CN105101816A - 含铜酵母萃取物及其制造方法、以及食品、及蔬菜的绿色保持复原剂 - Google Patents
含铜酵母萃取物及其制造方法、以及食品、及蔬菜的绿色保持复原剂 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种含铜酵母萃取物的制造方法、及含铜酵母萃取物、以及食品、及蔬菜的绿色保持复原剂，所述含铜酵母萃取物的制造方法包括萃取步骤，该步骤是使含有铜的酵母悬浮在包含氨基酸或其盐的溶液中，并将所获得的悬浮液的固体成分与液体成分进行分离，所述氨基酸或其盐为水溶性。
Description
技术领域
本发明涉及一种含铜酵母萃取物及其制造方法、以及食品、及蔬菜的绿色保持复原剂。
背景技术
关于铜，根据近来日本厚生劳动省所发表的数据，成人男性每天的推算平均必需量约为0.7mg(成人女性约为0.6mg)，如果身体内缺乏铜，则有可能引起贫血或心脏疾病等(参照非专利文献1)。因此，必须开发出可高效率地将铜摄取或吸收至身体内而可改善由缺铜引起的贫血、心脏疾病等的流质食品、饮料等安全食品原材料。
另一方面，酵母自古被人类用作食品原材料，例如也可将啤酒酵母用作食物纤维、维生素或矿物质成分的供给源。尤其认为菌体内摄入铜的酵母(含铜酵母)或其萃取物可用作补充铜的安全食品原材料。
然而，在以往的含铜酵母中，酵母臭等独特的臭味及酵母味等独特的味道没有得到充分地降低，因此在食品用途中并不充分令人满意。
为了解决所述问题，想到采用自所述含铜酵母萃取的含铜酵母萃取物。此前，在含有铜等矿物质的酵母的萃取中，可使用(1)热水萃取法、(2)自我消化法、(3)酶分解法等(参照非专利文献2)。然而，所述(1)～(3)的方法有矿物质的回收率(以下，有时称为“萃取率”)低的问题。现状是矿物质中，尤其是铜的萃取率低，从而强烈要求开发出可提高铜萃取率的技术。
现有技术文献
非专利文献
非专利文献1：“日本人的食物摄取基准2010年版”日本厚生劳动省“日本人的食物摄取基准”制定研究会报告书，第一出版股份有限公司，p.231-p.233，附录XLIX(2010年)
非专利文献2：杉本洋“酵母萃取物制造法的变迁(I)-根据国内的专利申请的倾向-”NewFoodIndustry1994,Vol.36,No.10,p.41-48
发明内容
[发明要解决的问题]
本发明的课题在于：根据此种要求，打破现状，解决所述的以往的各种问题，而达成以下的目标。即，本发明的目的在于提供一种可自含有铜的酵母以高萃取率而萃取铜的含铜酵母萃取物的制造方法、通过该制造方法而获得的含铜酵母萃取物、以及包含该含铜酵母萃取物的食品、及蔬菜的绿色保持复原剂。
[解决问题的技术手段]
作为用以解决所述课题的方法，如下所述。即，
＜1＞一种含铜酵母萃取物的制造方法，其特征在于：包括萃取步骤，该步骤是使含有铜的酵母悬浮在包含氨基酸或其盐的溶液中，并将所获得的悬浮液的固体成分与液体成分进行分离，
所述氨基酸或其盐为水溶性。
＜2＞根据所述＜1＞记载的含铜酵母萃取物的制造方法，其中萃取步骤中所获得的萃取液的pH值为小于4.0、及大于7.0且小于11.0中的任一值。
＜3＞根据所述＜1＞或＜2＞记载的含铜酵母萃取物的制造方法，其中氨基酸或其盐为选自组氨酸或其盐、甘氨酸或其盐、苏氨酸或其盐、及谷氨酸或其盐中的至少1种。
＜4＞根据所述＜1＞至＜3＞中任一项记载的含铜酵母萃取物的制造方法，其中氨基酸或其盐包含组氨酸或其盐。
＜5＞根据所述＜1＞至＜4＞中任一项记载的含铜酵母萃取物的制造方法，其中氨基酸或其盐包含组氨酸或其盐、与选自甘氨酸或其盐、苏氨酸或其盐、及谷氨酸或其盐中的至少1种。
＜6＞根据所述＜1＞至＜5＞中任一项记载的含铜酵母萃取物的制造方法，其包含利用细胞壁分解酶对含有铜的酵母进行处理的步骤。
＜7＞根据所述＜1＞至＜6＞中任一项记载的含铜酵母萃取物的制造方法，其中下述式所表示的铜的萃取率为40％以上，
铜萃取率(％)＝{萃取物中的铜总量(质量)/萃取所使用的酵母所含的铜总量(质量)}×100。
＜8＞根据所述＜7＞记载的含铜酵母萃取物的制造方法，其中铜的萃取率为50％以上。
＜9＞根据所述＜1＞至＜8＞中任一项记载的含铜酵母萃取物的制造方法，其在萃取步骤前包括热水处理步骤，该步骤是使酵母悬浮在60℃～120℃的热水中，并将所获得的悬浮液的固体成分与液体成分进行分离。
＜10＞根据所述＜9＞记载的含铜酵母萃取物的制造方法，其中在热水处理步骤中，向热水添加磷酸盐。
＜11＞一种含铜酵母萃取物，其特征在于：其是通过所述＜1＞至＜10＞中任一项记载的含铜酵母萃取物的制造方法而制造。
＜12＞根据所述＜11＞记载的含铜酵母萃取物，其中酵母为食用酵母。
＜13＞根据所述＜12＞记载的含铜酵母萃取物，其中食用酵母为选自面包酵母、啤酒酵母、葡萄酒酵母、清酒酵母及味噌酱油酵母中的至少1种。
＜14＞根据所述＜12＞记载的含铜酵母萃取物，其中食用酵母为酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)。
＜15＞根据所述＜11＞至＜14＞中任一项记载的含铜酵母萃取物，其可添加至食品中而使用。
＜16＞一种食品，其特征在于：包含所述＜11＞至＜15＞中任一项记载的含铜酵母萃取物。
＜17＞一种蔬菜的绿色保持复原剂，其特征在于：包含所述＜11＞至＜15＞中任一项记载的含铜酵母萃取物。
[发明的效果]
根据本发明，可解决所述的以往的问题，能够提供可自含有铜的酵母以高萃取率而萃取铜的含铜酵母萃取物的制造方法、通过该制造方法而获得的含铜酵母萃取物、以及包含该含铜酵母萃取物的食品、及蔬菜的绿色保持复原剂。
附图说明
图1是表示试验例1的结果的图表。
图2是表示试验例2-1至2-4的结果的图表。
图3是表示试验例3-1及3-2的结果的图表。
图4是表示试验例4-1-1～4-3-2的结果的图表。
图5A是表示试验例8中的LevelUpV8Clear的结果的图。
图5B是表示试验例8中的组氨酸盐酸盐萃取物的结果的图。
图5C是表示试验例8中的甘氨酸萃取物的结果的图。
图5D是表示试验例8中的苏氨酸盐酸盐萃取物的结果的图。
图5E是表示试验例8中的谷氨酸盐酸盐萃取物的结果的图。
具体实施方式
(含铜酵母萃取物的制造方法)
本发明的含铜酵母萃取物的制造方法包括萃取步骤，根据需要还包括酶处理步骤、热水处理步骤、干燥步骤等其他步骤。
＜萃取步骤＞
所述萃取步骤是如下步骤：使含有铜的酵母悬浮在包含氨基酸或其盐的溶液中，并将所获得的悬浮液的固体成分与液体成分进行分离。通过所述萃取步骤，可获得含有铜的液体成分(以下，有时称为“萃取液”)。
＜＜酵母＞＞
