CN105175383A - 一种联苯类化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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    • C07D311/64—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4 with oxygen atoms directly attached in position 8

Abstract

本发明公开了一种联苯类化合物及其制备方法和应用，所述的联苯类化合物是以干燥的藤黄属乔木枝条、叶或果实为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离得到化合物1和化合物2，所述的化合物1中C-1ˊ和C-2ˊ之间是碳碳双键，所述的化合物2中C-1ˊ和C-2ˊ之间是碳碳单键，分子式分别为C20H20O6和C18H20O4，分别具有下述结构式：所述制备方法是以干燥的藤黄属乔木枝条、叶和/或果实为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤。所述的应用为联苯类化合物在制备抗病毒药物中的应用。经抗病毒活性实验，化合物<b>1</b>和<b>2</b>具有较好的抗病毒活性。本发明化合物结构简单活性好，可作为抗病毒药物的先导性化合物，有良好的应用前景。

Description

一种联苯类化合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于植物化学技术领域，具体涉及一种联苯类化合物及其制备方法和应用。
背景技术
藤黄属(GarciniaL.)植物全球约450种，产亚洲、非洲南部及波利尼西亚西部，我国有21种，分布于广东、广西、云南等南部省区。研究表明，藤黄属植物富含异戊烯基取代的呫吨酮，这类成分结构新颖多样，且具有广泛的药理活性，尤以藤黄酸(gambogicacid)最具代表性，具有广谱强效的抗肿瘤活性，是近年来抗肿瘤天然产物的研究热点之一，我国学者正在开发其注射液为抗肿瘤一类新药。除呫吨酮外，苯甲酮类(benzophenones)和双黄酮类(bioflavonoids)等化合物也是本属植物的特征性成分，也具有多种生物活性。为了更有效地利用我国藤黄属植物资源，从中寻找具有开发前景的活性成分是非常必要的。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种联苯类化合物；第二目的在于提供所述的联苯类化合物的制备方法；第三目的在于提供所述的联苯类化合物的应用。
本发明的第一目的是这样实现的，所述的联苯类化合物是以干燥的藤黄属乔木枝条、叶或果实为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离得到化合物1和化合物2，所述的化合物1中C-1'和C-2'之间是碳碳双键，所述的化合物2中C-1'和C-2'之间是碳碳单键，分子式分别为C20H20O6和C18H20O4，分别具有下述结构式：
。
本发明的第二目的是这样实现的，是以干燥的藤黄属乔木枝条、叶或果实为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离获得，具体为：
A、浸膏提取：将藤黄属乔木枝条、叶或果实粗粉碎到20~40目，用有机溶剂超声提取2~4次，每次30~60min，提取液合并；提取液过滤，减压浓缩提取液至1/4~1/2体积时，静置，滤除沉淀物，浓缩成浸膏a；
B、有机溶剂萃取：浸膏a中加入重量比1~2倍量的水，用与水等体积的有机溶剂萃取3~5次，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏b；
C、硅胶柱层析：将浸膏b用重量比1.5~3倍量的丙酮溶解，然后用浸膏重0.8~1.2倍的80~100目硅胶拌样，然后上硅胶柱层析，装柱硅胶为160~200目，用量为浸膏b重量6~8倍量；用体积比为1:0~0:1的混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；
D、反相柱层析：将以9:1配比的有机溶剂进行洗脱得到的洗脱液上反相柱层析，反相柱是用反相材料C-18装柱；用体积含量为20~100%的甲醇水溶液进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液并浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；
E、高效液相色谱分离：将以体积含量45~85%甲醇水溶液洗脱得到的洗脱液经高效液相色谱分离纯化，即得所述的联苯类化合物1和化合物2；
