CN105214335A - 玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法 - Google Patents

Abstract

<b>本发明涉及植物提取技术领域，是一种玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法；第一步，玫瑰花粉处理后加入沸水蒸发；第二步，加入过氧化氢溶液；第三步，加水洗涤后静置，离心得一次沉淀，一次沉淀洗涤三次至四次后得最后沉淀；第四步，在最后沉淀中加入磷酸缓冲盐溶液、纤维素酶和溶菌酶，酶解后煮沸离心取上清液即为花粉氨基酸液。本发明提取过程中</b><b>不涉及金属研磨、</b><b>没有噪音和强腐蚀物，</b><b>杜绝了产品重金属污染和</b><b>噪音</b><b>污染，</b><b>本发明得到的花粉氨基酸液</b><b>内含花粉活性物质，</b><b>没有化学药剂残留，</b><b>且去除了花粉残壁的致敏效果，适合作为保健品和化妆品的原料；同时</b><b>把提取精油后的玫瑰花废液变废为宝，使玫瑰花花粉资源得到了有效利用，大大降低了生产成本。</b>

Description

玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法

技术领域

本发明涉及植物提取技术领域，是一种玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法。

背景技术

花粉是植物有性繁殖的雄配子体，通常由花粉壁包裹的营养细胞和生殖细胞组成，内含多种氨基酸、维生素、酯类、黄酮、矿物质、核酸等营养物质，从花粉成熟起直到花粉管萌发所需的除水外所有物质均由花粉自身具备，其营养十分均衡而浓缩。有文献记载，花粉对于肝脏超氧化物岐化酶有强化作用，可以有效抵抗自由基，延缓衰老；同时花粉内的活性成分可以刺激人体的免疫系统，增强人体免疫力，保护肝脏；另外，花粉可以调节内分泌，可以对糖尿病及其并发症有一定的保健效果。花粉内的活性物质可以刺激皮肤新陈代谢，其中Va、Vb对皮肤的营养、再生、调节具有积极作用。因此，花粉可以作为良好的保健品原料及化妆品原料，其保健和美容功效均由其天然的活性物质及营养物质为基础，对人体没有伤害，具有积极的经济价值。

但花粉的抗逆性极强，植物体为保护其遗传物质的稳定性，构造了极为坚固的花粉壁，酸碱、高温等条件均不能很好地对其进行破坏，阻碍花粉内营养物质的释放。同时花粉的外壁上的大分子是比较常见的致敏原，许多敏感体质的人会对花粉过敏，在使用花粉时最好将其外壁去除，以减少其可能的致敏效果。而当下的花粉产品多为破壁花粉，任然具有花粉壁结构，易引起过敏。现阶段一般是将新鲜花粉采用机械法破壁花粉，在研磨过程中易将金属碎屑带入产品中，而且制备过程中能耗大、噪音大；而化学方法采用强腐蚀物，容易产生残留，而且使用强腐蚀性化学试剂容易对操作者造成伤害。

现有新鲜玫瑰花经提取精油后的废液中含有大量的玫瑰花花粉，通常是将提取精油后的玫瑰花废液不经过任何处理直接排放，造成了玫瑰花花粉资源的浪费。

发明内容

本发明提供了一种玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法，克服了上述现有技术之不足，其能有效解决现有花粉产品在破壁的过程中易将金属碎屑带入产品中、制备过程中能耗大和噪音大，化学方法有化学试剂残留；提取精油后的玫瑰花废液不经过任何处理直接排放而造成资源浪费的问题。

