CN1686354A - 一种复方蒲公英冻干粉针剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种复方蒲公英冻干粉针剂及其制备方法。它是由鱼腥草、野菊花提取的挥发油的HP－β－CD包合物1－3重量份，蒲公英、鱼腥草、野菊花经提取纯化得到的提取物5－10重量份和适宜药用辅料制备而成。其中提取物中总黄酮的含量为30％－50％，绿原酸含量为0.5％－0.8％，咖啡酸含量为0.3％－0.5％。本发明还公开了其制备方法。含量测定结果和药理实验结果说明，本发明制剂含有的有效成分含量更高，药理作用更强。

Description

一种复方蒲公英冻干粉针剂及其制备方法

所属技术领域

本发明属中药制药技术领域，具体涉及一种复方蒲公英冻干粉针剂及其制备方法。

背景技术

蒲公英是为菊科多年生草本植物蒲公英Taraxacum mongolicum Hand.Mazz.及其多种同属植物的带根全草。蒲公英味苦、甘，性寒，人肝胃二经。具有清热解毒、消肿散结和利胆利尿等功效。药理实验表明，蒲公英具有抗菌、利胆、健胃、通乳和抗肿瘤等作用。临床上用于急慢性胃炎、乳腺炎、疗毒疮肿、肝炎、支气管炎、尿路感染等疾病。

鱼腥草为三白草科蕺菜属植物蕺菜Houttuyniacordata Thunb的干燥地上部分，味辛、性凉，具有清热解毒、消痈排脓、利尿通淋等功效，用于肺痈吐脓，痰热喘咳，热痢，热淋，痈肿疮毒。

野菊花为菊科多年生草本植物野菊Chrysanthemum indicum L等的头状花序。性味苦、辛，微寒，归肺、肝经。功能清热解毒，善治痈肿、疔毒、咽喉肿痛、风火赤眼、皮肤瘙痒等病证，同时又有很好的降压作用，可用于高血压病的辅助治疗。

复方蒲公英注射液由蒲公英、鱼腥草、野菊花三味中药经提取制备而成，具有清热解毒、疏风止咳功效，用于风热感冒、肺热咳嗽。

蒲公英含有绿原酸、咖啡酸和黄酮类成分，鱼腥草主要有效成分为挥发油类，也含黄酮成分，野菊花中所含的绿原酸、挥发油和黄酮类化合物是其发挥药效的主要有效成分。而复方蒲公英注射液原制备工艺中鱼腥草、野菊花仅提取了挥发油类成分。由于含有绿原酸及挥发油类等成分，产品质量不稳定，对保存的要求较高，保存不当药液会由于氧化出现浑浊、沉淀、变色等情况；复方蒲公英注射液质量标准中只对总黄酮的含量进行了测定，由于复方蒲公英注射液的蒲公英、鱼腥草、野菊花中均含有黄酮类成分，但其所含黄酮类成分结构和分子量各异，均以芦丁做对照计算含量，科学性差，同时仅测定黄酮类成分不能反映蒲公英和野菊花都含有的另一类活性成分绿原酸的含量情况，而《中国药典》一部蒲公英药材测定的咖啡酸的含量在制剂中也没有体现；另注射液由于注射液制备工艺中采用了三步醇沉法，在醇沉过程中部分有效成分会随着杂质一起被包裹沉淀，有效成分损失大；注射液对稳定性要求高，在携带、储藏、运输时容易破碎，也带来许多麻烦。

在资料检索中未发现有关复方蒲公英冻干粉针剂的报道。

发明内容

基于以上原因，本发明研究人员根据复方蒲公英中所含药材的有效成分的性质，对提取纯化工艺进行了改进，使有效成分的提取更全面、含量更高，杂质含量更少，将挥发油制成包合物后与提取物合并，制成冻干粉针剂也提高了制剂的稳定性，本发明还对制剂的质量标准进行了提高，测定了绿原酸和咖啡酸的含量，使制剂的质量可控性更强，药理实验结果表明，本发明复方蒲公英冻干粉针剂具有更好的药理作用。

本发明的目的是公开一种富含活性成分、疗效好、质量稳定、方便使用的复方蒲公英冻干粉针制剂。

本发明的另一个目的是提供上述复方蒲公英冻干粉针制剂的制备方法。

本发明通过以下技术方案实现。

一、制备方法

(1)原料药重量份组成为：蒲公英8-12份，鱼腥草8-12份，野菊花8-12份。

(2)取鱼腥草、野菊花药材，加水浸泡1小时，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，将收集的挥发油缓慢加入HP-β-CD饱和水溶液中，50℃-60℃保温条件下搅拌2-4小时，室温下继续搅拌3小时，冷藏过夜，过滤，真空干燥得到包合物。