所述酵母只要在菌体内含有铜，则没有特别限制，可根据需要适当选择。作为所述酵母中的铜含量，在使用含铜酵母萃取物作为铜强化食品原材料等的情况下，越多越好，就酵母中的铜的掺入极限、及有效率地制造含铜酵母萃取物的观点而言，干燥菌体每单位质量优选为0.01质量％～10质量％，更优选0.5质量％～2质量％。
此处，所述所谓铜含量，是指酵母菌体内的铜含量，例如优选即便为利用水等进行过清洗的菌体，在清洗后仍维持铜含量较高。此种酵母由于即便进行清洗，所述铜仍不会被去除而保持在菌体内部，所以为源自菌体的铜而安全性高，在进行过用以减少酵母特有的臭味或味道的热水处理(清洗)的情况下不会损害所添加的食品的味道等，而且以高浓度含有所述铜，所以适合作为食品原材料等。
此外，所述酵母中的铜含量可通过公知的方法进行测定，例如可通过原子吸光法而进行测定。
所述含有铜的酵母也可通过向培养液添加铜并培养酵母，使铜掺入至酵母菌体内而制作，也可使用市售品。作为市售品，例如可列举：矿物质酵母Cu1、酵母矿物质铜(以上为东方酵母工业(OrientalYeast)股份有限公司制造)等。
所述含有铜的酵母也可进一步加以破碎。即便在所述酵母为破碎物的情况下，仍然是铜含量越多越好，关于利用水等对破碎物进行清洗而获得的沉淀组分中的干燥菌体每单位质量的铜含量，优选进行破碎前的菌体中的干燥菌体每单位质量的铜含量的70质量％以上，更优选80质量％以上，尤其优选90质量％以上。
此外，作为所述破碎的方法，没有特别限制，可根据目的适当选择，例如可为物理破碎处理，也可为化学破碎处理，具体而言，可适宜地列举使用将0.5mm直径的珠粒50容量％填充至滚筒中的戴诺球磨机(DynoMill)的方法等。
另外，作为所述含有铜的酵母的形态，没有特别限制，可根据目的适当选择，例如可列举：湿菌体的形态、粉末的形态等。
所述酵母除铜以外，还可含有其他矿物质成分，作为该矿物质成分，没有特别限制，可根据目的适当选择，例如可列举：铁、镁、锰、锌等。这些矿物质成分可在酵母中单独含有1种，也可在酵母中含有2种以上，另外，作为所含的浓度，根据目的而不同，无法一概而定，通常优选高浓度。
作为所述酵母，在使用所述含铜酵母萃取物作为食品原材料等的情况下，尤其优选食用酵母。
作为所述食用酵母，没有特别限制，可自公知的食用酵母中进行选择，例如可列举：面包酵母、啤酒酵母、葡萄酒酵母、清酒酵母、味噌酱油酵母等。这些中，尤其优选面包酵母。
作为所述食用酵母的菌株，没有特别限制，可根据目的适当选择，例如可列举：酵母(Saccharomyces)属、球拟酵母(Torulopsis)属、假丝酵母(Mycotorula)属、孢圆酵母(Torulaspora)属、念珠酵母(Candida)属、红酵母(Rhodotorula)属、毕赤氏酵母(Pichia)属等。
作为所述食用酵母的菌株的具体例，可列举：酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、卡尔酵母(Saccharomycescarlsbergensis)、葡萄汁酵母(Saccharomyces uvarum)、鲁氏酵母(Saccharomycesrouxii)、球拟酵母(Torulopsisutilis)、白球拟酵母(Torulopsiscandida)、日本假丝酵母(Mycotorulajaponica)、解脂假丝酵母(Mycotorulalipolytica)、戴尔凯氏孢圆酵母(Torulasporadelbrueckii)、发酵性戴尔凯氏孢圆酵母(Torulasporafermentati)、清酒念珠菌(Candidasake)、热带念珠菌(Candidatropicalis)、产蛋白念珠菌(Candidautilis)、异常汉森酵母(Hansenula anomala)、汉森酵母(Hansenulasuaveolens)、扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibligera)、解脂酵母(Saccharomyceslipolytica)、深红酵母(Rhodotorularubra)、粉状毕赤酵母(Pichiafarinosa)等。
这些中，优选酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、卡尔酵母(Saccharomyces carlsbergensis)，尤其优选酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)。
＜＜氨基酸或其盐＞＞
作为所述氨基酸或其盐，只要为水溶性，则没有特别限制，可根据目的适当选择。
所谓所述水溶性，是指在20±5℃的水中溶解1质量％以上的溶解性。
作为所述氨基酸或其盐的具体例，可列举：组氨酸或其盐、甘氨酸或其盐、苏氨酸或其盐、谷氨酸或其盐、赖氨酸或其盐、精氨酸或其盐、丙氨酸或其盐、缬氨酸或其盐、脯氨酸或其盐、丝氨酸或其盐、半胱氨酸或其盐等。这些中，就铜萃取率更优异的方面而言，优选组氨酸或其盐、甘氨酸或其盐、苏氨酸或其盐、谷氨酸或其盐，更优选组氨酸或其盐。
作为所述盐，没有特别限制，可根据目的适当选择，例如可列举：盐酸盐、钠盐等。
所述氨基酸或其盐可单独使用1种，也可并用2种以上。另外，所述氨基酸或其盐可使用其中一者，也可使用两者。
作为使用多种所述氨基酸或其盐的形态，没有特别限制，可根据目的适当选择，就铜萃取率更优异，另外制造成本优异的方面而言，优选并用组氨酸或其盐、与选自甘氨酸或其盐、苏氨酸或其盐、及谷氨酸或其盐中的至少1种的形态。
作为所述并用的形态中的所述组氨酸或其盐、与选自所述甘氨酸或其盐、苏氨酸或其盐、及谷氨酸或其盐中的至少1种的比率，没有特别限制，可根据目的适当选择。
作为所述悬浮液中的所述氨基酸或其盐的量，没有特别限制，可根据目的适当选择，优选10mmol/L以上，更优选10mmol/L～200mmol/L。
作为包含所述氨基酸或其盐的溶液所使用的溶剂，没有特别限制，可根据目的适当选择，通常为水，也可为该水与醇等有机溶剂的混合溶液。
所述悬浮液中也可含有所述氨基酸或其盐以外的其他成分。作为所述其他成分，只要无损本发明的效果，则没有特别限制，可根据目的适当选择，例如可列举：羧酸或其盐等。
作为所述羧酸或其盐，没有特别限制，可根据目的适当选择，柠檬酸或其盐在通过与所述氨基酸或其盐进行组合而可提高铜的萃取率的方面优选。
作为所述柠檬酸的盐，没有特别限制，可根据目的适当选择，例如可列举柠檬酸三钠等。
作为所述羧酸或其盐的使用量，只要无损本发明的效果，则没有特别限制，可根据目的适当选择。
作为包含所述氨基酸或其盐的溶液的pH值，没有特别限制，可根据目的适当选择，优选设为与下述的萃取液的优选pH值对应的pH值。作为调整包含所述氨基酸或其盐的溶液的pH值的方法，可适当选择公知的方法。
