CN105223282A - 一种高效液相色谱梯度法测定醋酸阿比特龙有关物质的方法 - Google Patents
一种高效液相色谱梯度法测定醋酸阿比特龙有关物质的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105223282A CN105223282A CN201410298697.5A CN201410298697A CN105223282A CN 105223282 A CN105223282 A CN 105223282A CN 201410298697 A CN201410298697 A CN 201410298697A CN 105223282 A CN105223282 A CN 105223282A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- abiraterone
- mobile phase
- abiraterone acetate
- solution
- ratio
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种高效液相色谱梯度法测定醋酸阿比特龙待测样品中有关物质的方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：(1)制备标准品溶液，并以所述标准品溶液进行系统适用性试验，检定检测系统；(2)供试品溶液和对照品溶液的制备；(3)通过高效液相色谱测定待测样品中有关物质的含量；(4)计算待测样品中各杂质的含量。
Description
技术领域
本发明涉及醋酸阿比特龙及中间体有关物质的分析方法，特别是一种醋酸阿比特龙有关物质的高效液相色谱梯度法测定方法，属于药物合成分析领域。
背景技术
醋酸阿比特龙是一种CYP17抑制剂，临床适用于与泼尼松联用为治疗既往接受含多烯紫杉醇化疗转移去势难治性前列腺癌患者。分子式为C26H33NO2，分子量为391.55，化学名称为(3β)-17-(3-吡啶基)-雄甾-5,16-二烯-3-醇醋酸酯。醋酸阿比特龙主要杂质有6种，其在醋酸阿比特龙合成过程中生成，在原料和制剂储藏过程中也主要产生阿比特龙和阿比特龙环氧化物杂质，而阿比特龙和阿比特龙环氧化物两种杂质之间结构和极性相似，用一般的方法难于完全分离，本法通过系列的科学试验采用普通的C18柱和常规的试剂快速准确地实现了醋酸阿比特龙有关物质的测定，特别是能使阿比特龙和阿比特龙环氧化物完全分离，从而实现了醋酸阿比特龙原料、中间体及制剂的杂质的控制，保证了醋酸阿比特龙原料及制剂的质量可控，具有现实的意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种高效液相色谱梯度法测定醋酸阿比特龙、醋酸阿比特龙粗品和醋酸阿比特龙制剂有关物质的方法。本发明的高效液相色谱梯度法不仅可对杂质，如酮类杂质、乙酰化阿比特龙、消除产物和双甾体杂质进行准确测定，还可对阿比特龙和阿比特龙环氧化物等杂质进行准确测定。
本发明的技术方案为：
一种高效液相色谱梯度法测定醋酸阿比特龙待测样品中有关物质的方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：
(1)制备标准品溶液，以所述标准品溶液在下述色谱条件下进行系统适用性试验，检定检测系统；
色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以有机相为流动相B，以缓冲液和流动相B的混合物为流动相A，梯度洗脱，柱温为30～40℃，优选40℃，流速为1.1～1.3ml/min，优选1.2ml/min，检测波长为254nm；
标准品溶液的制备：分别取杂质酮类、阿比特龙、阿比特龙环氧化物、消除产物、双甾体杂质及醋酸阿比特龙对照品，精密称定，加溶剂[甲醇-乙腈(体积比为50:50)]制成每1ml中分别含酮类、阿比特龙、阿比特龙环氧化物、消除产物和双甾体杂质各0.01mg及醋酸阿比特龙1mg的混合溶液；精密量取10μl所述混合溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，校定检测系统至醋酸阿比特龙主峰与相邻杂质峰及杂质与杂质峰的分离度应大于1.5，理论板数按醋酸阿比特龙计算应不低于20000；
(2)供试品溶液和对照品溶液的制备
取醋酸阿比特龙待测样品，加溶剂[甲醇-乙腈(体积比为50:50)]制成每1ml中含1mg的溶液，作为供试品溶液；取醋酸阿比特龙对照品，加溶剂[甲醇-乙腈(体积比为50:50)]制成每1ml中含0.01mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)通过高效液相色谱测定待测样品中有关物质的含量
以对照品溶液注入经上述步骤(1)校定后的液相色谱仪，调节检测灵敏度，再将供试品溶液注入液相色谱仪，在步骤(1)所述的色谱条件下进行高效液相色谱，记录色谱图至约醋酸阿比特龙主峰保留时间的2.5倍，按外标法以对照品溶液主峰面积计算，供试品溶液中酮类、阿比特龙、阿比特龙环氧化物、消除产物和双甾体杂质不得过0.1％，总杂质不得过1.0％；
(4)计算待测样品中各杂质的含量。
进一步地，所述杂质中酮类的结构式为阿比特龙环氧化物的结构式为消除产物的结构式为双甾体杂质的结构式为
