CN104142403A - Chip蛋白在胰腺癌早期诊断以及预后判断中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及CHIP蛋白在胰腺癌早期诊断以及预后判断中的用途。进一步地，本发明提供了一种CHIP蛋白在用于制备诊断胰腺癌患者的试剂盒中的用途。更特别地，本发明提供了CHIP蛋白在制备用于评估胰腺癌患者预后的试剂盒中的用途。

Description

CHIP蛋白在胰腺癌早期诊断以及预后判断中的用途

技术领域

本发明涉及CHIP蛋白作为诊断胰腺癌患者以及评估胰腺癌患者预后的血清标记物的用途。

背景技术

胰腺癌是最难早期发现、恶性程度最高和预后最差的肿瘤之一。美国癌症协会对美国肿瘤发病率及死亡率的统计结果表明，胰腺癌占全部肿瘤死亡原因的第四位，5年生存率在5%以下。其死亡的主要原因是超过50%患者在发现时已处于晚期，肿瘤已包绕血管或发生远处转移，且对传统的放化疗或靶向治疗具有一定耐受性。因此，提高胰腺癌的早期诊断率，抑制肿瘤的生长和远处转移，提高药物的治疗效果，成为改善胰腺癌患者预后的关键因素。

由于胰腺癌临床发病隐匿，发展迅速，具有较高的侵袭性，而且通常在出现临床症状时已进入晚期，此时进行手术及放化疗效果极差，而改变这种情况的关键在于早期的诊断和治疗。因此，对于胰腺癌的肿瘤标记物的研究有助于肿瘤的早期发现，有助于对胰腺的良性病变或恶性肿瘤的鉴别诊断，为早期手术治疗提供诊断依据。由于血清中可能含有较多的肿瘤标记物，同时血样的采集安全可靠，因此，通过血清学样本对无症状患者进行胰腺癌的筛选具有很大的潜力。目前临床上常用的胰腺癌肿瘤学标志物是CA19-9和CA142。CA19-9是一种唾液酸Lewis血型类粘蛋白糖蛋白抗原，与Lewis血型成分有关，用于鉴别正常人和胰腺癌患者的敏感性为79%（70%-90%），特异性为82（68%-91%），其中约5%-14%的人群缺乏Lewis抗原糖基转移酶而不能合成CA19-9，即使发生胰腺癌后其CA19-9的表达并不升高；而急性胆管炎，胰腺炎胆汁淤积等非胰腺肿瘤疾病均可导致CA19-9表达的增加。因此，CA19-9表达水平的改变更多的是作为手术或放化疗后肿瘤复发的依据。CA242也是一种唾液酸化的粘蛋白类型糖抗原，由于同时受到Lewis血型的影响所以灵敏度与CA19-9相似，约为75%（65%-82%），特异性为90%（65%-95%），在与慢性胰腺炎、良性肝病、胆汁淤积等方面诊断效率略好于CA19-9。这些标志物用于鉴别诊断的准确性并不高，常需要联合使用。因此，还需要寻找一些敏感性或特异性更好的肿瘤学标志物用于早期诊断。

C末端Hsc70反应蛋白（命名为CHIP）是一个种属间高度保守的胞浆蛋白，在平滑肌细胞、心肌细胞、骨骼肌和大脑中高度表达。它含有三个功能区，N末端的TPR功能区、C-末端的U-盒子功能区和中间的正负电荷富集区。CHIP作为一个陪伴蛋白（chaperone）即可通过TPR基序（motif）与热休克蛋白Hsp70和Hsp90相互作用，辅助新生蛋白折叠，形成具有正常结构和功能的蛋白，抑制变性蛋白的聚集；又可通过U-盒子功能区作为E3连接酶，促进蛋白底物的泛素化降解。目前已经发现CHIP在多种肿瘤中发挥重要的作用。可与CHIP结合并发生降解的蛋白包括突变的p53，雌激素受体，erbB2，SMAD3，HIF-1，SRC-3，NF-κB，c-Myc，以及磷酸化的AKT等，这些底物都与肿瘤的增殖、侵袭或转移均密切相关。另一方面，CHIP在乳腺癌、胃癌及脑神经胶质瘤中的表达水平要明显低于癌旁的正常组织，这些结果均提示CHIP在多种肿瘤中发挥抑癌的作用，目前关于肿瘤患者血清中CHIP表达水平国内外并没有相关的报道。