(3)蒲公英和鱼腥草、野菊花药渣再加6-10倍量的水提取2次，每次1小时；合并两次煎煮液，静置，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.24的浸膏，加乙醇使含醇量达60％-70％，静置12小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水稀释至溶液∶药材为1∶1，药液过已处理好的大孔吸附树脂柱，先用3-5倍柱体积的水洗脱后，再用4-6倍量柱体积40％-70％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加水稀释至溶液∶药材为1∶0.5，用截留分子量为5000-20000的超滤膜进行超滤，超滤液减压浓缩并真空干燥，粉碎，得到提取物。

(4)取上述包合物、提取物加注射用水溶解，滤过，加入药用辅料，加注射用水至规定量，调节pH值至7.0-7.5，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。

在复方蒲公英冻干粉针剂的制备中，采用水蒸气蒸馏法提取鱼腥草、野菊花中的挥发油后，再用羟丙基β-环糊精(HP-β-CD)进行包合。HP-β-CD为水溶性的包合物，用其包合的挥发油制成粉针剂溶解性好，注射时易吸收，生物利用度高，患者痛感小，易于被患者愉快的接受；而且用HP-β-CD对挥发油进行包合，使其在制备、贮藏、运输的过程中不易被空气氧化而变质，增加了挥发油的稳定性，提高了疗效。蒲公英和野菊花都含黄酮类化合物及绿原酸，鱼腥草也含部分黄酮化合物，蒲公英还含咖啡酸等，因此将提取挥发油后的鱼腥草、野菊花和蒲公英合并用水提取，我们采用经典的水提醇沉法在除去部分杂质后，又用大孔吸附树脂对提取物进行了分离纯化，经纯化后的复方蒲公英提取物中主要有效成分总黄酮含量为35％-50％，绿原酸含量为0.5％-0.8％，咖啡酸含量为0.3％-0.5％。同时冻干后制剂的不稳定成分绿原酸和挥发油由于挥发油被包合互相隔离，绿原酸和挥发油的相互影响减少，且药物成分以固体状态存在，也提高了制剂的稳定性。

超滤膜分离技术是一种新兴的分离方法，它可以通过分子量的选择性筛选去除蛋白质、鞣质、树脂、淀粉等分子量较大的杂质，保留所需的有效成分，该方法在常温进行、条件温和，分离效率高，是一种节能环保的方法，本发明研究人员将用大孔树脂纯化后的复方夏天无提取物进一步用超滤膜进行纯化，并筛选了适合于本发明提取物的超滤膜的分子量。本发明用超滤工艺处理，可以进一步去除杂质，提高有效部位的纯度，从而提高制剂质量，同时超滤工艺的运用对于热原的去除也具有一定作用。本发明采用的超滤膜的分子量为5000-20000。

本发明制剂中含鱼腥草、野菊花提取的挥发油的HP-β-CD的包合物1-3重量份，蒲公英、鱼腥草、野菊花经提取纯化得到的提取物5-10重量份。

二、含量测定分析

1、复方蒲公英制剂中总黄酮的含量测定

1.1仪器与试药  日本岛津UV-3000A紫外分光光度计。复方蒲公英注射液(江西钟山药业有限责任公司)；本发明复方蒲公英冻干粉针剂(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)；芦丁对照品(中国药品生物制品检定所)；甲醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠试剂均为分析纯，水为三蒸水(自制)。

1.2对照品溶液配制  精密称取芦丁对照品100mg，置50ml量瓶中，加入甲醇30ml，置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得0.2mg/ml的芦丁对照品溶液。

1.3标准曲线制备精密吸取上述对照品溶液0、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00ml，分别置25ml容量瓶中，各加水至6ml，分别加5％亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6min后分别加1％硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6min，再分别加4％氢氧化钠溶液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15min，照分光光度法在在500nm处测定吸收值A，以吸收值A对浓度进行回归计算，回归方程为：Y＝0.124x-0.0034，r＝0.998。

1.4供试品溶液的制备取本品粉末，精密称定，取约0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，称定重量，超声处理40min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心(12000rpm)10min，取上清液过滤，取续滤液，即得。