进一步地，步骤(1)所述梯度洗脱中，流动相A比例的变化范围为于0～30分钟，线性梯度洗脱，流动相A的比例从100％变化为20％，流动相B的比例从0％变化为80％，于30～40分钟，线性梯度洗脱，流动相A的比例从20％变化为0％，流动相B的比例从80％变化为100％，于40～45分钟，等度洗脱，流动相A的比例保持0％不变，流动相B的比例保持100％不变，于45～46分钟，线性梯度洗脱，流动相A的比例从0％变化为100％，流动相B的比例从100％变化为0％，于46至52分钟，流动相A和B回到初始比例，色谱柱重新平衡。
进一步地，步骤(1)所述的流动相B为甲醇和乙腈的混合物，甲醇与乙腈的比例为体积比10～40∶90～60。
进一步地，步骤(1)所述流动相A的缓冲液与流动相B的比例为体积比50～70∶50～30。其中，所述缓冲液由水、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、磷酸氢二铵、醋酸铵、碳酸氢铵、柠檬酸钠、甲酸铵中的一种或几种组成，浓度为0.005mol/L～0.1mol/L。
本发明所述醋酸阿比特龙待测样品包括醋酸阿比特龙粗品、醋酸阿比特龙原料、醋酸阿比特龙片剂和醋酸阿比特龙片加速样品。本发明能有效地测定醋酸阿比特龙待测样品中的有关物质，特别是分解产物阿比特龙和阿比特龙环氧化物，方法简单快速，分析灵敏度好，重复性和重现性良好。结果准确可靠，可用于醋酸阿比特龙及含有醋酸阿比特龙药物的质量控制，具有现实意义。
附图说明
图1是醋酸阿比特龙与杂质：酮类、阿比特龙、阿比特龙环氧化物、消除产物、双甾体杂质的分离图。
其中，1为酮类，2为阿比特龙，3为阿比特龙环氧化物，4为醋酸阿比特龙，5为消除产物，6为双甾体杂质。
图2是醋酸阿比特龙粗品供试品溶液图的色谱图(批号：20120801)。
图3是醋酸阿比特龙原料供试品溶液图的色谱图(批号：20130301)。
图4是醋酸阿比特龙片剂加速6个月供试品溶液图的色谱图(批号：20130601)。
具体实施方式
以下实施例中使用的材料和试剂，除特殊说明，均为普通市售。
仪器：Agilent1260系列高效液相色谱仪
试剂：醋酸铵(分析纯)，甲醇(色谱纯，Merk公司)，乙腈(色谱纯，Merk公司)
色谱柱：沃特斯XBridgeShieldRPC18柱(150×4.6mm，5μm)
对照品的来源
醋酸阿比特龙：自制，纯度：99.5％，批号：20120601，制备方法：取醋酸阿比特龙原料经乙醇-水重结晶，干燥，即得。
阿比特龙：自制，纯度：98.9％，批号：20120611，制备方法：参考文献MichaelJarman,S.ElaineBarrie,andJoseM.Llera.The16,17-DoubleBondIsNeededforIrreversibleInhibitionofHumanCytochromeP45017αbyAbiraterone(17-(3-Pyridyl)androsta-5,16-dien-3β-ol)andRelatedSteroidalInhibitors.J.Med.Chem.1998,41,5375-5381.制得。
阿比特龙环氧化物：自制，纯度：99.3％，批号：20120607，制备方法：参考文献MichaelJarman,S.ElaineBarrie,andJoseM.Llera.The16,17-DoubleBondIsNeededforIrreversibleInhibitionofHumanCytochromeP45017αbyAbiraterone(17-(3-Pyridyl)androsta-5,16-dien-3β-ol)andRelatedSteroidalInhibitors.J.Med.Chem.1998,41,5375-5381.制得。
消除产物：自制，纯度：98.8％，批号：20120521，制备方法：参考文献“MichaelJarman,S.ElaineBarrie,andJoseM.Llera.The16,17-DoubleBondIsNeededforIrreversibleInhibitionofHumanCytochromeP45017αbyAbiraterone(17-(3-Pyridyl)androsta-5,16-dien-3β-ol)andRelatedSteroidalInhibitors.J.Med.Chem.1998,41,5375-5381.”制得。
酮类杂质：来源：SiopharmaAnalytics&SyntheticsLtd.，批号：SIO/ABTN/13081506
双甾体杂质：来源：SiopharmaAnalytics&SyntheticsLtd.，批号：SIO/ABTN/13082808
醋酸阿比特龙粗品和原料：参照公开号为CN101044155A，名称为《阿比特龙头3-酯的甲磺酸盐以及从甲基·叔丁基醚溶液中回收阿比特龙-3-酯的甲磺酸盐》的方法制得。
醋酸阿比特龙片剂：参照公开号为CN102743393A，名称为《一种含有醋酸阿比特龙的药物组合物及制备工艺》的方法制得。
【实施例1】高效液相色谱条件的筛选
1色谱条件与系统适用性试验
1.1流动相的选择
参考相关文献并结合实验的具体情况，以阿比特龙和阿比特龙环氧化物的分离度作为关键评价指标，对流动相B甲醇和乙腈的比例及流动相A不同缓冲盐的组成进行了选择，最后确定以甲酸铵-流动相B(体积比60∶40)为流动相A，以甲醇-乙腈(体积比45∶55)为流动相B，照下表1进行梯度洗脱，流动相的选择结果见下表2。