本发明来源于一个惊人的方法，即，本发明人发现正常人、慢性胰腺炎患者和胰腺癌患者三者血清CHIP表达水平有显著性差异。这一结果为胰腺疾病的鉴别诊断以及预后提供了一个新的思路。

发明内容

本发明人发现，癌组织表达水平高于癌旁组织，其表达与肿瘤淋巴结转移和术后转移负相关；CHIP高表达患者预后相对较好，是影响胰腺癌预后的可能危险因素。CHIP在慢性胰腺炎，胰腺癌患者血清中表达水平明显降低；在胰腺癌患者中，其表达水平与肿瘤远处转移相关，CHIP可作为鉴别正常人、慢性胰腺炎和胰腺癌患者有效的血清学标志物。

一方面，本发明提供了一种CHIP蛋白在用于制备诊断胰腺癌患者的试剂盒中的用途。

进一步地，本发明提供了一种CHIP蛋白作为区分正常人、慢性胰腺炎和胰腺癌患者的有效的血清学标志物中的用途。

进一步地，本发明提供了一种CHIP蛋白作为区分正常人、胰腺良性肿瘤和胰腺癌患者的有效的血清学标志物中的用途。

进一步地，本发明提供了一种CHIP蛋白作为区分胰腺良性肿瘤、胰腺内分泌肿瘤与正常人的有效的血清学标志物。进一步地，所述的试剂盒用于ELISA方法中。

另一方面，本发明提供了CHIP蛋白在制备用于评估胰腺癌患者预后的试剂盒中的用途。

进一步地，其中CHIP蛋白高表达患者预后相对较好。

附图说明

图1显示了CHIP和Hsp70在癌和癌旁组织中的表达水平。N代表癌旁胰腺组织，T代表胰腺癌组织。

图2显示了CHIP在癌组织及癌旁组织表达水平比较。

图3显示了血清CHIP表达水平鉴别正常人和慢性胰腺炎患者的价值。

图4显示了血清CHIP表达水平鉴别正常人和胰腺良性肿瘤患者的价值。

图5显示了血清CHIP表达水平鉴别正常人和胰腺内分泌肿瘤患者的价值。

图6显示了血清CHIP表达水平鉴别正常人和胰腺导管腺癌患者的价值。

图7显示了血清CHIP表达水平鉴别慢性胰腺炎患者和胰腺良性肿瘤患者的价值。

图8显示了血清CHIP表达水平鉴别慢性胰腺炎患者和胰腺内分泌肿瘤患者的价值。

图9显示了血清CHIP表达水平鉴别慢性胰腺炎患者和胰腺导管腺癌患者的价值。

图10显示了血清CHIP表达水平鉴别胰腺良性肿瘤患者和胰腺内分泌肿瘤患者的价值。

图11显示了血清CHIP表达水平鉴别胰腺良性肿瘤患者和胰腺导管腺癌患者的价值。

图12显示了血清CHIP表达水平鉴别胰腺内分泌肿瘤患者和胰腺导管腺癌患者的价值。

具体实施方式

本发明涉及的SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）是目前最常用的分离蛋白质的电泳技术。SDS能断裂分子内和分子间氢键，破坏蛋白质的二级和三级结构，蛋白质同SDS分子按比例结合，形成带负电荷的SDS-蛋白质复合物，这种复合物由于结合大量的SDS，使蛋白质丧失了原有的电荷状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块，从而降低或消除了各种蛋白质分子之间天然的电荷差异，由于SDS与蛋白质的结合是按重量成比例的，因此在进行电泳时，蛋白质分子的迁移速度仅取决于分子大小，因此可以根据蛋白分子量大小将不同的蛋白拉出不同的梯度进而检测。