F、E步骤所述的高效液相色谱分离纯化是以50~70%的甲醇为流动相，流速10~14ml/min，21.2×250mm，5μm的ZorbaxPrepHTGF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254nm，每次进样45~60μL，收集15~35min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的联苯类化合物1；
G、E步骤所述的高效液相色谱分离纯化是以50~70%的甲醇为流动相，流速10~14ml/min，21.2×250mm，5μm的ZorbaxPrepHTGF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254nm，每次进样45~60μL，收集35~50min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的联苯类化合物2。
本发明联苯类化合物是首次被分离出来的，通过核磁共振和其他波谱技术测定方法确定为联苯类化合物，并表征其具体结构为：
化合物1，为淡黄色胶状物；紫外光谱（溶剂为甲醇），λ max（logε）：570(2.32);205(4.36)nm；红外光谱（溴化钾压片）ν max3430,2926,2930,1720,1609,1578,1495,1442,1351,1263,1178,1109,1049,1020,830cm–1；HREIMS显示本发明化合物准分子离子峰m/z356.1274[M+Na]+（计算值为356.1260），结合13C和1HNMR谱（图1和图2，碳谱氢谱数据归属见表1）给出其分子式为C20H20O6。1HNMR（CD3OD，400MHz）和13CNMR（CD3OD，100MHz）数据，见表1。
化合物1的1H-NMR和13C-NMR谱显示乙酰氧基苯并吡喃环特征峰：烯氢原子δ H6.41(1H,d,J10.1Hz,H-1′)和δ H5.48(1H,d,J10.1Hz,H-2′),δ C124.7(C-1′),124.4(C-2′)。一个甲基δ H1.47(s,Me-5′)和δ C23.4(C-5′)。一个被氧化的亚甲基δ H4.27,4.14(2H,d,J11.5Hz,H-4′)和δ C69.0(C-4′)，一个被氧化的季碳77.6(C-3′)，以及一个乙酰氧基δ H2.00(s,OAc)和δ C172.6/20.7。13C-NMR谱中显示12个芳香碳原子信号δ C132.4(C-1),114.2(C-2),142.0(C-3),131.9(C-4),149.6(C-5),106.6(C-6),134.6(C-7),131.8(C-8,C-12),116.0(C-9,C-11),157.7(C-10)，这表明联苯结构的存在。HMBC谱中H-6与C-7(δ C134.6)相关，H-8和H-12与C-1相关，这进一步证明了联苯结构。HMBC谱中H-1′(δ H6.41)与C-1(δ C132.4)，C-2(δ C114.2)，和C-3(δ C142.0)相关，H-2′(δ H5.48)与C-2相关，这说明吡喃环与苯环在C-2和C-3相连。HMBC谱中OMe(δ H3.85)与C-5(δ C149.6)相关，说明C-5处为甲氧基取代。HMBC谱中一个1,2,3,4,5-pentasubstituted苯环的芳氢δ H6.44(s,H-6)与C-1(δ C132.4)，C-5，C-2(δ C114.2),和C-4(δ C131.9)相关，说明C-4为羟基取代。氢谱显示两对邻位偶合氢原子δ H7.11(dd,J8.4,1.9,H-8,12)和6.82(dd,J8.4,1.9,H-9,11)，说明另一个苯环为对位取代。根据化合物的分子式和氢谱、碳谱信号，C-10位也有一个羟基取代。因此，化合物1的结构得到确定,命名为multibiphenylB.
化合物2为淡桔黄色胶状物，紫外光谱（溶剂为甲醇），λ max（logε）：570(1.76),266(3.70),226(3.80),204(3.98)nm；红外光谱（溴化钾压片）ν max3423,2973,2931,1612,1494,1446,1418,1369,1346,1319,1252,1220,1169,1150,1113cm–1；HREIMS显示本发明化合物准分子离子峰m/z300.1360[M+Na]+（计算值为300.1362），结合13C和1HNMR谱（图3和图4，碳谱氢谱数据归属见表1）给出其分子式为C18H20O4。1HNMR（CD3OD，400MHz）和13CNMR（CD3OD，100MHz）数据，见表1。
化合物2的UV、IR、NMR谱与化合物1的很相似。高分辨质谱分子离子峰[M]+为m/z300.1360说明其分子式为C18H20O4,不饱和度为9。经过仔细比对，发现这两个化合物的区别在于化合物缺少一个乙酰氧基和一个双键。说明与化合物1相比，化合物2中C-4′没有乙酰氧基取代，而且C-1′和C-2′之间的双键被还原。因此，化合物2的结构得到确定,命名为multibiphenylC.
