CN105021825A - 一种检测胰腺癌相关多肽dap44的elisa试剂盒 - Google Patents

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Abstract

本发明利用前期合成和筛选的一对高效特异DAP44单克隆抗体，制备了DAP44ELISA检测试剂盒。所合成的ELISA试剂盒包括特异性DAP44抗体包被的酶标板、酶标试剂、洗涤缓冲液、样品稀释液、显色剂A液、显色剂B液、终止液、DAP44标准品。采用双抗体夹心ELISA方法，在微孔条上预包被DAP44抗体，使血清样本中的DAP44结合固定在酶标板微孔表面的抗体，加入HRP偶联DAP44二抗后，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，将样本吸光值与标准曲线比较即可得出相应DAP44的含量。本发明试剂盒具有高敏感性，有助于胰腺癌临床检测。

Description

一种检测胰腺癌相关多肽DAP44的ELISA试剂盒
技术领域
本发明属于抗肿瘤技术领域，涉及一对经抗体配对实验筛选的胰腺癌相关多肽DTNBP1Associated Peptide 44(DAP44)单克隆抗体，及上述单克隆抗体制备的ELISA检测试剂盒。
背景技术
胰腺位于上腹部，属腹膜后器官，解剖位置隐蔽，周围紧邻胃、十二指肠、肝、脾、肾等重要器官。胰腺癌起病隐匿，缺少典型的早期临床症状，早期便直接向胰周侵犯或经淋巴管和/或血管向远近器官组织转移。因此，大部分胰腺癌患者确诊时已为晚期，失去了根治性手术切除和放射治疗的胰腺癌的机会。当前，我国胰腺癌的发病率正以惊人的速度持续上升。研究证实，胰腺癌的早期诊断是提高胰腺癌病人治疗效果和生存率的关键所在。而肿瘤标志物是目前用于胰腺癌临床筛查和预测的主要依据。但目前能用于胰腺癌特异性诊断的肿瘤标志物尚不多，其中最常用的是CA19-9，但本身也存在假阳性和假阴性等局限，对直径<2cm的小胰腺癌诊断阳性率仅为30％—40％，而进展期可达80％—90％。因此，筛选新的胰腺癌特异性肿瘤标志物并应用于临床检测具有重要的意义。
本研究前期收集了胰腺癌病人术前术后血清，经高效色谱分选和蛋白质谱检测，发现了一种胰腺癌相关糖蛋白，在胰腺癌病人术前血清中高表达而术后血清中表达下降，经测序确定其氨基酸序列与DTNBP1高度同源，命名为DTNBP1Associated Peptide 44(DAP44)，可能是一种胰腺癌相关的肿瘤标志物。同时设计并制备了DAP44单克隆抗体，经抗体配对实验筛选了两株特异性强、敏感性高的单克隆抗体及杂交瘤细胞株。本研究在前期基础上制备DAP44ELISA检测试剂盒，并应用于胰腺癌的临床检测。
发明内容
本发明的目的是提供一种检测胰腺癌相关多肽DAP44的ELISA试剂盒，该ELISA试剂盒对胰腺癌患者的检测具有很好的敏感性。
本发明的技术方案是：一种检测胰腺癌相关多肽DAP44的ELISA试剂盒，包括：特异性DAP44抗体包被的酶标板、酶标试剂、洗涤缓冲液、样品稀释液、显色剂A液、显色剂B液、终止液、DAP44标准品和标准品稀释液。
酶标板上的单克隆抗体由保藏号为CCTCC C201564的杂交瘤细胞所产生，酶标试剂中的单克隆抗体由保藏号为CCTCC C201565的另一株杂交瘤细胞产生。
酶标试剂包含5.8g/L磷酸氢二钠、0.593g/L磷酸二氢钠、8.0g/L氯化钠、200ml/L小牛血清、0.5ml/L Proclin-300和0.4mg/L辣根过氧化物酶标记的胰腺癌相关抗原DAP44单克隆抗体。
洗涤缓冲液(PH7.4 0.15M PBS)：KH2PO40.2克，Na2HPO4·12H2O 2.9克，NaCl 8.0克，KCl 0.2克，Tween‐200.05％0.5ml，加蒸馏水至1000ml。
样品稀释液：牛血清白蛋白(BSA)0.1克，加洗涤缓冲液至100ml或以羊血清、兔血清等与洗涤液配成5～10％使用。
显色剂A液为H2O2，显色剂B液为TMB。
终止液为2M H2SO4。
DAP44 ELISA试剂盒的制备方法：
(1)酶标板包被：用纯化的保藏号为CCTCC C201564的抗DAP44抗体包被96孔板(12×8)酶标板，并封闭、抛光。
(2)酶标记抗体的制备：用辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase，HRP)标记保藏号为CCTCC C201565的抗DAP44单克隆抗体；
DAP44 ELISA试剂盒的使用方法：
(1)加入标准品和样本至相应的酶标板微孔中，使标准品或样本中的DAP44分子与酶标板中的抗体充分结合，洗去未结合的杂质；
(2)加入酶标试剂，使已结合的DAP44与HRP标记的DAP44单克隆抗体结合，洗去未结合酶标抗体；
(3)加入显色剂A、B液，充分混匀，终止液终止反应，酶标仪检测OD值。
本发明利用前期合成和筛选的一对高效特异DAP44单克隆抗体，制备了ELISA检测试剂盒。
本发明采用双抗体夹心ELISA方法，在微孔条上预包被DAP44抗体，血清样本中的DAP44结合固定在酶标板微孔表面的抗体，加入HRP偶联DAP44抗体后，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的蓝色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，将样本吸光值与标准曲线比较即可得出相应DAP44的含量。