作为所述悬浮液的pH值，没有特别限制，可根据目的适当选择，优选设为与下述的萃取液的优选pH值对应的pH值。作为调整所述悬浮液的pH值的方法，可适当选择公知的方法。
作为所述萃取步骤中的萃取时间，没有特别制限，可根据目的适当选择，就铜萃取率的观点而言，优选5分钟以上，更优选5分钟～24小时。
作为所述萃取步骤中的悬浮液的温度，没有特别限制，可根据目的适当选择，就铜萃取率的观点而言，优选10℃以上，更优选10℃～110℃。
作为所述萃取步骤中的铜萃取率(以下，也有时称为“铜溶出率”)，没有特别限制，可根据目的适当选择，越高越优选，优选40％以上，更优选50％以上，尤其优选60％以上。
所述铜萃取率可通过下述式而求出。
铜萃取率(％)＝{萃取物中的铜总量(质量)/萃取所使用的酵母所含的铜总量(质量)}×100
＜＜悬浮＞＞
作为使所述酵母悬浮在包含所述氨基酸或其盐的溶液中的方法，没有特别限制，可使用公知的搅拌方法或振荡方法。
另外，在所述萃取步骤中，也可将所述悬浮液进一步进行振荡。作为所述振荡的条件，没有特别限制，可根据目的适当选择。
＜＜固体成分与液体成分的分离＞＞
作为将所述悬浮液的固体成分与液体成分加以分离的方法，没有特别限制，可根据目的适当选择，例如可列举：过滤分离、离心分离等。
作为所述过滤的方法，没有特别限制，可适当选择公知的过滤装置而进行，例如可使用压滤机、管路过滤器等。此外，也可将这些并用。
作为所述离心分离的方法，没有特别限制，可适当选择公知的离心装置而进行。另外，作为所述离心的条件，也没有特别限制，可根据所述悬浮液的量而适当选择，例如可列举设为如下条件，即在所述悬浮液的量为5mL的情况下，以3,000rpm离心5分钟。
作为所述萃取步骤中所获得的萃取液的pH值，没有特别限制，可根据所使用的氨基酸或其盐而适当选择，就铜的萃取效率的观点而言，优选小于4.0、及大于7.0且小于11.0中的任一值。
作为在使用组氨酸或其盐作为所述氨基酸或其盐的情况下的所述萃取液的pH值，优选小于4.0、及大于7.0且小于11.0中的任一值，更优选大于7.0且10.0以下，尤其优选8.0以上且9.5以下。
作为在使用甘氨酸或其盐作为所述氨基酸或其盐的情况下的所述萃取液的pH值，优选小于4.0、及大于7.0且小于11.0中的任一值，更优选3.0以下、及大于7.0且10.0以下中的任一值，尤其优选2.3以下。
作为在使用苏氨酸或其盐作为所述氨基酸或其盐的情况下的所述萃取液的pH值，优选小于4.0、及大于7.0且小于11.0中的任一值，更优选2.7以下、及大于7.0且10.9以下中的任一值，尤其优选2.0以下、及8.0以上且9.5以下中的任一值。
作为在使用谷氨酸或其盐作为所述氨基酸或其盐的情况下的所述萃取液的pH值，优选小于4.0、及大于7.0且小于11.0中的任一值，更优选3.3以下、及大于7.0且10.3以下中的任一值，尤其优选3.0以下、及8.5以上且10.0以下中的任一值。
所述萃取步骤中的各溶液的pH值在悬浮到萃取的期间发生变化。因此，所述萃取步骤中的各溶液的pH值优选以成为所述萃取液的优选pH值的方式适当进行调整。
＜其他步骤＞
作为所述其他步骤，只要无损本发明的效果，则没有特别限制，可根据目的适当选择，例如可列举：酶处理步骤、热水处理步骤、干燥步骤、浓缩步骤、稀释步骤等。这些中，优选包括酶处理步骤、热水处理步骤。
＜＜酶处理步骤＞＞
所述酶处理步骤是利用细胞壁分解酶对所述含有铜的酵母进行处理的步骤。可通过进行所述酶处理步骤，而进一步提高铜的萃取率。
作为进行所述酶处理步骤的时期，没有特别限制，可根据目的适当选择，可在所述萃取步骤前进行，也可与所述萃取步骤同时进行，也可在所述萃取步骤后进行。
-细胞壁分解酶-
作为所述细胞壁分解酶，没有特别限制，可根据目的适当选择，例如可列举：β-葡聚醣酶、蛋白酶等。这些中，β-葡聚醣酶在使萃取物对溶剂的泄漏变容易的方面有利。
所述细胞壁分解酶可单独使用1种，也可并用2种以上。
作为所述细胞壁分解酶的使用量，没有特别限制，可根据目的适当选择，优选4.05YsU/mL～405.0YsU/mL。
所谓所述YsU，是活性度单位，将在35℃下作用于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)IFO0309的冷冻干燥菌体1mg时，使反应液的浊度每分钟下降1％的酶量设为酵母细胞壁溶解力1单位(YsU)。
所述酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)IFO0309可自公益财团法人发酵研究所获取。
作为所述酶处理的温度、pH值、及时间，没有特别限制，可根据所使用的细胞壁分解酶而适当选择。
＜＜热水处理步骤＞＞
所述热水处理步骤是如下步骤：在所述萃取步骤前，使含有铜的酵母悬浮在60℃～120℃的热水中，并将所获得的悬浮液的固体成分与液体成分进行分离。在所述萃取步骤前，进行所述热水处理步骤，由此可减少酵母特有的臭味及味道(酵母臭、酵母味)，所获得的含铜酵母萃取物在添加至食品等中时无损食品等的味道的方面优选。
作为所述热水的温度，没有特别限制，可根据目的适当选择，就在热水的温度越高，酵母臭及酵母味的减少效果越高的方面而言，优选80℃～120℃，更优选95℃～120℃。
作为使所述酵母悬浮的方法及将所获得的悬浮液的固体成分与液体成分进行分离的方法，没有特别限制，可列举：与所述的萃取步骤相同的方法。
在所述热水处理步骤中，为了减少酵母特有的臭味及味道，优选向热水中添加促进酵母臭或酵母味的提取(除去)的提取促进剂。作为所述提取促进剂，只要不对接下来的萃取步骤中的铜的萃取率产生不良影响，则没有特别限制，可根据目的适当选择，就在提取酵母臭的效果高，在热水步骤中不易萃取铜的方面而言，优选磷酸盐。
作为所述提取促进剂的添加量，没有特别限制，可根据目的适当选择，相对于干燥酵母菌体每单位质量，优选为5质量％～50质量％，更优选20质量％～50质量％。
＜＜干燥步骤、浓缩步骤、稀释步骤＞＞
所述干燥步骤是使所述含铜酵母萃取物进行干燥的步骤。
作为所述干燥的方法，没有特别限制，可根据目的适当选择，例如可使用喷雾干燥器L-8(大川原化工机股份有限公司制造)而进行。由此，可获得含有铜的酵母萃取固体(粉体)。此外，制成所述固体时，也可适当含有糊精等赋形剂。
所述浓缩步骤是将所述含铜酵母萃取物进行浓缩的步骤，所述稀释步骤是将所述含铜酵母萃取物进行稀释的步骤。
作为所述浓缩及稀释的方法，没有特别限制，可适当选择使用公知的方法。
(含铜酵母萃取物)
本发明的含铜酵母萃取物是通过本发明的含铜酵母萃取物的制造方法而制造。