本发明的第三目的是这样实现的，所述的联苯类化合物在制备抗病毒药物中的应用。
本发明分别以化合物1或化合物2为原料，经对感染轮状病毒的人MA104细胞的抗病毒活性实验，化合物1和2的治疗指数均大于10，分别为12.35+1.75和12.58+1.68，本发明化合物结构简单活性好，可作为抗病毒药物的先导性化合物，有良好的应用前景。
附图说明
图1为化合物1的核磁共振碳谱（13CNMR）；
图2为化合物1的核磁共振氢谱（1HNMR）；
图3为化合物2的核磁共振碳谱（13CNMR）；
图4为化合物2的核磁共振氢谱（1HNMR）；
图5为化合物1的主要HMBC（→）和1H-1HCOSY（–）相关。
具体实施方式
下面结合实施例和附图对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。
本发明所述的联苯类化合物是以干燥的藤黄属乔木枝条、叶或果实为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离得到化合物1和化合物2，所述的化合物1中C-1'和C-2'之间是碳碳双键，所述的化合物2中C-1'和C-2'之间是碳碳单键，分子式分别为C20H20O6和C18H20O4，分别具有下述结构式：
。
本发明所述的联苯类化合物的制备方法，是以干燥的藤黄属乔木枝条、叶或果实为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离获得，具体为：
A、浸膏提取：将藤黄属乔木枝条、叶或果实粗粉碎到20~40目，用有机溶剂超声提取2~4次，每次30~60min，提取液合并；提取液过滤，减压浓缩提取液至1/4~1/2体积时，静置，滤除沉淀物，浓缩成浸膏a；
B、有机溶剂萃取：浸膏a中加入重量比1~2倍量的水，用与水等体积的有机溶剂萃取3~5次，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏b；
C、硅胶柱层析：将浸膏b用重量比1.5~3倍量的丙酮溶解，然后用浸膏重0.8~1.2倍的80~100目硅胶拌样，然后上硅胶柱层析，装柱硅胶为160~200目，用量为浸膏b重量6~8倍量；用体积比为1:0~0:1的混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；
D、反相柱层析：将以9:1配比的有机溶剂进行洗脱得到的洗脱液上反相柱层析，反相柱是用反相材料C-18装柱；用体积含量为20~100%的甲醇水溶液进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液并浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；
E、高效液相色谱分离：将以体积含量45~85%甲醇水溶液洗脱得到的洗脱液经高效液相色谱分离纯化，即得所述的联苯类化合物1和化合物2；
F、E步骤所述的高效液相色谱分离纯化是以50~70%的甲醇为流动相，流速10~14ml/min，21.2×250mm，5μm的ZorbaxPrepHTGF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254nm，每次进样45~60μL，收集15~35min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的联苯类化合物1；
G、E步骤所述的高效液相色谱分离纯化是以50~70%的甲醇为流动相，流速10~14ml/min，21.2×250mm，5μm的ZorbaxPrepHTGF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254nm，每次进样45~60μL，收集35~50min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的联苯类化合物2。
A步骤中所述的有机溶剂为70~100%的丙酮、乙醇或甲醇。
B步骤中所述的有机溶剂为乙酸乙酯、氯仿、乙醚、石油醚或苯。
C步骤中所述的混合有机溶剂为正己烷-丙酮、氯仿-丙酮、氯仿-甲醇、石油醚-丙酮或石油醚-乙酸乙酯。
C步骤中所述的混合有机溶剂的体积配比为1:0、20:1、9:1、8:2、3:2、1:1、1:2、0:1。
本发明所述的联苯类化合物的应用，是所述的联苯类化合物在制备抗病毒药物中的应用。
本发明所述的藤黄属植物不受地区和品种限制，均可以实现本发明。
下面以具体实施例对本发明做进一步说明：
实施例1
取干燥的藤黄属乔木枝条、叶和/或果实3.5kg，粗粉碎至40目，用90%的乙醇超声提取4次，每次60min，提取液合并；提取液过滤，减压浓缩至体积的1/4；静置，滤除沉淀物，浓缩成346g浸膏a；在浸膏a中加入350g水，用与水等体积的乙酸乙酯萃取5次，合并萃取相，减压浓缩成183g浸膏b；用200目硅胶1360g装柱，在浸膏b中加入567g的丙酮溶解，然后加入100目硅胶164g拌样，拌样后上柱；用体积比分别为1:0、20:1、9:1、8:2、3:2、1:1、1:2、0:1的氯仿-甲醇混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分，得到8个部分，体积比9:1的氯仿-甲醇混合有机溶剂的洗脱液c为52g；用反相材料C-18装柱，洗脱液c上反相柱，以体积含量为20~100%的甲醇水溶液进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液并浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；取以体积含量50~70%甲醇水溶液洗脱得到的洗脱液，再以55%的甲醇为流动相，流速10ml/min，21.2×250mm，5μm的ZorbaxPrepHTGF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254nm，每次进样48μL，收集22min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的联苯类化合物1；收集34min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的联苯类化合物2。
