CN105018554B - 一种小分子牛骨胶原肽及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种小分子牛骨胶原肽及其制备方法，所述制备方法依次包括以下步骤：粉碎、提取分离、酶解、复合过滤、浓缩和干燥；所述酶解过程为：在牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解；一次酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至6‑7，然后加入脯氨酸蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为2h‑4h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％‑0.3％。本发明根据牛骨胶原蛋白的特殊性，首次采用脯氨酸蛋白酶和骨胶原蛋白酶进行复合酶解，使得到的产品实用性强，小分子活性肽的得率很高，得率高达90％。
Description
技术领域
本发明涉及生物活性物质的提取领域，具体涉及一种小分子牛骨胶原肽及其制备方法。
背景技术
我国是世界第一肉类生产大国，随着屠宰数量地不断增加，副产物也大量产生，目前每年能产生约近2000万吨的畜禽骨。以牛骨为例，其约占牛体质量的12％～20％，即每生产100kg牛肉就会有12～20kg的牛骨产生。在我国的骨加工业中，畜骨大部分用于生产动物饲料，例如生产骨胶、骨油、骨粉等，其附加值都很低，尤其是牛骨深加工开发研究较少。骨的营养价值丰富，骨中的粗蛋白含量与肉十分接近，且大部分是胶原，胶原占骨中蛋白质总量的80％以上。胶原蛋白是动物体骨骼中含量最大的一种蛋白质，将胶原蛋白进一步酶解可得到性能更加优良的胶原肽，将其应用于美容化妆品、医学、药用、食品工业等领域，能够充分提升其附加值。
胶原蛋白是广泛存在于动物和人体中的一种蛋白质，具有多种生理活性，但因分子量大而难以被人体完全吸收。胶原多肽是胶原蛋白经酶解而形成的小分子的生物活性肽，由于其源于动物胶原蛋白，分子结构和植物蛋白、胶原蛋白相比更适合人体吸收。胶原多肽不仅具有一般蛋白质的营养作用，还具有不可替代的调节功能和良好的营养特征、生理功能、加工特性等，人体吸收率达100％。其中，从牛骨中提取的胶原蛋白肽经酶解后所得到的牛骨胶原蛋白肽在增加骨密度、预防与治疗骨关节炎和骨质疏松、抑制血管紧张素转化酶活性、抑制血小板凝集活性、抗氧化活性、抗肿瘤活性等多方面具有特别的功能作用。
近年来关于骨骼酶解的相关专利，大多采用胃蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶等，虽然取得了一定的效果，但由于骨骼中主要成分是胶原蛋白，其三股螺旋结构导致胶原蛋白难以分解，且产物分子量分布范围广、不集中，大分子肽含量较高，因此至今没有找到真正合适的降解骨骼的大工业生产利用的酶类。且目前国内利用牛骨制备的胶原肽，产品分子量多数分布在5000道尔顿至10000道尔顿之间。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术中存在的缺陷，提供了一种小分子牛骨胶原肽及其制备方法。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种小分子牛骨胶原肽的制备方法，依次包括以下步骤：粉碎、提取分离、酶解、复合过滤、浓缩和干燥；
所述酶解过程是：向提取分离后获得的牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温度为50℃-55℃，一次酶解时间为1h-2h，骨胶原蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％-0.3％，一次酶解结束后进行灭酶处理；
一次酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至6-7，然后加入脯氨酸蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为2h-4h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％-0.3％，二次酶解结束后进行灭酶处理。
本发明的有益效果是：本发明根据牛骨胶原蛋白的特殊性，首次采用脯氨酸蛋白酶和骨胶原蛋白酶进行复合酶解，使得到的产品实用性强，小分子活性肽的得率很高，得率高达90％。
在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。