所述含铜酵母萃取物是通过所述含铜酵母萃取物的制造方法而制造，因此以高浓度含有源自天然物的铜。另外，所述含铜酵母萃取物在水中的溶解性也优异。
作为所述含铜酵母萃取物中的铜含量，没有特别限制，可根据目的适当选择，优选0.2质量％以上，更优选0.5质量％以上，尤其优选0.8质量％以上。
作为所述含铜酵母萃取物的形态，没有特别限制，可根据目的适当选择，可为通过所述萃取步骤而获得的液体(滤液、上清液等萃取液)，也可为粉末(powder)、粒子状、片状等固体，也可为凝胶状、浆液状等半固体。
＜用途＞
作为本发明的含铜酵母萃取物的用途，没有特别限制，可根据目的适当选择，优选作为添加至食品中而使用的食品原材料、饲料、饵料等的用途，尤其优选作为食品原材料的用途。所述食品原材料中，本发明的含铜酵母萃取物由于以高浓度含有源自天然物的铜，且在水中的溶解性也优异，所以优选流质食品、清凉饮料水。另外，作为其他用途，优选列举作为食品发酵培养基、蔬菜的绿色保持复原剂的用途。通过使用本发明的含铜酵母萃取物，可获得含铜食品、含铜饲料、含铜饵料等。
作为所述含铜酵母萃取物在使用时的形态，没有特别制限，可根据用途适当选择，可以干燥的粉末的状态(例如，通过喷雾干燥等使萃取物进行干燥而成的状态等)使用，也可以溶解于溶剂中而成的溶液的状态使用，也可以半固体的状态(例如，凝胶状、乳脂状的半固体等)使用。此外，作为用以制成所述使用形态的含铜萃取物的制备方法，没有特别限制，可使用公知装置等，依据公知方法而进行。
(食品)
本发明的食品包含本发明的含铜酵母萃取物，根据需要还包含其他成分。
此处，所谓所述食品，是指对人类健康造成危害的担忧较少，在通常社会生活中，通过口服或消化道投予而被摄取的食品，并不受行政区分上的食品、医药品、准药品等区分所限制，例如意指广泛包括口服摄取的一般食品、健康食品、保健功能食品、准药品、医药品等在内的食品。
作为所述食品的种类，没有特别限制，可根据目的适当选择，例如优选流质食品、面包、饼干、脆饼等点心、水产加工品、食肉加工品、面条类、味噌等调味料、加工蔬菜制品、果汁等饮料、冰淇淋等冰制食品、健康食品等，尤其优选流质食品、饮料。
作为所述食品中的所述含铜酵母萃取物的添加量，没有特别限制，可根据用途、目的等而适当选择。
作为所述其他成分，没有特别限制，可根据目的适当选择，例如可列举：制造食品时通常使用的辅助原料或添加物等。
作为所述辅助原料或添加物，没有特别限制，可根据目的适当选择，例如可列举：葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、山梨醣醇、甜菊糖、甜茶苷、玉米糖浆、乳糖、柠檬酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸、乳酸、L-抗坏血酸、dl-α-生育酚、异抗坏血酸钠、甘油、丙二醇、甘油脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、山梨糖醇酐脂肪酸酯、阿拉伯树胶、鹿角菜胶、酪蛋白、明胶、果胶、琼脂、维生素B类、烟碱酰胺、泛酸钙、氨基酸类、钙盐类、色素、香料、保存剂等。
作为所述其他成分的含量，没有特别限制，可根据目的适当选择。
(蔬菜的绿色保持复原剂)
本发明的蔬菜的绿色保持复原剂包含本发明的含铜酵母萃取物，根据需要还包含其他成分。
作为成为所述绿色保持复原剂的对象的蔬菜，只要为食用的绿色植物，则没有特别限制，可根据目的适当选择，例如可保持绿色蔬菜、茶叶等绿色植物的绿色，另外，可将已冷冻或冷藏的绿色蔬菜、已盐腌的绿色蔬菜、市售的腌制品等的已退色的绿色进行复原。
作为所述蔬菜的绿色保持复原剂中的所述含铜酵母萃取物的含量，没有特别限制，可根据目的适当选择。
作为所述蔬菜的绿色保持复原剂中的所述其他成分，没有特别限制，可根据目的适当选择，例如可列举：所述食品中的辅助原料或添加物等。
作为所述蔬菜的绿色保持复原剂中的所述其他成分的含量，没有特别限制，可根据目的适当选择。
作为所述蔬菜的绿色保持复原剂向蔬菜的添加量，没有特别限制，可根据目的适当选择。
实施例
以下，对本发明的试验例进行说明，但本发明并不受这些试验例的任何限定。
(试验例1：利用各种氨基酸或其盐所进行的铜的萃取)
对干物质量250mg的含铜酵母粉末(矿物质酵母Cu1，铜含量：11,422质量ppm，东方酵母工业(OrientalYeast)股份有限公司制造)添加100mmol/L的Tris-HCl(三羟甲基氨基甲烷盐酸盐)缓冲液(pH值7.6)2.5mL、及表1-1所示的100mmol/L的各氨基酸或其盐的溶液2.5mL(最终浓度50mmol/L)并进行搅拌，使含有铜的酵母悬浮而获得悬浮液。另外，作为对照，仅用水、100mmol/L的Tris-HCl缓冲液(pH值7.6)(以下，有时称为“缓冲液”)，以相同的方式获得悬浮液，进行与以下相同的试验。
将所述悬浮液在室温(25℃)下保温30分钟后，以3,000rpm离心分离5分钟。利用ICP发射光谱分析装置用过滤器将所获得的上清液进行过滤，将所获得的上清液采集至试验管，获得酵母萃取物，对其质量进行测定。另外，利用pH值测定计MP230(METTLERTOREDO公司制造)对所述酵母萃取物(以下，也有时称为“萃取液”)的pH值进行测定。
所述铜的萃取率是使用ICP发射光谱分析装置(Optima2100DV，珀金埃尔默(PerkinElmer)公司制造)，通过ICP发射光谱分析法对所述酵母萃取物中的铜含量进行测定，并根据下述式，算出溶出至萃取液中的铜的比率。将结果示于表1及图1。
铜萃取率(％)＝{萃取物中的铜总量(质量)/萃取所使用的酵母所含的铜总量(质量)}×100
[表1]
| 氨基酸或其盐的种类 | 萃取液的pH值 | 铜萃取率(％) |
| 水 | 5.4 | 10.8 |
| 缓冲液 | 7.3 | 21.7 |
| 组氨酸盐酸盐 | 5.6 | 57.6 |
| 甘氨酸 | 7.3 | 51.2 |
| 苏氨酸盐酸盐 | 7.2 | 42.2 |
| 谷氨酸盐酸盐 | 3.1 | 48.5 |
| 赖氨酸盐酸盐 | 7.2 | 36.4 |
| 精氨酸盐酸盐 | 7.1 | 29.8 |
图1中，“His”表示组氨酸盐酸盐的结果，“Gly”表示甘氨酸的结果，“Thr”表示苏氨酸盐酸盐的结果，“Glu”表示谷氨酸盐酸盐的结果，“Lys”表示赖氨酸盐酸盐的结果，“Arg”表示精氨酸盐酸盐的结果。
根据表1及图1的结果，显示通过使用氨基酸或其盐，可以高萃取率而萃取铜。另外，氨基酸或其盐中，在使用组氨酸盐酸盐、甘氨酸、苏氨酸盐酸盐、谷氨酸盐酸盐的情况下，铜的萃取率变得更高，并且在组氨酸盐酸盐中成为萃取率最高的结果。
(试验例2-1：利用组氨酸盐酸盐所进行的铜的萃取中的pH值的影响)