表1.流动相与洗脱时间
| 时间(分钟) | 流动相A(％) | 流动相B(％) |
| 0～30 | 100→20 | 0～80 |
| 30～40 | 20→0 | 80→100 |
| 40～45 | 0 | 100 |
| 45～46 | 0→100 | 100→0 |
| 46～52 | 100 | 0 |
表2.流动相选择结果
1.2色谱柱的选择
选用不同品牌、不同型号的色谱柱，以阿比特龙和阿比特龙环氧化物的分离度作为关键评价指标，最后确定采用沃特斯XBridgeShieldRPC18柱(150×4.6mm，5μm)。色谱柱选择结果见表3。
表3.色谱柱选择结果
1.3柱温的选择
选择柱温分别为30℃、35℃、40℃和45℃，以阿比特龙和阿比特龙环氧化物的分离度作为关键评价指标，最后确定采用40℃。柱温选择结果见表4。
表4.柱温选择结果
1.4仪器和流速
Agilent1260系列，DAD检测器；流速为1.0ml/min。
1.5灵敏度的测定
取醋酸阿比特龙供试品适量，精密称定，用溶剂[甲醇-乙腈(体积比50:50)]制成每1ml中含1mg的溶液，作为供试品溶液。再分别用溶剂[甲醇-乙腈(体积比50:50)]稀释制成一系列不同浓度的溶液，分别进样10μl，使之产生主峰为基线噪音三倍的信号。经度验，最小检知量为0.2ng，若以有关物质检查时的浓度1mg/ml计算，其检出限度为0.2‰。
1.6溶液稳定性
取同一份供试品溶液，分别于0、1、2、4、6、8、10、12小时分别进样测定，其主峰面积和有关物质测定结果在12小时内保持稳定。
上述结果表明，此方法简单快速，重现性好，可准确测定醋酸阿比特龙待测样品中的有关物质，特别是阿比特龙和阿比特龙环氧化物，能较好地控制产品的质量。
色谱条件的确定：经上述选择试验，确定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶(150×4.6mm，5μm)为填充剂，以甲酸铵-流动相B(体积比60∶40)为流动相A，以甲醇-乙腈(体积比45∶55)为流动相B，梯度洗脱，柱温为40℃，流速为1.2ml/min，检测波长为254nm；其中所述的梯度洗脱中，流动相A比例的变化范围为于0～30分钟，线性梯度洗脱，流动相A的比例从100％变化为20％，流动相B的比例从0％变化为80％，于30～40分钟，线性梯度洗脱，流动相A的比例从20％变化为0％，流动相B的比例从80％变化为100％，于40～45分钟，等度洗脱，流动相A的比例保持0％不变，流动相B的比例保持100％不变，于45～46分钟，线性梯度洗脱，流动相A的比例从0％变化为100％，流动相B的比例从100％变化为0％，于46至52分钟，流动相A和B回到初始比例，色谱柱重新平衡。
1.7系统适用性试验
分别取酮类、阿比特龙、阿比特龙环氧化物、消除产物、双甾体杂质及醋酸阿比特龙对照品，精密称定，加溶剂[甲醇-乙腈(体积比50:50)]制成每1ml中分别含酮类、阿比特龙、阿比特龙环氧化物、消除产物和双甾体杂质各0.01mg及醋酸阿比特龙1mg的混合溶液；精密量取10μl所述混合溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，醋酸阿比特龙主峰与相邻杂质峰及杂质与杂质峰的分离度应大于1.5，理论板数按醋酸阿比特龙计算应不低于20000。如附图1所示。
2供试品溶液的制备
取醋酸阿比特龙待测样品，加溶剂[甲醇-乙腈(体积比50:50)]制成每1ml中含1mg的溶液，作为供试品溶液。
3对照品溶液的制备
取醋酸阿比特龙对照品，加溶剂[甲醇-乙腈(体积比50:50)]制成每1ml中含0.01mg的溶液，作为对照品溶液。
4测定法
精密量取对照品溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成份色谱峰的峰高约为满量程的20～25％，再精密量取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图至醋酸阿比特龙主峰保留时间的2.5倍，供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按外标法以对照品溶液主峰面积计算，供试品溶液中酮类、阿比特龙、阿比特龙环氧化物、消除产物和双甾体杂质不得过0.1％，总杂质不得过1.0％。
【实施例2】醋酸阿比特龙粗品的测定取醋酸阿比特龙粗品适量，精密称定，加溶剂[甲醇-乙腈(体积比为50:50)]制成每1ml中含1mg的溶液，作为供试品溶液。取醋酸阿比特龙对照品适量，精密称定，加溶剂[甲醇-乙腈(体积比为50:50)]制成每1ml中含0.01mg的溶液，作为对照品溶液。在下列选定的色谱条件下：沃特斯XBridgeShieldRPC18柱(150×4.6mm，5μm)柱，以甲酸铵缓冲液-流动相B(60∶40)为流动相A，以甲醇-乙腈(45∶55)为流动相B，照下表5进行梯度洗脱，柱温为40℃，流速为1.2ml/min，检测波长为254nm。醋酸阿比特龙主峰与相邻杂质峰及杂质与杂质峰的分离度应大于1.5，理论板数按醋酸阿比特龙计算应不低于20000。精密量取对照品溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成份色谱峰的峰高约为满量程的20～25％，再精密量取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图至醋酸阿比特龙主峰保留时间的2.5倍，供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按外标法以对照品溶液主峰面积计算，供试品溶液中酮类、阿比特龙、阿比特龙环氧化物、消除产物和双甾体杂质不得过0.1％，总杂质不得过1.0％。分别对三个批次(20120801、20120901、20121001)的醋酸阿比特龙粗品进行测定，结果见下表6，图谱见附图2所示。