1.5总黄酮的测定分别精密量取供试品溶液5ml置25ml容量瓶中，照标准曲线方法进行测定，显色，在500nm波长处处测定A值，另精密量取供试品溶液5ml置25ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，在500nm波长处处测定A值，取两次吸收度差值，按回归方程计算总黄酮含量。结果见表1。

           表1  制剂中总黄酮(以无水芦丁计)含量测定

批次	含量(mg/支)
			复方蒲公英注射液	本发明复方蒲公英冻干粉针剂
	123	20.018.518.0			45.043.045.4

2、复方蒲公英制剂中绿原酸的含量测定

参照文献(凌云等，HPLC法测定蒲公英中绿原酸的含量.中草药.1998，29(8)：521-522)方法进行测定，结果见表2。

               表2  制剂中绿原酸含量测定

批次	含量(mg/支)
			复方蒲公英注射液	本发明复方蒲公英冻干粉针剂
	123	0.540.520.51			0.760.870.71

3、复方蒲公英制剂中咖啡酸的含量测定

参照《中国药典》2000版一部蒲公英药材项下咖啡酸的含量测定方法进行测定，结果见表3。

                表3  制剂中咖啡酸含量测定

批次	含量(mg/支)
			复方蒲公英注射液	本发明复方蒲公英冻干粉针剂
	123	0.230.200.21			0.310.280.30

以上含量测定结果说明，本发明的复方蒲公英冻干粉针剂中的总黄酮和绿原酸、咖啡酸含量明显高于复方蒲公英注射液的总黄酮和绿原酸、咖啡酸含量。说明本发明的制备方法更加合理，更加科学，更具有实用性。

4、提取物中总黄酮和绿原酸、咖啡酸的含量测定

测定仪器、试药及方法同上。本发明复方蒲公英提取物按本发明的制备方法所得；复方蒲公英注射液提取物(按照复方蒲公英注射液中的制法制备所得)；结果见表4、5、6。

                 表4  提取物中总黄酮(以无水芦丁计)含量测定

批次	含量(％)
			复方蒲公英注射液提取物	本发明复方蒲公英冻干粉针剂提取物
	123	21.022.520.8			40.545.638.1

                            表5  提取物中绿原酸含量测定

批次	含量(％)
			复方蒲公英注射液提取物	本发明复方蒲公英冻干粉针剂提取物
	123	0.460.480.45			0.750.610.58

                      表6  提取物中咖啡酸含量测定

批次	含量(％)
			复方蒲公英注射液提取物	本发明复方蒲公英冻干粉针剂提取
	123	0.240.220.22			0.320.360.41

以上含量测定结果说明，本发明的制备方法得到的复方蒲公英提取物中的有效成分总黄酮和绿原酸、咖啡酸的百分含量明显高于复方蒲公英注射液提取物中的总黄酮和绿原酸、咖啡酸的百分含量。说明本发明的制备方法制得的提取物纯度更高，工艺更加合理、科学。

三、药理实施例

试药；生理盐水(广东天之骄药物开发有限公司实验室提供)

复方蒲公英注射液(江西钟山药业有限责任公司)

本发明复方蒲公英冻干粉针剂(北京乾露春科技有限公司实验室提供)。

动物：新西兰白兔，体重1000-1250g雌雄各半；昆明种小鼠，体重18-22g，雌雄各半，大鼠，体重180-220g，雌雄各半。

细菌：肺炎链球菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌及福氏志贺菌由北京中医药大学提供。

1.抑菌试验

将肺炎链球菌(10¹⁰个/ml)、大肠埃希菌(10⁵个/ml)、金黄色葡萄球菌(10⁵个/ml)、绿脓假单胞菌(10⁵个/ml)及福氏志贺菌(10⁵个/ml)，分别涂布于厚约6mm的药皿平板上，然后在其中打成直径约6mm的孔若干。加满复方蒲公英冻干粉溶液和复方蒲公英注射液，37℃培养24小时，观察抑菌圈大小，结果见表7。

                              表7  抑菌实验结果

细菌	复方蒲公英注射液(mm)	本发明复方蒲公英冻干粉针剂(mm)
			肺炎链球菌(1010个/ml)大肠埃希菌(105个/ml)金黄色葡萄球菌(105个/ml)绿脓假单胞菌(105个/ml)福氏志贺菌(105个/ml)	97778	1513141315