所述试验例1-1中，针对使用100mmol/L的Tris-HCl缓冲液(pH值7.6)的情况，改为使用以成为表2-1所记载的萃取液的pH值的方式进行过调整的各溶液，并且将氨基酸或其盐设为组氨酸盐酸盐，除此以外，以与试验例1-1相同的方式进行试验，求出萃取液的pH值及铜的萃取率。将结果示于表2-1及图2。
[表2-1]
| 溶液 | 萃取液的pH值 | 铜萃取率(％) | 备注 |
| 2-1-1 | 1.9 | 66.4 | 利用盐酸调整pH值 |
| 2-1-2 | 2.6 | 60.8 | 利用盐酸调整pH值 |
| 2-1-3 | 3.1 | 51.3 | 利用盐酸调整pH值 |
| 2-1-4 | 4.4 | 58.6 | 利用磷酸二氢钠、及氢氧化钠调整pH值 |
| 2-1-5 | 5.1 | 57.4 | 利用磷酸二氢钠、及氢氧化钠调整pH值 |
| 2-1-6 | 6.1 | 63.2 | 利用磷酸二氢钠、及氢氧化钠调整pH值 |
| 2-1-7 | 6.5 | 68.9 | 利用氢氧化钠调整pH值 |
| 2-1-8 | 9.3 | 81.2 | 利用氢氧化钠调整pH值 |
| 2-1-9 | 12.5 | 25.7 | 利用氢氧化钠调整pH值 |
(试验例2-2：利用甘氨酸所进行的铜的萃取中的pH值的影响)
在所述试验例1-1中，针对使用100mmol/L的Tris-HCl缓冲液(pH值7.6)的情况，改为使用以成为表2-2所记载的萃取液的pH值的方式进行过调整的各溶液，并且将氨基酸或其盐设为甘氨酸，除此以外，以与试验例1-1相同的方式进行试验，求出萃取液的pH值及铜的萃取率。将结果示于表2-2及图2。
[表2-2]
| 溶液 | 萃取液的pH值 | 铜萃取率(％) | 备注 |
| 2-2-1 | 1.9 | 65.1 | 利用盐酸调整pH值 |
| 2-2-2 | 2.9 | 51.6 | 利用盐酸调整pH值 |
| 2-2-3 | 3.5 | 41.5 | 利用盐酸调整pH值 |
| 2-2-4 | 5.1 | 36.9 | 利用磷酸二氢钠、及氢氧化钠调整pH值 |
| 2-2-5 | 5.8 | 38.3 | 利用磷酸二氢钠、及氢氧化钠调整pH值 |
| 2-2-6 | 6.8 | 44.5 | 利用磷酸二氢钠、及氢氧化钠调整pH值 |
| 2-2-7 | 8.0 | 51.7 | 利用Tris及盐酸调整pH值 |
| 2-2-8 | 8.6 | 54.6 | 利用Tris及盐酸调整pH值 |
| 2-2-9 | 8.8 | 56.8 | 利用Tris及盐酸调整pH值 |
| 2-2-10 | 9.7 | 54.2 | 利用氢氧化钠调整pH值 |
| 2-2-11 | 11.0 | 36.7 | 利用氢氧化钠调整pH值 |
| 2-2-12 | 12.7 | 19.8 | 利用氢氧化钠调整pH值 |
(试验例2-3：利用苏氨酸盐酸盐所进行的铜的萃取中的pH值的影响)
所述试验例1-1中，针对使用100mmol/L的Tris-HCl缓冲液(pH值7.6)的情况，改为使用以成为表2-3所记载的萃取液的pH值的方式进行过调整的各溶液，并且将氨基酸或其盐设为苏氨酸盐酸盐，除此以外，以与试验例1-1相同的方式进行试验，求出萃取液的pH值及铜的萃取率。将结果示于表2-3及图2。
[表2-3]
| 溶液 | 萃取液的pH值 | 铜萃取率(％) | 备注 |
| 2-3-1 | 1.9 | 66.3 | 利用盐酸调整pH值 |
| 2-3-2 | 2.7 | 54.5 | 利用盐酸调整pH值 |
| 2-3-3 | 3.3 | 43.3 | 利用盐酸调整pH值 |
| 2-3-4 | 5.0 | 44.0 | 利用磷酸二氢钠、及氢氧化钠调整pH值 |
| 2-3-5 | 5.8 | 45.2 | 利用磷酸二氢钠、及氢氧化钠调整pH值 |
| 2-3-6 | 6.8 | 52.3 | 利用磷酸二氢钠、及氢氧化钠调整pH值 |
| 2-3-7 | 7.9 | 58.4 | 利用Tris及盐酸调整pH值 |
| 2-3-8 | 8.4 | 62.9 | 利用Tris及盐酸调整pH值 |
| 2-3-9 | 8.7 | 61.4 | 利用Tris及盐酸调整pH值 |
| 2-3-10 | 9.3 | 63.4 | 利用氢氧化钠调整pH值 |
| 2-3-11 | 10.8 | 54.7 | 利用氢氧化钠调整pH值 |
| 2-3-12 | 12.7 | 21.9 | 利用氢氧化钠调整pH值 |
(试验例2-4：利用谷氨酸钠的铜的萃取中的pH值的影响)
所述试验例1-1中，针对使用100mmol/L的Tris-HCl缓冲液(pH值7.6)的情况，改为使用以成为表2-4所记载的萃取液的pH值的方式进行过调整的各溶液，并且将氨基酸或其盐设为谷氨酸钠，除此以外，以与试验例1-1相同的方式进行试验，求出萃取液的pH值及铜的萃取率。将结果示于表2-4及图2。
[表2-4]
| 溶液 | 萃取液的pH值 | 铜萃取率(％) | 备注 |
| 2-4-1 | 2.9 | 55.7 | 利用盐酸调整pH值 |
| 2-4-2 | 4.2 | 40.1 | 利用盐酸调整pH值 |
| 2-4-3 | 4.7 | 37.0 | 利用盐酸调整pH值 |
| 2-4-4 | 5.0 | 35.7 | 利用盐酸调整pH值 |
| 2-4-5 | 5.3 | 34.3 | 利用盐酸调整pH值 |
| 2-4-6 | 5.4 | 37.1 | 利用盐酸调整pH值 |
| 2-4-7 | 6.0 | 39.7 | 利用氢氧化钠调整pH值 |
| 2-4-8 | 6.5 | 44.9 | 利用氢氧化钠调整pH值 |
| 2-4-9 | 8.7 | 54.9 | 利用氢氧化钠调整pH值 |
| 2-4-10 | 9.8 | 55.2 | 利用氢氧化钠调整pH值 |
| 2-4-11 | 11.2 | 31.1 | 利用氢氧化钠调整pH值 |
| 2-4-12 | 12.9 | 19.5 | 利用氢氧化钠调整pH值 |
图2中，“△”表示试验例2-1(组氨酸盐酸盐)的结果，“●”表示试验例2-2(甘氨酸)的结果，“■”表示试验例2-3(苏氨酸盐酸盐)的结果，“□”表示试验例2-4(谷氨酸钠)的结果。
根据试验例2-1至2-4的结果，如果萃取液的pH值为小于4.0、及大于7.0且小于11.0中的任一值，则成为更优异的铜的萃取率。
另外，作为使用组氨酸盐酸盐作为所述氨基酸或其盐的情况下的所述萃取液的pH值，成为如下结果：更优选大于7.0且10.0以下，尤其优选8.0以上且9.5以下。
