％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，合并醇洗脱液，减压浓缩至相对密度为1.15～1.30(70℃)的清膏，真空干燥，即得蒲公英提取物0.210Kg。

2)蒲公英提取物中总黄酮含量的测定

对照品、供试品溶液的制备：精密量取经芦丁对照品19.15mg置于100mL的容量瓶中，加50％甲醇定容至刻度，得对照品溶液；精密称定蒲公英提取物100mg置于100mL的容量瓶中，加50％甲醇定容至刻度，超声30分钟使溶解，从中精密吸取1ml，置于50mL的容量瓶中，加50％甲醇定容至刻度，得供试品溶液。

标准曲线的绘制：精密量取经芦丁对照品(0.1915mg/ml)0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml置于100mL的容量瓶中，加0.3ml5％NaNO₂，6分钟后加0.3ml10％Al(NO₃)₃，6分钟后加4ml4％NaOH，用水定容至刻度。

将对照品溶液分别在510nm处测定吸光度，得回归方程为Y＝0.2365X-0.0009，相关系数r＝0.9998。

总黄酮含量测定：取蒲公英提取物供试品溶液0.5mL于10mL的容量瓶中，加0.3ml5％NaNO₂，6分钟后加0.3ml10％Al(NO₃)₃，6分钟后加4ml4％NaOH，用水定容至刻度，在510nm处测定其吸光度，根据回归方程计算得供试品中总黄酮的含量，根据供试品溶液中总黄酮的含量计算得蒲公英提取物中总黄酮的含量为50.2％。

3)蒲公英提取物中咖啡酸含量的测定

供试品溶液的制备：精密称定蒲公英提取物100mg置于50ml量瓶中，加50％甲醇定容至刻度，0.45μm微孔滤膜过滤，得供试品溶液。

咖啡酸含量的测定：按《中国药典》2010年版一部蒲公英项下液相条件测定，进样量各5μl，测定供试品溶液中咖啡酸的含量，根据供试品溶液中咖啡酸含量计算得蒲公英提取物中咖啡酸的含量为0.88％。

实施例4蒲公英提取物的制备

取蒲公英药材6kg，用12倍量水提取2次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至密度为1.15g/ml，放冷，加乙醇至含醇量为70％，静置24小时，滤过，回收乙醇，将浓缩液加水稀释至相当于药材重量的3倍，调节pH为6，以1.5BV/h的流速加于预处理好的HPD-826型大孔树脂柱上，上样量为2倍树脂床体积，先以3BV/h的流速用3BVpH＝7的稀盐酸溶液洗脱，弃去，再以3BV/h的流速用3BV纯水洗脱，弃去，然后以3BV/h的流速用3BV60％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，最后以4BV/h的流速用3BV80％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，合并醇洗脱液，减压浓缩至相对密度为1.15～1.30(70℃)的清膏，真空干燥，即得蒲公英提取物0.180Kg。

按实施例3所述总黄酮和咖啡酸的测定方法，测得总黄酮和咖啡酸的含量分别为53.5％和0.83％。

实施例5蒲公英提取物的制备

取蒲公英药材6kg，用10倍量水提取2次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至密度为1.15g/ml，放冷，加乙醇至含醇量为60％，静置24小时，滤过，回收乙醇，将浓缩液加水稀释至相当于药材重量的2倍，调节pH为4，以1.5BV/h的流速加于预处理好的D-101型大孔树脂柱上，上样量为2倍树脂床体积，先以2BV/h的流速用2BVpH＝3.5的稀盐酸溶液洗脱，弃去，再以2BV/h的流速用2BV纯水洗脱，弃去，然后以2BV/h的流速用2BV50％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，最后以3BV/h的流速用2BV80％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，合并醇洗脱液，减压浓缩至相对密度为1.15～1.30(70℃)的清膏，微波真空干燥，即得蒲公英提取物0.246Kg。