本发明复方蒲公英冻干粉针剂和复方蒲公英注射液均能对以上细菌形成一定直径的抑菌圈，显示有较强的抑菌作用，但本发明复方蒲公英冻干粉针剂的抑菌作用明显比复方蒲公英注射液强。

2.解热试验：

选取健康新西兰白兔35只，体重为1000-1250g，雌雄各半，实验当日测肛温3次，取平均值作为正常体温，然后于背部皮下注射5％酵母悬液5ml/kg，5小时后选择体温上升0.8℃以上的新西兰白兔30只，随机分为空白对照组，复方蒲公英注射液组、本发明复方蒲公英冻干粉针剂组，每组动物10只。腹腔注射给药，给药剂量为2g生药/kg(容量为1ml)，空白对照组给予等容量生理盐水。给药后分别于1、2、3小时各测体温1次，比较各组动物体温下降值的差异，结果见表8。

                                                       表8  对新西兰白兔的解热作用

组别	正常体温(℃)	致热后5h体温(℃)	体温下降值(℃)
						1	2	3
			对照组复方蒲公英注射液本发明复方蒲公英冻干粉针剂	39.26±0.1639.20±0.1739.25±0.20	40.30±0.3540.21.±0.3140.27±0.36				0.04±0.090.27±0.100.55±0.18*	0.132±0.080.55±0.14*0.92±0.12**	0.34±0.150.70±0.16*0.95±0.21**

注：与生理盐水组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01

结论：以上实验结果表明本发明复方蒲公英冻干粉针剂具有比更好的解热作用。

3、镇咳试验

取小鼠30只，雌雄各半，随机分为3组，分组及给药方法同2，给药量为4g生药/kg(容量为0.2ml)，给药后75min将小鼠分别置于1L烧杯中，给予30％氨水雾化喷雾5s，观察并记录其首次咳嗽出现潜伏期和2min内次数，结果如表9。

               表9  对小鼠镇咳痛试验结果(X±SD)

组别	潜伏期时间(s)	咳嗽次数
			对照组复方蒲公英注射液本发明复方蒲公英冻干粉针剂	14.08±14.2848.12±3.80*57.50±4.60**	14.25±8.87.50±2.6*3.67±3.3**

注：与对照组比较：^*P＜0.05^**P＜0.01

4.镇痛试验

4.1对小鼠热板致痛作用的影响

取雌性小鼠30只，随机分为3组，即空白对照组、复方蒲公英注射液组、本发明复方蒲公英粉针剂组，空白对照组0.2ml生理盐水腹腔注射，给药组腹腔注射2g生药/kg，连续给药3天，末次给药后1h将各鼠分别固定于55±0.5℃的热板仪中，以舔后足作为“疼痛”的反应指标，观察给药后小鼠对热板痛的反应时间，结果见表10：

4.2对醋酸引起的扭体反应的影响

取小鼠30只，雌雄各半，分组及给药方法同4.1，连续给药3天，末次给药后1h，腹腔注射0.6％醋酸溶液0.2ml/20g体重，观察10min内的小鼠扭体次数，结果见表10：

                  表10  镇痛试验结果(X±SD)

组别	热板痛反应时间(s)	扭体次数
			对照组复方蒲公英注射液本发明复方蒲公英冻干粉针剂	11.0±4.314.8±3.9*18.6±4.7**	28.4±3.92.9±2.5*16.4±3.2**

注：与对照组比较：^*P＜0.05^**P＜0.01

试验结果表明本发明复方蒲公英粉针剂的镇痛作用比复方蒲公英注射液更为显著。

5.抗炎试验

5.1对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的影响

分别取大鼠30只，雌雄各半，分成对照组、复方蒲公英注射液组及本发明复方蒲公英冻干粉针剂组，空白对照组0.2ml生理盐水腹腔注射，给药组腹腔注射1.5g生药/kg，给药后立即向大鼠足趾注射0.1ml 1％的角叉菜胶溶液，1小时后测定大鼠足趾肿胀体积，并计算抑制肿胀体积百分率，结果见表11：

       表11  抗炎试验结果(X±SD)