表5.流动相与洗脱时间
| 时间(分钟) | 流动相A(％) | 流动相B(％) |
| 0～30 | 100→20 | 0～80 |
| 30～40 | 20→0 | 80→100 |
| 40～45 | 0 | 100 |
| 45～46 | 0→100 | 100→0 |
| 46～52 | 100 | 0 |
表6.醋酸阿比特龙粗品有关物质测定结果
| 批号 | 20120801 | 20120901 | 20121001 |
| 酮类(％) | 0.01 | 0.01 | 0.02 |
| 阿比特龙(％) | 0.21 | 0.15 | 0.18 |
| 阿比特龙环氧化物(％) | 0.03 | 0.05 | 0.04 |
| 消除产物(％) | 0.16 | 0.17 | 0.17 |
| 双甾体杂质(％) | 0.02 | 0.03 | 0.04 |
| 其它杂质(％) | 0.15 | 0.15 | 0.10 |
| 总杂质(％) | 0.58 | 0.56 | 0.55 |
【实施例3】醋酸阿比特龙原料的测定
取醋酸阿比特龙原料适量，精密称定，加溶剂[甲醇-乙腈(体积比为50:50)]制成每1ml中含1mg的溶液，作为供试品溶液。取醋酸阿比特龙对照品适量，精密称定，加溶剂[甲醇-乙腈(体积比为50:50)]制成每1ml中含0.01mg的溶液，作为对照品溶液。在下列选定的色谱条件下：沃特斯XBridgeShieldRPC18柱(150×4.6mm，5μm)柱，以甲酸铵-流动相B(60∶40)为流动相A，以甲醇-乙腈(45∶55)为流动相B，照下表7进行梯度洗脱，柱温为40℃，流速为1.2ml/min，检测波长为254nm。醋酸阿比特龙主峰与相邻杂质峰及杂质与杂质峰的分离度应大于1.5，理论板数按醋酸阿比特龙计算应不低于20000。精密量取对照品溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成份色谱峰的峰高约为满量程的20～25％，再精密量取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图至醋酸阿比特龙主峰保留时间的2.5倍，供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按外标法以对照品溶液主峰面积计算，供试品溶液中酮类、阿比特龙、阿比特龙环氧化物、消除产物和双甾体杂质不得过0.1％，总杂质不得过1.0％。分别对三个批次(20130201、20130301、20130401)的醋酸阿比特龙原料进行测定，结果见下表8，图谱见附图3所示。
表7.流动相与洗脱时间
| 时间(分钟) | 流动相A(％) | 流动相B(％) |
| 0～30 | 100→20 | 0～80 |
| 30～40 | 20→0 | 80→100 |
| 40～45 | 0 | 100 |
| 45～46 | 0→100 | 100→0 |
| 46～52 | 100 | 0 |
表8.醋酸阿比特龙原料有关物质测定结果
| 批号 | 20130201 | 20130301 | 20130401 |
| 酮类(％) | 0 | 0 | 0 |
| 阿比特龙(％) | 0.04 | 0.03 | 0.05 |
| 阿比特龙环氧化物(％) | 0.03 | 0.05 | 0.03 |
| 消除产物(％) | 0.05 | 0.02 | 0.04 |
| 双甾体杂质 | 0 | 0 | 0 |
| 其它杂质(％) | 0 | 0 | 0 |
| 总杂质(％) | 0.12 | 0.10 | 0.12 |
【实施例4】醋酸阿比特龙片剂0天的测定
取醋酸阿比特龙片剂细粉0天适量，精密称定，加溶剂[甲醇-乙腈(体积比为50:50)]制成每1ml中含醋酸阿比特龙1mg的溶液，作为供试品溶液。取醋酸阿比特龙对照品适量，精密称定，加溶剂[甲醇-乙腈(体积比为50:50)]制成每1ml中含0.01mg的溶液，作为对照品溶液。在下列选定的色谱条件下：沃特斯XBridgeShieldRPC18柱(150×4.6mm，5μm)柱，以甲酸铵-流动相B(60∶40)为流动相A，以甲醇-乙腈(45∶55)为流动相B，照下表9进行梯度洗脱，柱温为40℃，流速为1.2ml/min，检测波长为254nm。醋酸阿比特龙主峰与相邻杂质峰及杂质与杂质峰的分离度应大于1.5，理论板数按醋酸阿比特龙计算应不低于20000。精密量取对照品溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成份色谱峰的峰高约为满量程的20～25％，再精密量取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图至醋酸阿比特龙主峰保留时间的2.5倍，供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按外标法以对照品溶液主峰面积计算，供试品溶液中酮类、阿比特龙、阿比特龙环氧化物、消除产物和双甾体杂质不得过0.1％，总杂质不得过1.0％。分别对三个批次(20130402、20130403、20130404)的醋酸阿比特龙片剂0天样品进行测定，结果见下表10，