按实施例3所述总黄酮和咖啡酸的测定方法，测得总黄酮和咖啡酸的含量分别为52.1％和0.93％。

实施例6蒲公英提取物的制备

取蒲公英药材6kg，用10倍量水提取2次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至密度为1.15g/ml，放冷，加乙醇至含醇量为70％，静置24小时，滤过，回收乙醇，将浓缩液加水稀释至相当于药材重量的3倍，调节pH为5，以1.5BV/h的流速加于预处理好的HPD-750型大孔树脂柱上，上样量为2倍树脂床体积，先以3BV/h的流速用3BVpH＝3的稀盐酸溶液洗脱，弃去，再以2BV/h的流速用3BV纯水洗脱，弃去，然后以3BV/h的流速用40％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，最后以3BV/h的流速用3BV70％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，合并醇洗脱液，减压浓缩至相对密度为1.15～1.30(70℃)的清膏，真空干燥，即得蒲公英提取物0.252Kg。

按实施例3所述总黄酮和咖啡酸的测定方法，测得总黄酮和咖啡酸的含量分别为58.1％和1.15％。

实施例7蒲公英提取物的制备

取蒲公英药材6kg，用8倍量水提取2次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至密度为1.15g/ml，放冷，加乙醇至含醇量为50％，静置24小时，滤过，回收乙醇，将浓缩液加水稀释至相当于药材重量的1倍，调节pH为3.5，以1.5BV/h的流速加于预处理好的AB-8型大孔树脂柱上，上样量为2倍树脂床体积，先以2BV/h的流速用2BVpH＝4的稀盐酸溶液洗脱，弃去，再以3BV/h的流速用3BV纯水洗脱，弃去，然后以4BV/h的流速用2BV60％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，最后以3BV/h的流速用3BV60％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，合并醇洗脱液，减压浓缩至相对密度为1.15～1.30(70℃)的清膏，真空干燥，即得蒲公英提取物0.258Kg。

按实施例3所述总黄酮和咖啡酸的测定方法，测得总黄酮和咖啡酸的含量分别为57.6％和1.12％。

实施例8蒲公英提取物的制备

取蒲公英药材6kg，用8倍量水提取2次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至密度为1.15g/ml，放冷，加乙醇至含醇量为50％，静置24小时，滤过，回收乙醇，将浓缩液加水稀释至相当于药材重量的3倍，调节pH为2.5，以1.5BV/h的流速加于预处理好的HPD-100型大孔树脂柱上，上样量为2倍树脂床体积，先以1BV/h的流速用1.5BVpH＝3的稀盐酸溶液洗脱，弃去，再以3BV/h的流速用1BV纯水洗脱，弃去，然后以3BV/h的流速用3BV50％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，最后以2BV/h的流速用1BV70％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，合并醇洗脱液，减压浓缩至相对密度为1.15～1.30(70℃)的清膏，喷雾干燥，即得蒲公英提取物0.288Kg。

按实施例3所述总黄酮和咖啡酸的测定方法，测得总黄酮和咖啡酸的含量分别为55.4％和1.07％。

实施例9蒲公英提取物的制备

取蒲公英药材6kg，用10倍量水提取2次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至密度为1.15g/ml，放冷，加乙醇至含醇量为60％，静置24小时，滤过，回收乙醇，将浓缩液加水稀释至相当于药材重量的2倍，调节pH为4.5，以1.5BV/h的流速加于预处理好的HPD-826型大孔树脂柱上，上样量为2倍树脂床体积，先以3BV/h的流速用3BVpH＝4的稀盐酸溶液洗脱，弃去，再以2BV/h的流速用2BV纯水洗脱，弃去，然后以2BV/h的流速用1BV40％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，最后以3BV/h的流速用2BV80％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，合并醇洗脱液，减压浓缩至相对密度为1.15～1.30(70℃)的清膏，真空干燥，即得蒲公英提取物0.282Kg。