本发明的技术方案是通过以下措施来实现的：一种玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法，按下述方法进行：第一步，取玫瑰花粉适量，将玫瑰花粉在温度为-25℃至-15℃下放置48h至72h，然后加入10倍至20倍玫瑰花粉质量的沸水混合均匀得到花粉液，花粉液蒸发至花粉液体积的1/3至1/5后得到花粉浓缩液；第二步，在花粉浓缩液中加入3倍至10倍玫瑰花粉质量的过氧化氢水溶液，过氧化氢水溶液的质量百分比浓度为3%，加入后搅拌反应12h至24h，搅拌反应后得到第一悬浊液；第三步，在第一悬浊液中加入10倍至20倍玫瑰花粉质量的水，震摇洗涤后静置8h至15h，静置后离心分离，离心分离后得到一次沉淀；第四步，在一次沉淀中加入10倍至20倍玫瑰花粉质量的水，震摇洗涤后离心分离，离心分离后得到二次沉淀；第五步，重复第四步操作两次至三次后得到最后沉淀，在最后沉淀中加入10倍玫瑰花粉质量的pH为4.0的磷酸缓冲盐溶液，然后按每克玫瑰花粉中加入0.2g至0.5g纤维素酶和0.2g至0.5g溶菌酶计，依次加入纤维素酶和溶菌酶并混合均匀，在温度为43℃至47℃下搅拌反应20h至30h，搅拌反应后得到第二悬浊液；第六步，第二悬浊液煮沸1min至2min，冷却至室温后离心分离得到上清液，上清液即为花粉氨基酸液。

下面是对上述发明技术方案的进一步优化或/和改进：

上述纤维素酶的比活力为400u/mg；溶菌酶的比活力为20000u/mg。

上述离心分离的转速为2500r/min至3500r/min，离心分离的时间为15min至20min。

上述搅拌速率为60r/min至100r/min。

上述震摇洗涤的时间为3min至5min。

上述玫瑰花粉为玫瑰鲜花花粉或从提取精油后的玫瑰花废液中制备的玫瑰花花粉。

上述从提取精油后的玫瑰花废液中制备的玫瑰花花粉，按下述方法得到：第一步，取适量提取精油后的玫瑰花废液进行静置12h至24h，静置后将上层清液分离后，得到一次下层混合液；第二步，将一次下层混合液静置12h至24h，静置后将上层清液分离后，得到二次下层混合液；第三步，在二次下层混合液中加入食用酒精，食用酒精的加入量为二次下层混合液体积的2倍至3倍，食用酒精加入后调节pH为9至11后沉降2h至3h，沉降后得到花粉液；第四步，在花粉液中加入去离子水并混合均匀得到混合液，去离子水的加入量为花粉液体积的1倍至2倍，混合液静置5min至10min，静置后将上层清液分离后，得到三次下层混合液；第五步，三次下层混合液经300目至500目的筛网过滤后得到滤饼，将滤饼置于温度为60℃至65℃的烘箱中烘干至恒重，得到玫瑰花花粉。

上述提取精油后的玫瑰花废液按下述方法得到：采集新鲜玫瑰花，在新鲜玫瑰花中加入3倍至4倍新鲜玫瑰花质量的水，加热至沸腾后边搅拌边进行回流提取，回流提取3h至5h，搅拌速率为150r/min至180r/min，回流提取精油后馏余物经300目至500目筛网过滤后得到提取精油后的玫瑰花废液。

上述玫瑰花为大马士革玫瑰花或紫枝玫瑰花或苦水玫瑰花或丰花玫瑰花。

本发明在提取过程中不涉及金属研磨、没有噪音和强腐蚀物，杜绝了产品重金属污染和噪音污染，与现有氨基酸产品相比较，本发明得到的花粉氨基酸液内含花粉活性物质，没有化学药剂残留，且去除了花粉残壁的致敏效果，适合作为保健品和化妆品的原料；同时把提取精油后的玫瑰花废液变废为宝，使玫瑰花花粉资源得到了有效利用，大大降低了生产成本。