进一步，所述复合过滤包括活性碳过滤和膜过滤步骤，所述活性碳过滤步骤是向灭酶处理后的牛骨胶原蛋白酶解液中加入活性碳，活性碳的加入量为牛骨胶原蛋白质量的2％-4％，将牛骨胶原蛋白酶解液升温至80℃-100℃，并保温5min-10min；然后降温至70℃-80℃，静置30min-2h；
所述膜过滤步骤是将经过活性碳过滤后的牛骨胶原肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤器和孔径为0.1μm的多层膜过滤器进行过滤，膜过滤压力为0.1MPa-0.3MPa。
采用上述进一步方案的有益效果是：利用活性碳的吸附作用以及膜设备过滤作用，能有效去除有害重金属，使最终得到的牛骨胶原肽产品安全无毒。
进一步，所述浓缩过程为：将经过过滤的牛骨胶原肽溶液在蒸发器中浓缩至固形物含量为25％-35％，浓缩温度控制在55℃-65℃，浓缩压力为-0.4MPa至-0.6MPa。
进一步，所述干燥过程为：将经过浓缩的牛骨胶原蛋白浓缩液经干燥塔干燥，干燥过程中的进口温度为180℃-190℃，出口温度为85℃-95℃。
进一步，所述提取分离过程为：将经过粉碎后的牛骨清洗干净后，放入蒸煮罐中进行蒸煮，牛骨与水的体积比为1:3-5，蒸煮压力为0.15MPa-2MPa，蒸煮温度为100℃-120℃，蒸煮时间为2h-4h。
进一步，所述粉碎过程为：将新鲜的动物骨头先人工除去骨头上的杂质后，再利用碎骨机粉碎至2cm-3cm的骨块。
进一步，所述灭酶处理过程为：将经过一次酶解或二次酶解获得的牛骨胶原蛋白酶解液加热至90℃-100℃，并保持5min-10min，进行灭酶处理。
采用上述方法即制得本发明所述的一种小分子牛骨胶原肽，小分子牛骨胶原肽的平均分子量为200道尔顿-1000道尔顿。
具体实施方式
结合以下实施例对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。、
实施例1
本实施例的一种小分子牛骨胶原肽的制备方法，具体包括以下步骤：
1)粉碎：将新鲜的牛骨头先人工除去骨头上的杂质后，再利用碎骨机粉碎至2cm的骨块。
2)提取分离：所述提取分离过程为：将经过粉碎后的牛骨清洗干净后，放入蒸煮罐中进行蒸煮，牛骨与水的体积比为1:3，蒸煮压力为0.15MPa，蒸煮温度为100℃，蒸煮时间为2h。提取分离后得到牛骨胶原蛋白提取液，采用波美计或凯氏定氮法对牛骨胶原蛋白提取液中的牛骨胶原蛋白含量进行检测。
3)酶解：在牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温度为50℃，一次酶解时间为1h，骨胶原蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％；
骨胶原蛋白酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至7，然后加入脯氨酸蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为2h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％；
将经过二次酶解的牛骨胶原蛋白酶解液加热至90℃，并保持5min，进行灭酶处理。
本实施例根据牛骨胶原蛋白的特殊性，首次采用脯氨酸蛋白酶和骨胶原蛋白酶进行复合酶解，使得到的产品实用性强，小分子活性肽的得率很高，得率高达90％。
4)复合过滤：复合过滤包括活性碳过滤和膜过滤，所述活性碳过滤为将灭酶处理后的牛骨胶原蛋白酶解液中加入活性碳，活性碳的加入量为牛骨胶原蛋白质量的2％，将牛骨胶原蛋白酶解液升温至80℃，并保温10min；然后降温至70℃，静置30min；
膜过滤为将经过活性碳过滤后的牛骨胶原肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤器和孔径为0.1μm的多层膜过滤器进行过滤，膜过滤压力为0.1MPa。
本实施例利用活性碳的吸附作用以及膜设备过滤作用，能有效去除有害重金属，使最终得到的小分子骨胶原肽产品安全无毒。
5)浓缩：将经过过滤的牛骨胶原肽溶液进入蒸发器中浓缩至固形物含量为30％，浓缩温度控制在65℃，浓缩压力为-0.6MPa。
6)干燥：将经过浓缩的牛骨胶原蛋白浓缩液经干燥塔干燥，干燥过程中的进口温度为190℃，出口温度为95℃。
采用上述方法即制得本发明所述的一种小分子牛骨胶原肽，小分子牛骨胶原肽的平均分子量为200道尔顿-1000道尔顿。
实施例2
本实施例的一种小分子牛骨胶原肽的制备方法，具体包括以下步骤：
1)粉碎：将新鲜的牛骨头先人工除去骨头上的杂质后，再利用碎骨机粉碎至2cm的骨块。
2)提取分离：所述提取分离过程为：将经过粉碎后的牛骨清洗干净后，放入蒸煮罐中进行蒸煮，牛骨与水的体积比为1:3，蒸煮压力为0.15MPa，蒸煮温度为100℃，蒸煮时间为2h。提取分离后得到牛骨胶原蛋白提取液，采用波美计或凯氏定氮法对牛骨胶原蛋白提取液中的牛骨胶原蛋白含量进行检测。