作为使用甘氨酸作为所述氨基酸或其盐的情况下的所述萃取液的pH值，成为如下结果：更优选3.0以下、及大于7.0且10.0以下中的任一值，尤其优选2.3以下。
作为使用苏氨酸盐酸盐作为所述氨基酸或其盐的情况下的所述萃取液的pH值，成为如下结果：更优选2.7以下、及大于7.0且10.9以下中的任一值，尤其优选2.0以下、及8.0以上且9.5以下中的任一值。
作为使用谷氨酸钠作为所述氨基酸或其盐的情况下的所述萃取液的pH值，成为如下结果：更优选3.3以下、及大于7.0且10.3以下中的任一值，尤其优选3.0以下、及8.5以上且10.0以下中的任一值。
(试验例3-1：细胞壁分解酶处理)
对干物质量250mg的含铜酵母粉末(矿物质酵母Cu1，铜含量：11,422质量ppm，东方酵母工业(OrientalYeast)股份有限公司制造)添加150mmol/L的氢氧化钠2.5mL、及100mmol/L的组氨酸盐酸盐的溶液2.5mL(最终浓度50mmol/L)并进行搅拌，使含有铜的酵母悬浮而获得悬浮液。
将所述悬浮液在室温(25℃)下保温60分钟后，以3,000rpm进行5分钟离心分离，利用ICP发射光谱分析装置用过滤器将所获得的上清液进行过滤。
对所述离心分离后的残渣添加2质量％酶液(详细内容参照下文)4.5mL进行悬浮后，在45℃下反应180分钟。
在所述反应后，以3,000rpm进行5分钟离心分离，利用ICP发射光谱分析装置用过滤器将所获得的上清液进行过滤。
将所获得的氨基酸处理后的上清液、及酶处理后的上清液采集至试验管，获得酵母萃取物，以与试验例1-1相同的方式对铜的萃取率进行测定。将结果示于表3及图3。
＜酶液＞
将β-葡聚醣酶(天野酶(AmanoEnzyme)股份有限公司制造，TUNICASE)调整为80.1YsU/mL的67mmol/L的磷酸缓冲液(pH值7.7)。
(试验例3-2：细胞壁分解酶处理)
所述试验例3-1中，不进行利用酶液的处理，除此以外，以与试验例3-1相同的方式求出铜的萃取率。将结果示于表3及图3。
[表3]
| 铜萃取率(％) | |
| 试验例3-1 | 91.8 |
| 试验例3-2 | 70.3 |
根据表3及图3的结果，显示通过将利用氨基酸或其盐的处理、及利用细胞壁分解酶的处理并用，而提高铜的萃取率。
(试验例4：与组氨酸盐酸盐的并用)
＜试验例4-1-1：甘氨酸单独＞
对干物质量250mg的含铜酵母粉末(矿物质酵母Cu1，铜含量：11,422质量ppm，东方酵母工业(OrientalYeast)股份有限公司制造)添加以下述方式制备的50mmol/L的甘氨酸含有液5.0mL并进行搅拌，使含有铜的酵母悬浮而获得悬浮液。
将所述悬浮液在室温(25℃)下保温30分钟后，以3,000rpm进行5分钟离心分离，利用ICP发射光谱分析装置用过滤器将所获得的上清液进行过滤，以与试验例1-1相同的方式对铜的萃取率进行测定。将结果示于表4-1及图4。
＜甘氨酸含有液＞
制备含有100mmol/L的甘氨酸的100mmol/L的氢氧化钠溶液(pH值9.5左右)。利用20mmol/L的氢氧化钠溶液将所述氢氧化钠溶液进行稀释，而制备甘氨酸的浓度为50mmol/L的甘氨酸含有液。
＜试验例4-1-2：甘氨酸与组氨酸盐酸盐的并用＞
所述试验例4-1-1中，针对添加50mmol/L的甘氨酸含有液5.0mL的情况，改为添加50mmol/L的甘氨酸含有液2.5mL、及以下述方式制备的50mmol/L的组氨酸盐酸盐含有液2.5mL，除此以外，以与试验例4-1-1相同的方式进行试验。将结果示于表4-1及图4。
＜组氨酸盐酸盐含有液＞
制备含有100mmol/L的组氨酸盐酸盐的100mmol/L的氢氧化钠溶液(pH值9.5左右)。利用20mmol/L的氢氧化钠溶液将所述氢氧化钠溶液进行稀释，制备组氨酸盐酸盐的浓度为50mmol/L的组氨酸盐酸盐含有液。
[表4-1]
| 氨基酸等 | 铜萃取率(％) | |
| 试验例4-1-1 | 仅甘氨酸 | 46.7 |
| 试验例4-1-2 | 甘氨酸及组氨酸盐酸盐 | 65.1 |
＜试验例4-2-1：单独苏氨酸盐酸盐＞
所述试验例4-1-1中，针对使用50mmol/L的甘氨酸含有液5.0mL的情况，改为使用50mmol/L的苏氨酸盐酸盐含有液5.0mL，除此以外，以与试验例4-1-1相同的方式进行试验。将结果示于表4-2及图4。
＜试验例4-2-2：苏氨酸盐酸盐与组氨酸盐酸盐的并用＞
所述试验例4-1-2中，针对使用50mmol/L的甘氨酸含有液2.5mL的情况，改为使用50mmol/L的苏氨酸盐酸盐含有液2.5mL，除此以外，以与试验例4-1-2相同的方式进行试验。将结果示于表4-2及图4。
[表4-2]
| 氨基酸等 | 铜萃取率(％) | |
| 试验例4-2-1 | 仅苏氨酸盐酸盐 | 53.5 |
| 试验例4-2-2 | 苏氨酸盐酸盐及组氨酸盐酸盐 | 64.7 |
＜试验例4-3-1：单独谷氨酸钠＞
所述试验例4-1-1中，针对使用50mmol/L的甘氨酸含有液5.0mL的情况，改为使用50mmol/L的谷氨酸钠含有液5.0mL，除此以外，以与试验例4-1-1相同的方式进行试验。将结果示于表4-3及图4。
＜试验例4-3-2：谷氨酸钠与组氨酸盐酸盐的并用＞
所述试验例4-1-2中，针对使用50mmol/L的甘氨酸含有液2.5mL的情况，改为使用50mmol/L的谷氨酸钠含有液2.5mL，除此以外，以与试验例4-1-2相同的方式进行试验。将结果示于表4-3及图4。
[表4-3]
| 氨基酸等 | 铜萃取率(％) | |
| 试验例4-3-1 | 仅谷氨酸钠 | 37.5 |
| 试验例4-3-2 | 谷氨酸钠及组氨酸盐酸盐 | 61.5 |
根据试验例4-1-1至4-3-2的结果可知，通过并用组氨酸或其盐与其他氨基酸或其盐，可提高铜的萃取率。
(试验例5-1：利用组氨酸盐酸盐所进行的铜的萃取中的浓度的影响)
对干物质量250mg的含铜酵母粉末(矿物质酵母Cu1，铜含量：11,422质量ppm，东方酵母工业(OrientalYeast)股份有限公司制造)添加以下述方式制备的各浓度的组氨酸盐酸盐含有液5.0mL并进行搅拌，使含有铜的酵母悬浮而获得悬浮液。
将所述悬浮液在室温(25℃)下保温60分钟后，以3,000rpm进行5分钟离心分离，利用ICP发射光谱分析装置用过滤器将所获得的上清液进行过滤，以与试验例1-1相同的方式，对铜的萃取率进行测定。将结果示于表5-1。
此外，关于不含有组氨酸盐酸盐的情况，也以相同方式进行试验。
＜组氨酸盐酸盐含有液＞
制备含有200mmol/L的组氨酸盐酸盐的300mmol/L的氢氧化钠溶液(pH值9.5左右)。利用20mmol/L的氢氧化钠溶液将所述氢氧化钠溶液进行稀释，而制备组氨酸盐酸盐的浓度为10mmol/L、20mmol/L、50mmol/L、100mmol/L、200mmol/L的组氨酸盐酸盐含有液。此外，还准备了不含组氨酸盐酸盐的300mmol/L的氢氧化钠溶液。