Western blot即蛋白质印迹。被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如PVDF薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与辣根过氧化物酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。发光值得高低反映蛋白浓度的高低水平。

ELISA检测人血清中的CHIP表达水平是结合在固相载体（如96孔板）表面的抗体仍保持其免疫活性，受检标本中的抗原可以与固相载体表面的抗体发生抗原抗体反应，用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体符合物与液体中的其他物质分开，再加入酶标记的抗体，使之也通过反应而结合在固体载体上。此时固相上的酶含量即与标本中受监测物质的量呈正比，通过酶催化的底物颜色即可确定标本中抗原的含量。

本部分实验主要通过免疫组化研究CHIP在胰腺癌组织和癌旁组织中的表达水平，通过CHIP的表达水平与临床指标的联系寻找可能影响预后的因素，通过CHIP表达水平与总生存期和无瘤生存期观察其是否可以作为预测预后的指标；通过在正常人和不同患者血清中CHIP表达水平的差异观察其是否可以作为胰腺癌鉴别诊断的有效肿瘤学标志物。

实施例1、实验材料的采集

1、组织病理标本：

收集北京协和医院2006年1月至2010年7月收治的经病理检查确诊的胰腺导管腺癌的病例标本，标本于北京协和医院基本外科-80℃标本库保存。研究样本的纳入和排除标准如下：

1）纳入标准：病理诊断为胰腺导管腺癌的标本，行手术切除的病例。

2）排除标准：未行肿瘤切除，或仅行胰腺组织活检；病例资料不完整，无法获得随访信息；标本无法制备成免疫组化切片。

本次共有58例胰腺癌患者被纳入本次研究，其中男性25人，女性33人，男女比例为1:1.32；年龄＜65岁者38例，≥65岁者20例；位于胰头者36例，位于胰体尾者22例；低分化者25例，高中分化者33例；肿瘤TNM分期1-2期44例，3-4期14例；R0切除者47例，R1切除11例。所有患者在术前均未接受放化疗或免疫治疗。本项研究已经获得北京协和医院伦理委员会的批准。

2、血清标本：

收集北京协和医院2008年1月至2012年1月进行检查的健康志愿者47例，经临床诊断为慢性胰腺炎患者的血标本18例，经病理检查确诊为胰腺良性肿瘤的血标本29例，经病理检查确诊为胰腺内分泌肿瘤的血标本19例，经病理检查确诊为胰腺导管腺癌患者的血标本47例。行手术患者其血清样品均为手术前获取样品，标本保存于北京协和医院基本外科-80℃冰箱中。研究样本的纳入和排除标准如下：

1）纳入标准：

健康志愿者：无肝炎，结核，慢性炎症以及肿瘤的健康人群。

慢性胰腺炎：根据内外分泌不足的临床症状和体征、影像学诊断作为临床诊断纳入标准。

胰腺良性肿瘤：包括浆液性囊性肿瘤，粘液性囊性肿瘤，导管内乳头状粘液性肿瘤，实性假乳头性肿瘤患者。

胰腺内分泌肿瘤：包括胰岛素瘤和胰腺内分泌癌患者。

胰腺癌：胰腺导管腺癌患者，包括未手术切除仅行病理穿刺确诊患者。

2）排除标准:伴有肝炎，胆囊炎或其他合并症；血清标本发生降解；术后获取的血清样品；病例资料不完整，无法获得随访信息。

本项研究已经获得北京协和医院伦理委员会的批准。

实施例2、实验方法

采用本领域公知的技术进行组织蛋白的提取、组织蛋白SDS-PAGE和Westernblot、免疫组化检测、ELISA检测人血清中的CHIP表达水平。其中CHIP蛋白的ELISA试剂盒购自武汉华美生物有限公司，试剂盒号CBS-EL022887HU。