3)酶解：在牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温度为50℃，一次酶解时间为1h，骨胶原蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％；
骨胶原蛋白酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至6，然后加入脯氨酸蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为2h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％；
将经过二次酶解的牛骨胶原蛋白酶解液加热至90℃，并保持5min，进行灭酶处理。
本实施例根据牛骨胶原蛋白的特殊性，首次采用脯氨酸蛋白酶和骨胶原蛋白酶进行复合酶解，使得到的产品实用性强，小分子活性肽的得率很高，得率高达90％。
4)复合过滤：复合过滤包括活性碳过滤和膜过滤，所述活性碳过滤为将灭酶处理后的牛骨胶原蛋白酶解液中加入活性碳，活性碳的加入量为牛骨胶原蛋白质量的2％，将牛骨胶原蛋白酶解液升温至80℃，并保温5min；然后降温至70℃，静置30min；
膜过滤为将经过活性碳过滤后的牛骨胶原肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤器和孔径为0.1μm的多层膜过滤器进行过滤，膜过滤压力为0.1MPa。
本实施例利用活性碳的吸附作用以及膜设备过滤作用，能有效去除有害重金属，使最终得到的小分子骨胶原肽产品安全无毒。
5)浓缩：将经过过滤的牛骨胶原肽溶液进入蒸发器中浓缩至固形物含量为30％，浓缩温度控制在55℃，浓缩压力为-0.4MPa。
6)干燥：将经过浓缩的牛骨胶原蛋白浓缩液经干燥塔干燥，干燥过程中的进口温度为180℃，出口温度为85℃。
采用上述方法即制得本发明所述的一种小分子牛骨胶原肽，小分子牛骨胶原肽的平均分子量为200道尔顿-1000道尔顿。
实施例3
本实施例的一种小分子牛骨胶原肽的制备方法，具体包括以下步骤：
1)粉碎：将新鲜的牛骨头先人工除去骨头上的杂质后，再利用碎骨机粉碎至2.5cm的骨块。
2)提取分离：所述提取分离过程为：将经过粉碎后的牛骨清洗干净后，放入蒸煮罐中进行蒸煮，牛骨与水的体积比为1:4，蒸煮压力为0.18MPa，蒸煮温度为110℃，蒸煮时间为3h。提取分离后得到牛骨胶原蛋白提取液，采用波美计或凯氏定氮法对牛骨胶原蛋白提取液中的牛骨胶原蛋白含量进行检测。
3)酶解：在牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温度为53℃，一次酶解时间为1.5h，骨胶原蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.2％；
骨胶原蛋白酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至6.5，然后加入脯氨酸蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为3h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.2％；
将经过二次酶解的牛骨胶原蛋白酶解液加热至95℃，并保持8min，进行灭酶处理。
本实施例根据牛骨胶原蛋白的特殊性，首次采用脯氨酸蛋白酶和骨胶原蛋白酶进行复合酶解，使得到的产品实用性强，小分子活性肽的得率很高，得率高达90％。
4)复合过滤：复合过滤包括活性碳过滤和膜过滤，所述活性碳过滤为将灭酶处理后的牛骨胶原蛋白酶解液中加入活性碳，活性碳的加入量为牛骨胶原蛋白质量的3％，将牛骨胶原蛋白酶解液升温至90℃，并保温8min；然后降温至78℃，静置1h；
膜过滤为将经过活性碳过滤后的牛骨胶原肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤器和孔径为0.1μm的多层膜过滤器进行过滤，膜过滤压力为0.2MPa。
本实施例利用活性碳的吸附作用以及膜设备过滤作用，能有效去除有害重金属，使最终得到的小分子骨胶原肽产品安全无毒。
5)浓缩：将经过过滤的牛骨胶原肽溶液进入蒸发器中浓缩至固形物含量为35％，浓缩温度控制在60℃，浓缩压力为-0.5MPa。
6)干燥：将经过浓缩的牛骨胶原蛋白浓缩液经干燥塔干燥，干燥过程中的进口温度为188℃，出口温度为90℃。
采用上述方法即制得本发明所述的一种小分子牛骨胶原肽，小分子牛骨胶原肽的平均分子量为200道尔顿-1000道尔顿。
实施例4