[表5-1]
| 组氨酸盐酸盐的浓度 | 铜萃取率(％) |
| 0mmol/L | 18.3 |
| 10mmol/L | 57.2 |
| 20mmol/L | 66.1 |
| 50mmol/L | 76.0 |
| 100mmol/L | 85.8 |
| 200mmol/L | 88.4 |
(试验例5-2：利用甘氨酸的铜所进行的萃取中的浓度的影响)
试验例5-1中，将组氨酸盐酸盐含有液改为以下述方式制备的各浓度的甘氨酸含有液，除此以外，以与试验例5-1相同的方式进行试验。将结果示于表5-2。
＜甘氨酸含有液＞
制备含有200mmol/L的甘氨酸的75mmol/L的氢氧化钠溶液(pH值9.5左右)。利用20mmol/L的氢氧化钠溶液将所述氢氧化钠溶液进行稀释，而制备甘氨酸的浓度为10mmol/L、20mmol/L、50mmol/L、100mmol/L、200mmol/L的甘氨酸含有液。此外，还准备了不含甘氨酸的75mmol/L的氢氧化钠溶液。
[表5-2]
| 甘氨酸的浓度 | 铜萃取率(％) |
| 0mmol/L | 18.7 |
| 10mmol/L | 33.4 |
| 20mmol/L | 41.6 |
| 50mmol/L | 49.6 |
| 100mmol/L | 55.7 |
| 200mmol/L | 60.6 |
(试验例5-3：利用谷氨酸钠所进行的铜的萃取中的浓度的影响)
试验例5-1中，将组氨酸盐酸盐含有液改为以下述方式制备的各浓度的谷氨酸钠含有液，除此以外，以与试验例5-1相同的方式进行试验。将结果示于表5-3。
＜谷氨酸钠含有液＞
制备含有200mmol/L的谷氨酸钠的75mmol/L的氢氧化钠溶液(pH值9.5左右)。利用20mmol/L的氢氧化钠溶液将所述氢氧化钠溶液进行稀释，而制备谷氨酸钠的浓度为10mmol/L、20mmol/L、50mmol/L、100mmol/L、200mmol/L的谷氨酸钠含有液。
[表5-3]
| 谷氨酸钠的浓度 | 铜萃取率(％) |
| 0mmol/L | 18.4 |
| 10mmol/L | 41.1 |
| 20mmol/L | 44.5 |
| 50mmol/L | 52.2 |
| 100mmol/L | 55.8 |
| 200mmol/L | 58.9 |
(试验例5-4：利用苏氨酸盐酸盐所进行的铜的萃取中的浓度的影响)
试验例5-1中，将组氨酸盐酸盐含有液改为以下述方式制备的各浓度的苏氨酸盐酸盐含有液，除此以外，以与试验例5-1相同的方式进行试验。将结果示于表5-4。
＜苏氨酸盐酸盐含有液＞
制备含有200mmol/L的苏氨酸盐酸盐的300mmol/L的氢氧化钠溶液(pH值9.5左右)。利用20mmol/L的氢氧化钠溶液将所述氢氧化钠溶液进行稀释，而制备苏氨酸盐酸盐的浓度为10mmol/L、20mmol/L、50mmol/L、100mmol/L、200mmol/L的苏氨酸盐酸盐含有液。
[表5-4]
| 苏氨酸盐酸盐的浓度 | 铜萃取率(％) |
| 0mmol/L | 18.5 |
| 10mmol/L | 42.0 |
| 20mmol/L | 52.4 |
| 50mmol/L | 59.8 |
| 100mmol/L | 66.8 |
| 200mmol/L | 71.0 |
根据试验例5-1至5-4的结果可知，在大范围的氨基酸或其盐的浓度下，铜的萃取率优异。
(试验例6-1：利用组氨酸盐酸盐所进行的铜的萃取中的温度的影响)
对干物质量250mg的含铜酵母粉末(矿物质酵母Cu1，铜含量：11,422质量ppm，东方酵母工业(OrientalYeast)股份有限公司制造)添加以下述方式制备的组氨酸盐酸盐的浓度为100mmol/L的组氨酸盐酸盐含有液5.0mL并进行搅拌，使含有铜的酵母悬浮而获得悬浮液。
将所述悬浮液在室温(25℃)、50℃、75℃、或100℃下保温10分钟后，以3,000rpm进行5分钟离心分离，利用ICP发射光谱分析装置用过滤器将所获得的上清液进行过滤，以与试验例1-1相同的方式对铜的萃取率进行测定。将结果示于表6-1。
＜组氨酸盐酸盐含有液＞
制备含有200mmol/L的组氨酸盐酸盐的300mmol/L的氢氧化钠溶液(pH值9.5左右)。利用20mmol/L的氢氧化钠溶液将所述氢氧化钠溶液进行稀释，而制备组氨酸盐酸盐的浓度为100mmol/L的组氨酸盐酸盐含有液。
[表6-1]
| 处理温度 | 铜萃取率(％) |
| 25℃ | 82.3 |
| 50℃ | 80.6 |
| 75℃ | 82.3 |
| 100℃ | 82.6 |
(试验例6-2：利用甘氨酸所进行的铜的萃取中的温度的影响)
试验例6-1中，将组氨酸盐酸盐含有液改为以下述方式制备的甘氨酸的浓度为100mmol/L的甘氨酸含有液，除此以外，以与试验例6-1相同的方式进行试验。将结果示于表6-2。
＜甘氨酸含有液＞
制备含有200mmol/L的甘氨酸的75mmol/L的氢氧化钠溶液(pH值9.5左右)。利用20mmol/L的氢氧化钠溶液将所述氢氧化钠溶液进行稀释，而制备甘氨酸的浓度为100mmol/L的甘氨酸含有液。
[表6-2]
| 处理温度 | 铜萃取率(％) |
| 25℃ | 43.9 |
| 50℃ | 46.3 |
| 75℃ | 45.8 |
| 100℃ | 44.9 |
(试验例6-3：利用苏氨酸盐酸盐所进行的铜的萃取中的温度的影响)
试验例6-1中，将组氨酸盐酸盐含有液改为以下述方式制备的苏氨酸盐酸盐的浓度为100mmol/L的苏氨酸盐酸盐含有液，除此以外，以与试验例6-1相同的方式进行试验。将结果示于表6-3。
＜苏氨酸盐酸盐含有液＞
制备含有200mmol/L的苏氨酸盐酸盐的300mmol/L的氢氧化钠溶液(pH值9.5左右)。利用20mmol/L的氢氧化钠溶液将所述氢氧化钠溶液进行稀释，而制备苏氨酸盐酸盐的浓度为100mmol/L的苏氨酸盐酸盐含有液。
[表6-3]
| 处理温度 | 铜萃取率(％) |
| 25℃ | 60.1 |
| 50℃ | 60.8 |
| 75℃ | 60.5 |
| 100℃ | 61.0 |
根据试验例6-1至6-3的结果可知，在大范围的处理温度下，铜的萃取率优异。
(试验例7-1：利用组氨酸盐酸盐所进行的铜的萃取中的处理时间的影响)
对干物质量250mg的含铜酵母粉末(矿物质酵母Cu1，铜含量：11,422质量ppm，东方酵母工业(OrientalYeast)股份有限公司制造)添加以下述方式制备的组氨酸盐酸盐的浓度为100mmol/L的组氨酸盐酸盐含有液5.0mL并进行搅拌，使含有铜的酵母悬浮而获得悬浮液。