附图说明

附图1为本发明花粉氨基酸液氨基酸检测仪图谱。

具体实施方式

本发明不受下述实施例的限制，可根据本发明的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。

实施例1，该玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法，按下述方法进行：第一步，取玫瑰花粉适量，将玫瑰花粉在温度为-25℃至-15℃下放置48h至72h，然后加入10倍至20倍玫瑰花粉质量的沸水混合均匀得到花粉液，花粉液蒸发至花粉液体积的1/3至1/5后得到花粉浓缩液；第二步，在花粉浓缩液中加入3倍至10倍玫瑰花粉质量的过氧化氢水溶液，过氧化氢水溶液的质量百分比浓度为3%，加入后搅拌反应12h至24h，搅拌反应后得到第一悬浊液；第三步，在第一悬浊液中加入10倍至20倍玫瑰花粉质量的水，震摇洗涤后静置8h至15h，静置后离心分离，离心分离后得到一次沉淀；第四步，在一次沉淀中加入10倍至20倍玫瑰花粉质量的水，震摇洗涤后离心分离，离心分离后得到二次沉淀；第五步，重复第四步操作两次至三次后得到最后沉淀，在最后沉淀中加入10倍玫瑰花粉质量的pH为4.0的磷酸缓冲盐溶液，然后按每克玫瑰花粉中加入0.2g至0.5g纤维素酶和0.2g至0.5g溶菌酶计，依次加入纤维素酶和溶菌酶并混合均匀，在温度为43℃至47℃下搅拌反应20h至30h，搅拌反应后得到第二悬浊液；第六步，第二悬浊液煮沸1min至2min，冷却至室温后离心分离得到上清液，上清液即为花粉氨基酸液。本发明对生产操作者和产品使用者都有较强的安全保障，尤其是其中化学处理中3%的过氧化氢可用于人体体表消毒，其降解产物为水和氧气，均为无毒物。

实施例2，该玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法，按下述方法进行：第一步，取玫瑰花粉适量，将玫瑰花粉在温度为-25℃或-15℃下放置48h或72h，然后加入10倍或20倍玫瑰花粉质量的沸水混合均匀得到花粉液，花粉液蒸发至花粉液体积的1/3或1/5后得到花粉浓缩液；第二步，在花粉浓缩液中加入3倍或10倍玫瑰花粉质量的过氧化氢水溶液，过氧化氢水溶液的质量百分比浓度为3%，加入后搅拌反应12h或24h，搅拌反应后得到第一悬浊液；第三步，在第一悬浊液中加入10倍或20倍玫瑰花粉质量的水，震摇洗涤后静置8h或15h，静置后离心分离，离心分离后得到一次沉淀；第四步，在一次沉淀中加入10倍或20倍玫瑰花粉质量的水，震摇洗涤后离心分离，离心分离后得到二次沉淀；第五步，重复第四步操作两次或三次后得到最后沉淀，在最后沉淀中加入10倍玫瑰花粉质量的pH为4.0的磷酸缓冲盐溶液，然后按每克玫瑰花粉中加入0.2g或0.5g纤维素酶和0.2g或0.5g溶菌酶计，依次加入纤维素酶和溶菌酶并混合均匀，在温度为43℃或47℃下搅拌反应20h或30h，搅拌反应后得到第二悬浊液；第六步，第二悬浊液煮沸1min或2min，冷却至室温后离心分离得到上清液，上清液即为花粉氨基酸液。

实施例3，该玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法，按下述方法进行：第一步，取玫瑰花粉1.00g，将玫瑰花粉在温度为-20℃时放置48h，然后加入20g的沸水中混合均匀得到花粉液，花粉液蒸发至花粉液体积的1/3后得到花粉浓缩液；第二步，在花粉浓缩液中加入10ml百分比浓度为3%的过氧化氢水溶液，加入后搅拌反应24h，搅拌反应后得到第一悬浊液；第三步，在第一悬浊液中加入10ml水，震摇洗涤后静置8h，静置后离心分离，离心分离后得到一次沉淀；第四步，在一次沉淀中加入10ml水，震摇洗涤后离心分离，离心分离后得到二次沉淀；第五步，重复第四步操作两次后得到最后沉淀，在最后沉淀中加入10ml的pH为4.0的磷酸缓冲盐溶液，然后依次加入0.2016g纤维素酶和0.2015g溶菌酶并混合均匀，在温度为45℃下搅拌反应24h，搅拌反应后得到第二悬浊液；第六步，第二悬浊液煮沸1min，冷却至室温后离心分离得到上清液，上清液即为花粉氨基酸液。

实施例4，该玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法，按下述方法进行：第一步，取玫瑰花粉1.00g，将玫瑰花粉在温度为-20℃时放置24h，然后加入10g的沸水中混合均匀得到花粉液，花粉液蒸发至花粉液体积的1/3后得到花粉浓缩液；第二步，在花粉浓缩液中加入10ml百分比浓度为3%的过氧化氢水溶液，加入后搅拌反应24h，搅拌反应后得到第一悬浊液；第三步，在第一悬浊液中加入10ml水，震摇洗涤后静置8h，静置后离心分离，离心分离后得到一次沉淀；第四步，在一次沉淀中加入10ml水，震摇洗涤后离心分离，离心分离后得到二次沉淀；第五步，重复第四步操作三次后得到最后沉淀，在最后沉淀中加入10ml的pH为4.0的磷酸缓冲盐溶液，然后依次加入0.5000g纤维素酶和0.4990g溶菌酶并混合均匀，在温度为45℃下搅拌反应24h，搅拌反应后得到第二悬浊液；第六步，第二悬浊液煮沸2min，冷却至室温后离心分离得到上清液，上清液即为花粉氨基酸液。