免疫组化结果的判定如下：

按染色阳性细胞百分比分为四个等级

—阴性

+＜30%阳性细胞数

++30-60%阳性细胞数

+++>60%阳性细胞数

以阳性细胞百分比为60%分为CHIP低表达和CHIP高表达两组。评分由两位病理科医师独立完成。

统计分析：

对于计数资料采用卡方检验（Chi-square test）或Fisher精确检验；单因素分析用Log-rank检验组间生存曲线差异，多因素分析采用Cox比例风险回归模型分析相对危险度；Kaplan-Meier法进行生存时间分析；采用ROC曲线评估指标的诊断价值以及诊断敏感性和特异性。统计软件采用SPSS13.0，取p<0.05为有统计学差异。采用Graphpad Prism5.0进行统计作图。

实施例3、实验结果

1）、SDS-PAGE和Western blot检测CHIP和Hsp70在胰腺癌和癌旁组织的表达水平

结果发现，CHIP在第一和第三例病人中的胰腺癌组织中表达水平是升高的，在第二和第四例病人中表达水平明显降低。Hsp70表达水平差别并不明显，第一例和第三例患者表达水平升高，第二例表达水平无明显差异，第四例表达水平降低。（图1）

2）、免疫组化检测CHIP蛋白在胰腺癌组织和癌旁组织的表达水平

CHIP蛋白表达主要在胞浆中，表现为淡黄色至深棕色。癌旁组织CHIP蛋白阴性表达37例，有表达21例。癌组织阴性表达19例，有表达39例。胰腺癌组织中CHIP表达水平明显高于癌旁组织，差异具有统计学意义。（p=0.001）。（图2）

3）、人胰腺癌组织中CHIP表达水平与临床特征的关系

以阳性细胞百分比60%分为低表达和高表达组，进行免疫组化染色进行评分和统计学分析。结果发现，CHIP表达水平与N分期有相关性，p=0.041，胰腺癌中低表达CHIP发生淋巴结转移的风险是高表达CHIP发生淋巴结转移风险的3.06倍。另外，CHIP表达水平也与术后肿瘤转移有相关性，p=0.01，低表达CHIP发生术后转移的风险是高表达CHIP发生术后转移的4.18倍。CHIP表达和性别、年龄、肿瘤部位、手术方式、肿瘤分化程度、是否根治切除、T分期、远处转移、术后是否复发并无相关性。

表1胰腺癌组织CHIP蛋白表达水平与临床指标的相关性

a代表采用Fisher精确检验

*代表p<0.05

4）、胰腺癌组织CHIP表达水平和临床病理指标对总体生存期的影响

4.1）、各指标对总生存期影响的单因素分析

共有58例患者获得最终随访资料并进入总体生存相关性分析。根据癌组织CHIP免疫组化结果、年龄、性别、肿瘤部位、切缘受累情况、手术方式、肿瘤分化、T分期、淋巴结转移、远处转移、TNM分期等指标进行分组，采用Kaplan-Meier比较各组指标与总体生存期之间的相关性。结果显示，CHIP表达水平的高低，是否根治性切除、T分期、是否淋巴结转移、是否有远处转移这些指标所对应的胰腺癌患者总生存期有显著性差异(p<0.05)，是影响预后的危险因素。（表2）

表2胰腺癌CHIP表达水平及各临床病例指标对总体生存期影响的单因素分析

*代表p<0.05

4.2）、各指标对总生存期影响的多因素分析

对于单因素分析p<0.1的指标，包括根治性切除、T分期、淋巴结转移、远处转移和CHIP表达水平，纳入Cox回归模型进行多因素分析，统计各因素对总生存期的影响，并确定相对危险度。结果表明，淋巴结转移和远处转移是影响预后的独立危险因素，具有统计学意义（p<0.05）。而根治性切除，T分期和CHIP表达水平并非独立危险因素。（表3）