表9.流动相与洗脱时间
| 时间(分钟) | 流动相A(％) | 流动相B(％) |
| 0～30 | 100→20 | 0～80 |
| 30～40 | 20→0 | 80→100 |
| 40～45 | 0 | 100 |
| 45～46 | 0→100 | 100→0 |
| 46～52 | 100 | 0 |
表10.醋酸阿比特龙片剂0天有关物质测定结果
| 批号 | 20130402 | 20130403 | 20130404 |
| 酮类(％) | 0 | 0 | 0 |
| 阿比特龙(％) | 0.04 | 0.05 | 0.04 |
| 阿比特龙环氧化物(％) | 0.05 | 0.04 | 0.05 |
| 消除产物(％) | 0.03 | 0.04 | 0.05 |
| 双甾体杂质 | 0 | 0 | 0 |
| 其它杂质(％) | 0 | 0 | 0 |
| 总杂质(％) | 0.10 | 0.13 | 0.14 |
【实施例5】醋酸阿比特龙片剂加速6个月样品的测定
取醋酸阿比特龙片剂加速6个月样品(40℃±2℃，湿度75％±5，加速6个月的样品)细粉适量，精密称定，加溶剂[甲醇-乙腈(体积比为50:50)]制成每1ml中含醋酸阿比特龙1mg的溶液，作为供试品溶液。取醋酸阿比特龙对照品适量，精密称定，加溶剂[甲醇-乙腈(体积比为50:50)]制成每1ml中含0.01mg的溶液，作为对照品溶液。在下列选定的色谱条件下：沃特斯XBridgeShieldRPC18柱(150×4.6mm，5μm)柱，以甲酸铵-流动相B(60∶40)为流动相A，以甲醇-乙腈(45∶55)为流动相B，照下表11进行梯度洗脱，柱温为40℃，流速为1.2ml/min，检测波长为254nm。醋酸阿比特龙主峰与相邻杂质峰及杂质与杂质峰的分离度应大于1.5，理论板数按醋酸阿比特龙计算应不低于20000。精密量取对照品溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成份色谱峰的峰高约为满量程的20～25％，再精密量取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图至醋酸阿比特龙主峰保留时间的2.5倍，供试品溶液色谱图中如有杂质峰，按外标法以对照品溶液主峰面积计算，供试品溶液中酮类、阿比特龙、阿比特龙环氧化物、消除产物和双甾体杂质不得过0.1％，总杂质不得过1.0％。分别对三个批次(20130601、20130701、20130702)的醋酸阿比特龙片剂加速6个月样品进行测定，结果见下表12，图谱见附图4所示。
表11.流动相与洗脱时间
| 时间(分钟) | 流动相A(％) | 流动相B(％) |
| 0～30 | 100→20 | 0～80 |
| 30～40 | 20→0 | 80→100 |
| 40～45 | 0 | 100 |
| 45～46 | 0→100 | 100→0 |
| 46～52 | 100 | 0 |
表12.醋酸阿比特龙片剂加速6个月有关物质测定结果
| 批号 | 20130601 | 20130701 | 20130702 |
| 酮类(％) | 0.12 | 0.13 | 0.11 |
| 阿比特龙(％) | 0.07 | 0.08 | 0.06 |
| 阿比特龙环氧化物(％) | 0.14 | 0.15 | 0.15 |
| 消除产物(％) | 0.04 | 0.04 | 0.03 |
| 双甾体杂质 | 0 | 0 | 0 |
| 其它杂质(％) | 0.15 | 0.10 | 0.13 |
| 总杂质(％) | 0.52 | 0.50 | 0.48 |
Claims (9)
1.一种高效液相色谱梯度法测定醋酸阿比特龙待测样品中有关物质的方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：
(1)制备标准品溶液，以所述标准品溶液在下述色谱条件下进行系统适用性试验，检定检测系统；
色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以有机相为流动相B，以缓冲液和流动相B的混合物为流动相A，梯度洗脱，柱温为30～40℃，流速为1.1～1.3ml/min，检测波长为254nm；
标准品溶液的制备：分别取杂质酮类、阿比特龙、阿比特龙环氧化物、消除产物、双甾体杂质及醋酸阿比特龙对照品，精密称定，加体积比为50:50的甲醇-乙腈溶剂制成每1ml中分别含酮类、阿比特龙、阿比特龙环氧化物、消除产物和双甾体杂质各0.01mg及醋酸阿比特龙1mg的混合溶液；精密量取10μl所述混合溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，校定检测系统至醋酸阿比特龙主峰与相邻杂质峰及杂质与杂质峰的分离度应大于1.5，理论板数按醋酸阿比特龙计算应不低于20000；
(2)供试品溶液和对照品溶液的制备