本发明试剂盒具有高敏感性，有助于胰腺癌临床检测。
附图说明
图1是采用本发明的试剂盒绘制的标准曲线。
图2是采用本发明的试剂盒检测健康血清样本与胰腺癌血清中DAP44含量检测值(ng/ml)
具体实施方式
实施例1 DAP44 ELISA检测试剂盒的制备。、
1包被：用pH 9.5包被缓冲液稀释保藏号为CCTCC C201564纯化抗体(10ug/ml)，包被96孔板，100μ1/孔，4℃包被过夜。空白对照孔设4孔/板，加入包被液100μ1。包被液标准配方：Na2CO31.59克，NaHCO32.93克，加蒸馏水至1000ml。
2洗板：用自动洗板机洗板三次，5分钟/次，洗涤缓冲液(pH7.4 0.15M PBS)：KH2PO40.2克，Na2HPO4·12H2O 2.9克，NaCl 8.0克，KCl 0.2克，Tween-20 0.05％0.5ml，加蒸馏水至1000ml。
3封闭：用1％BSA封闭酶标板上没有结合上抗体的位点。200μl/孔，室温作用1小时，洗板。
4抗体的标记：(1)称取5mgHRP溶解于1ml蒸馏水中；(2)于上液中加入0.2ml新配的0.1M NaIO4溶液，室温下避光搅拌20分钟；(3)将上述溶液装入透析袋中，对1mM pH 4.4的醋酸钠缓冲液透析，4℃过夜；(4)加20μl 0.2M pH 9.5碳酸盐缓冲液，使pH升高到9.0～9.5，然后立即加入10mg IgG(抗体，或SPA5mg在1ml0.01M碳酸盐缓冲液中)，室温避光轻轻搅拌2小时。(5)加0.1ml新配的4mg/ml NaBH 4液，混匀，再置4℃2小时。(6)将上述液装入透析袋中，对0.15M pH 7.4PBS透析，4℃过夜。(7)搅拌，逐滴加入等体积饱和硫酸铵，置4℃1小时。(8)3000rpm离心半小时，弃上清。沉淀物用半饱和硫酸铵洗二次，最后沉淀物溶于少量0.15M pH 7.4的PBS中。(9)将上述溶液装入透析袋中，对0.15M pH 7.4的PBS缓冲盐水透析，去除铵离子后(用萘氏试剂检测)，10,000rpm离心30分钟去除沉淀，上清液即为酶结合物，分装后，冰冻保存。
5酶标试剂的配制：制备的辣根过氧化物酶标记的由保藏号为CCTCC C201565的抗DAP44单克隆抗体；以1：2500的比例将酶标抗体溶于酶缓冲液中。酶缓冲液配方为：5.8g/L磷酸氢二钠、0.593g/L磷酸二氢钠、8.0g/L氯化钠、200ml/L小牛血清、0.5ml/L Proclin-300。
6样品稀释液的制备：牛血清白蛋白(BSA)0.1克，加洗涤缓冲液至100ml或以羊血清、兔血清等与洗涤液配成5～10％使用。
7显色剂A液为H2O2，显色剂B液为TMB。
8终止液：2M H2SO4，蒸馏水178.3ml，逐滴加入浓硫酸(98％)21.7ml至200ml。
9校准品的配制：用样品稀释液将合成的DAP44纯品稀释，使得校准品中的抗原浓度梯度分别为2000、1000、500、250、125、62.5、0ng/m1。
实施例2 本发明胰腺癌相关抗原DAP44 ELISA试剂盒的使用方法
1.加样孵育：将试剂盒复温至室温，取足够数量包被板，分别设置空白孔(不加样品和酶标试剂)、校准孔和待测样品孔，按顺序在校准孔中加入50ul标准品，在待测样品孔中先加入40ul样品稀释液，再加入10ul待测样品(样品最终稀释度为5倍)。震荡混匀，37℃孵育30min。
2.洗板：洗板机洗板，每孔加入350ul洗涤缓冲液，静置30秒后弃去，重复洗5次，拍干。
3.加酶标试剂：每孔加入酶标试剂50ul，空白孔除外，37℃孵育30min，重复洗5次；
4.显色：每孔加入显色剂A 50ul，再加入显色剂B 50ul，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10min。
5.终止：每孔加入终止液50ul，终止反应(此时蓝色立转黄色)。
6.测定：在加入终止液15min以内进行，以空白孔调零，450nm波长依序测定各孔吸光度(OD值)，绘制抗原样本浓度与OD450值之间关系的标准曲线，如图1所示，方程：y＝-3E-07x2+0.0012x-0.0238，R2＝0.999。查标准曲线得到待测样本中抗原的浓度。
表1 抗原标准品浓度与OD450检测值
标准浓度 OD450
2000 1.244
1000 0.891
500 0.505
250 0.239
125 0.099
62.5 0.05
0 0
实施例1利用本发明的ELISA试剂盒检测36例胰腺癌患者血清和21例正常体检者血清中DAP44水平，结果如图2，结果提示：与正常人相比，胰腺癌患者血清中DAP44水平显著升高；该DAP44ELISA试剂盒对胰腺癌患者的检测具有很高的敏感性。
杂交瘤细胞株的保藏
将杂交瘤细胞株于2015年6月10日保藏于中国典型培养物保藏中心(湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内)，编号No.2D1C11的杂交瘤细胞株保藏号为CCTCC C201564，编号为No.1E8H3的杂交瘤细胞株保藏号为CCTCC C201565。