表3影响胰腺癌总生存期的多因素分析

*代表p<0.05

5）、胰腺癌组织CHIP表达水平及各临床指标对无病生存期的影响

5.1）、各指标对无病生存期影响的单因素分析

共有46例R0切除患者进行无病生存相关性因素分析。根据年龄、性别、肿瘤部位、手术方式、肿瘤分化程度、T分期、淋巴结转移、远处转移、TNM分期和CHIP表达水平高低进行分组，采用Kaplan-Merer法比较各指标组间无病生存期的差别，同时分析这些指标对总生存期相关性因素分析。结果提示，淋巴结有无转移对无病生存时间有显著性影响，差异有统计学意义（p<0.01），提示淋巴结转移是影响无病生存期的危险因素。而肿瘤分化程度和CHIP表达水平对无病生存期的影响虽然没有观察到统计学意义，但p分别为0.1和0.067提示肿瘤低分化和CHIP低表达有可能是无病生存期的危险因素。对各指标和总生存期影响结果分析发现，淋巴结转移对总生存期有显著性影响，差异有统计学意义(p=0.002)，提示淋巴结转移是影响总生存期的危险因素。（表4）

表4癌组织CHIP表达水平及各病例指标对无病生存期及R0切除后总体生存期影响的单因素分析

*代表p<0.05

5.2）、各指标对无病生存期影响的多因素分析

对于单因素分析对总生存期有意义或潜在意义的指标，包括肿瘤分化程度、淋巴结转移和CHIP表达水平纳入Cox回归模型进行多因素分析，统计各因素对无病生存期的影响，并确定相对危险度。结果表明，肿瘤分化程度和淋巴结转移是影响预后的独立危险因素，具有统计学意义（p<0.05）。而CHIP表达水平并非独立危险因素。（表5）

表5影响胰腺癌无病生存期的多因素分析

*代表p<0.05

6）、不同患者血清中CHIP表达水平

由表6可见，正常志愿者血清中CHIP表达水平较高，而慢性胰腺炎患者CHIP表达量中等，良性肿瘤，胰腺神经内分泌肿瘤和胰腺导管腺癌患者其血清CHIP表达水平较低。其中，正常志愿者与其他患者血清CHIP表达差异明显，p均<0.01，有统计学意义；慢性胰腺炎患者与其他患者血清CHIP表达差异明显，p均<0.05，有统计学意义；胰腺良性肿瘤，胰腺内分泌肿瘤及胰腺癌患者血清CHIP表达水平无统计学差异。

表6各组血清CHIP表达水平及相互比较

Nor:正常志愿者，CP:慢性胰腺炎患者，PET:胰腺内分泌肿瘤患者，PBT:胰腺良性肿瘤患者，PDAC:胰腺导管腺癌患者

7）、胰腺癌患者血清中CHIP表达水平与各临床病例指标的关系

血清中CHIP表达以58pg/ml作为分界点分为低表达组和高表达组，研究其与年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤分化程度、T分期、淋巴结转移、远处转移及TNM分期之间的相关性。结果发现，血清中CHIP表达水平与肿瘤是否发生远处转移有相关性，统计学有显著性差异（p=0.01），血清低表达CHIP患者发生远处转移的风险是血清高表达CHIP患者发生远处转移风险的1.76倍。（表7）

表7胰腺癌患者血清CHIP表达水平与各临床指标的相关性

a指采用Fisher精确检验

*代表p<0.05

8）、胰腺癌患者血清CHIP表达水平及各临床病理指标对总体生存期的影响

共有47例患者获得最终随访资料并进入总体生存相关性分析。根据CHIP在血清中表达高低、年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤分化、T分期、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、是否手术等指标进行分组，采用Kaplan-Meier比较各组指标与总体生存期之间的相关性。结果显示，淋巴结转移、远处转移、TNM分期和是否手术切除所对应的胰腺癌患者总生存期有显著性差异(p<0.05)，是影响预后的危险因素。而血清CHIP表达水平并非影响预后的因素。（表8）