取醋酸阿比特龙待测样品，加体积比为50:50的甲醇-乙腈溶剂制成每1ml中含1mg的溶液，作为供试品溶液；取醋酸阿比特龙对照品，加体积比为50:50的甲醇-乙腈溶剂制成每1ml中含0.01mg的溶液，作为对照品溶液；
(3)通过高效液相色谱测定待测样品中有关物质的含量
以对照品溶液注入经上述步骤(1)校定后的液相色谱仪，调节检测灵敏度，再将供试品溶液注入液相色谱仪，在步骤(1)所述的色谱条件下进行高效液相色谱，记录色谱图至醋酸阿比特龙主峰保留时间的2.5倍，按外标法以对照品溶液主峰面积计算，供试品溶液中酮类、阿比特龙、阿比特龙环氧化物、消除产物和双甾体杂质不得过0.1％，总杂质不得过1.0％；
(4)计算待测样品中各杂质的含量。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酮类的结构式为：
所述阿比特龙环氧化物的结构为：
所述消除产物的结构式为：
所述双甾体杂质的结构式为：
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述梯度洗脱中，流动相A比例的变化范围为于0～30分钟，线性梯度洗脱，流动相A的比例从100％变化为20％，流动相B的比例从0％变化为80％，于30～40分钟，线性梯度洗脱，流动相A的比例从20％变化为0％，流动相B的比例从80％变化为100％，于40～45分钟，等度洗脱，流动相A的比例保持0％不变，流动相B的比例保持100％不变，于45～46分钟，线性梯度洗脱，流动相A的比例从0％变化为100％，流动相B的比例从100％变化为0％，于46至52分钟，流动相A和B回到初始比例，色谱柱重新平衡。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱条件中的柱温为40℃，流速为1.2ml/min。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的有机相为甲醇和乙腈的混合物，甲醇与乙腈的比例为体积比10～40∶90～60。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述流动相A中缓冲液与流动相B的比例为体积比50～70∶50～30。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述缓冲液由水、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、磷酸氢二铵、醋酸铵、碳酸氢铵、柠檬酸钠、甲酸铵中的一种或几种组成，浓度为0.005mol/L～0.1mol/L。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述缓冲液为甲酸铵。
9.如权利要求1-8任一项所述的方法，其特征在于，所述醋酸阿比特龙待测样品包括醋酸阿比特龙粗品、醋酸阿比特龙原料、醋酸阿比特龙片剂和醋酸阿比特龙片加速样品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410298697.5A CN105223282B (zh) | 2014-06-26 | 2014-06-26 | 一种高效液相色谱梯度法测定醋酸阿比特龙有关物质的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410298697.5A CN105223282B (zh) | 2014-06-26 | 2014-06-26 | 一种高效液相色谱梯度法测定醋酸阿比特龙有关物质的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105223282A true CN105223282A (zh) | 2016-01-06 |
| CN105223282B CN105223282B (zh) | 2017-05-03 |
Family
ID=54992354
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410298697.5A Active CN105223282B (zh) | 2014-06-26 | 2014-06-26 | 一种高效液相色谱梯度法测定醋酸阿比特龙有关物质的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105223282B (zh) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107014915A (zh) * | 2017-03-17 | 2017-08-04 | 中国计量大学 | 全血中阿比特龙的定量检测方法 |
| CN107216364A (zh) * | 2017-06-27 | 2017-09-29 | 重庆华邦胜凯制药有限公司 | 一种甾体化合物及其制备方法 |
| CN108181386A (zh) * | 2017-12-19 | 2018-06-19 | 重庆华邦制药有限公司 | 一种分离测定醋酸阿比特龙中间体中有关物质的方法 |
| CN111253461A (zh) * | 2020-01-15 | 2020-06-09 | 江西青峰药业有限公司 | 一种7-氧代醋酸阿比特龙的合成方法 |