本实施例的一种小分子牛骨胶原肽的制备方法，具体包括以下步骤：
1)粉碎：将新鲜的牛骨头先人工除去骨头上的杂质后，再利用碎骨机粉碎至3cm的骨块。
2)提取分离：所述提取分离过程为：将经过粉碎后的牛骨清洗干净后，放入蒸煮罐中进行蒸煮，牛骨与水的体积比为1:5，蒸煮压力为2MPa，蒸煮温度为120℃，蒸煮时间为4h。提取分离后得到牛骨胶原蛋白提取液，采用波美计或凯氏定氮法对牛骨胶原蛋白提取液中的牛骨胶原蛋白含量进行检测。
3)酶解：在牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温度为55℃，一次酶解时间为2h，骨胶原蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.3％；
骨胶原蛋白酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至7，然后加入脯氨酸蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为4h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.3％；
将经过二次酶解的牛骨胶原蛋白酶解液加热至100℃，并保持10min，进行灭酶处理。
本实施例根据牛骨胶原蛋白的特殊性，首次采用脯氨酸蛋白酶和骨胶原蛋白酶进行复合酶解，使得到的产品实用性强，小分子活性肽的得率很高，得率高达90％。
4)复合过滤：复合过滤包括活性碳过滤和膜过滤，所述活性碳过滤为将灭酶处理后的牛骨胶原蛋白酶解液中加入活性碳，活性碳的加入量为牛骨胶原蛋白质量的4％，将牛骨胶原蛋白酶解液升温至100℃，并保温10min；然后降温至80℃，静置2h；
膜过滤为将经过活性碳过滤后的牛骨胶原肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤器和孔径为0.1μm的多层膜过滤器进行过滤，膜过滤压力为0.15MPa。
本实施例利用活性碳的吸附作用以及膜设备过滤作用，能有效去除有害重金属，使最终得到的小分子骨胶原肽产品安全无毒。
5)浓缩：将经过过滤的牛骨胶原肽溶液进入蒸发器中浓缩至固形物含量为25％，浓缩温度控制在65℃，浓缩压力为-0.6MPa。
6)干燥：将经过浓缩的牛骨胶原蛋白浓缩液经干燥塔干燥，干燥过程中的进口温度为185℃，出口温度为95℃。
采用上述方法即制得本发明所述的一种小分子牛骨胶原肽，小分子牛骨胶原肽的平均分子量为200道尔顿-1000道尔顿。
实施例5
本实施例的一种小分子牛骨胶原肽的制备方法，具体包括以下步骤：
1)粉碎：将新鲜的牛骨头先人工除去骨头上的杂质后，再利用碎骨机粉碎至2.5cm的骨块。
2)提取分离：所述提取分离过程为：将经过粉碎后的牛骨清洗干净后，放入蒸煮罐中进行蒸煮，牛骨与水的体积比为1:3.5，蒸煮压力为2MPa，蒸煮温度为120℃，蒸煮时间为4h。提取分离后得到牛骨胶原蛋白提取液，采用波美计或凯氏定氮法对牛骨胶原蛋白提取液中的牛骨胶原蛋白含量进行检测。
3)酶解：在牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温度为50℃，一次酶解时间为1h，骨胶原蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％；
骨胶原蛋白酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至6，然后加入脯氨酸蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为2h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％；
将经过二次酶解的牛骨胶原蛋白酶解液加热至90℃，并保持5min，进行灭酶处理。
本实施例根据牛骨胶原蛋白的特殊性，首次采用脯氨酸蛋白酶和骨胶原蛋白酶进行复合酶解，使得到的产品实用性强，小分子活性肽的得率很高，得率高达90％。
4)复合过滤：复合过滤包括活性碳过滤和膜过滤，所述活性碳过滤为将灭酶处理后的牛骨胶原蛋白酶解液中加入活性碳，活性碳的加入量为牛骨胶原蛋白质量的2％，将牛骨胶原蛋白酶解液升温至80℃，并保温5min；然后降温至70℃，静置1.5h；
膜过滤为将经过活性碳过滤后的牛骨胶原肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤器和孔径为0.1μm的多层膜过滤器进行过滤，膜过滤压力为0.1MPa。
本实施例利用活性碳的吸附作用以及膜设备过滤作用，能有效去除有害重金属，使最终得到的小分子骨胶原肽产品安全无毒。