表8胰腺癌CHIP血清表达水平及各临床病例指标对总体生存期影响的单因素分析

*代表p<0.05

9）、血清CHIP表达水平对各种胰腺疾病的鉴别诊断的意义

9.1）、血清CHIP表达用于鉴别正常人和慢性胰腺炎患者

通过建立ROC曲线分析其曲线下面积为0.882，与AZ=0.5比较差异有统计学意义（p<0.01）。提示血清CHIP蛋白表达水平对于正常人和慢性胰腺炎患者有较高鉴别诊断价值，其准确率为88.2%；根据统计结果可能切点的敏感度和特异度最大选择临界点，确定血清中CHIP含量127.73pg/ml作为最佳临界点(cut-offvalue)，其敏感性为94.4%，特异性为74.5%。（图3）

9.2）、血清CHIP表达用于鉴别正常人和胰腺良性肿瘤患者

通过建立ROC曲线分析其曲线下面积为0.962，与AZ=0.5比较差异有统计学意义（p<0.01）。提示血清CHIP蛋白对于正常人和胰腺良性肿瘤患者有较高鉴别诊断价值，其准确率为96.2%；根据统计结果可能切点的敏感度和特异度最大选择临界点，确定血清中CHIP含量87.07g/ml作为最佳临界点(cut-off value)，其敏感性为93.1%，特异性为91.5%。(图4)

9.3）、血清CHIP表达用于鉴别正常人和胰腺内分泌肿瘤患者

通过建立ROC曲线分析其曲线下面积为0.966，与AZ=0.5比较差异有统计学意义（p<0.01）。提示血清CHIP蛋白对于正常人和胰腺内分泌肿瘤患者有较高鉴别诊断价值，其准确率为96.6%；根据统计结果可能切点的敏感度和特异度最大选择临界点，确定血清中CHIP含量为87.75pg/ml作为最佳临界点，其敏感性为100%，特异性为91.49%。（图5）

9.4）、血清CHIP表达用于鉴别正常人和胰腺导管腺癌患者

通过建立ROC曲线分析其曲线下面积为0.957，与AZ=0.5比较差异有统计学意义（p<0.01）。提示血清CHIP蛋白对于正常人和胰腺导管腺癌患者有较高鉴别诊断价值，其准确率为95.7%；根据统计结果可能切点的敏感度和特异度最大选择临界点，确定血清中CHIP含量99.29pg/ml作为最佳临界点，其敏感性为93.6%，特异性为85.1%。（图6）

9.5）、血清CHIP表达用于鉴别慢性胰腺炎患者和胰腺良性肿瘤患者

通过建立ROC曲线分析其曲线下面积为0.688，与AZ=0.5比较差异有统计学意义（p=0.032）。提示血清CHIP蛋白对于慢性胰腺炎患者和胰腺良性瘤患者有一定鉴别诊断价值，其准确率为68.8%；根据统计结果可能切点的敏感度和特异度最大选择临界点，确定血清中CHIP含量87.81pg/ml作为最佳临界点，其敏感性为93.1%，特异性为44.4%。（图7）

9.6）、血清CHIP表达用于鉴别慢性胰腺炎患者和胰腺内分泌肿瘤患者

通过建立ROC曲线分析其曲线下面积为0.713，与AZ=0.5比较差异有统计学意义（p=0.027）。提示血清CHIP蛋白对于慢性胰腺炎患者和胰腺内分泌肿瘤患者有一定鉴别诊断价值，其准确率为71.3%；根据统计结果可能切点的敏感度和特异度最大选择临界点，确定血清中CHIP含量88.5pg/ml作为最佳临界点，其敏感性为100%，特异性为44.4%。（图8）