实施例5，作为上述实施例的优化，纤维素酶的比活力为400u/mg；溶菌酶的比活力为20000u/mg。酶活力和加酶量成反比，可依据酶活力改变酶用量。

实施例6，作为上述实施例的优化，离心分离的转速为2500r/min至3500r/min，离心分离的时间为15min至20min。

实施例7，作为上述实施例的优化，搅拌速率为60r/min至100r/min。

实施例8，作为上述实施例的优化，震摇洗涤的时间为3min至5min。

实施例9，作为上述实施例的优化，玫瑰花粉为玫瑰鲜花花粉或从提取精油后的玫瑰花废液中制备的玫瑰花花粉。

实施例10，作为上述实施例的优化，从提取精油后的玫瑰花废液中制备的玫瑰花花粉，按下述方法得到：第一步，取适量提取精油后的玫瑰花废液进行静置12h至24h，静置后将上层清液分离后，得到一次下层混合液；第二步，将一次下层混合液静置12h至24h，静置后将上层清液分离后，得到二次下层混合液；第三步，在二次下层混合液中加入食用酒精，食用酒精的加入量为二次下层混合液体积的2倍至3倍，食用酒精加入后调节pH为9至11后沉降2h至3h，沉降后得到花粉液；第四步，在花粉液中加入去离子水并混合均匀得到混合液，去离子水的加入量为花粉液体积的1倍至2倍，混合液静置5min至10min，静置后将上层清液分离后，得到三次下层混合液；第五步，三次下层混合液经300目至500目的筛网过滤后得到滤饼，将滤饼置于温度为60℃至65℃的烘箱中烘干至恒重，得到玫瑰花花粉。本发明中一次下层混合液静置后的上层清液经分离后可用作饮料添加剂或口服液添加剂，从而使水资源得到了有效利用，降低了生产成本。

实施例11，作为上述实施例的优化，提取精油后的玫瑰花废液按下述方法得到：采集新鲜玫瑰花，在新鲜玫瑰花中加入3倍至4倍新鲜玫瑰花质量的水，加热至沸腾后边搅拌边进行回流提取，回流提取3h至5h，搅拌速率为150r/min至180r/min，回流提取精油后馏余物经300目至500目筛网过滤后得到提取精油后的玫瑰花废液。

实施例12，作为上述实施例的优化，玫瑰花为大马士革玫瑰花或紫枝玫瑰花或苦水玫瑰花或丰花玫瑰花。本发明适用但不限于以上品种玫瑰。

将上述实施例得到的本发明花粉氨基酸液按《GBT12143-2008饮料通用分析方法》中甲醛值法测定氨基态氮浓度，其计算公式为 ，其中：x单位为mg/100ml，c为NaOH浓度，V为NaOH体积，K为样品稀释倍数，m为试样体积。实施例3得到的本发明花粉氨基酸液的氨基态氮含量为0.063%，破壁率为92%；实施例4得到的本发明花粉氨基酸液的氨基态氮含量为0.070%，破壁率为95%。

附图1为本发明花粉氨基酸液氨基酸检测仪图谱；从图1可以看出，本发明得到的花粉氨基酸液富含包括天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、精氨酸等16种人体所需的α氨基酸，其中包含7种人体必需氨基酸，具有比较全面的营养价值，其作为食品和化妆品的添加剂可以较为全面地补充人体或局部的氨基酸，起到一定的营养作用。

综上所述，本发明在提取过程中不涉及金属研磨、没有噪音和强腐蚀物，杜绝了产品重金属污染和噪音污染，与现有氨基酸产品相比较，本发明得到的花粉氨基酸液内含花粉活性物质，没有化学药剂残留，且去除了花粉残壁的致敏效果，适合作为保健品和化妆品的原料；同时把提取精油后的玫瑰花废液变废为宝，使玫瑰花花粉资源得到了有效利用，大大降低了生产成本。