按实施例3所述总黄酮和咖啡酸的测定方法，测得总黄酮和咖啡酸的含量分别为49.3％和1.10％。

实施例10蒲公英提取物的制备

取蒲公英药材6kg，用9倍量水提取2次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至密度为1.15g/ml，放冷，加乙醇至含醇量为70％，静置24小时，滤过，回收乙醇，将浓缩液加水稀释至相当于药材重量的2倍，调节pH为5，以1.5BV/h的流速加于预处理好的HPD-750型大孔树脂柱上，上样量为2倍树脂床体积，先以2BV/h的流速用3BVpH＝2的稀盐酸溶液洗脱，弃去，再以2BV/h的流速用3BV纯水洗脱，弃去，然后以1BV/h的流速用1BV50％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，最后以4BV/h的流速用2BV60％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，合并醇洗脱液，减压浓缩至相对密度为1.15～1.30(70℃)的清膏，微波真空干燥，即得蒲公英提取物0.216Kg。

按实施例3所述总黄酮和咖啡酸的测定方法，测得总黄酮和咖啡酸的含量分别为53.8％和1.05％。

实施例11蒲公英提取物的制备

取蒲公英药材6kg，用10倍量水提取2次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至密度为1.15g/ml，放冷，加乙醇至含醇量为50％，静置24小时，滤过，回收乙醇，将浓缩液加水稀释至相当于药材重量的3倍，调节pH为2.5，以的1.5BV/h流速加于预处理好的D-101型大孔树脂柱上，上样量为2倍树脂床体积，先以3BV/h的流速用2.5BVpH＝3的稀盐酸溶液洗脱，弃去，再以3BV/h的流速用3BV纯水洗脱，弃去，然后以1BV/h的流速用2BV60％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，最后以1BV/h的流速用1BV70％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，合并醇洗脱液，减压浓缩至相对密度为1.15～1.30(70℃)的清膏，微波真空干燥，即得蒲公英提取物0.192Kg。

按实施例3所述总黄酮和咖啡酸的测定方法，测得总黄酮和咖啡酸的含量分别为57.2％和1.01％。

实施例12蒲公英提取物的制备

取蒲公英药材6kg，用11倍量水提取2次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩至密度为1.15g/ml，放冷，加乙醇至含醇量为70％，静置24小时，滤过，回收乙醇，将浓缩液加水稀释至相当于药材重量的3倍，调节pH为4，以的1.5BV/h流速加于预处理好的AB-8型大孔树脂柱上，上样量为2倍树脂床体积，先以1BV/h的流速用1BVpH＝3的稀盐酸溶液洗脱，弃去，再以2BV/h的流速用1BV纯水洗脱，弃去，然后以3BV/h的流速用3BV40％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，最后以3BV/h的流速用1BV80％的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，合并醇洗脱液，减压浓缩至相对密度为1.15～1.30(70℃)的清膏，真空干燥，即得蒲公英提取物0.272Kg。

按实施例3所述总黄酮和咖啡酸的测定方法，测得总黄酮和咖啡酸的含量分别为56.0％和0.97％。

Claims (6)

1.一种蒲公英提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)取蒲公英药材，水提取，滤过，合并滤液，减压浓缩，得浓缩液；

2)步骤1)浓缩液加乙醇至含醇量为40％-70％，静置、过滤、减压浓缩、回收乙醇，得浓缩液；

3)步骤2)浓缩液加水稀释至相当于1-3倍药材重量，调节pH为2-6，加于预处理好的大孔树脂柱上进行吸附，先以1-3BV/h的流速用1-3BVpH＝3-7的稀盐酸溶液洗脱，再以2-3BV/h的流速用1-3BV纯水洗脱，弃去洗脱液，然后以1-4BV/h的流速用1-3BV40％-60％乙醇洗脱，最后以2-4BV/h的流速用1-3BV60％-80％的乙醇洗脱；

4)合并步骤3)醇洗脱液，浓缩，干燥，得蒲公英提取物。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述水提取加水量为8-12倍药材重量，提取次数为3次，每次1小时。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)所述浓缩液的乙醇含量为70％。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)所述大孔树脂的型号为HPD-826、HPD-750、HPD-100、D-101和AB-8中的一种。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述大孔树脂的型号为HPD-750。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于，步骤3)所述浓缩液加水稀释至相当于3倍药材重量并调节pH为3-5，除杂用稀盐酸溶液pH＝3-5，洗脱用乙醇溶液的浓度分别为40％和70％。