实施例2
取干燥的藤黄属乔木枝条、叶和/或果实5kg，粗粉碎至20目，用100%的乙醇超声提取2次，每次50min，提取液合并；提取液过滤，减压浓缩至体积的1/3；静置，滤除沉淀物，浓缩成450g浸膏a；在浸膏a中加入450g的水，用与水等体积的氯仿萃取3次，合并萃取相，减压浓缩成258g浸膏b；用160目硅胶2064g装柱，在浸膏b中加入774g的丙酮溶解，然后加入80目硅胶213g拌样，拌样后上柱；用体积比分别为1:0、20:1、9:1、8:2、3:2、1:1、1:2、0:1的正己烷-丙酮混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；体积比9:1的正己烷-丙酮混合有机溶剂的洗脱液c为69g；用反相材料C-18装柱，洗脱液c上反相柱，以体积含量为20~100%的甲醇水溶液进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液并浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；取以体积含量50~70%甲醇水溶液洗脱得到的洗脱液，再以60%的甲醇为流动相，流速14ml/min，21.2×250mm，5μm的ZorbaxPrepHTGF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254nm，每次进样45μL，收集17min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的联苯类化合物1。收集25min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的联苯类化合物2。
实施例3
取干燥的藤黄属乔木枝条、叶和/或果实6kg，粗粉碎至30目，用80%的甲醇超声提取4次，每次30min，提取液合并；提取液过滤，减压浓缩至体积的1/2；静置，滤除沉淀物，浓缩成580g浸膏a；在浸膏a中加入1118g的水，用与水等体积的乙醚萃取4次，合并萃取相，减压浓缩成340g浸膏b；用180目硅胶2391g装柱，在浸膏b中加入670g的丙酮溶解，然后加入90目硅胶410.4g拌样，拌样后上柱；用体积比分别为1:0、20:1、9:1、8:2、3:2、1:1、1:2、0:1的氯仿-丙酮混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；体积比9:1的氯仿-丙酮混合有机溶剂的洗脱液c为63g；用反相材料C-18装柱，洗脱液c上反相柱，以体积含量为20~100%的甲醇水溶液进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液并浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；取以体积含量50~70%甲醇水溶液洗脱得到的洗脱液，再以65%的甲醇为流动相，流速12ml/min，21.2×250mm，5μm的ZorbaxPrepHTGF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254nm，每次进样50μL，收集13min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的联苯类化合物1；收集26min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的联苯类化合物2。
实施例4
取实施例1制备的化合物1，为淡黄色胶状物；测定方法为：用核磁共振，结合其它波谱技术鉴定结构。
（1）紫外光谱（溶剂为甲醇），λ max（logε）：570(2.32);205(4.36)nm；
（2）红外光谱（溴化钾压片）ν max3430,2926,2930,1720,1609,1578,1495,1442,1351,1263,1178,1109,1049,1020,830cm–1；
（3）HRESIMS显示本发明化合物准分子离子峰m/z356.1274[M+Na]+（计算值为356.1260），结合13C和1HNMR谱（图1和图2，碳谱氢谱数据归属见表1）给出其分子式为C20H20O6。1HNMR（CD3OD，400MHz）和13CNMR（CD3OD，100MHz）数据，见表1。