以上技术特征构成了本发明的实施例，其具有较强的适应性和实施效果，可根据实际需要增减非必要的技术特征，来满足不同情况的需求。

Claims (9)

1.一种玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法，其特征在于按下述方法进行：第一步，取玫瑰花粉适量，将玫瑰花粉在温度为-25℃至-15℃下放置48h至72h，然后加入10倍至20倍玫瑰花粉质量的沸水混合均匀得到花粉液，花粉液蒸发至花粉液体积的1/3至1/5后得到花粉浓缩液；第二步，在花粉浓缩液中加入3倍至10倍玫瑰花粉质量的过氧化氢水溶液，过氧化氢水溶液的质量百分比浓度为3%，加入后搅拌反应12h至24h，搅拌反应后得到第一悬浊液；第三步，在第一悬浊液中加入10倍至20倍玫瑰花粉质量的水，震摇洗涤后静置8h至15h，静置后离心分离，离心分离后得到一次沉淀；第四步，在一次沉淀中加入10倍至20倍玫瑰花粉质量的水，震摇洗涤后离心分离，离心分离后得到二次沉淀；第五步，重复第四步操作两次至三次后得到最后沉淀，在最后沉淀中加入10倍玫瑰花粉质量的pH为4.0的磷酸缓冲盐溶液，然后按每克玫瑰花粉中加入0.2g至0.5g纤维素酶和0.2g至0.5g溶菌酶计，依次加入纤维素酶和溶菌酶并混合均匀，在温度为43℃至47℃下搅拌反应20h至30h，搅拌反应后得到第二悬浊液；第六步，第二悬浊液煮沸1min至2min，冷却至室温后离心分离得到上清液，上清液即为花粉氨基酸液。

2.根据权利要求1所述的玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法，其特征在于纤维素酶的比活力为400u/mg；溶菌酶的比活力为20000u/mg。

3.根据权利要求1或2所述的玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法，其特征在于离心分离的转速为2500r/min至3500r/min，离心分离的时间为15min至20min。

4.根据权利要求1或2或3所述的玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法，其特征在于搅拌速率为60r/min至100r/min。

5.根据权利要求1或2或3或4所述的玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法，其特征在于震摇洗涤的时间为3min至5min。

6.根据权利要求1或2或3或4或5所述的玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法，其特征在于玫瑰花粉为玫瑰鲜花花粉或从提取精油后的玫瑰花废液中制备的玫瑰花花粉。

7.根据权利要求6所述的玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法，其特征在于从提取精油后的玫瑰花废液中制备的玫瑰花花粉，按下述方法得到：第一步，取适量提取精油后的玫瑰花废液进行静置12h至24h，静置后将上层清液分离后，得到一次下层混合液；第二步，将一次下层混合液静置12h至24h，静置后将上层清液分离后，得到二次下层混合液；第三步，在二次下层混合液中加入食用酒精，食用酒精的加入量为二次下层混合液体积的2倍至3倍，食用酒精加入后调节pH为9至11后沉降2h至3h，沉降后得到花粉液；第四步，在花粉液中加入去离子水并混合均匀得到混合液，去离子水的加入量为花粉液体积的1倍至2倍，混合液静置5min至10min，静置后将上层清液分离后，得到三次下层混合液；第五步，三次下层混合液经300目至500目的筛网过滤后得到滤饼，将滤饼置于温度为60℃至65℃的烘箱中烘干至恒重，得到玫瑰花花粉。

8.根据权利要求6或7所述的玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法，其特征在于提取精油后的玫瑰花废液按下述方法得到：采集新鲜玫瑰花，在新鲜玫瑰花中加入3倍至4倍新鲜玫瑰花质量的水，加热至沸腾后边搅拌边进行回流提取，回流提取3h至5h，搅拌速率为150r/min至180r/min，回流提取精油后馏余物经300目至500目筛网过滤后得到提取精油后的玫瑰花废液。

9.根据权利要求8所述的玫瑰花粉中提取花粉氨基酸液的方法，其特征在于玫瑰花为大马士革玫瑰花或紫枝玫瑰花或苦水玫瑰花或丰花玫瑰花。