组别	抑制率
		对照组复方蒲公英注射液本发明复方蒲公英冻干粉针剂	3.10±0.938.5±4.5**57.0±5.2**Δ

注：^**与对照组比较^*P＜0.01，与复方蒲公英注射液组比较^ΔP＜0.05

5.2对小鼠耳二甲苯致炎的影响：

取小鼠30只，雌雄各半，分组及给药方法同4.1，于末次给药后30min，将二甲苯0.02ml涂于小鼠左耳，1h后脱臼处死小鼠，剪下二耳，打孔称重，以左耳与右耳片重量差值为肿胀度，结果见表12。

              表12  对小鼠耳二甲苯致炎的影响结果(X±SD)

组别	肿胀度差值(mg)	抑制率(％)
			对照组复方蒲公英注射液组本发明复方蒲公英冻干粉针剂	7.9±1.44.1±1.13.2±1.0	48.1±5.3**59.5±6.0**Δ

注：与对照组比较：^**P＜0.01，与复方蒲公英注射液组比较^ΔP＜0.05

结果表明本发明的复方蒲公英冻干粉针剂抗炎作用明显好于复方蒲公英注射液。

六、制备实施例

实施例1：

(1)原料药的处方为：蒲公英1000g，鱼腥草1000g，野菊花1000g。

(2)取鱼腥草、野菊花药材，加水浸泡1小时，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，将收集的挥发油缓慢加入HP-β-CD饱和水溶液中，50℃-60℃保温条件下搅拌2小时，室温下继续搅拌3小时，冷藏过夜，过滤，真空干燥得到包合物15g。

(3)蒲公英和鱼腥草、野菊花药渣再加倍量的水提取2次，每次1小时；合并两次煎煮液，静置，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.24的浸膏，加乙醇使含醇量达60％，静置12小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水稀释至溶液∶药材为1∶1，药液过已处理好的大孔吸附树脂柱，先用3倍柱体积的水洗脱后，再用4倍量柱体积70％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加水稀释至溶液∶药材为1∶0.5，用截留分子量为5000的超滤膜进行超滤，超滤液减压浓缩并真空干燥，粉碎，得到提取物65g。

(4)制剂处方为：挥发油包合物15g，提取物65g，甘露醇40g。

(5)取上述挥发油包合物、提取物加注射用水溶解，滤过，加入甘露醇，加注射用水至规定量，调节pH值至7.0-7.5，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得500支。

实施例2：

(1)原料药的处方为：蒲公英1000g，鱼腥草1000g，野菊花1000g。

(2)取鱼腥草、野菊花药材，加水浸泡1小时，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，将收集的挥发油缓慢加入HP-β-CD饱和水溶液中，50℃-60℃保温条件下搅拌3小时，室温下继续搅拌3小时，冷藏过夜，过滤，真空干燥得到包合物20g。

(3)蒲公英和鱼腥草、野菊花药渣再加8倍量的水提取2次，每次1小时；合并两次煎煮液，静置，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.24的浸膏，加乙醇使含醇量达65％，静置12小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水稀释至溶液∶药材为1∶1，药液过已处理好的大孔吸附树脂柱，先用4倍柱体积的水洗脱后，再用5倍量柱体积60％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加水稀释至溶液∶药材为1∶0.5，用截留分子量为10000的超滤膜进行超滤，超滤液减压浓缩并真空干燥，粉碎，得到提取物70g。

(4)制剂处方为：挥发油包合物20g，提取物70g，右旋糖酐60g。

(5)取上述挥发油包合物、提取物加注射用水溶解，滤过，加入右旋糖酐，加注射用水至规定量，调节pH值至7.0-7.5，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得500支。

实施例3：

(1)原料药的处方为：蒲公英1000g，鱼腥草1000g，野菊花1000g。

(2)取鱼腥草、野菊花药材，加水浸泡1小时，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，将收集的挥发油缓慢加入HP-β-CD饱和水溶液中，50℃-60℃保温条件下搅拌4小时，室温下继续搅拌3小时，冷藏过夜，过滤，真空干燥得到包合物25g。

(3)蒲公英和鱼腥草、野菊花药渣再加10倍量的水提取2次，每次1小时；合并两次煎煮液，静置，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.24的浸膏，加乙醇使含醇量达70％，静置12小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水稀释至溶液∶药材为1∶1，药液过已处理好的大孔吸附树脂柱，先用5倍柱体积的水洗脱后，再用6倍量柱体积50％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加水稀释至溶液∶药材为1∶0.5，用截留分子量为20000的超滤膜进行超滤，超滤液减压浓缩并真空干燥，粉碎，得到提取物80g。