化合物1的1H-NMR和13C-NMR谱显示乙酰氧基苯并吡喃环特征峰：烯氢原子δ H6.41(1H,d,J10.1Hz,H-1′)和δ H5.48(1H,d,J10.1Hz,H-2′),δ C124.7(C-1′),124.4(C-2′)。一个甲基δ H1.47(s,Me-5′)和δ C23.4(C-5′)。一个被氧化的亚甲基δ H4.27,4.14(2H,d,J11.5Hz,H-4′)和δ C69.0(C-4′)，一个被氧化的季碳77.6(C-3′)，以及一个乙酰氧基δ H2.00(s,OAc)和δ C172.6/20.7。13C-NMR谱中显示12个芳香碳原子信号δ C132.4(C-1),114.2(C-2),142.0(C-3),131.9(C-4),149.6(C-5),106.6(C-6),134.6(C-7),131.8(C-8,C-12),116.0(C-9,C-11),157.7(C-10)，这表明联苯结构的存在。HMBC谱中H-6与C-7(δ C134.6)相关，H-8和H-12与C-1相关，这进一步证明了联苯结构。HMBC谱中H-1′(δ H6.41)与C-1(δ C132.4)，C-2(δ C114.2)，和C-3(δ C142.0)相关，H-2′(δ H5.48)与C-2相关，这说明吡喃环与苯环在C-2和C-3相连。HMBC谱中OMe(δ H3.85)与C-5(δ C149.6)相关，说明C-5处为甲氧基取代。HMBC谱中一个1,2,3,4,5-pentasubstituted苯环的芳氢δ H6.44(s,H-6)与C-1(δ C132.4)，C-5，C-2(δ C114.2),和C-4(δ C131.9)相关，说明C-4为羟基取代。氢谱显示两对邻位偶合氢原子δ H7.11(dd,J8.4,1.9,H-8,12)和6.82(dd,J8.4,1.9,H-9,11)，说明另一个苯环为对位取代。根据化合物的分子式和氢谱、碳谱信号，C-10位也有一个羟基取代。因此，化合物1的结构得到确定,命名为multibiphenylB.
实施例5
取实施例1制备的化合物2，为淡桔黄色胶状物；测定方法为：用核磁共振，结合其它波谱技术鉴定结构。
（1）紫外光谱（溶剂为甲醇），λ max（logε）：570(1.76),266(3.70),226(3.80),204(3.98)nm；
（2）红外光谱（溴化钾压片）ν max3423,2973,2931,1612,1494,1446,1418,1369,1346,1319,1252,1220,1169,1150,1113cm–1；
（3）HRESIMS显示本发明化合物准分子离子峰m/z300.1360[M+Na]+（计算值为300.1362），结合13C和1HNMR谱（图3和图4，碳谱氢谱数据归属见表1）给出其分子式为C18H20O4。1HNMR（CDC13，400MHz）和13CNMR（CDC13，100MHz）数据，见表1。
化合物2的UV、IR、NMR谱与化合物1的很相似。高分辨质谱分子离子峰[M]+为m/z300.1360说明其分子式为C18H20O4,不饱和度为9。经过仔细比对，发现这两个化合物的区别在于化合物缺少一个乙酰氧基和一个双键。说明与化合物1相比，化合物2中C-4′没有乙酰氧基取代，而且C-1′和C-2′之间的双键被还原。因此，化合物2的结构得到确定,命名为multibiphenylC.
实施例6
取实施例2制备的化合物1，为黄色胶状物；按实施例4中的方法进行结构测定，结果为：其结构同实施例6，分子式为C20H20O6。确认实施例2制备的化合物为所述的联苯类化合物multibiphenylB。
实施例7
取实施例2制备的化合物2，为淡桔黄色胶状物；按实施例5中的方法进行结构测定，结果为：其结构同实施例5，分子式为C18H20O4。确认实施例2制备的化合物为所述的联苯类化合物multibiphenylC。
表1化合物的1H和13CNMR数据(δinppm,1inCD3OD,2inCDC13,100and400MHz)
实施例8
取实施例3制备的化合物1，为黄色胶状物；按实施例4中的方法进行结构测定，结果为：其结构同实施例6，分子式为C20H20O6。确认实施例3制备的化合物为所述的联苯类化合物multibiphenylB。
实施例9
取实施例3制备的化合物2，为淡桔黄色胶状物；按实施例5中的方法进行结构测定，结果为：其结构同实施例5，分子式为C18H20O4。确认实施例3制备的化合物为所述的联苯类化合物multibiphenylC。
实施例10
取实施例1~3所制备的任一联苯类化合物进行抗病毒活性检测试验，试验情况如下：
用人轮状病毒细胞Wa株体外感染恒河猴胚肾MA104传代细胞，利巴韦林用作阳性对照测得化合物的CC50和EC50。恒河猴胚肾MA104传代细胞以DMEM培养基，在96孔微量培养板中(1×105cellsperwell)，37℃，50ml·L-1CO2孵箱培养，48小时后换液，移去原来的培养基，加入含有系列浓度化合物的新培养基，72小时后，弃培养基，加入5μL的3-(4,5-dimethylthiozol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide(MTT)solution，37oC继续孵育4小时，弃MTT溶液，加入100μL的0.04molL-1HCl-isopropanol以溶解formazan晶体。放置过夜后用酶标仪在655nm波长下测定各孔的OD值，各化合物的50%cytotoxicconcentration(CC50)用回归分析得到。
在混合处理实验中，每个化合物以不同浓度(1–160μgmL-1)与感染复数为0.01的轮状病毒在4oC孵育1小时。混合物加入96孔微量板中已长成单层的MA104细胞(1×105cellsperwell)进行接种，每孔接种50μl，每个稀释度接种3孔，37℃，50ml·L-1CO2孵箱中吸附1小时，弃去接种液，加入含1μgmL-1trypsin的EMEM培养基，37℃，50ml·L-1CO2孵箱继续孵育72小时，至对照组细胞出现病变现象viralcytopathiceffect(CPE)，各化合物的50%effectiveconcentration(EC50)用回归分析得到。
表2.Anti-rotavirusActivityofcompounds12.a
aAllresultsareexpressedasmean±SD;n=3
CC50:mean(50%)valueofcytotoxicconcentration.