9.7）、血清CHIP表达用于鉴别慢性胰腺炎患者和胰腺导管腺癌患者

通过建立ROC曲线分析其曲线下面积为0.765，与AZ=0.5比较差异有统计学意义（p=0.001）。提示血清CHIP蛋白对于慢性胰腺炎和胰腺导管腺癌患者有一定鉴别诊断价值，其准确率为76.5%；根据统计结果可能切点的敏感度和特异度最大选择临界点，确定血清中CHIP含量58.68pg/ml作为最佳临界点，其敏感性为68.09%，特异性为77.78%。（图9）

9.8）、血清CHIP表达用于鉴别胰腺良性肿瘤患者和胰腺内分泌肿瘤患者

通过建立ROC曲线分析其曲线下面积为0.550，与AZ=0.5比较差异没有统计学意义（p=0.562）。提示血清CHIP蛋白对于胰腺良性肿瘤和胰腺内分泌肿瘤患者没有鉴别诊断价值。（图10）

9.9）、通过建立ROC曲线分析其曲线下面积为0.611，与AZ=0.5比较差异没有统计学意义（p=0.105）。提示血清CHIP蛋白对于胰腺良性肿瘤和胰腺导管腺癌患者没有鉴别诊断价值。（图11）

9.10）、血清CHIP表达用于鉴别胰腺内分泌肿瘤患者和胰腺导管腺癌患者

通过建立ROC曲线分析其曲线下面积为0.557，与AZ=0.5比较差异没有统计学意义（p=0.474）。提示血清CHIP蛋白对于胰腺内分泌肿瘤和胰腺导管腺癌患者没有鉴别诊断价值。（图12）

实验结论

1）、胰腺癌组织中CHIP表达水平较癌旁组织升高；

2）、胰腺癌组织中CHIP表达与淋巴结转移和术后复发呈负相关；

3）、胰腺癌组织中CHIP低表达与预后不良有关，其表达水平降低是影响胰腺癌患者总生存期和无瘤生存期的可能危险因素。

4）、正常人、慢性胰腺炎患者、胰腺癌患者血清CHIP表达逐渐降低；

5）、血清CHIP表达可作为胰腺癌鉴别诊断的肿瘤学标志物；

6）、血清CHIP表达可作为胰腺良性肿瘤或胰腺内分泌肿瘤与正常人鉴别诊断的肿瘤学标志物。

终上所述，CHIP在癌组织表达水平高于癌旁组织，其表达与肿瘤淋巴结转移和术后转移负相关；CHIP高表达患者预后相对较好，是影响胰腺癌预后的可能危险因素。CHIP在慢性胰腺炎，胰腺癌患者血清中表达水平明显降低；在胰腺癌患者中，其表达水平与肿瘤远处转移相关，CHIP可作为鉴别正常人、慢性胰腺炎和胰腺癌患者有效的血清学标志物。

Claims (7)

1.CHIP蛋白标志物在制备用于诊断胰腺癌患者的试剂盒中的用途。

2.根据权利要求1的用途，其中所述的CHIP蛋白标志物作为区分正常人、慢性胰腺炎和胰腺癌患者的有效的血清学标志物。

3.根据权利要求1的用途，其中所述的CHIP蛋白标志物作为区分正常人、胰腺良性肿瘤和胰腺癌患者的有效的血清学标志物。

4.根据权利要求1的用途，其中所述的CHIP蛋白标志物作为区分胰腺良性肿瘤、胰腺内分泌肿瘤与正常人的有效的血清学标志物。

5.根据权利要求1-4任一项所述的用途，其中将所述试剂盒用于ELISA方法中。

6.一种CHIP蛋白在制备用于评估胰腺癌患者预后的试剂盒中的用途。

7.根据权利要求6所述的用途，其中CHIP蛋白高表达患者预后相对较好。