5)浓缩：将经过过滤的牛骨胶原肽溶液进入蒸发器中浓缩至固形物含量为30％，浓缩温度控制在55℃，浓缩压力为-0.6MPa。
6)干燥：将经过浓缩的牛骨胶原蛋白浓缩液经干燥塔干燥，干燥过程中的进口温度为190℃，出口温度为95℃。
采用上述方法即制得本发明所述的一种小分子牛骨胶原肽，小分子牛骨胶原肽的平均分子量为200道尔顿-1000道尔顿。
采用GB/T 22729-2008对本实施例3方法制得的小分子牛骨胶原肽的分子量分布进行检测，检测结果如表1所示。
表1小分子牛骨胶原肽的分子量分布表
由表1可知，采用实施例3所述方法制得的小分子牛骨胶原肽的平均分子量主要分布在180道尔顿-1000道尔顿之间，该分子量区间的小分子牛骨胶原肽粉水溶性好，更有利于牛骨胶原肽活性成分的吸收和利用。
采用GB 5009.5-2010对本实施例3方法制得的一种小分子牛骨胶原肽的肽含量、酸溶蛋白含量、总氮含量和干燥失重进行检测，检测结果如表2所示。
表2小分子牛骨胶原肽粉的肽含量、酸溶蛋白含量、总氮含量和干燥失重检测结果
| 肽含量(g/100g) | 90.95 |
| 酸溶蛋白含量(g/100g) | 86.10 |
| 总氮含量(g/100g) | 15.60 |
| 干燥失重(％) | 5.51 |
由表2可知，采用实施例3所述方法制取小分子牛骨胶原肽的得率为90％以上，其中酸溶蛋白含量占大多数，有利于人体胃的消化吸收，具有抗肿瘤、提高机体免疫能力、抗氧化等多种生理功能。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种小分子牛骨胶原肽的制备方法，其特征在于，依次包括以下步骤：粉碎、提取分离、酶解、复合过滤、浓缩和干燥；小分子牛骨胶原肽的平均分子量为200道尔顿-1000道尔顿；
所述酶解过程是：向提取分离后获得的牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解，一次酶解温度为50℃-55℃，一次酶解时间为1h-2h，骨胶原蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1%-0.3%，一次酶解结束后进行灭酶处理；
一次酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至6-7，然后加入脯氨酸蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为2h-4h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1%-0.3%，二次酶解结束后进行灭酶处理。
2.根据权利要求1所述一种小分子牛骨胶原肽的制备方法，其特征在于，所述复合过滤包括活性碳过滤和膜过滤步骤，所述活性碳过滤步骤是向灭酶处理后的牛骨胶原蛋白酶解液中加入活性碳，活性碳的加入量为牛骨胶原蛋白质量的2%-4%，将牛骨胶原蛋白酶解液升温至80℃-100℃，并保温5min-10min；然后降温至70℃-80℃，静置30min-2h；
所述膜过滤步骤是将经过活性碳过滤后的牛骨胶原肽溶液依次经过桶式过滤器、棉饼过滤器和孔径为0.1μm的多层膜过滤器进行过滤，膜过滤压力为0.1MPa-0.3MPa。
3.根据权利要求1所述一种小分子牛骨胶原肽的制备方法，其特征在于，所述浓缩过程为：将经过过滤的牛骨胶原肽溶液在蒸发器中浓缩至固形物含量为25%-35%，浓缩温度控制在55℃-65℃，浓缩压力为-0.4MPa至-0.6MPa。
4.根据权利要求1所述一种小分子牛骨胶原肽的制备方法，其特征在于，所述干燥过程为：将经过浓缩的牛骨胶原肽浓缩液经干燥塔进行喷雾干燥，干燥过程中的进口温度为180℃-190℃，出口温度为85℃-95℃。
5.根据权利要求1所述一种小分子牛骨胶原肽的制备方法，其特征在于，所述提取分离过程为：将经过粉碎后的牛骨清洗干净后，放入蒸煮罐中进行蒸煮，牛骨与水的体积比为1:3-5，蒸煮压力为0.15MPa-2MPa，蒸煮温度为100℃-120℃，蒸煮时间为2h-4h。
6.根据权利要求1所述一种小分子牛骨胶原肽的制备方法，其特征在于，所述粉碎过程为：将新鲜的动物骨头先人工除去骨头上的杂质后，再利用碎骨机粉碎至2cm-3cm的骨块。
7.根据权利要求1所述一种小分子牛骨胶原肽的制备方法，其特征在于，所述灭酶处理过程为：将经过一次酶解或二次酶解获得的牛骨胶原蛋白酶解液加热至90℃-100℃，并保持5min-10min，进行灭酶处理。
8.一种小分子牛骨胶原肽，其特征在于，采用如权利要求1-6任一项所述方法即制得所述的一种小分子牛骨胶原肽，小分子牛骨胶原肽的平均分子量为200道尔顿-1000道尔顿。
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