| CN111505148A (zh) * | 2020-04-29 | 2020-08-07 | 甘肃兰药药业有限公司 | 一种醋酸阿比特龙有关物质的高效液相色谱检测方法 |
| CN112379026A (zh) * | 2020-12-14 | 2021-02-19 | 南京广祺医药科技有限公司 | 一种定量测定血液中阿比特龙的方法及应用 |
| CN113009014A (zh) * | 2021-02-24 | 2021-06-22 | 上海旭东海普药业有限公司 | 一种2-甲氧基-5-氟尿嘧啶杂质的高效液相检测方法 |
| CN115372522A (zh) * | 2022-09-23 | 2022-11-22 | 河北省药品医疗器械检验研究院(河北省化妆品检验研究中心) | 一种检测醋酸阿比特龙含量的方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102816199A (zh) * | 2012-08-15 | 2012-12-12 | 武汉长联来福制药股份有限公司 | 醋酸阿比特龙二聚体化合物的制备及检测方法 |
| WO2013030410A2 (en) * | 2011-12-23 | 2013-03-07 | Crystal Pharma, S.A.U. | Synthesis of abiraterone and related compounds |
| CN103450313A (zh) * | 2013-08-21 | 2013-12-18 | 苏州明锐医药科技有限公司 | 一种醋酸阿比特龙的制备方法 |
| WO2015015246A1 (en) * | 2013-07-29 | 2015-02-05 | Industriale Chimica S.R.L. | Process for the preparation of abiraterone and abiraterone acetate |
-
2014
- 2014-06-26 CN CN201410298697.5A patent/CN105223282B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2013030410A2 (en) * | 2011-12-23 | 2013-03-07 | Crystal Pharma, S.A.U. | Synthesis of abiraterone and related compounds |
| CN102816199A (zh) * | 2012-08-15 | 2012-12-12 | 武汉长联来福制药股份有限公司 | 醋酸阿比特龙二聚体化合物的制备及检测方法 |
| WO2015015246A1 (en) * | 2013-07-29 | 2015-02-05 | Industriale Chimica S.R.L. | Process for the preparation of abiraterone and abiraterone acetate |
| CN103450313A (zh) * | 2013-08-21 | 2013-12-18 | 苏州明锐医药科技有限公司 | 一种醋酸阿比特龙的制备方法 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| ALAA KHEDR ET AL.: "Analysis of abiraterone stress degradation behavior using liquid chromatography coupled to ultraviolet detection and electrospray ionization mass spectrometry", 《JOURNAL OF PHARMACEUTICAL AND BIOMEDICAL ANALYSIS》 * |
| THE UNITED STATES PHARMACOPEIA: "《USP Pending Monograph Draft 1-For Public Comment》", 31 December 2013 * |
| VANESSA MARTINS ET AL.: "A validated liquid chromatographic–tandem mass spectroscopy method for the quantification of abiraterone acetate and abiraterone in human plasma", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B》 * |
| 孙键 等: "抗前列腺癌药物醋酸阿比特龙的合成", 《中国新药杂志》 * |
| 王红波 等: "醋酸阿比特龙的合成", 《中国医药工业杂志》 * |
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107014915A (zh) * | 2017-03-17 | 2017-08-04 | 中国计量大学 | 全血中阿比特龙的定量检测方法 |
| CN107014915B (zh) * | 2017-03-17 | 2019-09-10 | 中国计量大学 | 全血中阿比特龙的定量检测方法 |