Claims (3)

1.一种ELISA试剂盒，其特征在于，包括：特异性DAP44抗体包被的酶标板、酶标试剂、洗涤缓冲液、样品稀释液、显色剂A液、显色剂B液、终止液、DAP44标准品和标准品稀释液，
其中酶标板上的单克隆抗体由保藏号为CCTCC C201564的杂交瘤细胞所产生，辣根过氧化物酶标记的单克隆抗体由另一株保藏号为CCTCC C201565的杂交瘤细胞产生；
酶标试剂：包含5.8g/L磷酸氢二钠、0.593g/L磷酸二氢钠、8.0g/L氯化钠、200ml/L小牛血清、0.5ml/L Proclin-300和0.4mg/L辣根过氧化物酶标记的胰腺癌相关抗原DAP44单克隆抗体；
洗涤缓冲液pH 7.4 0.15M PBS：KH2PO4 0.2克，Na2HPO4·12H2O 2.9克，NaCl 8.0克，KCl 0.2克，Tween‐200.05％0.5ml，加蒸馏水至1000ml；
样品稀释液：牛血清白蛋白0.1克，加洗涤缓冲液至100ml或以羊血清、兔血清与洗涤液配成5～10％使用；
显色剂A液为H2O2，显色剂B液为TMB；
终止液为2M H2SO4。
2.如权利要求1所述的ELISA试剂盒，其特征在于，ELISA试剂盒的制备方法如下：
(1)酶标记抗体的制备：用辣根过氧化物酶HRP标记保藏号为CCTCC C201565的抗DAP44单克隆抗体；
(2)酶标板包被：用纯化的保藏号为CCTCC C201564的抗DAP44抗体包被96孔板酶标板，并封闭、抛光。
3.如权利要求1所述的ELISA试剂盒，其特征在于，ELISA试剂盒的使用方法如下：
(1)加入标准品和样本至相应的酶标板微孔中，使标准品或样本中的DAP44分子与酶标板中的抗体充分结合，洗去未结合的杂质；
(2)使已结合的DAP44与HRP标记的DAP44单克隆抗体结合，洗去未结合酶标抗体；
(3)加入显色剂A、B液，充分混匀，终止液终止反应，酶标仪检测OD值。
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Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101358976A (zh) * 2008-04-28 2009-02-04 北京华大吉比爱生物技术有限公司 检测六项肿瘤标志物的微阵列-酶联免疫检测试剂盒
CN103782175A (zh) * 2011-09-13 2014-05-07 奥林巴斯株式会社 胰腺病标记物的检出方法
CN104142403A (zh) * 2013-05-10 2014-11-12 中国医学科学院北京协和医院 Chip蛋白在胰腺癌早期诊断以及预后判断中的用途
WO2014205374A1 (en) * 2013-06-20 2014-12-24 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods for diagnosing pancreatic cancer
CN104507965A (zh) * 2012-06-19 2015-04-08 比奥尤尼沃萨有限责任公司 作为血清和组织生化标志物的bag3
WO2015067969A2 (en) * 2013-11-11 2015-05-14 Immunovia Ab Method, array and use thereof

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101358976A (zh) * 2008-04-28 2009-02-04 北京华大吉比爱生物技术有限公司 检测六项肿瘤标志物的微阵列-酶联免疫检测试剂盒
CN103782175A (zh) * 2011-09-13 2014-05-07 奥林巴斯株式会社 胰腺病标记物的检出方法
CN104507965A (zh) * 2012-06-19 2015-04-08 比奥尤尼沃萨有限责任公司 作为血清和组织生化标志物的bag3
CN104142403A (zh) * 2013-05-10 2014-11-12 中国医学科学院北京协和医院 Chip蛋白在胰腺癌早期诊断以及预后判断中的用途
WO2014205374A1 (en) * 2013-06-20 2014-12-24 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods for diagnosing pancreatic cancer
WO2015067969A2 (en) * 2013-11-11 2015-05-14 Immunovia Ab Method, array and use thereof

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