EC50:mean(50%)valueofeffectiveconcentration.
TI:治疗指数,CC50/EC50。

Claims (7)

1.一种联苯类化合物，其特征在于所述的联苯类化合物是以干燥的藤黄属乔木枝条、叶或果实为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离得到化合物1和化合物2，所述的化合物1中C-1'和C-2'之间是碳碳双键，所述的化合物2中C-1'和C-2'之间是碳碳单键，分子式分别为C20H20O6和C18H20O4，分别具有下述结构式：
。
2.一种权利要求1所述的联苯类化合物的制备方法，其特征在于是以干燥的藤黄属乔木枝条、叶或果实为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离获得，具体为：
A、浸膏提取：将藤黄属乔木枝条、叶或果实粗粉碎到20~40目，用有机溶剂超声提取2~4次，每次30~60min，提取液合并；提取液过滤，减压浓缩提取液至1/4~1/2体积时，静置，滤除沉淀物，浓缩成浸膏a；
B、有机溶剂萃取：浸膏a中加入重量比1~2倍量的水，用与水等体积的有机溶剂萃取3~5次，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏b；
C、硅胶柱层析：将浸膏b用重量比1.5~3倍量的丙酮溶解，然后用浸膏重0.8~1.2倍的80~100目硅胶拌样，然后上硅胶柱层析，装柱硅胶为160~200目，用量为浸膏b重量6~8倍量；用体积比为1:0~0:1的混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；
D、反相柱层析：将以9:1配比的有机溶剂进行洗脱得到的洗脱液上反相柱层析，反相柱是用反相材料C-18装柱；用体积含量为20~100%的甲醇水溶液进行梯度洗脱，收集各部分洗脱液并浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；
E、高效液相色谱分离：将以体积含量45~85%甲醇水溶液洗脱得到的洗脱液经高效液相色谱分离纯化，即得所述的联苯类化合物1和化合物2；
F、E步骤所述的高效液相色谱分离纯化是以50~70%的甲醇为流动相，流速10~14ml/min，21.2×250mm，5μm的ZorbaxPrepHTGF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254nm，每次进样45~60μL，收集15~35min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的联苯类化合物1；
G、E步骤所述的高效液相色谱分离纯化是以50~70%的甲醇为流动相，流速10~14ml/min，21.2×250mm，5μm的ZorbaxPrepHTGF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254nm，每次进样45~60μL，收集35~50min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的联苯类化合物2。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于A步骤中所述的有机溶剂为70~100%的丙酮、乙醇或甲醇。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于B步骤中所述的有机溶剂为乙酸乙酯、氯仿、乙醚、石油醚或苯。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于C步骤中所述的混合有机溶剂为正己烷-丙酮、氯仿-丙酮、氯仿-甲醇、石油醚-丙酮或石油醚-乙酸乙酯。
6.根据权利要求2或5所述的制备方法，其特征在于C步骤中所述的混合有机溶剂的体积配比为1:0、20:1、9:1、8:2、3:2、1:1、1:2、0:1。
7.一种权利要求1所述的联苯类化合物的应用，其特征在于所述的联苯类化合物在制备抗病毒药物中的应用。
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106831365A (zh) * 2016-12-27 2017-06-13 云南民族大学 一种羟基甲氧基取代联苯类化合物及其制备方法和应用
CN107056743A (zh) * 2016-11-21 2017-08-18 云南民族大学 一种缩酚酸环醚化合物及其制备方法和应用
CN109053447A (zh) * 2018-08-06 2018-12-21 云南民族大学 一种异戊烷基取代联苯类化合物及其制备方法和应用