将所述悬浮液在室温(25℃)下保温10分钟、20分钟、40分钟、或60分钟后，以3,000rpm进行5分钟离心分离，利用ICP发射光谱分析装置用过滤器将所获得的上清液进行过滤，以与试验例1-1相同的方式对铜的萃取率进行测定。将结果示于表7-1。
＜组氨酸盐酸盐含有液＞
制备含有200mmol/L的组氨酸盐酸盐的300mmol/L的氢氧化钠溶液(pH值9.5左右)。利用20mmol/L的氢氧化钠溶液将所述氢氧化钠溶液进行稀释，而制备组氨酸盐酸盐的浓度为100mmol/L的组氨酸盐酸盐含有液。
[表7-1]
| 处理时间 | 铜萃取率(％) |
| 10分钟 | 82.3 |
| 20分钟 | 81.7 |
| 40分钟 | 84.2 |
| 60分钟 | 83.7 |
(试验例7-2：利用甘氨酸所进行的铜的萃取中的处理时间的影响)
试验例7-1中，将组氨酸盐酸盐含有液改为以下述方式制备的甘氨酸的浓度为100mmol/L的甘氨酸含有液，除此以外，以与试验例7-1相同的方式进行试验。将结果示于表7-2。
＜甘氨酸含有液＞
制备含有200mmol/L的甘氨酸的75mmol/L的氢氧化钠溶液(pH值9.5左右)。利用20mmol/L的氢氧化钠溶液将所述氢氧化钠溶液进行稀释，而制备甘氨酸的浓度为100mmol/L的甘氨酸含有液。
[表7-2]
| 处理时间 | 铜萃取率(％) |
| 10分钟 | 43.9 |
| 20分钟 | 44.2 |
| 40分钟 | 42.8 |
| 60分钟 | 43.0 |
(试验例7-3：利用苏氨酸盐酸盐所进行的铜的萃取中的处理时间的影响)
试验例7-1中，将组氨酸盐酸盐含有液改为以下述方式制备的苏氨酸盐酸盐的浓度为100mmol/L的苏氨酸盐酸盐含有液，除此以外，以与试验例7-1相同的方式进行试验。将结果示于表7-3。
＜苏氨酸盐酸盐含有液＞
制备含有200mmol/L的苏氨酸盐酸盐的300mmol/L的氢氧化钠溶液(pH值9.5左右)。利用20mmol/L的氢氧化钠溶液将所述氢氧化钠溶液进行稀释，而制备苏氨酸盐酸盐的浓度为100mmol/L的苏氨酸盐酸盐含有液。
[表7-3]
| 处理时间 | 铜萃取率(％) |
| 10分钟 | 60.1 |
| 20分钟 | 61.0 |
| 40分钟 | 60.2 |
| 60分钟 | 60.5 |
根据试验例7-1至7-3的结果可知，在大范围的处理时间内，铜的萃取率优异。
(试验例8：盐腌保存黄瓜的绿色保持复原效果的评价)
＜含铜酵母萃取物的粉末的制备＞
使用组氨酸盐酸盐、甘氨酸、苏氨酸盐酸盐、或谷氨酸盐酸盐作为氨基酸或其盐，以与试验例1相同的方式获得含铜酵母萃取物。
对所述含铜酵母萃取物添加DL-苹果酸与糊精，使用喷雾干燥器L-8(大川原化工机股份有限公司制造)进行干燥，而制备铜含量为0.5质量％的粉末(以下，有时分别称为“组氨酸盐酸盐萃取物”、“甘氨酸萃取物”、“苏氨酸盐酸盐萃取物”、“谷氨酸盐酸盐萃取物”)。
此外，作为阳性对照，针对LevelUpV8Clear(东方酵母工业(OrientalYeast)股份有限公司制造)，也以粉末中的铜含量成为0.5质量％的方式进行制备。
＜绿色保持试验＞
制备所述组氨酸盐酸盐萃取物、甘氨酸萃取物、苏氨酸盐酸盐萃取物、谷氨酸盐酸盐萃取物、或LevelUpV8Clear的2％水溶液(质量/体积)，加温至90℃。
其后，投入盐腌保存黄瓜(吉粋股份有限公司制造)，一边进行搅拌一边在90℃下加热40分钟。
加热40分钟后，去除汤汁，确认盐腌保存黄瓜的色调。将结果示于图5A至图5E。
图5A表示LevelUpV8Clear的结果，图5B表示组氨酸盐酸盐萃取物的结果，图5C表示甘氨酸萃取物的结果，图5D表示苏氨酸盐酸盐萃取物的结果，图5E表示谷氨酸盐酸盐萃取物的结果。
根据图5A至图5E的结果，对于组氨酸盐酸盐萃取物、甘氨酸萃取物、苏氨酸盐酸盐萃取物、及谷氨酸盐酸盐萃取物，确认到优于LevelUpV8Clear的绿色保持效果。
[产业上的可利用性]
根据本发明的含铜酵母萃取物的制造方法，可以高萃取率来萃取铜，而可有效率地制造高浓度含有源自天然物的铜的含铜酵母萃取物。
本发明的含铜酵母萃取物可适宜地用作流质食品、饮料等经口经管营养组合物、食品原材料、蔬菜的绿色保持复原剂等。另外，通过使用本发明的含铜酵母萃取物作为所述经口经管营养组合物、所述食品原材料，可预防或改善由缺铜引起的贫血、心脏疾病等。
Claims (11)
1.一种含铜酵母萃取物的制造方法，其特征在于：包括萃取步骤，该步骤是使含有铜的酵母悬浮在包含氨基酸或其盐的溶液中，并将所获得的悬浮液的固体成分与液体成分进行分离，
所述氨基酸或其盐为水溶性。
2.根据权利要求1所述的含铜酵母萃取物的制造方法，其特征在于：萃取步骤中所获得的萃取液的pH值为小于4.0、及大于7.0且小于11.0中的任一值。
3.根据权利要求1或2所述的含铜酵母萃取物的制造方法，其特征在于：氨基酸或其盐为选自组氨酸或其盐、甘氨酸或其盐、苏氨酸或其盐、及谷氨酸或其盐中的至少1种。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的含铜酵母萃取物的制造方法，其特征在于：氨基酸或其盐包含组氨酸或其盐。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的含铜酵母萃取物的制造方法，其特征在于：氨基酸或其盐包含组氨酸或其盐与选自甘氨酸或其盐、苏氨酸或其盐、及谷氨酸或其盐中的至少1种。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的含铜酵母萃取物的制造方法，其特征在于：包括利用细胞壁分解酶对含有铜的酵母进行处理的步骤。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的含铜酵母萃取物的制造方法，其特征在于：下述式所表示的铜萃取率为40％以上，
铜萃取率(％)＝{萃取物中的铜总量(质量)/萃取所使用的酵母所含的铜总量(质量)}×100。
8.根据权利要求7所述的含铜酵母萃取物的制造方法，其特征在于：铜的萃取率为50％以上。
9.一种含铜酵母萃取物，其特征在于：其是通过权利要求1至8中任一项所述的含铜酵母萃取物的制造方法而制造。
10.一种食品，其特征在于：包含权利要求9所述的含铜酵母萃取物。
11.一种蔬菜的绿色保持复原剂，其特征在于：包含权利要求9所述的含铜酵母萃取物。
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