(4)制剂处方为；挥发油包合物25g，提取物80g，乳糖35g。

(5)取上述挥发油包合物、提取物加注射用水溶解，滤过，加入乳糖，加注射用水至规定量，调节pH值至7.0-7.5，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得500支。

实施例4：

(1)原料药的处方为：蒲公英800g，鱼腥草800g，野菊花800g。

(2)取鱼腥草、野菊花药材，加水浸泡1小时，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，将收集的挥发油缓慢加入HP-β-CD饱和水溶液中，50℃-60℃保温条件下搅拌3小时，室温下继续搅拌3小时，冷藏过夜，过滤，真空干燥得到包合物10g。

(3)蒲公英和鱼腥草、野菊花药渣再加8倍量的水提取2次，每次1小时；合并两次煎煮液，静置，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.24的浸膏，加乙醇使含醇量达70％，静置12小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水稀释至溶液∶药材为1∶1，药液过已处理好的大孔吸附树脂柱，先用4倍柱体积的水洗脱后，再用5倍量柱体积50％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加水稀释至溶液∶药材为1∶0.5，用截留分子量为10000的超滤膜进行超滤，超滤液减压浓缩并真空干燥，粉碎，得到提取物50g。

(4)制剂处方为：挥发油包合物10g，提取物50g，甘露醇40g，乳糖20g。

(5)取上述挥发油包合物、提取物加注射用水溶解，滤过，加入药用辅料，加注射用水至规定量，调节pH值至7.0-7.5，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得500支。

实施例5：

(1)原料药的处方为：蒲公英1200g，鱼腥草1200g，野菊花1200g。

(2)取鱼腥草、野菊花药材，加水浸泡1小时，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，将收集的挥发油缓慢加入HP-β-CD饱和水溶液中，50℃-60℃保温条件下搅拌2小时，室温下继续搅拌3小时，冷藏过夜，过滤，真空干燥得到包合物30g。

(3)蒲公英和鱼腥草、野菊花药渣再加10倍量的水提取2次，每次1小时；合并两次煎煮液，静置，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.24的浸膏，加乙醇使含醇量达60％，静置12小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水稀释至溶液∶药材为1∶1，药液过已处理好的大孔吸附树脂柱，先用3倍柱体积的水洗脱后，再用6倍量柱体积55％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加水稀释至溶液∶药材为1∶0.5，用截留分子量为10000的超滤膜进行超滤，超滤液减压浓缩并真空干燥，粉碎，得到提取物100g。

(4)制剂处方为：挥发油包合物30g，提取物100g，葡萄糖30g。

(5)取上述挥发油包合物、提取物加注射用水溶解，滤过，加入葡萄糖，加注射用水至规定量，调节pH值至7.0-7.5，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得500支。

Claims (2)

1、一种复方蒲公英冻干粉针剂，其特征在于它是由鱼腥草、野菊花提取的挥发油的HP-β-CD包合物1-3重量份，蒲公英、鱼腥草、野菊花提取物5-10重量份和适宜药用辅料制备而成；其特征还在于提取物中总黄酮含量为35％-50％，绿原酸含量为0.5％-0.8％，咖啡酸含量为0.3％-0.5％。

2、根据权利要求1的复方蒲公英冻干粉针剂的制备方法，其特征包括以下步骤：

(1)原料药重量份组成为：蒲公英8-12份，鱼腥草8-12份，野菊花8-12份。

(2)取鱼腥草、野菊花药材，加水浸泡1小时，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，将收集的挥发油缓慢加入HP-β-CD饱和水溶液中，50℃-60℃保温条件下搅拌2-4小时，室温下继续搅拌3小时，冷藏过夜，过滤，真空干燥得到包合物。

(3)蒲公英和鱼腥草、野菊花药渣再加6-10倍量的水提取2次，每次1小时；合并两次煎煮液，静置，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20-1.24的浸膏，加乙醇使含醇量达60％-70％，静置12小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水稀释至溶液∶药材为1∶1，药液过已处理好的大孔吸附树脂柱，先用3-5倍柱体积的水洗脱后，再用4-6倍量柱体积40％-70％乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加水稀释至溶液∶药材为1∶0.5，用截留分子量为5000-20000的超滤膜进行超滤，超滤液减压浓缩并真空干燥，粉碎，得到提取物。

(4)取上述包合物、提取物加注射用水溶解，滤过，加入药用辅料，加注射用水至规定量，调节pH值至7.0-7.5，微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。