CN109485570A (zh) * 2018-08-06 2019-03-19 云南民族大学 一种异戊烯基取代联苯类化合物及其制备方法和应用
CN109485569A (zh) * 2018-08-06 2019-03-19 云南民族大学 一种乙酰氧基异戊烯基取代联苯类化合物及其制备方法和应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002047180A (ja) * 2000-08-02 2002-02-12 Lotte Co Ltd シクロオキシゲナーゼ阻害剤及びそれを含有する飲食品
KR20090022070A (ko) * 2007-08-29 2009-03-04 한국화학연구원 2-메틸-2'-하이드록시메틸-6-아미도 벤조피란 유도체 및약제학적으로 허용 가능한 그의 염, 그의 제조방법, 그를유효성분으로 함유하는 산화스트레스 억제용 조성물 및그를 이용한 약리학적인 용도
CN104262308A (zh) * 2014-08-06 2015-01-07 云南中烟工业有限责任公司 一种骈六元环联苯类化合物及其制备方法和应用
CN104761525A (zh) * 2015-04-10 2015-07-08 云南民族大学 一种黄酮类化合物及其制备方法与应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002047180A (ja) * 2000-08-02 2002-02-12 Lotte Co Ltd シクロオキシゲナーゼ阻害剤及びそれを含有する飲食品
KR20090022070A (ko) * 2007-08-29 2009-03-04 한국화학연구원 2-메틸-2'-하이드록시메틸-6-아미도 벤조피란 유도체 및약제학적으로 허용 가능한 그의 염, 그의 제조방법, 그를유효성분으로 함유하는 산화스트레스 억제용 조성물 및그를 이용한 약리학적인 용도
CN104262308A (zh) * 2014-08-06 2015-01-07 云南中烟工业有限责任公司 一种骈六元环联苯类化合物及其制备方法和应用
CN104761525A (zh) * 2015-04-10 2015-07-08 云南民族大学 一种黄酮类化合物及其制备方法与应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHIHIRO ITO ET AL.: "Biphenyl Derivatives from Garcinia schomburgkiana and the Cytotoxicity of the Isolated Compounds", 《NATURAL PRODUCT COMMUNICATIONS》 *
丁骁等: "藤黄科植物化学成分的研究概况", 《化学工程与装备》 *

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107056743A (zh) * 2016-11-21 2017-08-18 云南民族大学 一种缩酚酸环醚化合物及其制备方法和应用
CN107056743B (zh) * 2016-11-21 2019-09-13 云南民族大学 一种缩酚酸环醚化合物及其制备方法和应用
CN106831365A (zh) * 2016-12-27 2017-06-13 云南民族大学 一种羟基甲氧基取代联苯类化合物及其制备方法和应用
CN106831365B (zh) * 2016-12-27 2020-11-24 云南民族大学 一种羟基甲氧基取代联苯类化合物及其制备方法和应用
CN109053447A (zh) * 2018-08-06 2018-12-21 云南民族大学 一种异戊烷基取代联苯类化合物及其制备方法和应用
CN109485570A (zh) * 2018-08-06 2019-03-19 云南民族大学 一种异戊烯基取代联苯类化合物及其制备方法和应用
CN109485569A (zh) * 2018-08-06 2019-03-19 云南民族大学 一种乙酰氧基异戊烯基取代联苯类化合物及其制备方法和应用
CN109053447B (zh) * 2018-08-06 2021-04-06 云南民族大学 一种异戊烷基取代联苯类化合物及其制备方法和应用
CN109485570B (zh) * 2018-08-06 2021-04-09 云南民族大学 一种异戊烯基取代联苯类化合物及其制备方法和应用
CN109485569B (zh) * 2018-08-06 2021-05-18 云南民族大学 一种乙酰氧基异戊烯基取代联苯类化合物及其制备方法和应用

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