| CN107216364A (zh) * | 2017-06-27 | 2017-09-29 | 重庆华邦胜凯制药有限公司 | 一种甾体化合物及其制备方法 |
| CN107216364B (zh) * | 2017-06-27 | 2019-09-27 | 重庆华邦胜凯制药有限公司 | 一种甾体化合物及其制备方法 |
| CN108181386A (zh) * | 2017-12-19 | 2018-06-19 | 重庆华邦制药有限公司 | 一种分离测定醋酸阿比特龙中间体中有关物质的方法 |
| CN111253461A (zh) * | 2020-01-15 | 2020-06-09 | 江西青峰药业有限公司 | 一种7-氧代醋酸阿比特龙的合成方法 |
| CN111253461B (zh) * | 2020-01-15 | 2022-07-01 | 江西山香药业有限公司 | 一种7-氧代醋酸阿比特龙的合成方法 |
| CN111505148A (zh) * | 2020-04-29 | 2020-08-07 | 甘肃兰药药业有限公司 | 一种醋酸阿比特龙有关物质的高效液相色谱检测方法 |
| CN111505148B (zh) * | 2020-04-29 | 2023-04-07 | 甘肃兰药药业有限公司 | 一种醋酸阿比特龙有关物质的高效液相色谱检测方法 |
| CN112379026A (zh) * | 2020-12-14 | 2021-02-19 | 南京广祺医药科技有限公司 | 一种定量测定血液中阿比特龙的方法及应用 |
| CN113009014A (zh) * | 2021-02-24 | 2021-06-22 | 上海旭东海普药业有限公司 | 一种2-甲氧基-5-氟尿嘧啶杂质的高效液相检测方法 |
| CN115372522A (zh) * | 2022-09-23 | 2022-11-22 | 河北省药品医疗器械检验研究院(河北省化妆品检验研究中心) | 一种检测醋酸阿比特龙含量的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN105223282B (zh) | 2017-05-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105223282A (zh) | 一种高效液相色谱梯度法测定醋酸阿比特龙有关物质的方法 | |
| CN105334274B (zh) | 枸橼酸托法替布含量及其有关物质的反相高效液相色谱法测定方法 | |
| CN110031573B (zh) | 二维柱切换高效液相色谱法测定维生素d含量的方法 | |
| CN104407087B (zh) | 一种同时检测桃金娘根中没食子酸和鞣花酸的方法 | |
| CN105424820A (zh) | 一种对11种人参皂苷类成分同时进行定性及定量的方法 | |
| CN109633063B (zh) | 一种人血浆中替格瑞洛及其活性代谢产物浓度的检测方法 | |
| CN110824029A (zh) | 基于uplc及一测多评法的白芷药材中香豆素类成分含量检测 | |
| CN104764820A (zh) | 测定半夏糖浆中活性成分盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱含量的方法 | |
| CN103808835A (zh) | Hplc-dad法同时测定四物汤煎剂中10种化学成分含量的方法 | |
| CN104155401B (zh) | 蜂王浆中三种脂肪酸含量的检测方法及应用 | |
| CN112730674B (zh) | 一种罗汉茶的质量检测方法 | |
| CN104374841B (zh) | 羚羊感冒片质量控制参照品及用途 | |
| CN106483230B (zh) | 一种尿液羟基多环芳烃的快速检测方法 | |
| CN104897796A (zh) | 一种高效液相色谱法测定芝麻油中齐墩果酸、熊果酸含量的方法 | |
| CN104914194B (zh) | 一种用气相色谱仪检测薄荷素油滴丸中薄荷脑含量的方法 | |
| CN104849381B (zh) | 基于高效液相色谱-电雾式检测器法同时测定7种黄芪皂苷类成分的方法 | |
| CN102841169B (zh) | 一种高效液相色谱梯度法测定左亚叶酸钙有关物质的方法 | |
| CN106290600B (zh) | 一种用液相色谱法分离康尼替尼及有关物质的方法 | |
| CN108918721A (zh) | 一种款冬花中绿原酸含量的测定方法 | |
| CN112684031B (zh) | 聚维酮k30含量的hplc测定方法 | |
| CN104634911A (zh) | 一种喘可治注射液4种黄酮类有效成分检测方法 | |
| CN104007197B (zh) | 一种检测新型睾酮兴奋剂的方法 | |
| CN105277633B (zh) | 一种炔诺酮衍生物及其中间体的杂质检测分析方法 | |
| CN107966498B (zh) | 一种检测艾代拉里斯中溶剂残留的方法 | |
| CN106645474A (zh) | 丹绿补肾胶囊中次野鸢尾黄素和胡椒碱的含量测定方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |