CN104955824B - 作为含t790m的egfr突变体的抑制剂的氨基嘧啶化合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及式(I)表示的新的化合物，其为含T790M的EGFR突变体的抑制剂，还涉及含该化合物的药物组合物，它们的制备方法以及它们在预防或治疗癌症中的治疗用途。

Description

作为含T790M的EGFR突变体的抑制剂的氨基嘧啶化合物
相关申请
本申请要求美国临时申请号61/728487、61/784494和61/866164号申请的权益，这些申请分别于2014年11月20日、2013年3月14日以及2013年8月15日提交。上述这些申请的所有教导都以引证的方式引入本文。
发明领域
本发明涉及新的化合物，其为含T790M的EGFR突变体的抑制剂，还涉及含该化合物的药物组合物，它们的制备方法以及它们在预防或治疗人类癌症中的治疗用途。
技术背景
HER家族受体酪氨酸激酶是细胞生长、分化和生存的重要调节剂。该受体家族包括四个不同的成员，包括表皮生长因子受体(EGFR、ErbB1或HER1)HER2(ErbB2)、HER3(ErbB3)和HER4(ErbB4)。在配体结合时，该受体形成同型二聚体和异源二聚体，并接着内在酪氨酸激酶活性的激活导致受体自发磷酸化以及下游信号传导分子的激活(Yarden和Sliwkowski)。由过表达或突变引发的反常EGFR已经被暗示在多种类型的人类癌症，包括结肠直肠癌、胰腺癌、神经胶质瘤、头颈癌和肺癌，近几年已经开发出了数种EGFR靶向试剂(Ciardiello,Hynes)。厄洛替尼EGFR酪氨酸激酶的一种可逆抑制剂，得到了美国食品药物管理局(the United States Food and Drug Administration,FDA)批准，用于治疗复发的NSCLC和胰腺癌。其他可逆的EGFR酪氨酸激酶抑制剂(“TKI”)包括吉非替尼和拉帕替尼。
在具有肿瘤体细胞激酶结构域突变的非小细胞肺癌(NSCLC)患者的亚组中，观察到EGFR酪氨酸激酶抑制剂的给人印象最深刻的单个试剂活性，而在野生型EGFR患者中的临床益处被极大地减小(Lynch 2004,Paez 2004)。EGFR最常见的体细胞突变为外显子19缺失delta 746-750最常见的普遍突变以及外显子21氨基酸取代以L858R最频繁的突变(Sharma)。有趣的是，这是以腺癌、女性、从未吸烟者和亚洲人的高度普遍性为特征的患者的亚组(Miller,Pao 2004)。
具有EGFR突变的肺癌的患者在服用EGFR酪氨酸激酶抑制剂10-14个月后最终发展出疾病进展(Pao 2010)。超过50％的在酪氨酸激酶抑制剂上有进展的患者获得在激酶结构域中于位置790处的第二突变，已知为看守残基(gatekeeper residue)。通过较大体积的残基甲硫氨酸取代苏氨酸(T790M突变)导致对ATP的亲和力相对于EGFR突变形式的增加以及来自EGFR TKI治疗的临床益处，并且导致对TKIs的亲和力的降低，这一起赋予了耐药性(Yun)。导致药物耐受的在激酶结构域中的类似看守突变参见Abl和Kit(Tamborini,Gorre)。本发明显示生成了特异性抑制含T790M的EGFR突变体的选择性分子。
参考文献：
Yarden,Y.,Sliwkowski,MX.Untangling the ErbB signalling network.NatureReview Mol Cell Biol.2001Feb；2(2):127-37.
Ciardiello,F.,and Tortora,G.(2008)。EGFR antagonists in cancertreatment.The New England journal of medicine 358,1160-1174.
Hynes NE,MacDonald G.ErbB receptors and signaling pathways incancer.Curr Opin Cell Biol.2009Apr；21(2):177-84.
Lynch,T.J.,Bell,D.W.,Sordella,R.,Gurubhagavatula,S.,Okimoto,R.A.,Brannigan,B.W.,Harris,P.L.,Haserlat,S.M.,Supko,J.G.,Haluska,F.G.,et al.(2004)。Activating mutations in the epidermal growth factor receptorunderlying responsiveness of non-small-cell lung cancer to gefitinib.The NewEngland journal of medicine 350,2129-2139.
Paez,J.G.,Janne,P.A.,Lee,J.C.,Tracy,S.,Greulich,H.,Gabriel,S.,Herman,P.,Kaye,F.J.,Lindeman,N.,Boggon,T.J.,et al.(2004)。EGFR mutations in lungcancer:correlation with clinical response to gefitinib therapy.Science(NewYork,NY 304,1497-1500.
Sharma SV,Bell DW,Settleman J,Haber DA.Epidermal growth factorreceptor mutations in lung cancer.Nat Rev Cancer.2007Mar；7(3):169-81.
Miller VA,Kris MG,Shah N,Patel J,Azzoli C,Gomez J,Krug LM,Pao W,RizviN,Pizzo B,Tyson L,Venkatraman E,Ben-Porat L,Memoli N,Zakowski M,Rusch V,Heelan RT.Bronchioloalveolar pathologic subtype and smoking history predictsensitivity to gefitinib in advanced non-small-cell lung cancer.J ClinOncol.2004Mar 15；22(6):1103-9.
Pao W,Miller V,Zakowski M,Doherty J,Politi K,Sarkaria I,Singh B,Heelan R,Rusch V,Fulton L,Mardis E,Kupfer D,Wilson R,Kris M,Varmus h。EGFreceptor gene mutations are common in lung cancers from"never smokers"and areassociated with sensitivity of tumors to gefitinib and erlotinib.Proc NatlAcad Sci U S A.2004Sep 7；101(36):13306-11.
Pao W,Chmielecki J.Rational,biologically based treatment of EGFR-mutant non-small-cell lung cancer.Nat Rev Cancer.2010Nov；10(11):760-74.
Yun CH,Mengwasser KE,Toms AV,Woo MS,Greulich h，Wong KK,Meyerson M,EckMJ.The T790M mutation in EGFR kinase causes drug resistance by increasing theaffinity for ATP.Proc Natl Acad Sci U S A.2008Feb 12；105(6):2070-5.
Tamborini E,Bonadiman L,Greco A,Albertini V,Negri T,Gronchi A,Bertulli R,Colecchia M,Casali PG,Pierotti MA,Pilotti S.A new mutation in theKIT ATP pocket causes acquired resistance to imatinib in a gastrointestinalstromal tumor patient.Gastroenterology.2004Jul；127(1):294-9.
Gorre ME,Mohammed M,Ellwood K,Hsu N,Paquette R,Rao PN,SawyersCL.Clinical resistance to STI-571cancer therapy caused by BCR-ABL genemutation or amplification.Science.2001Aug 3；293(5531):876-80.
发明内容
本发明涉及式(I)化合物：
其中，
X为CR3或N；
R1为C3-C7杂环烃基、杂芳基、芳基、-O(C1-C6烃基)、-O(C3-C7环烃基)或-NRaRb，其中所述C3-C7杂环烃基和杂芳基可以进一步被1至5个Rf基团取代；
R2为氢、-(CH2)m芳基、-(CH2)m杂芳基、-(CH2)mC4-C7杂环烃基、C1-C6烃基、烃基氨基、烃氧基或–CH2O(C1-C3烃基)；
R3为氢、C1-C3烃基、CN、COOH、C3-C7环烃基、杂环烃基、-NHC(O)C1-C6烃基、-(CH2)mC(O)NRaRb或杂芳基；
R4为氢、C3-C7杂环烃基、C3-C7环烃基、C1-C6烃基、-(CH2)m苯基或-(CH2)m杂芳基；
其中各Ra独立地为H或C1-C6烃基；各Rb独立地为H、C1-C6烃基、烃氧基、氨基、-(CH2)mC3-C7环烃基、-(CH2)mC3-C7杂环烃基或-(CH2)m杂芳基，其中所述C3-C7杂环烃基和杂芳基可以进一步经选自以下的1至3个基团取代：卤代、羟基、C1-C3烃基、氨基、氧代、酰胺基(amide)、磺酰基、亚砜基(sulfoxide)、亚砜亚氨基(sulfoximinyl)、烃氧基、CN和酰基；Ra和Rb一起可以形成C3-C7环烃基、C3-C7杂环烃基或杂芳基环；
其中各Rf独立地选自C1-C3烃基、烃氧基、氨基、羟基、烃基氨基、酰胺基、脲、氧代、卤代、吡唑基、咪唑基、三唑基、CN、-NHC(O)(C1-C3烃基)、酰基、磺酰基、亚砜基、亚砜亚氨基、磺酰胺基、酰胺基、-(CH2)mC3-C7杂环烃基、-O(C1-C6烃基)、-C(O)ORa；
各m独立地为0、1、2或3；
或其可药用盐。
本发明还涉及式(I)化合物的药物组合物。
本发明还涉及抑制含T790M的EGFR突变体的方法。
本发明还涉及治疗癌症的方法，式(I)化合物在治疗中的用途以及式(I)化合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
本发明还涉及制备式(I)化合物的方法。
发明详述
定义
如本文所用的，除非另有说明，术语“酰基”是指基团-C(O)R’，其中R’为烃基、C3-C6环烃基或杂环基，每个均如本文所定义。
如本文所用的，除非另有说明，术语“烃氧基”是指基团–OR’，其中R’为C1-C4烃基或C3-C6环烃基，如上文所定义。“烃氧基”的实例包括甲氧基、乙氧基、异丙氧基、丙氧基、丁氧基、t-丁氧基、异丁氧基、环丙氧基和环丁氧基以及其卤代形式，例如，氟甲氧基和二氟甲氧基。
如本文所用的，除非另有说明，术语“烃基”(或“亚烃基”)涉及具有1至12个碳原子的直链或支链烃，其可以为未经取代或经取代的、饱和的或具有多个(例如在本发明范围内，1、2或3个)不饱和度的不饱和的。取代基的实例选自：卤代、三氟甲基、二氟甲基、氨基、烃基氨基、氰基、磺酰基、磺酰胺基(sulfonamide)、亚砜基、酰胺基、羟基、烃氧基、酯、羧酸和烃硫基。本文使用的“烃基”的实例包括但不限于：甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、n-丁基、t-丁基、异戊基、n-戊基等以及其取代的形式。取代烃基的实例包括但不限于：二氟甲基和三氟甲基。未饱和的烃基还可以指烯基或炔基，如上所述，其可以为取代的。不饱和的烃基包括但不限于：乙烯基(ethenyl或vinyl)(-CH＝CH2)、丙-1-烯基(-CH＝CHCH3)、丙-2-烯基(-CH2CH＝CH2)、2-甲基丙-1-烯基、丁-1-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、丁-1,3-二烯基、2-甲基丁-1,3-二烯、己-1-烯基、己-2-烯基、己-3-烯基、己-4-烯基、己-1,3-二烯基、乙炔基(-C≡CH)、丙-1-炔基(-C≡CCH3)、丙-2-炔基(炔丙基，-CH2C≡CH)、丁-1-炔基、丁-2-炔基和丁-3-炔基.
如本文所用的，术语“烃基氨基”是指基团–NR’R”，其中R’为H、C1-C6烃基或C3-C6环烃基，且R”为C1-C6烃基或C3-C6环烃基。
如本文所用的，除非另有说明，术语“酰胺基(amide)”是指基团–C(O)NR’R”,其中R’和R”各自独立地为H、C1-C6烃基或C3-C6环烃基。
如本文所用的，除非另有说明，术语“芳基”是指芳香族的烃环体系。该环体系可以为单环或稠合多环(例如，双环、三环等)、经取代或未经取代的。在多个实施方案中，单环芳基环为C5-C10或C5-C7或C5-C6，其中这些碳数是指形成环体系的碳的数目。C6环体系，即苯环，为芳基。在多个实施方案中，多环环为双环芳基，其中双环芳基的实例包括C8-C12或C9-C10。具有10个碳原子的萘环为多环芳基。芳基的取代基的实例描述在下文“任选取代”的定义中。
如本文所用的，除非另有说明，术语“氰基”是指基团-CN。
如本文所用的，除非另有说明，“环烃基”是指非芳香族的、经取代或未经取代的、饱和或部分未饱和的烃环基团。取代基的实例描述在“任选取代”的定义中。在一个实例中，环烃基基团为3至12个碳原子(C3-C12)。在其他实例中，环烃基为C3-C8、C3-C10或C5-C10。在其他实例中，环烃基基团，作为单环，为C3-C8、C3-C6或C5-C6。在另一实例中，环烃基基团，作为双环，为C7-C12。在另一实例中，环烃基基团，作为螺环体系，为C5-C12。单环环烃基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、1-环戊-1-烯基、1-环戊-2-烯基、1-环戊-3-烯基、环己基、全氘化环己基、1-环己-1-烯基、1-环己-2-烯基、1-环己-3-烯基、环己二烯基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基、环十一碳基和环十二碳基。具有7至12个环原子的双环环烃基的示例性安排包括但不限于：[4,4]、[4,5]、[5,5]、[5,6]或[6,6]环体系。示例性桥接双环环烃基包括但不限于：双环[2.2.1]庚烷、双环[2.2.2]辛烷和双环[3.2.2]壬烷。螺环烃基的实例包括螺[2.2]戊烷、螺[2.3]己烷、螺[2.4]庚烷、螺[2.5]辛烷和螺[4.5]癸烷。
如本文所用的，除非另有说明，术语“酯”是指基团-C(O)OR’，其中R’为C1-C6烃基或C3-C6环烃基。
如本文所用的，除非另有说明，术语“杂环”、“杂环烃基”或“杂环基”是指未经取代或经取代的含有2至12个环碳原子和1至3个环杂原子的单环或多环非芳香族环体系。多环体系可以为稠合的双环或三环、螺环或桥接的。杂原子的实例包括N、O和S，包括N-氧化物、氧化硫和二氧化硫。在一个实施方案中，环为3至8元的并且为完全饱和的或者具有一个或多个不饱和度。多重不饱和度包括在本定义内。取代基的实例如下所定义。“杂环”基团的实例包括但不限于四氢呋喃基、吡喃基、1,4-二噁烷基、1,3-二噁烷基、哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、氮杂环丁烷基、哌嗪基、吡咯烷酮基、哌嗪酮基、吡唑烷基，以及它们的各种互变异构体。
如本文所用的，除非另有说明，术语“杂芳基”，除非另有说明，是指含有1至9个碳和至少一个杂原子的芳香环体系。杂原子的实例包括N、O和S。杂芳基可以为单环或多环的、经取代的或未经取代的。单环杂芳基基团可以在环中具有2至6个环碳原子和1至3环杂原子，而多环杂芳基可以含有3至9个环碳原子和1至5个环杂原子。多环杂芳基环可以含有稠合的、螺环的或桥接的环接头，例如双环杂芳基为多环杂芳基。双环杂芳基环可以含有8至12元原子。单环杂芳基环可以含有5至8元原子(碳和杂原子)。示例性杂芳基包括但不限于：苯并呋喃基、苯并噻吩基、呋喃基、咪唑基、吲哚、氮杂吲哚基、氮杂苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、苯并咪唑基、四嗪基、四唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、三嗪基、噻唑基和噻吩基。杂芳基的取代基的实例在下面“任选取代”的定义中描述。
如本文所用的，除非另有说明，术语“脲”是指基团–NR’C(O)NR”，其中R’和R”各自独立地为H、C1-C6烃基或C3-C6环烃基。
如本文所用的，除非另有说明，术语“任选”表示接着描述的(一个或多个)事件可以发生或可以不发生，并且包括包括发生的事件和不会发生的事件这两者。
如本文所用的，除非另有说明，短语“任选取代”或其变体表示以一个或多个取代基例如1个、2个或3个进行的任选取代，包括多重程度的取代。短语不应当被解释为本文描述和描绘的取代的重复。示例性任选的取代基基团包括酰基、C1-C6烃基、磺酰基、氨基、磺酰胺基、亚砜基、烃氧基、氰基、卤代、脲、酯、羧酸、酰胺基、羟基、氧代和硝基。
如本文所用的，除非另有说明，术语“治疗”是指缓解具体病症、消除或减轻一种或多种病症的症状、减缓或消除所述病症的进展。
如本文所用的，除非另有说明，术语“有效量”是指药物或药剂的量会导致例如研究员或临床医生寻找的组织、系统、动物或人的生物学或医学响应。
如本文所用的，除非另有说明，术语“治疗有效量”是指：与未接受该量的相应受治疗者相比，该量产生对疾病、障碍或副作用的治疗，或疾病或障碍的进展率的降低。所述术语还在其含义内包括有效增强正常生理功能的量。对于在治疗中使用，治疗有效量的式I化合物及其盐，可以以原料药(raw chemical)给药。此外，所述活性成分可以以药物组合物提供。
本发明涉及式(I)化合物或其可药用盐。
本发明涉及式(I)化合物或其可药用盐。
本发明还涉及式(I)化合物，其中X为N；或其可药用盐。
本发明还涉及式(I)化合物，其中X为CR3；或其可药用盐。
本发明还涉及上述化合物中的任一个，其中R1为C3-C7杂环烃基；或其可药用盐。
本发明还涉及上述化合物中的任一个，其中R1为杂芳基；或其可药用盐。
本发明还涉及上述化合物中的任一个，其中R1为-NRaRb；或其可药用盐。
本发明还涉及上述化合物中的任一个，其中R2为C1-C6烃基；或其可药用盐。
本发明还涉及上述化合物中的任一个，其中R2为氢、-(CH2)m芳基、杂芳基、C4-C7杂环烃基、烃基氨基、烃氧基或–(CH2)mO(C1-C3烃基)；或其可药用盐。
本发明还涉及上述化合物中的任一个，其中R4为氢或C1-C6烃基；
本发明还涉及上述可适用化合物中的任一个，其中R3为氢、C1-C3烃基、杂芳基或–(CH2)mC(O)NRaRb；或其可药用盐。
本发明还涉及上述可适用化合物中的任一个，其中R1为选自以下的C3-C7杂环烃基：哌啶基、哌嗪基、吡唑基和吡咯烃基，其中所述C3-C7杂环烃基可以进一步经1至5个选自以下的Rf取代：C1-C6烃基、烃氧基、卤代、羟基、磺酰基和磺酰胺基；或其可药用盐。
本发明还涉及上述可适用化合物中的任一个，其中R2为氢或C1-C3烃基；或其可药用盐。
本发明还涉及上述可适用化合物中的任一个，其中R3为氢、C1-C3烃基或-C(O)NH2；或其可药用盐。
本发明还涉及上述可适用化合物中的任一个，其中R4为氢或异丙基；Rf为F；或其可药用盐。
本发明还涉及在实验部分中的任一个实施例。
典型但非绝对地，本发明的盐为可药用盐。在术语“可药用盐”中包括的盐是指本发明化合物的非毒性盐。所公开化合物的含有碱性胺或其他碱性官能团的盐可以通过本领域已知的任何方法制备，包括以如下处理游离碱：无机酸，如氢氯酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或有机酸，如乙酸、三氟乙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水杨酸，吡喃糖苷酸(pyranosidyl acid)，如葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸，α-羟基酸，如柠檬酸或酒石酸，氨基酸，如天冬氨酸或谷氨酸，芳香族酸，如苯甲酸或肉豆蔻酸，磺酸，如p-甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸等。可药用盐的实例包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、丁炔-1,4-二酸盐、己炔-1,6-二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、苯基乙酸盐、苯基丙酸盐、苯基丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、γ-羟基丁酸盐、乙醇酸盐、酒石酸盐、扁桃酸盐，和磺酸盐，如二甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-1-磺酸盐和萘-2-磺酸盐。
所公开的含有羧酸或其他酸性官能团的化合物的盐可以通过与碱反应来制备。这样的可药用盐可以以提供可药用阳离子的碱制备，这样的碱包括碱金属盐(特别是钠和钾)、碱土金属盐(特别是钙和镁)、铝盐和铵盐，以及由生理上可接受的有机碱制备，这样的碱例如三甲基胺、三乙基胺、吗啉、吡啶、哌啶、甲基吡啶、二环己基胺、N,N’-二苄基乙二胺、2-羟基乙基胺、双-(2-羟基乙基)胺、三-(2-羟基乙基)胺、普鲁卡因(procaine)、二苄基哌啶、去氢枞胺(dehydroabietylamine)、N,N’-去氢枞胺、葡糖胺、N-甲基葡糖胺、三甲基吡啶(collidine)、胆碱、奎宁、喹啉，以及碱性氨基酸，如赖氨酸和精氨酸。
不可药用的其他盐可以用于制备本发明化合物，并且这些盐应当被认为形成了本发明的另一方面。这些盐，例如草酸盐或三氟乙酸盐，尽管本身不可药用，但是可以用于制备可在获得本发明化合物以及它们的可药用盐中用作中间体的盐。
式(I)化合物可以固体或液体形式存在。在固态中，其可以晶体或非晶形式或者其混合物存在。本领域技术人员将会理解晶体或非晶化合物可以形成可药用溶剂化物。在晶体的溶剂化物中，溶剂分子可以在结晶期间结合进入晶体的点阵中。溶剂化物可以包括非水溶剂，例如但不限于：乙醇、异丙醇、DMSO、乙酸、乙醇胺或乙酸乙酯，或者它们可以涉及水作为结合进入晶体点阵的溶剂。其中水为结合进入晶体点阵的溶剂的溶剂化物典型地称为"水合物"。水合物包括化学计量量的水合物以及含有可变数量的水的组合物。本发明包括所有这些溶剂化物。
本领域技术人员将进一步理解一些以晶体形式存在的本发明化合物(包括其多种溶剂化物)可以呈现为多晶型(即，存在不同晶体结构的能力)。这些不同的晶型典型地为"多晶型物"。本发明包括所有这些多晶型物。多晶型物具有相同的化学组成但是堆积、几何排列以及结晶固态的其他描述性性质不同。多晶型物因此可以具有不同的物理性质，例如形状、密度、硬度、可形变性、稳定性和溶出性质。多晶型物典型地呈现出不同的熔点、IR谱和X射线粉末衍射图案，其可以用于鉴定。本领域技术人员将会理解可以制备不同的多晶型物，例如，通过改变或调节用来制备化合物的反应条件或试剂。例如，温度、压力或溶剂的改变会导致多晶型物。此外，一种多晶型物可以在一些条件下自发地转化成另一种多晶型物。
式(I)化合物或其盐可以立体异构的形式存在(例如，其含有一个或多个不对称碳原子)。单个的立体异构体(对映异构体和非对映异构体)以及它们的混合物包括在本发明范围内。类似地，应当理解式(I)化合物或盐可以不同于该化学势所示的互变异构体的形式存在，并且这些也包括在本发明的范围内。应当理解本发明包括上述定义的特定基团的所有的组合和亚组。本发明范围包括立体异构体的混合物以及纯化的对映异构体或者富集对映异构体/非对映异构体的混合物。应当理解本发明包括上述定义的特定基团的所有的组合和亚组。
本发明还包括同位素标记的化合物，其与式(I)中所述的那些一致，但是事实上由于一个或多个原子被具有原子质量或质量数不同于一般天然存在的原子质量或质量数的原子取代。可以结合进入本发明化合物和可药用盐的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘和氯的同位素，例如2H、3H、11C、13C、14C、15N、17O、18O、31P、32P、35S、18F、36Cl、123I和125I。
含有前述同位素和/或其他原子的其他同位素的本发明化合物和所述化合物的可药用盐在本发明的范围内。同位素标记的本发明化合物，例如那些结合了放射性同位素3H、14C的本发明化合物，可用于药物和/或底物组织分布测试。氚化(即3H)和碳-14(即14C)同位素由于它们易于制备和可检测性而经常使用。11C和18F同位素可用于PET(正电子发射断层扫描)，125I可用于SPECT(单光子发射计算机化断层扫描)，均可用于脑部成像。此外，以较重同位素如氘2H取代，可以由于较大的代谢稳定性得到一些治疗优势，例如体内半衰期增加或剂量要求降低，并且因此在一些环境中是优选的。同位素标记的式I化合物以及根据本发明的那些一般可以通过实施在方案中和/或在下文中实施记载的方法，通过以容易获得的同位素标记的试剂取代非同位素标记的试剂来制备。
药物组合物
本发明进一步提供了药物组合物(也称药物制剂)，其包含式I化合物或其可药用盐以及一种或多种赋形剂(在制药领域中也称为载体和/或稀释剂)。赋形剂在与制剂中其他成份相容的意义上是可接受的并且对于其接受者(即，患者)而言不是有害的。
根据本发明的其他方面，提供了制备药物组合物的方法，包括混合(或共混)式I化合物或其盐与至少一种赋形剂。
药物组合物可以是单位剂量形式，其含有预定量的活性成分/单位剂量。该单位可含有治疗有效剂量的式(I)化合物或其盐，或一部分治疗有效剂量，使得可以在给定时间给药多个单位剂量，以达到所需治疗有效剂量。优选的单位剂量制剂为含有每日剂量或亚剂量的单位剂量制剂，如上所述，或活性成分的合适的部分。另外，该药物组合物可以通过药剂领域熟知的任何方法制备。
本发明化合物可以通过任何合适的方式给药，包括口服、局部(包括含服和舌下)、经直肠、经阴道、透皮、肠胃外、皮下、腹腔内、肺内、皮内、鞘内和硬膜外和经鼻内给药，并且如果需要用于局部治疗，病灶内给药。肠胃外输注包括肌内、静脉内、动脉内、腹腔内或皮下给药。
本发明化合物可以任何方便的给药形式给药，例如，片剂、粉剂、胶囊剂、溶液剂、分散剂、悬浮剂、糖浆、喷雾、栓剂、凝胶剂、乳剂、贴剂，等。这样的组合物可以含有在药物制剂中常规的组分，例如稀释剂、载体、pH调节剂、甜味剂、膨松剂和其他活性试剂。
这样的组合物可以通过制药领域内已知的任何方法制备，例如，通过将活性成份与(一种或多种)赋形剂联合。典型的制剂通过将本发明的化合物与载体或赋形剂混合而制备。载体和赋形剂的实例对于本领域技术人员是公知的并且详细描述于，例如，Ansel,Howard C.,et al.,Ansel’s Pharmaceutical Dosage Forms and Drug DeliverySystems.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2004；Gennaro,Alfonso R.,etal.Remington:The Science and Practice of Pharmacy.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2000；和Rowe,Raymond C.Handbook of PharmaceuticalExcipients.Chicago,Pharmaceutical Press,2005中。制剂还可以包括一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂、抗氧化剂、避光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、香味剂、调味剂、稀释剂和其他已知的添加剂以得到外观优雅的药物(即，本发明化合物或其药物组合物)或帮助制备药品(即，药剂)。
当适于口服给药时，药物组合物可以为独立的单位，例如片剂或胶囊；粉剂或颗粒剂；在含水或非-含水液体中的溶液或悬浮液；可食用泡沫体剂(foam或whip)；水包油液体乳剂或油包水液体乳剂。本发明化合物或其盐，或本发明药物组合物还可掺入糖果、囊剂，和/或舌带制剂中用于作为“快速-溶解”药物给药。
例如，对于以片剂或胶囊形式的口服给药，所述活性药物成分可以与口服、非-毒性药学上可接受的惰性载体(例如乙醇、甘油、水等)混合。粉剂或颗粒剂通过粉碎所述化合物至可接受的细尺寸，并与相同粉碎的药用载体(例如可食用碳水合物，例如，淀粉或甘露糖醇)混合而制备。还可以存在调味剂、防腐剂、分散剂和着色剂。
通过制备如上所述的粉末混合物，并填充至成型的明胶或非-明胶壳中制备胶囊。可以在填充操作前加入助流剂和润滑剂(例如胶体二氧化硅、滑石粉、硬脂酸镁、硬脂酸钙、固体聚乙二醇)至粉末混合物中。也可以加入崩解剂或增溶剂(例如琼脂，碳酸钙或碳酸钠)以改善胶囊摄入时的药物利用度。
此外，需要或必要时，也可以将粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂掺入混合物中。粘合剂的实例包括淀粉、明胶、天然糖类(例如葡萄糖或β_乳糖)、谷物增甜剂、天然和合成胶质(例如阿拉伯胶、黄蓍胶、海藻酸钠、羧甲基纤维素、聚乙二醇、蜡等)。用于这些剂型的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂(Disintegrator)包括,但不限于，淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。
例如通过制备粉末混合物、制粒或成块(slugging)、加入润滑剂和崩解剂，以及压制成片剂配制片剂。通过混合化合物与稀释剂或如上所述的碱，以及任选的粘合剂(例如羧甲基纤维素、海藻酸盐(aliginate)、明胶或聚乙烯吡咯烷酮)、溶解阻滞剂(例如石蜡)、吸收加速剂(例如季铵盐)，和/或吸收剂(例如皂土、高岭土或磷酸氢钙)，并合适地粉碎来制备粉末混合物。所述粉末混合物可以通过润湿粘合剂(例如糖浆、淀粉糊、acadiamucilage或纤维素或聚合物材料的溶液)并使其通过筛来制粒。作为制粒的另一种方法，可以将粉末混合物通过压片机，使得不完全成型的结块破碎为颗粒。可以通过加入硬脂酸、硬脂酸盐、滑石粉或矿物油润滑所述颗粒，以防止粘附至形成片剂的模头。然后将润滑的混合物压制成片剂。本发明化合物或盐也可以与自由流动的惰性载体混合，并直接压制成片剂而不进行制粒或成块步骤。可以提供由虫胶的隔离层、糖层或聚合材料，以及蜡抛光层组成的清晰的不透明保护包衣。染料可以加入至这些包衣中以区分不同的剂量。
口服液体(例如溶液、糖浆和酏剂)可以以剂量单位制备，使得给定量含有预定量的活性成分。糖浆可以通过溶解本发明化合物或其盐于合适地调味的水溶液中来制备，而酏剂可以通过使用非-毒性醇性载体来制备。悬浮液可以通过分散本发明化合物或盐于非-毒性载剂中来配制。也可以加入增溶剂和乳化剂(例如乙氧基化的异硬脂醇和聚氧乙烯山梨醇醚)、防腐剂、调味添加剂(例如薄荷油、天然增甜剂、糖精或其它人工增甜剂等)。
合适时，口服给药的剂量单位制剂可以微胶囊化。还可制备所述制剂以延长或持续释放，例如，通过将微粒材料包衣或包埋在聚合物、蜡等中。
在一个实施方案中，片剂和胶囊用于递送药物组合物。
本发明提供对罹患癌症(例如肺癌和胰腺癌)的哺乳动物(例如人)的治疗方法。该治疗包括将治疗有效量的式I化合物或其盐给药至所述哺乳动物(例如人)的步骤。治疗还可包括将治疗有效量的含有式I化合物或其盐的药物组合物给药至所述哺乳动物(例如人)的步骤。
对于在治疗中使用，虽然治疗有效量的式I化合物或其盐可以以原料药给药给药，但是其典型地以活性成分的药物组合物或制剂提供。
本发明的精确的治疗有效量的化合物或其盐将取决于许多因素，包括，但不限于，待治疗的受治疗者(患者)的年龄和体重、需要治疗的准确病症及其严重性、所述药物制剂/组合物的性质，以及给药途径，并且将最终由住院医生或兽医决定。典型地，式(I)化合物或其盐将以大约0.1至100mg/kg接受者(患者，哺乳动物)体重/天的范围给予用于治疗，并且更常用0.1至10mg/kg体重/天的范围。可接受的每日剂量可以为大约1至大约1000mg/天,优选大约1至大约100mg/天。该量可以以单剂量/天给予,或以数次(例如二、三、四、五或更多次)分剂量/天给予，使得总的每日剂量相同。有效量的盐可以以有效量的式I化合物本身的比例确定。相似剂量应当适合治疗(包括预防)本文治疗的其它病症。一般而言，合适的剂量的确定可以容易地由医学或药学领域的技术人员完成。
适应症和治疗方法
本发明化合物抑制含T790M的EGFR突变体的活性。本文提供的组合物方法可以潜在地用于治疗癌症，包括例如星形细胞癌、乳腺癌、宫颈癌、结肠直肠癌、子宫内膜癌、食道癌、胃癌、头颈癌、肝细胞癌、喉癌、肺癌、口腔癌、卵巢癌、前列腺癌和甲状腺癌和肉瘤。更具体地，这些化合物可以潜在地用于治疗：心脏癌症：肉瘤(血管肉瘤、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、脂肉瘤)、粘液瘤、横纹肌瘤、纤维瘤、脂肪瘤和畸胎瘤；肺脏癌症:支气管癌(鳞状细胞癌、未分化的小细胞癌、未分化的大细胞癌、腺癌)、肺泡(细支气管)癌、支气管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、软骨错构瘤、间皮瘤；胃肠道癌症:食道癌(鳞状细胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃癌(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胰腺癌(导管腺癌、胰岛素瘤、高血糖素瘤、胃泌素瘤、类癌瘤、舒血管肠肽瘤)、小肠癌(腺癌、淋巴瘤、类癌瘤、卡波西肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神经纤维瘤、纤维瘤)、大肠癌(腺癌、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、错构瘤、平滑肌瘤)；泌尿生殖道癌症:肾癌(腺癌、维尔姆斯瘤(肾胚细胞瘤)、淋巴瘤、白血病)、膀胱和尿道癌(鳞状细胞癌、移行细胞癌、腺癌)、前列腺癌(腺癌、肉瘤)、睾丸癌(精原细胞瘤、畸胎瘤、胚胎性癌、畸胎癌、绒毛膜癌、肉瘤、间质细胞癌、纤维瘤、纤维腺瘤、腺瘤样瘤、脂肪瘤)；肝脏癌症:肝癌(肝细胞癌)、胆管癌、肝毒细胞瘤、血管肉瘤、肝细胞性腺瘤、血管瘤；骨骼癌症:骨源性肉瘤(骨肉瘤)、纤维肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、软骨肉瘤、尤因肉瘤、恶性淋巴瘤(网状细胞肉瘤)、多发性骨髓瘤、恶性巨细胞脊索瘤、骨软骨肿(骨软骨外生骨疣)、良性软骨瘤、成软骨细胞瘤、软骨粘液纤维瘤、骨样骨瘤和巨细胞瘤；神经系统癌症:颅骨癌(骨瘤、血管瘤、肉芽肿、黄色瘤、畸形性骨炎)、脑膜癌(脑脊膜瘤、脑膜肉瘤、神经胶质瘤)、脑癌(星形细胞瘤、髓母细胞瘤、胶质瘤、室管膜瘤、生殖细胞瘤(松果体瘤)、成胶质细胞瘤、少突神经胶质瘤、神经鞘瘤、视网膜母细胞瘤、先天性肿瘤)、脊髓神经纤维瘤、脑脊膜瘤、胶质瘤、肉瘤)；妇科肿瘤:子宫癌(子宫内膜癌)、子宫颈癌(宫颈癌、瘤前宫颈发育不良)、卵巢癌症(卵巢癌(浆液囊腺癌、粘液囊腺癌、未分类癌)、粒层-卵泡膜细胞瘤、塞-莱细胞瘤、无性细胞瘤、恶性畸胎瘤)、外阴癌(鳞状细胞癌、上皮内癌、腺癌、纤维肉瘤、黑素瘤)、阴道癌(透明细胞癌、鳞状细胞癌、葡萄状肉瘤(胚胎横纹肌肉瘤)、输卵管癌(癌)；血液癌症:血癌(髓性白血病(急性和慢性)、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、骨髓增生性疾病、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征)、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤(恶性淋巴瘤)；皮肤癌症:恶性黑素瘤、基底细胞癌、鳞状细胞癌、卡波西肉瘤、发育不良痣、脂肪瘤、血管瘤、皮肤纤维瘤、瘢痕瘤、牛皮癣；以及肾上腺癌症:成神经细胞瘤。因此,本文提供的术语“癌细胞”包括遭受任一种上述病症或与之相关的病症的细胞。
在一个实施方案中，本文所提供的组合物的方法可用于治疗肺癌和胰腺癌，更具体地，非小细胞肺癌(NSCLC)。
组合
当给药式(I)化合物用于治疗癌症时，本文中使用的术语“共同给药”及其类似术语是指同时给药或分开连续给药本文所述的LSDl抑制化合物，以及已知可用于治疗癌症的其他活性成分，包括化疗和放射治疗。本文所用的术语“其他活性成分”包括任何化合物或治疗剂，当给予需要癌症治疗的患者时，其具有已知的或证明有利的性质。如果给药不是同时进行，则所述化合物以相互接近的时间给药。另外，所述化合物是否以相同剂型给药是不重要的，例如一个化合物可以局部给药且另一个化合物可以口服给药。
典型地，在治疗本发明中的癌症时，可以共同给药对待治疗的敏感肿瘤具有活性的任何抗肿瘤药物。该药物的实例参考V.T.Devita和S.Hellman(主编)的CancerPrinciples and Practice of Oncology,第6版(2001年2月15日)，Lippincott Williams&Wilkins Publishers。本领域一般技术人员将能够根据药物的具体特征和所涉及癌症辨别药物的何种组合将是有用的。可用于本发明的典型抗肿瘤药物包括，但不限于，抗微管剂例如二萜类化合物和长春花生物碱；铂配位络合物；烷基化剂例如氮芥、氧氮磷杂环己二烯(oxazaphosphorine)、烷基磺酸盐、亚硝基脲和三氮烯；抗生素例如蒽环类、放线菌素和博莱霉素；拓扑异构酶II抑制剂例如表鬼白毒素；抗代谢剂例如嘌呤和嘧啶类似物和抗叶酸化合物；拓扑异构酶I抑制剂例如喜树碱；激素和激素类似物；信号转导途径抑制剂；非-受体酪氨酸激酶血管生成抑制剂；免疫治疗`剂；促细胞凋亡剂；以及细胞周期信号转导抑制剂。
用于与本发明的T790M抑制化合物组合或共同给药的其它活性成分的实例为化疗剂。
抗微管或抗有丝分裂剂是时相特异性药物(phase specific agent),其在细胞周期中的M期或有丝分裂期对肿瘤细胞的微管具有活性。抗微管剂的实例包括但不限于二萜类化合物和长春花生物碱。
天然来源的二萜类化合物是时相特异性的抗癌剂，其在细胞周期中的G2/M期起作用。认为二萜类化合物通过与该蛋白结合，使微管的β-微管蛋白亚单位稳定。然后使蛋白质的分解受到抑制，有丝分裂停止，接着发生细胞死亡。二萜类化合物的实例包括但不限于紫杉醇及其类似物多西紫杉醇。
紫杉醇，5β,20-环氧-1,2α,4,7β,10β,13α-六羟基紫杉-11-烯-9-酮4,10-二乙酸酯-2-苯甲酸酯13-(2R,3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝氨酸酯，其是从太平洋紫杉树(Taxusbrevifolia)中分离出来的天然二萜产物，且在商业上可得到可注射的溶液其为萜类紫杉烷家族的成员。其在1971年由Wani等人首次分离出来(J.Am.Chem，Soc.,93:2325，1971)，并通过化学和X-射线结晶学方法表征其结构。其活性的机理之一是关于紫杉醇能结合微管蛋白，进而抑制癌细胞生长。Schiff等，Proc.Natl,Acad,Sci.USA,77:1561-1565(1980)；Schiff等，Nature,277:665-667(1979)；Kumar，J.Biol,Chem,256:10435-10441(1981)。有关一些紫杉醇衍生物的合成及抗癌活性的综述，参见D.G.I.Kingston等，Studies in Organic Chemistry vol.26，标题“Newtrends in Natural Products Chemistry 1986,Attaur-Rahman,P.W.Le Quesne,Eds.(Elsevier,Amsterdam,1986)pp 219-235。
在美国，已经批准紫杉醇的临床使用，用于治疗难治的卵巢癌(Markman等,YaleJournal of Biology and Medicine,64:583,1991；McGuire et al.,Ann.lntem,Med.,111:273,1989)和用于治疗乳腺癌(Holmes et al.,J.Nat.Cancer Inst.,83:1797,1991.)。其为治疗皮肤癌(Einzig et.al.,Proc.Am.Soc.Clin.Oncol.,20:46)及头颈癌(Forastire et.al.,Sem.Oncol.,20:56,1990)的可能的候选药物。该化合物还具有治疗多囊性肾病(Woo et.al.,Nature,368:750.1994)、肺癌和疟疾的潜力。采用紫杉醇治疗患者，导致骨髓抑制(多重细胞谱系(multiple cell lineages)，Ignoff,R.J.et.al,CancerChemotherapy Pocket Guide,1998)，这与高于阈浓度(50nM)的给药的持续时间有关(Kearns,C.M.et.al.,Seminars in Oncology,3(6)p.16-23,1995)。
多西紫杉醇，具有5β-20-环氧-1,2α,4,7β,10β,13α-六羟基紫杉-11-烯-9-酮的(2R,3S)-N-羧基-3-苯基异丝氨酸，N-叔丁基酯，13-酯，4-乙酸酯2-苯甲酸酯，三水合物，在商业上可得到可注射的溶液多西紫杉醇可用于治疗乳腺癌。多西紫杉醇是适量(q.v.)紫杉醇的半合成衍生物，其利用天然前体即从欧洲浆果紫杉树的针叶中提取的10-去乙酰基浆果赤霉素III制备。多西紫杉醇的剂量限制性毒性是嗜中性白细胞减少症。
长春花生物碱是来源于长春花属植物的时相特异性的抗肿瘤药物。长春花生物碱通过特异性地结合微管蛋白而在细胞周期的M期(有丝分裂)起作用。因此，被结合的微管蛋白分子不能聚合成微管。认为有丝分裂在中期被停止，随后细胞死亡。长春花生物碱的实例包括但不限于长春碱，长春新碱，及长春瑞滨。
长春碱，长春碱硫酸盐，以注射液市售获得。尽管已经表明其有可能作为各种实体瘤的二线治疗，但是其最初表明用于治疗睾丸癌和各种淋巴瘤，包括霍奇金病及淋巴细胞和组织细胞的淋巴瘤。骨髓抑制是长春碱的剂量限制性副作用。
长春新碱，长春碱22-氧代-硫酸盐，以注射溶液市售获得。长春新碱显示用于治疗急性白血病，还发现用于治疗多数霍奇金和非霍奇金恶性淋巴瘤。脱发和神经作用是长春新碱最常见的副作用，并产生较小程度的骨髓抑制和胃肠粘膜炎作用。
长春瑞滨，3’,4’-二脱氢-4’-脱氧-C’-去甲长春碱(norvincaleukoblastine)[R-(R*,R*)-2,3-二羟基丁二酸(1:2)(盐)]，以长春瑞滨酒石酸盐注射溶液市售获得，是半合成的长春花生物碱。长春瑞滨可作为单独的药物或与其它化学治疗剂如顺铂组合，用于治疗各种实体瘤，特别是非小细胞肺癌、晚期乳腺癌及激素难治的前列腺癌。骨髓抑制是长春瑞滨最常见的剂量限制性副作用。
铂配位络合物是非时相特异性的抗癌剂，其与DNA相互作用。铂络合物进入肿瘤细胞，进行水合作用，并与DNA形成内部和相互间的交叉连接，导致对肿瘤不利的生物学作用。铂配位络合物的实例包括但不限于顺铂和卡铂。
顺铂，顺式-二氨二氯合铂，以注射溶液市售获得。顺铂最初用于治疗转移性睾丸癌和卵巢癌以及晚期的膀胱癌。顺铂的主要剂量限制性副作用是肾毒性和耳毒性，所述肾毒性可通过水合和利尿来控制。
卡铂，二氨[1,1-环丁烷-二羧酸根(2-)-O,O’]合铂，以注射溶液市售获得。卡铂最初用于晚期卵巢癌的一线和二线治疗。骨髓抑制是卡铂的剂量限制性毒性。
烷基化剂是非时相特异性的抗癌药物和强的亲电试剂。通常，烷基化剂借助于烷基化作用，通过DNA分子的亲核部分如磷酸基(phosphate)、氨基、巯基、羟基、羧基和咪唑基，与DNA形成共价键。这种烷基化作用破坏核酸功能，导致细胞死亡。烷基化剂的实例包括但不限于氮芥如环磷酰胺、美法仑和苯丁酸氮芥，磺酸烷基酯如白消安，亚硝基脲如卡莫司汀，及三氮烯如达卡巴嗪。
环磷酰胺，2-[双(2-氯乙基)氨基]四氢-2H-1,3,2-氧氮磷杂环己二烯2-氧化物一水合物，以注射溶液或片剂市售获得。环磷酰胺可作为单独的药物或与其它化学治疗剂组合，用于治疗恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤和白血病。脱发、恶心、呕吐和白细胞减少症是环磷酰胺最常见的剂量限制性副作用。
美法仑，4-[双(2-氯乙基)氨基]-L-苯基丙氨酸，以注射溶液或片剂市售获得。美法仑可用于多发性骨髓瘤和不可切除的卵巢上皮癌的姑息疗法。骨髓抑制是美法仑最常见的剂量限制性副作用。
苯丁酸氮芥，4-[双(2-氯乙基)氨基]苯丁酸，以片剂市售获得。苯丁酸氮芥可用于慢性淋巴细胞性白血病，恶性淋巴瘤如淋巴肉瘤，巨滤泡性淋巴瘤，及霍奇金病的姑息疗法。骨髓抑制是苯丁酸氮芥最常见的剂量限制性副作用。
白消安，1,4-丁二醇二甲磺酸酯，以片剂市售获得。白消安用于慢性髓细胞性白血病的姑息疗法。骨髓抑制是白消安最常见的剂量限制性副作用。
卡莫司汀，1,3-[双(2-氯乙基)-1-亚硝基脲，以单瓶装的冻干产物市售获得。卡莫司汀可作为单独的药物或与其它药物组合，用于脑瘤、多发性骨髓瘤、霍奇金病和非霍奇金淋巴瘤的姑息疗法。延迟的骨髓抑制是卡莫司汀最常见的剂量限制性副作用。
达卡巴嗪，5-(3，3-二甲基-1-三氮烯基)-咪唑-4-甲酰胺，以单瓶装的产物市售获得。达卡巴嗪可用于转移性恶性黑素瘤的治疗，并且可与其它药物组合，用于霍奇金病的二线治疗。恶心、呕吐和厌食是达卡巴嗪最常见的剂量限制性副作用。
抗生素类抗癌剂是非时相特异性的药物，其结合或嵌入DNA中。通常，这种作用导致稳定的DNA复合物或链断裂，破坏核酸的正常功能，导致细胞死亡。抗生素类抗肿瘤药物的实例包括但不限于放线菌素如放线菌素D；蒽环类(anthrocyclines)如柔红霉素和多柔比星；及博来霉素。
放线菌素D(dactinomycin)，也称之为放线菌素D(actinomycin D),以注射液形式市售获得。放线菌素D可用于Wilm氏肿瘤和横纹肌肉瘤的治疗。恶心、呕吐和厌食是放线菌素D最常见的剂量限制性副作用。
柔红霉素，(8S-顺-)-8-乙酰基-10-[(3-氨基-2,3,6-三脱氧-a-L-来苏-己吡喃糖基(hexopyranosyl))氧基]-7，8，9,10-四氢-6,8,11-三羟基-1-甲氧基-5,12-并四苯二酮(naphthacenedione)盐酸盐，以脂质体注射溶液或注射溶液市售获得。柔红霉素可在急性非淋巴细胞性白血病和晚期HIV相关的卡波西(Kaposi)肉瘤的治疗中用于诱导缓解。骨髓抑制是柔红霉素最常见的剂量限制性副作用。
多柔比星，(8S,10S)-10-[(3-氨基-2,3,6-二脱氧-α-L-来苏-己吡喃糖基)氧基]-8-乙醇酰基-7,8,9,10-四氢-6,8,11-三羟基-1-甲氧基-5,12-并四苯二酮盐酸盐，以或注射溶液市售获得。多柔比星主要用于急性成淋巴细胞性白血病和急性成髓细胞性白血病的治疗，但也可是治疗某些实体瘤和淋巴瘤的有用组分。骨髓抑制是多柔比星最常见的剂量限制性副作用。
博来霉素，是从轮丝链霉菌(streptomyces verticilus)菌株中分离出来的细胞毒素糖肽类抗生素的混合物，以市售获得。博来霉素可作为单独的药物或与其它药物组合，用于鳞状细胞癌、淋巴瘤和睾丸癌的姑息疗法。肺部和皮肤毒性是博来霉素最常见的剂量限制性副作用。
拓扑异构酶II抑制剂包括但不限于表鬼臼脂毒素。
表鬼臼脂毒素是来源于曼德拉草(mandrake)植物的时相特异性的抗肿瘤药物。表鬼臼脂毒素通常通过与拓扑异构酶II和DNA形成三元复合物，导致DNA链断裂来影响处于细胞周期的S和G2期的细胞。链断裂积聚，接着细胞死亡。表鬼臼脂毒素的实例包括但不限于依托泊苷和替尼泊苷。
依托泊苷，4’-去甲基-表鬼臼脂毒素9[4,6-0-(R)-亚乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷]，以注射溶液或胶囊市售获得，并且常称之为VP-16。依托泊苷可作为单独的药物或与其它化疗剂组合，用于治疗睾丸癌和非小细胞肺癌。骨髓抑制是依托泊苷最常见的副作用。白细胞减少症的发生率倾向于比血小板减少症的发生率更严重。
替尼泊苷，4’-去甲基-表鬼臼脂毒素9[4,6-0-(R)-噻吩亚甲基-β-D-吡喃葡萄糖苷]，以注射溶液市售获得，并且通常称之为VM-26。替尼泊苷可作为单独的药物或与其它化疗剂组合，用于治疗儿童急性白血病。骨髓抑制是替尼泊苷最常见的剂量限制性副作用。替尼泊苷可引起白细胞减少症和血小板减少症。
抗代谢肿瘤药物是时相特异性的抗肿瘤药物，其作用于细胞周期的S期(DNA合成)，通过抑制DNA的合成，或者通过抑制嘌呤或嘧啶碱基的合成进而限制DNA的合成。因此，S期不能继续下去，接着细胞死亡。抗代谢类抗肿瘤药物的实例包括但不限于氟尿嘧啶，甲氨蝶呤，阿糖胞苷，巯基嘌呤，硫鸟嘌呤，及吉西他滨。
5-氟尿嘧啶，5-氟-2,4-(1Η,3Η)嘧啶二酮，以氟尿嘧啶市售获得。5-氟尿嘧啶的给药导致胸苷酸合成的抑制，并且还掺入到RNA和DNA中。结果通常是细胞死亡。5-氟尿嘧啶可作为单独的药物或与其它化疗剂组合，用于治疗乳腺癌、结肠癌、直肠癌、胃癌和胰腺癌。骨髓抑制和粘膜炎是5-氟尿嘧啶的剂量限制性副作用。其它的氟嘧啶类似物包括5-氟脱氧尿嘧啶核苷(氟尿苷)和5-氟脱氧尿嘧啶核苷一磷酸。
阿糖胞苷，4-氨基-Ι-β-D-阿拉伯呋喃糖基-2(IH)-嘧啶酮，以市售获得，并且通常称之为Ara-C。认为阿糖胞苷在S-期具有细胞时相特异性，其通过将阿糖胞苷末端掺入到生长的DNA链中而抑制DNA链的延长。阿糖胞苷作为单独的药物或与其它化疗剂组合，用于治疗急性白血病。其它的胞苷类似物包括5-氮杂胞苷和2’,2’-二氟脱氧胞苷(吉西他滨)。阿糖胞苷引起白细胞减少症、血小板减少症和粘膜炎。
巯基嘌呤，1,7-二氢-6H-嘌呤-6-硫酮一水合物，以市售获得。巯基嘌呤在S-期通过至今尚未清楚的机理抑制DNA的合成具有细胞时相特异性。巯基嘌呤可作为单独的药物或与其它化疗剂组合，用于治疗急性白血病。预期骨髓抑制和胃肠粘膜炎是高剂量巯基嘌呤的副作用。可使用的巯基嘌呤类似物是硫唑嘌呤。
硫鸟嘌呤，2-氨基-1,7-二氢-6H-嘌呤-6-硫酮，以市售获得。硫鸟嘌呤在S-期通过至今尚未清楚的机理抑制DNA的合成具有细胞时相特异性。硫鸟嘌呤可作为单独的药物或与其它化疗剂组合，用于治疗急性白血病。骨髓抑制，包括白细胞减少症、血小板减少症和贫血是给药硫鸟嘌呤最常见的剂量限制性副作用。然而，还发生胃肠副作用，而且该副作用可能是剂量限制性的。其它的嘌呤类似物包括喷司他丁、赤式羟基壬基腺嘌呤(erythrohydroxynonyl adenine)、磷酸氟达拉滨和克拉屈滨。
吉西他滨，2’-脱氧-2’，2’-二氟胞苷一盐酸盐(β-异构体)，以市售获得。吉西他滨通过阻断细胞通过G1/S边界的发展在S-期具有细胞时相特异性。吉西他滨可与顺铂组合，用于治疗局部的晚期非小细胞肺癌，也可以单独地用于治疗局部的晚期胰腺癌。骨髓抑制，包括白细胞减少症、血小板减少症和贫血是给药吉西他滨最常见的剂量限制性副作用。
甲氨蝶呤，Ν-[4[[(2,4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]甲基氨基]苯甲酰基]-L-谷氨酸，以甲氨蝶呤钠市售获得。甲氨蝶呤在S-期具有细胞时相特异性作用，其通过抑制合成嘌呤核苷酸和胸苷酸所需的脱氢叶酸还原酶来抑制DNA的合成、修复和/或复制。甲氨蝶呤可作为单独的药物或与其它化疗剂组合，用于治疗绒毛膜癌，脑膜白血病，非霍奇金淋巴瘤，以及乳腺癌、头癌、颈癌、卵巢癌和膀胱癌。预期骨髓抑制(白细胞减少症、血小板减少症和贫血)及粘膜炎是给药甲氨蝶呤的副作用。
喜树碱，包括喜树碱和喜树碱衍生物,其可作为拓扑异构酶I抑制剂来使用或开发。认为喜树碱细胞毒素活性与其拓扑异构酶I抑制活性相关。喜树碱的实例包括但不限于伊立替康，托泊替康，及下述7-(4-甲基哌嗪基-亚甲基)-10,11-亚乙二氧基-20-喜树碱的各种旋光体。
伊立替康HCl，(4S)-4,11-二乙基-4-羟基-9-[(4-哌啶子基哌啶子基)羰基氧基]-1H-吡喃并[3’,4’,6,7]中氮茚并[l,2-b]喹啉-3,14(4H,12H)-二酮盐酸盐，可以注射溶液市售获得。
伊立替康是喜树碱的衍生物，其与其活性代谢物SN-38一起结合在拓扑异构酶1-DNA复合物上。认为由于双链不可修复的(irreparable)断裂，导致出现细胞毒性，所述断裂是由拓扑异构酶1:DNA:伊立替康或SN-38三元复合物与复制酶之间的相互作用引起的。伊立替康可用于治疗结肠或直肠的转移癌。伊立替康HCl的剂量限制性副作用是骨髓抑制，包括嗜中性白细胞减少症，以及包括腹泻的GI效应。
托泊替康HC1，(S)-10-[(二甲基氨基)甲基]-4-乙基-4,9-二羟基-1H-吡喃并[3’,4’,6,7]中氮茚并[1,2-b]喹啉-3,14-(4H,12H)-二酮一盐酸盐，可以注射溶液市售获得。托泊替康是喜树碱的衍生物，其与拓扑异构酶1-DNA复合物结合，并阻止单链断裂的再连接，所述单链断裂是拓扑异构酶I响应DNA分子的扭转张力(torsionalstrain)所引起的。托泊替康用于卵巢转移癌和小细胞肺癌的二线治疗。托泊替康HCl的剂量限制性副作用是骨髓抑制，主要是嗜中性白细胞减少症。
同样感兴趣的是以下式A的喜树碱衍生物，目前处于研发中，包括外消旋混合物(R,S)形式以及R和S对映异构体：
已知为化学名“7-(4-甲基哌嗪基-亚甲基)-10,11-亚乙二氧基-20(R,S)-喜树碱(外消旋混合物)或7-(4-甲基哌嗪基-亚甲基)-10,11-亚乙二氧基-20(R)-喜树碱(R对映异构体)或7-(4-甲基哌嗪基-亚甲基)-10,11-亚乙二氧基-20(S)-喜树碱(S对映异构体)”。该化合物以及相关化合物(包括制备方法)公在美国专利6,063,923；5,342,947；5,559,235；5,491,237和于1997年11月24日提交的待审查的美国专利申请08/977,217中。
激素和激素类似物为治疗癌症有用的化合物，其中激素和癌症的生长和/或停止生之间长存在关系。用于治疗癌症的激素和激素类似物的实例包括，但不限于，肾上腺皮质类固醇类，例如泼尼松和泼尼松龙，其用于治疗儿童的恶性淋巴瘤和急性白血病；氨鲁米特和其它芳香酶抑制剂，例如阿那曲唑、来曲唑、vorazole和依西美坦，其用于治疗肾上腺皮质癌和包含雌激素受体的激素依赖性乳腺癌；孕酮，例如醋酸甲地孕酮，其用于治疗激素依赖性乳腺癌和子宫内膜癌；雌激素、雄激素以及抗雄激素，例如氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、醋酸环丙孕酮，和5α-还原酶，例如非那雄胺和度他雄胺，其用于治疗前列腺癌和良性前列腺肥大；抗雌激素，例如他莫昔芬、托瑞米芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬、iodoxyfene以及美国专利5,681,835、5,877,219和6,207,716中公开的选择性雌激素受体调节剂(SERMS)，其用于治疗激素依赖性乳腺癌和其它易发性癌症；以及促性腺素-释放激素(GnRH)及其类似物，其刺激黄体生成激素(LH)和/或促卵泡激素(FSH)的释放，用于治疗前列腺癌，例如，LHRH激动剂和拮抗剂，例如醋酸戈舍瑞林和luprolide。
信号转导途径抑制剂为阻断或抑制引起细胞内变化的化学过程的那些抑制剂。本文所用的该变化为细胞增殖或分化。用于本发明的信号转导抑制剂包括受体酪氨酸激酶、非-受体酪氨酸激酶、SH2/SH3区域阻断剂、丝氨酸/苏氨酸激酶、磷脂酰肌醇-3激酶、肌醇信号，以及Ras癌基因的抑制剂。
多种蛋白酪氨酸激酶催化细胞生长的调节中涉及的多种蛋白中的特定酪氨酰残基的磷酸化。该蛋白酪氨酸激酶可以大致分类为受体或非-受体激酶。
受体酪氨酸激酶为跨膜蛋白，其具有胞外配体结合区域、跨膜区域，以及酪氨酸激酶区域。受体酪氨酸激酶涉及细胞生长的调节，并通常称为生长因子受体。许多这些激酶的不合适的或不受控制的活化，即异常激酶生长因子受体活化，例如通过过表达或突变，已经显示出导致不受控制的细胞生长。因此，该激酶的异常活性已经与恶性组织生长联系起来。因此，该激酶的抑制剂可以提供癌症治疗方法。生长因子受体包括，例如，表皮生长因子受体(EGFr)、血小板衍生生长因子受体(PDGFr)、erbB2、erbB4、血管内皮生长因子受:体(VEGFr)、具有免疫球蛋白-样和表皮生长因子同源性区域的酪氨酸激酶(TIE-2)、胰岛素生长因子-1(IGFI)受体、巨噬细胞集落刺激因子(cfms)、BTK、ckit、cmet、成纤维细胞生长因子(FGF)受体、Trk受体(TrkA、TrkB和TrkC)、ephrin(eph)受体，以及RET原癌基因。生长受体的多种抑制剂处于研发之中，包括配体拮抗剂、抗体、酪氨酸激酶抑制剂和反义寡核苷酸。生长因子受体和抑制生长因子受体功能的药剂公开在，例如，Kath,John C.,Exp.Opin.Ther.Patents(2000)10(6):803-818；Shawver等，DDT Vol 2,No.2 February1997；以及Lofts,F.J.等，“Growth factor receptors as targets”,New MolecularTargets for Cancer Chemotherapy,ed.Workman,Paul and Kerr,David,CRC press1994,London中。
酪氨酸激酶(其不是生长因子受体激酶)被称为非-受体酪氨酸激酶。用于本发明的非-受体酪氨酸激酶，其为抗癌症药物的靶点或潜在靶点，包括cSrc、Lck、Fyn、Yes、Jak、cAbl、FAK(黏着斑激酶)、Brutons酪氨酸激酶，以及Bcr-Abl。该非-受体激酶和抑制非-受体酪氨酸激酶功能的药剂公开在Sinh,S.and Corey,S.J.,(1999)Journal ofHematotherapy and Stem Cell Research 8(5):46580；以及Bolen,J.B.,Brugge,J.S.,(1997)Annual review of Immunology.15:371-404。
厄洛替尼为EGFR抑制剂。吉非替尼(Gefitinib，)为此类型的另一种药物。厄洛替尼特异性靶向表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶，后者在多种形式的癌症中高度表达并偶尔突变。厄洛替尼以不可逆的方式结合至受体的三磷酸腺苷(ATP)结合位点。对于待传送的信号。两个EGFR分子需要一起形成同型二聚体。这些然后互相使用ATP的分子至酪氨酸残基上的反式-磷酸酯，生成磷酸酪氨酸残基，将磷酸酪氨酸蛋白质招募至EGFR以组装将信号级联传导至胞核或将其他细胞生活过程激活的蛋白质复合物。通过抑制该ATP，在EGFR中不可能形成磷酸酪氨酸残基并且不会引发信号级联。
SH2/SH3区域阻断剂为断裂多种酶或适体(adaptor)蛋白中的SH2或SH3区域结合的药剂，包括PI3-K p85亚单位、Src家族激酶、适体分子(She、Crk、Nek、Grb2)和Ras-GAP。SH2/SH3区域作为抗癌症药物的靶点公开在Smithgall,T.E.(1995),Journal ofPharmacological and Toxicological Methods.34(3)125-32中。
丝氨酸/苏氨酸激酶的抑制剂包括MAP激酶级联阻断剂，其包括Raf激酶(rafk)、促分裂原或胞外调节的激酶(MEK)，以及胞外调节的激酶(ERK)的阻断剂；并且蛋白激酶C家族成员阻断剂包括PKC(alpha、beta、gamma、epsilon、mu、lambda、iota、zeta)、IkB激酶家族(IKKa、IKKb)、PKB家族激酶、AKT激酶家族成员，以及TGFβ受体激酶的阻断剂。该丝氨酸/苏氨酸激酶及其抑制剂公开在Yamamoto,T.,Taya,S.,Kaibuchi,K.,(1999),Journal ofBiochemistry.126(5)799-803；Brodt,P,Samani,A.,and Navab,R.(2000),BiochemicalPharmacology,60.1101-1107；Massague,J.,Weis-Garcia,F.(1996)Cancer Surveys.27:41-64；Philip,P.A.,and Harris,A.L.(1995),Cancer Treatment and Research.78:3-27,Lackey,K.等，Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters,(10),2000,223-226；U.S.专利No.6,268,391；和Martinez-Iacaci,L.,et al,Int.J.Cancer(2000),88(1),44-52中。
包括PI3-激酶、ATM、DNA-PK以及Ku的阻断剂的磷脂酰肌醇-3激酶家族成员的抑制剂也用于本发明。该激酶公开在Abraham,R.T.(1996),Current Opinion in Immunology.8(3)412-8；Canman,C.E.,Lim,D.S.(1998),Oncogene 17(25)3301-3308；Jackson,S.P.(1997),International Journal of Biochemistry and Cell Biology.29(7):935-8；和Zhong,H.et al,Cancer res,(2000)60(6),1541-1545。
还用于本发明的是肌醇信号抑制剂，例如磷脂酶C阻断剂以及肌醇类似物。该信号抑制剂公开在Powis,G.，和Kozikowski A.,(1994)New Molecular Targets for CancerChemotherapy ed.,Paul Workman and David Kerr,CRC press 1994,London中。
信号转导途径抑制剂的其它类型为Ras癌基因的抑制剂。该抑制剂包括法呢基转移酶、栊牛儿基-栊牛儿基转移酶、CAAX蛋白酶、反义寡核苷酸、核糖酶和免疫疗法的抑制剂。该抑制剂已经显示出在含有野生型突变ras的细胞中阻断ras激活，因此作为抗增殖药剂。Ras癌基因的抑制在Scharovsky,O.G.,Rozados,V.R.,Gervasoni,S.I.Matar,P.(2000),Journal of Biomedical Science.7(4)292-8；Ashby,M.N.(1998),CurrentOpinion in Lipidology.9(2)99-102；and BioChim.Biophys.Acta,(19899)1423(3):19-30中讨论。
如上所述，拮抗受体激酶配体结合的抗体也用作信号转导抑制剂。该类信号转导途径抑制剂包括使用人化的抗体至受体酪氨酸激酶的胞外配体结合区域。例如ImcloneC225EGFR特异性抗体(见Green,M.C.等，Monoclonal Antibody Therapy for SolidTumors,Cancer Treat.Rev.,(2000),26(4),269-286)；erbB2抗体(见Tyrosine Kinase Signalling in Breast cancer:erbB Family ReceptorTyrosineKniases,Breast cancer Res.,2000,2(3),176-183)；以及2CB VEGFR2特异性抗体(见Brekken,R.A.等，Selective Inhibition of VEGFR2Activity by a monoclonalAnt1-VEGF antibody blocks tumor growth in mice,Cancer Res.(2000)60,5117-5124)。
非-受体激酶血管生成抑制剂也可用于本发明。血管生成相关的VEGFR和TIE2的抑制剂在上文信号转导抑制剂中讨论(两种受体均为受体酪氨酸激酶)。血管生成通常与erbB2/EGFR信号转导联系起来，因为erbB2和EGFR的抑制剂已经显示出抑制血管生成，主要地VEGF表达。因此，erbB2/EGFR抑制剂与血管生成抑制剂的组合具有意义。因此，非-受体酪氨酸激酶抑制剂也可以与本发明的EGFR/erbB2抑制剂组合使用。例如，抗-VEGF抗体，其不识别VEGFR(受体酪氨酸激酶)，但是结合配体；将抑制血管生成的整联蛋白的(alphavbeta3)的小分子抑制剂；内皮他丁(endostatin)和血管他丁(angiostatin)(非-RTK)也得以证明用于与公开的erb家族抑制剂组合。(见Bruns CJ et al(2000),Cancer Res.,60:2926-2935；Schreiber AB,Winkler ME,and Derynck R.(1986),Science,232:1250-1253；Yen L等.(2000)，Oncogene 19:3460-3469)。
用于免疫治疗方案的药剂也可用于与式(I)化合物组合。存在许多对erbB2或EGFR产生免疫响应的免疫策略。这些策略通常在肿瘤疫苗的范围内。免疫方法的有效性可以经过使用小分子抑制剂结合抑制erbB2/EGFR信号途径的得以大大增强。对抗erbB2/EGFR的免疫/肿瘤疫苗方法的讨论可见于Reilly RT et al.(2000),Cancer Res.60:3569-3576；和Chen Y,Hu D,Eling DJ,Robbins J,and Kipps TJ.(1998),Cancer Res.58:1965-1971。
用于促细胞凋亡方案的药剂(例如，bcl-2反义寡核苷酸)也可用于本发明的组合中。蛋白的Bcl-2家族的成员阻断凋亡。上调的bcl-2因此已经与化学抗性联系起来。研究显示表皮生长因子(EGF)刺激bcl-2家族(即，mcl-1)的抗凋亡成员。因此，设计的下调bcl-2在肿瘤中的表达的策略已经证明临床有益，而且现已进入II/III期临床试验，即Genta的G3139bcl-2反义寡核苷酸。使用对bcl-2的该反义寡核苷酸策略的促细胞凋亡策略在WaterJS et al.(2000),J.Clin.Oncol.18:1812-1823；和Kitada S et al.(1994),AntisenseRes.Dev.4:71-79中讨论。
细胞周期信号转导抑制剂抑制参与细胞周期控制的分子。蛋白激酶的家族称为细胞周期蛋白依赖激酶(CDK)，而且它们与称为细胞周期蛋白的蛋白家族的相互作用控制真核细胞周期的进展。不同细胞周期蛋白/CDK复合物的协调活化和失活对于细胞周期的正常进展至关重要。细胞周期信号转导的多种抑制剂处于研发之中。例如，细胞周期蛋白依赖激酶，包括CK2、CK4和CK6以及它们的抑制剂的实例公开在，例如，Rosania et al,Exp.Opin.Ther.Patents(2000)10(2):215-230中。此外，p21WAFl/CIPl已经公开为细胞周期蛋白依赖性激酶(Cdk)的有效和通用的抑制剂(Progress in Cell Cycle Res.,3:125(1997))。已知诱导p21WAF1/CIP1表达的化合物和抑制细胞增殖并抑制肿瘤活性有关系(Richon等，Proc.Nat Acad.Sci.U.S.A.97(18):10014-10019(2000))，且包括作为细胞周期信号转导抑制剂。
视黄酸受体的调节剂已经用于治疗白血病。白血病的病理与不成熟的祖细胞的异常蓄积有关，其对视黄酸治疗敏感。急性前髓细胞性白血病(APL，也称为急性髓性白血病亚型M3)的绝大多数病例涉及染色体15和17的染色体易位，其导致视黄酸受体(RAR)基因的基因与前髓细胞性白血病(PML)基因融合。该融合PML-RAR蛋白导致阻止不成熟的髓系细胞分化为更成熟的细胞。认为该分化的阻断和随后的较低分化的细胞的蓄积导致了白血病。ATRA(维甲酸)作用于PML-RAR消除该阻断，导致不成熟的前髓细胞分化为正常成熟的血细胞，因此降低前髓细胞并提高具有有限寿命的最终分化的细胞的数量。Talazorole是与维甲酸同类的实验。
后生修饰(epigenetic alteration)已经在几乎所有类型的人癌症中涉及。癌症特异性改变常常经过组蛋白修饰和对DNA的修饰(包括DNA超甲基化)与肿瘤抑制基因的沉默相关。后生药物(epigenetic pharmaceuticals)控制与肿瘤抑制基因有关的调节区域，通过导致组蛋白的构象变化和除去对DNA的抑制修饰达成。这些变化直接影响癌症的形成和进展。后生药物的实例包括组蛋白脱乙酰基酶抑制剂和DNA甲基化抑制剂。
组蛋白脱乙酰基酶抑制剂(HDAC抑制剂，HDI)是一类干扰组蛋白脱乙酰基酶的功能的化合物。组蛋白脱乙酰基酶的抑制剂已经显示出有效治疗皮肤的T-细胞淋巴瘤。临床中正在研究它们用于多种其它肿瘤类型。批准使用的HDAC抑制剂的实例为Vorinostat和Romidepsin。认为这些化合物抑制HDAC的活性并导致促进基因表达的对组蛋白的乙酰基化的蓄积。
阿扎胞苷(INN)或5-氮杂胞苷(以商品名Vidaza销售)是胞苷的化学类似物，而胞苷是DNA和RNA中存在的核苷。阿扎胞苷及其去氧衍生物地西他滨(也已知为5-氮杂-2,脱氧胞苷)用于治疗骨髓增生异常综合征，目前处于其它肿瘤适应症的研究中。阿扎胞苷作为假底物和DNA甲基转移酶的有效抑制剂(其导致DNA甲基化减少)起作用。在细胞中，DNA甲基转移酶在复制过程中将阿扎胞苷掺入DNA，并在转录过程中将阿扎胞苷掺入RNA。经过形成该分子与DNA甲基转移酶之间稳定的复合物产生DNA甲基化的抑制，从而饱和细胞甲基化机器。这导致DNA甲基化丧失和可以影响细胞调节蛋白(例如转录机器)能够与DNA联系的方式。
所述HDAC抑制剂的实施例包括：
1.Vorinostat，包括其药学上的可接受盐。Marks et al.,Nature Biotechnology25,84to 90(2007)；Stenger,Community Oncology 4,384-386(2007).
Vorinostat具有以下化学结构和名称：
N-羟基-N'-苯基-辛二酰胺
2.Romidepsin，包括其药学上的可接受盐。
Vinodhkumar et al.,Biomedicine&Pharmacotherapy 62(2008)85-93.
Romidepsin具有以下化学结构和名称：
(1S,4S,7Z,10S,16E,21R)-7-亚乙基-4,21-二(丙-2-基)-2-氧杂-12,13-二硫杂-5,8,20,23-四氮杂双环[8.7.6]二十三碳-16-烯-3,6,9,19,22-戊酮
3.Panobinostat，包括其药学上的可接受盐。Drugs of the Future 32(4):315-322(2007).
Panobinostat具有以下化学结构和名称：
(2E)-N-羟基-3-[4-({[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)乙基]氨基}甲基)苯基]丙烯酰胺
4.丙戊酸，包括其药学上的可接受盐。Gottlicher,et al.,EMBO J.20(24):6969-6978(2001)。
丙戊酸具有以下化学结构和名称：
2-丙基戊酸
5.Mocetinostat(MGCD0103)，包括其药学上的可接受盐。Balasubramanian etal.,Cancer Letters 280:211-221(2009)。
Mocetinostat具有以下化学结构和名称：
N-(2-氨基苯基)-4-[[(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]甲基]苯甲酰胺
所述HDAC抑制剂的其它实例包括在Bertrand European Journal of MedicinalChemistry 45,(2010)2095-2116中。
蛋白酶体抑制剂为阻断蛋白酶体作用的药物，蛋白酶体是裂解蛋白(例如p53蛋白)的细胞复合体(cellular complexes)。几种蛋白酶体抑制剂已经上市或处于治疗癌症的研究中。用于本文组合的合适的蛋白酶体抑制剂包括：
1.Bortezomib包括其药学上的可接受盐。Adams J,Kauffman M(2004),Cancer Invest 22(2):304–11.
Bortezomib具有以下化学结构和名称。
[(1R)-3-甲基-1-({(2S)-3-苯基-2-[(哌嗪-2-基羰基)氨基]丙酰基}氨基)丁基]硼酸
2.Disulfiram，包括其药学上的可接受盐。
Bouma et al.(1998).J.Antimicrob.Chemother.42(6):817–20.
Disulfiram具有以下化学结构和名称。
1,1',1”,1”'-[二硫烷二基双(硫羰基次氨基)]四乙烷
3.没食子酸表没食子儿茶素酯(Epigallocatechin gallate，EGCG)，包括其药学上的可接受盐。Williamson et al.,(December 2006),The Journal of Allergy andClinical Immunology 118(6):1369–74.
没食子酸表没食子儿茶素酯具有以下化学结构和名称。
苯甲酸[(2R,3R)-5,7-二羟基-2-(3,4,5-三羟基苯基)色满-3-基]3,4,5-三羟基酯
4.Salinosporamide A，包括其药学上的可接受盐。Feling et at.,(2003),Angew.Chem.Int.Ed.Engl.42(3):355–7.
Salinosporamide A具有以下化学结构和名称。
(4R,5S)-4-(2-氯乙基)-1-((1S)-环己-2-烯基(羟基)甲基)-5-甲基-6-氧杂-2-氮杂双环3.2.0庚烷-3,7-二酮
5.Carfilzomib，包括其药学上的可接受盐。Kuhn DJ,et al,Blood,2007,110:3281-3290.
Carfilzomib具有以下化学结构和名称。
(S)-4-甲基-N-((S)-1-(((S)-4-甲基-1-((R)-2-甲基氧杂环丙烷-2-基)-1-氧代戊-2-基)氨基)-1-氧代-3-苯基丙-2-基)-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰氨基)戊酰胺
70千道尔顿热休克蛋白(Hsp70)和90千道尔顿热休克蛋白(Hsp90)是广泛表达的热休克蛋白。Hsp70和Hsp90在某些癌症类型中过表达。几种Hsp70和Hsp90抑制剂正处于治疗癌症的研究中。本文组合使用的合适的Hsp70和Hsp90抑制剂包括；
1.17-AAG(格尔德霉素)，包括其药学上的可接受盐。Jia W et al.Blood.2003Sep1；102(5):1824-32.
17-AAG(格尔德霉素)具有以下化学结构和名称。
17-(烯丙基氨基)-17-去甲氧基格尔德霉素
2.Radicicol，包括其药学上的可接受盐。(Lee et al.,Mol CellEndocrinol.2002,188,47-54)
Radicicol具有以下化学结构和名称。
(1aR,2Z,4E,14R,15aR)-8-氯-9,11-二羟基-14-甲基-15,15a-二氢-1aH-苯并[c]环氧乙烷并[2,3-k][1]氧杂环十四碳二烯-6,12(7H,14H)-二酮
癌症代谢的抑制剂：许多肿瘤细胞显示与正常组织显著不同的代谢。例如，糖酵解(即将葡萄糖转化为丙酮酸的代谢过程)的速率增加，并且生成的丙酮酸被还原为乳酸，而非进一步在线粒体中经三羧酸(TCA)循环被氧化。甚至在有氧条件下也常常观察到该效应，并且称为Warburg效应。
乳酸脱氢酶A(LDH-A)(乳酸脱氢酶的一种亚型)表达于肌肉细胞中，在肿瘤细胞代谢中起关键作用，其通过进行丙酮酸至乳酸的还原，然后其运输至细胞外。已经显示所述酶在许多肿瘤类型中被上调。在Warburg效应中描述的葡萄糖代谢的改变对癌症细胞的生长和增殖至关重要，而且使用RNA-1敲除的LDH-A已经显示出在异种移植模型中导致细胞增殖和肿瘤生长的降低。
D.A.Tennant et.al.,Nature Reviews,2010,267.
P.Leder,et.al.,Cancer Cell,2006,9,425.
已经在癌症前体损伤中发现脂肪酸合成酶(FAS)的高水平。药理学抑制FAS影响癌症发育和维持中涉及的关键癌基因的表达。
Alli et al.Oncogene(2005)24,39–46.doi:10.1038
癌症代谢的抑制剂，包括LDH-A的抑制剂和脂肪酸生物合成的抑制剂(或FAS抑制剂)，可接受与本发明化合物组合使用。
在一个实施方式中，请求保护的发明中所述癌症治疗方法包括共同给药式(I)化合物和/或其药学上可接受的盐，以及至少一种抗肿瘤剂，例如抗微管剂、钼配位络合物、烷基化剂、抗生素、拓扑异构酶II抑制剂、抗代谢剂、拓扑异构酶I抑制剂、激素和激素类似物、信号转导途径抑制剂、非-受体酪氨酸激酶血管生成抑制剂、免疫治疗剂、促细胞凋亡剂、细胞周期信号转导抑制剂；HDAC抑制剂，蛋白酶体抑制剂；和癌症代谢的抑制剂。
在另一实施方案中，本发明涉及共同给药本发明化合物与厄洛替尼(erlotinib)的组合用于治疗癌症。
在另一实施方案中，本发明涉及共同给药本发明化合物与厄洛替尼的组合用于治疗非小细胞肺癌。
在一个实施方案中，本发明涉及厄洛替尼和本发明化合物或其可药用盐的组合在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
在一个实施方案中，本发明涉及厄洛替尼和本发明化合物或其可药用盐的组合在制备用于治疗非小细胞肺癌中的用途。
实验
一般实验条件
1H NMR谱在环境温度使用Varian Unity Inova(400MHz)谱仪(具有三重共振5mm探针，Avance III(300MHz)谱仪)或Bruker Ultrashield(400MHz或500MHz)谱仪来记录。化学位移以相对于四甲基硅烷的ppm表示。使用以下缩写：br＝宽信号，s＝单峰，d＝双重峰，dd＝双双峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰。
微波试验使用CEM Discover、Smith Synthesiser或Biotage Initiator 60TM(使用单模式谐振器或动态场调节，这两者产生可重复性和控制)来进行。可以实现40-250℃的温度并且可以达到高达30bar的压力。
用来确定保留时间(RT)和相关质量离子的高压液相色谱–质谱(LCMS)试验使用以下方法中的一个来实施。这些谱仪具有以正离子模式和负离子模式操作的电喷射源。使用Sedex 85蒸发光散射检测器完成另外的检测。
方法A:实验实施于Agilent 1100HPLC上，具有Agilent MSD质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用Agilent ZORBAX SB-C18 100x 3.0mm柱和0.7ml/分钟的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于98％水(含0.05％TFA)(溶剂A)和2％乙腈(含0.05％TFA)(溶剂B)，经25.5分钟增加至2％溶剂A和98％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定2.5分钟。
方法B:实验实施于Agilent 1200HPLC上，具有Agilent MSD质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用Agilent ZORBAX SB-C18 30x 2.1mm柱和0.4ml/分钟的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于97％水(含0.05％TFA)(溶剂A)和3％乙腈(含0.05％TFA)(溶剂B)，经7分钟增加至5％溶剂A和95％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定1.5分钟。
方法C:实验实施于Waters Acquity UHPLC上，具有Waters–LCT Premier XE质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用Acquity UPLC BEH C18,1.7um,2.1*50mm柱和0.6ml/分钟的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于98％水(含0.05％TFA)(溶剂A)和2％乙腈(含0.05％TFA)(溶剂B),经17分钟增加至2％溶剂A和98％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定1.5分钟。
方法D:实验实施于Waters Acquity UHPLC上，具有Waters–LCT Premier XE质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用Acquity UPLC BEH C18,1.7um,2.1*50mm柱和0.6ml/分钟的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于98％水(含0.05％TFA)(溶剂A)和2％乙腈(含0.05％TFA)(溶剂B),经7.5分钟增加至2％溶剂A和98％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定1.0分钟。
方法E:实验实施于Waters Micromass ZQ2000四极质谱仪上，其连接至具有PDAUV检测器的Waters Acquity UPLC体系。
LC柱-Acquity BEH C18 1.7um 100x 2.1mm，保持在40℃和0.4mL/分钟的流速。流动相包含甲酸0.1％于水中(溶剂A)和甲酸0.1％于乙腈中(溶剂B)。
方法F:实验实施于Waters Micromass ZQ2000四极质谱仪上，其连接至具有PDAUV检测器的Waters Acquity UPLC体系。
LC柱-Acquity Shield RP18 1.7μm,100×2.1mm或Acquity HSS T3 1.8μm,100×2.1mm，保持在40℃和0.4mL/分钟的流速。流动相包含甲酸0.1％于水中(溶剂A)和甲酸0.1％于乙腈中(溶剂B).
方法G:实验实施于SHIMADZU 1100HPLC上，具有SHIMADZU MSD质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用SHIMADU XR-ODS 50x 3.0mm柱和0.9ml/分钟的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于95％水(含0.1％甲酸)(溶剂A)和5％乙腈(溶剂B)，经2分钟增加至100％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定1.1分钟。
方法H:实验实施于SHIMADZU 1100HPLC，具有SHIMADZU MSD质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用Phenomenex Gemini-NX C18 50x 3.0mm柱和0.9ml/分钟的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于90％水(含0.04％NH3)(溶剂A)和10％乙腈(溶剂B)，经4分钟增加至35％溶剂A和65％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定0.2分钟。
方法I:实验实施于SHIMADZU 1100HPLC上，具有SHIMADZU MSD质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用SHIMADZU Shim-pack XR-ODSⅢ50x 2.0mm柱和0.7ml/分钟的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于95％水(含0.1％FA)(溶剂A)和5％乙腈(溶剂B)，经1分钟增加至60％溶剂A和40％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定1分钟。
方法J:实验实施于SHIMADZU 1100HPLC上，具有SHIMADZU MSD质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用SHIMADU XR-ODS 50x 3.0mm柱和1ml/分钟的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于95％水(含0.05％TFA)(溶剂A)和5％乙腈(含0.05％TFA)(溶剂B),经4.2分钟增加至5％溶剂A和95％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定1分钟。
方法K:实验实施于SHIMADZU 1100HPLC上，具有SHIMADZU MSD质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用SHIMADU XR-ODS 50x 3.0mm柱和1ml/分钟的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于95％水(含0.05％TFA)(溶剂A)和5％乙腈(含0.05％TFA)(溶剂B),经2分钟增加至25％溶剂A和75％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定1.2分钟。
方法L:实验实施于SHIMADZU 1100HPLC上，具有SHIMADZU MSD质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用SHIMADU XR-ODS 50x 3.0mm柱和1ml/分钟的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于95％水(含0.05％TFA)(溶剂A)和5％乙腈(含0.05％TFA)(溶剂B),经4.5分钟增加至35％溶剂A和65％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定0.7分钟。
方法M:实验实施于SHIMADZU 1100HPLC，具有SHIMADZU MSD质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用SHIMADU XR-ODS 50x 3.0mm柱和1ml/分钟的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于95％水(含0.05％TFA)(溶剂A)和5％乙腈(含0.05％TFA)(溶剂B)，经4分钟增加至30％溶剂A和70％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定1.9分钟。
方法N:实验实施于SHIMADZU 1100HPLC上，具有SHIMADZU MSD质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用SHIMADU XR-ODS 50x 3.0mm柱和1ml/分钟的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于95％水(含0.05％TFA)(溶剂A)和5％乙腈(含0.05％TFA)(溶剂B),经2分钟增加至100％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定1.1分钟。
方法O:实验实施于Agilent 1100HPLC上，具有Agilent四极LC/MSD SL质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用Agilent XBridge C18 30x 3.0mm柱和2mL/min的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于98％水(含0.05％TFA)(溶剂A)和2％乙腈(含0.05％TFA)(溶剂B),经2.2min增加至5％溶剂A和95％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定0.3min。
方法P:实验实施于Waters Acquity UHPLC，具有Waters SQ质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用Acquity UPLC BEH C18,1.7um,2.1*50mm柱和0.7mL/min的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于95％水(含0.05％TFA)(溶剂A)和5％乙腈(含0.05％TFA)(溶剂B),经1.4min增加至5％溶剂A和95％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定0.3min。
方法Q:实验实施于Shimadzu 1100HPLC上，具有Shimadzu MSD质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用Shim-pack XR-ODS50x 3.0mm柱和1mL/min的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于95％水(含0.05％TFA)(溶剂A)and 5％乙腈(含0.05％TFA)(溶剂B),经2.2min增加至100％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定1min。
方法R:实验实施于Shimadzu 1100HPLC上，具有Shimadzu MSD质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用Shim-pack XBridge C18 50x 3.0mm柱和1.1mL/min的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于95％水(含0.05％碳酸氢铵)(溶剂A)和5％乙腈(溶剂B),经2.2min增加至95％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定1min。
方法S:实验实施于Shimadzu 1100HPLC上，具有Shimadzu MSD质谱仪，使用ESI作为离子化源，使用Shimadzu Acquity UPLC BEH C18 50x 2.1mm柱和0.7mL/分钟的流速。该溶剂体为如下的梯度：起始于95％水(含0.1％TFA)(溶剂A)和5％乙腈(含0.05％TFA)(溶剂B)，经2min增加至100％溶剂B。最终溶剂体系再保持恒定1.2min。
方案
本发明的化合物可以如以下方案A所示进行制备。2-卤代吡啶化合物a与胺反应得到化合物b。还原硝基基团得到c，其可与式d的化合物缩合得到化合物e。化合物e与2-氯-4-氨基嘧啶的钯介导的偶联得到化合物f。氯化物以合适取代的胺直接置换或者与芳基硼酸酯或锡烷进行钯介导的偶联得到最终化合物g和h。
方案A：
备选地，本发明化合物可以如以下方案B所示进行制备。2-氯-4-氨基嘧啶可以与适当取代的胺反应或者经由与芳基硼酸酯或锡烷的钯介导的偶联得到在2-位具有可变取代的嘧啶i。化合物i和化合物e可以经由钯介导的偶联发生反应形成最终化合物g或h。
方案B：
本发明化合物可以如以下方案C所示进行制备。2-卤代-氮杂吲哚j的碘化得到化合物k。以烷基卤将化合物k烷基化得到化合物l。化合物l可以n-BuLi和CO2处理得到化合物m。任选取代的胺与化合物m在标准酰胺键形成条件下的偶联得到化合物n。任选取代的氨基嘧啶化合物i与化合物n的钯介导的偶联得到最终化合物o。
方案C:
实施例1:N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-2-(1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并 [3,2-c]吡啶-6-胺
步骤1:4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-吡唑
向4-碘代-1H-吡唑(11.0g,56.7mmol)和乙炔基(三甲基)甲硅烷(22.3g,227mmol)在四氢呋喃(80mL)中的溶液添加二乙基胺(80mL,758mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(6.03g,8.51mmol)和碘化亚铜(I)(1.62g,8.51mmol)，并且反应混合物于室温搅拌18h。将溶剂真空除去并且所得残余物溶解于Et2O(400mL)并过滤。滤液经浓缩并且剩余物通过硅胶色谱法纯化(梯度0-100％Et2O/庚烷)得到标题化合物(5.1g,55％)，为棕色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝165.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.92(s,1H),7.87(s,1H),7.46(s,1H),0.01(d,J＝6.4Hz,9H).
步骤2:4-乙炔基-1H-吡唑
向4-((三甲基甲硅烷基)乙炔基-1H-吡唑(5.0g,30mmol)在四氢呋喃(50mL)中的溶液添加氢氧化锂水合物(1.9g,46mmol)在水(10mL)中的溶液。于室温搅拌18h后，反应混合物以乙酸中和并浓缩。剩余物在1-丁醇和水之间分配并且合并的有机层经浓缩得到化合物(2.8g,定量)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.08(s,1H),7.84(s,2H),3.93(s,1H).
步骤3:2-溴-5-碘吡啶-4-胺
向2-溴吡啶-4-胺(15.0g,86.7mmol)和乙酸钠(14.2g,173.4mmol)在冰乙酸(150mL)中的溶液添加一氯化碘(4.9mL,95.4mmol)在冰乙酸(70mL)中的溶液。于70℃加热18h后，将反应冷却至室温并倒入水(800mL)中。水溶液以EtOAc分配两次。合并的有机层以饱和Na2CO3水溶液、饱和Na2S2O3水溶液、盐水洗涤并经MgSO4干燥。有机层经过滤并真空浓缩，并且所得残余物通过硅胶色谱法纯化(梯度10-60％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(8.9g,34％)。LCMS(ESI)[M+H]＝300.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.16(s,1H),6.77(s,1H),6.50(s,2H).
步骤4:N-(2-溴-5-碘吡啶-4-基)甲磺酰胺
将在二氯甲烷(8mL)中的甲磺酰氯(2.15mL,27.3mmol)滴加至2-溴-5-碘吡啶-4-胺(1.63g,5.45mmol)和三乙基胺(3.84mL,27.3mmol)在二氯甲烷(20mL)中的冷的0℃溶液。反应混合物温热至室温并搅拌2h。将溶剂真空除去并且所得残余物通过硅胶色谱法纯化(梯度5-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(1.1g,44％产率)，为灰白色固体，其溶解于在四氢呋喃(15mL)中的NaOH水溶液(10％,15mL)中并于室温搅拌16小时。反应混合物经浓缩。添加水并然后使用柠檬酸水溶液酸化至pH 4。所得固体经过滤并干燥得到标题化合物(0.950g,46％)。LCMS(ESI)[M+H]＝379.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.62(s,1H),7.52(s,1H),3.26(s,3H).
步骤5:6-溴-2-(1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
N-(2-溴-5-碘吡啶-4-基)甲磺酰胺(1500mg,4.0mmol)、4-乙炔基-1H-吡唑(440mg,4.8mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(140mg,0.20mmol)、碘化亚铜(I)(38mg,0.20mmol)和三乙基胺(2.5mL,18mmol)在DMF(35mL)中的混合物于100℃加热3h，并且然后冷却至50℃。添加DBU(1.8mL)并于50℃继续搅拌30min。冷却至室温后，溶液以饱和NH4Cl稀释并以EtOAc萃取两次。合并的有机层经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化(梯度5-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(350mg,33％)。LCMS(ESI)[M+H]＝263.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.13(s,1H),11.92(s,1H),8.51(s,1H),8.26(s,1H),8.01(s,1H),7.48(s,1H),6.72(s,1H)
步骤6:6-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2-(1-((2-(三甲基甲硅烷 基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
于0℃，氢化钠(270mg,6.7mmol)缓慢地添加至6-溴-2-(1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(350mg,1.3mmol)在THF(10mL)中的溶液并搅拌30分钟，接着添加2-(氯甲氧基)乙基三甲基甲硅烷(0.94mL,5.3mmol)。反应混合物温热至室温并再搅拌5h。反应以H2O(50mL)淬灭，并且水层以EtOAc萃取两次。合并的有机层经真空浓缩并且所得残余物通过硅胶色谱法纯化(梯度0-50％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(250mg,36％)。LCMS(ESI)[M+H]＝524.0；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.60(d,J＝4.1Hz,1H),8.36–8.33(m,1H),8.01(d,J＝2.9Hz,2H),6.85(s,1H),5.64(s,2H),5.48(d,J＝8.3Hz,2H),3.61–3.48(m,4H),0.94–0.76(m,4H),0.01–0.00(m,18H)。
步骤7:N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-2-(1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并 [3,2-c]吡啶-6-胺
6-溴-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(125mg,0.239mmol)、2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(64.6mg,0.310mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(10.9mg,0.012mmol)、Xantphos(14.2mg,0.024mmol)和碳酸铯(233mg,0.716mmol)在1,4-二噁烷(1.5mL)和1,2-二甲氧基乙烷(1.5mL)中的化合物添加至微波试管中。在以氮气吹扫5分钟后，密封试管于120℃在CEM微波中加热60min。反应混合物经过硅藻土垫过滤并且滤液经真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化(梯度0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(43mg,28％.LCMS(ESI)[M+H]＝652.0)，为灰白色固体，其溶解于MeOH(1mL)和10％NaOH水溶液(0.1mL)中，并于室温搅拌30min。该混合物经蒸发并且剩余物通过HPLC纯化(C18氧化硅，在20min梯度5-50％乙腈/0.1％NH4OH/水上)得到标题化合物(5.0mg,20％)。LCMS(ESI):RT(min)＝3.460,M+H＝391.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.46(s,1H),8.44(s,1H),8.07(s,2H),7.96–7.87(m,2H),6.63–6.53(m,2H),4.24(dt,J＝13.0,4.6Hz,2H),3.52–3.35(m,2H),3.30(s,3H),1.97–1.85(m,2H),1.51–1.36(m,2H).
实施例2:1-异丙基-N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-2-(1H-吡唑-4-基)- 1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
步骤1:4-碘代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑
向吹扫并保持以氮气的1L 3颈圆底烧瓶中添加4-碘代-1H-吡唑(45.0g,232mmol,1.00当量)和N,N-二甲基甲酰胺(500mL)。接着于0℃分若干批次添加氢化钠(10.2g,2.55mmol,1.10当量)。并于0℃在冰/盐浴中将反应混合物搅拌30min。向反应混合物伴随搅拌滴加[2-(氯甲氧基)乙基]三甲基甲硅烷(42.3g,254mmol,1.10当量)。所得溶液于室温再搅拌3h。反应混合物通过添加水/冰(250mL)淬灭，以乙酸乙酯(2x500mL)萃取并且各有机层经分离和合并。合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到4-碘代-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑(80.0g)，为浅黄色油状物，不经进一步纯化。
步骤2:1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-4-(2-(三甲基甲硅烷基)乙炔 基)-1H-吡唑
向吹扫并保持以氮气的惰性气氛的1L 3颈圆底烧瓶中添加4-碘代-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑(75.0g,231mmol)、CuI(880mg,4.62mmol)、二氯双(三苯基膦)钯(II)(3.25g,4.63mmol)、三乙基胺(93.5g,926mmol)、TMS-乙炔(56.7g,578mmol)和四氢呋喃(500mL)。于室温搅拌5h后，反应混合物以H2O(300mL)和乙酸乙酯(1000mL)稀释，过滤，以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-4-[2-(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-1H-吡唑(80.0g)，为棕色油状物。LCMS(ESI):RT(min)＝1.912,[M+H]+＝295,方法＝K.
步骤3:4-乙炔基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑
向吹扫并保持以氮气的100mL 3颈圆底烧瓶中添加1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-4-[2-(三甲基甲硅烷基)乙炔基]-1H-吡唑(80.0g,272mmol,1.00当量)和四氢呋喃(100mL)。接着于室温伴随搅拌滴加TBAF(1N在四氢呋喃中,300mL)。于室温搅拌4h后，反应混合物以乙酸乙酯(300mL)稀释、以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过以乙酸乙酯/石油醚(1:50)的色谱纯化得到标题化合物(30.0g,50.0％)，为黄色油状物。LCMS(ESI):RT(min)＝1.256,[M+H]+＝223,方法＝G.1H NMR(300MHz,CDCl3)7.68(s,1H),7.59(s,1H),5.34(s,2H),3.50(m,2H),2.99(s,1H),0.85(m,2H),0.03(s,9H).
步骤4:6-溴-2-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1H-吡 咯并[3,2-c]吡啶
N-(2-溴-5-碘吡啶-4-基)甲磺酰胺(5.9g,16.0mmol)、4-乙炔基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑(4.5g,20.0mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(550mg,0.78mmol)、碘化亚铜(I)(150mg,0.78mmol)和三乙基胺(6.6mL,47.0mmol)在DMF(50mL)中的混合物于100℃加热3h并且然后冷却至50℃。添加DBU(7.1mL)并于50℃再持续搅拌30分钟。于室温搅拌18h后，混合物以NH4Cl水溶液稀释，并以EtOAc萃取两次。合并的有机层经MgSO4干燥并真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化(梯度0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(2.1g,34％)。LCMS(ESI)[M+H]+＝395.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),8.41(s,1H),8.09(s,1H),7.53(s,1H),6.80(s,1H),5.51(s,2H),3.67–3.55(m,2H),0.97–0.74(m,2H),0.00(s,9H).
步骤5:6-溴-1-异丙基-2-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4- 基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
将2-碘丙烷(0.4mL,4.0mmol)添加至6-溴-2-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(500mg,1.0mmol)、碳酸铯(1000mg,4.0mmol)在DMF(4mL)中的混合物。于90℃搅拌48h后，混合物以EtOAc(80mL)稀释并以水洗涤。有机层经真空浓缩并且剩余物通过硅胶色谱法纯化(梯度0-40％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(240mg,40％)。LCMS(ESI)[M+H]+＝437.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.62(s,1H),8.31(s,1H),7.87(d,J＝9.9Hz,2H),6.65(s,1H),5.79(s,1H),5.52(s,2H),4.84–4.71(m,1H),3.72–3.59(m,2H),1.58(d,J＝6.9Hz,6H),0.99–0.85(m,2H),0.00(s,9H).
步骤6:1-异丙基-N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-2-(1H-吡唑-4-基)- 1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
将6-溴-1-异丙基-2-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(236mg,0.542mmol)、2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(169mg,0.813mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(24.8mg,0.0271mmol)、Xantphos(32.3mg,0.054mmol)、碳酸铯(442mg,1.36mmol)和1,4-二噁烷(4mL)添加至压力试管。以氮气吹扫5分钟或，密封试管于120℃加热20h。反应混合物通过硅藻土垫过滤并以EtOAc洗涤。滤液经真空浓缩并且剩余物通过硅胶色谱法纯化(梯度0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(110mg,36％,LCMS(ESI)[M+H]＝563.6)，为灰白色固体。受保护的产物溶解于4N HCl(在1,4-二噁烷(4mL)中)并于室温搅拌1h。混合物经浓缩并且剩余物通过制备性HPLC纯化(C18氧化硅，在20min梯度5-50％乙腈/0.1％NH4OH于水中)得到标题化合物(19mg,22％)。LCMS(ESI):RT(min)＝3.581,[M+H]+＝433.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.21(s,1H),9.56(s,1H),8.50(s,1H),8.33(s,1H),7.93(d,J＝5.7Hz,1H),6.45(s,2H),4.72(p,J＝7.1Hz,1H),4.33–4.24(m,2H),3.50–3.34(m,2H),3.30(s,3H),1.91(d,J＝12.2Hz,2H),1.57(d,J＝7.0Hz,6H),1.43(dq,J＝8.2,4.5,3.9Hz,2H).
实施例3:(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧 啶-4-基]胺甲酸盐
步骤1:(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)异丙基胺
于室温将异丙基胺(1.43mL,16.7mmol)滴加至2,4-二氯-5-硝基吡啶(3g,13.9mmol)和三乙基胺(3.9mL,27.8mmol)在THF(50mL)中的溶液中,导致剧烈的放热。反应混合物于室温搅拌3h并且然后在水和EtOAc之间分配。水相以EtOAc洗涤并且合并的有机相以盐水洗涤，干燥(MgSO4)并真空浓缩得到标题化合物，为黄色固体(定量)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.02(1H,s),8.08(1H,s),6.74(1H,s),3.88-3.72(1H,m),1.37(6H,d,J＝6.4Hz).
步骤2:2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺
2-氯嘧啶-4-基胺(3.5g,27.0mmol)、4-甲氧基哌啶盐酸盐(4.09g,27.0mmol)和Cs2CO3(26.4g,81.0mmol)悬浮于DMF(60mL)中并于120℃加热18h。反应混合物在水和EtOAc之间分配。水相以EtOAc(x 2)洗涤并且合并的有机相以盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并且真空浓缩得到标题化合物，为固体(2.5g)。水相经真空浓缩并且浆料以EtOAc萃取。挥发物经真空除去并且所得残余物通过色谱法纯化(Si-PCC,梯度0-100％EtOAc/环己烷)并且然后以环己烷研磨得到第二批次的标题化合物(2.38g,87％合并两个批次)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.94(1H,d,J＝5.60Hz),5.74(1H,d,J＝5.60Hz),4.53(2H s),4.33-4.24(2H,m),3.47-3.37(4H,m),3.33-3.24(2H,m),1.98-1.87(2H,m),1.60-1.47(2H,m).
步骤3:N4-异丙基-N2-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-5-硝基吡啶-2,4-二 胺
(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)异丙基胺(517mg,2.4mmol)、2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-胺(500mg,2.4mmol)、XPhos(229mg,48μmol)、Pd2(dba)3(109mg,12μmol)和Cs2CO3(1.56g,4.8mmol)悬浮于1,4-二噁烷(10mL)中。反应混合物以氩气脱气，超声并且然后在回流下加热3h。冷却的反应混合物在水和EtOAc之间分配。水相以EtOAc(x 2)洗涤并且合并的有机相以盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并真空浓缩。所得深棕色固体以二乙醚研磨得到标题化合物，为浅黄色固体(667mg,72％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:9.02(1H,s),8.25(1H,m),8.11(1H,d,J＝5.5Hz),7.66(1H,s),7.30(1H,s),6.06(1H,d,J＝5.5Hz),4.33-4.20(2H,m),3.94-3.82(1H,m),3.56-3.44(3H,m),3.41(3H,s),2.00-1.89(2H,m),1.68-1.57(2H,m),1.37(6H,d,J＝6.38Hz).
步骤4:N4-异丙基-N2-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]吡啶-2,4,5-三胺
N4-异丙基-N2-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-5-硝基吡啶-2,4-二胺(2.18g,5.6mmol)和Pd/C(10重量％)(300mg)悬浮于EtOAc/MeOH(100mL/10mL)的混合物中并且在氢气下搅拌18h。反应混合物经过滤并且滤液经真空浓缩。所得残余物通过色谱法纯化(Si-PCC,梯度0-10％2M NH3/MeOH，在DCM中)得到标题化合物(1.84g,92％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.99(1H,d,J＝5.7Hz),7.61(1H,s),7.27(1H,s),7.18(1H,s),6.14(1H,d,J＝5.7Hz),4.37-4.2(3H,m),3.76-3.64(1H,m),3.50-3.33(6H,m),2.82(2H,s),1.99-1.89(2H,m),1.65-1.52(2H,m),1.28(6H,d,J＝6.3Hz)。
步骤5:(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧 啶-4-基]胺甲酸盐
向N4-异丙基-N2-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]吡啶-2,4,5-三胺(70mg,0.19mmol)在原甲酸三甲基酯(2mL)中的溶液添加甲酸(5滴)并且反应混合物于100℃加热1h。挥发物经真空除去并且所得残余物通过HPLC纯化(C18氧化硅，在20min梯度20-60％乙腈/0.1％NH4OH于水中，接着20min梯度5-50％乙腈/0.1％HCO2H于水中)得到标题化合物(19mg,27％)。LCMS(ESI):RT 2.28min,[M+H]+367.9,方法＝E.1H NMR(400MHz,DMSO):δ9.74(1H,s),8.60(1H,d,J＝0.9Hz),8.35(1H,s),8.28(1H,s),8.14(0.4H,s),7.92(1H,d,J＝5.7Hz),6.33(1H,d,J＝5.7Hz),4.65-4.54(1H,m),4.24-4.12(2H,m),3.24(3H,s),2.46-2.25(3H,m),1.91-1.77(2H,m),1.51(6H,d,J＝6.8Hz),1.44-1.31(2H,m)。
实施例4:(2-乙基-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌啶- 1-基)嘧啶-4-基]胺
N4-异丙基-N2-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]吡啶-2,4,5-三胺(185mg,0.57mmol)、原丙酸三甲基酯(2mL)和甲酸(5滴)的混合物于180℃在微波辐射下加热7h。粗的反应混合物通过色谱法纯化(Si-PCC,梯度0-5％2M NH3/MeOH，在DCM中)，接着HPLC纯化(C18氧化硅，在20min梯度10-90％乙腈/0.1％NH4OH于水中)得到标题化合物(113mg,55％)。LCMS(ESI):RT2.44min,[M+H]+396.1,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.62(1H,s),8.35(1H,s),8.00(1H,d,J＝5.64Hz),7.49(1H,s),6.01(1H,d,J＝5.7Hz),4.69-4.56(1H,m),4.39-4.28(2H,m),3.50-3.40(3H,m),3.37(3H,s),),2.88(2H,q,J＝7.5Hz),1.98-1.89(2H,m),1.66-1.54(8H,m),1.43(3H,t,J＝7.5Hz)。
实施例5:(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌啶- 1-基)嘧啶-4-基]胺
N4-异丙基-N2-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]吡啶-2,4,5-三胺(1.0g,2.81mmol)、原乙酸三甲基酯(7mL)和甲酸(12滴)的混合物于220℃在微波辐射下加热5小时30分钟。粗的反应混合物通过色谱法纯化(Si-PCC,梯度0-10％2M NH3/MeOH，在DCM中)得到标题化合物(963mg,90％)。LCMS(ESI):RT 2.19min,[M+H]+382.2,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.58(1H,s),8.34(1H,s),8.00(1H,d,J＝5.6Hz),7.33(1H,s),6.00(1H,d,J＝5.6Hz),4.67-4.54(1H,m),4.38-4.28(2H,m),3.50-3.40(3H,m),3.38(3H,s),2.59(3H,s),1.99-1.90(2H,m),1.63(6H,d,J＝6.9Hz),1.62-1.55(2H,m)。
实施例6:1-异丙基-N6-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-N2-甲基-1H-咪唑并 [4,5-c]吡啶-2,6-二胺
N4-异丙基-N2-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]吡啶-2,4,5-三胺(150mg,0.42mmol)和异硫氰酸甲酯(46mg,0.63mmol)溶解在乙腈(7mL)中并于70℃加热18h。添加(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐(278mg,0.63mmol)和DBU(128mg,0.84mmol)，并且于回流温度持续搅拌16h。反应混合物在水和EtOAc之间分配。水相以EtOAc(x 2)萃取并且合并的有机相以盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并真空浓缩。所得残余物通过HPLC纯化(C18氧化硅，在20min梯度10-90％乙腈/0.1％NH4OH于水中)得到标题化合物(38mg,23％)。LCMS(ESI):RT 1.91min,[M+H]+397.2,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.37(1H,d,J＝0.8Hz),8.08(1H,s),7.98(1H,d,J＝5.7Hz),7.28(1H,s),6.01(1H,d,J＝5.7Hz),4.38-4.22(3H,m),4.17-4.15(1H,m),3.49-3.38(3H,m),3.37(3H,s),3.13(3H,d,J＝4.9Hz),1.97-1.87(2H,m),1.65-1.3(8H,m)。
实施例7:[2-(2-乙氧基乙氧基甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]- [2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]胺
步骤1:2-氯-N-异丙基-5-硝基吡啶-4-胺
向2000-mL 3颈圆底烧瓶中添加2,4-二氯-5-硝基吡啶(90.0g,466mmol,1.00当量)在四氢呋喃(1000mL)、三乙基胺(70.0g,691mmol,1.48当量)中的溶液。接着于0℃伴随搅拌滴加丙-2-胺(33.0g,558mmol,1.20当量)。所得溶液于室温搅拌4h。所得混合物经真空浓缩。剩余物以H2O(1000mL)研磨。固体经过滤并在烘箱中减压干燥得到2-氯-5-硝基-N-(丙-2-基)吡啶-4-胺标题化合物(96g,95％)，为黄色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝1.913,[M+H]+＝216,方法＝H.
步骤2:6-氯-N4-异丙基吡啶-3,4-二胺
2-氯-5-硝基吡啶-4-基)异丙基胺(1.01g,4.68mmol)和Pt2O(10mg)在EtOAc(25mL)中的悬浮液于RT在氢气气氛下搅拌18h。反应混合物经过滤并且滤液经真空浓缩得到标题化合物，为黑色固体(880mg,定量)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.64(1H,s),6.44(1H,s),4.22-4.13(1H,m),3.68-3.55(1H,m),3.49(2H,s),1.27(6H,d,J＝6.3Hz)。
步骤3:6-氯-2-氯甲基-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
氯乙酰氯(56μL,0.70mmol)添加至6-氯-N4-异丙基吡啶-3,4-二胺(100mg,0.54mmol)和Et3N(150μL,1.08mmol)在DCM(1mL)中的溶液并且反应混合物于RT搅拌30min。挥发物经真空除去并且所得残余物溶解于AcOH(1mL)。反应混合物于70℃加热48h，然后以水稀释并且通过添加NaOH(1N)将pH调节至8。水相以EtOAc(x 2)洗涤并且合并的有机层以盐水洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发。所得残余物通过色谱法纯化(Si-PCC,梯度0-10％MeOH/DCM)得到标题化合物(53mg,40％)。LCMS(ESI):[M+H]+244.1.
步骤4:6-氯-2-(2-乙氧基乙氧基甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
向2-乙氧基乙醇(23μL,0.24mmol)在THF(2mL)中的溶液添加NaH(60重量％，在矿物油中，11mg,0.28mmol)并且反应混合物于室温搅拌5min。添加6-氯-2-氯甲基-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(53mg,0.22mmol)，作为在THF(1mL)中的溶液，并且反应混合物于室温搅拌1h，然后以水稀释并以EtOAc(x 2)萃取。合并的有机层以盐水洗涤，干燥(MgSO4)并真空浓缩得到标题化合物(59mg,91％)。LCMS(ESI):[M+H]+298.2.
步骤5:[2-(2-乙氧基乙氧基甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]-[2- (4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]胺
6-氯-2-(2-乙氧基乙氧基甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(59mg,0.19mmol)、2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(38mg,0.18mmol)、XPhos(17mg,0.04mmol)、Pd2(dba)3(8mg,9μmol)和Cs2CO3(118mg,0.36mmol)悬浮在二噁烷(2mL)中。反应混合物以氩气流脱气并超声并且然后于100℃加热3h。反应混合物在水和EtOAc之间分配。水相以EtOAc萃取并且合并的有机相以盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并真空浓缩。所得残余物通过制备性HPLC纯化(柱C18,20min梯度10-50％乙腈/0.1％HCO2H于水中)得到标题化合物(17mg,20％)。LCMS(ESI):RT 2.74min,[M+H]+470.3,方法＝E.1H NMR(400MHz,DMSO):δ9.73(1H,s),8.58(1H,d,J＝0.9Hz),8.41(1H,s),7.92(1H,d,J＝5.6Hz),6.37(1H,d,J＝5.7Hz),4.89-4.78(1H,m),4.72(2H,s),4.26-4.14(2H,m),3.57-3.49(2H,m),3.48-3.19(10H,m),1.91-1.81(2H,m),1.54(6H,d,J＝6.9Hz),1.45-1.32(2H,m),1.03(3H,t,J＝6.9Hz)。
实施例8:[2-(2-二甲基氨基乙氧基甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6- 基]-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]胺
步骤1:[2-(6-氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲氧基)乙基]二甲基胺
向2-二甲基氨基乙醇(54μL,0.54mmol)在THF(2mL)中的溶液添加NaH(60重量％在矿物油中，27mg,0.68mmol)并且反应混合物于室温搅拌5min。添加6-氯-2-氯甲基-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例7,步骤3)(110mg,0.45mmol)，为在THF(1mL)中的溶液，并且反应混合物于室温搅拌2h，然后以水稀释并以EtOAc(x 2)萃取。合并的有机层以盐水洗涤，干燥(MgSO4)并真空浓缩得到标题化合物(133mg,定量)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.79(1H,s),7.47(1H,s),5.03-4.91(1H,m),3.83(2H,s),3.58(2H,t,J＝5.7Hz),2.50(2H,t,J＝5.7Hz),2.24(6H,s),1.62(6H,d,J＝7.3Hz)。
步骤2:[2-(2-二甲基氨基乙氧基甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6- 基]-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]胺
[2-(6-氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲氧基)乙基]二甲基胺(133mg,0.45mmol)、2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(85mg,0.41mmol)、XPhos(39mg,0.08mmol)、Pd2(dba)3(19mg,20.3μmol)和Cs2CO3(265mg,0.81mmol)悬浮在二噁烷(4mL)中。反应混合物以氩气流脱气并超声并且然后于100℃加热18h。反应混合物在水和EtOAc之间分配。水相以EtOAc萃取并且合并的有机相以盐水洗涤，干燥(MgSO4)，并真空浓缩。所得残余物通过色谱法纯化(Si-PCC,梯度0-10％MeOH/DCM，接着10％2M NH3/MeOH，在DCM中)并且然后通过制备性HPLC纯化(柱C18,20min梯度20-70％乙腈/0.1％NH4OH/水)得到标题化合物(114mg,60％)。LCMS(ESI):RT 1.85min,[M+H]+469.3,方法＝E.1H NMR(400MHz,DMSO):δ9.73(1H,s),8.58(1H,s),8.41(1H,s),7.92(1H,d,J＝5.6Hz),6.37(1H,d,J＝5.7Hz),4.91-4.79(1H,m),4.70(2H,s),4.25-4.12(2H,m),3.51(2H,t,J＝5.8Hz),3.45-3.14(6H,m),2.38(2H,t,J＝5.8Hz),2.09(6H,s),1.92-1.81(2H,m),1.54(6H,d,J＝6.9Hz),1.46-1.32(2H,m).
实施例9:(2-二甲基氨基甲基-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4- 甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]胺甲酸盐
步骤1:(2-氯甲基-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌啶- 1-基)嘧啶-4-基]胺
N4-异丙基-N2-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]吡啶-2,4,5-三胺(实施例3,步骤4)(50mg,0.14mmol)溶解于2-氯-1,1,1-三甲氧基乙烷(1mL)中并添加催化量的对甲苯磺酸。反应混合物于100℃加热1h，并且然后挥发物经真空除去。所得残余物通过色谱法纯化(Si-PCC,梯度0-10％MeOH/DCM)得到标题化合物(50mg,86％)。LCMS(ESI):[M+H]+416.3.
步骤2:(2-二甲基氨基甲基-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲 氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]胺甲酸盐
(2-氯甲基-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]胺(50mg,0.12mmol)在二甲基胺(1M，在MeOH中,2mL)中于120℃在微波辐射下加热20min。挥发物经真空除去并且所得残余物通过制备性HPLC纯化(柱C18,20min梯度5-50％乙腈/0.1％HCO2H于水中)得到标题化合物(16mg,28％)。LCMS(ESI):RT 1.74min,[M+H]+425.0,方法＝E.1H NMR(400MHz,DMSO):δ9.69(1H,s),8.53(1H,s),8.38(1H,s),8.10(1H,s),7.91(1H,d,J＝5.7Hz),6.36(1H,d,J＝5.7Hz),5.02-4.91(1H,m),4.26-4.13(2H,m),3.63(2H,s),3.49-3.08(6H,m),2.14(6H,s),1.90-1.81(2H,m),1.51(6H,d,J＝6.9Hz),1.45-1.32(2H,m).
实施例10:{1-异丙基-6-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]-1H-咪唑并 [4,5-c]吡啶-2-基}甲醇
(2-氯甲基-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]胺(实施例9,步骤1)(40mg,0.096mmol)和KOAc(18mg,0.14mmol)在DMF(1mL)中的溶液于100℃加热45min。挥发物经真空除去并且所得残余物溶解于MeOH(1mL)和水(0.3mL)的混合物中。添加LiOH一水合物(6mg,0.14mmol)并且反应混合物于室温搅拌1h。挥发物经真空除去并且所得残余物通过制备性HPLC纯化(柱C18,20min梯度5-50％乙腈/0.1％NH4OH/水)得到标题化合物(20mg,52％)。LCMS(ESI):RT 2.11min,[M+H]+397.95,方法＝E.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.70(1H,s),8.54(1H,s),8.39(1H,s),7.91(1H,d,J＝5.7Hz),6.36(1H,d,J＝5.7Hz),5.63(1H,t,J＝5.7Hz),4.97-4.83(1H,m),4.66(2H,d,J＝5.6Hz),4.25-4.15(2H,m),3.45-3.28(3H,m),3.24(3H,s),1.91-1.80(2H,m),1.53(6H,d,J＝6.9Hz),1.44-1.32(2H,m).
实施例11:(1-异丙基-2-甲氧基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌 啶-1-基)嘧啶-4-基]胺
(1-异丙基-2-甲氧基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]胺(11mg,19％)从N4-异丙基-N2-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]吡啶-2,4,5-三胺(实施例3步骤4,50mg,0.14mmol)根据对于实施例4描述的类似方法制备。LCMS(ESI):RT 2.60min,[M+H]+398.2,方法＝E.1H NMR(400MHz,DMSO):δ8.44(1H,d,J＝1.0Hz),8.20(1H,s),8.02(1H,d,J＝5.7Hz),7.34(1H,s),6.04(1H,d,J＝5.7Hz),4.72-4.57(1H,m),4.39-4.29(2H,m),4.20(3H,s),3.53-3.41(3H,m),3.40(3H,s),2.01-1.91(2H,m),1.71-1.58(2H,m),1.57(6H,d,J＝7.3Hz)。
实施例12:(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(1,4,6,7-四氢吡唑并 [4,3-c]吡啶-5-基)嘧啶-4-基]胺
步骤1:(2-溴-5-硝基吡啶-4-基)异丙基胺
2,4-二溴-5-硝基吡啶(10g,0.035mol)溶解于THF(150mL)中。滴加异丙基胺(4.6mL,0.053mol)并且所得亮黄色混合物搅拌30min。进一步添加异丙基胺(3.5mL)并将反应混合物搅拌30min。挥发物经真空除去并且所得残余物在DCM和水之间分配。有机层经干燥(MgSO4)，过滤并真空蒸发得到标题化合物，为黄色固体(9.2g,定量)。LCMS(ESI):[M+H]+259.8.
步骤2:6-溴-N4-异丙基吡啶-3,4-二胺
(2-溴-5-硝基吡啶-4-基)异丙基胺(9.2g,0.035mol)溶解于AcOH(140mL)中。于室温将Fe粉(7.9g,0.142mol)缓慢地添加至搅拌混合物中。10min后反应混合物显示温和的放热并且使用冰浴冷却至40℃的最大温度。室温持续搅拌18h。反应混合物以EtOAc(300mL)稀释，缓慢地倾倒至Na2CO3(1M水溶液,1.5L)并经Hyflo过滤，以EtOAc充分洗涤。合并的有机层经分离，以盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空蒸发得到粉色固体(7.83g,定量)。LCMS(ESI):[M+H]+231.
步骤3:6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-溴-N4-异丙基吡啶-3,4-二胺(7.8g,0.034mol)悬浮于原甲酸三甲基酯(69mL)和甲酸(24mL)中。所得混合物于110℃加热12h。冷却的溶液倾倒通过SCX筒。该筒首先以MeOH洗涤，并且产物以2M NH3/MeOH洗脱。将含有各级分的产物合并并且真空浓缩并且所得残余物通过硅胶色谱法纯化(PPC-ISCO,梯度0-100％EtOAc/DCM)得到标题化合物，为米色固体(6.5g,80％)。LCMS(ESI):[M+H]+239.9.
步骤4:(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺
将6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(1.2g,0.005mol)、2-氯嘧啶-4-基胺(0.63g,0.0049mol)、Pd2dba3(229mg,0.25mmol)、Xantphos(578mg,1mmol)、Cs2CO3(3.25g,0.01mol)在二噁烷(40mL)中的混合物脱气并以氩气吹扫(x 3)。所得混合物在回流温度下加热12h。冷却的混合物以DCM稀释并通过Hyflo过滤。所得橙色溶液经真空浓缩并吸收至硅藻土上并通过氧化硅上的色谱纯化(PPC-ISCO梯度0-5％2M NH3/MeOH，在DCM中)。合适的级分经真空浓缩得到标题化合物，为白色固体(720mg,48％)。LCMS(ESI):[M+H]+288.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.8(1H,d,J＝0.9Hz),8.37(1H,br s),8.23(1H,d,J＝6.0Hz),8.14(1H,br s),8.01(1H,s),7.03(1H,br s),4.67(1H,七重峰,J＝6.6Hz),1.69(6H,d,J＝6.6Hz)
步骤5:(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(1,4,6,7-四氢吡唑并[4, 3-c]吡啶-5-基)嘧啶-4-基]胺
(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(80mg,0.28mmol)、4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(65mg,0.33mmol)、三乙基胺(0.18mL,1.32mmol)在异丙醇(0.5mL)中的混合物于150℃在微波辐射下加热30min。冷却的混合物以水稀释并且所得沉淀通过过滤收集。由此得到的固体从MeOH/EtOAc结晶得到标题化合物，为白色固体(42mg,41％)。LCMS(ESI):RT 2.05min,[M+H]+376.0,方法＝E.1H NMR(400MHz,DMSO):δ12.45(1H,s),9.79(1H,s),8.62(1H,d,J＝0.9Hz),8.41(1H,s),8.32(1H,s),7.96(1H,d,J＝5.7Hz),7.45(0.6H,s,互变异构体),7.25(0.4H,s,互变异构体),6.38(1H,d,J＝5.7Hz),4.87-4.54(3H,m),4.07(2H,t,J＝5.7Hz),2.77-2.66(2H,m),1.58(6H,d,J＝6.8Hz)。
实施例13:1-[4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]哌啶- 4-醇
(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例12,步骤4)(75mg,0.26mmol)、哌啶-4-醇(31mg,0.30mmol)、三乙基胺(0.07mL)在异丙醇(0.5mL)中的化合物于150℃在微波辐射下以高的吸光度加热30min。冷却的反应混合物以水稀释并搅拌10min。所得沉淀通过过滤收集。由此得到的固体从MeOH/EtOAc结晶得到标题化合物，为白色固体(70mg,76％)。LCMS(ESI):RT 1.95min,[M+H]+354.1,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.73(1H,d,J＝1.0Hz),8.34(1H,d,J＝1.0Hz),8.02(1H,d,J＝5.6Hz),7.91(1H,s),7.48(1H,s),6.03(1H,d,J＝5.7Hz),4.62-4.49(1H,m),4.47-4.37(2H,m),4.02-3.90(1H,m),3.38(2H,ddd,J＝13.4,9.7,3.3Hz),2.01-1.90(2H,m),1.65-1.50(9H,m).
实施例14:8-[4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]-1-氧 杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-酮
(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例12,步骤4)(80mg,0.268mmol)、1-氧杂-3,8-二氮杂螺[4.5]癸-2-酮(52mg,0.33mmol)、三乙基胺(0.13mL)在异丙醇(0.5mL)中的化合物于150℃在微波辐射下以高的吸光度加热45min。冷却的反应混合物以水稀释并且所得沉淀通过过滤收集得到标题化合物，为白色固体(61mg,54％)。LCMS(ESI):RT 1.95min,[M+H]+409.1,方法＝E.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.78(1H,s),8.61(1H,d,J＝1.0Hz),8.32(1H,s),8.29(1H,s),7.94(1H,d,J＝5.7Hz),7.49(1H,s),6.38(1H,d,J＝5.7Hz),4.67-4.53(1H,m),4.14-4.04(2H,m),3.63-3.52(2H,m),3.24(2H,s),1.85-1.66(4H,m),1.52(6H,d,J＝6.7Hz)。
实施例15:[2-(5,6-二氢-8H-咪唑并[1,2-a]哌嗪-7-基)嘧啶-4-基]-(1-异丙基- 1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺
(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例12,步骤4)(70mg,0.24mmol)、5,6,7,8-四氢咪唑并[1,2-a]哌嗪(44mg,0.36mmol)、三乙基胺(0.15mL)在异丙醇(0.5mL)中的混合物于150℃在微波辐射下以高的吸光度加热2.5h。冷却的反应混合物倾倒至SCX筒上；该筒以MeOH洗涤，接着将产物以2M NH3/MeOH洗脱。含有各级分的产物经真空浓缩并且所得残余物从MeOH/EtOAc结晶得到标题化合物，为白色固体(55mg,62％)。LCMS(ESI):RT 1.72min,[M+H]+376.0,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.75(1H,d,J＝1.0Hz),8.29(1H,s),8.06(1H,d,J＝5.7Hz),7.95(1H,s),7.66(1H,s),7.02(1H,d,J＝1.3Hz),6.86(1H,d,J＝1.3Hz),6.22(1H,d,J＝5.7Hz),5.08(2H,s),4.79-4.67(1H,m),4.30(2H,t,J＝5.4Hz),4.07(2H,t,J＝5.4Hz),1.70(6H,d,J＝6.7Hz).
实施例16:(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲磺酰基哌嗪-1- 基)嘧啶-4-基]-胺
(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例12,步骤4)(70mg,0.24mmol)、1-甲磺酰基哌嗪(72mg,0.36mmol)、三乙基胺(0.15mL)在异丙醇(0.5mL)中的混合物于150℃在微波辐射下加热30min。冷却的反应混合物以水稀释并且所得沉淀通过过滤收集得到标题化合物，为白色固体(75mg,75％)。LCMS(ESI):RT 2.17mi,n[M+H]+417.1,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.75(1H,d,J＝1.0Hz),8.11(1H,s),8.04(1H,d,J＝5.7Hz),7.93(1H,s),7.49(1H,s),6.20(1H,d,J＝5.0Hz),4.60-4.47(1H,m),4.00(4H,t,J＝5.0Hz),3.28(4H,t,J＝5.0Hz),2.77(3H,s),1.63(6H,d,J＝6.9Hz)。
实施例17:(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(3-甲氧基氮杂环丁烷- 1-基)嘧啶-4-基]胺
(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例12,步骤4)(37mg,0.13mmol)、3-甲氧基氮杂环丁烷盐酸盐(19mg,0.15mmol),Cs2CO3(83mg,0.61mmol)在异丙醇(0.5mL)中的混合物与60℃加热3h并且然后于室温加热18h。挥发物经真空除去并且所得残余物以DCM稀释。所得悬浮液经过滤并且滤液经真空浓缩。所得剩余物通过色谱法纯化(Si-PCC,梯度0-5％2M NH3/MeOH，在DCM中)并且然后从EtOAc/二乙醚结晶得到标题化合物(17mg,39％)。LCMS(ESI):RT 2.14min,[M+H]+340.1,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.72(1H,d,J＝1.0Hz),8.49(1H,s),8.00(1H,d,J＝5.7Hz),7.91(1H,s),7.64(1H,s),6.08(1H,d,J＝5.7Hz),4.63-4.49(1H,m),4.37-4.28(3H,m),4.09-3.99(2H,m),3.34(3H,s),1.63(6H,d,J＝6.3Hz).
实施例18:[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-[1-(四氢呋喃-3-基)-1H-咪唑 并[4,5-c]吡啶-6-基]胺
步骤1:(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)(四氢呋喃-3-基)胺
向2,4-二氯-5-硝基吡啶(386mg,2.0mmol)和三乙基胺(417μL,3.0mmol)在THF(6mL)中的溶液滴加四氢呋喃-3-基胺(208mg,2.4mmol)并将反应混合物搅拌1h。添加额外量的四氢呋喃-3-基胺(50mg)并将反应混合物搅拌1h。挥发物经真空除去并且所得残余物在水和EtOAc之间分配。有机相经干燥(MgSO4)并真空浓缩得到标题化合物，为黄色固体(490mg,定量)。LCMS(ESI):[M+H]+244.2.
步骤2:6-氯-N4-(四氢呋喃-3-基)-吡啶-3,4-二胺
向(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)(四氢呋喃-3-基)胺(485mg,1.99mmol)在AcOH(5mL)中的溶液分份添加Fe粉(440mg,8.0mmol)。反应混合物于室温搅拌18h并且然后以EtOAc稀释。所得悬浮液通过硅藻土过滤并且滤液经真空浓缩。所得残余物溶解于EtOAc并且该溶液通过添加Na2CO3(1M水溶液)变成碱性。所得混合物以EtOAc(x 3)萃取并且合并的有机层以盐水洗涤，干燥(MgSO4)并真空浓缩得到标题化合物(297mg,70％)。LCMS(ESI):[M+H]+214.2.
步骤3:6-氯-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶
6-氯-N4-(四氢呋喃-3-基)吡啶-3,4-二胺(290mg,1.35mmol)在原甲酸三甲基酯(10mL)和甲酸(1mL)中的化合物在氮气气氛下于90℃加热18h。冷却的反应混合物装载至SCX筒上，其以DCM和MeOH洗涤，并且产物以2M NH3/MeOH洗脱。将含有各级分的产物合并并且真空浓缩并且所得残余物通过色谱法纯化(Si-PCC,梯度0-6％MeOH/DCM)得到标题化合物，为粉色固体(200mg,67％)。LCMS(ESI):RT 2.00min[M+H]+224.2.
步骤4:[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-[1-(四氢呋喃-3-基)-1H-咪唑并 [4,5-c]吡啶-6-基]胺
6-氯-1-(四氢呋喃-3-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(91mg,0.41mmol)、2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺(84mg,0.41mmol)、Pd2dba3(19mg,0.02mmol)、Xphos(39mg,0.08mmol)、Cs2CO3(265mg,0.8mmol)在二噁烷(2mL)中的混合物以氩气吹扫(x 3)并于120℃在密封试管中加热12h。冷却的反应混合物以DCM稀释并通过硅藻土过滤。滤液经真空浓缩并且所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(PPC-ISCO,梯度0-5％2M NH3/MeOH，在DCM中)并且从EtOAc/二乙醚结晶得到标题化合物，为白色固体(60mg,38％)。LCMS(ESI):RT2.10min[M+H]+396.1,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.73(1H,d,J＝1.0Hz),8.25(1H,d,J＝1.0Hz),8.03(1H,d,J＝5.6Hz),7.96(1H,s),7.45(1H,s),6.08(1H,d,J＝5.6Hz),4.99-4.88(1H,m),4.33-4.21(3H,m),4.19-4.11(1H,m),4.07-3.93(2H,m),3.50-3.41(3H,m),3.38(3H,s),2.58-2.45(1H,m),2.29-2.19(1H,m),1.98-1.88(2H,m),1.65-1.55(2H,m)。
实施例19:[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-[1-(四氢呋喃-4-基)-1H-咪唑 并[4,5-c]吡啶-6-基]胺
步骤1:2-氯-5-硝基吡啶-4-基)(四氢呋喃-4-基)胺
向2,4-二氯-5-硝基吡啶(386mg,2.0mmol)和三乙基胺(417μL,3.0mmol)在THF(6mL)中的溶液经10min滴加四氢呋喃-4-基胺(242mg,2.4mmol)，并将反应混合物搅拌1h。添加额外量的四氢呋喃-4-基胺(50mg)并且持续搅拌1h。挥发物经真空除去并且所得残余物在水和EtOAc之间分配。有机相经干燥(MgSO4)并真空浓缩得到标题化合物，为黄色固体(514mg,定量)。LCMS(ESI):[M+H]+258.2.
步骤2:6-氯-N4-(四氢呋喃-4-基)吡啶-3,4-二胺
向2-氯-5-硝基吡啶-4-基)(四氢呋喃-4-基)胺(513mg,1.99mmol)在AcOH(5mL)中的溶液分份添加Fe粉(440mg,8.0mmol)。反应混合物于室温搅拌18h并且然后以EtOAc稀释。所得悬浮液通过硅藻土过滤并且滤液经真空浓缩。所得残余物溶解于EtOAc并且通过添加NaHCO3(饱和水溶液)变成碱性。所得混合物以EtOAc(x 3)萃取并且合并的有机层以盐水洗涤，干燥(MgSO4)并真空浓缩得到标题化合物，为红色油状物(453mg,80％)。LCMS(ESI):[M+H]+228.2.
步骤3:6-氯-1-(四氢呋喃-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-氯-N4-(四氢呋喃-4-基)吡啶-3,4-二胺(355mg,1.55mmol)在原甲酸三甲基酯(10mL)和甲酸(5滴)中的混合物于80℃加热18h。冷却的反应混合物装载至SCX筒上，其以MeOH洗涤并且产物以2M NH3/MeOH稀释。将含有各级分的产物合并且真空浓缩并且所得残余物通过色谱法纯化(Si-PCC,梯度0-5％MeOH/DCM)得到标题化合物，为粉色固体(400mg,72％)。LCMS(ESI):[M+H]+238.2.
步骤4:[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-[1-(四氢呋喃-4-基)-1H-咪唑并 [4,5-c]吡啶-6-基]胺
6-氯-1-(四氢呋喃-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(97mg,0.41mmol)、2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(84mg,0.41mmol)、Pd2dba3(19mg,0.02mmol)、XPhos(39mg,0.08mmol)、Cs2CO3(265mg,0.8mmol)在二噁烷(2mL)中的混合物以氩气吹扫(x3)并于120℃在密封试管中加热18h。冷却的反应混合物以DCM稀释并通过硅藻土过滤。滤液经真空浓缩并且所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(PPC-ISCO,梯度0-5％2M NH3/MeOH，在DCM中)并从二乙醚结晶得到标题化合物，为乳膏状固体(130mg,78％)。LCMS(ESI):RT 2.16min,[M+H]+410.2,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.73(1H,d,J＝1.0Hz),8.35(1H,d,J＝1.0Hz),8.02(1H,d,J＝5.6Hz),7.91(1H,s),7.46(1H,s),6.01(1H,d,J＝5.6Hz),4.41-4.25(3H,m),4.18(2H,dd,J＝11.9,4.3Hz),3.60-3.43(5H,m),3.37(3H,s),2.28-2.16(2H,m),2.13-2.05(2H,m),1.99-1.89(2H,m),1.66-1.56(2H,m).
实施例20:(1-乙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧 啶-4-基]胺
步骤1:6-氯-1-乙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-氯-N4-乙基吡啶-3,4-二胺(使用类似于实施例7,步骤1-2描述的方法制备)(386mg,1.78mmol)在原甲酸三甲基酯(10mL)和甲酸(5滴)中的混合物于120℃加热18h。冷却的反应混合物装载至SCX筒上，其以MeOH洗涤，同时产物以2M NH3/MeOH洗脱。含有各级分的产物经合并并真空浓缩。所得残余物通过色谱法纯化(Si-PCC,梯度0-100％EtOAc/DCM)并且然后从环己烷/二乙醚结晶得到标题化合物，为白色固体(160mg,50％)。LCMS(ESI):[M+H]+182.1.
步骤2:(1-乙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶- 4-基]胺
6-氯-1-乙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(80mg,0.43mmol)、2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(91mg,0.43mmol)、Pd2dba3(20mg,0.02mmol)、XPhos(42mg,0.09mmol)、Cs2CO3(285mg,0.9mmol)在二噁烷(2mL)中的混合物以氩气吹扫(x3)并于130℃在密封试管中在微波辐射下加热45min并且然后于120℃加热36h。冷却的反应混合物以DCM稀释并通过硅藻土过滤。滤液经真空浓缩且所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(PPC-ISCO,梯度0-5％2M NH3/MeOH，在DCM中)并从EtOAc/二乙醚结晶得到标题化合物(30mg,20％)。LCMS(ESI):RT 2.12min,[M+H]+354.2,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.73(1H,d,J＝1.0Hz),8.33(1H,s),8.01(1H,d,J＝5.6Hz),7.83(1H,s),7.64(1H,s),6.02(1H,d,J＝5.7Hz),4.33-4.24(2H,m),4.19-4.12(2H,m),3.50-3.40(3H,m),3.37(3H,s),1.98-1.89(2H,m),1.67-1.55(2H,m),1.53(3H,t,J＝7.6Hz).
实施例21:[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-[1-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)- 1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺
步骤1:6-氯-1-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-氯-N4-甲基吡啶-3,4-二胺(使用类似于实施例7,步骤1-2描述的方法制备)(92mg,0.58mmol)和1H-吡唑-4-甲酸(67mg,0.58mmol)在多磷酸(～0.5mL)中的混合物以氩气吹扫并在密封小瓶中于150℃伴随搅拌加热18h。冷却的混合物以水稀释(1mL)并通过添加NaOH(50％水溶液)变成pH 7。沉淀出固体，其通过过滤分离。该固体悬浮于MeOH并超声15min。MeOH经真空除去。重复该方法(x2)并且并且所得固体经真空干燥得到灰色固体(130mg,定量)。LCMS(ESI):[M+H]+234/236(35Cl/37Cl).
步骤2:6-氯-1-甲基-2-[1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]-1H- 咪唑并[4,5-c]吡啶
向6-氯-1-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(130mg,0.58mmol)在THF(4mL)中的悬浮液在氮气气氛下添加NaH(60％在矿物油中的悬浮液，27mg,0.696mmol)。添加DMF(0.5mL)以促进溶解。搅拌15min后，添加2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(140mg,0.84mmol)在THF(1mL)中的溶液并持续搅拌30min。反应混合物通过添加水而淬灭并且然后挥发物经真空除去。所得残余物在水和EtOAc之间分配，有机相经干燥(MgSO4)并真空浓缩。所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(PPC-ISCO,梯度0-100％EtOAc/环己烷)得到标题化合物，为白色固体(85mg,40％)。LCMS(ESI):[M+H]+364.2.
步骤3:[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-{1-甲基-2-[1-(2-三甲基甲硅烷基 乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基}胺
6-氯-1-甲基-2-[1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(45mg,0.2mmol)、2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(79mg,0.2mmol)、Pd2dba3(9mg,0.01mmol)、XPhos(19mg,0.04mmol)、Cs2CO3(130mg,0.4mmol)在二噁烷(2mL)中的混合物以氩气吹扫(x3)并于120℃在密封试管中加热18h。冷却的反应混合物以DCM稀释并通过硅藻土过滤。滤液经真空浓缩并且所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(PPC-ISCO,梯度0-5％2M NH3/MeOH，在DCM中)得到标题化合物，为白色固体(60mg,56％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.70(1H,d,J＝1.0Hz),8.28(1H,s),8.19(1H,s),8.08-8.03(2H,m),7.46(1H,br s),6.10(1H,d,J＝5.7Hz),5.54(2H,s),4.38-4.28(2H,m),3.90(3H,s),3.67-3.61(2H,m),3.57-3.47(3H,m),3.42(3H,s),2.3-1.94(2H,m),1.72-1.55(2H,m),0.98-0.96(2H,m),0.00(9H,s).
步骤4:[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-[1-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1H-咪 唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺
[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-{1-甲基-2-[1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基}胺(55mg,0.1mmol)在MeOH(2mL)和HCl(6M水溶液,1mL)中的混合物于70℃加热18h。将冷却的反应混合物倾倒至SCX筒上，以MeOH洗涤，并且产物以2M NH3/MeOH洗脱。含有各级分的产物经合并并且真空浓缩得到标题化合物，为白色固体(25mg,62％)。LCMS(ESI):RT 2.03min,[M+H]+405.9,方法＝E.1H NMR(400MHz,DMSO):δ13.38(1H,s),9.73(1H,s),8.53(1H,d,J＝1.0Hz),8.43(1H,s),8.25(1H,s),8.07(1H,s),7.92(1H,d,J＝5.7Hz),6.36(1H,d,J＝5.7Hz),4.24-4.14(2H,m),3.82(3H,s),3.46-3.28(3H,m),3.25(3H,s),1.92-1.82(2H,m),1.45-1.34(2H,m).
实施例22:[2-(2-氟苄基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]-[2-(4-甲氧基 哌啶-1-基)嘧啶-4-基]胺
步骤1:N-(4-氨基-6-溴吡啶-3-基)-2-(2-氟苯基)-N-甲基乙酰胺
向6-溴-N3-甲基吡啶-3,4-二胺(使用类似于实施例12,步骤1-2描述的方法制备)(136mg,0.67mmol)、(2-氟苯基)乙酸(104mg,0.67mmol)和HOAT(91mg,0.67mmol)在DCM(3mL)中的搅拌悬浮液中添加EDCI(193mg,1.01mmol)。所得溶液搅拌1h并且然后添加另一等份的EDCI(100mg)。持续搅拌18h。混合物以DCM稀释和水并且将DCM萃取物合并，干燥(MgSO4)并蒸发。所得粗产物不经纯化用于后续步骤中。LCMS(ESI):[M+H]+338.0.
步骤2:6-溴-2-(2-氟苄基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶
N-(4-氨基-6-溴吡啶-3-基)-2-(2-氟苯基)-N-甲基乙酰胺(0.67mmol)在AcOH(4mL)中的混合物于90℃加热18h。挥发物经真空除去，与甲苯共沸。所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(PPC-ISCO,梯度0-40％EtOAc/环己烷)得到标题化合物(66mg,30％，经两步)。LCMS(ESI):[M+H]+320.1.
步骤3:[2-(2-氟苄基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]-[2-(4-甲氧基哌 啶-1-基)嘧啶-4-基]胺
6-溴-2-(2-氟苄基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶(65mg,0.2mmol)、2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺(42mg,0.2mmol)、Pd2dba3(11mg,0.01mmol)、XPhos(11mg,0.02mmol)、Cs2CO3(203mg,0.62mmol)在二噁烷(2mL)中的混合物以氩气吹扫(x 3)并于90℃在密封试管中加热18h。冷却的反应混合物以DCM稀释并通过硅藻土过滤。滤液经真空浓缩并且所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(PPC-ISCO,梯度0-8％MeOH/DCM)并从EtOAc/环己烷结晶。收集固体得到标题化合物，为橙色固体(50mg,36％)。LCMS(ESI):RT 2.86min,[M+H]+448.0,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.38(1H,d,J＝1.0Hz),8.09(1H,s),8.04(1H,d,J＝5.7Hz),7.29-7.16(3H,m),7.13-7.05(2H,m),6.27(1H,d,J＝5.7Hz),4.40-4.31(4H,m),3.72(3H,s),3.50-3.34(6H,m),2.02-1.92(2H,m),1.64-1.54(2H,m)。
实施例23:[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-[2-(1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并 [4,5-c]吡啶-6-基]胺
步骤1:6-溴-2-(1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-溴吡啶-3,4-二胺(100mg,0.53mmol)和1H-吡唑-4-甲酸(60mg,0.53mmol)在多磷酸(1g)中的混合物在密封小瓶中200℃加热18h。反应混合物以水稀释并通过添加NaOH(50％水溶液)变成碱性并形成白色沉淀。由此形成的固体通过过滤收集并以水洗涤得到标题化合物(150mg,定量)。LCMS(ESI):[M+H]+264.1.
步骤2:6-溴-3-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-2-[1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧 基甲基)-1H-吡唑-4-基]-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶
向6-溴-2-(1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶(150mg,0.53mmol)在THF(2mL)中的悬浮液在氮气气氛下添加NaH(60％在矿物油中的分散体，63mg,1.6mmol)。DMF(2mL)添加以促进溶解。在停止冒泡后，添加2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(265mg,1.6mmol)并持续搅拌2h。反应混合物在水和EtOAc之间分配。水相以EtOAc萃取(x3)并且合并的有机相经干燥(MgSO4)并真空浓缩。所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(PPC-ISCO,梯度0-40％EtOAc/环己烷)得到标题化合物(2个区位异构体的混合物)，为黄色油状物，其于静置时固化(224mg 81％)。LCMS(ESI):[M+H]+524.2.
步骤3:[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-{3-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲 基)-2-[1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6- 基}胺
6-溴-3-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-2-[1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶(120mg,0.23mmol)、2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(53mg,0.25mmol)、Pd2dba3(10mg,0.01mmol)、XPhos(22mg,0.046mmol)、Cs2CO3(273mg,0.84mmol)在二噁烷(2mL)中的混合物以氩气吹扫(x 3)并于120℃加热18h。冷却的反应混合物以DCM稀释并通过硅藻土过滤。滤液经真空浓缩并且所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(PPC-ISCO,梯度0-10％MeOH/DCM，接着0-15％MeOH/EtOAc并接着0-10％2M NH3/MeOH，在DCM中)得到标题化合物(120mg,81％)。LCMS(ESI):[M+H]+652.4.
步骤4:[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-[2-(1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-基]胺
[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-{3-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-2-[1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基}胺(120mg,0.18mmol)悬浮于MeOH(5mL)和HCl(6M水溶液,0.5mL)中。反应混合物于RT搅拌3h并且然后于50℃再搅拌3h。静置时沉淀出固体。由此得到的悬浮液通过使用加热和超声溶解于MeOH中并且所得溶液装载至SCX筒上。The筒以MeOH洗涤，同时产物以2M NH3/MeOH洗脱。含有各级分的产物经合并以及真空浓缩并且所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(PPC-ISCO,梯度0-10％2M NH3/MeOH，在DCM中)得到标题化合物，为白色固体(55mg,76％)。LCMS(ESI):RT 2.00min,[M+H]+391.9,方法＝E.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.29(1H,s),12.67(1H,s),9.61(1H,s),8.51(1H,s),8.43-8.09(2H,br s),8.03(1H,s),7.93(1H,d,J＝5.9Hz),6.58-6.50(1H,m),4.25-4.14(2H,m),3.48-3.30(3H,m),3.28(3H,s),1.93-1.84(2H,m),1.47-1.35(2H,m).
实施例24:(1-环戊基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基) 嘧啶-4-基]胺
步骤1:6-氯-1-环戊基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
6-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(100mg,0.65mmol)、碘代环戊烷(254mg,1.3mmol)和Cs2CO3(422mg,1.3mmol)在DMF(1mL)中的混合物于80℃加热18h。冷却的反应混合物在水和EtOAc之间分配。水相以EtOAc萃取并且合并的有机相经干燥(MgSO4)并真空浓缩。所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(PPC-ISCO,梯度0-50％EtOAc/环己烷)得到标题化合物，为无色油状物(80mg,56％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.64(1H,s),7.31(1H,s),7.21(1H,d,J＝3.3Hz),6.57(1H,d,J＝3.2Hz),4.76-4.65(1H,m),2.30-2.17(2H,m),1.97-1.72(6H,m).
步骤2:(1-环戊基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧 啶-4-基]胺
6-氯-1-环戊基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(76mg,0.35mmol)、2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(72mg,0.35mmol)、Pd2dba3(15mg,0.016mmol)、XPhos(33mg,0.027mmol)、Cs2CO3(225mg,0.69mmol)在二噁烷(3.5mL)中的混合物以氩气吹扫(x 3)并于120℃在密封试管中在微波辐射中加热30min。冷却的反应混合物以DCM稀释并通过硅藻土过滤。滤液经真空浓缩并且所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(PPC-ISCO,梯度0-10％MeOH/EtOAc，接着0-4％2M NH3/MeOH，在DCM中)并且然后通过反相HPLC纯化得到标题化合物(22mg,16％)。LCMS(ESI):RT 2.83min,[M+H]+392.9,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.53(1H,s),8.20(1H,s),7.99(1H,d,J＝5.7Hz),7.47(1H,s),7.11(1H,d,J＝3.4Hz),6.49(1H,d,J＝3.4Hz),6.03(1H,d,J＝5.7Hz),4.72-4.63(1H,m),4.37-4.27(2H,m),3.49-3.39(3H,m),3.38(3H,s),2.24-2.11(2H,m),1.98-1.70(8H,m),1.66-1.54(2H,m).
实施例25:[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-[3-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)- 3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺二盐酸盐
步骤1:6-溴-3-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-溴-N3-甲基吡啶-3,4-二胺(54mg,0.27mmol)、1H-吡唑-4-甲酸(30mg,0.27mmol)和多磷酸(0.5mL)的混合物于200℃在密封试管中加热5h。冷却后，反应混合物以水稀释并通过添加50％NaOH水溶液变成pH 7。形成白色的悬浮液并通过过滤收集固体得到标题化合物(69mg,93％)。LCMS(ESI):[M+H]+278.2.
步骤2:6-溴-3-甲基-2-[1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]-3H- 咪唑并[4,5-c]吡啶
向6-溴-3-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶(67mg,0.24mmol)在DMF(1mL)中的悬浮液在氮气气氛下添加NaH(60％在矿物油中的分散体，20mg,0.48mmol)。搅拌10min后，添加2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(80mg,0.48mmol)并且立即形成沉淀。冷却的反应混合物在水和DCM之间分配。有机相经干燥(PTFE frit)并真空浓缩。所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(PPC-ISCO,梯度0-100％EtOAc/环己烷)得到标题化合物，为固体(45mg,48％)。LCMS(ESI):[M+H]+408.1.
步骤3:[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-{3-甲基-2-[1-(2-三甲基甲硅烷基 乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基}胺
6-溴-3-甲基-2-[1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶(45mg,0.11mmol)、2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(24mg,0.12mmol)、Pd2dba3(5mg,5mol％)、XPhos(10mg,20mol％)、Cs2CO3(72mg,0.22mmol)在二噁烷(1mL)中的混合物以氩气吹扫(x 3)并于120℃在密封试管中加热18h。冷却的反应混合物以DCM稀释并通过硅藻土过滤。滤液经真空浓缩并且所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(PPC-ISCO,梯度0-5％MeOH/DCM)得到标题化合物，为无色玻璃状物(31mg,53％)。LCMS(ESI):[M+H]+536.0.
步骤4:[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-[3-甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-3H-咪 唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺二盐酸盐
[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-{3-甲基-2-[1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基}胺(31mg,0.06mmol)悬浮于MeOH(1mL)并加热得到溶液。添加HCl(6M水溶液,0.5mL)并将反应混合物搅拌2h。沉淀出固体并通过过滤收集，然后以水洗涤并真空干燥得到标题化合物，为白色固体(22mg,80％)。LCMS(ESI):RT 2.01min,[M]+405.9,方法＝E.1H NMR(400MHz,DMSO-d6+TFA):δ9.11(1H,s),8.73(2H,s),8.41(1H,br s),7.94(1H,d,J＝7.0Hz),6.61(1H,br s),4.14(3H,s),3.98-3.87(2H,m),3.67-3.55(2H,m),3.2-3.45(1H,m),3.25(3H,s),1.98-1.88(2H,m),1.68-1.53(2H,m).
实施例26:(1-环戊基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基-哌啶-1- 基)-嘧啶-4-基]胺
步骤1:(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)环戊基胺
(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)环戊基胺(410mg,85％)从2,4-二氯-5-硝基吡啶(386mg,2.0mmol)和环戊基胺(170mg,2.0mmol)根据对于实施例18步骤1描述的类似方法制备。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.01(1H,s),8.17(1H,s),6.76(1H,s),3.99-3.87(1H,m),2.20-2.06(2H,m),1.88-1.58(6H,m).
步骤2:6-氯-N4-环戊基吡啶-3,4-二胺
向(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)环戊基胺(410mg,1.7mmol)在EtOH(3mL)中的溶液添加H2O(6mL)、NH4Cl(363mg,6.8mmol)和Fe粉(473mg,8.5mmol)。反应混合物于78℃搅拌20h并且然后以DCM稀释。所得悬浮液通过硅藻土过滤并且滤液通过添加NaHCO3水溶液而变成碱性。有机层以盐水洗涤干燥(MgSO4)并真空浓缩得到标题化合物(290mg,80％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.63(1H,s),6.47(1H,s),4.26(1H,s),3.83-3.71(1H,m),2.97(2H,s),2.13-1.99(2H,m),1.81-1.60(4H,m),1.59-1.45(2H,m).
步骤3:6-氯-1-环戊基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-氯-1-环戊基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(70mg,61％)从6-氯-N4-环戊基吡啶-3,4-二胺(110mg,0.51mmol)根据对于实施例19步骤3描述的类似方法制备。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.85(1H,d,J＝0.9Hz),8.01(1H,s),7.40(1H,d,J＝0.9Hz),4.74-4.63(1H,m),2.38-2.25(2H,m),2.08-1.79(6H,m).
步骤4:(1-环戊基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)-嘧 啶-4-基]胺
(1-环戊基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)-嘧啶-4-基]胺(30mg,15％)从6-氯-1-环戊基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(110mg,0.496mmol)和2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-胺(实施例3步骤2,103mg,0.496mmol)根据对于实施例22步骤4描述的类似方法制备。LCMS(ESI):RT 2.59min,[M+H]+394.0,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.72(1H,d,J＝1.0Hz),8.27(1H,s),8.02(1H,d,J＝5.6Hz),7.89(1H,s),7.47(1H,s),6.03(1H,d,J＝5.7Hz),4.69-4.58(1H,m),4.34-4.24(2H,m),3.50-3.39(3H,m),3.37(3H,s),2.30-2.20(2H,m),2.09-1.99(2H,m),1.97-1.76(6H,m),1.66-1.54(2H,m)。
实施例A1:6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(912mg,95％)从6-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(750mg,4.9mmol)和2-溴丙烷(0.92mL,9.8mmol)根据对于实施例24步骤1描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+195.0.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.65(1H,d,J＝0.9Hz),7.30(1H,s),7.24(1H,d,J＝3.5Hz),6.59(1H,d,J＝3.5Hz),4.66-4.51(1H,m),1.54(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例A2:2-[(4-氨基嘧啶-2-基)甲基氨基]乙醇
2-氯嘧啶-4-基胺(2.08g,16mmol)和2-甲基氨基乙醇(1.31mL,16mmol)在二噁烷(16mL)中的混合物于150℃在微波辐射下加热1h。反应混合物溶解于2M NH3/MeOH中并添加DCM。固体经过滤并且滤液经真空浓缩。所得残余物通过色谱法纯化(氧化硅，梯度5-10％2MNH3/MeOH，在DCM中)得到标题化合物，为白色固体(2.1g,78％)。LCMS(ESI):[M+H]+169.0.1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.87(1H,d,J＝5.7Hz),5.76(1H,d,J＝5.70Hz),5.14(1H,br s),4.66(2H,s),3.88-3.82(2H,m),3.74-3.68(2H,m),3.16(3H,s).
实施例A3:6-氯-1-苯基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
2,2'-联吡啶(128mg,0.82mmol)和Cu(OAc)2(148mg,0.82mmol)在二氯乙烷(4mL)中的混合物于70℃在氮气气氛下加热5min。添加6-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(250mg,1.64mmol)、苯基硼酸(400mg,3.28mmol)、Na2CO3(348mg,3.28mmol)and DCE(4mL)并且反应混合物于70℃加热18h。添加额外量的2,2'-联吡啶(64mg)、Cu(OAc)2(74mg)和苯基硼酸(200mg)并于70℃持续搅拌18h。反应混合物以EtOAc稀释并过滤。滤液以盐水洗涤并且水相进一步以EtOAc(x 2)萃取。合并的有机层经干燥(Na2SO4)并真空浓缩。所得残余物通过色谱法纯化(Si-PCC,梯度5-90％EtOAc/环己烷)得到标题化合物，为白色固体(84mg,22％)。LCMS(ESI):[M+H]+228.9.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.75(1H,d,J＝0.9Hz),7.62-7.54(2H,m),7.50-7.42(4H,m),7.38(1H,d,J＝3.4Hz),6.77(1H,dd,J＝3.4,0.9Hz).
实施例A4:1-(4-氨基嘧啶-2-基)哌啶-4-甲酰胺
2-氯嘧啶-4-基胺(500mg,3.9mmol)、哌啶-4-甲酰胺(495mg,3.9mmol)和DIPEA(0.67mL,3.9mmol)在二噁烷(3.9mL)中的混合物于密封试管中于100℃加热18h。反应混合物以MeOH稀释并且然后浓缩。所得剩余物通过色谱法纯化(Si-PCC,梯度5-10％2M NH3/MeOH，在DCM中)得到标题化合物，为白色固体(327mg,38％)。LCMS(ESI):[M+H]+222.0.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.73(1H,d,J＝5.6Hz),7.25(1H,s),6.74(1H,s),6.34(2H,s),5.70(1H,d,J＝5.6Hz),4.60(2H,d,J＝13.1Hz),2.73(2H,t,J＝12.5Hz),2.36-2.25(1H,m),1.68(2H,d,J＝12.9Hz),1.46-1.34(2H,m).
实施例A5:4-(4-氨基嘧啶-2-基)哌嗪-2-酮
4-(4-氨基嘧啶-2-基)哌嗪-2-酮(300mg,40％)从2-氯嘧啶-4-基胺(500mg,3.9mmol)和哌嗪-2-酮(386mg,3.9mmol)根据对于实施例A4描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+194.0.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.98(1H,s),7.78(1H,d,J＝5.7Hz),6.50(2H,s),5.79(1H,d,J＝5.7Hz),4.10(2H,s),3.81(2H,t,J＝5.4Hz),3.25-3.17(2H,m)。
实施例A6:(4-吡唑-1-基-哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺
(4-吡唑-1-基-哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺(259mg,55％)从2-氯嘧啶-4-基胺(251mg,1.9mmol)和4-吡唑-1-基哌啶二盐酸盐(434mg,1.9mmol)根据对于实施例A4描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+245.0.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.78-7.70(2H,m),7.41(1H,d,J＝1.7Hz),6.40(2H,s),6.21(1H,t,J＝2.0Hz),5.72(1H,d,J＝5.7Hz),4.74-4.66(2H,m),4.46-4.35(1H,m),2.94-2.83(2H,m),2.01-1.93(2H,m),1.83-1.70(2H,m).
实施例A7:2-(4-咪唑-1-基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺
2-(4-咪唑-1-基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺(232mg,68％)从2-氯嘧啶-4-基胺(182mg,1.4mmol)和4-咪唑-1-基哌啶二盐酸盐(314mg,1.4mmol)根据对于实施例A4描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+245.0.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.98(1H,s),7.75(1H,d,J＝5.8Hz),7.39(1H,s),7.02(1H,s),6.57(2H,s),5.77(1H,d,J＝5.8Hz),4.80-4.71(2H,m),4.42-4.30(1H,m),2.93-2.80(2H,m),2.05-1.94(2H,m),1.83-1.68(2H,m).
实施例A8:2-(4-[1,2,4]三唑-1-基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺
2-(4-[1,2,4]三唑-1-基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺(235mg,48％)从2-氯嘧啶-4-基胺(258mg,2.0mmol)和4-[1,2,4]三唑-1-基哌啶二盐酸盐(449mg,2.0mmol)根据对于实施例A4描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+246.0.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(1H,s),7.95(1H,s),7.76(1H,d,J＝5.7Hz),6.42(2H,s),5.74(1H,d,J＝5.7Hz),4.76-4.66(2H,m),4.60-4.50(1H,m),2.98-2.87(2H,m),2.08-1.99(2H,m),1.86-1.71(2H,m).
实施例A9:2-(1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)嘧啶-4-基胺
2-(1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基)嘧啶-4-基胺(352mg,65％)从2-氯嘧啶-4-基胺(300mg,2.3mmol)和1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷盐酸盐(419mg,2.36mmol)根据对于实施例A4描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+235.1.
实施例A10:1-[4-(4-氨基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基]乙酮
1-[4-(4-氨基嘧啶-2-基)哌嗪-1-基]乙酮(421mg,83％)从2-氯嘧啶-4-基胺(300mg,2.3mmol)和1-哌嗪-1-基乙酮(300mg,2.35mmol)根据对于实施例A4描述的类似方法制备。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.75(1H,d,J＝5.7Hz),6.47(2H,s),5.76(1H,d,J＝5.7Hz),3.71-3.54(4H,m),3.49-3.39(4H,m),2.03(3H,s).
实施例A11:2-[1-(4-氨基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]丙-2-醇
2-[1-(4-氨基嘧啶-2-基)哌啶-4-基]丙-2-醇(定量产率)从2-氯嘧啶-4-基胺(300mg,2.30mmol)和2-哌啶-4-基丙-2-醇(329mg,2.30mmol)根据对于实施例A4描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+237.2.
实施例A12:2-(4-甲氧基-4-甲基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺
2-(4-甲氧基-4-甲基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺(20mg,17％)从2-氯嘧啶-4-基胺(70mg,0.54mmol)和4-甲氧基-4-甲基哌啶(70mg,0.54mmol)根据对于实施例A4描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+223.1.
实施例A13:1-(4-氨基嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-甲腈
1-(4-氨基嘧啶-2-基)氮杂环丁烷-3-甲腈(293mg,53％)从2-氯嘧啶-4-基胺(403mg,3.13mmol)和氮杂环丁烷-3-甲腈盐酸盐(371mg,3.13mmol)根据对于实施例A4描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+176.2.
实施例A14:6-溴-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
步骤1:(2-溴-5-硝基吡啶-4-基)-(2,2,2-三氟乙基)胺
(2-溴-5-硝基吡啶-4-基)-(2,2,2-三氟乙基)胺(844mg,79％)从2,4-二溴-5-硝基吡啶(1.0g,3.56mmol)和2,2,2-三氟乙基胺(709mg,7.12mmol)根据对于实施例3描述的类似方法制备。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.04(1H,s),8.42(1H,s),7.04(1H,s),4.07-3.89(2H,m).
步骤2:6-溴-N4-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-3,4-二胺
6-溴-N4-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-3,4-二胺(715mg,94％)从(2-溴-5-硝基吡啶-4-基)-(2,2,2-三氟乙基)胺(844mg,2.81mmol)根据对于实施例12步骤2描述的类似方法制备.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.46(1H,s),6.77(1H,s),6.17(1H,t,J＝6.7Hz),4.85(2H,s),4.19-3.99(2H,m)。
步骤3:6-溴-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-溴-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(400mg,54％)从6-溴-N4-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-3,4-二胺(715mg,2.65mmol)根据对于实施例3描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+280.0.
实施例A15:6-氯-1-环丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
步骤1:(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)环丙基胺
(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)环丙基胺(428mg,97％)从2,4-二氯-5-硝基吡啶(400mg,2.07mmol)和环丙基胺(158μL,2.28mmol)根据对于实施例3步骤1描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+214.1.
步骤2:6-氯-N4-环丙基吡啶-3,4-二胺
6-氯-N4-环丙基吡啶-3,4-二胺(360mg,98％)从(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)环丙基胺(428mg,2.0mmol)根据对于实施例26步骤2描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+184.0.
步骤3:6-氯-1-环丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-氯-1-环丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(287mg,76％)从6-氯-N4-环丙基吡啶-3,4-二胺(360mg,1.96mmol)根据对于实施例20步骤1描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+194.0.
实施例A16:6-氯-1-环丁基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
步骤1:(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)环丁基胺
(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)环丁基胺(471mg,定量产率)从2,4-二氯-5-硝基吡啶(400mg,2.07mmol)和环丁基胺(195μL,2.28mmol)根据对于实施例3描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+228.1.
步骤2:6-氯-N4-环丁基吡啶-3,4-二胺
6-氯-N4-环丁基吡啶-3,4-二胺(409mg,定量产率)从(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)环丁基胺(471mg,2.07mmol)根据对于实施例26步骤2描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+198.2.
步骤3:6-氯-1-环丁基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-氯-1-环丁基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(300mg,70％)从6-氯-N4-环丁基吡啶-3,4-二胺(409mg,2.07mmol)根据对于实施例20步骤1描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+208.0.
实施例A17:6-氯-1-环己基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
步骤1:(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)环己基胺
(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)环己基胺(529mg,定量产率)从2,4-二氯-5-硝基吡啶(400mg,2.07mmol)和环己基胺(261μL,2.28mmol)根据对于实施例3描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+256.0.
步骤2:6-氯-N4-环己基吡啶-3,4-二胺
6-氯-N4-环己基吡啶-3,4-二胺(393mg,84％)从(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)环己基胺(529mg,2.07mmol)根据对于实施例26步骤2描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+226.2.
步骤3:6-氯-1-环己基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-氯-1-环己基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(320mg,78％)从6-氯-N4-环己基吡啶-3,4-二胺(393mg,1.74mmol)根据对于实施例20步骤1描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+236.1.
实施例A18:1-仲丁基-6-氯-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
步骤1:仲丁基-(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)胺
仲丁基-(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)胺(475mg,定量产率)从2,4-二氯-5-硝基吡啶(400mg,2.07mmol)和仲丁基胺(230μL,2.28mmol)根据对于实施例3描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+230.1.
步骤2:N4-仲丁基-6-氯吡啶-3,4-二胺
N4-仲丁基-6-氯吡啶-3,4-二胺(390mg,94％)从仲丁基-(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)胺(475mg,2.07mmol)根据对于实施例26步骤2描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+200.2.
步骤3:1-仲丁基-6-氯-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
1-仲丁基-6-氯-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(287mg,70％)从N4-仲丁基-6-氯吡啶-3,4-二胺(390mg,1.95mmol)根据对于实施例20步骤1描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+210.0.
实施例A19:6-氯-1-(2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
步骤1:(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)-(2,2,2-三氟-1-甲基乙基)胺
(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)-(2,2,2-三氟-1-甲基乙基)胺(338mg,62％)从2,4-二氯-5-硝基吡啶(386mg,2.0mmol)和2,2,2-三氟-1-甲基乙基胺(404mg,4.0mmol)根据对于实施例18步骤1描述的类似方法制备。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.10(1H,s),8.26(1H,d,J＝8.9Hz),6.86(1H,s),4.32-4.18(1H,m),1.59(3H,d,J＝6.8Hz).
步骤2:6-氯-N4-(2,2,2-三氟-1-甲基乙基)吡啶-3,4-二胺
6-氯-N4-(2,2,2-三氟-1-甲基乙基)吡啶-3,4-二胺(250mg,85％)从(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)-(2,2,2-三氟-1-甲基乙基)胺(330mg,1.22mmol)根据对于实施例18步骤2描述的类似方法制备。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.75(1H,s),6.56(1H,s),4.48(1H,d,J＝8.7Hz),4.12-3.97(1H,m),3.03(2H,s),1.37(3H,d,J＝6.9Hz).
步骤3:6-氯-1-(2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-氯-1-(2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(240mg,92％)从6-氯-N4-(2,2,2-三氟-1-甲基乙基)吡啶-3,4-二胺(250mg,1.04mmol)根据对于实施例18步骤3描述的类似方法制备。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.90(1H,d,J＝0.9Hz),8.07(1H,s),7.42(1H,s),4.89-4.90(1H,m),1.92(3H,d,J＝7.3Hz).
实施例A20:1-叔丁基-6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
步骤1:叔丁基-(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)胺
叔丁基-(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)胺(592mg,定量)从2,4-二氯-5-硝基吡啶(500mg,2.59mmol)和叔丁基胺(378mg,5.18mmol)根据对于实施例18步骤1描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+230.0.
步骤2:N4-叔丁基-6-氯吡啶-3,4-二胺
N4-叔丁基-6-氯吡啶-3,4-二胺(521mg,定量)从叔丁基-(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)胺(590mg,2.58mmol)根据对于实施例18步骤2描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+200.0.
步骤3:1-叔丁基-6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
1-叔丁基-6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(180mg,64％)从N4-叔丁基-6-氯吡啶-3,4-二胺(250mg,1.25mmol)根据对于实施例5描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+223.9.
实施例A21:6-氯-1-(2-甲氧基-1,1-二甲基乙基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡 啶
步骤1:(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)-(2-甲氧基-1,1-二甲基乙基)胺
(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)-(2-甲氧基-1,1-二甲基乙基)胺(676mg,定量)从2,4-二氯-5-硝基吡啶(500mg,2.6mmol)和2-甲氧基-1,1-二甲基乙基胺(963mg,5.2mmol)根据对于实施例18步骤1描述的类似方法制备。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.00(1H,s),8.77(1H,s),6.98(1H,s),3.46(3H,s),3.40(2H,s),1.48(6H,s).
步骤2:6-氯-N4-(2-甲氧基-1,1-二甲基乙基)吡啶-3,4-二胺
6-氯-N4-(2-甲氧基-1,1-二甲基乙基)吡啶-3,4-二胺(617mg,97％)从(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)-(2-甲氧基-1,1-二甲基乙基)胺(676mg,2.76mmol)根据对于实施例18步骤2描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+230.1.
步骤3:6-氯-1-(2-甲氧基-1,1-二甲基乙基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-氯-1-(2-甲氧基-1,1-二甲基乙基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(214mg,71％)从6-氯-N4-(2-甲氧基-1,1-二甲基乙基)吡啶-3,4-二胺(270mg,1.17mmol)根据对于实施例5描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+253.9.
实施例A22:4-[4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]氯化 哌啶鎓盐
步骤1:4-[4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]哌啶-1- 甲酸叔丁基酯
4-[4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁基酯(实施例27,步骤1)(135mg,0.31mmol)和Pd/C(10wt％,100mg)在EtOAc(10mL)和MeOH(1mL)中的悬浮液于RT在氢气气氛下搅拌。添加另外的Pd/C(10wt％,100mg)并于RT持续搅拌18h。反应混合物经过滤并且滤液经真空浓缩得到标题化合物(88mg,65％)。LCMS(ESI):[M+H]+438.2.
步骤2:4-[4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]氯化哌啶 鎓盐
4-[4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]氯化哌啶鎓盐(75mg,定量产率)从4-[4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯(88mg,0.201mmol)根据对于实施例27步骤2描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M]+338.0.
实施例27:(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(1-甲磺酰基-1,2,3,6- 四氢吡啶-4-基)嘧啶-4-基]胺
步骤1:4-[4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]-3,6-二 氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁基酯
(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例12,步骤4)(100mg,0.35mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁基酯(161mg,0.52mmol)、Cs2CO3(169mg,0.52mmol)和Pd(PPh3)4(40mg,0.04mmol)在二噁烷(3mL)和水(0.1mL)中的溶液以氩气流脱气并且然后于100℃加热3h。反应混合物在水和EtOAc之间分配并且水相以EtOAc萃取。合并的有机层以盐水洗涤，干燥(MgSO4)并真空浓缩。所得残余物通过色谱法纯化(Si-PCC,梯度0-10％MeOH/DCM)得到标题化合物(142mg,93％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.78(1H,d,J＝1.0Hz),8.47(1H,s),8.36(1H,d,J＝5.8Hz),7.96(1H,s),7.74(1H,s),7.18(1H,br.s),6.71(1H,d,J＝5.8Hz),4.70-4.56(1H,m),4.18(2H,br.s),3.66(2H,br.s),2.81(2H,br.s),1.68(6H,d,J＝6.8Hz),1.49(9H,s).
步骤2:4-[4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]-1,2,3, 6-氯化四氢吡啶鎓盐
将HCl(4N在二噁烷中的溶液)添加至4-[4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁基酯(142mg,0.33mmol)在MeOH(3mL)中的溶液。反应混合物于室温搅拌1h并且然后挥发物经真空除去得到标题化合物，为灰白色固体.LCMS(ESI):[M]+336.1.
步骤3:(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(1-甲磺酰基-1,2,3,6-四 氢吡啶-4-基)嘧啶-4-基]胺
4-[4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]-1,2,3,6-氯化四氢吡啶鎓盐(60mg,0.16mmol)、三乙基胺(68μL,0.49mmol)和甲磺酰氯(14μL,0.18mmol)在THF(3mL)中的悬浮液于50℃加热18h。添加额外量的三乙基胺(34μL)和甲磺酰氯(19μL)并于50℃持续加热4h。冷却的反应混合物在水和EtOAc之间分配并且水相以EtOAc萃取。合并的有机层以盐水洗涤，干燥(MgSO4)并真空浓缩。所得残余物通过制备性反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(16mg,24％)。LCMS(ESI):RT 2.35min,[M+H]+414.0,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.79(1H,d,J＝1.0Hz),8.37(1H,d,J＝5.8Hz),8.29(1H,s),7.98(1H,s),7.68(1H,s),7.24-7.18(1H,m),6.82(1H,d,J＝5.8Hz),4.68-4.55(1H,m),4.11-4.05(2H,m),3.55(2H,t,J＝5.7Hz),2.97-2.90(2H,m),2.88(3H,s),1.69(6H,d,J＝6.8Hz).
实施例28:(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-(2-吗啉-4-基嘧啶-4-基) 胺
2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例12,步骤4)(80mg,0.28mmol)、吗啉(0.03mL,0.3mmol)和DIPEA(0.15mL,0.83mmol)在异丙醇(0.5mL)中的混合物于150℃在微波辐射下加热30min。添加水(5mL)并形成沉淀。由此形成的固体通过过滤收集得到标题化合物，为白色固体(54mg,57％)。LCMS(ESI):RT 2.05min,[M+H]+340.2,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.87(1H,s),8.68(1H,d,J＝0.9Hz),8.41(1H,s),8.35(1H,s),8.02(1H,d,J＝5.7Hz),6.47(1H,d,J＝5.7Hz),4.74-4.61(1H,m),3.78-3.67(8H,m),1.57(6H,d,J＝6.8Hz).
实施例29:4-(4-((1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-基)硫 吗啉1-氧化物
和
实施例30:4-(4-((1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-基)硫 吗啉1,1-二氧化物
在氮气气氛下将间-氯过氧苯甲酸(64mg,0.29mmol)添加至(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-(2-硫吗啉-4-基嘧啶-4-基)胺(实施例137)(50mg,0.14mmol)的混合物中。反应混合物于室温搅拌1h并且然后与第二批次的物料(0.14mmol)合并，后者已经经历了同样的反应条件。合并的反应混合物以偏亚硫酸氢钠的饱和溶液洗涤，接着以NaHCO3的饱和溶液洗涤。有机层经干燥(MgSO4)并真空浓缩。所得残余物通过柱色谱纯化(Si-PCC,梯度1-10％2M NH3/MeOH，于DCM中)，接着通过制备性反相HPLC纯化得到标题化合物，为白色固体。
实施例29(23mg,21％):LCMS(ESI):RT 1.82min,[M+H]+372.1,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.78(1H,d,J＝1.0Hz),8.13(1H,s),8.08(1H,d,J＝5.7Hz),7.96(1H,s),7.64(1H,s),6.25(1H,d,J＝5.7Hz),4.68-4.50(3H,m),4.30-4.19(2H,m),2.86-2.79(4H,m),1.66(6H,d,J＝6.7Hz).
实施例30(11mg,11％):LCMS(ESI):RT 2.12min,[M+H]+388.1,方法＝E.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.93(1H,s),8.67(1H,s),8.35(1H,s),8.16(1H,s),8.04(1H,d,J＝5.7Hz),6.59(1H,d,J＝5.7Hz),4.70-4.57(1H,m),4.30-4.18(4H,m),3.23-3.13(4H,m),1.55(6H,d,J＝6.7Hz).
实施例31:3-{6-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]吡咯并[3,2-c]吡啶- 1-基}-2,2-二甲基丙酰胺
步骤1:3-(6-氯吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2,2-二甲基丙酸乙基酯
6-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(509mg,3.3mmol)、3-溴-2,2-二甲基丙酸乙基酯(1.4g,6.7mmol)和Cs2CO3(2.17g,6.7mmol)在DMF(5mL)中的混合物于80℃加热18h。挥发物经真空除去并且所得残余物通过色谱法纯化(Si-PCC,梯度10-60％EtOAc/环己烷)得到标题化合物，为无色油状物(204mg,22％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.64(1H,d,J＝0.9Hz),7.28(1H,s),7.12(1H,d,J＝3.3Hz),6.57(1H,dd,J＝3.3,0.9Hz),4.24(2H,s),4.17-4.08(2H,m),1.27-1.19(9H,m).
步骤2:3-{6-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]吡咯并[3,2-c]吡啶-1- 基}-2,2-二甲基丙酸乙基酯
3-{6-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基}-2,2-二甲基丙酸乙基酯(76mg,51％)从3-(6-氯吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)-2,2-二甲基丙酸乙基酯(92mg,0.33mmol)和2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺(68mg,0.33mmol)根据对于实施例22步骤3描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+453.1.
步骤3:3-{6-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]吡咯并[3,2-c]吡啶-1- 基}-2,2-二甲基丙酸
3-{6-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基}-2,2-二甲基丙酸乙基酯(70mg,0.15mmol)和LiOH(3M,0.1mL,0.3mmol)在MeOH(6mL)和水(3mL)中的混合物于50℃加热18h。挥发物经真空除去并且所得残余物在NH4Cl饱和水溶液和DCM分配。水相进一步以DCM(x 4)萃取并且合并的有机层经干燥(Na2SO4)并真空浓缩得到标题化合物，为白色固体(64mg,98％)。LCMS(ESI):[M+H]+425.1.
步骤4:3-{6-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]吡咯并[3,2-c]吡啶-1- 基}-2,2-二甲基丙酰胺
在氮气气氛下向3-{6-[2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基}-2,2-二甲基丙酸(64mg,0.15mmol)、NH4Cl(16mg,0.2mmol)和DIPEA(0.1mL,0.45mmol)在DMF(1.5mL)中的混合物添加HATU(37mg,0.1mmol)。于室温搅拌1h后，添加另外的HATU(37mg,0.1mmol)并持续搅拌1h。反应混合物经真空浓缩并且所得残余物在DCM和Na2CO3水溶液之间分配。水相进一步以DCM萃取并且合并的有机层经干燥(Na2SO4)并真空浓缩。所得剩余物通过色谱法纯化(Si-PCC,梯度1-10％2MNH3/MeOH/DCM)得到标题化合物，为白色固体(18mg,28％)。LCMS(ESI):RT 2.04min,[M+H]+423.9,方法＝E.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.52(1H,d,J＝0.9Hz),8.16(1H,s),8.02(1H,d,J＝5.7Hz),7.55(1H,s),7.10(1H,d,J＝3.3Hz),6.51(1H,dd,J＝3.3,0.8Hz),6.13(1H,d,J＝5.7Hz),5.63-5.47(2H,m),4.41-4.33(2H,m),4.26(2H,s),3.54-3.44(3H,m),3.41(3H,s),2.05-1.92(2H,m),1.71-1.59(2H,m),1.28(6H,s)。
实施例32:((R)或(S)1-仲丁基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌 啶-1-基)嘧啶-4-基]胺(单个的未知的立体异构体)
实施例32从实施例153(表1)通过手性分离使用ChiralPak IA柱(20mm x 250mm)以及10％EtOH、10％TBME和0.5％二乙基胺在庚烷(等强度的)中的混合物以18mL/min的流速得到。使用叠层式注射方法(13x 7.5mg)，得到流动较快的对映异构体(41mg,>99％ee)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.80(1H,s),8.67(1H,d,J＝0.9Hz),8.40(1H,s),8.34(1H,s),7.97(1H,d,J＝5.6Hz),6.39(1H,d,J＝5.7Hz),4.4-4.36(1H,m),4.29-4.19(2H,m),3.52-3.35(3H,m),3.30(3H,s),2.04-1.86(4H,m),1.56(3H,d,J＝6.8Hz),1.50-1.39(2H,m),0.78(3H,t,J＝7.3Hz).
实施例33:((R)或(S)1-仲丁基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲氧基哌 啶-1-基)嘧啶-4-基]胺(单个的未知的立体异构体)
实施例33从实施例153(表1)通过手性分离使用ChiralPak IA柱(20mm x 250mm)以及10％EtOH、10％TBME和0.5％DEA在庚烷(等强度的)中的混合物以18mL/min的流速得到。使用叠层式注射方法(13x 7.5mg)，得到流动较慢的对映异构体(38mg,93％ee)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.80(1H,s),8.67(1H,d,J＝0.9Hz),8.40(1H,s),8.34(1H,s),7.97(1H,d,J＝5.6Hz),6.39(1H,d,J＝5.7Hz),4.4-4.36(1H,m),4.29-4.19(2H,m),3.52-3.35(3H,m),3.30(3H,s),2.04-1.86(4H,m),1.56(3H,d,J＝6.8Hz),1.50-1.39(2H,m),0.78(3H,t,J＝7.3Hz).
实施例34:1-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2- 基]哌啶-3,4-二醇
[2-(3,6-二氢-2H-吡啶-1-基)嘧啶-4-基]-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(70mg,0.21mmol)、锇酸钾(VI)二水合物(10mg,0.003mmol)、N-甲基吗啉N-氧化物(49mg,0.42mmol)在丙酮(5mL)和水(0.5mL)中的悬浮液搅拌18h。添加Na2S2O5(1M在水中的溶液,2mL)丙持续搅拌1h。所得混合物以MeOH和DCM稀释并装载至SCX筒上。该筒以MeOH洗涤并且产物以2M NH3/MeOH洗脱。含有各级分的产物经真空浓缩并且所得剩余物以热的MeOH研磨。所得悬浮液经冷却并过滤得到标题化合物，为米色固体(66mg,83％)。LCMS(ESI):RT 1.76min,[M+H]+384.1,方法＝E.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64(1H,s),8.48(1H,d,J＝0.9Hz),8.38(1H,s),7.92(1H,d,J＝5.6Hz),6.37(1H,d,J＝5.6Hz),4.78-4.65(1H,m),4.54(2H,d,J＝4.3Hz),3.90-3.62(5H,m),3.59-3.50(1H,m),2.55(3H,s),1.79-1.67(1H,m),1.63-1.49(7H,m)。
实施例35:N-(2-(8-氧杂-3-氮杂-双环[3.2.1]辛-3-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基- 1H咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:2-(8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)嘧啶-4-胺
向30mL密封试管中添加2-氯嘧啶-4-胺(589mg,4.55mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液、8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷(745mg,6.58mmol)和碳酸钾(1.59g,11.5mmol)。反应混合物于120℃以微波辐射辐照1h。所得溶液以H2O(20mL)稀释。所得溶液以乙酸乙酯萃取(3x30mL)。合并的有机层以盐水洗涤(50mL)，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法以二氯甲烷/甲醇(100:9.8)纯化得到2-[8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]嘧啶-4-胺(400mg,43％)，为白色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝1.00,[M+H]+＝207,方法＝J.
步骤2:6-氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
向1000mL 3颈圆底烧瓶中添加6-氯-4-N-(丙-2-基)吡啶-3,4-二胺(实施例7,步骤2)(64.0g,344mmol)在原甲酸三甲基酯(500mL)和甲酸(10mL)中的溶液。所得溶液于80℃搅拌4h。所得混合物经真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法以乙酸乙酯/石油醚(70:30)纯化得到6-氯-1-(丙-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(51g,76％)，为棕色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝1.002,[M+H]+＝196,方法＝L；1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ8.76(s,1H),7.59(s,1H),7.91(s,1H),4.77-4.86(m,1H),1.53-1.55(d,J＝6.6Hz,6H).
步骤3:N-(2-(8-氧杂-3-氮杂-双环[3.2.1]辛-3-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-1H- 咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
在30mL密封试管中添加6-氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(394mg,2.01mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的溶液、Pd2(dba)3.CHCl3(150mg,0.140mmol),XantPhos(315mg,0.540mmol)、Cs2CO3(2.20g,6.75mmol)、2-8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基嘧啶-4-胺(410mg,1.99mmol)。反应混合物在微波辐射下于140℃加热45min。反应混合物以甲醇(10mL)稀释，将固体滤出，并且滤液经真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱法以二氯甲烷/甲醇(100:9.8)纯化得到2-[8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基]-N-[1-(丙-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]嘧啶-4-胺(188.8mg,26％)，为黄色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝1.495,[M+H]+＝366.20,方法＝G；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.84(s,1H),8.65(s,1H),8.44(s,1H),8.33(s,1H),7.98-7.95(m,1H),6.43-6.41(m,1H),4.72-4.63(m,1H),4.43(m,2H),4.22-4.17(m,2H),3.17-3.10(m,2H),1.85-1.68(m,4H),1.57-1.50(m,6H).
实施例36:(R或S)-N-(2-(2-氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基)嘧啶-4-基)-1-异丙 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(单个的未知的立体异构体)
以及
实施例37:(R或S)-N-(2-(2-氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基)嘧啶-4-基)-1-异丙 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(单个的未知的立体异构体)
步骤1:2-(2-氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基)嘧啶-4-胺
2-氯嘧啶-4-胺(76.1mg,0.587mmol)、8-氧杂-3-氮杂螺[4.4]壬烷盐酸盐(100mg,0.58054mmol)、碳酸铯(396mg,1.20mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(2.5mL,32mmol)的混合物于120℃加热24小时。反应混合物以乙酸乙酯稀释，以水(2x)和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(12g氧化硅,溶剂梯度:0-100％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到76.4mg(60％)的标题化合物。LCMS(ESI):[M+H]+＝221.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.70(d,J＝5.6Hz,1H),6.28(s,1H),5.69(d,J＝5.7Hz,1H),3.84–3.71(m,2H),3.58–3.51(m,2H),3.50–3.35(m,3H),3.27–3.21(m,1H),1.93–1.76(m,4H).
步骤2:N-(2-(2-氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬-7-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-1H-咪唑并 [4,5-c]吡啶-6-胺
6-氯-1-异丙基1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例35,步骤2)(68.5mg,0.350mmol)、2-(8-氧杂-3-氮杂螺[4.4]壬-3-基)嘧啶-4-胺(75.4mg,0.342mmol)、三(二苯叉丙酮)二钯氯仿复合物(18.0mg,0.0169mmol)、2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯(19.4mg,0.0399mmol)、碳酸铯(239.0mg,0.726mmol)和1,4-二噁烷(1.5mL)的混合物在密封小瓶中在氮气下于120℃加热18小时。反应混合物以乙酸乙酯稀释，以水(2x)和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(12g氧化硅,溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)，接着通过手性SFC纯化以分离各立体异构体。
实施例36,峰1:18.7mg(14％),LCMS(ESI):RT(min)＝3.363,M+H＝380.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.77(s,1H),8.69(s,1H),8.64(d,J＝0.8Hz,1H),8.31(s,1H),7.94(d,J＝5.6Hz,1H),6.33(d,J＝5.7Hz,1H),4.72–4.62(m,1H),3.91–3.76(m,2H),3.71–3.49(m,6H),2.07–1.87(m,4H),1.56(dd,J＝6.8,2.1Hz,6H).
实施例37,峰2:17.3mg(13％)；LCMS(ESI):RT(min)＝3.367,[M+H]+＝380.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.77(s,1H),8.69(s,1H),8.64(d,J＝0.8Hz,1H),8.31(s,1H),7.94(d,J＝5.5Hz,1H),6.33(d,J＝5.7Hz,1H),4.73–4.61(m,1H),3.89–3.76(m,2H),3.71–3.50(m,6H),2.06–1.86(m,4H),1.56(dd,J＝6.8,2.1Hz,6H).
实施例38:1-异丙基-N-(2-(6-(甲基磺酰基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基)嘧啶- 4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1：6-(4-氨基嘧啶-2-基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁基酯
2-氯嘧啶-4-胺(46.6mg,0.36mmol)、6-(叔丁氧基羰基)-6-氮杂-2-氮鎓杂杂螺(azoniaspiro)[3.3]庚烷草酸酯(100mg,0.33mmol)、碳酸铯(235.0mg,0.714mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)于120℃加热18小时。反应混合物浓缩至硅藻土上，并且粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(12g氧化硅,溶剂梯度：0-10％甲醇/二氯甲烷)得到45.4mg(47％)的所需产物。LCMS(ESI):[M+H]+＝292.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.69(d,J＝5.7Hz,1H),6.44(s,2H),5.75(d,J＝5.7Hz,1H),4.00(s,4H),3.98(s,4H),1.37(s,9H).
步骤2：6-(4-((1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-基)-2,6- 二氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁基酯
6-氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例35,步骤2)(34.1mg,0.174mmol)、6-(4-氨基嘧啶-2-基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁基酯(45.0mg,0.154mmol)、三(二苯叉丙酮)二钯氯仿复合物(7.5mg,0.0070mmol),2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯(10.5mg,0.0216mmol)、碳酸铯(130.4mg,0.396mmol)和1,4-二噁烷(1.5mL)的混合物在密封小瓶中在氮气下于120℃加热4天。反应混合物以乙酸乙酯稀释，以水(2x)和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(4g氧化硅,溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到51.7mg(74％)的标题化合物。LCMS(ESI):[M+H]+＝451.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.81(s,1H),8.64(s,1H),8.48(s,1H),8.32(s,1H),7.94(d,J＝5.7Hz,1H),6.50(d,J＝5.7Hz,1H),4.73–4.61(m,1H),4.18(s,4H),3.26(s,4H),1.59(d,J＝6.7Hz,6H),1.39(s,9H).
步骤3:1-异丙基-N-(2-(6-(甲基磺酰基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基)嘧啶-4- 基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
6-(4-((1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁基酯(51mg,0.11mmol)、二氯甲烷(4.0mL)和氯化氢(4.0mol/L在二噁烷中)(0.2mL,0.8mmol)的混合物于室温搅拌4小时并且然后减压浓缩得到N-(2-(2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺盐酸盐。将该物质溶解于四氢呋喃(4.0mL,49mmol)(含三乙基胺(0.05mL,0.4mmol))并且然后以甲磺酰氯(9.7μL,0.12mmol)处理。将该混合物于室温搅拌3小时，此时添加另外的甲磺酰氯(3.0μL)。2小时后，反应混合物以二氯甲烷稀释，以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(4g氧化硅,溶剂梯度：0-10％甲醇/二氯甲烷)接着通过反相HPLC纯化并冻干得到7.6mg(16％)的标题化合物。LCMS(ESI):RT(min)＝3.264,[M+H]+＝429.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.83(s,1H),8.64(d,J＝1.0Hz,1H),8.50(s,1H),8.33(s,1H),7.95(d,J＝5.8Hz,1H),6.51(d,J＝5.7Hz,1H),4.78–4.62(m,1H),4.22(s,4H),4.12(s,4H),3.02(s,3H),1.59(d,J＝6.7Hz,6H).
实施例39:N4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-N2-(2-(甲基磺酰基)乙 基)嘧啶-2,4-二胺
步骤1:N2-(2-(甲基磺酰基)乙基)嘧啶-2,4-二胺
2-氯嘧啶-4-胺(106.7mg,0.8236mmol)、2-氨基乙基甲基砜盐酸盐(155.2mg,0.9236mmol)、三氟乙酸(0.05mL,0.6mmol)和叔丁醇(2.0mL,21mmol)的混合物于120℃加热3天。将反应混合物倒入10mL饱和碳酸氢钠水溶液中并以二氯甲烷(3x 30mL)萃取。合并的有机萃取物经硫酸镁干燥，过滤，并真空浓缩得到84.5mg(47％)的标题化合物，其不经纯化直接进行下去。LCMS(ESI):[M+H]+＝217.1.
步骤2:N4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-N2-(2-(甲基磺酰基)乙基) 嘧啶-2,4-二胺
使用N2-(2-(甲基磺酰基)乙基)嘧啶-2,4-二胺和对于实施例36描述的方法，得到标题化合物，4.6％的产率(6.7mg)。LCMS(ESI):RT(min)＝3.030,[M+H]+＝376.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.72(s,1H),8.64(d,J＝1.2Hz,1H),8.41–8.31(m,2H),7.93(d,J＝5.6Hz,1H),6.90(t,J＝5.8Hz,1H),6.51(d,J＝5.8Hz,1H),4.82–4.66(m,1H),3.77(q,J＝6.5Hz,2H),3.42(t,J＝6.9Hz,2H),3.02(s,3H),1.55(d,J＝6.7Hz,6H).
实施例40:N4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-N2-(1-甲基-1H-吡唑-4- 基)嘧啶-2,4-二胺
步骤1:N2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-2,4-二胺
2-氯嘧啶-4-胺(130.9mg,1.010mmol)、1-甲基-1H-吡唑-4-基胺(169mg,1.7mmol)、三氟乙酸(0.05mL,0.6mmol)和叔丁醇(2.0mL)的混合物在密封小瓶中于110℃加热4小时。反应混合物以氨/甲醇中和并浓缩至硅藻土上。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(12g氧化硅,溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到284.1mg(65％纯度,96％产率)的标题化合物。LCMS(ESI):[M+H]+＝191.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.69(s,1H),7.95(s,1H),7.81(s,1H),7.75(d,J＝6.7Hz,1H),7.54(s,1H),6.01(d,J＝6.7Hz,1H),3.81(s,3H).
步骤2:N4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-N2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基) 嘧啶-2,4-二胺
6-氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例35,步骤2)(216.7mg,1.1mmol)、N2-(1-甲基吡唑-4-基)嘧啶-2,4-二胺(284mg,0.97mmol)、三(二苯叉丙酮)二钯氯仿复合物(48.9mg,0.05mmol)、2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯(52.2mg,0.107mmol)、碳酸铯(0.64g,1.96mmol)和1,4-二噁烷(5.0mL)的混合物经历于130℃的微波辐射2小时。向反应混合物添加三(二苯叉丙酮)二钯氯仿复合物(54.1mg,0.0507mmol)和4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(70.7mg,0.122mmol)。反应混合物经历于130℃的微波辐射1小时并且然后于150℃2小时。反应混合物以乙酸乙酯稀释，以水(2x)和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(12g氧化硅,溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到118.7mg，接着通过反相HPLC纯化并冻干得到44.2mg(13％)的标题化合物。LCMS(ESI):RT(min)＝3.463,[M+H]+＝350.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.71(s,1H),8.88(s,1H),8.67(d,J＝0.9Hz,1H),8.39(s,1H),8.02(d,J＝5.7Hz,1H),7.85(s,1H),7.54(s,1H),6.71(s,1H),4.79–4.59(m,1H),3.78(s,3H),1.53(d,J＝6.7Hz,6H).
实施例41:1-异丙基-N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-2-(三氟甲基)-1H- 咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:6-氯-1-异丙基-2-(三氟甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
三乙基胺(0.40mL,2.8mmol)、三氟乙酸(75μL,0.97mmol)、三苯基膦(604mg,2.30mmol)和四氯甲烷(4.0mL)的混合物于室温搅拌10分钟。然后添加6-氯-N4-异丙基-吡啶-3,4-二胺(实施例7,步骤2)(142.7mg,0.77mmol)在四氯甲烷(1mL)中的溶液，并且反应混合物于80℃加热10小时。反应混合物以二氯甲烷稀释，以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(12g Silicycle HP氧化硅,溶剂梯度:0-100％乙酸乙酯/庚烷)得到151.7mg(75％)的标题化合物。LCMS(ESI):[M+H]+＝264.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.00(d,J＝0.9Hz,1H),8.21(d,J＝1.0Hz,1H),4.88(p,J＝6.9Hz,1H),1.64(d,J＝6.8Hz,6H).
步骤2:1-异丙基-N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-2-(三氟甲基)-1H-咪 唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(62.4mg,0.300mmol)、6-氯-1-异丙基-2-(三氟甲基)咪唑并[4,5-c]吡啶(70.8mg,0.269mmol)、三(二苯叉丙酮)二钯氯仿复合物(13.2mg,0.0124mmol)、2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯(21.4mg,0.0440mmol)、碳酸铯(185.5mg,0.564mmol)和1,4-二噁烷(1.5mL)的混合物在密封小瓶中在氮气下于120℃加热10小时。反应混合物以乙酸乙酯稀释，以水(2x)和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(4g SilicycleHP氧化硅,溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)接着通过反相HPLC纯化并冻干得到64.5mg(55％)的标题化合物。LCMS(ESI):RT(min)＝4.453,[M+H]+＝436.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.00(s,1H),8.89(d,J＝0.9Hz,1H),8.58(d,J＝1.0Hz,1H),8.01(d,J＝5.7Hz,1H),6.45(d,J＝5.6Hz,1H),4.86(p,J＝6.8Hz,1H),4.33–4.17(m,2H),3.54–3.34(m,3H),3.30(s,3H),1.99–1.83(m,2H),1.66(d,J＝6.9Hz,5H),1.52–1.37(m,2H).
实施例42:N4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-N2-(1H-吡唑-4-基)嘧 啶-2,4-二胺
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例12,步骤4)(51.1mg,0.177mmol)、1H-吡唑-4-胺(23.9mg,0.288mmol)、三氟乙酸(10.0μL,0.129mmol)和叔丁醇(1.5mL,16mmol)的混合物在密封小瓶中100℃加热2天。反应混合物以二氯甲烷稀释，以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发。粗产物(20.3mg)经反相HPLC纯化并冻干得到4.6mg(8％)的标题化合物。LCMS(ESI):RT(min)＝3.051,[M+H]+＝336.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.43(s,1H),9.72(s,1H),8.83(s,1H),8.66(d,J＝1.0Hz,1H),8.38(s,1H),8.01(d,J＝5.7Hz,1H),6.67(s,1H),4.62(br s,1H),1.51(d,J＝6.6Hz,6H).
实施例43:1-异丙基-N-(2-(4-(三氟甲氧基)哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-1H-咪唑并 [4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:4-(((甲硫基)硫羰基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯
向吹扫并保持以氮气惰性气氛的1000mL 4-颈圆底烧瓶中放置氢化钠(12.8g,373.33mmol,70％wt)、二甲基乙酰胺(500mL)，接着伴随搅拌于0℃分若干批次添加4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(50g,248.43mmol)。混合物搅拌1小时。向其中伴随搅拌于0℃滴加二硫化碳(75.6g,994.74mmol)。混合物搅拌1小时。伴随搅拌于0℃向混合物滴加碘甲烷(53.0g,373.24mmol)。所得溶液于0℃搅拌1.5h并通过添加500g的冰淬灭。溶液的pH值以饱和NaHCO3水溶液调节至8。所得溶液以3x500mL的乙酸乙酯萃取。各有机层经合并并浓缩。剩余物在硅胶柱上纯化以乙酸乙酯:石油醚(1:10)洗脱得到60g(83％)的标题化合物。
步骤2:4-(三氟甲氧基)哌啶
向吹扫并保持以氮气惰性气氛的1000mL 4-颈圆底烧瓶(PTFE)中放置1,3-二溴-5,5-二甲基乙内酰脲(hydantoin)(133g,468.31mmol)、二氯甲烷(150mL)，接着伴随搅拌于-78℃滴加吡啶氢氟酸盐(612g,4.33mol,70％)。混合物于-78℃搅拌1h。向其中伴随搅拌于-78℃经30min滴加4-[[(甲硫基)硫羰基]氧基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯(30g,102.94mmol)在二氯甲烷(500mL)中的溶液。所得溶液于-78℃搅拌1h并于室温搅拌过夜。反应然后通过添加1kg的冰淬灭。溶液的pH值以饱和碳酸钾水溶液调节至10。所得溶液以4x1L的乙酸乙酯萃取。各有机层经合并，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到50g(粗)的4-(三氟甲氧基)哌啶，为黄色油状物，其不经纯化直接使用。
步骤3:4-(三氟甲氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯
向3000-mL 4-颈圆底烧瓶中放置4-(三氟甲氧基)哌啶(50g,295.60mmol,1.00当量)、乙酸乙酯(2000mL)和二碳酸二叔丁基酯(96.7g,443.07mmol,1.50当量)。所得溶液于室温搅拌过夜并真空浓缩。剩余物在硅胶柱上纯化以乙酸乙酯:石油醚(1:10)洗脱得到16g(20％)的标题化合物，为浅黄色固体。
步骤4:4-(三氟甲氧基)哌啶盐酸盐
向250-mL 3颈圆底烧瓶中放置4-(三氟甲氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(16g,59.42mmol,1.00当量)和二氯甲烷(150mL)。向上述引入氯化氢(气体)。所得溶液于室温搅拌4h，真空浓缩并以200mL的乙醚稀释。混合物于室温搅拌10min。固体通过过滤收集并以1x50mL的乙醚洗涤得到10g(82％)的标题化合物，为白色固体。LCMS(ESI):[M-HCl+H]+＝170；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.20(s,2H),4.74(m,1H),3.18(m,2H),3.06(d,2H),2.12(m,2H),1.91(m,2H).
步骤5:1-异丙基-N-(2-(4-(三氟甲氧基)哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-胺
(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例12,步骤4)(76.9mg,0.266mmol)、4-(三氟甲氧基)哌啶盐酸盐(83.2mg,0.384mmol)、三乙基胺(0.20mL,1.4mmol)和2-丙醇(2.0mL)的混合物在微波辐射下于150℃加热30分钟。反应混合物以二氯甲烷稀释，以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发.粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到64.9mg(58％)的标题化合物。LCMS(ESI):RT(min)＝4.048,[M+H]+＝422.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.81(s,1H),8.66(d,J＝1.0Hz,1H),8.33(s,2H),7.99(d,J＝5.7Hz,1H),6.44(d,J＝5.7Hz,1H),4.74(dt,J＝8.7,4.5Hz,1H),4.70–4.62(m,1H),4.32–4.17(m,2H),3.58–3.46(m,2H),2.06–1.99(m,2H),1.76–1.65(m,2H),1.56(d,J＝6.7Hz,6H).
实施例44:N-(2-((1R,5S,6s)-6-氨基-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)嘧啶-4-基)- 1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:(1R,5S,6s)-6-(((苄基氧基)羰基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲 酸叔丁基酯
向反式-6-氨基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯(218.8mg,1.104mmol)和碳酸铯(723.9mg,2.20mmol)在四氢呋喃(4.0mL)中的混合物添加氯甲酸苄基酯(0.20mL,1.3mmol)。反应混合物然后于室温搅拌3天。反应混合物以乙酸乙酯稀释，以水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(12g SilicycleHP氧化硅,溶剂梯度:0-100％乙酸乙酯/庚烷，TLC，以CAM染色以坚定相关各级分)得到357.1mg(97％)的标题化合物。LCMS(ESI):[M+Na]+＝355.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.49(s,1H),7.41–7.26(m,5H),5.01(s,2H),3.44(s,1H),3.42(s,1H),3.34–3.30(br s,1H),3.29–3.24(br s,1H),2.15(d,J＝2.6Hz,1H),1.63(d,J＝2.7Hz,2H),1.37(s,9H).
步骤2:(1R,5S,6s)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基氨基甲酸苄基酯
(1R,5S,6s)-6-(苄基氧基羰基氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯(98mg,0.2948mmol)、氯化氢(4.0mol/L，在二噁烷中)(0.75mL,3.0mmol)和二氯甲烷(4.0mL,62mmol)的混合物于室温搅拌19小时。反应混合物经减压蒸发得到定量产率的标题化合物，其不经纯化直接进行下去。LCMS(ESI):[M+H]+＝233.4.
步骤3:苄基N-((1R,5S,6s)-3-(4-((1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨 基)嘧啶-2-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)氨基甲酸酯
(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例12,步骤4)(75.6mg,0.262mmol)、N-[(1R,5S,6s)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基]氨基甲酸苄基酯(0.29mmol,0.29mmol)、三乙基胺(0.10mL,0.71mmol)和2-丙醇(2.0mL,26mmol)的混合物在微波辐射下于150℃加热30分钟。添加5mL水并且所期望的产物经由过滤回收，为褐色固体(61.3mg,48％产率)。LCMS(ESI):[M+H]+＝485.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.77(s,1H),8.64(d,J＝0.9Hz,1H),8.57(s,1H),8.32(s,1H),7.93(d,J＝5.7Hz,1H),7.54(s,1H),7.40–7.26(m,5H),6.38(d,J＝5.7Hz,1H),5.02(s,2H),4.69(br s,1H),3.93–3.82(m,2H),3.64–3.51(m,2H),1.82(s,2H),1.66–1.51(m,6H).
步骤4.N-(2-((1R,5S,6s)-6-氨基-3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)嘧啶-4-基)-1- 异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向N-[(1S,5R,6s)-3-[4-[(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基]嘧啶-2-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基]氨基甲酸苄基酯(60.3mg,0.124mmol)在乙醇(3.0mL,52mmol)中的溶液在氮气气氛下添加钯(10wt.％在碳上)(19.7mg,0.0185mmol)。将反应容器排空并回填以氢气，并且然后于室温在氢气球下搅拌19小时。添加钯(10wt.％在碳上)(19.7mg,0.0185mmol)并且反应混合物在氢气气氛下于50℃加热7小时。反应混合物经硅藻土过滤并蒸发。粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到9.5mg(22％)的标题化合物。LCMS(ESI):RT(min)＝2.855,[M+H]+＝351.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.74(s,1H),8.63(d,J＝1.0Hz,1H),8.59(s,1H),8.32(s,1H),7.91(d,J＝5.7Hz,1H),6.35(d,J＝5.7Hz,1H),4.75–4.63(m,1H),3.75(br s,2H),3.55(br s,2H),2.00(t,J＝2.1Hz,1H),1.60(d,J＝6.8Hz,5H),1.57(s,2H).
实施例45:1-异丙基-N-(2-((1R,5S,6s)-6-(甲基氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己- 3-基)嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:(1R,5S,6s)-6-(((苄基氧基)羰基)(甲基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己 烷-3-甲酸叔丁基酯
向(1R,5S,6s)-6-(苄基氧基羰基氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯(实施例44,步骤1)(258mg,0.7762mmol)在四氢呋喃(5.0mL,62mmol)中的溶液添加氢化钠(60wt％在矿物油中的分散体)(56mg,1.40mmol)。该混合物于室温搅拌30分钟，接着添加碘甲烷(63.0μL,1.01mmol)。反应混合物于室温搅拌16小时。反应混合物以乙酸乙酯稀释，以水(2x)和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发得到250.2mg(93％)的标题化合物。LCMS(ESI):[M+H-tBu]+＝292.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.44–7.27(m,5H),5.06(s,2H),3.43(d,J＝10.9Hz,2H),3.35–3.25(m,2H),2.82(s,3H),2.23(t,J＝2.3Hz,1H),1.85(d,J＝1.6Hz,2H),1.36(s,9H).
步骤2:1-异丙基-N-(2-((1R,5S,6s)-6-(甲基氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-3- 基)嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
使用(1R,5S,6s)-6-(((苄基氧基)羰基)(甲基)氨基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯并根据为实施例44描述的方法，以3个步骤和52％产率(68.8mg)得到标题化合物。LCMS(ESI):RT(min)＝2.770,[M+H]+＝365.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.75(s,1H),8.64(d,J＝1.0Hz,1H),8.61(s,1H),8.32(s,1H),7.91(d,J＝5.6Hz,1H),6.35(d,J＝5.7Hz,1H),4.76–4.64(m,1H),3.77(br s,2H),3.55(br s,2H),2.30(s,3H),1.82(t,J＝2.1Hz,1H),1.63–1.61(m,2H),1.60(d,J＝6.8Hz,6H).
实施例46:N-(2-(6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-基)嘧啶-4-基)-1-异 丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:4-氯-5-硝基吡啶-2-醇
向吹扫并保持以氮气的1L 4-颈圆底烧瓶添加四氢呋喃(200mL)。于-70℃将氨气鼓泡进入溶液得到氨的饱和溶液。于-70℃向混合物添加t-BuOK(53.1g,0.473mol)，提供溶液(I)。向吹扫并保持以氮气的另一5L 4-颈圆底烧瓶添加4-氯-3-硝基吡啶(30.0g,0.189mol)在四氢呋喃(200mL)中的溶液。于0℃向混合物添加t-BuOOH(53.1g,0.473mol)得到溶液(II)。于-70℃将溶液(II)滴加至溶液(I)中，所得溶液于-40℃搅拌2小时。反应混合物通过饱和氯化铵水溶液淬灭并真空浓缩。剩余物以水研磨，并且固体通过过滤收集，以THF(50mL)洗涤并经真空干燥得到4-氯-5-硝基吡啶-2-醇(13.0g,39.0％)，为黄色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝0.535,[M+H]+＝175,方法＝G.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)8.80(s,1H),6.98(br,1H),5.91(s,1H).
步骤2:2,4-二溴-5-硝基吡啶
向冲洗并保持以氮气的250mL 3颈圆底烧瓶添加4-氯-5-硝基吡啶-2-醇(11.5g,65.9mmol)在CH3CN(110mL)中的溶液，接着添加POBr3(23.1g)。所得溶液于80℃搅拌2小时。固体经滤出并且滤液经真空浓缩。剩余物悬浮于500mL的冰水中。所得固体通过过滤收集并经真空干燥得到2,4-二溴-5-硝基吡啶(7.66g,41.1％)，为浅黄色固体，其不经纯化直接使用。
步骤3:2-溴-N-异丙基-5-硝基吡啶-4-胺
向吹扫并保持以氮气的250mL 3颈圆底烧瓶中添加2,4-二溴-5-硝基吡啶(13.0g,4.60mmol)、四氢呋喃(100mL)和三乙基胺(7.00g,69.2mmol)。向反应混合物滴加丙-2-胺(3.00mL)伴随搅拌于0℃。在混合物已经于室温搅拌4h后，反应混合物经真空浓缩并且剩余物悬浮于H2O(100mL)。固体通过过滤收集并经真空干燥得到标题化合物(12.0g)，为黄色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝1.502,M+H+＝260,方法＝L.
步骤4:6-溴-N4-异丙基吡啶-3,4-二胺
向250mL 3颈圆底烧瓶中添加2-溴-N-异丙基-5-硝基吡啶-4-胺(12.0g,46.1mmol)在乙醇(100mL)和乙酸(3.00mL)中的溶液。接着于80℃分若干批次添加Fe粉(25.0g,0.446mol)。反应混合物于80℃搅拌4h。固体经滤出并且滤液经真空浓缩。所得残余物溶解于乙酸乙酯(150mL)，以盐水洗涤(2x100mL)，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物(10.0g)，为棕色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝1.580,[M+H]+＝230,方法＝H.
步骤5:(E)-N-6-溴-4-(异丙基氨基)吡啶-3-基乙酰亚胺酸乙基酯
向500mL圆底烧瓶中添加6-溴-N4-异丙基吡啶-3,4-二胺(7.00g,30.4mmol)、1,1,1-三乙氧基乙烷(40.0mL)和乙酸(3.00mL)。反应混合物于80℃搅拌过夜并且然后真空浓缩。剩余物溶解于乙酸乙酯(50mL)中，以盐水洗涤(2x30mL)，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物(8.00g,88.1％)，为棕色油状物。LCMS(ESI):RT(min)＝1.324,[M+H]+＝300,方法＝J.
步骤6:6-溴-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
向250mL 3颈圆底烧瓶中添加(E)--N-6-溴-4-(异丙基氨基)吡啶-3-基乙酰亚胺酸乙基酯(8.00g,26.6mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液和碳酸钾(8.00g,57.9mmol)。所得溶液于100℃搅拌过夜。反应混合物以H2O(100mL)稀释并以乙酸乙酯萃取(3x100mL)。合并的有机层以盐水洗涤(2x100mL)，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法以乙酸乙酯/石油醚(3:1)纯化得到标题化合物(3.20g,47.1％)，为棕色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝1.103,[M+H]+＝254,方法＝G.
步骤7:N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向吹扫并保持以氮气的250mL 3颈圆底烧瓶中添加6-溴-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(3.50g,13.0mmol)在1,4-二噁烷(70.0mL)中的溶液、2-氯嘧啶-4-胺(1.70g,13.1mmol)、XantPhos(1.70g,2.94mmol)、Pd2(dba)3.CHCl3(1.70g,1.64mmol)和Cs2CO3(11.0g,33.7mmol)。所得混合物于100℃搅拌4h。将混合物冷却至室温，固体经滤出并且滤液经真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法以二氯甲烷/甲醇(50:1)纯化得到标题化合物(1.10g,26.1％)，为黄色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝1.215,[M+H]+＝303,方法＝I.1HNMR(300Hz,DMSO-d6):δ10.55(s,1H),8.57(s,1H),8.27-8.25(d,J＝5.7Hz,1H),8.13(s,1H),7.48(s,1H),4.72-4.68(m,1H),2.58(s,3H),1.58-1.56(d,6H)。
步骤8:N-(2-(6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-基)嘧啶-4-基)-1-异丙 基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(103.5mg,0.3418mmol)、4,5,6,7-四氢-1H-吡唑并[4,3-C]吡啶(69.6mg,0.548mmol)、三乙基胺(0.15mL,1.1mmol)和2-丙醇(1.5mL,19mmol)的混合物在微波辐射下于150℃加热60分钟。反应混合物以二氯甲烷稀释，以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发。粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到67.7mg(51％)的标题化合物。LCMS(ESI):RT(min)＝3.19,[M+H]+＝390.2,方法＝C；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),9.71(s,1H),8.51(d,J＝1.2Hz,1H),8.39(s,1H),7.99(d,J＝5.6Hz,1H),7.46(s,1H),6.47(d,J＝5.7Hz,1H),4.80(s,2H),4.78–4.69(m,1H),4.12(t,J＝5.7Hz,2H),2.75(t,J＝5.8Hz,2H),2.58(s,3H),1.64(d,J＝6.8Hz,6H).
实施例47:((1R,5S,6r)-3-(4-((1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基) 嘧啶-2-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)甲醇
步骤1:(1R,5S,6r)-6-(羟甲基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯
向(1R,5S,6r)-3-(叔丁氧基羰基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酸(250.8mg,1.104mmol)在四氢呋喃(5.0mL,62mmol)中的溶液滴加在四氢呋喃(2.20mL,2.2mmol)中的硼烷-四氢呋喃复合物(1.0mol/L)。反应混合物于室温搅拌20小时。向反应添加在四氢呋喃(2.20mL,2.2mmol)中的硼烷-四氢呋喃复合物(1.0mol/L)。再经7小时后，添加在四氢呋喃(3.0mL,3.0mmol)中的硼烷-四氢呋喃复合物(1.0mol/L)并且反应混合物于室温搅拌3天。反应混合物以二氯甲烷稀释，以水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发得到定量产率的标题化合物，其不经纯化直接进行下去。LCMS(ESI):[M+H-tBu]+＝158.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ4.45(t,J＝5.5Hz,1H),3.47–3.34(m,3H),3.29–3.25(m,2H),3.26–3.18(m,2H),1.41–1.38(m,2H),1.37(s,9H).
步骤2:(1R,5S,6r)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基甲醇盐酸盐
(1S,5R,6r)-6-(羟甲基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯(86mg,0.36292mmol)、氯化氢(4.0mol/L，在二噁烷中)(1.0mL,4.0mmol)和二氯甲烷(2.5mL,39mmol)的混合物于室温搅拌20小时。反应混合物经减压浓缩得到定量产率的标题化合物，其不经纯化直接进行下去。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.30(br s,1H),8.94(br s,1H),4.60(t,J＝5.5Hz,1H),3.57(s,2H),3.29–3.22(m,4H),1.64–1.53(m,2H),1.20–1.08(m,1H).
步骤3:((1R,5S,6r)-3-(4-((1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧 啶-2-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基)甲醇
使用(1R,5S,6r)-3-氮杂双环[3.1.0]己-6-基甲醇盐酸盐并根据为实施例43描述的方法，得到标题化合物，65％产率(59.0mg)。LCMS(ESI):RT(min)＝3.164,[M+H]+＝366.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.74(s,1H),8.64(d,J＝1.0Hz,1H),8.58(d,J＝1.0Hz,1H),8.32(s,1H),7.92(d,J＝5.7Hz,1H),6.37(d,J＝5.7Hz,1H),4.75–4.63(m,1H),4.49(t,J＝5.5Hz,1H),3.90–3.74(m,2H),3.55(br s,2H),3.35(t,J＝5.9Hz,2H),3.27(s,1H),1.64–1.49(m,7H),0.85–0.74(m,1H).
实施例48:1-异丙基-N-(2-((1R,5S,6r)-6-(甲氧基甲基)-3-氮杂双环[3.1.0] 己-3-基)嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:(1R,5S,6r)-6-(甲氧基甲基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯
(1S,5R,6r)-6-(羟甲基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯(171mg,0.72162mmol)在四氢呋喃(5.0mL,62mmol)中的溶液以氢化钠(60wt％在矿物油中的分散体)(61mg,1.52513mmol)处理。该混合物于室温搅拌40分钟并且然后以碘甲烷(100.0μL,1.60mmol)处理并于室温搅拌24小时。反应混合物以乙酸乙酯稀释，以水(2x)和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发得到化合物(460.6mg,98％)，其不经纯化直接进行下去。LCMS(ESI):[M+H-tBu]+＝172.4.
步骤2.:1-异丙基-N-(2-((1R,5S,6r)-6-(甲氧基甲基)-3-氮杂双环[3.1.0]己- 3-基)嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
使用(1R,5S,6r)-6-(甲氧基甲基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯并根据为实施例43描述的方法，得到标题化合物，62％产率(82.3mg)。LCMS(ESI):RT(min)＝3.456,[M+H]+＝380.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.75(s,1H),8.64(d,J＝1.0Hz,1H),8.58(d,J＝1.0Hz,1H),8.32(s,1H),7.92(d,J＝5.6Hz,1H),6.37(d,J＝5.7Hz,1H),4.75–4.64(m,1H),3.84(br s,2H),3.55(br s,2H),3.28(d,J＝6.8Hz,2H),3.24(s,3H),1.62(m,2H),1.59(d,J＝6.8Hz,6H),0.87(m,1H).
实施例49:N2-(1-苄基-1H-吡唑-3-基)-N4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶- 6-基)嘧啶-2,4-二胺
(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例12,步骤4)(68.8mg,0.238mmol)、1-苄基-1H-吡唑-3-胺(72.7mg,0.399mmol)、三氟乙酸(10.0μL,0.129mmol)和叔丁醇(1.5mL,16mmol)的混合物于100℃加热5小时。反应混合物以二氯甲烷稀释，以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发得到152.1mg粗产物。23mg的粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到8.6mg的标题化合物。LCMS(ESI):RT(min)＝4.094,[M+H]+＝426.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.79(s,1H),9.43(s,1H),8.64(d,J＝1.0Hz,1H),8.39(s,2H),8.01(d,J＝5.8Hz,1H),7.72(d,J＝2.3Hz,1H),7.38–7.31(m,2H),7.31–7.21(m,3H),6.69(d,J＝2.2Hz,1H),6.59(d,J＝5.8Hz,1H),5.24(s,2H),4.80(br s,1H),1.48(d,J＝6.7Hz,6H).
实施例50:3-((4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶- 2-基)氨基)四氢噻吩1,1-二氧化物
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(120.0mg,0.3963mmol)、1,1-二氧代四氢噻吩-3-基胺(88.9mg,0.625mmol)、三氟乙酸(10.0μL,0.129mmol)和叔丁醇(1.5mL,16mmol)的混合物在微波辐射下于130℃加热60分钟。反应混合物以二氯甲烷稀释，以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发得到150.4mg粗产物。纯化粗产物经由制备性手性SFC分离各立体异构体得到化合物，为单个的未知的立体异构体。LCMS(ESI):RT(min)＝3.094,[M+H]+＝402.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(s,1H),8.50(d,J＝0.9Hz,1H),7.97–7.93(m,2H),6.99(s,1H),6.80(d,J＝5.8Hz,1H),4.78–4.64(m,2H),3.53(dd,J＝13.3,7.5Hz,1H),3.44–3.33(m,1H),3.17–3.08(m,1H),3.09–2.99(m,1H),2.56(s,3H),2.48–2.43(m,1H),2.27–2.15(m,1H),1.56(dd,J＝6.8,1.5Hz,6H).
实施例51:6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-1-异丙 基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
步骤1:6-溴-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
于0℃向6-溴-5-氮杂吲哚(1.0g,4.9mmol)在DMF(8mL)中的溶液添加60％氢化钠(0.23g,5.8mmol)。混合物于0℃搅拌5min，然后添加2-溴丙烷(0.7mL,7mmol)。反应于室温搅拌2h。反应然后通过倾倒至饱和NH4Cl上淬灭。产物以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过在硅胶上快速色谱法纯化粗产物(溶剂梯度:0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(1.5g,定量)。
步骤2:6-溴-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲醛
向冷的(0℃)DMF(40mL)中添加POCl3(3.0mL,31mmol)。反应于0℃搅拌20min。于室温滴加6-溴-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(4.9mmol)在DMF(1mL)中的溶液。反应于70℃搅拌2h。混合物然后通过倾倒至饱和碳酸氢钠溶液上而中和。产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物经饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过在硅胶上快速色谱法纯化粗产物(溶剂梯度:0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(1.34g,80％)。
步骤3:6-溴-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酸
向6-溴-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲醛(1.3g,4.9mmol)在t-BuOH(10mL)中的溶液添加2-甲基-2-丁烯(2M，在THF中,4.1mL,49mmol)。然后添加亚氯酸钠(1.1g,9.7mmol)和磷酸二氢钠(5.8g,49mmol)在水(15mL)中的溶液。反应于室温搅拌18h。混合物然后以盐水稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗物质(1.3g,94％)不经进一步纯化而使用。
步骤4:6-溴-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
向6-溴-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酸(1.25g,4.4mmol)在DMF(10mL)中的溶液添加DIPEA(1.2mL,6.6mmol)和HBTU(2.64g,6.62mmol)。混合物于室温搅拌15min，然后添加氢氧化铵(10mL)。所得混合物经剧烈搅拌1h。混合物然后以盐水稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗物质通过在硅胶上的快速色谱法纯化(溶剂梯度:0-10％MeOH/DCM)得到标题化合物(0.72g,58％).
步骤5:6-((2-氯嘧啶-4-基)氨基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
向压力试管添加6-溴-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(0.15g,0.53mmol)、4-氨基-2-氯嘧啶(70mg,0.53mmol)、Xantphos(32mg,0.053mmol)、Pd2(dba)3(25mg,0.027mmol)、Cs2CO3(0.35g,1.1mmol)和二噁烷(2mL)。混合物通过氮气鼓泡脱气20min。反应小瓶然后经密封并于120℃搅拌6h。反应然后经过滤并浓缩。通过在硅胶上快速色谱法纯化粗产物(溶剂梯度:0-10％MeOH/DCM)得到标题化合物(0.70g,40％)。
步骤6:1-(环丙基磺酰基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2- 基)-1H-吡唑
向4-吡唑硼酸频哪醇酯(1.02g,5.26mmol)在DMF(15mL)中的溶液添加氢化钠(60％,0.32g,8mmol)和环丙基磺酰氯(0.8g,5.78mmol)。反应于室温搅拌5h。混合物然后以盐水稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗物质通过在硅胶上的快速色谱法纯化(溶剂梯度:0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(0.8g,50％).
步骤7:6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-1-异丙基- 1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
向玻璃小瓶添加：1-(环丙基磺酰基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(95mg,0.30mmol)、6-((2-氯嘧啶-4-基)氨基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(50mg,0.15mmol)、Pd(Amphos)2Cl2(5mg,0.008mmol)、Na2CO3的2M溶液(0.11mL,0.23mmol)和乙腈(2.5mL)。混合物通过氮气鼓泡脱气20min。反应小瓶经密封并于100℃在油浴中搅拌1h。反应混合物冷却至室温，过滤并浓缩。通过反相HPLC纯化粗产物并冻干得到标题化合物(20mg,30％)。LCMS(ESI):RT 4.13min,[M+H]+467.2,方法＝B；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.27(s,1H),9.08(t,J＝2.4Hz,1H),8.70(d,J＝0.5Hz,1H),8.50(s,1H),8.47(d,J＝0.5Hz,1H),8.37(d,J＝5.9Hz,1H),8.23(s,1H),7.49(s,1H),7.11(s,1H),6.97(d,J＝8.7Hz,1H),6.63(d,J＝8.8Hz,1H),4.80(m,1H),1.56(d,J＝6.7Hz,6H),1.40–1.31(m,2H),1.30–1.23(m,2H).
实施例52:N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向玻璃小瓶添加：1-(环丙基磺酰基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(实施例51,步骤6)(0.56g,1.8mmol)、N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(0.56g,1.8mmol)、Pd(Amphos)2Cl2(65mg,0.092mmol)、Na2CO3的2M溶液(1.4mL,2.8mmol)和乙腈(2.5mL)。混合物通过氮气鼓泡脱气20min。反应小瓶经密封并于100℃在油浴中搅拌3h。反应混合物冷却至室温，过滤并浓缩。通过反相HPLC纯化粗产物并冻干得到标题化合物(41mg,5％)。LCMS(ESI):RT 4.77min,[M+H]+439.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.16(s,1H),8.66(s,1H),8.56(d,J＝0.8Hz,1H),8.47(d,J＝0.5Hz,1H),8.39(m,2H),7.24(s,1H),4.78(m,1H),2.58(s,3H),1.63(d,J＝6.9Hz,6H),1.38–1.21(m,4H).
实施例53:1-异丙基-N-(2-(4-甲氧基苯基)嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶- 6-胺
步骤1:2-(4-甲氧基苯基)嘧啶-4-胺
向玻璃小瓶添加(4-甲氧基苯基)硼酸(0.15g,1.0mmol)、2-氯嘧啶-4-胺(0.13mg,1.0mmol)、Pd(Amphos)2Cl2(35mg,0.050mmol)、Na2CO3的2M溶液(0.75mL,1.5mmol)和乙腈(2.5mL)。混合物通过氮气鼓泡脱气20min。反应小瓶经密封，并在110℃在油浴中搅拌2h。反应混合物冷却至室温,过滤并浓缩。纯化粗产物通过在氧化硅上的快速色谱得到标题化合物(141mg,70％)。
步骤2:1-异丙基-N-(2-(4-甲氧基苯基)嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6- 胺
向玻璃小瓶添加2-(4-甲氧基苯基)嘧啶-4-胺(0.14g,0.66mmol)、6-氯-1-异丙基-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例35,步骤2)(0.13g,0.66mmol)、叔丁醇钠(0.2g,2mmol)、t-BuOH(2.5mL)和氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(摩尔比PdP/P＝1:1)(50mg)。反应通过氮气鼓泡脱气15min。反应小瓶经密封并在油浴中于120℃加热12h。然后反应经过滤，浓缩并通过反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(129.6mg,54％)。LCMS(ESI):RT 3.85min,[M+H]+361.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.16(s,1H),8.71(s,1H),8.57(s,1H),8.41(d,J＝5.8Hz,1H),8.37(m,3H),7.13(d,J＝5.7Hz,1H),7.10–6.98(m,2H),4.77(m,1H),3.86(s,3H),1.65(d,J＝6.8Hz,6H)。
实施例54:1-异丙基-N-(2-(6-甲氧基吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c] 吡啶-6-胺
向玻璃小瓶添加2-(6-甲氧基-3-吡啶基)嘧啶-4-胺(0.14g,0.66mmol)、6-氯-1-异丙基-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例35,步骤2)(0.13g,0.66mmol)、碳酸铯(0.43g,2.0mmol)、1,4-二噁烷(3mL)、XPhos(32mg,0.066mmol)和Pd2(dba)3(31mg,0.33mmol)。反应通过氮气鼓泡脱气15min。反应小瓶经密封并于120℃加热12h在油浴中。然后反应经过滤，浓缩并通过反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(129.6mg,54％)。LCMS(ESI):RT3.78min,[M+H]+362.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.22(s,1H),9.17(d,J＝2.3Hz,1H),8.72(s,1H),8.58(m,1H),8.45(d,J＝3.3Hz,1H),8.41(m,2H),7.23(d,J＝5.6Hz,1H),6.97(d,J＝8.7Hz,1H),4.77(m,1H),3.95(s,3H),1.63(d,J＝6.8Hz,6H).
实施例55:N-(2'-乙氧基-[2,5'-联嘧啶]-4-基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡 啶-6-胺
向玻璃小瓶添加2-甲氧基嘧啶-5-硼酸(0.105g,0.613mmol)、(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例12,步骤4)(0.176mg,0.613mmol)、Pd(Amphos)2Cl2(22mg,0.031mmol)、Na2CO3的2M溶液(0.46mL,0.92mmol)和乙腈(2.5mL)。混合物通过氮气鼓泡脱气20min。反应小瓶经密封并在微波中于140℃加热20min。或者，将反应密封并于100℃在油浴中搅拌2h。反应混合物冷却至室温，过滤并浓缩。通过反相HPLC纯化粗产物并冻干得到标题化合物(41mg,18％)。LCMS(ESI):RT 3.91min,[M+H]+377.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.31(s,1H),9.40(s,2H),8.73(d,J＝1.0Hz,1H),8.46(d,J＝5.9Hz,1H),8.39(d,J＝7.9Hz,2H),7.30(s,1H),4.85–4.71(m,1H),4.46(q,J＝7.1Hz,2H),1.61(d,J＝6.8Hz,6H),1.38(t,J＝7.1Hz,3H).
实施例56:N-(2-(4-异丙氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5- c]吡啶-6-胺
(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例12,步骤4)(100mg,0.35mmol)、4-异丙氧基哌啶(50mg,0.35mmol)、DIPEA(90mg,0.70mmol)在异丙醇(2mL)中的混合物于90℃加热2h。冷却的混合物经浓缩并通过反相HPLC纯化得到标题化合物(27.8mg,20％)。LCMS(ESI):RT3.92min,[M+H]+396.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.76(s,1H),8.65(d,J＝0.9Hz,1H),8.39(s,1H),8.32(s,1H),7.96(d,J＝5.6Hz,1H),6.38(d,J＝5.6Hz,1H),4.73–4.57(m,1H),4.28(m,2H),3.76(m,1H),3.70–3.56(m,1H),1.90–1.76(m,2H),1.56(d,J＝6.8Hz,6H),1.40(m,2H),1.10(d,J＝6.1Hz,6H).
实施例57:N-乙基-1-异丙基-6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-1H- 吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
步骤1:6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
于0℃向6-氯-5-氮杂吲哚(0.50g,3.3mmol)在DMF(8mL)中的溶液添加60％氢化钠(0.16g,3.9mmol)。混合物于0℃搅拌5min，然后添加2-溴丙烷(0.47mL,4.9mmol)。反应于室温搅拌2h。反应然后通过倾倒至饱和NH4Cl上而淬灭。产物以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。纯化粗产物通过在氧化硅上的快速色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(0.52g,82％)。
步骤2:6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲醛
向冷的(0℃)DMF(10mL)添加POCl3(1.1mL,12mmol)。反应于0℃搅拌20min。于室温滴加6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(0.47g,2.43mmol)在DMF(1mL)中的溶液。反应于60℃搅拌2h。混合物然后缓慢地通过倒至饱和碳酸氢钠溶液上而中和。产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。纯化粗产物通过在氧化硅上的快速色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(0.52g,95％)。
步骤3:6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酸
向6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲醛(0.52g,2.3mmol)在t-BuOH(10mL)中的溶液添加2-甲基-2-丁烯(2M，在THF中,12mL,23mmol)。然后添加亚氯酸钠(0.53g,4.6mmol)和磷酸二氢钠(2.8g,23mmol)在水(10mL)中的溶液。反应于室温搅拌18h。混合物然后以盐水稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗物质(0.42g,76％)不经进一步纯化而使用。
步骤4:6-氯-N-乙基-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
向6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酸(0.20g,0.84mmol)在DMF(5mL)中的溶液添加DIPEA(0.22g,1.7mmol)、HBTU(0.40g,1.0mmol)和乙基胺盐酸盐(84mg,1.0mmol)。所得混合物于室温搅拌2h。混合物然后以盐水稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗物质通过在氧化硅上的快速色谱纯化(溶剂梯度:0-5％MeOH/DCM)得到标题化合物(0.15g,67％)。
步骤5:N-乙基-1-异丙基-6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-1H-吡 咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
向玻璃小瓶添加2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(0.067g,0.32mmol)、6-氯-N-乙基-1-异丙基-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(0.086g,0.32mmol)、叔丁醇钠(96mg,0.97mmol)、t-BuOH(2.5mL)和氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(摩尔比PdP/P＝1:1)(50mg)。反应通过氮气鼓泡脱气15min。将反应密封并在油浴中于120℃加热12h。然后反应经过滤，浓缩并通过反相HPLC纯化得到标题化合物(129.6mg,54％)。LCMS(ESI):RT 3.50min,[M+H]+438.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.75(s,1H),9.02(s,1H),8.34(s,1H),8.13(d,J＝7.3Hz,2H),7.96(m,2H),6.34(d,J＝5.7Hz,1H),4.60(m,1H),4.24(m,2H),2.89(s,1H),2.73(s,1H),2.07(s,1H),1.91(m,2H),1.51(d,J＝6.7Hz,6H),1.48–1.37(m,2H),1.14(t,J＝7.2Hz,3H).
实施例58:1-异丙基-6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-1H-吡咯并 [3,2-c]吡啶-3-甲腈
1-异丙基-6-[[2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-基]氨基]吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(实施例115)(58mg,0.14mmol)和POCl3(10mL)的混合物于90℃搅拌20min。反应经浓缩。通过反相HPLC纯化粗产物并冻干得到标题化合物(22.3mg,40％)。LCMS(ESI):RT4.06min,[M+H]+392.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.89(s,1H),8.66(s,1H),8.46(d,J＝6.5Hz,2H),7.98(d,J＝5.6Hz,1H),6.37(d,J＝5.6Hz,1H),4.66(m,1H),4.23(m,2H),3.53–3.33(m,3H),1.98–1.83(m,2H),1.58–1.37(m,8H).
实施例59:1-异丙基-N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-3-(5-甲基-1,3,4- 噁二唑-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
步骤1:N'-乙酰基-6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰肼
6-氯-1-异丙基-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酸(实施例57,步骤3)(0.358g,1.5mmol)、DIPEA(0.4g,3mmol)、HBTU(697mg,1.80mmol)和乙酰肼(136mg,1.65mmol)在DMF(5mL)中的混合物于室温搅拌18h。反应然后以盐水稀释。产物以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。纯化粗产物通过在氧化硅上的快速色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(0.29g,66％).
步骤2:2-(6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-5-甲基-1,3,4-噁二唑
N'-乙酰基-6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰肼(0.15g,0.51mmol)和POCl3(5mL)的混合物于95℃搅拌1h。反应然后经浓缩。剩余物通过添加饱和碳酸氢钠中和。产物以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物通过在氧化硅上的快速色谱纯化(溶剂梯度:0-5％MeOH/DCM)得到标题化合物(0.091g,65％)。
步骤3:1-异丙基-N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-3-(5-甲基-1,3,4-噁 二唑-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
向玻璃小瓶添加2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(0.067g,0.31mmol)、2-(6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-5-甲基-1,3,4-噁二唑(0.085g,0.31mmol)、叔丁醇钠(91mg,0.92mmol)、t-BuOH(2.5mL)和氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(摩尔比PdP/P＝1:1)(50mg)。反应通过氮气鼓泡脱气15min。反应小瓶经密封并在油浴中于120℃加热6h。然后反应经过滤，浓缩并通过反相HPLC纯化得到标题化合物(31.5mg,23％)。LCMS(ESI):RT 4.25min,[M+H]+449.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.89(s,1H),8.99(d,J＝0.9Hz,1H),8.47(s,1H),8.26(s,1H),7.98(d,J＝5.6Hz,1H),6.37(d,J＝5.7Hz,1H),4.69(m,1H),4.25(m,2H),3.55–3.34(m,4H),2.58(s,3H),1.91(d,J＝9.9Hz,2H),1.56(d,J＝6.7Hz,6H),1.52–1.37(m,2H).
实施例60:6-((2-(6,7-二氢-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-5(4H)-基)嘧啶-4-基)氨 基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
6-[(2-氯嘧啶-4-基)氨基]-1-异丙基-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(实施例51,步骤5)(11.4mg,0.027mmol)、4-乙氧基哌啶(27mg,0.21mmol)、DIPEA(27mg,0.21mmol)在2-丙醇(3mL)中的混合物于100℃搅拌2h。反应混合物经浓缩并且反应通过反相HPLC纯化得到标题化合物(11.4mg,13％)。LCMS(ESI):RT 3.38min,[M+H]+418.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.48(s,1H),9.81(s,1H),9.02(d,J＝0.9Hz,1H),8.41(s,1H),8.19(s,1H),7.98(d,J＝5.7Hz,1H),7.46(s,2H),6.96(s,1H),6.38(d,J＝5.7Hz,1H),4.81(s,2H),4.76–4.55(m,1H),4.11(t,J＝5.7Hz,2H),2.78(s,2H),1.57(d,J＝6.7Hz,6H).
实施例61:1-(4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶- 2-基)-N-甲基-1H-咪唑-4-甲酰胺
步骤1:1-[4-[(1-异丙基-2-甲基-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基]嘧啶-2-基]咪 唑-4-甲酸
1H-咪唑-4-甲酸甲基酯(64mg,0.51mmol)和N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(140mg,0.46mmol)、碳酸铯(140mg,0.46mmol)在t-BuOH中的混合物在微波辐射下于150℃加热30min。反应经过滤并浓缩得到标题化合物(0.31g,定量)。粗物质不经纯化用于后续步骤中。
步骤2:1-(4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2- 基)-N-甲基-1H-咪唑-4-甲酰胺
粗的1-[4-[(1-异丙基-2-甲基-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基]嘧啶-2-基]咪唑-4-甲酸(0.10g,0.26mmol)、DIPEA(0.14mL,0.79mmol)、HBTU(210mg,0.53mmol)的混合物于室温搅拌30min。添加40wt％甲基胺水溶液并且搅拌反应30min。反应然后经浓缩并且反应通过反相HPLC纯化得到标题化合物(7.7mg,7.4％)。LCMS(ESI):RT 3.68min,[M+H]+392.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.50(s,1H),8.60(s,1H),8.55(d,J＝1.3Hz,1H),8.38(d,J＝5.9Hz,1H),8.27(d,J＝1.3Hz,2H),8.13(d,J＝4.8Hz,1H),7.30(s,1H),4.79(m,2H),2.77(d,J＝4.8Hz,3H),2.60(s,3H),1.64(d,J＝6.9Hz,6H).
实施例62:5-(4-((1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-基)吡 啶-2-醇
向1-异丙基-N-[2-(6-甲氧基-3-吡啶基)嘧啶-4-基]咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例54)(30mg,0.083mmol)在乙腈(5mL)中的溶液添加TMSI(0.1mL)。反应于50℃搅拌4h。反应经浓缩并通过反相HPLC纯化得到标题化合物(3.7mg,13％)。LCMS(ESI):RT3.20min,[M+H]+348.2,方法＝B.
实施例63:N-(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)-1-异丙基-6-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧 啶-4-基氨基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
步骤1:6-氯-3-碘代-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
向100mL3颈圆底烧瓶添加6-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(1.00g,6.55mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液、氢氧化钾(1.40g,24.9mmol)。并于室温将反应混合物搅拌20min，然后将I2(1.66g,6.54mmol,1.00)添加至溶液中。并于室温将反应混合物再搅拌30min。反应混合物以H2O(50mL)稀释并且固体通过过滤收集。固体经减压干燥过夜得到6-氯-3-碘代-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(1.70g,93.0％)，为黄色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝1.321,[M+H]+＝279,方法＝N.
步骤2:6-氯-3-碘代-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
向吹扫并保持以氮气的惰性气氛的100mL 3颈圆底烧瓶中添加6-氯-3-碘代-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(1.70g,6.10mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20.0mL)中的溶液，接着添加氢化钠(600mg,25.0mmol)。接着伴随搅拌于0℃滴加2-碘丙烷(2.20g,12.9mmol)。并于室温将反应混合物搅拌16h。然后反应通过添加水来淬灭(50mL)。所得溶液以乙酸乙酯萃取(3x50mL)并且各有机层经分离和合并。合并的有机层以盐水洗涤(100mL)，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法以乙酸乙酯/石油醚(1:7)纯化得到标题化合物(1.40g,72.0％)，为黄色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝1.549,[M+H]+＝321,方法＝M.
步骤3:6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酸
向吹扫并保持以氮气的惰性气氛的500mL 3颈圆底烧瓶中添加6-氯-3-碘代-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(14.0g,43.6mmol)在四氢呋喃(150mL)中的溶液。接着伴随搅拌于-78℃滴加n-BuLi(30mL,2.5M在庚烷中的溶液)。于-78℃搅拌30min后，于-78℃分若干批次向反应混合物添加CO2(固体)。所得溶液再搅拌60min，同时将温度保持在-78℃。反应混合物通过添加饱和氯化铵(50mL)淬灭。所得溶液以H2O(200mL)稀释，以乙酸乙酯萃取(2x300mL)并且各有机层经分离和合并。合并的有机层以盐水洗涤(500mL)，经无水硫酸钠干燥并且真空浓缩得到标题化合物(7.00g,67.0％)，为黄色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝1.254,[M+H]+＝239,方法＝M；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.58(s,1H),8.95(s,1H),8.35(s,1H),7.89(s,1H),4.92-4.83(m,1H),1.50-1.43(m,6H).
步骤4:N-(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)-6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3- 甲酰胺
向25mL小瓶中添加6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酸(300mg,1.26mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液、2-(1H-咪唑-1-基)乙-1-胺(280mg,2.52mmol)、HBTU(600mg,1.58mmol)和DIPEA(500mg,3.87mmol)。并将反应混合物于室温搅拌3h。固体经滤出并且滤液经真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱法以二氯甲烷/甲醇(100:10)纯化得到标题化合物(500mg)，为黄色油状物。LCMS(ESI):RT(min)＝0.604,[M+H]+＝332,方法＝G.
步骤5:N-(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)-1-异丙基-6-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶- 4-基氨基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
向30mL密封试管中添加N-(2-(1H-咪唑-1-基)乙基)-6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(300mg,0.900mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的溶液、2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(189mg,0.910mmol)、XantPhos(105mg,0.180mmol)、Pd2(dba)3.CHCl3(93.0mg,0.0900mmol)和Cs2CO3(870mg,2.67mmol)。反应混合物在微波辐射下于140℃加热75min。固体经滤出并且滤液经真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法以二氯甲烷/甲醇(10:1)纯化得到标题化合物(57.4mg,13.0％)，为浅黄色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝1.816,[M+H]+＝504.45,方法＝J；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.81(s,1H),8.99(s,1H),8.37(s,1H),8.19-8.17(m,1H),8.12(s,1H),7.96-7.95(m,1H),7.63(s,1H),7.20(s,1H),6.89(s,1H),6.35-6.33(m,1H),4.64-4.57(m,1H),4.26-4.15(m,4H),3.60-3.56(m,2H),3.48-3.30(m,6H),1.93-1.90(m,2H),1.52-1.50(m,6H),1.47-1.23(m,2H)。
实施例64:N-乙基-1-异丙基-6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-1H- 吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
步骤1:6-氯-1-异丙基-3-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
向玻璃小瓶添加6-氯-3-碘代-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(实施例63,步骤2)(0.15g,0.47mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(0.11g,0.56mmol)、双(二-叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(II)(35mg,0.047mmol)、碳酸钠的2M溶液(0.5mL,0.94mmol)和乙腈(2.5mL)。反应小瓶经密封并于100℃搅拌1h。反应经过滤，浓缩并通过在硅胶上的快速色谱纯化(溶剂梯度:0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(0.12g,98％)。
步骤2:N-乙基-1-异丙基-6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-1H-吡 咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
向玻璃小瓶添加2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(0.056g,0.27mmol)、6-氯-1-异丙基-3-(1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(0.070g,0.27mmol)、叔丁醇钠(80mg,0.81mmol)、t-BuOH(2.5mL)和氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(摩尔比PdP/P＝1:1)(50mg)。反应通过氮气鼓泡脱气15min。反应小瓶经密封并在油浴中于120℃加热3h。然后反应经过滤，浓缩并通过制备性反相HPLC纯化得到标题化合物(19.8mg,17％)。LCMS(ESI):RT 3.95min,[M+H]+433.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.68(s,1H),9.71(s,1H),9.05(s,1H),8.33(s,1H),7.95(d,J＝5.7Hz,1H),7.85(s,1H),7.73(s,1H),6.64(d,J＝2.1Hz,1H),6.36(d,J＝5.7Hz,1H),4.61(m,1H),4.26(m,2H),3.57–3.35(m,3H),2.05–1.83(m,2H),1.53(d,J＝6.7Hz,6H),1.49–1.35(m,2H).
下表1中的各化合物根据如在本文另一实施例中所描述的类似的试验方法(使用适当取代的试剂)制备，这样的实施例在合成方法栏中列为参考。
表1.
下表2中的各化合物根据如下述两种一般合成方法(使用适当取代的试剂)中的一种方法制备，这样的实施例在合成方法栏中列为参考。
一般方法A:
称重适当取代的胺(1当量.,0.13mmol)进入1打兰(dram)圆锥形小瓶。向其中小瓶添加溶解在沸腾的异丙醇中的N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(0.667当量.,0.087mmol)至浓度为约35mM。然后添加三乙基胺(2当量.,0.26mmol)。反应于110℃继续过夜或者直到UPLC分析表明转化完全。反应混合物经减压浓缩。任何Boc-保护的物质任选地通过在4MHCl中震荡2小时脱保护，并且然后减压除去酸性溶剂。在除去所有的挥发物之后，粗产物溶解于二氯甲烷(2mL)并以碳酸氢钠(2x 1mL)洗涤。有机部分经分离并减压浓缩。粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到期望产物。
一般方法B:
称重适当取代的胺(1当量.,0.13mmol)进入1打兰圆锥形小瓶。向其中小瓶添加溶解在沸腾的异丙醇中的N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(0.667当量.,0.087mmol)至浓度为约35mM。然后添加三乙基胺(2当量.,0.26mmol)。反应混合物经历于220℃和300psi的微波辐照(或设备的最大值)30分钟。反应混合物经减压浓缩。在除去所有的挥发物之后，粗产物溶解于二氯甲烷(2mL)中并以碳酸氢钠(2x 1mL)洗涤。有机部分经分离并减压浓缩。粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到期望产物。
表2
下表3中的各化合物根据如在本文另一实施例中所描述的类似的试验方法(使用适当取代的试剂)制备，这样的实施例在合成方法栏中列为参考。
表3.
实施例A23:氰基(羟甲基)甲基乙酸乙基酯
2-氰基丙酸乙基酯(2.238g,17.6mmol)、低聚甲醛(0.87g,26.4mmol)和碳酸钾(7.3g,52.8mmol)在乙醇(100mL)中的混合物于室温搅拌2.5h，然后通过硅藻土垫过滤。滤液经真空浓缩并且剩余物在EtOAc和水之间分配。水相以另外的EtOAc萃取，并且合并的有机萃取物经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度10-50％EtOAc/环己烷)得到标题化合物，为无色油状物(1.633g,59％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ4.31(2H,q,J＝7.1Hz),3.97-3.86(2H,m),2.37(1H,t,J＝7.1Hz),1.60(3H,s),1.35(3H,t,J＝7.1Hz).
实施例A24:3-氨基-2-(2,2-二甲基丙酰基氧基甲基)-2-甲基丙酸乙基酯盐酸盐
步骤1:氰基-(2,2-二甲基丙酰基氧基甲基)甲基乙酸乙基酯
于0℃向氰基(羟甲基)甲基乙酸乙基酯(0.5g,3.18mmol)在二氯甲烷(8mL)中的溶液添加三甲基乙酰氯(0.47mL,3.82mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.827mL,4.77mmol)。并将反应混合物于室温搅拌3h，然后以二氯甲烷稀释，相继以1M HCl和饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法纯化(氧化硅,梯度5-20％EtOAc/环己烷)得到标题化合物，为无色油状物(0.693g,90％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ4.37(1H,d,J＝11.0Hz),4.31(1H,d,J＝11.0Hz),4.30(2H,q,J＝7.1Hz),1.63(3H,s),1.35(3H,t,J＝7.1Hz),1.23(9H,s).
步骤2:3-氨基-2-(2,2-二甲基丙酰基氧基甲基)-2-甲基丙酸乙基酯盐酸盐
氰基-(2,2-二甲基丙酰基氧基甲基)甲基乙酸乙基酯(0.136g,0.564mmol)、氧化铂(IV)(12mg,0.05mmol)、乙醇(6mL)和4M HCl在二噁烷(0.25mL)中的混合物在氢气气球下搅拌3h，然后通过硅藻土垫过滤。滤液经真空浓缩得到标题化合物，为无色胶状物(定量)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.19(3H,br s),4.17-4.09(4H,m),3.15-2.98(2H,m),1.24(3H,s),1.20(3H,t,J＝7.1Hz),1.12(9H,s).
实施例A25:3-氨基-2-羟基-2-甲基丙酸乙基酯
向2-羟基-2-甲基-3-硝基丙酸乙基酯(J.Am.Chem.Soc.,2008,130,13862)(0.5g,2.822mmol)在乙酸(35mL)中的溶液经10min分份添加锌屑(7.38g,113mmol)。混合物在浴中于15℃搅拌6.5h，然后通过硅藻土垫过滤.滤液经真空浓缩，以甲苯真空共浓缩并且剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(梯度2-12％2M氨，在甲醇/二氯甲烷中)得到标题化合物，为无色油状物(0.378g,91％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ4.25(2H,q,J＝7.1Hz),3.04(1H,d,J＝13.1Hz),2.76(1H,d,J＝13.1Hz),2.73(3H,br s),1.36(3H,s),1.31(3H,t,J＝7.1Hz).
实施例A26:2,2-二甲基-3-(2,2,2-三氟乙酰基氨基)丙酸乙基酯
于0℃向3-氨基-2,2-二甲基丙酸乙基酯(0.5g,3.44mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液添加N,N-二异丙基乙基胺(0.895mL,5.165mmol)，接着经5min滴加三氟乙酸酐(0.574mL,4.13mmol)。混合物于0℃搅拌2.5h，然后以1M HCl洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物，为无色油状物(定量)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.10(1H,br s),4.18(2H,q,J＝7.1Hz),3.44(2H,d,J＝6.4Hz),1.28(3H,t,J＝7.1Hz),1.23(6H,s).
实施例A27:2,2-二甲基-3-[甲基-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]丙酸乙基酯
向2,2-二甲基-3-(2,2,2-三氟乙酰基氨基)丙酸乙基酯(0.877mg,3.44mmol)在THF(10mL)中的溶液于0℃添加碘甲烷(0.279mL,4.47mmol)，接着经10min分份添加氢化钠(60％在油状物中的分散体,0.413g,10.3mmol)。混合物于室温搅拌4h，并且然后添加至1MHCl和二乙醚的0℃混合物。水相以另外的二乙醚萃取，并且合并的有机萃取物经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法纯化(氧化硅，梯度5-20％EtOAc/环己烷)得到标题化合物，为无色油状物(0.669g,76％2步)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ4.18(2H,q,J＝7.1Hz),3.72(2H,s),3.11(3H,q,J＝1.7Hz),1.30(3H,t,J＝7.1Hz),1.24(6H,s).
实施例A28:2,2-二甲基-3-甲基氨基丙酸乙基酯
于2M氨中的2,2-二甲基-3-[甲基-(2,2,2-三氟乙酰基)氨基]丙酸乙基酯(0.669g,2.62mmol)在甲醇(20mL)中的溶液于室温搅拌3h，然后添加在甲醇(10mL)中的7M氨并持续搅拌18h。反应混合物经真空浓缩并且剩余物通过在氧化硅上的色谱法纯化(溶剂梯度1-7％，2M氨在甲醇中/二氯甲烷)得到标题化合物，为无色油状物(0.32g,77％)。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ4.16(2H,q,J＝7.1Hz),2.65(2H,s),2.45(3H,s),1.27(3H,t,J＝7.1Hz),1.22(6H,s),1.15(1H,br s).
实施例A29:2-氰基-4-(2,2-二甲基丙酰基氧基)-2-甲基丁酸乙基酯
于0℃向2-氰基丙酸乙酯(0.636g,5mmol)在二甲基甲酰胺(3mL)中的溶液经5min分份添加氢化钠(60％在油中的悬浮液,0.22g,5.5mmol)。于室温搅拌混合物10min，然后再冷却至0℃，同时添加2,2-二甲基丙酸2-溴乙基酯(US 2012/0202785)(1.254g,6mmol)在二甲基甲酰胺(2mL)中的溶液。并于室温将反应混合物搅拌16h，然后以EtOAc稀释，相继以1MHCl、水和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(梯度5-20％EtOAc/环己烷)得到标题化合物，为无色油状物(1.048g,82％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ4.33-4.18(4H,m),2.35(1H,dt,J＝14.5,6.5Hz),2.13(1H,dt,J＝14.5,6.3Hz),1.66(3H,s),1.34(3H,t,J＝7.1Hz),1.21(9H,s).
实施例A30:2-氨基甲基-4-(2,2-二甲基丙酰基氧基)-2-甲基丁酸 乙基酯
2-氰基-4-(2,2-二甲基丙酰基氧基)-2-甲基丁酸乙基酯(0.5g,1.96mmol),氧化铂(IV)(30mg,0.13mmol)、乙醇(20mL)和4M HCl在二噁烷(1mL)中的混合物在氢气球下搅拌4h，然后通过硅藻土垫过滤。滤液经真空浓缩，并且剩余物通过在氧化硅上的色谱法纯化(溶剂梯度:2-6％2M氨，在甲醇/二氯甲烷中)得到标题化合物，为无色胶状物(0.384g,76％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ4.17(2H,q,J＝7.1Hz),4.13-4.07(2H,m),2.89(1H,d,J＝13.2Hz),2.74(1H,d,J＝13.2Hz),2.03(1H,dt,J＝14.1,6.7Hz),1.81(1H,dt,J＝14.0,6.8Hz),1.27(3H,t,J＝7.1Hz),1.20(3H,s),1.19(11H,s).
实施例A31:(E)-2,2-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2- 基)丁-3-烯酸 乙基酯
的混合物乙基2,2-二甲基-3-丁烯酸乙基酯(J.Org.Chem.,2000,65,8402)(0.462g,3.25mmol)、乙烯基硼酸频哪醇酯(0.20g,1.3mmol)、Grubbs催化剂(第二代)(55mg,0.065mmol)和二氯甲烷(13mL)在回流下加热16h。添加另一份Grubbs催化剂(第二代)(55mg,0.065mmol)并持续加热24h。反应混合物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度：0-10％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到标题化合物，为无色油状物(0.089g,27％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ6.74(1H,d,J＝18.3Hz),5.50(1H,d,J＝18.3Hz),4.12(2H,q,J＝7.1Hz),1.30(6H,s),1.27(12H,s),1.24(3H,t,J＝7.1Hz).
实施例A32:[(E)-1,1-二甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷- 2-基)烯丙基]氨基甲酸叔丁基酯
标题化合物(118.5mg,53％)从(1,1-二甲基烯丙基)氨基甲酸叔丁基酯(WO2007/115058)(0.2g,1.08mmol)和乙烯基硼酸频哪醇酯(0.111g,0.72mmol)根据对于实施例A31描述的类似方法制备。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ6.64(1H,d,J＝18.2Hz),5.47(1H,d,J＝18.2Hz),4.56(1H,br s),1.42(9H,s),1.37(6H,s),1.27(12H,s).
实施例A33:二甲基-(5-三丁基甲锡烷基三唑-2-基)胺
于-78℃将n-丁基锂(2.5M在己烷中,1.34mL,3.35mmol)添加至2-二甲基氨基噻唑(J.Chem.Soc.,Perkin Trans.1,1983,341)(0.39g,3.04mmol)在THF(10mL)中的溶液。混合物于-78℃搅拌30min，并且添加三丁基三氯化锡(0.817mL,3.35mmol)在THF(3mL)中的溶液。经90min将反应混合物温热至0℃。添加饱和氯化铵并且混合物以EtOAc萃取。合并的有机相以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物，为浅黄色油状物(定量)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.10(1H,s),3.12(6H,s),1.59-1.51(6H,m),1.39-1.27(6H,m),1.08-1.04(6H,m),0.89(9H,t,J＝7.3Hz).
实施例A34:2-乙基-5-三丁基甲锡烷基噻唑
标题化合物(1.1g,100％)从2-乙基噻唑(0.3g,2.63mmol)根据对于实施例A33描述的类似方法制备。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.59(1H,s),3.10(2H,q,J＝7.6Hz),1.59-1.51(6H,m),1.41(3H,t,J＝7.6Hz),1.38-1.28(6H,m),1.13-1.09(6H,m),0.89(9H,t,J＝7.3Hz).
实施例A35:(反式)-3-羟基-4-甲氧基哌啶和(反式)-4-羟基-3-甲氧基哌啶
步骤1:(反式)-3-羟基-4-甲氧基哌啶-1-甲酸苄基酯和(反式)-4-羟基-3-甲氧基 哌啶-1-甲酸苄基酯
向7-氧杂-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-3-甲酸苄基酯(1.9g,8.15mmol)在甲醇(17mL)中的混合物缓慢地添加硝酸铈铵(0.447mg,0.815mmol)；反应混合物变成深橙色。混合物在氮气下搅拌12h。该混合物经蒸发至硅藻土上并且产物通过色谱法在氧化硅上纯化(洗脱：EtOAc/环己烷)得到产物，为无色油状物，区位异构体的混合物。(1.45g,67％)。LCMS(ESI):[M+H]+265.
步骤2:(反式)-3-羟基-4-甲氧基哌啶和(反式)-4-羟基-3-甲氧基哌啶
(反式)-3-羟基-4-甲氧基哌啶-1-甲酸苄基酯和(反式)-4-羟基-3-甲氧基哌啶-1-甲酸苄基酯(1.2g,4.5mmol)的混合物溶解于工业甲基化酒精(industrial methylatedspirits,30mL)并且混合物以氩气吹扫。添加Pd-C(10％,100mg)，作为在工业甲基化酒精的浆料(5mL)并且混合物在氢气氛围下搅拌2h。混合物以氩气吹扫，过滤以除去催化剂并且所得溶液真空浓缩得到无色油状物，其静置时结晶，为区位异构体的混合物。LCMS(ESI):[M+H]+132.
实施例A36:4-二甲基氨基甲基-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
1-氧杂-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯(427mg,2.0mmol)在二甲基胺(2M在甲醇中的溶液)(4mL)中于室温搅拌64h。反应混合物经真空浓缩。剩余物吸收在碳酸氢钠水溶液中并以乙酸乙酯(2×25mL)萃取。将有机萃取物合并，经硫酸镁干燥并真空浓缩。粗物质通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:1-10％2M甲醇性氨/二氯甲烷)得到无色油状物(428mg,83％)。LCMS(ESI):[M-tBu]+203.
实施例A37:4-二甲基氨基甲基-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
氢化钠(60％在油状物中的分散体)(131mg,3.28mmol)添加至4-二甲基氨基甲基-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(424mg,1.64mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液并且所得混合物于室温搅拌45min。添加甲基碘(0.11mL,1.72mmol)并且反应混合物于室温搅拌3h。反应混合物通过缓慢添加水淬灭并且然后以碳酸氢钠水溶液(70mL)稀释。混合物水溶液以乙酸乙酯萃取(4×15mL)。将有机萃取物合并，以盐水洗涤，经硫酸镁干燥并真空浓缩。粗剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:1-5％2M甲醇性氨/二氯甲烷)得到无色油状物(329mg,76％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.84–3.64(m,2H),3.19(s,3H),3.14–3.01(m,2H),2.31–2.28(m,8H),1.81–1.75(m,2H),1.48–1.41(m,2H),1.45(s,9H)。
实施例A38:(4-甲氧基哌啶-4-基甲基)二甲基胺
将三氟乙酸(2.5mL)添加至4-二甲基氨基甲基-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(337mg,1.2mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液并于室温搅拌20min。反应混合物以甲醇稀释并装载至SCX筒。标题化合物以甲醇洗涤并且然后以2M氨/甲醇洗脱。碱性级分经真空浓缩得到无色油状物LCMS(ESI):[M+H]+173.
实施例A39:4-羟基-4-甲氧基甲基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
将甲醇钠(122mg,2.3mmol)添加至1-氧杂-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯(400mg,1.9mmol)在无水甲醇(1.9mL)中的溶液并且反应溶液于室温搅拌64h。反应混合物经真空浓缩。粗反应吸收在氯化铵水溶液中并以乙酸乙酯萃取(2x)。将有机萃取物合并，经硫酸镁干燥并真空浓缩。粗物质通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:5-50％乙酸乙酯/环己烷)得到无色油状物(413mg,90％)。LCMS(ESI):[M+Na]+268.
实施例A40:4-甲氧基-4-甲氧基甲基哌啶
4-甲氧基-4-甲氧基甲基哌啶从4-羟基-4-甲氧基甲基哌啶-1-甲酸叔丁基酯根据根据那些对于实施例A37和A38描述的类似方法合成。这得到了无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+160.
实施例A41:4-(2-羟基乙基)-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
经2min于0℃将硼烷二甲基硫化物复合物(3.8mL,40mmol)添加至在四氢呋喃(90mL)中的4-甲氧基-4-乙烯基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(Monatshefte fuer Chemie,2004,135(7),899–909)(4.8g,20mmol)。15min后，反应混合物温热至室温并再搅拌30min。将反应混合物冷却至0℃并滴加6M氢氧化钠(33mL,200mmol)，接着缓慢添加过氧化氢溶液(30wt.％在水中)(23mL,200mmol)。并将反应混合物搅拌30min并且然后以偏亚硫酸氢钠水溶液淬灭并真空浓缩以除去挥发性有机萃取物。所得混合物水溶液以乙酸乙酯(2x)萃取。将有机萃取物合并，以盐水洗涤(50mL)，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度：50-100％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到无色油状物(1.68g,33％)。LCMS(ESI):[M+H]+260.
实施例A42:2-(4-甲氧基哌啶-4-基)乙醇
2-(4-甲氧基哌啶-4-基)乙醇从4-(2-羟基乙基)-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯在于对于实施例A38所描述的类似方法中合成。这得到了无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.78(t,J＝6.5Hz,2H),3.21(s,3H),3.18–3.09(m,4H),2.03–1.97(m,2H),1.91–1.83(m,2H),1.81(t,J＝6.5Hz,2H)。
实施例A43:4-(2-甲磺酰基氧基乙基)-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
于0℃将甲磺酰氯(0.13mL,1.70mmol)滴加至4-(2-羟基乙基)-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(400mg,1.54mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.40mL,2.31mmol)在四氢呋喃(4mL)中的溶液。反应混合物温热至室温并搅拌90min。反应混合物以氢氧化铵水溶液淬灭并且然后真空浓缩。剩余物吸收在碳酸氢钠水溶液中并以乙酸乙酯(2x)萃取。将有机萃取物合并，以盐水洗涤(15mL)，经硫酸钠干燥并真空浓缩得到无色油状物(511mg,98％)。LCMS(ESI):[M+Na]+360.
实施例A44:4-(2-二甲基氨基乙基)-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
在二甲基胺中的4-(2-甲磺酰基氧基乙基)-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(221mg,0.65mmol)(2M在四氢呋喃中的溶液)(2mL)于65℃在密封试管中加热。反应混合物以甲醇稀释并装载至SCX筒上。标题化合物以甲醇洗涤并以2M氨/甲醇洗脱。碱性级分真空浓缩得到浅黄色油状物(187mg,69％)。LCMS(ESI):[M+H]+257.
实施例A45:[2-(4-甲氧基哌啶-4-基)乙基]二甲基胺
[2-(4-甲氧基哌啶-4-基)乙基]二甲基胺从4-(2-二甲基氨基乙基)-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯在对于实施例A38描述的类似方法中合成。这得到了浅黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+187.
实施例A46:4-(2-叠氮基乙基)-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
将叠氮化钠(64mg,1.0mmol)添加至4-(2-甲磺酰基氧基乙基)-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(302mg,0.9mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1.5mL)中的溶液并于40℃搅拌16h。反应混合物以二氯甲烷稀释并通过在氧化硅上的柱色谱纯化(溶剂梯度:10-50％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到无色油状物(201mg,79％)。LCMS(ESI):[M+H]+285.
实施例A47:2-(4,5,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-2-基)乙醇 盐酸盐和2-(4,5, 6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)乙醇 盐酸盐
步骤1:3-[1-二甲基氨基亚甲-(Z)-基]-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯
4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯(2g,10.0mmol)溶解于二甲基甲酰胺二甲基缩醛(10mL)并且反应混合物于回流加热16h。将反应冷却至室温，真空浓缩并且所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂:100％EtOAc)得到化合物，为油状物(0.46g,18％)。1H NMR 400MHzδ(CDCl3):7.49(1H,s),4.55(2H,s),3.60(2H,d,J＝6.5Hz),3.11(6H,s),2.44(2H,t,J＝6.5Hz),1.48(9H,s).
步骤2:2-(2-羟基乙基)-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁基酯和1- (2-羟基乙基)-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁基酯
向3-[1-二甲基氨基亚甲-(Z)-基]-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯(455mg,1.78mmol)在工业甲基化酒精(10mL)中的溶液添加2-羟基乙基肼(163mg,2.15mmol)并且反应混合物于回流加热4h。反应混合物经真空浓缩并且所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂:100％EtOAc)得到化合物，为区位异构体的1:1.3混合物(0.45g,94％)。1H NMR 400MHzδ(CDCl3):7.32(1H,s),7.20(1.3H,s),4.46(2.6H,s),4.43(2H,s),4.18(2.6H,t,J＝4.8Hz),4.10-4.07(2H,m),4.02-3.92(4.6H,m),3.77-3.64(4.6h，m),3.31(1H,br s),3.13(1.3H,br s),2.75(2.6H,t,J＝4.8Hz),2.68(2H,t,J＝4.9Hz),1.48(20.7H,s).
步骤3:2-(4,5,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-2-基)乙醇 盐酸盐和2-(4,5,6,7- 四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)乙醇 盐酸盐
2-(2-羟基乙基)-2,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁基酯和1-(2-羟基乙基)-1,4,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-5-甲酸叔丁基酯(200mg,0.75mmol)在甲醇(1mL)中的混合物以HCl/二噁烷(4N,2mL)处理。反应于室温搅拌1h，然后真空浓缩得到标题产物的混合物，为白色固体。(152mg,100％)。1H NMR 400MHzδ(DMSO-d6):9.30(4.6H,br s),7.60(1.3H,s),7.36(1H,s),4.15-4.01(9.2H,m),3.77-3.62(4.6h，m),3.40(4.6H,m),2.97(2H,t,J＝6.1Hz),2.85(2.6H,t,J＝6.1Hz).
实施例A48:(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-2-甲氧基甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡 啶-6-基)胺
步骤1:N-(6-溴-4-异丙基氨基吡啶-3-基)-2-甲氧基乙酰胺
于0℃向6-溴-N4-异丙基吡啶-3,4-二胺(实施例12,步骤2)(200mg,0.88mmol)和三乙基胺(243μL,1.75mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液滴加甲氧基乙酰氯(104μL,1.14mmol)并且反应混合物于室温搅拌30min。反应混合物以水稀释并以二氯甲烷(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩得到标题化合物(263mg,100％)。1H NMR 400MHz(CDCl3)δ8.01(1H,br s),7.89(1H,s),6.72(1H,s),4.95-4.81(1H,m),4.10(2H,s),3.53(3H,s),1.26(6H,d,J＝6.3Hz).
步骤2:6-溴-1-异丙基-2-甲氧基甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
N-(6-溴-4-异丙基氨基吡啶-3-基)-2-甲氧基乙酰胺(263mg,0.88mmol)和碳酸钾(157mg,1.14mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液于100℃加热16h。反应混合物以水稀释且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到化合物，为灰白色固体(143mg,57％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝284.
步骤3:(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-2-甲氧基甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6- 基)胺
6-溴-1-异丙基-2-甲氧基甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(143mg,0.50mmol)、4-氨基-2-氯嘧啶(65mg,0.50mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(23mg,25μmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(58mg,0.10mmol)、碳酸铯(328mg,1.00mmol)和二噁烷(5mL)密封在小瓶中并且混合物以氩气脱气。反应混合物于100℃加热3h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到化合物，为灰白色固体(113mg,67％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝333.
实施例A49:(2-氯嘧啶-4-基)-[1-异丙基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑 并[4,5-c]吡啶-6-基]胺
步骤1:乙酸(6-溴-4-异丙基氨基吡啶-3-基氨基甲酰基)甲基酯
于0℃乙氧基乙酰氯(1.8mL,16.9mmol)滴加至6-溴-N4-异丙基吡啶-3,4-二胺(实施例12,步骤2)(3g,13.0mmol)和三乙基胺(3.6mL,26.0mmol)在二氯甲烷中的溶液并且所得混合物于0℃搅拌15min。反应混合物以水稀释并且产物以二氯甲烷(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并且真空浓缩以得到粗的标题产物，为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝330.
步骤2:(6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇
乙酸(6-溴-4-异丙基氨基吡啶-3-基氨基甲酰基)甲基酯(4.28g,13.0mmol)和碳酸钾(2.34g,16.9mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的悬浮液于120℃加热5h。反应混合物冷却至室温并以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物溶解于甲醇(20mL)和水(5mL)中并添加氢氧化锂一水合物(200mg,4.8mmol)。反应混合物于室温搅拌16h。反应混合物以HCl(1N)酸化直到pH5，接着加入饱和碳酸氢钠水溶液直到pH 8。产物以EtOAc(3x)萃取并且合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-5％甲醇/EtOAc)得到化合物，为灰白色固体(1.53g,43％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝270.
步骤3:6-溴-1-异丙基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
向(6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇(1.53g,5.77mmol)在四氢呋喃(20mL)中的溶液添加3,4-二氢吡喃(790μL,8.66mmol)和p-甲苯磺酸(98mg,0.58mmol)并且所得混合物于回流加热1h。添加3,4-二氢吡喃(0.4mL,4.3mmol)并持续加热16h。反应混合物以稀释饱和碳酸氢钠水溶液并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-5％甲醇/EtOAc)得到化合物，为灰白色固体(1.89g,94％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝354.
步骤4:(2-氯嘧啶-4-基)-[1-异丙基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并 [4,5-c]吡啶-6-基]-胺
6-溴-1-异丙基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(1.89g,5.34mmol)、4-氨基-2-氯嘧啶(691mg,5.34mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(244mg,0.27mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(617mg,1.07mmol),碳酸铯(3.48g,10.67mmol)和二噁烷(50mL)密封在小瓶中并且混合物以氩气脱气。反应混合物于100℃加热1h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-5％甲醇/EtOAc)得到化合物，为灰白色固体(1.68g,78％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝403.
实施例A50:(2-氯嘧啶-4-基)-(4,4-二甲基-3,4-二氢-2H-1-氧杂-4a,7,9-三氮 杂芴-6-基)胺
步骤1:3-(2-溴-5-硝基吡啶-4-基氨基)-3-甲基丁-1-醇
向2,4-二溴-5-硝基吡啶(0.5g,1.77mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液添加3-氨基-3-甲基丁-1-醇(220mg,2.12mmol)并且反应混合物于回流加热16h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/戊烷)得到化合物，为黄色固体(480mg,89％)。1H NMR 400MHzδ(CDCl3):8.96(1H,s),8.71(1H,br s),7.12(1H,s),3.89-3.82(2H,m),2.07(2H,t,J＝6.4Hz),1.55(6H,s),1.45(1H,t,J＝4.6Hz).
步骤2:(2-溴-5-硝基吡啶-4-基)-[1,1-二甲基-3-(四氢吡喃-2-基氧基)丙基]胺
向3-(2-溴-5-硝基吡啶-4-基氨基)-3-甲基丁-1-醇(480mg,1.58mmol)在四氢呋喃(15mL)中的溶液添加3,4-二氢吡喃(360μL,3.95mmol)和p-甲苯磺酸(27mg,0.16mmol)并且所得混合物于回流加热16h。反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/戊烷)得到化合物(0.61g,100％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝388.
步骤3:6-溴-N4-[1,1-二甲基-3-(四氢吡喃-2-基氧基)丙基]吡啶-3,4-二胺
向(2-溴-5-硝基吡啶-4-基)-[1,1-二甲基-3-(四氢吡喃-2-基氧基)-丙基]胺(0.71g,1.84mmol)在工业甲基化酒精(5mL)中的溶液添加氧化铂(IV)(36mg,0.16mmol)。反应混合物在氢气气氛下于室温搅拌1h。反应混合物经真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/环己烷)得到化合物，为橙色油状物(373mg,57％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝358.
步骤4:6-溴-1-[1,1-二甲基-3-(四氢吡喃-2-基氧基)-丙基]-1,3-二氢咪唑并 [4,5-c]吡啶-2-酮
将光气溶液(20％，在甲苯中)(0.82mL,1.56mmol)滴加至6-溴-N4-[1,1-二甲基-3-(四氢吡喃-2-基氧基)丙基]吡啶-3,4-二胺(373mg,1.04mmol)和三乙基胺(290μL,2.08mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液，导致形成厚的白色沉淀。反应混合物于室温搅拌10min，以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。固体以二乙醚研磨得到标题化合物，为灰白色固体(0.30g,74％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝382.
步骤5:6-溴-1-(3-羟基-1,1-二甲基丙基)-1,3-二氢咪唑并[4,5-c]吡啶-2-酮
6-溴-1-[1,1-二甲基-3-(四氢吡喃-2-基氧基)丙基]-1,3-二氢咪唑并[4,5-c]吡啶-2-酮(297mg,0.77mmol)溶解于在甲醇中的氢氯酸(10mL,1.25M)并且反应混合物于室温搅拌3h。反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液碱化至pH 8并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。固体以二乙醚研磨得到标题化合物，为灰白色固体(0.21g,90％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝300&302.
步骤6:6-溴-4,4-二甲基-3,4-二氢-2H-1-氧杂-4a,7,9-三氮杂芴
将偶氮二羧酸二异丙基酯(196μL,0.99mmol)滴加至6-溴-1-(3-羟基-1,1-二甲基丙基)-1,3-二氢咪唑并[4,5-c]吡啶-2-酮(213mg,0.71mmol)和三苯基膦(279mg,1.06mmol)在四氢呋喃(5mL)中的悬浮液并且反应混合物于室温搅拌1h直到固体溶解。反应混合物以氢氯酸(10mL,1M)稀释并且溶液以EtOAc(10mL)洗涤。水级分以饱和碳酸氢钠水溶液碱化至pH 8。产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到化合物，为灰白色固体(69mg,34％)。1H NMR 400MHzδ(CDCl3):8.55(1H,s),7.45(1H,s),4.52(2H,t,J＝5.4Hz),2.23(2H,t,J＝5.4Hz),1.73(6H,s).
步骤7:(2-氯嘧啶-4-基)-(4,4-二甲基-3,4-二氢-2H-1-氧杂-4a,7,9-三氮杂芴- 6-基)胺
6-溴-4,4-二甲基-3,4-二氢-2H-1-氧杂-4a,7,9-三氮杂芴(69mg,0.24mmol)、4-氨基-2-氯嘧啶(32mg,0.24mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(11mg,12μmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(28mg,49μmol)、碳酸铯(160mg,0.49mmol)和二噁烷(3mL)密封在小瓶中并且混合物以氩气脱气。反应混合物于100℃加热16h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到化合物，为灰白色固体(34mg,42％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝331.
实施例A51:(R)-6-溴-1-仲丁基-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-咪唑 并[4,5-c]吡啶
步骤1:(2-溴-5-硝基吡啶-4-基)-((R)-仲丁基)胺
向2,4-二溴-5-硝基吡啶(1g,3.50mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液添加(R)-仲丁基胺(429μL,4.26mmol)和三乙基胺(1mL,7.10mmol)并且反应混合物于室温搅拌1h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并且真空浓缩得到化合物，为黄色固体(903mg,93％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝274(100％).
步骤2:6-溴-N4-((R)-仲丁基)吡啶-3,4-二胺
向(2-溴-5-硝基吡啶-4-基)-((R)-仲丁基)胺(903mg,3.29mmol)在工业甲基化酒精(20mL)中的溶液添加乙酸(1mL)、水(0.5mL)和铁粉(738mg,13.2mmol)并且所得混合物于室温搅拌2h。反应混合物通过硅藻土过滤并且滤液以水稀释。产物以EtOAc(3x)萃取并且合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。这得到了标题化合物，为棕色固体(750mg,93％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝244.
步骤3:(R)-1-((R)-6-溴-1-仲丁基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)乙醇
向(R)-乳酰胺(410mg,4.60mmol)在二氯甲烷(15mL)中的溶液添加三乙基氧鎓四氟硼酸盐(963mg,5.1mmol)并且反应混合物于室温搅拌2h。反应混合物经真空浓缩并且所得剩余物溶解于乙醇(15mL)中。添加6-溴-N4-((R)-仲丁基)吡啶-3,4-二胺(750mg,3.1mmol)并且反应混合物于回流加热4h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-5％甲醇/EtOAc)得到化合物，为灰白色固体(214mg,23％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝298.
步骤4:(R)-6-溴-1-仲丁基-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-咪唑并 [4，5-c]吡啶
向(R)-1-((R)-6-溴-1-仲丁基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)乙醇(214mg,0.71mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液添加3,4-二氢吡喃(262μL,2.87mmol)和p-甲苯磺酸(催化性的)并且所得混合物于回流加热4h。添加进一步等份的3,4-二氢吡喃(612μL,6.7mmol)和p-甲苯磺酸(催化性的)并持续加热48h。反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/戊烷)得到化合物(0.16g,58％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝382.
实施例A52:2-(1-乙磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基胺
步骤1:1-(乙磺酰基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H- 吡唑
向反应小瓶中放置4-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(20.0g,103mmol)在二氯甲烷(270mL)和三乙基胺(34.6g,342mmol)中的溶液。反应混合物冷却至0℃并且添加乙磺酰氯(19.9g,155mmol)。并于室温将反应混合物搅拌12h。反应经过滤并且溶液经真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂:20％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物，为黄色油状物(19g,64％).
步骤2:2-(1-乙磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基胺
1-(乙磺酰基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(1g,3.49mmol)、2-氯-4-氨基嘧啶(412mg,3.18mmol)、双(二-叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(II)(225mg,0.32mmol)和碳酸铯(1.35g,4.13mmol)悬浮在二噁烷(7mL)和水(1mL)中。反应混合物以氩气脱气，并于100℃加热45min。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-5％甲醇/EtOAc)得到化合物(0.57g,71％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝254.
实施例A53:(R)-6-溴-1-仲丁基-2-[(S)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-咪唑 并[4,5-c]吡啶
步骤1:(2-溴-5-硝基吡啶-4-基)-((S)-仲丁基)胺
向2,4-二溴-5-硝基吡啶(1g,3.50mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液添加(S)-仲丁基胺(429μL,4.26mmol)和三乙基胺(1mL,7.10mmol)并且反应混合物于室温搅拌1h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并且真空浓缩得到化合物，为黄色固体(903mg,93％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝274.
步骤2:6-溴-N4-((S)-仲丁基)吡啶-3,4-二胺
向(2-溴-5-硝基吡啶-4-基)-((S)-仲丁基)胺(903mg,3.29mmol)在工业甲基化酒精(20mL)中的溶液添加乙酸(1mL)、水(0.5mL)和铁粉(738mg,13.2mmol)并且所得混合物于室温搅拌2h。反应混合物通过硅藻土过滤并且滤液以水稀释。产物以EtOAc(3x)萃取并且合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并且真空浓缩得到化合物，为棕色固体(670mg,83％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝244.
步骤3:(R)-1-((S)-6-溴-1-仲丁基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)乙醇
向(R)-乳酰胺(367mg,4.10mmol)在二氯甲烷(15mL)中的溶液添加三乙基氧鎓四氟硼酸盐(860mg,4.53mmol)并且反应混合物于室温搅拌2h。反应混合物经真空浓缩并且所得剩余物溶解于乙醇(15mL)中。添加6-溴-N4-((S)-仲丁基)吡啶-3,4-二胺(670mg,2.74mmol)并且反应混合物于回流加热16h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-5％甲醇/EtOAc)得到化合物，为灰白色固体(300mg,37％)。1H NMR 400MHzδ(CDCl3):8.78(1H,s),7.58(1H,s),5.19-5.05(1H,m),4.66-4.53(1H,m),2.13-1.92(2H,m),1.75(3H,d,J＝6.9Hz),1.60(3H,d,J＝7.5Hz),0.86(3H,t,J＝7.5Hz).
步骤4:(R)-6-溴-1-仲丁基-2-[(S)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-咪唑并 [4,5-c]吡啶
向(R)-1-((S)-6-溴-1-仲丁基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)-乙醇(300mg,1.00mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液添加3,4-二氢吡喃(367μL,4.00mmol)和p-甲苯磺酸(催化性)和所得混合物于回流加热4h。添加另一等份的3,4-二氢吡喃(612μL,6.7mmol)和p-甲苯磺酸(催化性)并持续加热48h。反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/戊烷)得到化合物(227mg,59％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝382.
实施例A54:6-氯-1-异丙基-2-[2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙氧基]-1H-咪唑并[4, 5-c]吡啶和6-溴-1-异丙基-2-[2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙氧基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
步骤1:6-溴-1-异丙基-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-酮
光气(20％在甲苯中)(3.4mL,6.52mmol,)滴加至6-溴-N4-异丙基吡啶-3,4-二胺(实施例12,步骤2)(1g,4.35mmol)和三乙基胺(1.21mL,8.69mmol)在四氢呋喃(30mL)中的溶液，导致形成厚的白色沉淀。反应混合物于室温搅拌30min，以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩得到化合物，为灰白色固体(1.02g,92％)。1H NMR 400MHzδ(CDCl3):9.55(1H,br s),8.13(1H,s),7.24(1H,s),4.69(1H,七重峰,J＝6.9Hz),1.54(6H,d,J＝6.9Hz).
步骤2:6-溴-2-氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶和2-溴-6-氯-1-异丙基-1H- 咪唑并[4,5-c]吡啶
6-溴-1-异丙基-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-酮(300mg,1.17mmol)溶解于氧氯化磷(V)(5mL)并且反应混合物于回流加热48h。反应混合物经真空浓缩并且所得剩余物溶解于EtOAc中。溶液以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩得到标题化合物，为～2:1混合物。LCMS(ESI):[M+H]+＝274,276,278.
步骤3:6-氯-1-异丙基-2-[2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙氧基]-1H-咪唑并[4,5-c] 吡啶和6-溴-1-异丙基-2-[2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙氧基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-溴-2-氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶和2-溴-6-氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(220mg,0.80mmol)和2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙醇(176mg,1.20mmol)和碳酸铯(522mg,1.60mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(6mL)中的混合物在密封试管中于100℃加热16h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/环己烷)得到各标题化合物，为溴化物：氯化物的约2:1混合物(226mg,78％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝384and[M+H]+＝340.
实施例A55:6-氯-1-异丙基-2-(2-甲氧基乙氧基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶和6- 溴-1-异丙基-2-(2-甲氧基乙氧基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-溴-2-氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶和2-溴-6-氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例A54,步骤2)(70mg,～0.25mmol)、2-甲氧基乙醇(30μL,0.38mmol)和碳酸铯(166mg,0.51mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物于100℃加热16h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到各标题化合物，为溴化物：氯化物的约3:2混合物(49mg,66％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝314and[M+H]+＝270.
实施例A56:(6-氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)-(2-甲氧基乙基)胺
2,6-二氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例284,步骤2)(250mg,1.1mmol)和2-甲氧基乙基胺(0.66mL,7.60mmol)溶解于二甲基乙酰胺(3mL)中并且反应混合物于95℃加热2h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到化合物，为灰白色固体(264mg,90％)。1H NMR 400MHzδ(CDCl3):8.34(1H,s),7.15(1H,s),4.77-4.69(1H,m),4.32(1H,七重峰,J＝6.9Hz),3.76-3.69(2H,m),3.68-3.63(2H,m),3.42(3H,s),1.59(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例A57:(6-氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)二甲基胺
2,6-二氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例284,步骤2)(100mg,0.44mmol)和2-甲氧基乙基胺(0.25mL,2.88mmol)溶解于二甲基甲酰胺(3mL)并且反应混合物于95℃加热48h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-5％甲醇/EtOAc)得到化合物(44mg,42％)，从二甲基甲酰胺的热分解衍生。LCMS(ESI):[M+H]+＝239.
实施例A58:6-溴-4,4-二甲基-3,4-二氢-1H-2-氧杂-4a,7,9-三氮杂芴
步骤1:乙酸2-(2-溴-5-硝基吡啶-4-基氨基)-2-甲基丙基酯
向2-(2-溴-5-硝基吡啶-4-基氨基)-2-甲基丙-1-醇(0.97g,3.36mmol)和三乙基胺(0.94mL,6.73mmol)在四氢呋喃(15mL)中的溶液于0℃添加乙酰氯(251μL,3.55mmol)并且反应混合物于室温搅拌1h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩得到化合物，为黄色固体(1.1g,100％)。1H NMR 400MHzδ(CDCl3):8.98(1H,s),7.17(1H,s),4.18(2H,s),2.15(3H,s),1.54(6H,s).
步骤2:乙酸2-(5-氨基-2-溴吡啶-4-基氨基)-2-甲基丙基酯
乙酸2-(2-溴-5-硝基吡啶-4-基氨基)-2-甲基丙基酯(1.1g,3.30mmol)和氧化铂(IV)(100mg,0.44mmol)在EtOAc(30mL)中的混合物在氢气气氛下于室温搅拌16h。反应混合物经真空浓缩并且所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到化合物(809mg,80％)。1H NMR 400MHzδ(CDCl3):7.64(1H,s),6.80(1H,s),4.68(1H,br s),4.14(2H,s),2.98(2H,br s),2.12(3H,s),1.43(6H,s).
步骤3:乙酸2-[5-(2-乙氧基乙酰基氨基)-2-溴吡啶-4-基氨基]-2-甲基丙基酯
向乙酸2-(5-氨基-2-溴吡啶-4-基氨基)-2-甲基丙基酯(300mg,0.99mmol)和三乙基胺(0.28mL,1.98mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液添加乙酸氯羰基甲基酯(117μL,1.09mmol)并且反应混合物于室温搅拌1h。反应混合物以水稀释且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-5％甲醇/EtOAc)得到化合物(211mg,53％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝402.
步骤4:乙酸2-(2-乙氧基甲基-6-溴咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-2-甲基丙基酯
乙酸2-[5-(2-乙氧基乙酰基氨基)-2-溴吡啶-4-基氨基]-2-甲基丙基酯(267mg,0.66mmol)溶解于乙酸(3mL)并且反应混合物于回流加热16h。反应混合物经真空浓缩且所得剩余物溶解于EtOAc(10mL)中。溶液以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤并以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并且真空浓缩得到化合物(195mg,76％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝384.
步骤5:2-(6-溴-2-羟甲基咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-2-甲基丙-1-醇
向乙酸2-(2-乙氧基甲基-6-溴咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-2-甲基丙基酯(195mg,0.51mmol)在甲醇(5mL)和水(1mL)中的溶液添加氢氧化锂一水合物(47mg,1.16mmol)并且反应混合物于室温搅拌2h。反应混合物经浓缩至～1/3体积并且该溶液以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并且真空浓缩得到化合物(133mg,87％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝300&302.
步骤6:6-溴-4,4-二甲基-3,4-二氢-1H-2-氧杂-4a,7,9-三氮杂芴
向2-(6-溴-2-羟甲基咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)-2-甲基丙-1-醇(120mg,0.38mmol)和三苯基膦(126mg,0.48mmol)在四氢呋喃(3mL)中的混合物添加二偶氮二羧酸异丙基酯(86μL,0.44mmol)并且反应混合物于室温搅拌4d。反应混合物经真空浓缩，溶解于二乙醚中并以氢氯酸水溶液(1M,10mL)洗涤。水溶液级分以饱和碳酸氢钠水溶液碱化至pH8。产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到化合物(56mg,49％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝282.
实施例A59:6-溴-2-甲基-1-(四氢吡喃-4-基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
步骤1:(2-溴-5-硝基吡啶-4-基)-(四氢吡喃-4-基甲基)胺
向2,4-二溴-5-硝基吡啶(1g,3.50mmol)在四氢呋喃(15mL)中的溶液添加(四氢-2H-吡喃-4-基)甲胺(449mg,3.91mmol)和三乙基胺(1mL,7.10mmol)并且反应混合物于室温搅拌90min。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩得到化合物，为黄色固体(1.01g,90％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝316.
步骤2:6-溴-N4-(四氢吡喃-4-基甲基)吡啶-3,4-二胺
向(2-溴-5-硝基吡啶-4-基)-(四氢吡喃-4-基甲基)胺(1.01g,3.19mmol)、乙酸(1mL)和水(0.5mL)在工业甲基化酒精(20mL)中的溶液添加铁粉(1.07g,19mmol)。反应混合物于室温搅拌2h，然后于50℃搅拌1h。反应混合物冷却至室温，以EtOAc(5mL)稀释并以饱和碳酸氢钠水溶液碱化至pH 8。将浆料通过硅藻土过滤并且滤液以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并且真空浓缩得到化合物，为黄色固体(900mg,98％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝286.
步骤3:6-溴-2-甲基-1-(四氢吡喃-4-基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-溴-N4-(四氢吡喃-4-基甲基)吡啶-3,4-二胺(300mg,1.05mmol)和乙酰亚胺酸乙基酯盐酸盐(142mg,1.15mmol)在乙醇(5mL)中的溶液于回流加热3h。添加乙酰亚胺酸乙基酯盐酸盐(40mg,0.32mmol)并持续加热2h。反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物以EtOAc研磨得到化合物，为浅棕色固体(220mg,68％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝310,312.
实施例A60:6-氯-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙 基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
步骤1:(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)胺
2,4-二氯-5-硝基吡啶(4g,20.72mmol)、(R)-三氟甲基-2-氨基丙烷(4.69g,41.44mmol)和三乙基胺(5.8mL,41.4mmol)在四氢呋喃中的溶液在密封容器中于55℃加热6d。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-30％EtOAc/环己烷)得到化合物，为橙色油状物(3.95g,70％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝270.
步骤2:6-氯-N4-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)吡啶-3,4-二胺
向(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)胺(3.95g,14.70mmol)、乙酸(4mL)和水(2mL)在工业甲基化酒精(80mL)中的溶液添加铁粉(4.92g,0.089mol)。反应混合物于室温搅拌1h。反应混合物以EtOAc稀释(5mL)并以饱和碳酸氢钠水溶液碱化至pH 8。该浆料通过硅藻土过滤并且滤液以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩得到化合物，为棕色固体(3.32g,95％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝240.
步骤3:乙酸[6-氯-4-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基氨基)吡啶-3-基氨基甲酰基] 甲基酯
向6-氯-N4-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)吡啶-3,4-二胺(1g,4.17mmol)和三乙基胺(1.16mL,8.34mmol)在四氢呋喃(15mL)中的溶液于0℃滴加乙氧基乙酰氯(471μL,4.38mmol)并且反应混合物于室温搅拌2h。反应混合物以水稀释并且产物以二氯甲烷(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-3％甲醇/EtOAc)得到化合物(832mg,59％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝340.
步骤4:乙酸6-氯-1-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2- 基甲基酯
乙酸[6-氯-4-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基氨基)吡啶-3-基氨基甲酰基]甲基酯(832mg,2.40mmol)溶解于乙酸(5mL)并且反应混合物于回流加热16h。反应混合物经真空浓缩并且所得剩余物溶解于EtOAc(10mL)中。溶液以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤并以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩得到化合物(732mg,93％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝322和324.
步骤5:6-氯-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)- 1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
向乙酸6-氯-1-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲基酯(550mg,1.71mmol)在甲醇(10mL)中的溶液添加氢氧化锂一水合物(108mg,2.56mmol)和水(1mL)。所得混合物于室温搅拌30min。混合物以HCl(1N)酸化至pH 5，接着以饱和碳酸氢钠水溶液碱化至pH 8。溶液以EtOAc(3x)萃取。并且合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物溶解于四氢呋喃(15mL)并添加3,4-二氢吡喃(624μL,6.84mmol)和p-甲苯磺酸(33mg,0.17mmol)。反应混合物于回流搅拌5d，以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/环己烷)得到化合物(586mg,94％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝364.
实施例A61:6-氯-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((R)-2,2,2-三氟-1- 甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
步骤1:(R)-1-[6-氯-1-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶- 2-基]乙醇
向(R)-乳酰胺(1.23g,13.8mmol)在二氯甲烷(40mL)中的溶液添加三乙基氧鎓四氟硼酸盐(2.88g,15.1mmol)并且反应混合物于室温搅拌2h。反应混合物经真空浓缩并且所得剩余物溶解于乙醇(50mL)中。添加6-氯-N4-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)吡啶-3,4-二胺(实施例A60,步骤2)(2.13g,9.18mmol)并且反应混合物于回流加热1h。反应混合物以水稀释且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/环己烷)得到化合物(2.05g,78％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝294.
步骤2:6-氯-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基 乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
向(R)-1-[6-氯-1-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]乙醇(2.03g,6.91mmol)在四氢呋喃(30mL)中的溶液添加3,4-二氢吡喃(2.5mL,27.6mmol)和p-甲苯磺酸(131mg,0.69mmol)并且所得混合物于回流加热5d.反应混合物冷却至室温，以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/戊烷)得到化合物(2.03g,78％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝378.
实施例A62:2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基胺
1-环丙烷磺酰基-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(2g,6.7mmol)(实施例51步骤6)、2-氯-4-氨基嘧啶(0.79g,6.1mmol)、双(二-叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(II)(432mg,0.61mmol)和碳酸铯(2.58g,7.9mmol)悬浮在二噁烷(15mL)和水(2.5mL)中。反应混合物以氩气脱气，并于100℃加热1.5h。反应混合物以水稀释and产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/环己烷)得到化合物(1.09g,67％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝266.
实施例A63(-)-2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺
步骤1:(3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
向(-)-(3R,4S)-3-氟-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(WO2011/36576)(500mg,2.28mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液添加氢化钠(60％在矿物油中的分散体)(109mg,2.74mmol)并且反应混合物于室温搅拌10min。添加硫酸二甲基酯(0.26mL,2.74mmol)并且反应混合物于室温搅拌3h。反应混合物以水稀释并且产物以乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历在氧化硅上的快速色谱(溶剂梯度:0-100％乙酸乙酯/环己烷)得到化合物(530mg,100％)。1H NMR 400MHzδ(CDCl3):4.81-4.58(1H,m),4.06-3.97(1H,m),3.89-3.64(1H,m),3.50-3.38(4H,m),3.37-3.20(1H,m),3.17-3.04(1H,m),1.94-1.82(1H,m),1.78-1.67(1H,m),1.46(9H,s).
步骤2:(-)-2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺
(3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(530mg,2.27mmol)溶解于HCl/二噁烷(4N,5mL)中并且反应于40℃搅拌2h。反应混合物经真空浓缩。所得剩余物悬浮于异丙醇(5mL)并添加2-氯-4-氨基嘧啶(294mg,2.27mmol)和三乙基胺(0.95mL,6.82mmol)。反应混合物在密封反应小瓶中于120℃加热16h。反应混合物冷却至室温，蒸发至干并经历氧化硅上的色谱(溶剂梯度:25-100％乙酸乙酯/环己烷)得到化合物(353mg,69％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝227；[α]D-9.2°(c 3.5in二氯甲烷).
实施例A64:(-)-(3R,4S)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟哌啶-4-醇
(-)-(3R,4S)-3-氟-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(WO2011/36576)(500mg,2.27mmol),溶解于HCl/二噁烷(4N,5mL)中并且反应于40℃搅拌90min。反应混合物经真空浓缩。所得剩余物悬浮于异丙醇(5mL)并添加2-氯-4-氨基嘧啶(294mg,2.27mmol)和三乙基胺(0.95mL,6.82mmol)。反应混合物在密封反应小瓶中于130℃加热16h，冷却至室温，蒸发至干并经历氧化硅上的色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/乙酸乙酯)得到化合物(383mg,79％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝213；[α]D-6.8(c 3.5,甲醇)
实施例A65(+)-2-((3S,4R)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺
步骤1:(3S,4R)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
向(+)-(3S,4R)-3-氟-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(WO2011/36576)(500mg,2.28mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液添加氢化钠(60％在矿物油中的分散体)(109mg,2.74mmol)并且反应混合物于室温搅拌10min。添加硫酸二甲基酯(0.26mL,2.74mmol)并且反应混合物于室温搅拌3h。反应混合物以水稀释并且产物以乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历氧化硅上的色谱(溶剂梯度:0-100％乙酸乙酯/环己烷)得到化合物(530mg,100％)。1H NMR 400MHzδ(CDCl3):4.81-4.56(1H,m),4.07-3.94(1H,m),3.89-3.62(1H,m),3.49-3.36(4H,m),3.37-3.20(1H,m),3.17-2.99(1H,m),1.94-1.82(1H,m),1.78-1.63(1H,m),1.46(9H,s).
步骤2:(+)-2-((3S,4R)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺
(3S,4R)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(530mg,2.27mmol),溶解于HCl/二噁烷(4N,5mL)中并且反应于40℃搅拌2h。反应混合物经真空浓缩。所得剩余物悬浮于异丙醇(5mL)并添加2-氯-4-氨基嘧啶(294mg,2.27mmol)和三乙基胺(0.95mL,6.82mmol)。反应混合物在密封反应小瓶中于120℃加热16h。反应混合物经历快速色谱(溶剂梯度:25-100％乙酸乙酯/环己烷)得到化合物(373mg,72％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝227.[α]D+14.0°(c 3.0，在二氯甲烷中)
实施例A66(+)-(3S,4R)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟哌啶-4-醇
(+)-(3S,4R)-3-氟-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(500mg,2.27mmol),溶解于HCl/二噁烷(4N,5mL)中并且反应于40℃搅拌90min。反应混合物经真空浓缩。所得剩余物悬浮于异丙醇(5mL)并添加2-氯-4-氨基嘧啶(294mg,2.27mmol)和三乙基胺(0.95mL,6.82mmol)。反应混合物在密封小瓶中130℃加热16h。反应混合物经蒸发至干，吸收至硅藻土上并经历快速色谱(SiO2,以0-10％甲醇/乙酸乙酯洗脱)得到化合物(378mg,78％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝213；[α]D+9.0°(c 3.5，在甲醇中)。
实施例A67:(6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)乙基胺
反应容器填充有6-溴-N4-异丙基吡啶-3,4-二胺(实施例12,步骤2)(300mg,1.30mmol)、异硫氰酸乙基酯(171μl,1.96mmol)和乙腈(15ml)。反应混合物在回流下加热24h。反应混合物冷却至室温并添加(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐(864.9mg,1.96mmol)和1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(390μL,2.61mmol)。反应混合物在回流下加热24h。反应混合物冷却至室温在EtOAc和蒸馏水之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂:10％2M甲醇性氨/EtOAc)得到标题化合物(86.2mg,23％)。LCMS(ESI):[M+H]+284.2.
实施例A68:(±)-6-溴-1-异丙基-2-[2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙氧基甲基]-1H- 咪唑并[4,5-c]吡啶
反应容器填充有(6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇(实施例251,步骤5)(200mg,0.743mmol)并溶解于二甲基甲酰胺(7mL)中。反应混合物冷却至0℃并添加氢化钠(35.6mg,0.892mmol)。反应混合物于0℃搅拌10min。并且添加2-(2-溴乙氧基)四氢吡喃(137.5μl,0.892mmol)。反应混合物从0℃温热至室温并于室温搅拌24h。反应混合物在EtOAc和蒸馏水之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过在氧化硅上的色谱法进一步纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到标题化合物(196.1mg,66％)。LCMS(ESI):[M+H]+399.3.
实施例A69:6-溴-1-异丙基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
反应容器填充有3,3,3-三氟丙酸(116μl,1.30mmol)、三乙基胺(500μl,3.59mmol)、三苯基膦(855mg,3.26mmol)和四氯化碳(5ml)。反应混合物于室温搅拌10min并添加6-溴-N4-异丙基吡啶-3,4-二胺(实施例12,步骤2)(250mg,1.09mmol)，作为四氯化碳(2ml)中的溶液。反应混合物于80℃加热24h。反应混合物冷却至室温并在二氯甲烷和蒸馏水之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过在氧化硅上的色谱法进一步纯化(溶剂梯度:0-50％EtOAc/环己烷)得到标题化合物(175.2mg,50％)。LCMS(ESI):[M+H]+323.1.
实施例A70:[1-(4-氨基嘧啶-2-基)-4-甲氧基哌啶-4-基]甲醇
反应容器填充有2-氯嘧啶-4-基胺(578mg,4.46mmol)、(4-甲氧基哌啶-4-基)甲醇(648mg,4.46mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(875μl,5.05mmol)和乙醇(12ml)。反应混合物在微波辐射下于150℃加热1h，冷却至室温并以甲醇稀释。反应混合物通过甲醇性溶液流经SCX-2筒纯化，该筒以甲醇洗涤并且产物以2M NH3/甲醇洗脱得到标题化合物(920mg,87％)。LCMS(ESI):[M+H]+239.3
实施例A71:3-(4-氨基嘧啶-2-基氨基)-2,2-二甲基丙酸乙基酯
标题化合物(87mg,37％)从2-氯嘧啶-4-基胺(127mg,0.98mmol)和3-氨基-2,2-二甲基丙酸乙基酯(WO2011106276)(143mg,0.98mmol)根据对于实施例A70描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+239.3
实施例A72:6-溴-1-异丙基-2-[1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-咪唑并[4,5- c]吡啶
步骤1:(±)-1-(6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)乙醇
反应容器填充有(±)-乳酰胺(968mg,10.86mmol)、三乙基氧鎓四氟硼酸盐(2.06g,10.86mmol)和四氢呋喃(35ml)。反应混合物于室温搅拌90min并真空浓缩。剩余物溶解于乙醇(31ml)并填充以6-溴-N4-异丙基吡啶-3,4-二胺(实施例12,步骤2)(1.0g,4.34mmol)。反应混合物于75℃加热24h，冷却至室温在EtOAc和1M HCl水溶液之间分配。酸性层经分离，以饱和碳酸氢钠中和并以EtOAc萃取。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩得到标题化合物(757.2mg,62％)。LCMS(ESI):[M+H]+285.2.
步骤2:6-溴-1-异丙基-2-[1-(四氢吡喃-2-基氧基)-乙基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡 啶
反应容器装填以(±)-1-(6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)乙醇(757.2mg,2.67mmol)、二氢吡喃(488μl,5.35mmol)、p-甲苯磺酸(45.5mg,0.267mmol)和四氢呋喃(23.0ml)。反应混合物在回流下加热24h，冷却至室温，并在EtOAc和蒸馏水之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过在氧化硅上的色谱法进一步纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到标题化合物(778.3mg,79％)。LCMS(ESI):[M+H]+369.2.
实施例A73:6-溴-1-异丙基-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-咪唑并 [4,5-c]吡啶
标题化合物(442.5mg,69％)从(R)-乳酰胺(428.1mg,4.81mmol)根据对于实施例A72描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+369.2.
实施例A74:6-溴-1-异丙基-2-[(S)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-咪唑并 [4,5-c]吡啶
标题化合物(1.55g,95％)从(S)-乳酰胺(1.0g,11.22mmol)根据对于实施例A72描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+369.2.
实施例A75:(±)-6-溴-1-异丙基-2-[1-甲基-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H- 咪唑并[4,5-c]吡啶
标题化合物(641.6mg,53％)从2-羟基-2-甲基丙酰胺(1.0g,9.70mmol)根据对于实施例A72描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+383.3.
实施例A76:6-溴-2-环丙基-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
标题化合物(1.58g,76％)从环丙烷甲酰胺(1.0g,11.75mmol)根据对于实施例A72描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+281.2.
实施例A77:(±)-6-溴-1-异丙基-2-(四氢呋喃-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
标题化合物(973mg,78％)从四氢呋喃-2-甲酰胺(738.2mg,6.41mmol)(1.0g,11.75mmol)根据对于实施例A72描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+311.2.
实施例A78:(±)-6-溴-1-异丙基-2-(1-甲氧基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
标题化合物(1.41g,77％)从(±)-2-甲氧基丙酰胺(1g,9.69mmol)根据对于实施例A72描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+299.2.
实施例A79:[(S)-1-(6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)-乙基]氨基 甲酸叔丁基酯
标题化合物(591mg,46％)从((S)-1-氨基甲酰基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(1.0g,5.32mmol)根据对于实施例A72描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+384.3.
实施例A80:[(R)-1-(6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)-乙基]氨基 甲酸叔丁基酯
标题化合物(700.6mg,54％)从((R)-1-氨基甲酰基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(1.0g,5.32mmol)根据对于实施例A72描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+384.3.
实施例A81:6-溴-2-((S)-2,2-二甲基-[1,3]二氧杂环戊烷-4-基)-1-异丙基-1H- 咪唑并[4,5-c]吡啶
标题化合物(113.2mg,26％)从(S)-2,2-二甲基-[1,3]二氧杂环戊烷-4-甲酰胺(286.2mg,1.97mmol)根据对于实施例A72描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+341.2.
实施例A82:6-氯-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙 基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
步骤1：(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)胺
反应容器填充有2,4-二氯-5-硝基吡啶(1g,5.18mmol)、(S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基胺(703mg,6.22mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(1.44ml,10.36mmol)和四氢呋喃(10ml)。反应混合物于55℃加热7d。反应混合物冷却至室温，并在EtOAc和蒸馏水之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过在氧化硅上的色谱法进一步纯化(溶剂梯度:0-50％EtOAc/环己烷)得到标题化合物(3.86g,92％)。LCMS(ESI):[M+H]+270.6.
步骤2:6-氯-N4-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)吡啶-3,4-二胺
反应容器填充有(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)胺(3.86g,14.32mmol)、工业甲基化酒精(80ml)、蒸馏水(2ml)和乙酸(4ml)。反应混合物冷却至0℃并且分份添加铁粉(4.81g,85.9mmol)。反应混合物温热至室温并搅拌24h。反应混合物经真空过滤并且剩余物在EtOAc和饱和碳酸氢钠之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩得到标题化合物(3.37g,定量)。LCMS(ESI):[M+H]+240.6.
步骤3:乙酸[6-氯-4-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基氨基)吡啶-3-基氨基甲酰基] 甲基酯
反应容器填充有6-氯-N4-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)吡啶-3,4-二胺(1.0g,4.17mmol)和四氢呋喃(10ml)。反应混合物冷却至0℃并以及三乙基胺(1.16ml,8.34mmol)。滴加乙酸氯羰基甲基酯(417μl,4.38mmol)并且反应混合物经2h温热至室温。反应混合物在EtOAc和饱和碳酸氢钠之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到标题化合物(944mg,67％)。LCMS(ESI):[M+H]+340.7.
步骤4:乙酸6-氯-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2- 基甲基酯
反应容器填充有乙酸[6-氯-4-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基氨基)吡啶-3-基氨基甲酰基]甲基酯(944mg,2.77mmol)、乙酸(6ml)和N,N-二甲基甲酰胺(20ml)。反应混合物于室温搅拌并与118℃加热24h。反应混合物冷却至室温并在EtOAc和饱和碳酸氢钠之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩得到标题化合物(894mg,定量)。LCMS(ESI):[M+H]+322.7.
步骤5:[6-氯-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基] 甲醇
反应容器填充有乙酸6-氯-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基甲基酯(894mg,2.78mmol)并溶解于甲醇(15ml)和蒸馏水(2ml)中。反应混合物于室温搅拌5h。反应混合物以1M HCl水溶液淬灭并饱和碳酸氢钠碱化。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩得到标题化合物(778mg,quant)。LCMS(ESI):[M+H]+280.7.
步骤6:6-氯-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)- 1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
反应容器填充有[6-氯-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]甲醇(778mg,2.78mmol)、二氢吡喃(1.02ml,11.12mmol)、p-甲苯磺酸(53mg,0.1mmol)和四氢呋喃(25ml)。反应混合物在回流下加热24h。反应混合物经冷却至室温，并在EtOAc和蒸馏水之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过在氧化硅上的色谱法进一步纯化(溶剂梯度:0-50％EtOAc/环己烷)得到标题化合物(805.6mg,80％)。LCMS(ESI):[M+H]+364.8.
实施例A83:6-氯-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1- 甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
标题化合物(968.5mg,定量)从(R)-乳酰胺(587mg,6.59mmol)根据对于实施例A72描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+378.8.
实施例A84:(±)-顺式-2-(3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺
反应容器填充有2-氯嘧啶-4-基胺(499mg,3.86mmol)、(±)-顺式-3-氟-4-甲氧基哌啶盐酸盐(WO2009054468)(654mg,3.86mmol)、碳酸铯(3.76g,11.56mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(8mL)。反应混合物于120℃加热24h，冷却至室温，并真空浓缩。剩余物通过氧化硅上的色谱直接纯化(溶剂梯度:0-50％EtOAc/环己烷)得到标题化合物(533.4mg,62％)。LCMS(ESI):[M+H]+227.3.
实施例A85:(±)-顺式-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟哌啶-4-醇
(顺式)-3-氟哌啶二醇盐酸盐(17.7g,0.114mol)、2-氯-4-氨基嘧啶(14.7g,0.114mol)和三乙基胺(48mL,0.342mol)在异丙醇中的悬浮液在密封的不锈钢容器中于110℃for 2天。冷却的反应混合物以盐水研磨以溶解三乙基氯化铵。沉淀通过过滤分离，以水洗涤并且乙腈并真空干燥得到产物，为白色固体(16.3g,67％)。1H NMR(DMSO-d6):7.72(1H,d,J＝5.64Hz),6.38(2H,s),5.70(1H,d,J＝5.6Hz),5.03(1H,d,J＝5.11Hz),4.48-4.61(1H,m),4.35-4.45(1H,m),4.17(1H,dt,J＝13.2,4.8Hz),3.69-3.83(1H,m),3.33-3.44(1H,m),3.12-3.23(1H,m),1.52-1.67(2H,m).
实施例A86:2-甲基-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)- 1H-吡唑-1-基)丙酰胺
向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(252.4mg,1.30mmol)和碳酸铯(866.3mg,2.63mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(4.0mL)中的混合物滴加2-溴-2-甲基丙酰胺(403.7mg,2.36mmol)。所得混合物于室温搅拌15h并且然后于50℃加热6h。反应混合物然后冷却至室温，以EtOAc稀释，以2:1:1水:盐水:饱和碳酸氢钠(3x)和盐水的混合物洗涤，经硫酸镁干燥，并通过硅胶塞过滤，以另外的EtOAc漂洗。滤液经真空蒸发并且粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(溶剂梯度:0-100％EtOAc/庚烷)得到化合物(91.6mg,25％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝280.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.97(s,1H),7.63(s,1H),7.12(s,1H),6.79(s,1H),1.69(s,6H),1.26(s,12H).
实施例A87:2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑- 1-基)丙腈
向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(260.6mg,1.34mmol)和碳酸铯(664.6mg,2.02mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3.0mL)中的混合物滴加2-溴丙腈(156.0μL,1.75mmol)。所得混合物于室温搅拌18h。反应混合物以EtOAc稀释，以2:1:1水:盐水:饱和碳酸氢钠(3x)的混合物和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，并通过硅胶塞过滤，以另外的EtOAc漂洗。滤液经真空浓缩得到标题化合物(325.2mg,98％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝248.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.12(s,1H),7.73(s,1H),5.86(q,J＝7.1Hz,1H),1.79(d,J＝7.1Hz,3H),1.26(s,12H).
实施例A88:N,2-二甲基-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2- 基)-1H-吡唑-1-基)丙酰胺
向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(252.1mg,1.30mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL)在烘干的烧瓶中的溶液添加氢化钠(60wt％在矿物油中的分散体)(69.1mg,1.73mmol)。反应混合物于室温搅拌20min，并且然后添加N-甲基-2-溴异丁酰胺(292.3mg,1.59mmol)。于室温持续搅拌4h，接着添加氢化钠(60wt％在矿物油中的分散体)(69.1mg,1.73mmol)。反应混合物于室温再搅拌20h并且然后以EtOAc稀释，以水(2x)和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空浓缩。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(溶剂梯度:20-100％EtOAc/庚烷)得到化合物(216.3mg,75％纯,43％产率)。LCMS(ESI):[M+H]+＝294.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.97(s,1H),7.64(s,1H),7.24(s,1H),2.54(d,J＝4.5Hz,3H),1.68(s,6H),1.26(s,12H).
实施例A89:3,3-二甲基哌啶-4-胺二盐酸盐
步骤1:4-氨基-3,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
3,3-二甲基-4-氧代-哌啶-1-甲酸叔丁基酯(108.2mg,0.4760mmol)和氨(7.0N在甲醇中的溶液)(2.0mL,14mmol)的混合物于室温搅拌16h。然后添加硼氢化钠(81.5mg,2.13mmol)并且混合物于室温搅拌3h。反应混合物经减压浓缩以除去大部分溶剂，以饱和碳酸氢钠水溶液稀释，并以二氯甲烷(3x)萃取。合并的有机萃取物经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩得到化合物(105.6mg,63％产率,65％纯)，其不经进一步纯化而使用。LCMS(ESI):[M+H-t丁基]+＝173.4.
步骤2:3,3-二甲基哌啶-4-胺二盐酸盐
向4-氨基-3,3-二甲基-哌啶-1-甲酸叔丁基酯(65％纯,105.6mg,0.30mmol)在二氯甲烷(3.0mL)中的溶液添加氯化氢(4.0M，在二噁烷中)(1.0mL,4.0mmol)。反应混合物于室温搅拌15h。反应混合物经真空浓缩得到标题化合物，作为二盐酸盐(定量产率)，其不经进一步纯化而使用。LCMS(ESI):[M+H]+＝129.4.
实施例251:(6-(2-(3-氨基-1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基)-1- 异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇
步骤1:4-溴-3-硝基-1H-吡唑
向3-硝基-1H-吡唑(10.0g,88.4mmol)在乙酸(100mL)中的搅拌悬浮液添加溴(4.80mL,93.7mmol)。所得溶液于室温搅拌12h。混合物以水稀释并以氢氧化钠水溶液将pH调节至8。所得溶液以乙酸乙酯萃取并且有机层以盐水洗涤经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂:10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物，为白色固体(8.5g,50％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ14.36(br,1H),8.35(s,1H)。
步骤2:4-溴-1-(环丙基甲基)-3-硝基-1H-吡唑
向4-溴-3-硝基-1H-吡唑(3.0g,15.6mmo)在N,N-二甲基甲酰胺(22mL)的搅拌悬浮液添加氢化钠(60wt％在矿物油中的分散体)(1.25g,52.1mmol)和(溴甲基)环丙烷(4.20g,31.1mmol)。所得溶液于室温搅拌5h。反应然后以添加水而猝灭。水相以EtOAc(3x)萃取且合并的有机相以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂:10％EtOAc/石油醚)得到标题化合物，为黄色固体(700mg,18％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.461,[M+H]+＝246&248,方法＝M.
步骤3:1-(环丙基甲基)-3-硝基-1H-吡唑-4-基硼酸
向4-溴-1-(环丙基甲基)-3-硝基-1H-吡唑(500mg,2.03mmol)在2-甲基氧杂环戊烷(8mL)中的搅拌悬浮液添加4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(620mg,2.44mmol)、[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(复合以二氯甲烷)(166mg,0.20mmol)和醋酸钾(998mg,10.2mmol)。所得溶液于95℃搅拌12h，冷却至室温，过滤，真空浓缩并且剩余物通过在氧化硅上的色谱法纯化(溶剂:50％EtOAc/石油醚)得到标题化合物，为白色固体(250mg,58％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.694,[M+H]+＝212,方法＝M.
步骤4:2-(6-溴-4-(异丙基氨基)吡啶-3-基氨基)-2-氧代乙酸乙酯
于0℃向6-溴-4-N-(丙-2-基)吡啶-3,4-二胺(实施例46,步骤4)(9.00g,39.1mmol)在二氯甲烷(50mL)中的溶液添加三乙基胺(7.90g,78.1mmol)，接着伴随搅拌滴加2-氯-2-氧代乙酸乙酯(6.40g,46.9mmol)。所得溶液于0℃搅拌1h并以水稀释(10mL)。所得溶液以盐水洗涤(2x)，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物，为棕色粗固体(12g,67％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.060,[M+H]+＝330&332,方法＝L.
步骤5:(6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇
向2-(6-溴-4-(异丙基氨基)吡啶-3-基氨基)-2-氧代乙酸乙酯(190g,575mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1.8L)中的溶液添加碳酸钾(273g,1.98mol)。所得溶液搅拌4h在120℃.将反应冷却至室温，以水稀释并且以EtOAc(4x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。产物然后经烘干得到标题化合物，为白色固体(88g,57％)。粗产物不经进一步纯化而用于后续步骤。LCMS(ESI):RT(min)＝0.857,[M+H]+＝270&272,方法＝L.
步骤6:6-溴-1-异丙基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c] 吡啶
向(6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]甲醇(3.00g,11.1mmol)在四氢呋喃(100mL)中的溶液添加p-甲苯磺酸(190mg,1.11mmol)和3,4-二氢-2H-吡喃(2.10g,25.0mmol)。所得溶液于60℃搅拌12h。将反应冷却至室温，以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:0-100％EtOAc/石油醚)得到标题化合物，为白色固体(2.0g,51％)。LCMS(ESI):RT(min)＝2.546,[M+H]+＝354,方法＝L.
步骤7:N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H- 咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
6-溴-1-异丙基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(3.00g,8.47mmol)、2-氯嘧啶-4-胺(1.09g,8.41mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(389mg,0.42mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(960mg,1.69mmol)、碳酸铯(5.50g,2.00当量)和1.4-二噁烷(30mL)的混合物于100℃搅拌1h。将反应冷却至室温，过滤并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:0-100％EtOAc/石油醚)得到标题化合物，为浅黄色固体(3.1g,91％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.602,[M+H]+＝403,方法＝M；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.60(s,1H),8.70(s,1H),8.27-8.26(d,J＝6.0Hz,1H),8.24(br,1H),7.45(br,1H),4.95-4.91(d,J＝12.4Hz,1H),4.90-4.84(m,1H),4.76-4.73(d,J＝12.4Hz,2H),3.80-3.75(m.1H),3.53-3.50(m,1H),1.75-1.65(m,2H),1.61-1.59(d,J＝6.8Hz,6H),1.50-1.48(m,4H).
步骤8:N-(2-(1-(环丙基甲基)-3-硝基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2- ((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向反应小瓶中添加[1-(环丙基甲基)-3-硝基-1H-吡唑-4-基]硼酸(200mg,0.95mmol)、N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(380mg,0.94mmol)、双(二-叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(II)(70mg,0.10mmol)、碳酸钠(250mg,2.34mmol)、乙腈(12mL)、N,N-二甲基甲酰胺(1mL)和水(0.5mL)。反应混合物经历于130℃的微波辐照30min。将反应冷却至室温，过滤并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂:10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物，为黄色固体(190mg,38％)。LCMS(ESI):RT(min)＝2.258,[M+H]+＝534,方法＝M.
步骤9:N-(2-(3-氨基-1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2- ((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向反应小瓶中添加N-(2-(1-(环丙基甲基)-3-硝基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(160mg,0.30mmol)、铁粉(67.0mg,1.20mmol)、氯化铵(93.0mg,1.74mmol)、水(1.5mL)、乙酸(1mL)和乙醇(10mL)。并将反应混合物于80℃搅拌4.5h，冷却至室温，过滤并真空浓缩得到标题化合物，为棕色油状物(210mg)，其不经纯化直接进行下去。LCMS(ESI):RT(min)＝1.485,[M+H]+＝504,方法＝M.
步骤10:(6-(2-(3-氨基-1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基)-1-异 丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇
向反应小瓶中添加N-(2-(3-氨基-1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(0.30mmol,前述步骤的粗产物)、三氟乙酸(2mL,26.9mmol)和乙醇(5mL)。并将反应混合物于80℃搅拌1h。将反应冷却至室温，通过添加水而淬灭，并以碳酸钠水溶液将pH调节至8。所得溶液以EtOAc萃取并且有机层以盐水洗涤经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物经反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物，为白色固体(21.1mg,17％，经2个步骤)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.721,[M+H]+＝420,方法＝M；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.89(s,1H),8.64(s,1H),8.28(d,J＝6.0Hz,1H),7.96(s,1H),7.88(s,1H),7.33(s,1H),5.83(s,2H),5.71-5.68(m,1H),4.99-4.92(m.1H),4.72(d,J＝6.0Hz,2H),3.76(d,J＝6.8Hz,2H),1.60(d,J＝6.8Hz,6H),1.27-1.20(m,1H),0.56-0.52(m,2H),0.54-0.52(m,2H)。
实施例252:N-(4-氰基环己基)-6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶- 4-基)氨基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
步骤1:6-溴-N-(4-氰基环己基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
向反应小瓶中添加4-氨基环己烷-1-甲腈(300mg,2.42mmol)、HBTU(549mg,1.45mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(312mg,2.41mmol)、6-溴-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酸(实施例51,步骤3)(342mg,1.21mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(10mL)。并将反应混合物于室温搅拌2h，以水稀释并且以乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-33％乙酸乙酯/己烷)得到标题化合物，为浅黄色固体(340mg,72％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.223,[M+H]+＝389,方法＝S.
步骤2:N-(4-氰基环己基)-6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4- 基)氨基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
向反应小瓶中添加6-溴-N-(4-氰基环己基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(300mg,0.77mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(87mg,0.15mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(70.5mg,0.08mmol)、碳酸铯(502mg,1.54mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基胺(实施例A62)(205mg,0.770mmol)和二噁烷(8mL)。并将反应混合物于100℃搅拌2h。在氮气的惰性气氛下。反应经过滤并真空浓缩。粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物，为白色固体(15.4mg,3％)。LCMS(ESI):RT(min)＝2.063,[M+H]+＝574.10,方法＝R；1H NMR(300MHz,DMSO-d6,ppm):δ10.28(s,1H),9.07(s,1H),8.70(s,1H),8.50(s,1H),8.47(s,1H),8.37(d,J＝6Hz,1H),8.27(s,1H),7.95(d,J＝6Hz,1H),7.11(d,J＝6Hz,1H),4.81(m,1H),3.88(m,1H),3.27(m,1H),3.13(m,1H),1.92(m,4H),1.70(m,4H),1.57(d,J＝6Hz,6H),1.34(m,2H),1.29(m,2H)。
实施例253:2-(3-(6-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基)-1- 异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-4-甲基-1H-吡唑-1-基)乙醇
步骤1:3-碘代-4-甲基-1H-吡唑
向反应小瓶中添加4-甲基-1H-吡唑-3-胺盐酸盐(1.00g,7.49mmol)、乙酸(20mL)和水(5mL)，接着于0℃伴随搅拌滴加亚硝酸钠水溶液(3.76M)(2mL,7.52mmol)。向所得反应混合物中添加硫酸(0.2mL)、碘化钾(3.74g,22.5mmol)和碘(3.82g,15.0mmol)并将反应混合物于55℃搅拌3h。反应然后通过添加冰水淬灭并以氨(15M，在水中)将pH调节至7。所得溶液以EtOAc萃取并且有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物，为浅黄色固体(1g,47％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.264,[M+H]+＝209,方法＝N.
步骤2:3-碘代-4-甲基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙基)-1H-吡唑
向反应小瓶中添加3-碘代-4-甲基-1H-吡唑(1.40g,6.73mmol)、2-(2-溴乙氧基)噁烷(2.80g,13.4mmol)、碳酸铯(4.39g,13.5mmol)和乙腈(30mL)。反应混合物于室温搅拌过夜，过滤并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂:33％EtOAc/石油醚)得到标题化合物，为黄色油状物(1.6g,71％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.377,[M+H]+＝337,方法＝M.
步骤3:4-甲基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙基)-3-(三丁基甲锡烷基)-1H- 吡唑
于-78℃向含在四氢呋喃(20mL)中的3-碘代-4-甲基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙基)-1H-吡唑(1.60g,4.76mmol)反应小瓶中在氮气下滴加n-丁基锂(2.3mL,2.5M)，接着滴加三丁基氯甲锡烷(1.86g,5.71mmol)。所得溶液于室温搅拌2h。以碳酸氢钠水溶液将pH调节至7-8并且反应以EtOAc萃取。有机层以盐水洗涤经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂:25％EtOAc/石油醚)得到标题化合物，为黄色油状物(1.2g,50％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.719,[M+H]+＝499,方法＝N.
步骤4:2-溴-5-甲基吡啶-1-氧化物
在氮气下2-溴-5-甲基吡啶(300g,1.74mol)、间-氯过氧苯甲酸(450g,2.61mol)在二氯甲烷(2L)中的混合物于室温搅拌过夜。以碳酸氢钠水溶液将pH调节至8并且反应以二氯甲烷(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物，为黄色固体(310g,95％)。LCMS(ESI):RT(min)＝0.907,[M+H]+＝188,方法＝R.
步骤5:2-溴-5-甲基-4-硝基吡啶-1-氧化物
向含2-溴-5-甲基吡啶-1-氧化物(100g,532mmol)在浓硫酸(100mL)中的溶液的反应小瓶于60℃伴随搅拌滴加发烟硝酸在硫酸(1:1,200mL)的混合物。所得溶液于90℃搅拌1h，冷却至室温并并通过滴加冰水淬灭反应经过滤并且滤液以EtOAc萃取。有机层以饱和碳酸钠水溶液和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物，为黄色固体(80g,65％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.284,[M+H]+＝233&235,方法＝R.
步骤6:(E)-2-溴-5-(2-(二甲基氨基)乙烯基)-4-硝基吡啶-1-氧化物
向反应小瓶中添加2-溴-5-甲基-4-硝基吡啶-1-氧化物(90.0g,386mmol),N,N-二甲基甲酰胺(450mL)和N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(450mL)。所得溶液于120℃搅拌4h。反应冷却至0℃并且产物通过过滤分离并干燥得到标题化合物，为黑色固体(45g,40％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.794,[M+H]+＝288&290,方法＝R.
步骤7:6-溴-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
向反应小瓶中添加(E)-2-溴-5-(2-(二甲基氨基)乙烯基)-4-硝基吡啶-1-氧化物(40.0g,138mmol)、铁粉(31.2g,557mmol)和乙酸(800mL)。并将反应混合物于100℃搅拌5h，过滤并真空浓缩。以碳酸钠水溶液将pH调节至8并以乙酸乙酯萃取。有机部分以盐水洗涤经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂:33％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物，为白色固体(10g,37％)。1HNMR(300Hz,DMSO-d6):δ11.65(s,1H),8.62(s,1H),7.65(s,1H),7.49(s,1H),6.61(s,1H)。
步骤8:6-溴-3-碘代-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
6-溴-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(3.00g,12.2mmol)和氢氧化钾(3.00g,53.5mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的混合物于室温搅拌30min。添加碘(3.90g,15.4mmol)并于室温再搅拌反应30min。反应混合物以水稀释并且产物通过过滤分离并减压干燥得到标题化合物，为黄色固体(3.5g,89％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.232,[M+H]+＝323,方法＝R.
步骤9:6-溴-3-碘代-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
于0℃向反应小瓶中添加6-溴-3-碘代-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(3.50g,10.8mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的溶液、氢化钠(60wt％在矿物油中的分散体)(900mg,37.5mmol)和2-碘丙烷(3.70g,21.8mmol)。并于室温将反应混合物搅拌16h，通过添加水淬灭并以乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(10％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物，为白色固体(3g,76％)。LCMS(ESI):RT(min)＝2.323,[M+H]+＝365,方法＝R.
步骤10:6-溴-1-异丙基-3-(4-甲基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙基)-1H- 吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
在氮气下向反应小瓶中添加4-甲基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙基)-3-(三丁基甲锡烷基)-1H-吡唑(1.20g,2.40mmol)、6-溴-3-碘代-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(1.00g,2.74mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(283mg,0.240mmol)、噻吩-2-甲酸亚铜(I)(464mg,2.43mmol)和1,4-二噁烷(8mL)。将反应容器密封并在微波中于100℃辐照90min。然后反应通过添加水来淬灭并以乙酸乙酯萃取(2x)。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂:50％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物，为黄色油状物(206mg,19％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.405,[M+H]+＝447&449,方法＝N.
步骤11:N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-3-(4- 甲基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙基)-1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6- 胺
向反应小瓶中添加6-溴-1-异丙基-3-(4-甲基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙基)-1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(200mg,0.450mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基胺(实施例A62)(142mg,0.540mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(42mg,0.050mmol),4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(52mg,0.090mmol)、碳酸铯(364mg,1.12mmol)和1,4-二噁烷(4mL)。并将反应混合物在氮气的惰性气氛中于100℃搅拌2h。在冷却至室温后，反应经过滤并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂:20％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物，为黄色固体(150mg,53％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.377,[M+H]+＝632,方法＝M.
步骤12:2-(3-(6-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基)-1-异 丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-4-甲基-1H-吡唑-1-基)乙醇
向反应小瓶中添加N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-3-(4-甲基-1-(2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙基)-1H-吡唑-3-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(150mg,0.240mmol)和HCl(4M in 1,4-二噁烷)(15mL)。并将反应混合物于室温搅拌15min。以碳酸氢钠水溶液将pH调节至7-8并以乙酸乙酯萃取。有机层以盐水洗涤经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物经反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物，为灰白色固体(19mg,15％)。LCMS(ESI):RT(min)＝2.004,[M+H]+＝548.15,方法＝N；1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ10.22(s,1H),9.13(s,1H),8.71(s,1H),8.46(s,1H)。8.38-8.36(d,J＝6.0Hz,2H),7.62(s,1H),7.56(s,1H),7.16(s,1H),4.93-4.85(m,1H),4.83-4.79(m,1H),4.16(m,2H),3.80-3.78(d,J＝5.1Hz,2H),3.33-3.26(m,1H),2.22(s,3H),1.61-1.59(d,J＝6.6Hz,6H),1.39-1.26(m,4H)
实施例254:N-(2-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-3-(2H-1,2,3-三唑-4- 基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
步骤1:6-溴-1-异丙基-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
向反应小瓶中添加6-溴-3-碘代-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(实施例253,步骤9)(3.00g,8.22mmol)、双(三苯基膦)氯化钯(II)(75mg,0.11mmol)、碘化亚铜(I)(40mg,0.21mmol)、三乙基胺(3.50g,34.6mmol)、乙炔基三甲基甲硅烷(810mg,8.25mmol)和四氢呋喃(50mL)。并于室温在氮气下将反应混合物搅拌3h，真空浓缩并通过硅胶色谱纯化(洗脱剂：5％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物，为黄色油状物(2.3g,83％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.744,[M+H]+＝335,方法＝M.
步骤2:6-溴-3-乙炔基-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
向以氮气吹扫并维持在氮气下的反应小瓶中添加6-溴-1-异丙基-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(1.00g,2.98mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液，接着伴随搅拌于-40℃滴加四丁基氟化铵(0.1M,0.5mL)。所得溶液于室温搅拌3h，真空浓缩并通过硅胶色谱纯化(洗脱剂：6％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物，为棕色油状物(250mg,32％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.509,[M+H]+＝263,方法＝M.
步骤3:3-(2-苄基-2H-1,2,3-三唑-4-基)-6-溴-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡 啶
向反应小瓶中添加6-溴-3-乙炔基-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(230mg,0.870mmol)、(叠氮基甲基)苯(180mg,1.35mmol)、碘化亚铜(I)(160mg,0.84mmol)、L-抗坏血酸钠(12mg)、N,N-二甲基甲酰胺(10mL)和水(4mL)。并将反应混合物于室温搅拌4h。反应混合物以50mL的水稀释，以3x50mL的乙酸乙酯萃取，以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法以乙酸乙酯/石油醚(3/7)纯化得到标题化合物，为黄色油状物(90mg,26％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.452,[M+H]+＝396&398,方法＝M.
步骤4:3-(2-苄基-2H-1,2,3-三唑-4-基)-N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4- 基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
向反应小瓶中添加3-(2-苄基-2H-1,2,3-三唑-4-基)-6-溴-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(150mg,0.38mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基胺(实施例A62)(130mg,0.49mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(50mg,0.05mmol)、(9,9-二甲基-9H-呫吨-4,5-二基)双(二苯基膦)(56mg,0.10mmol)、碳酸铯(550mg,1.69mmol)和1,4-二噁烷(10mL)。并将反应混合物于100℃在氮气下搅拌3h。在冷却至室温后，反应经过滤并且所得溶液以水稀释，以乙酸乙酯萃取(2x)，以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(洗脱剂：5％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物，为黄色固体(130mg,59％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.343,[M+H]+＝581,方法＝M.
步骤5:N-(2-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-3-(2H-1,2,3-三唑-4-基)- 1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
向反应小瓶中添加3-(2-苄基-2H-1,2,3-三唑-4-基)-N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(130mg,0.22mmol)、三氯化铝(143mg,1.08mmol)和甲苯(6mL)。并将反应混合物于60℃搅拌20h，冷却至室温，并过滤以收集沉淀。沉淀经反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物，为浅黄色固体(8.3mg,10％)。LCMS(ESI):RT(min)＝2.178,[M+H]+＝387.0,方法＝N.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ13.19(s,1H),10.07(s,1H),9.07(s,1H),8.45(s,1H),8.30(d,J＝6.0Hz,1H),8.25(s,1H),8.20(br,1H),8.04(s,1H),7.07(d,J＝4.4Hz,1H),6.53(s,1H),4.80-4.77(m,1H),1.60(d,J＝6.8Hz,6H).
实施例255:2-(4-(6-(2-(1-(乙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基)-1-异 丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)-N-(氧杂环丁烷-3-基)乙酰胺
步骤1:2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-基) 乙酸乙基酯
向反应小瓶中添加4-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(1g,5.15mmol)、2-溴乙酸乙基酯(940mg,5.63mmol)、碳酸铯(2.68g,8.23mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(10mL)。反应混合物在氮气的惰性气氛下于60℃搅拌过夜。在冷却至室温后，溶液以水稀释，以乙酸乙酯萃取(3x)，合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-5％乙酸乙酯/石油醚)得到2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)乙酸乙基酯，为黄色油状物(800mg,55％)。
步骤2:2-(4-(6-溴-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)乙 酸乙基酯
向反应小瓶中添加2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)乙酸乙基酯(3.70g,13.2mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(760mg,0.660mmol)、碳酸钠(2.80g,26.4mmol)、6-溴-3-碘代-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(实施例253,步骤9)(4.80g,13.1mmol)、乙腈(50mL)和水(5mL)。并将反应混合物在氮气的惰性气氛下于80℃搅拌4h。反应以水稀释，以乙酸乙酯萃取(3x)，合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-33％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物，为黄色固体(1.2g,23％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.310,[M+H]+＝391,方法＝M.
步骤3:2-(4-(6-(2-氯嘧啶-4-基氨基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3- 基)-1H-吡唑-1-基)乙酸乙基酯
向反应小瓶中添加2-(4-(6-溴-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)乙酸乙基酯(1.80g,4.60mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(0.84g,0.092mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(0.44g,0.076mmol)、2-氯嘧啶-4-胺(600mg,4.63mmol)、碳酸铯(3.00g,9.20mmol)和1,4-二噁烷(30mL)。并将反应混合物在氮气的惰性气氛下于90℃搅拌2h。将反应冷却至室温，以乙酸乙酯萃取，并且有机层以盐水洗涤经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂:10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物，为黄色固体(1g,49％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.229,[M+H]+＝440,方法＝M.
步骤4:2-(4-[6-[(2-氯嘧啶-4-基)氨基]-1-(丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶- 3-基]-1H-吡唑-1-基)乙酸
向反应小瓶中添加2-(4-(6-(2-氯嘧啶-4-基氨基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)乙酸乙基酯(1.00g,2.27mmol)、氢氧化锂(100mg,4.18mmol)、水(4mL)和乙醇(20mL)。并将反应混合物于60℃搅拌30min并以乙酸将pH调节至6。沉淀通过过滤收集并在烘箱中干燥得到标题化合物，为黄色固体(0.5g,53％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.109,[M+H]+＝412,方法＝G.
步骤5:2-(4-[6-[(2-氯嘧啶-4-基)氨基]-1-(丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶- 3-基]-1H-吡唑-1-基)-N-(氧杂环丁烷-3-基)乙酰胺
向反应小瓶中添加2-(4-[6-[(2-氯嘧啶-4-基)氨基]-1-(丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基]-1H-吡唑-1-基)乙酸(130mg,0.320mmol)、HBTU(180mg,0.47mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(61mg,0.47mmol)、氧杂环丁烷-3-胺(69mg,0.94mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(5mL)。并将反应混合物于室温在氮气的惰性气氛下搅拌2h，以水稀释，并以乙酸乙酯萃取。有机层以盐水洗涤经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物，为黄色固体(120mg,81％)。粗产物不经进一步纯化而用于后续步骤。LCMS(ESI):RT(min)＝1.030min,[M+H]+＝467,方法＝N.
步骤6:2-[4-[6-([2-[1-(乙磺酰基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-4-基]氨基)-1-(丙-2- 基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基]-1H-吡唑-1-基]-N-(氧杂环丁烷-3-基)乙酰胺
向反应小瓶中添加2-(4-[6-[(2-氯嘧啶-4-基)氨基]-1-(丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基]-1H-吡唑-1-基)-N-(氧杂环丁烷-3-基)乙酰胺(130mg,0.28mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(32mg,0.030mmol)、碳酸钠(59mg,0.56mmol)、1-(乙基磺酰基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(实施例A52,步骤1)(120mg,0.42mmol)、二噁烷(3mL)和水(0.3mL)。并将反应混合物在氮气的惰性气氛下于90℃搅拌4h。反应混合物以水稀释、以乙酸乙酯萃取，并且有机层以盐水洗涤，经硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物，为浅黄色固体(48.6mg,29％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.518,[M+H]+＝591.10,方法＝R；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.23(s,1H),8.96(d,J＝6.8Hz,1H),8.83(s,1H),8.69(s,1H),8.49(s,1H),8.48(s,1H),8.37(d,J＝6.0Hz,1H),8.20(s,1H),7.90(s,1H),7.80(s,1H),7.12(s,1H),4.85-4.72(m,6H),4.46(m,2H),3.84(m,2H),1.56(s,6H),1.16(m,3H)。
实施例256:4-(6-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基)-1-异 丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)吡咯烷-2-酮
步骤1:4-(6-溴-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)吡咯烷-2-酮
向反应小瓶中添加6-溴-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(实施例253,步骤7)(268mg,1.36mmol)、2-氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-甲酸叔丁基酯(500mg,2.73mmol)和乙酸(4mL)。反应混合物于105℃搅拌过夜。将反应冷却至室温,真空浓缩且剩余物溶解于乙酸乙酯(10mL)。期望产物通过过滤分离并在烘箱中干燥得到标题化合物，为棕色固体(150mg,39％)。LCMS(ESI):RT(min)＝0.931,[M+H]+＝280,方法＝R.
步骤2:4-[6-溴-1-(丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基]吡咯烷-2-酮
向反应小瓶中添加4-(6-溴-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)吡咯烷-2-酮(50mg,0.18mmol)、碳酸铯(116mg,0.36mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(2mL)。并将反应混合物搅拌30min并添加2-碘丙烷(63.7mg,0.380mmol)。并将反应混合物于80℃搅拌2h，冷却至室温，以水稀释，并以乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-100％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物为浅黄色油状物(30mg,52％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.101,[M+H]+＝322&324,方法＝N.
步骤3:4-[6-([2-[1-(环丙烷磺酰基)-1H-吡唑-4-基]嘧啶-4-基]氨基)-1-(丙- 2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基]吡咯烷-2-酮
向反应小瓶中添加4-[6-溴-1-(丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基]吡咯烷-2-酮(50mg,0.16mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(14mg,0.020mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(17.5mg,0.03mmol)、碳酸铯(101mg,0.30mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基胺(实施例A62)(41mg,0.15mmol)和1,4-二噁烷(5mL)。并将反应混合物于100℃搅拌2h，冷却至室温，过滤并真空浓缩。粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物，为白色固体(23.8mg,30％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.543,[M+H]+＝507.05,方法＝R.1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ10.21(s,1H),8.67(s,1H),8.56(s,1H),8.51-8.38(m,3H),8.08(s,1H),7.45(s,1H),7.17(s,1H),4.99-4.93(m,1H),4.79-4.64(m,1H),3.32-3.31(m,2H),2.39-2.28(m,2H),2.17-2.01(m,1H),1.52(d,J＝3Hz,6H),1.51(s,2H),1.50-1.37(m,2H)。
实施例257:N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-2-甲基-1-(1, 1,1-三氟丙-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:(E)-6-溴-N3-(2-乙氧基亚丙基)-N4-(1,1,1-三氟丙-2-基)吡啶-3,4-二胺
6-溴-4-N-(1,1,1-三氟丙-2-基)吡啶-3,4-二胺(类似于实施例A60制备,步骤2)(200mg,0.70mmol)溶解于1,1,1-三乙氧基乙烷(10mL)和乙酸(1mL)中并于80℃搅拌16h。混合物冷却至室温并真空浓缩得到标题化合物，为黄色油状物(23.8mg,30％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.300,[M+H]+＝354&356,方法＝L.
步骤2:6-溴-2-甲基-1-(1,1,1-三氟丙-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
向反应小瓶中添加(E)-6-溴-N3-(2-乙氧基丙叉基)-N4-(1,1,1-三氟丙-2-基)吡啶-3,4-二胺(300mg,0.85mmol)、碳酸钾(1.00g,7.24mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(10mL)。并将反应混合物于100℃搅拌16h。在冷却至室温后，反应混合物以水稀释且以乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂:30％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物，为黄色油状物(120mg,48％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.376,[M+H]+＝308,方法＝M.
步骤3:2-氯-N-[2-甲基-1-(1,1,1-三氟丙-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基] 嘧啶-4-胺
向反应小瓶中添加6-溴-2-甲基-1-(1,1,1-三氟丙-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(120mg,0.39mmol)、2-氯嘧啶-4-胺(52mg,0.40mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(45mg,0.080mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(38mg,0.04mmol)、碳酸铯(397mg,1.22mmol)和1,4-二噁烷(5mL)。并将反应混合物于100℃搅拌2h。在冷却至室温后，反应经过滤并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂:75％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物，为白色固体(60mg,43％)。LCMS(ESI):RT(min)＝0.814,[M+H]+＝357,方法＝S.
步骤4:N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-2-甲基-1-(1,1,1- 三氟丙-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向反应小瓶中添加2-氯-N-[2-甲基-1-(1,1,1-三氟丙-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]嘧啶-4-胺(60mg,0.17mmol)、1-(环丙基磺酰基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(实施例51,步骤6)(62mg,0.21mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(23mg,0.02mmol)、碳酸钠(72mg,0.68mmol)、1,4-二噁烷(4mL)和水(0.4mL)。反应混合物在微波中于100℃辐照60min。在冷却至室温后，反应经过滤并真空浓缩。粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物，为白色固体(19.8mg,24％)。LCMS(ESI):RT(min)＝2.369,[M+H]+＝493,方法L；1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ10.26(s,1H),8.63-8.58(m,2H),8.45-8.33(m,3H),7.29(m,1H),5.73-5.57(m,1H),3.25-3.24(m,1H),2.62(s,3H),1.92-1.90(d,J＝6.8Hz,3H),1.33-1.15(m,4H)。
实施例258:1-异丙基-2-甲基-N-(2-(1-(吡咯烷-3-基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧 啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:3-[4-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-磺酰基]吡咯 烷-1-甲酸叔丁基酯
向反应小瓶中添加4-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(790mg,4.07mmol)、碳酸铯(3.60g,11.0mmol)、3-(氯磺酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(1g,3.71mmol)和乙腈(30mL)。反应混合物于室温搅拌过夜。反应经过滤并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物，为黄色固体(800mg,50％)。LCMS(ESI):RT(min)＝0.932,[M+H]+＝428,方法＝S.
步骤2:3-[4-(4-[[2-甲基-1-(丙-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]氨基]嘧 啶-2-基)-1H-吡唑-1-磺酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯
向反应小瓶中添加3-[4-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-磺酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(500mg,1.17mmol)、N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(354mg,1.17mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(135mg,0.120mmol)、碳酸钠(372mg,3.51mmol)、1,4-二噁烷(15mL)和水(1.5mL)。反应混合物经历微波辐照于100℃ 1h。将反应冷却至室温，过滤并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物，为浅黄色固体(500mg,75％)。LCMS(ESI):RT(min)＝0.777,[M+H]+＝568,方法＝S.
步骤3:1-异丙基-2-甲基-N-(2-(1-(吡咯烷-3-基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶- 4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
3-[4-(4-[[2-甲基-1-(丙-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]氨基]嘧啶-2-基)-1H-吡唑-1-磺酰基]吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(500mg,0.88mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)和三氟乙酸(3mL)。所得溶液于室温搅拌40min并真空浓缩。粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物，为白色固体(38.7mg,9％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.133,[M+H]+＝468.00,方法＝L；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.20(s,1H),8.68(s,1H),8.56(s,1H),8.49-8.38(m,3H),7.23(s,1H),4.80-4.76(m,1H),4.33-4.27(m,1H),3.29-3.02(m,3H),2.76(s,2H),2.58(s,3H),2.07-2.03(m,2H),1.63(d,J＝6Hz,6H)。
实施例259:1-(3-(4-(4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基) 嘧啶-2-基)-1H-吡唑-1-基磺酰基)吡咯烷-1-基)乙酮
向反应小瓶中添加1-异丙基-2-甲基-N-(2-(1-(吡咯烷-3-基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例258)(150mg,0.32mmol)、三乙基胺(97mg,0.96mmol)、乙酰氯(25mg,0.32mmol)和四氢呋喃(10mL)。并将反应混合物于0℃搅拌40min。所得混合物经真空浓缩并通过硅胶色谱纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物，为白色固体(13.6mg,8％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.264,[M+H]+＝510.05,方法＝L；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.20(s,1H),8.73-8.68(m,1H),8.57-8.52(m,2H),8.39(s,2H),7.24(s,1H),4.77-4.66(m,2H),3.94-3.81(m,2H),3.58-3.51(m,2H),2.58-2.42(m,3H),2.28(s,2H),1.93-1.88(m,3H),1.62(s,6H).
实施例260:1-异丙基-2-甲基-N-(2-(1-(氧杂环丁烷-3-基磺酰基)-1H-吡唑-4- 基)嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:1-(氧杂环丁烷-3-基硫烷基)乙-1-酮
向反应小瓶中添加3-碘氧杂环丁烷(2.5g,13.6mmol),potassium乙烷thioate(4.60g,34.0mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(8mL)。反应混合物于室温搅拌过夜。所得溶液以乙酸乙酯萃取并且有机层以盐水洗涤经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂:10％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物为浅黄色油状物(1.3g,72％)。
步骤2:氧杂环丁烷-3-磺酰氯
于0℃向吹扫并保持以氮气惰性气氛的含N-氯琥珀酰亚胺(2.00g,15.0mmol)和乙腈(8mL)的反应小瓶中伴随搅拌滴加氯化氢(7N，在水中)(0.3mL)，接着滴加1-(氧杂环丁烷-3-基硫烷基)乙-1-酮(500mg,3.78mmol)在乙腈(2mL)中的溶液。所得溶液于0℃搅拌20min，真空浓缩并于乙醚共蒸发得到标题化合物，为无色油状物(0.5g)。粗产物不经进一步纯化而用于后续步骤。
步骤3:2-氯嘧啶-4-基(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基甲 酸叔丁基酯
向反应小瓶中添加N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(500mg,1.65mmol)、三乙基胺(500mg,4.94mmol)、4-二甲基氨基吡啶(20mg,0.160mmol,)、二碳酸二叔丁基酯(1.00g,4.58mmol)and二氯甲烷(10mL)。并将反应混合物于室温搅拌16h。所得溶液以50mL的水稀释，以3x50mL的乙酸乙酯萃取，以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法以乙酸乙酯/石油醚(4:1)纯化得到标题化合物，为浅黄色固体(0.6g,90％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.310,[M+H]+＝403,方法＝M.
步骤4:-2-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡 啶-6-基)氨基甲酸叔丁基酯
向反应小瓶中添加2-氯嘧啶-4-基(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基甲酸叔丁基酯(1.00g,2.48mmol)、4-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(570mg,2.94mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(300mg,0.26mmol)、碳酸钠(790mg,7.45mmol,)、1,4-二噁烷(20mL)和水(2mL)。反应混合物以微波辐射辐照于100℃ 90min。反应经过滤并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂:10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物，为白色固体(700mg,65％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.196,[M+H]+＝435,方法＝M.
步骤5:1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基(2-(1-(氧杂环丁烷-3-基 磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯
向吹扫并保持在氮气的惰性气氛下的反应小瓶中放置氧杂环丁烷-3-磺酰氯(210mg,1.34mmol)、三乙基胺(200mg,1.98mmol)和二氯甲烷(10mL)。接着伴随搅拌滴加2-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基甲酸叔丁基酯(300mg,0.69mmol)。并于0℃将反应混合物搅拌3h。反应混合物以盐水洗涤经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物，为黄色固体(200mg,52％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.269,[M+H]+＝555,方法＝R.
步骤6:1-异丙基-2-甲基-N-(2-(1-(氧杂环丁烷-3-基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧 啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向反应小瓶中添加1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基(2-(1-(氧杂环丁烷-3-基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯(200mg,0.36mmol)、三氟乙酸(1mL)和二氯甲烷(1mL)。并于室温将反应混合物搅拌30min。添加饱和碳酸氢钠水溶液且所得溶液以乙酸乙酯萃取。有机层以盐水洗涤经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物，为白色固体(60mg,37％)。LCMS(ESI):RT(min)＝2.052,[M+H]+＝455.05,方法＝R；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.20(s,1H),8.72(s,1H),8.57(s,1H),8.50(s,1H),8.41-8.38(m,2H),7.25(s,1H),5.38-5.31(m,1H),4.93-4.75(m,5H),2.68(s,3H),1.62(s,6H)。
实施例261:(1-异丙基-6-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基)-1H-咪唑并 [4,5-c]吡啶-2-基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮
步骤1:6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-甲酸
向反应小瓶中添加6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇(实施例251,步骤5)(1g,3.70mmol)、高锰酸钾(5.9g,37mmol)、丙酮(20mL)和水(7mL)。并将反应混合物于室温搅拌2h，通过添加甲醇淬灭并过滤。所得混合物经真空浓缩得到标题化合物，为黄色固体(2g,76％)。粗产物不经进一步纯化而用于后续步骤。LCMS(ESI):RT(min)＝1.201,[M+H]+＝284,方法＝R.
步骤2:(6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮
向反应小瓶中添加6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-甲酸(500mg,1.76mmol)、1-甲基哌嗪(5.4g,53.91mmol)、苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基鏻六氟磷酸盐(2.8g,3.00当量)、N,N-二异丙基乙基胺(464mg,3.59mmol)and N,N-二甲基甲酰胺(10mL)。反应混合物于室温搅拌过夜，以水稀释并且以乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物，为黄色油状物(400mg,62％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.083,[M+H]+＝366,方法＝M.
步骤3:(1-异丙基-6-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基)-1H-咪唑并[4,5- c]吡啶-2-基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮
向反应小瓶中添加(6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(200mg,0.55mmol,1.00当量)、三(二苄叉基丙酮)二钯氯仿复合物(25.9mg,0.05当量)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(28.9mg,0.05当量)、2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(137mg,0.66mmol,1.20当量)、碳酸铯(815mg,5.00当量)和1,4-二噁烷(5mL)。反应混合物在微波辐射下于140℃加热1h。反应经过滤并真空浓缩。粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物，为白色固体(13.1mg,5％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.100,[M+H]+＝494,方法＝K；1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ9.89(s,1H),8.73(s,1H),8.50(s,1H),8.00-7.98(d,J＝5.7Hz,1H),6.42-6.34(d,J＝5.4Hz,1H),4.76-4.67(m,1H),4.26-4.23(m,2H),3.72(m,2H),3.52-3.44(m,3H),3.44-3.36(m,2H),3.29(s,3H),2.43-2.42(m,2H),2.33-2.28(m,2H),2.22(s,3H),1.93-1.89(m,2H),1.59-1.57(d,J＝6.9Hz,6H),1.50-1.35(m,2H)。
实施例262:2-氯-6-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基)-1- 异丙基-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
步骤1:6-溴-2-氯-1-异丙基-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶- 3-甲酰胺
向吹扫并保持在氮气的惰性气氛下的含6-溴-1-异丙基-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(使用对于实施例51,步骤1-4描述的类似方法制备)(100mg,0.27mmol)在四氢呋喃(3mL)中的溶液的反应小瓶中于-78℃伴随搅拌滴加二异丙基氨化锂(0.82mL,3.00当量)。所得溶液于-78℃搅拌30min。向反应混合物经10min于-78℃分3批添加过氯乙烷(323mg,4.00当量)。所得溶液于-78℃搅拌10min，接着于室温搅拌1h。反应然后以水淬灭并以乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物，为白色固体(80mg,73％)。LCMS(ESI):RT(min)＝0.965,[M+H]+＝400&402,方法＝L.
步骤2:2-氯-6-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基)-1-异丙 基-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
向反应小瓶中添加6-溴-2-氯-1-异丙基-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(60mg,0.15mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基胺(实施例A62)(52.0mg,0.20mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(17.9mg,0.02mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(22.5mg,0.04mmol)、碳酸铯(127mg,0.39mmol)和1,4-二噁烷(3mL)。并于100℃将反应混合物搅拌3h。将反应冷却至室温，过滤，并真空浓缩。粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物，为白色固体(20.4mg,23％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.579,[M+H]+＝585.20,方法＝M；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ10.28(s,1H),8.77(s,1H),8.68(s,1H),8.48(s,2H),8.41(d,J＝5.6Hz,1H),7.95(d,J＝8Hz,1H),7.25(s,1H),5.02-5.06(m,1H),4.06-4.02(m,1H),3.90-3.87(m,2H),3.45-3.32(m,2H),3.29-3.25(m,1H),1.84-1.82(m,2H),1.68-1.57(m,8H),1.37-1.34(m,4H)。
实施例263:N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-2-(二氟甲 基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:6-溴-2-(二氟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
向反应小瓶中添加三苯基膦(17.0g,64.8mmol)、2,2-二氟乙酸(2.5g,26.0mmol)、三乙基胺(7.30g,72.1mmol)、6-溴-N4-异丙基吡啶-3,4-二胺(实施例46,步骤4)(5.00g,21.7mmol)和四氯化碳(50mL)。反应混合物在氮气的惰性气氛下于80℃搅拌过夜。反应混合物以水稀释，以乙酸乙酯萃取，并且有机层以盐水洗涤经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物以25％乙酸乙酯/石油醚通过色谱法纯化得到标题化合物，为黄色固体(4g,63％)。
步骤2:2-氯-N-[2-(二氟甲基)-1-(丙-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]嘧 啶-4-胺
向反应小瓶中添加6-溴-2-(二氟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(1.0g,3.45mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯氯仿复合物(160mg,0.05当量)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(0.1g,0.05当量)、2-氯嘧啶-4-胺(400mg,3.09mmol)、碳酸铯(2.30g,7.06mmol)和1,4-二噁烷(20mL)。并将反应混合物于100℃搅拌5h。反应混合物以水稀释并以乙酸乙酯萃取。有机层以盐水洗涤，经硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物，为黄色固体(0.5g,43％)。粗产物不经进一步纯化而用于后续步骤。LCMS(ESI):RT(min)＝2.083,[M+H]+＝339,方法＝R.
步骤3:2-[1-(环丙烷磺酰基)-1H-吡唑-4-基]-N-[2-(二氟甲基)-1-(丙-2-基)- 1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]嘧啶-4-胺
向反应小瓶中添加2-氯-N-[2-(二氟甲基)-1-(丙-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]嘧啶-4-胺(300mg,0.89mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(50mg,0.04mmol)、碳酸钠(0.19g,1.79mmol)、1-(环丙烷磺酰基)-4-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(实施例51,步骤6)(320mg,1.07mmol)、二噁烷(5mL)和水(0.5mL)。反应混合物在氮气的惰性气氛下于90℃搅拌过夜。所得溶液以水稀释，以乙酸乙酯萃取和有机层以盐水洗涤经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂:30％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物，为灰白色固体(200mg,48％)。LCMS(ESI):RT(min)＝2.488,[M+H]+＝475.20,方法＝R；1HN MR(400MHz,DMSO-d6):δ10.40(s,1H),8.87(s,1H),8.69(s,1H),8.61(s,1H),8.49(s,1H),8.44(d,J＝4.2Hz,1H),7.47(m,1H),7.25(d,J＝4Hz,1H),5.00(m,1H),3.26(m,1H),1.70(s,6H),1.33(m,2H),1.27(m,2H)。
实施例264:6-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基)-1-异丙 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-甲醛
向反应小瓶中添加N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例52)(200mg,0.44mmol)、2-碘酰基苯甲酸(184mg,1.85mmol,)和DMSO(3mL)。并将反应混合物于室温搅拌6h。所得溶液以水稀释并过滤。粗的沉淀通过硅胶色谱法纯化(溶剂:20％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物，为黄色固体(13.4mg,7％)。LCMS(ESI):RT(min)＝2.158,[M+H]+＝453.05,方法＝R；1H NMR(300MHz,CDCl3):δ10.07(s,1H),8.99(s,1H),8.71(s,1H),8.63(s,1H),8.49(s,1H),8.45(d,J＝5.7Hz,1H),7.93(br,1H),6.84(d,J＝5.7Hz,1H),5.94-5.85(m,1H),2.89-2.80(m,1H),1.78(d,J＝6.9Hz,6H),1.56-1.51(m,2H),1.29-1.22(m,2H)。
实施例265:(6-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基)-1-(戊- 2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇
步骤1:2-溴-5-硝基-N-(戊-2-基)吡啶-4-胺
向反应小瓶中添加2,4-二溴-5-硝基吡啶(5.89g,20.9mmol)、戊-2-胺(2.00g,22.9mmol)、三乙基胺(5.8mL,41.73mmol)和四氢呋喃(30mL)。并将反应混合物于室温搅拌8h。反应通过添加水淬灭并以乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物，为黄色固体(5.66g,94％)。粗产物不经进一步纯化用于后续步骤。
步骤2:6-溴-4-N-(戊-2-基)吡啶-3,4-二胺
向反应小瓶中添加2-溴-5-硝基-N-(戊-2-基)吡啶-4-胺(3g,10.4mmol)、氧化铂(IV)(400mg,1.76mmol)和四氢呋喃(20mL)。并将反应混合物在氢气气氛(1atm)下于室温搅拌2h。反应经过滤并真空浓缩得到标题化合物，为深红色油状物(2.7g,99％)。粗产物不经进一步纯化用于后续步骤。LCMS(ESI):RT(min)＝1.133,[M+H]+＝258,方法＝N.
步骤3:2-(6-溴-4-(戊-2-基氨基)吡啶-3-基氨基)-2-氧代乙酸乙酯
向反应小瓶中添加6-溴-4-N-(戊-2-基)吡啶-3,4-二胺(2.71g,10.5mmol)、三乙基胺(3mL,21.58mmol)、2-氯-2-氧代乙酸乙酯(1.43g,10.5mmol)和二氯甲烷(20mL)。于0℃搅拌反应1h，通过添加水淬灭并以二氯甲烷萃取(2x).合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂:50％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物，为白色固体(1g,27％)。LCMS(ESI):RT(min)＝1.195,[M+H]+＝358,方法＝N.
步骤4:乙酸(6-溴-1-(戊-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲基酯
2-(6-溴-4-(戊-2-基氨基)吡啶-3-基氨基)-2-氧代乙酸乙酯(1g,2.79mmol)溶解于乙酸(10mL)并在微波辐射下于120℃加热4h。反应通过添加水淬灭并以二氯甲烷(3x)萃取。合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物，为白色固体(610mg,64％)。粗产物不经进一步纯化用于后续步骤。LCMS(ESI):RT(min)＝1.411,[M+H]+＝340,方法＝M.
步骤5:(6-溴-1-(戊-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇
向反应小瓶中添加乙酸(6-溴-1-(戊-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲基酯(610mg,1.79mmol)、氢氧化钠(144mg,4.49mmol)、水(1mL)和甲醇(10mL)。并将反应混合物于室温搅拌30min。反应通过添加水淬灭并以二氯甲烷(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物，为白色固体(500mg,93％)。粗产物不经进一步纯化用于后续步骤。LCMS(ESI):RT(min)＝0.914,[M+H]+＝298,方法＝M.
步骤6:(6-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基)-1-(戊-2- 基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇
向反应小瓶中添加(6-溴-1-(戊-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇(440mg,1.48mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基胺(实施例A62)(392mg,1.48mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(136mg,0.15mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(171mg,0.30mmol)、碳酸铯(966mg,2.96mmol)和二噁烷(10mL)。反应混合物在氮气的惰性气氛下于100℃加热90min。反应然后通过添加水淬灭并以二氯甲烷(3x)萃取。合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂:10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物，为白色固体(160mg,22％)。LCMS(ESI):RT(min)＝2.406,[M+H]+＝483,方法＝N；1H NMR(300Hz,CDCl3):δ8.80(s,1H),8.68(s,1H),8.48(s,1H),8.40-8.38(d,J＝6.0Hz,2H),7.98(s,1H),6.89-6.87(d,J＝5.7Hz,1H),4.92(s,2H),4.62-4.59(m,1H),3.88(s,1H),2.86-2.81(m,1H),2.22-2.17(m,1H),2.04-1.96(m,1H),1.76-1.73(d,J＝6.9Hz,3H),1.56-1.50(m,2H),1.37-1.32(m,1H),1.26-1.11(m,3H),0.89(m,3H)
实施例266:(反式)-N-{1-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨 基)嘧啶-2-基]-4-甲氧基哌啶-3-基}甲磺酰胺甲酸盐
步骤1:(反式)-3-叠氮基-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
甲基碘(328μL,5.27mmol)添加至(反式)-3-叠氮基-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters 2008,18,5063-5065)(1.16g,4.79mmol)在四氢呋喃(16mL)中的溶液。冷却至0℃后，缓慢添加氢化钠(60％在矿物油中)(230mg,5.75mmol)并且反应混合物于0℃搅拌15min，然后温热至室温并于室温搅拌18h。粗混合物通过添加甲醇淬灭并以二氯甲烷稀释。有机相以水洗涤，经硫酸镁干燥并真空浓缩。所得黄色油状物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:0-30％EtOAc/环己烷)得到标题化合物(0.92g,75％)，为无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+257.2.
步骤2:(反式)-3-氨基-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
(反式)-3-叠氮基-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(300mg,1.17mmol)在工业甲基化酒精(10mL)中的混合物在氢气气氛下在10％钯/碳(20mg,催化性的)的存在下搅拌4h。反应混合物经硅藻土过滤，以另外的甲基化酒精漂洗，并且滤液经真空浓缩得到标题化合物(310mg,定量)。LCMS(ESI):[M+H]+231.1.
步骤3:(反式)-3-甲磺酰基氨基-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
于0℃在氮气气氛下三乙基胺(281μl,2.02mmol)添加至(反式)-3-氨基-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(310mg,1.35mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液，接着添加甲磺酰氯(136μL,1.75mmol)。反应混合物缓慢地温热至室温并搅拌18h。粗混合物以碳酸氢钠的饱和水溶液稀释并进一步以二氯甲烷萃取。有机层经硫酸镁干燥并真空浓缩得到标题化合物，为黄色油状物(460mg,定量)。LCMS(ESI):[M+H]+309.1.
步骤4:N-((反式)-4-甲氧基哌啶-3-基)甲磺酰胺
(反式)-3-甲磺酰基氨基-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(460mg,1.49mmol)在二氯甲烷(15mL)中的溶液以三氟乙酸(3.75mL)处理并于室温在氮气气氛下搅拌18h。混合物经减压浓缩并且所得剩余物通过SCX纯化，首先以甲醇洗脱并且然后2M氨/甲醇洗脱得到标题化合物，为棕色油状物(230mg,74％)。LCMS(ESI):[M+H]+209.0.
步骤5:(反式)-N-{1-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基) 嘧啶-2-基]-4-甲氧基哌啶-3-基}甲磺酰胺 甲酸盐
(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例46,步骤7)(120mg,0.305mmol)、(反式)-N-(4-甲氧基哌啶-3-基)甲磺酰胺(70mg,0.336mmol)和三乙基胺(0.6mL)在异丙醇(120mL)中的混合物在密封反应小瓶中在氩气气氛下于110℃加热18h。冷却至室温后，挥发物经真空浓缩并且所得剩余物通过反相HPLC纯化得到标题化合物，为甲酸盐(87mg,60％)。LCMS(ESI):RT 2.14min[M+H]+475.1,方法F；1HNMR(400MHz,DMSO-d6):9.68(1H,s),8.49(1H,d,J＝0.9Hz),8.24(1H,s),8.14(1H,s),7.96(1H,d,J＝5.7Hz),7.35(1H,d,J＝7.9Hz),6.55-6.47(1H,m),4.76-4.64(1H,m),4.56-4.39(2H,m),3.35(3H,s),3.32-2.94(4H,m),2.91(3H,s),2.55(3H,s),2.21-2.11(1H,m),1.60-1.52(6H,m),1.39-1.28(1H,m).
实施例267:(反式)-[2-(3-氨基-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-(1-异丙基-2- 甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺
步骤1:(反式)-3-叠氮基-4-甲氧基哌啶
(反式)-3-叠氮基-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(263mg,0.78mmol)在二氯甲烷(1.25mL)中的溶液以三氟乙酸(2mL)于0℃处理并缓慢的温热至室温。3h后，反应混合物经真空浓缩。所得残余物通过SCX筒纯化，首先以甲醇洗脱并且然后以2M氨/甲醇洗脱，得到标题化合物，为无色油状物(112mg,92％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ3.31(3H,s),3.32-3.28(1H,m),3.20-3.06(1H,m),2.97(1h，ddd,J＝12.4,4.8,1.6Hz),2.82-2.89(1h，m),2.34(1h，td,J＝12.4,2.7Hz),2.20(1h，dd,J＝12.4,10.2Hz),2.02-2.04(1h，m),1.18(1h，tdd,J＝12.2,10.4,4.3Hz).
步骤2:(反式)-[2-(3-叠氮基-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-(1-异丙基-2-甲 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺
(反式)-3-叠氮基-4-甲氧基哌啶(54mg,0.347mmol)、(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例46,步骤7)(100mg,0.33mmol)、三乙基胺(92μL)在异丙醇(0.6mL)中的混合物在氩气气氛下于150℃在微波辐射下加热30min。反应混合物经真空浓缩并且所得残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度0-5％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物，为米色固体(113mg,81％)。LCMS(ESI):[M+H]+423.1.
步骤3:(反式)-[2-(3-氨基-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-(1-异丙基-2-甲 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺
[2-((反式)-3-叠氮基-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(110mg,0.26mmol)在工业甲基化酒精(4mL)中的溶液以10％钯/碳(20mg)在氢气气氛下于室温处理18h。反应混合物以氮气吹扫并并通过硅藻土过滤，以另外的工业甲基化酒精漂洗。所得剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度0-8％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)得到标题化合物，为白色泡沫(36mg,35％)。LCMS(ESI):RT 1.66min,[M+H]+397.1,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.68(1H,s),8.51(1H,d,J＝0.9Hz),8.33(1H,s),7.96(1H,d,J＝5.7Hz),6.45(1H,d,J＝5.7Hz),4.80-4.68(1H,m),4.57-4.46(2H,m),3.35(3H,s),3.19-3.01(2H,m),2.89-2.79(1H,m),2.64-2.54(4H,m),2.14-2.05(1H,m),1.69-1.52(8H,m),1.34-1.22(1H,m)。
实施例268:[1-(1-环丙基乙基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]-[2-(4- 甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]胺
步骤1:(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)-(1-环丙基乙基)胺
二异丙基乙基胺(1.14mL,6.5mmol)添加至2,4-二氯-5-硝基吡啶(0.5g,2.6mmol)和1-环丙基乙基胺盐酸盐(632mg,5.2mmol)在四氢呋喃(8mL)中的混合物。反应混合物于室温搅拌4h。添加另外的二异丙基乙基胺(0.5mL)并持续搅拌18h。反应混合物经真空浓缩并且所得剩余物在水和二氯甲烷之间分配。有机层经硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-30％EtOAc/环己烷)得到标题化合物，为黄色固体(392mg,62％)。LCMS(ESI):[M+H]+242.0.
步骤2:6-氯-N4-(1-环丙基乙基)吡啶-3,4-二胺
6-氯-N4-(1-环丙基乙基)吡啶-3,4-二胺(354mg,61％)从(2-氯-5-硝基吡啶-4-基)-(1-环丙基乙基)胺(392mg,1.63mmol)根据类似于在实施例12,步骤2中描述的方法制备.LCMS(ESI):[M+H]+212.0
步骤3:6-氯-1-(1-环丙基乙基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-氯-N4-(1-环丙基乙基)吡啶-3,4-二胺(0.354mg,1.67mmol)、原甲酸三乙基酯(3mL,过量)并且甲酸(15滴)在密封反应小瓶中在微波辐射中于220℃加热5h。冷却的混合物通过SCX筒纯化，首先以甲醇洗脱并且然后以2M氨/甲醇洗脱，接着通过硅胶色谱纯化(溶剂梯度:10-75％EtOAc/环己烷)得到化合物，为棕色固体(165mg,42％)。LCMS(ESI):[M+H]+236.0
步骤4:[1-(1-环丙基乙基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]-[2-(4-甲氧 基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]胺
2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(84mg,0.402mmol),2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(37mg,0.077mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(18mg,19μmol)和碳酸铯(249mg,0.77mmol)悬浮在二噁烷(2mL)中。反应混合物以氩气吹扫并于100℃加热3h。反应混合物冷却至室温并流经氧化硅塞，以0-10％甲醇/二氯甲烷的溶剂梯度的洗脱产物。所得残余物进一步通过制备性HPLC纯化得到标题化合物(22mg,14％)。LCMS(ESI):RT2.48min,[M+H]+408.2,方法＝F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.71(1H,s),8.51(1H,s),8.45(1H,br s),7.95(1H,d,J＝5.6Hz),6.40(1H,br d,J＝5.6Hz),4.25-4.20(2H,m),3.79-3.71(1H,m),3.49-3.43(1H,m),3.41-3.35(2H,m),3.29(3H,s),2.51(3H,s),1.92-1.85(2H,m),1.63(3H,d,J＝7.0Hz),1.61-1.55(1H,m),1.47-1.38(2H,m),0.71-0.65(1H,m),0.56-0.50(1H,m),0.46-0.39(1H,m),0.28-0.22(1H,m).
实施例269:(2-环己基嘧啶-4-基)-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺
步骤1:(2-环己-1-烯基嘧啶-4-基)(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺
(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例12,步骤4)(100mg,0.35mmol)、1-环己烯-1-基硼酸频哪醇酯(112μL,0.52mmol),四(三苯基膦)钯(0)(20mg,5mol％)和碳酸铯(170mg,0.52mmol)在二噁烷(3mL)和水(0.5mL)中的混合物以氮气脱气并吹扫。所得混合物于120℃在微波辐射下加热45min。反应混合物以甲醇稀释并装载至SCX筒上。该筒以甲醇洗涤并且然后以2M氨/甲醇洗脱。各产物级分经真空浓缩。所得残余物通过色谱法纯化(溶剂梯度:1-10％2M氨，在甲醇中/二氯甲烷)得到灰白色固体(89mg,77％)LCMS(ESI):[M+H]+335.
步骤2:(2-环己基嘧啶-4-基)(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺
(2-环己-1-烯基嘧啶-4-基)(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(85mg,0.27mmol)和10％钯/碳(85mg)在工业甲基化酒精(20mL)中的混合物在氢气气氛下搅拌16h，然后通过硅藻土垫过滤。滤液经真空浓缩并且剩余物通过反相HPLC纯化得到无色固体(45mg,53％)。LCMS(ESI):RT 2.70min[M+H]+337,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.06(s,1H),8.68(s,1H),8.64(s,1H),8.34(s,1H),8.26(d,J＝5.7Hz,1H),7.02(d,J＝5.7Hz,1H),4.76–4.66(m,1H),2.74–2.67(m,1H),2.06–2.00(m,2H),1.84–1.60(m,5H),1.60(d,J＝6.5Hz,6H),1.45–1.34(m,2H),1.30–1.19(m,1H).
实施例270:{2-[4-(2-氨基乙基)-4-甲氧基哌啶-1-基]嘧啶-4-基}(1-异丙基-2- 甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺
步骤1:4-(2-叠氮基乙基)-4-甲氧基哌啶
4-(2-叠氮基乙基)-4-甲氧基哌啶从4-(2-叠氮基乙基)-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯在于对于实施例A38所描述的类似方法中。这得到了无色油状物合成。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.35(t,J＝7.4Hz,2H),3.20–3.09(m,4H),3.17(s,3H),1.98–1.92(m,2H),1.87–1.79(m,2H),1.81(t,J＝7.4Hz,2H).
步骤2:{2-[4-(2-叠氮基乙基)-4-甲氧基哌啶-1-基]嘧啶-4-基}(1-异丙基-2-甲 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺
{2-[4-(2-叠氮基乙基)-4-甲氧基哌啶-1-基]嘧啶-4-基}(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺从N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺和4-(2-叠氮基乙基)-4-甲氧基哌啶在于对于实施例46所描述的类似方法中合成。这得到了无色固体。LCMS(ESI):[M+H]+451.
步骤3:{2-[4-(2-氨基乙基)-4-甲氧基哌啶-1-基]嘧啶-4-基}(1-异丙基-2-甲 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺
{2-[4-(2-叠氮基乙基)-4-甲氧基哌啶-1-基]嘧啶-4-基}(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(148mg,3.28mmol)和10％钯/碳(15mg)在工业甲基化酒精(15mL)中的混合物在氢气气氛下搅拌16h，然后通过硅藻土垫过滤。滤液经真空浓缩并且剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:5-10％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)得到无色固体(94mg,68％)。LCMS(ESI):RT 1.73min[M+H]+425,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.67(s,1H),8.50(s,1H),8.39(s,1H),7.94(d,J＝5.6Hz,1H),6.39(d,J＝5.7Hz,1H),4.76–4.66(m,1H),4.34–4.29(m,2H),3.29–3.20(m,2H),3.14(s,3H),2.59–2.55(m,2H),2.56(s,3H),1.77–1.72(m,2H),1.60–1.54(m,2H),1.55(d,J＝6.8Hz,6H),1.48–1.41(m,2H)。
实施例271:[2-(4-氨基甲基-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基](1-异丙基-2-甲 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺
[2-(4-氨基甲基-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基](1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺从N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺和4-叠氮基甲基-4-甲氧基哌啶(WO2005/79805)在于对于实施例270所描述的类似方法中合成。这得到了灰白色固体。LCMS(ESI):RT 1.69min[M+H]+411,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.68(s,1H),8.50(s,1H),8.40(s,1H),7.95(d,J＝5.7Hz,1H),6.40(d,J＝5.7Hz,1H),4.77–4.66(m,1H),4.37–4.31(m,2H),3.29–3.21(m,2H),3.16(s,3H),2.66(s,2H),2.56(s,3H),1.79–1.74(m,2H),1.56(d,J＝6.9Hz,6H),1.50–1.42(m,2H).
实施例272:{6-[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基]-1-异丙基- 1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基}甲醇
步骤1:[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基]-[1-异丙基-2-(四氢- 吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]-胺
(2-氯嘧啶-4-基)-[1-异丙基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(中间体A49)(1.59g,3.95mmol)、N-环丙基磺酰基-4-吡唑硼酸频哪醇酯(实施例51,步骤6)(1.41g,4.74mmol)、四三苯基膦钯(456mg,0.39mmol)和碳酸铯(1.67g,5.13mmol)溶解于二噁烷(50mL)和水(5mL)中。混合物以氩气脱气并且反应混合物于回流加热2.5h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-4％甲醇/EtOAc)得到化合物(1.94g,90％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝539.
步骤2:{6-[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基]-1-异丙基-1H- 咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基}甲醇
[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基]-[1-异丙基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(1.91g,3.54mmol)溶解于HCl(1.25M在甲醇中)(15mL)并且反应混合物于室温搅拌3h，接着于40℃搅拌1h。反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)。产物然后在水中回流1h，冷却至室温并通过过滤收集得到化合物(977mg,61％)。LCMS(ESI)RT 2.73min[M+H]+455,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.22(1H,s),8.67(1H,s),8.66(1H,s),8.48(1H,s),8.47(1H,br s),8.40(1H,d,J＝5.9Hz),7.28-7.20(1H,m),5.70(1H,t,J＝5.5Hz),5.00(1H,七重峰,J＝6.9Hz),4.74(2H,d,J＝5.5Hz),3.29-3.21(1H,m),1.65(6H,d,J＝6.9Hz),1.37-1.22(4H,m)。
实施例273:(1-异丙基-6-((2-((1R,5R,8r)-8-甲氧基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3- 基)嘧啶-4-基)氨基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇
的混合物N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(155.8mg,0.3867mmol)、(1S,5R,8r)-8-甲氧基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷盐酸盐(84.6mg,0.476mmol)、三乙基胺(0.20mL,1.4mmol)和2-丙醇(1.5mL)与150℃在微波辐射下加热30分钟。反应混合物以二氯甲烷稀释，以水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发。所得残余物溶解于甲醇(3.0mL)，并以氯化氢(4.0mol/L在二噁烷的溶液,1.0mL,4.0mmol)处理。该混合物于室温搅拌3小时,并且然后蒸发至干。反应混合物以二氯甲烷稀释，以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发.粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到103.9mg(63％)的标题化合物。LCMS(ESI)RT 3.299min[M+H]+424.3,方法B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.73(s,1H),8.63–8.52(m,2H),7.95(d,J＝5.6Hz,1H),6.37(d,J＝5.6Hz,1H),5.72–5.61(m,1H),4.95(p,J＝6.9Hz,1H),4.71(d,J＝5.5Hz,2H),4.16(d,J＝12.0Hz,2H),3.61(t,J＝4.9Hz,1H),3.37(s,3H),3.27–3.23(m,1H),2.30(s,2H),1.78–1.67(m,2H),1.57(d,J＝6.9Hz,6H),1.54–1.45(m,2H).
实施例274:{6-[2-(4-氨基甲基-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]-1-异丙 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基}甲醇
{6-[2-(4-氨基甲基-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基}甲醇从N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例251,步骤7)和4-叠氮基甲基-4-甲氧基哌啶(WO2005/79805)根据那些对于实施例270和实施例273描述的类似方法合成。这得到了灰白色固体。LCMS(ESI):RT 1.65min[M+H]+427,方法F；1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.65(s,1H),8.41(s,1H),8.04(d,J＝5.7Hz,1H),7.49(s,1H),6.04(d,J＝5.7Hz,1H),4.89(s,2H),4.85–4.77(m,1H),4.50–4.44(m,2H,3.41–3.34(m,2H),3.25(s,3H),2.71(s,2H),1.90–1.85(m,2H),1.67(d,J＝6.9Hz,6H),1.52–1.45(m,2H)
实施例275:(2-环己-1-烯基嘧啶-4-基)-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c] 吡啶-6-基)胺
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(151mg,0.5mmol)、1-环己烯-1-基硼酸频哪醇酯(156μL,0.75mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(29mg,0.25μmol,5mol％)和碳酸铯(325mg,1.0mmol)在二噁烷(5mL)和水(0.5mL)中的混合物于120℃在微波辐射下加热45min。反应混合物以甲醇稀释并装载至SCX筒上。该筒以甲醇洗涤并且然后以2M氨/甲醇洗脱。产物级分经真空浓缩。所得残余物通过色谱法纯化(氧化硅,梯度1-7％甲醇/二氯甲烷)得到灰白色固体，其从乙酸乙酯重结晶(79mg,77％)。LCMS(ESI):RT 1.73min:[M+H]+349.2方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.97(1H,s),8.63(1H,s),8.53(1H,d,J＝0.9Hz),8.29(1H,d,J＝5.6Hz),7.25-7.30(1H,m),7.00(1H,br d,J＝5.6Hz)4.74(1H,七重峰,6.9Hz),2.57-2.62(2H,m),2.57(3H,s),2.23-2.31(2H,m),1.70-1.78(2H,m),1.62-1.69(2H,m)1.57(6H,d,J＝6.9Hz)
实施例276:4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-甲 腈
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(605mg,2.0mmol)、氰化钠(118mg,2.4mmol)、1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷(224mg,2.00mmol)在DMSO(3mL)和水(1mL)中的混合物于80℃在氮气下加热12h。混合物以水稀释并且沉淀出固体。固体通过过滤分离。水性滤液以EtOAc萃取并且有机萃取物与固体物质合并。固体溶解于甲醇，吸收至硅藻土上并在氧化硅上纯化，以1-7％甲醇/二氯甲烷洗脱得到产物，其在乙酸乙酯中研磨得到乳状固体(580mg,定量)。LCMS(ESI):RT 2.63min,[M+H]+＝294.1,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.64(1H,s),8.58(1H,d,J＝0.9Hz),8.45(1H,d,J＝5.6Hz),8.05(1H,br s),7.75(1H,br s),4.74(1H,七重峰,J＝6.9Hz),2.58(3H,s),1.58(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例277 2-{6-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧 啶-2-基]-4,5,6,7-四氢吡唑并[3,4-c]吡啶-1-基}乙醇
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(100mg,0.33mmol)、2-(4,5,6,7-四氢吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)乙醇(87mg,0.43mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(230μL,1.32mmol)和n-丁醇(2mL)在密封容器中于110℃加热16h。反应混合物装载至SCX-2筒上，以甲醇洗涤并且产物以氨/甲醇(2N)洗脱。溶剂经真空浓缩并且剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)。产物通过超临界液体色谱进一步纯化得到标题化合物(16mg)。LCMS(ESI):RT＝2.02min,[M+H]+434,方法F.1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.74(1H,s),8.63(1H,s),8.27(1H,d,J＝5.8Hz),7.95(1H,s),7.79(1H,br s),6.66(1H,d,J＝5.8Hz),4.64(1H,七重峰,J＝6.8Hz),3.94-3.89(2H,m),2.97-2.89(1H,m),2.85-2.76(5H,m),2.21-2.07(4h,m),1.68(6H,d,J＝6.8Hz)。
实施例2782-{6-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶- 2-基]-4,5,6,7-四氢吡唑并[3,4-c]吡啶-2-基}乙醇
标题化合物在通过超临界液相色谱纯化2-{6-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)-嘧啶-2-基]-4,5,6,7-四氢-吡唑并[3,4-c]吡啶-1-基}乙醇(实施例277)期间从粗的反应产物分离。LCMS(ESI):RT＝2.03min,[M+H]+434,方法F.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.58(1H,s),8.34(1H,s),8.03(1H,d,J＝5.7Hz),7.49(1H,s),7.20(1H,s),6.07(1H,d,J＝5.7Hz),4.85(2H,s),4.65(1H,七重峰,J＝6.9Hz),4.21(2H,t,J＝5.8Hz),4.17(2H,t,J＝4.8Hz),3.95(2H,t,J＝4.8Hz),2.86(2H,t,J＝5.8Hz),2.60(3H,s),1.69(6H,d,J＝6.9Hz)。
实施例279:[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基]-(1-异丙基-2-甲 氧基甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺
(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-2-甲氧基甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例A48)(65mg,0.19mmol)、N-环丙基磺酰基-4-吡唑硼酸频哪醇酯(实施例51,步骤6)(87mg,0.28mmol)、四三苯基膦钯(23mg,19μmol)和碳酸铯(95mg,0.29mmol)溶解于二噁烷(2mL)和水(0.2mL)中。混合物以氩气脱气并且反应混合物于回流加热1h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-3％甲醇/EtOAc)得到化合物(36mg,39％)。LCMS(ESI):RT＝3.21min,[M+H]+469,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.21(1H,s),8.70(1H,s),8.67(1H,s),8.50(1H,br s),8.48(1H,s),8.41(1H,d,J＝5.8Hz),7.28-7.19(1H,m),4.90(1H,七重峰,J＝6.9Hz),4.72(2H,s),3.32(3H,s),3.30-3.21(1H,m),1.64(6H,d,J＝6.9Hz),1.37-1.22(4H,m)。
实施例280:[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基]-(3,3-二甲基-2, 3-二氢-1-氧杂-3a,6,8-三氮杂环戊二烯并[a]茚-5-基)-胺
步骤1:2-(2-溴-5-硝基吡啶-4-基氨基)-2-甲基丙-1-醇
向2,4-二溴-5-硝基吡啶(1g,3.5mmol)在四氢呋喃(30mL)中的溶液添加2-氨基-2-甲基丙醇(0.5mL,5.32mmol)并且反应混合物于50℃加热3h。添加另一等份的2-氨基-2-甲基丙醇(1.0mL,10.64mmol)并持续加热16h。反应混合物冷却至室温，真空浓缩并且所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/戊烷)得到化合物，为黄色固体(1.02g,100％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.96(1H,s),8.73(1H,br s),7.15(1H,s),3.71(2H,d,J＝5.1Hz),1.92(1H,t,J＝5.1Hz),1.50(6H,s).
步骤2:(2-溴-5-硝基吡啶-4-基)-[2-(叔丁基-二甲基甲硅烷基氧基)-1,1-二甲 基乙基]胺
向2-(2-溴-5-硝基吡啶-4-基氨基)-2-甲基丙-1-醇(1g,3.45mmol)在四氢呋喃(15mL)中的溶液添加叔丁基二甲基甲硅烷基氯(0.57mL,3.79mmol)，咪唑(0.28g,4.13mmol)和4-二甲基氨基吡啶(催化性)。反应混合物于室温搅拌72h。反应混合物以水稀释并且产物以二氯甲烷萃取(3x)。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/戊烷)得到化合物，为无色油状物(1.08g,77％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.96(1H,s),8.83(1H,br s),7.14(1H,s),3.56(2H,s),1.44(6H,s),0.93(9H,s),0.12(6H,s).
步骤3:6-溴-N4-[2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1,1-二甲基乙基]吡啶-3,4- 二胺
向(2-溴-5-硝基吡啶-4-基)-[2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1,1-二甲基乙基]胺(1.08g,2.67mmol)在工业甲基化酒精(20mL)中的溶液添加氧化铂(IV)(100mg,0.44mmol)。反应混合物在氢气气氛下于室温搅拌2h。反应混合物经过滤并且滤液真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/戊烷)得到化合物，为橙色油状物(740mg,80％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝374.
步骤4:6-溴-1-[2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1,1-二甲基乙基]-1,3-二氢- 咪唑并[4,5-c]吡啶-2-酮
于0℃将光气溶液(1.1mL,20％在甲苯中,2.08mmol)滴加至6-溴-N4-[2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1,1-二甲基乙基]吡啶-3,4-二胺(520mg,1.39mmol)和三乙基胺(387μL,2.7mmol)在四氢呋喃(15mL)中的溶液，导致形成厚的白色沉淀。反应混合物于室温搅拌20min。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩得到化合物，为灰白色固体(0.55g,99％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝400.
步骤5:6-溴-1-(2-羟基-1,1-二甲基乙基)-1,3-二氢咪唑并[4,5-c]吡啶-2-酮
6-溴-1-[2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-1,1-二甲基乙基]-1,3-二氢-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-酮(550mg,1.37mmol)和四丁基氟化铵(1M在四氢呋喃中)(2.75mL,2.75mmol)在四氢呋喃(5mL)中的溶液于室温搅拌16h。添加另一等份的四丁基氟化铵(1M在四氢呋喃中)(2mL,2.00mmol)并持续搅拌24h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩得到深棕色固体。产物以EtOAc研磨得到标题化合物，为灰白色固体(288mg,73％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝286.
步骤6:5-溴-3,3-二甲基-2,3-二氢-1-氧杂-3a,6,8-三氮杂环戊二烯并[a]茚
偶氮二羧酸异丙基酯(277μL,1.41mmol)滴加至6-溴-1-(2-羟基-1,1-二甲基乙基)-1,3-二氢咪唑并[4,5-c]吡啶-2-酮(288mg,1.0mmol)和三苯基膦(396mg,1.51mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液并且反应混合物于室温搅拌30min。反应混合物经真空浓缩并且所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)。产物溶解于二氯甲烷(5mL)中并且该溶液以氢氯酸水溶液(10mL,1M)洗涤。水溶液级分以饱和碳酸氢钠水溶液碱化至pH 8。产物以EtOAc(3x)萃取并且合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩得到标题化合物，为白色固体(218mg,79％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝268.
步骤7:[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基]-(3,3-二甲基-2,3-二 氢-1-氧杂-3a,6,8-三氮杂环戊二烯并[a]茚-5-基)-胺
5-溴-3,3-二甲基-2,3-二氢-1-氧杂-3a,6,8-三氮杂环戊二烯并[a]茚(35mg,0.13mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基胺(实施例A62)(35mg,0.13mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(6mg,6.5μmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(15mg,26μmol)、碳酸铯(85mg,0.26mmol)和二噁烷(3mL)密封在小瓶中并且混合物以氩气脱气。反应混合物于100℃加热16h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历反相HPLC得到化合物(10mg,17％)。LCMS(ESI):RT＝2.78min,[M+H]+453,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.15(1H,s),8.63(1H,s),8.44(1H,s),8.38(1H,d,Hz),8.36(1H,s),8.21(1H,br s),7.19-7.10(1H,m),4.94(2H,s),3.29-3.21(1H,m),1.70(6H,s),1.36-1.20(4H,m)。
实施例281:(R)-1-{1-((R)-仲丁基)-6-[2-(1-乙磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶- 4-基氨基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基}乙醇
步骤1:{1-((R)-仲丁基)-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-基}[2-(1-乙磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基]胺
(R)-6-溴-1-仲丁基-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例A51)(80mg,0.21mmol),)、2-(1-乙磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基胺(实施例A52)(53mg,0.21mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(10mg,0.01mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(24mg,0.04mmol)、碳酸铯(136mg,0.42mmol)和二噁烷(3mL)密封在小瓶中并且混合物通过同时在超声下鼓泡氩气通过溶液而脱气。反应混合物于100℃加热1.75h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到化合物(50mg,43％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝555.
步骤2:(R)-1-{1-((R)-仲丁基)-6-[2-(1-乙磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨 基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基}乙醇
{1-((R)-仲丁基)-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基}-[2-(1-乙磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基]胺(50mg,90μL),溶解于HCl(1.25M在甲醇中)(5mL)并且反应混合物于室温搅拌4h，然后于40℃搅拌1h。反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历反相HPLC得到化合物(38mg,89％)。LCMS(ESI):RT＝2.95min,[M+H]+471,方法F；1H NMR 400MHzδ(CDCl3):8.68(2H,s),8.46(2H,s),8.35(1H,d,J＝5.8Hz),8.29(1H,br s),6.80(1H,d,J＝5.8Hz),5.08(1H,q,J＝6.5Hz),4.55-4.45(1H,m),3.55(2H,q,J＝7.4Hz),2.31-2.18(1H,m),2.14-2.02(1H,m),1.73(3H,d,J＝7.2Hz),1.68(3H,d,J＝6.6Hz),1.28(3H,t,J＝7.4Hz),0.84(3H,t,J＝7.3Hz)。
实施例282:2-{6-[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基]-1-异丙 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基氧基}乙醇
步骤1:[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基]-{1-异丙基-2-[2-(四氢 吡喃-2-基氧基)乙氧基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基}胺
6-氯-1-异丙基-2-[2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙氧基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶和6-溴-1-异丙基-2-[2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙氧基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例A54)(226mg,～0.62mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基胺(实施例A62)(182mg,0.68mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(18mg,0.03mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(15mg,0.03mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(14mg,0.02mmol)和碳酸铯(400mg,1.2mmol)悬浮在二噁烷(5mL)中的混合物并且所得混合物以氩气脱气。反应混合物于100℃加热90min，冷却至室温,以水稀释并且以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到化合物，为灰白色固体(58mg,16％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝569.
步骤2:2-{6-[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基]-1-异丙基- 1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基氧基}乙醇
[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基]-{1-异丙基-2-[2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙氧基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基}胺(58mg,0.10mmol)溶解于氢氯酸(1.25M在甲醇中)(5mL)中并且反应混合物于室温搅拌2h。反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历制备型HPLC得到标题化合物，为白色固体(19mg,38％)。LCMS(ESI):RT＝2.72min,[M+H]+485,方法F；1H NMR 400MHzδ(CDCl3):8.63(1H,s),8.43(1H,s),8.39-8.32(3H,m),6.84(1H,d,J＝5.8Hz),4.74-4.65(3H,m),4.07-4.01(2H,m),2.84-2.76(1H,m),1.65(6H,d,J＝6.9Hz),1.52-1.47(2H,m),1.24-1.16(2H,m)。
实施例283:N6-[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基]-1-异丙基-N2, N2-二甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2,6-二胺
(6-氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)二甲基胺(实施例A57)(49mg,0.18mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基胺(实施例A62)(48mg,0.18mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(18mg,0.04mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(8mg,0.01mmol)和碳酸铯(120mg,0.26mmol)悬浮在二噁烷(3mL)中并且所得混合物以氩气脱气。反应混合物于100℃加热90min，冷却至室温，以水稀释并且以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历反相HPLC得到化合物(18mg,21％)。LCMS(ESI):RT＝2.96min,[M+H]+468,方法F；1H NMR 400MHzδ(CDCl3):8.66(1H,s),8.49(1H,s),8.46(1H,s),8.34(1H,d,J＝5.8Hz),8.26(1H,br s),7.98(1H,br s),6.82(1H,d,J＝5.8Hz),4.68(1H,七重峰,J＝6.9Hz),2.95(6H,s),2.84-2.77(1H,m),1.68(6H,d,J＝6.9Hz),1.53-1.46(2H,m),1.22-1.15(2H,m)。
实施例284:[2-(氮杂环丁烷-3-基氧基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6- 基]-[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基]胺
步骤1:6-氯-1-异丙基-1,3-二氢咪唑并[4,5-c]吡啶-2-酮
光气溶液(9.9mL,20％在甲苯中,18.8mmol)滴加至6-氯-N4-异丙基吡啶-3,4-二胺(2.33m,12.5mmol)和三乙基胺(3.49mL,25.0mmol)在四氢呋喃(75mL)中的溶液，导致形成厚的白色沉淀。反应混合物于室温搅拌15min，以水稀释，并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥and真空浓缩得到化合物，为灰白色固体(2.53g,94％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝212.
步骤2:2,6-二氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
6-氯-1-异丙基-1,3-二氢咪唑并[4,5-c]吡啶-2-酮(2.53g,11.95mmol)悬浮于磷酰氯(20mL)并且反应混合物于回流加热4d，期间固体溶解。反应混合物经真空浓缩并且剩余物以EtOAc稀释。溶液缓慢地倒入水中并且所得混合物通过添加氢氧化钠溶液(2M)碱化至pH 10。产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/环己烷)得到化合物，为灰白色固体(1.34g,49％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝230&232&234.
步骤3:3-(6-氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基氧基)氮杂环丁烷-1-甲 酸叔丁基酯
2,6-二氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(200mg,0.87mmol)、3-羟基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁基酯(226mg,1.30mmol)和碳酸铯(566mg,1.74mmol)在二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物于100℃加热2h。反应混合物以水稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-100％EtOAc/环己烷)得到化合物，为灰白色固体(272mg,87％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝367&369.
步骤4:3-{6-[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基氨基]-1-异丙基- 1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基氧基}氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁基酯
3-(6-氯-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁基酯(272mg,0.74mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基胺(实施例A62)(216mg,0.82mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(71mg,0.15mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(34mg,0.04mmol)和碳酸铯(483mg,1.48mmol)悬浮在二噁烷(5mL)中并且所得混合物以氩气脱气。反应混合物于100℃加热4h，冷却至室温，以水稀释并且以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到化合物(125mg,28％)LCMS(ESI):[M+H]+＝596.
步骤5:[2-(氮杂环丁烷-3-基氧基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]- [2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基]胺
向3-{6-[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基氨基]-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基氧基}-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁基酯(125mg,0.21mmol)在二氯甲烷(1mL)中的溶液添加三氟乙酸(1mL)并且反应混合物于室温搅拌1h。反应以饱和碳酸氢钠水溶液碱化至pH 8并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历通过反相HPLC纯化得到化合物(11mg,11％)。LCMS(ESI):RT＝2.29min,[M+H]+496,方法F；1H NMR 400MHzδ(CDCl3):8.64(1H,s),8.44(1H,s),8.43(1H,s),8.33(1H,d,J＝5.9Hz),8.17(1H,br s),7.99(1H,br s),6.82(1H,d,J＝5.8Hz),5.63(1H,quin,J＝6.0Hz),4.70(1H,七重峰,J＝6.9Hz),4.14-4.06(2H,m),3.90-3.82(2H,m),2.94-2.69(2H,m),1.65(6H,d,J＝6.9Hz),1.53-1.46(2H,m),1.22-1.15(2H,m)。
实施例285:[2-(氮杂环丁烷-3-基氧基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6- 基]-[2-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基]胺
向3-{6-[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基氨基]-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基氧基}氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁基酯(实施例284,步骤4)(147mg,0.25mmol)在甲醇(5mL)中的溶液添加HCl(4M，在二噁烷中)(5mL)并且反应混合物于室温搅拌20min。反应混合物经真空浓缩并且所得剩余物经历通过反相HPLC的纯化得到化合物(15mg,16％)。LCMS(ESI):RT＝1.65min,[M+H]+392,方法F；1H NMR 400MHzδ(DMSO-d6):9.84(1H,s),8.32(1H,s),8.24(1H,d,J＝5.8Hz),8.20-7.97(3H,m),7.16-7.06(1H,m),5.44(1H,quin,J＝6.1Hz),4.65(1H,七重峰,J＝6.9Hz),3.81-3.73(2H,m),3.62-3.54(2H,m),1.53(6H,d,J＝6.9Hz)。
实施例286:[(R)-6-[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基]-1-(2, 2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]甲醇
步骤1:[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基]-[(R)-2-(四氢吡喃-2- 基氧基甲基)-1-(2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺
6-氯-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例A60)(137mg,0.38mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基胺(实施例A62)(100mg,0.38mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(36mg,0.08mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(17mg,0.02mmol)和碳酸铯(246mg,0.75mmol)悬浮在二噁烷(3.5mL)中并且所得混合物以氩气脱气。反应混合物于100℃加热1h，冷却至室温，以水稀释并且以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历硅胶色谱(溶剂梯度:0-5％甲醇/EtOAc)得到化合物(90mg,40％)LCMS(ESI):[M+H]+＝593.
步骤2:[(R)-6-[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基]-1-(2,2,2- 三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]甲醇
[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基]-[(R)-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1-(2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(90mg,0.15mmol)溶解于氢氯酸(1.25M在甲醇中)(5mL)并且反应混合物于室温搅拌1h。反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历制备性HPLC得到标题化合物，为白色固体(47mg,61％)。LCMS(ESI):RT＝3.19min,[M+H]+509,方法F；1H NMR 400MHzδ(CDCl3):8.69(1H,s),8.63(1H,s),8.43(1H,s),8.40(1H,br s),8.38(1H,d,J＝5.8Hz),7.98(1H,br s),6.84(1H,d,J＝5.8Hz),5.35(1H,quin,J＝7.7Hz),4.95(1H,d,J＝14.2),4.91(1H,d,J＝14.2Hz),2.85-2.76(1H,m),1.99(3H,d,J＝7.2Hz),1.55-1.44(2H,m),1.24-1.13(2H,m)。
实施例287:(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(1-甲磺酰基哌啶-4- 基)嘧啶-4-基]胺
向4-[4-(1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]氯化哌啶鎓盐(实施例A22)(45mg,0.12mmol)在二甲基甲酰胺(3mL)中的悬浮液添加三乙基胺(50μL,0.36mmol)和甲磺酰氯(19μL,0.24mmol)并且反应混合物于室温搅拌2h。反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历制备性HPLC得到化合物(10mg,20％)。LCMS(ESI):RT＝2.18min,[M+H]+416,方法F；1H NMR 400MHzδ(CDCl3):8.74(1H,s),8.63(1H,s),8.27(1H,d,J＝5.8Hz),7.95(1H,s),7.79(1H,br s),6.66(1H,d,J＝5.8Hz),4.64(1H,七重峰,J＝6.8Hz),3.94-3.89(2H,m),2.97-2.89(1H,m),2.85-2.76(5H,m),2.21-2.07(4h,m),1.68(6H,d,J＝6.8Hz).
实施例288:(R)-1-[6-[2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)-嘧啶-4-基氨 基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]乙醇
步骤1:[2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)-嘧啶-4-基]-[2-[(R)-1-(四氢 吡喃-2-基氧基)-乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基] 胺
6-氯-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例A83)(175mg,0.46mmol)、(-)-2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺(实施例A63)(100mg,0.44mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(42mg,0.09mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(20mg,0.02mmol)和碳酸铯(288mg,0.88mmol)悬浮在二噁烷(5mL)中并且所得混合物以氩气脱气。反应混合物于100℃加热90min。反应混合物冷却至室温，以水稀释并且产物以乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历快速色谱(溶剂梯度:0-4％甲醇/乙酸乙酯)得到化合物(135mg,53％)LCMS(ESI):[M+H]+＝568.
步骤2:(R)-1-[6-[2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]-1- ((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]乙醇
[2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)-嘧啶-4-基]-[2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)-乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(135mg,0.24mmol)溶解于氢氯酸/甲醇(5mL,1.25M)中并且反应混合物于室温搅拌2h。反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并产物以乙酸乙酯萃取(3x)。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历制备性HPLC得到标题化合物，为白色固体(37mg,32％)。LCMS(ESI):RT 2.58min,[M+H]+484,方法F；1H NMR 400MHzδ(CDCl3):8.71(1H,s),8.38(1H,br s),8.04(1H,d,J＝5.8Hz),7.44(1H,br s),6.09(1H,d,J＝5.8Hz),5.59(1H,quin,J＝7.7Hz),5.11(1H,q,J＝9.7Hz),4.92-4.87(0.5H,m),4.79-4.76(0.5H,m),4.70-4.61(1H,m),4.40-4.32(1H,m),3.72-3.52(2H,m),3.50(3H,s),3.49-3.41(1H,m)2.06-1.95(1H,m),1.92(3H,d,J＝6.9Hz),1.84(3H,d,J＝6.6Hz),1.79-1.47(1H,m).
实施例289:(3R,4S)-3-氟-1-{4-[2-((R)-1-羟基乙基)-1-((S)-2,2,2-三氟-1- 甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}-哌啶-4-醇
步骤1:(3R,4S)-3-氟-1-{4-[2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2, 2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}哌啶-4-醇
6-氯-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例A83)(200mg,0.53mmol)、(-)-(3R,4S)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟哌啶-4-醇(实施例A64)(112mg,0.53mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(50mg,0.119mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(24mg,0.03mmol)和碳酸铯(345mg,1.06mmol)悬浮在二噁烷(5mL)中并且所得混合物以氩气脱气。反应混合物于100℃加热1h。反应混合物以水稀释并且产物以乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历在氧化硅上的快速色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/乙酸乙酯)得到化合物(160mg,55％)LCMS(ESI):[M+H]+＝554.
步骤2:(3R,4S)-3-氟-1-{4-[2-((R)-1-羟基乙基)-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基 乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}-哌啶-4-醇
(3R,4S)-3-氟-1-{4-[2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}哌啶-4-醇(160mg,0.29mmol)溶解于氢氯酸/甲醇(5mL,1.25M)中并且反应混合物于室温搅拌3h。反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并产物以乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历制备性HPLC得到标题化合物，为白色固体(53mg,39％)。LCMS(ESI):RT 2.28min,[M+H]+470,方法F；1H NMR 400MHzδ(d6-DMSO):9.80(1H,br s),8.63(1H,s),8.32(1H,br s),7.93(1H,d,J＝5.9Hz),6.44(1H,br s),5.91(1H,d,J＝6.2Hz),5.90-5.78(1H,m),5.07(1H,d,J＝5.3),4.98(1H,quin,J＝6.6Hz),4.69-4.65(0.5H,m),4.58-4.49(1.5H,m),4.34-4.26(1H,m),3.86-3.72(1H,m),3.49-3.40(1H,m),1.81(3H,d,J＝7.1Hz),1.68-1.60(3H,m),1.58(3H,d,J＝6.6Hz).
实施例290:(R)-1-[6-[2-((3S,4R)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)-嘧啶-4-基氨 基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]乙醇
步骤1:[2-((3S,4R)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)-嘧啶-4-基]-[2-[(R)-1-(四氢 吡喃-2-基氧基)-乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基] 胺
6-氯-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例A83)(175mg,0.46mmol)、(+)-2-((3S,4R)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)-嘧啶-4-基胺(实施例A65)(100mg,0.44mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(42mg,0.09mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(20mg,0.02mmol)和碳酸铯(288mg,0.88mmol)悬浮在二噁烷(5mL)并且所得混合物以氩气脱气。反应混合物于100℃加热90min，冷却至室温，以水稀释并且产物以乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历在氧化硅上的快速色谱(溶剂梯度:0-4％甲醇/乙酸乙酯)得到化合物(119mg,48％)LCMS(ESI):[M+H]+＝568.
步骤2:(R)-1-[6-[2-((3S,4R)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)-嘧啶-4-基氨基]-1- ((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]乙醇
[2-((3S,4R)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)-嘧啶-4-基]-[2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)-乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(119mg,0.21mmol)溶解于氢氯酸/甲醇(5mL,1.25M)中并且反应混合物于室温搅拌2h。反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并产物以乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历制备性HPLC得到标题化合物，为白色固体(37mg,32％)。LCMS(ESI):RT＝2.57min,[M+H]+484,方法F；1H NMR 400MHzδ(CDCl3):8.69(1H,s),8.31(1H,br s),8.01(1H,d,J＝5.8Hz),7.37(1H,br s),6.08(1H,d,J＝5.8Hz),5.57(1H,quin,J＝7.7Hz),5.08(1H,q,J＝9.7Hz),4.84-4.79(0.5H,m),4.72-4.68(0.5H,m),4.50-4.41(1H,m),4.23-4.14(1H,m),3.84-3.70(1H,m),3.63-3.52(2H,m),3.47(3H,s),2.03-1.92(1H,m),1.89(3H,d,J＝6.9Hz),1.82(3H,d,J＝6.6Hz),1.80-1.74(1H,m).
实施例291:(3S,4R)-3-氟-1-{4-[2-((R)-1-羟基乙基)-1-((S)-2,2,2-三氟-1- 甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}-哌啶-4-醇
步骤1:(3S,4R)-3-氟-1-{4-[2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2, 2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}哌啶-4-醇
6-氯-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例A83)(200mg,0.53mmol)、(+)-(3S,4R)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟哌啶-4-醇(实施例A66)(112mg,0.53mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(50mg,0.119mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(24mg,0.03mmol)和碳酸铯(345mg,1.06mmol)悬浮在二噁烷(5mL)中并且所得混合物以氩气脱气。反应混合物于100℃加热1h。反应混合物以水稀释并且产物以乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历在氧化硅上的快速色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/乙酸乙酯)得到化合物(150mg,44％)LCMS(ESI):[M+H]+＝554.
步骤2:(3S,4R)-3-氟-1-{4-[2-((R)-1-羟基乙基)-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基 乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}哌啶-4-醇
(3S,4R)-3-氟-1-{4-[2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}哌啶-4-醇(150mg,0.27mmol)溶解于氢氯酸/甲醇(5mL,1.25M)中并且反应混合物于室温搅拌3h。反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并产物以乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。所得剩余物经历制备性HPLC得到标题化合物，为白色固体(53mg,39％)。LCMS(ESI):RT＝2.28min,[M+H]+470,方法F；1H NMR 400MHzδ(d6-DMSO):9.80(1H,br s),8.63(1H,s),8.31(1H,br s),7.93(1H,d,J＝5.9Hz),6.44(1H,br s),5.91(1H,d,J＝6.2Hz),5.90-5.76(1H,m),5.11-5.04(1H,m),4.98(1H,quin,J＝6.6Hz),4.68-4.64(0.5H,m),4.56-4.44(1.5H,m),4.34-4.24(1H,m),3.86-3.72(1H,m),3.53-3.40(1H,m),1.81(3H,d,J＝7.1Hz),1.71-1.60(3H,m),1.58(3H,d,J＝6.6Hz).
实施例292:1-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2- 基]哌啶-3-甲腈
微波反应容器装填以(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例46,步骤7)(0.075g,0.248mmol)、(±)-哌啶-3-甲腈(0.031g,0.285mmol)、三乙基胺(70μL)和异丙醇(0.5ml)。反应混合物在微波辐射下于150℃加热30min。冷却至室温，真空浓缩，以二乙醚研磨并真空过滤。收集的固体通过反相HPLC进一步纯化得到标题化合物(30.2mg,32％)。LCMS(ESI):RT 2.19min[M+H]+377.1,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.71(1H,s),8.47(1H,s),8.25(1H,s),7.94(1H,d,J＝5.7Hz),6.45(1H,d,J＝5.7Hz),4.72-4.65(1H,m),4.13-4.03(1H,m),3.93-3.85(2H,m),3.69-3.62(1H,m),3.08-3.03(1H,m),2.52(3H,s),1.97-1.82(2H,m),1.70-1.55(2H,m),2.53,2.51(6H,2xd,J＝6.7Hz)。
实施例293:N6-[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基]-1-异丙基-N2-甲 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2,6-二胺
步骤1:(6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲基胺
反应容器填充有6-溴-N4-异丙基吡啶-3,4-二胺(实施例12,步骤2)(600mg,2.61mmol)、异硫氰酸甲酯(286mg,3.91mmol)并溶解于乙腈(30ml)中。反应混合物在回流下加热24h。反应混合物冷却至室温并添加(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐(1.72g,3.91mmol)并且添加1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(780μL,5.21mmol)。反应混合物在回流下加热24h。反应混合物冷却至室温并在EtOAc和蒸馏水之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂:10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(646.1mg,92％)。LCMS(ESI):[M+H]+370.1.
步骤2:N6-[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基]-1-异丙基-N2-甲基- 1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2,6-二胺
反应容器填充有(6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲基胺(100mg,0.371mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基胺(实施例A62)(98.6mg,0.371mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(42.9mg,0.074mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(17.0mg,0.019mmol)、碳酸铯(242.0mg,0.743mmol)和二噁烷(4.0ml)。反应混合物在氩气下脱气并在回流下加热24h。反应混合物冷却至室温，真空过滤并且滤液在EtOAc和蒸馏水之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)and反相HPLC得到标题化合物(32mg,19％)。LCMS(ESI):RT 2.63min,[M+H]+454.2,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.94(1H,s),8.63(1H,s),8.44(1H,s),8.34(1H,d,J＝5.9Hz),8.20(1H,s),8.18(1H,s),8.05(1H,brs),7.29(1H,brs),6.82(1H,q,J＝4.6Hz),4.61(1H,七重峰,J＝6.9Hz),3.24-3.17(1H,m),2.92(3H,d,J＝4.5Hz),1.49(6H,d,J＝7.0Hz),1.31-1.17(4H,m).
实施例294:(±)-1-{6-[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基]-1- 异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基}乙醇
步骤1:(2-氯嘧啶-4-基)-{1-异丙基-2-[1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-咪唑 并[4,5-c]吡啶-6-基}胺
反应容器填充有6-溴-1-异丙基-2-[1-(四氢吡喃-2-基氧基)-乙基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例A72)(788.3mg,2.11mmol)、2-氯嘧啶-4-基胺(274.0mg,2.11mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(244.6mg,0.423mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(96.7mg,0.106mmol)、碳酸铯(1.38g,4.23mmol)，并溶解于二噁烷(21.0ml)中。反应混合物经脱气并置于氩气下。反应混合物于室温搅拌并在回流下加热24h。反应混合物冷却至室温，真空过滤并且滤液在EtOAc和蒸馏水之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到标题化合物(208.0mg,21％)。LCMS(ESI):[M+H]+417.9.
步骤2:[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)-嘧啶-4-基]-{1-异丙基-2-[1-(四 氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基}胺
反应容器填充有(2-氯嘧啶-4-基)-{1-异丙基-2-[1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基}胺(208mg,0.5mmol)、1-环丙烷磺酰基-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(实施例51,步骤6)(179mg,0.6mmol)、(三苯基膦)钯(0)(57.8mg,0.05mmol)、碳酸铯(212.0mg,0.65mmol)、二噁烷(7.0ml)和蒸馏水(30μl)。反应混合物经脱气并置于氩气下。反应混合物在回流下加热24h，冷却至室温，过滤并且滤液在EtOAc和蒸馏水之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(143.5mg,52％)。LCMS(ESI):[M+H]+553.7.
步骤3:(±)-1-{6-[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基]-1-异丙 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基}乙醇
反应容器填充有[2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基]-{1-异丙基-2-[1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基}胺(143.5mg,0.259mmol)和HCl(1.25M在甲醇中)(5ml)并于室温搅拌2h。反应混合物在EtOAc和饱和碳酸氢钠之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过反相HPLC纯化得到标题化合物(121.7mg,定量)。LCMS(ESI):RT 2.88min,[M+H]+469.2,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.14(1H,s),8.62(2H,s),8.42(1H,s),8.40(1H,bs),8.34(1H,d,J＝6.1Hz),7.21-7.19(1H,m),5.67(1H,d,J＝4.5Hz),5.13-5.06(1H,m),5.02-4.99(1H,m),3.22-3.17(1H,m),1.60,1.58(6H,2x d,J＝6.4Hz),1.55(3H,d,J＝6.8Hz),1.30-1.17(4H,m).
实施例295:[2-(2-乙基氨基噻唑-5-基)嘧啶-4-基](1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑 并[45-c]吡啶-6-基)胺
步骤1:乙基-(5-(三丁基甲锡烷基)噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基酯
反应容器填充有二异丙基胺(584.2μl,4.13mmol)和四氢呋喃(11ml)。反应混合物冷却至-40℃。滴加N-丁基锂(2.5M在己烷中)(1.65ml,4.13mmol)并且反应混合物在-40和-20℃之间搅拌30min。反应混合物冷却至-78℃并添加乙基噻唑-2-基-氨基甲酸叔丁基酯(786.6mg,3.44mmol)在四氢呋喃(11ml)中的溶液。混合物于-78℃搅拌40min并添加三丁基氯化锡(1.12ml,4.13mmol)在四氢呋喃(5ml)中的溶液。反应混合物经2h温热至室温。添加饱和氯化铵溶液并且反应混合物在水和EtOAc之间分配。合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩得到标题化合物(1.78g,定量)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.28(1H,s),4.12(2H,q,J＝7.3Hz),1.59(9H,s),1.29(3H,t,J＝7.3Hz).
步骤2:乙基-{5-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶- 2-基]-噻唑-2-基}氨基甲酸叔丁基酯
反应容器填充有(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(180mg,0.594mmol)、乙基-(5-三丁基甲锡烷基噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基酯(460.4mg,0.892mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(68.7mg,0.059mmol),二噁烷(1.8ml)和甲苯(1.8ml)。反应混合物经脱气，置于氩气下并在微波辐射下于140℃加热1h。反应混合物冷却至室温，以二氯甲烷(30ml)稀释，以氟化钾(1g,17mmol)处理，并于室温搅拌10min。反应混合物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到标题化合物(309.1mg,quant)。LCMS(ESI):[M+H]+495.6.
步骤3:[2-(2-乙基氨基噻唑-5-基)嘧啶-4-基](1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-基)胺
反应容器填充有乙基-{5-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]噻唑-2-基}氨基甲酸叔丁基酯(294mg,0.594mmol)和二氯甲烷(4ml)。添加TFA(1ml)并且反应混合物于室温搅拌1h。反应混合物在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过反相HPLC纯化得到标题化合物(85.4mg,36％)。LCMS(ESI):RT 2.44min,[M+H]+395.0,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.95(1H,s),8.50(1H,d,J＝0.8Hz),8.33(1H,bs),8.17(1H,d,J＝6.1Hz),8.10(1H,t,J＝5.4Hz),7.84(1H,s),7.00-6.96(1H,m),4.75-4.68(1H,m),3.26-3.21(2H,m),2.53(3H,s),1.61(6H,d,J＝6.8Hz),1.17(3H,t,J＝7.0Hz).
实施例296:顺式-3-氟-1-{4-[2-((R)-1-羟基乙基)-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基 乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}哌啶-4-醇
步骤1:顺式-3-氟-1-{4-[2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2,2,2- 三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}哌啶-4-醇
反应容器填充有6-氯-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例A83)(310.3mg,0.904mmol)、(±)-顺式-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟哌啶-4-醇(实施例A85)(190mg,1.16mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(78.2mg,0.164mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(37.6mg,0.041mmol)、碳酸铯(535mg,1.64mmol)和二噁烷(6.5ml)。反应混合物经脱气，置于氩气下并于110℃加热5h。反应混合物冷却至室温，真空过滤并且滤液在EtOAc和蒸馏水之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到标题化合物(222.1mg,49％)，为各异构体的混合物。LCMS(ESI):[M+H]+554.6.
步骤2:顺式-3-氟-1-{4-[2-((R)-1-羟基乙基)-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙 基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}哌啶-4-醇
反应容器填充有3-氟-1-{4-[2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)-乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}哌啶-4-醇(222.1mg,0.399mmol)和HCl(1.25M在甲醇中)(9ml)并于室温搅拌1h。反应混合物在EtOAc和饱和碳酸氢钠之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到标题化合物，为2种非对映异构体的混合物(120.4mg,64％)。LCMS(ESI):RT 2.24min,[M+H]+470.2,方法F；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.72(2H,2x s),8.36,8.34(2H,2x s),8.05(2H,2x d,J＝5.7Hz),7.38(2H,2x s),6.11,6.09(2H,2x d,J＝5.7Hz),5.63-5.56(2H,m),5.14-5.08(2H,m),4.82-4.75(1H,m),4.70-4.63(1H,m),4.53-4.46(1H,m),4.35-4.20(2H,m),4.13-3.96(4H,m),3.89-3.74(2H,m),3.64-3.58(1H,m),2.22(2H,2x d,J＝7.3Hz),2.09,2.08(2H,2x d,J＝6.6Hz),2.00-1.85(4H,m),1.92(6H,2x d,J＝7.1Hz),1.85(6H,2x d,J＝6.7Hz).
实施例297:(R)-1-[6-[2-(顺式-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]-1- ((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]乙醇
步骤1:[2-(顺式-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)-嘧啶-4-基]-[2-[(R)-1-(四氢吡 喃-2-基氧基)乙基]-1-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺
反应容器填充有6-氯-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例A61)(400mg,1.058mmol)、(±)-顺式-2-(3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺(实施例A84)(264mg,1.16mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(101mg,0.212mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(48.5mg,0.052mmol)、碳酸铯(690mg,2.12mmol)和二噁烷(8ml)。反应混合物经脱气，置于氩气下并于110℃加热3h。反应混合物冷却至室温，真空过滤并且滤液在EtOAc和蒸馏水之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到标题化合物(398.5mg,66％)。LCMS(ESI):[M+H]+568.6.
步骤2:(R)-1-[6-[2-(顺式-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]-1-((R)- 2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]乙醇
反应容器填充有[2-(顺式-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-[2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(398.5mg,0.702mmol)和HCl(1.25M在甲醇中)(16ml)并于室温搅拌1h。反应混合物在EtOAc和饱和碳酸氢钠之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/EtOAc)得到标题化合物，为2个非对映异构体的不可分开的混合物(214.4mg,63％)。LCMS(ESI):RT 2.48min,[M+H]+484.1,方法F；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.70(2H,2x d,J＝1.1Hz),8.36,8.32(2H,2x s),8.06,8.05(2H,2x d,J＝5.6Hz),7.38,7.37(2H,2x s),6.11,6.09(2H,2x d,J＝5.7Hz),5.53-5.43(2H,m),5.20-5.12(2H,m),4.91-4.82(1H,m),4.79-4.70(1H,m),4.66-4.58(1H,m),4.50-4.42(1H,m),4.37-4.28(1H,m),4.23-4.15(1H,m),3.88-3.53(6H,m),3.51,3.50(6H,2x s),2.75(2H,bs),2.05-1.95(2H,m),1.91,1.89(6H,2x d,J＝7.1Hz),1.86-1.80(2H,m),1.77,1.75(6H,2x d,J＝6.7Hz).
实施例298:3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2- 基氨基]丙酰胺
步骤1:3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨 基]丙酸叔丁基酯
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(55.7mg,0.184mmol)、3-氨基丙酸叔丁基酯盐酸盐(66.9mg,0.368mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.127mL,0.736mmol)在异丙醇(3mL)中的混合物于150℃在微波辐射下加热5h。反应混合物经真空浓缩。所得残余物在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。水相以另外的二氯甲烷萃取，并且合并的有机萃取物经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法纯化(氧化硅,梯度2-10％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)得到标题化合物，为无色胶状物(51.1mg,67％)。LCMS(ESI):[M+H]+412.
步骤2:3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨 基]丙酸
于0℃向3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨基]丙酸叔丁基酯(51mg,0.124mmol)在二氯甲烷(1mL)中的溶液添加TFA(1.5mL)。混合物温热至室温并搅拌2h。添加甲苯并且反应混合物经真空浓缩(2x)。剩余物溶解于乙腈并装在至SCX筒上。该筒相继以乙腈和5％氨水溶液/乙腈洗涤，然后以2M氨/甲醇洗脱得到标题化合物，为无色固体(39.3mg,85％)。LCMS(ESI):[M+H]+356.
步骤3:3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨 基]丙酰胺
向3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨基]丙酸(39mg,0.105mmol)、氯化铵(5.6mg,0.105mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.055mL,0.317mmol)在二甲基甲酰胺(1mL)中的混合物于0℃经5min分份添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(60.2mg,0.158mmol)。混合物于室温搅拌1.5h，然后真空浓缩。所得残余物通过色谱法纯化(氧化硅,梯度3-21％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)，接着通过质量引导的自动纯化得到标题化合物，为无色固体(7.2mg,19％)。LCMS(ESI):RT 1.70min,[M+H]+355.1,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.59(1H,brs),8.48(1H,s),8.38(1H,br s),7.88(1H,d,J＝5.7Hz),7.33(1H,br s),6.83(1H,br s),6.48(1H,br s),4.71(1H,七重峰,J＝6.9Hz),3.58-3.53(2H,m),2.56(3H,s),2.39(2H,t,J＝7.1Hz),1.55(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例299:2-{[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶- 2-基氨基]甲基}-2-甲基丁酸
步骤1:2-{[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基 氨基]甲基}-2-甲基丁酸乙基酯
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(150mg,0.495mmol)、2-氨基甲基-2-甲基丁酸乙基酯(WO2009/067547)(237mg,1.49mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.172mL,1.0mmol)在异丙醇(5mL)中的混合物于150℃在微波辐射下加热8h。反应混合物经真空浓缩。所得残余物在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液。水相以另外的二氯甲烷萃取，并且合并的有机萃取物经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:2-10％2M甲醇性氨/二氯甲烷)得到标题化合物，为无色胶状物(定量)。LCMS(ESI):[M+H]+426.
步骤2:2-{[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基 氨基]甲基}-2-甲基丁酸
向2-{[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨基]甲基}-2-甲基丁酸乙基酯(0.196mg,0.495mmol)在THF(3mL)和甲醇(0.75mL)中的溶液添加氢氧化锂一水合物(62.4mg,1.49mmol)在水(1.5mL)中的溶液。混合物于120℃在微波辐射下加热3h，然后真空浓缩。所得残余物溶解于水(5mL)并以1M HCl(1.5mL)处理。所得沉淀通过过滤收集,以水洗涤并真空干燥。通过在氧化硅上进行色谱进一步纯化(溶剂梯度:5-40％2M甲醇性氨/二氯甲烷)得到标题化合物，为白色固体(123mg,63％,2个步骤)。LCMS(ESI):RT 2.27min,[M+H]+398.2,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(1H,s),8.49(1H,s),8.29(1H,br s),7.88(1H,d,J＝5.7Hz),6.53(1H,d,J＝5.4Hz),6.13(1H,br s),4.72(1H,七重峰,J＝6.9Hz),3.60(1H,dd,J＝13.1,5.9Hz),3.48(1H,dd,J＝13.2,5.6Hz),2.56(3H,s),1.70-1.61(1H,m),1.56(6H,d,J＝6.9Hz),1.53-1.44(1H,m),1.10(3H,s),0.83(3H,t,J＝7.5Hz).
实施例300:2-{[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶- 2-基氨基]甲基}-2-甲基丁酰胺
标题化合物(27.6mg,67％)从2-{[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨基]甲基}-2-甲基丁酸(实施例299,步骤1)(41mg,0.10mmol)根据对于实施例298,步骤3描述的类似方法制备。LCMS(ESI):RT 2.05min,[M+H]+397.1,方法F；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(1H,s),8.48(1H,s),8.30(1H,br s),7.88(1H,d,J＝5.6Hz),7.18(1H,br s),7.00(1H,br s),6.52(1H,br d,J＝6.5Hz),5.93(1H,br s),4.72(1H,七重峰,J＝6.9Hz),3.54(1H,dd,J＝13.0,5.9Hz),3.41(1H,dd,J＝13.0,5.8Hz),2.56(3H,s),1.69-1.59(1H,m),1.57(6H,d,J＝6.9Hz),1.52-1.43(1H,m),1.10(3H,s),0.81(3H,t,J＝7.4Hz).
实施例301:2-羟基-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基) 嘧啶-2-基氨基]丙酰胺
步骤1:2-羟基-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧 啶-2-基氨基]丙酸乙基酯和2-羟基-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6- 基氨基)嘧啶-2-基氨基]丙酸异丙基酯
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(150mg,0.495mmol)、3-氨基-2-羟基丙酸乙基酯盐酸盐(J.Med.Chem.,2008,15,5387)(253mg,1.49mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.516mL,2.98mmol)在异丙醇(5mL)中的混合物于150℃在微波辐射下加热9h。反应混合物经真空浓缩。所得残余物在8％甲醇/二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。水相以另外的二氯甲烷萃取，并且合并的有机萃取物以水洗涤，然后经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:2-12％2M甲醇性氨/二氯甲烷)得到标题化合物的混合物，为无色胶状物(75.5mg,38％)。LCMS(ESI):[M+H]+400&414.
步骤2:2-羟基-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧 啶-2-基氨基]丙酸
向2-羟基-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨基]丙酸乙基酯和异丙基酯(75.5mg,0.189mmol)的混合物在THF(1mL)和甲醇(0.25mL)中的溶液添加氢氧化锂一水合物(23.8mg,0.566mmol)在水(0.5mL)中的溶液。混合物于120℃在微波辐射下加热2h，然后真空浓缩。所得残余物溶解于水(1mL)，以1M HCl(0.566mL)处理并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:10-50％2M甲醇性氨/二氯甲烷)得到标题化合物，为乳状固体(57.2mg,81％)。LCMS(ESI):[M+H]+372.
步骤3:2-羟基-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧 啶-2-基氨基]丙酰胺
向2-羟基-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨基]丙酸(57mg,0.153mmol)、苯并三唑-1-醇铵盐(WO2006/100119)(46.7mg,0.307mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.08mL,0.46mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中铵盐添加N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(43.7mg,0.23mmol)。混合物于室温搅拌4h，然后添加更多份的苯并三唑-1-醇铵盐(46.7mg,0.307mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(0.08mL,0.46mmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(43.7mg,0.23mmol)。混合物搅拌2天，以甲醇稀释并装载至SCX筒上。该筒以甲醇洗涤并且所期望的产物以1M氨/甲醇洗脱并真空浓缩。所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:3-18％2M甲醇性氨/二氯甲烷)得到标题化合物，为白色固体(34.7mg,61％)。LCMS(ESI):RT1.64min,[M+H]+371.1,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(1H,s),8.49(1H,s),8.37(1H,br s),7.89(1H,d,J＝5.7Hz),7.28(1H,br s),7.24(1H,br s),6.53(1H,br s),6.321H,br t,J＝5.2Hz),4.72(1H,七重峰,J＝6.9Hz),4.06(1H,br s),3.64(1H,dt,J＝12.9,4.5Hz),3.52(1H,br s),2.56(3H,s),1.56(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例302:3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2- 基氨基]-2,2-二甲基丙酸
步骤1:3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨 基]-2,2-二甲基丙酸 乙基酯
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(1.0g,3.3mmol)、3-氨基-2,2-二甲基丙酸乙基酯(WO2009/067547)(0.5g,3.44mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.629mL,3.63mmol)在异丙醇(20mL)中的混合物于150℃在微波辐射下加热10h。反应混合物经真空浓缩。所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:2％-8％2M甲醇性氨/二氯甲烷)得到标题化合物，为灰白色泡沫(1.305g,96％)。LCMS(ESI):[M+H]+412.
步骤2:3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨 基]-2，2-二甲基丙酸
3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨基]-2,2-二甲基丙酸乙基酯(1.132g,2.75mmol)在6M HCl(20mL)中的溶液于120℃在微波辐射下加热1h并且然后真空浓缩。所得残余物以氨水处理，真空浓缩并通过氧化硅上的色谱纯化(溶剂梯度:5-40％2M甲醇性氨/二氯甲烷)得到标题化合物，为白色固体(1.02g,97％)。LCMS(ESI):RT 2.12min,[M+H]+384.2,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.58(1H,s),8.49(1H,s),8.29(1H,br s),7.88(1H,d,J＝5.7Hz),6.54(1H,d,J＝5.7Hz),6.17(1H,brs),4.72(1H,七重峰,J＝6.9Hz),3.54(2H,d,J＝6.0Hz),2.56(3H,s),1.57(6H,d,J＝6.9Hz),1.16(6H,s).
实施例303:2-羟甲基-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨 基)嘧啶-2-基氨基]-2-甲基丙酰胺
步骤1:2-(2,2-二甲基丙酰基氧基甲基)-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨基]-2-甲基丙酸 乙基酯
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(0.15g,0.495mmol)、3-氨基-2-(2,2-二甲基丙酰基氧基甲基)-2-甲基丙酸乙基酯盐酸盐(实施例A24,步骤2)(0.5636mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.214mL,1.238mmol)在异丙醇(4.5mL)中的混合物于150℃在微波辐射下加热10h。反应混合物经真空浓缩。所得残余物通过色谱法纯化(氧化硅,梯度1-7％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)得到标题化合物，为白色固体(0.166g,65％)。LCMS(ESI):[M+H]+512.
步骤2:2-羟甲基-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧 啶-2-基氨基]-2-甲基丙酸
2-(2,2-二甲基丙酰基氧基甲基)-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨基]-2-甲基丙酸乙基酯(165mg,0.322mmol)在3MHCl(5mL)中的溶液于110℃在微波辐射下加热1h，然后真空浓缩。所得残余物以氨水处理，真空浓缩，通过色谱纯化(氧化硅,梯度5-45％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)得到标题化合物，为白色固体(84.6mg,66％)。LCMS(ESI):[M+H]+400.
步骤3:2-羟甲基-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧 啶-2-基氨基]-2-甲基丙酰胺
向2-羟甲基-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨基]-2-甲基丙酸(79mg,0.198mmol)、氯化铵(21.2mg,0.396mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.137mL,0.792mmol)在二甲基甲酰胺(1.5mL)中的混合物于0℃经10min分份添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(113mg,0.297mmol)。混合物于室温搅拌0.5h，然后添加氨水(0.1mL)并且反应混合物真空浓缩。所得残余物通过色谱法纯化(氧化硅,梯度2-14％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)得到标题化合物，为无色固体(24.1mg,31％)。LCMS(ESI):RT 1.75min,[M+H]+399.2,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(1H,s),8.49(1H,s),8.25(1H,br s),7.88(1H,d,J＝5.8Hz),7.17(1H,brs),6.99(1H,br s),6.57(1H,br d,J＝5.6Hz),6.18(1H,t,J＝5.9Hz),5.21(1H,br s),4.72(1H,七重峰,J＝6.9Hz),3.56-3.43(4H,m),2.56(3H,s),1.56(6H,d,J＝6.9Hz),1.06(3H,s).
实施例304:(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(3-甲氧基-3- 甲基丁-1-炔基)嘧啶-4-基]胺
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(0.15g,0.495mmol)、3-甲氧基-3-甲基丁-1-炔(58.2mg,0.594mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(34.8mg,0.05mmol)、三苯基膦(26.1mg,0.1mmol)、碘化亚铜(I)(18.9mg,0.1mmol)、三乙基胺(0.207mL,1.49mmol)和二甲基甲酰胺(3.5mL)于120℃在微波辐射下加热3h。冷却的反应混合物在EtOAc和水之间分配。水相以另外的EtOAc萃取，并且合并的有机萃取物以水和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，并真空浓缩。剩余物通过色谱法纯化(氧化硅,梯度2-6％2M氨在甲醇中/二氯甲烷；梯度1-8％甲醇/乙酸甲酯)得到标题化合物，为无色胶状物(96.5mg,54％)。LCMS(ESI):RT 2.77min,[M+H]+365.2,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.27(1H,s),8.54(1H,s),8.31(1H,br s),8.30(1H,d,J＝6.0Hz),7.37(1H,br s),4.72(1H,七重峰,J＝6.9Hz),3.35(3H,s),2.57(3H,s),1.58(6H,d,J＝6.9Hz),1.50(6H,s).
实施例305:(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(3-甲氧基-3- 甲基丁基)嘧啶-4-基]胺
(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(3-甲氧基-3-甲基丁-1-炔基)嘧啶-4-基]胺(实施例304)(0.104g,0.285mmol)和10％Pd/C(20mg)在EtOH(10mL)中的混合物在氢气球下搅拌16h，然后通过硅藻土垫过滤。滤液经真空浓缩并且剩余物通过色谱法纯化(氧化硅,梯度2-18％甲醇/乙酸甲酯)接着通过质量引导的自动纯化得到标题化合物，为无色固体(39.3mg,37％)。LCMS(ESI):RT 2.36min,[M+H]+369.2,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.97(1H,s),8.52(1H,s),8.48(1H,br s),8.24(1H,d,J＝5.9Hz),7.15(1H,br d),4.72(1H,七重峰,J＝6.9Hz),3.12(3H,s),2.77-2.72(2H,m),2.56(3H,s),1.95-1.91(2H,m),1.59(6H,d,J＝6.9Hz),1.15(6H,s).
实施例306:1-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2- 基]-3-甲基吡咯烷-3-甲酰胺
步骤1:1-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]- 3-甲基吡咯烷-3-甲酸乙基酯
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(0.15g,0.495mmol)、2-氨基甲基-4-(2,2-二甲基丙酰基氧基)-2-甲基丁酸乙基酯(实施例A30)(0.154g,0.594mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.129mL,0.743mmol)在异丙醇(4.5mL)中的混合物于150℃在微波辐射下加热10h。反应混合物经真空浓缩。所得残余物在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。水相以另外的二氯甲烷萃取，并且合并的有机萃取物以水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。通过色谱纯化(氧化硅,梯度2-8％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)得到标题化合物，为无色胶状物(定量)。LCMS(ESI):[M+H]+424.
步骤2:1-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]- 3-甲基吡咯烷-3-甲酸
1-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]-3-甲基吡咯烷-3-甲酸乙基酯(0.495mmol)在3M HCl(5mL)中的溶液于110℃在微波辐射下加热1h，然后真空浓缩。所得残余物以氨水处理，真空浓缩通过色谱纯化(氧化硅,梯度5-35％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)得到标题化合物，为白色固体(0.18g,92％,2个步骤)。LCMS(ESI):[M+H]+396.
步骤3:1-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]- 3-甲基吡咯烷-3-甲酰胺
向1-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]-3-甲基吡咯烷-3-甲酸(90mg,0.227mmol)、氯化铵(24.4mg,0.455mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.158mL,0.91mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中的混合物于0℃经15min分份添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(130mg,0.34mmol)。混合物于室温搅拌1.5h，然后以乙腈(8mL)和水(0.5mL)稀释得到澄清的溶液，其装载至SCX筒上。将该筒以乙腈/水(9:1)洗涤，并且所期望的产物以氨水/乙腈(1:9)洗脱，接着以2M氨/甲醇洗脱。在真空浓缩后，所得残余物通过色谱法纯化(氧化硅,梯度2-14％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)得到标题化合物，为白色固体(62.6mg,70％)。LCMS(ESI):RT1.90min,[M+H]+395.3,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.68(1H,s),8.65(1H,br s),8.49(1H,s),7.92(1H,d,J＝5.7Hz),7.34(1H,br s),6.98(1H,br s),6.35(1H,br d,J＝5.3Hz),4.72(1H,七重峰,J＝6.9Hz),4.06(1H,br s),3.60(2H,br s),3.39(1H,br d,J＝10.6Hz),2.56(3H,s),2.39-2.30(1H,m),1.91-1.84(1H,m),1.57&1.56(6H,2d,J＝6.9Hz),1.31(3H,s).
实施例307:(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[((E)-2-戊-1-烯 基)嘧啶-4-基]胺
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(0.10g,0.33mmol)、1-戊烯-1-基硼酸(0.112g,0.98mmol)、[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)、复合以二氯甲烷(54mg,0.066mmol)、二甲氧基乙烷(2mL)和2M碳酸钠在水(0.5mL)中的混合物于100℃在密封小瓶中加热16h。反应混合物在二氯甲烷和水之间分配。水相以另外的二氯甲烷萃取，且合并的有机萃取物以水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。所得残余物通过色谱法纯化(氧化硅,梯度2-10％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)接着通过质量引导的自动纯化得到标题化合物，为无色泡沫(71.9mg,65％)。LCMS(ESI):RT2.69min,[M+H]+337.1,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.98(1H,s),8.53(1H,s),8.48(1H,br s),8.27(1H,d,J＝5.9Hz),7.12(1H,br d,J＝5.7Hz),7.09(1H,dt,J＝15.6,7.2Hz),6.39(1H,dt,J＝15.6,1.3Hz),4.74(1H,七重峰,J＝6.9Hz),2.57(3H,s),2.27(2H,dq,J＝7.1,1.3Hz),1.60(6H,d,J＝6.9Hz),1.52(2H,六重峰,J＝7.3Hz),0.95(3H,t,J＝7.3Hz).
实施例308:(E)-4-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧 啶-2-基]-2-甲基丁-3-烯-2-醇
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(0.10g,0.33mmol)、3-甲基-3-羟基丁烯-1-基硼酸酯(J.Org.Chem.,2003,68,6031)(0.137g,0.66mmol)、[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)，复合以二氯甲烷(54mg,0.066mmol)、二甲氧基乙烷(2mL)和2M碳酸钠在水(0.5mL)中的混合物于100℃在密封小瓶中加热64h。反应混合物在二氯甲烷和水之间分配。水相以另外的二氯甲烷萃取，并且合并的有机萃取物以水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。所得残余物通过色谱法纯化(氧化硅,梯度2-12％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)得到标题化合物，为无色固体(91.9mg,79％)。LCMS(ESI):RT 2.13min,[M+H]+353.1,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.99(1H,s),8.54(1H,s),8.43(1H,br s),8.29(1H,d,J＝5.9Hz),7.15(1H,br s),7.14(1H,d,J＝15.7Hz),6.51(1H,d,J＝15.7Hz),4.86(1H,s),4.74(1H,七重峰,J＝6.9Hz),2.57(3H,s),1.61(6H,d,J＝6.9Hz),1.31(6H,s).
实施例309:(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-(2-吡啶-3-基嘧 啶-4-基)胺
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(50mg,0.165mmol)、3-吡啶硼酸(40.6mg,0.33mmol)、[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)，复合以二氯甲烷(27mg,0.033mmol)、二甲氧基乙烷(1mL)和2M碳酸钠在水(0.25mL)中的混合物于100℃在密封小瓶中加热16h。反应混合物以甲醇(25mL)、水(3mL)的混合物稀释并添加1MHCl(0.5mL)并将溶液装载至SCX筒上。该筒以甲醇/水(4:1)洗涤，接着以甲醇洗涤，并且所期望的产物以0.5M氨/甲醇洗脱。在真空浓缩后，所得残余物通过色谱法纯化(氧化硅,梯度2％-7％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)得到标题化合物，为乳状固体(42.6mg,75％)。LCMS(ESI):RT 2.22min,[M+H]+346.2,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.25(1H,s),9.55(1H,d,J＝2.0Hz),8.73(1H,dd,J＝4.8,1.7Hz),8.67(1H,dt,J＝8.0,2.0Hz),8.58(1H,s),8.50(1H,br s),8.49(1H,d,J＝5.8Hz),7.57(1H,dd,J＝7.9,4.8Hz),7.32(1H,br s),4.77(1H,七重峰,J＝6.9Hz),2.59(3H,s),1.63(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例310:(E)-4-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧 啶-2-基]-2,2-二甲基丁-3-烯酰胺
步骤1:(E)-4-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2- 基]-2，2-二甲基丁-3-烯酸乙基酯
标题化合物(64mg,42％)从N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(112mg,0.37mmol)和(E)-2,2-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)丁-3-烯酸乙基酯(实施例A31)(113mg,0.421mmol),根据对于实施例307描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+409.
步骤2和3:(E)-4-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧 啶-2-基]-2，2-二甲基丁-3-烯酰胺
标题化合物(16.5mg,33％％)从(E)-4-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]-2,2-二甲基丁-3-烯酸乙基酯(53.9mg,0.132mmol)根据那些对于实施例300,步骤2和298,步骤3描述的类似方法制备。LCMS(ESI):RT 2.13min,[M+H]+380.1,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.01(1H,s),8.53(1H,s),8.44(1H,br s),8.30(1H,d,J＝5.9Hz),7.20(1H,d,J＝15.9Hz),7.16(1H,br s),7.10(1H,br s),6.95(1H,brs),6.41(1H,d,J＝15.9Hz),4.73(1H,七重峰,J＝6.9Hz),2.57(3H,s),1.59(6H,d,J＝6.9Hz),1.32(6H,s).
实施例311:(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(3-甲基-3H- 咪唑-4-基)嘧啶-4-基]胺
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(60mg,0.2mmol)、1-甲基-5-三丁基甲锡烷基-1H-咪唑(0.11g,0.3mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(18.3mg,0.016mmol)、二噁烷(0.6mL)和甲苯(0.6mL)的混合物于140℃在微波辐射下加热4h。反应混合物以二氯甲烷(30mL)稀释，添加氟化钾(1g)，并且搅拌混合物10min。混合物然后装载至氧化硅筒上。该筒以2-10％2M氨在甲醇中/二氯甲烷的梯度洗脱，在真空浓缩后得到粗产物。进一步的色谱(氧化硅,梯度10-40％甲醇/EtOAc)得到标题化合物，为白色固体(29mg,42％)。LCMS(ESI):RT 1.83min,[M+H]+349.0,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.02(1H,s),8.56(1H,s),8.37(1H,d,J＝5.9Hz),8.22(1H,br s),7.78(1H,s),7.72(1H,d,J＝1.2Hz),7.31(1H,br s),4.75(1H,七重峰,J＝6.9Hz),4.02(3H,s),2.58(3H,s),1.60(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例312:(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(2-甲基氨基 噻唑-5-基)嘧啶-4-基]胺
步骤1:{5-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基] 噻唑-2-基}甲基氨基甲酸叔丁基酯
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(60mg,0.2mmol)、甲基-(5-三丁基甲锡烷基噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基酯(Org.Lett.,2002,4,4209)(0.151g,0.3mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(18.3mg,0.016mmol)、二噁烷(0.6mL)和甲苯(0.6mL)于140℃在微波辐射下加热1h。反应混合物以二氯甲烷(30mL)稀释，添加氟化钾(1g)，并且所得混合物搅拌10min，接着装载至氧化硅筒上。该筒以2-10％2M氨在甲醇中/二氯甲烷的梯度洗脱得到标题化合物，为无色胶状物(89.6mg,93％)。LCMS(ESI):[M+H]+481.
步骤2:(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(2-甲基氨基噻唑- 5-基)嘧啶-4-基]胺
向{5-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]噻唑-2-基}甲基氨基甲酸叔丁基酯(89.6mg,0.186mmol)在二氯甲烷(4mL)中的溶液于0℃添加TFA(1mL)。混合物温热至室温并搅拌3h。添加甲苯并且反应混合物经真空浓缩(2x)。剩余物溶解于甲醇并装载于SCX筒上。该筒相继以甲醇洗涤，并且所期望的产物以0.5M氨/甲醇洗脱。在真空浓缩后，剩余物通过色谱法纯化(氧化硅,梯度2-10％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)得到标题化合物，为白色固体(54.7mg,77％)。LCMS(ESI):RT 2.24min,[M+H]+381.0,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.01(1H,s),8.54(1H,s),8.40(1H,br s),8.22(1H,d,J＝5.9Hz),8.05(1H,q,J＝4.7Hz),7.90(1H,s),7.02(1H,br s),4.77(1H,七重峰,J＝6.9Hz),2.89(3H,d,J＝4.7Hz),2.58(3H,s),1.66(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例313:5-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2- 基]吡啶-2-甲酰胺
步骤1:5-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基] 吡啶-2-甲酸
标题化合物(64mg,42％)从N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(100mg,0.33mmol)和2-甲氧基羰基吡啶-5-硼酸(89.6mg,0.495mmol),根据对于实施例309描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+390.
步骤2:5-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基] 吡啶-2-甲酰胺
向5-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]吡啶-2-甲酸(60mg,0.154mmol)、氯化铵(16.5mg,0.308mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.107mL,0.616mmol)在二甲基甲酰胺(1.5mL)中的混合物于0℃经5min分份添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(88mg,0.231mmol)。混合物于室温搅拌2h并且然后添加水(0.1mL)。混合物以甲醇(15mL)和0.5M HCl(2mL)稀释并装载于SCX筒上。该筒以甲醇洗涤并且产物以1M氨/甲醇洗脱，接着以2M氨/甲醇和二氯甲烷(1:1)洗脱。在真空浓缩后，剩余物通过色谱法纯化(氧化硅,梯度2-15％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)得到标题化合物，为乳状固体(23.8mg,40％)。LCMS(ESI):RT 2.37min,[M+H]+389.2,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.29(1H,s),9.54(1H,d,J＝1.9Hz),8.82(1H,dd,J＝8.1,2.1Hz),8.59(1H,s),8.53(1H,d,J＝5.9Hz),8.41(1H,br s),8.22(1H,br s),8.18(1H,d,J＝8.1Hz),7.76(1H,br s),7.41(1H,br s),4.77(1H,七重峰,J＝6.9Hz),2.59(3H,s),1.64(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例314:(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(6-甲基氨基 吡啶-3-基)嘧啶-4-基]胺
步骤1:{5-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基] 吡啶-2-基}甲基氨基甲酸叔丁基酯
标题化合物从N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(0.05g,0.165mmol)和甲基-[5-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基]氨基甲酸叔丁基酯(0.11g,0.33mmol)根据对于实施例307描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+475.
步骤2:(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(6-甲基氨基吡啶- 3-基)嘧啶-4-基]胺
标题化合物，为白色固体(43.3mg,83％)从{5-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]吡啶-2-基}甲基氨基甲酸叔丁基酯(66.5mg,0.14mmol)根据对于实施例312,步骤2描述的类似方法制备。LCMS(ESI):RT 1.99min[M+H]+375.1,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.01(1H,s),9.06(1H,d,J＝2.2Hz),8.55(1H,s),8.50(1H,br s),8.34(1H,d,J＝5.8Hz),8.31(1H,dd,J＝8.8,2.3Hz),7.12(1H,br s),6.97(1H,q,J＝4.9Hz),6.52(1H,d,J＝8.8Hz),4.77(1H,七重峰,J＝6.9Hz),2.86(1H,d,J＝4.8Hz),2.58(3H,s),1.63(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例315:N-{5-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧 啶-2-基]噻唑-2-基}-N-甲基乙酰胺
向(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(2-甲基氨基噻唑-5-基)嘧啶-4-基]胺(实施例312)(60mg,0.157mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中添加乙酸(0.0108mL,0.189mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.082mL,0.474mmol)。经5min分份添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-噻唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(90mg,0.236mmol)。混合物于室温搅拌3h，然后以二氯甲烷(15mL)稀释并装载至氧化硅筒上。该筒以2-12％2M氨在甲醇中/二氯甲烷的梯度洗脱。进一步的色谱(氧化硅,梯度5-30％甲醇/EtOAc)得到标题化合物，为白色固体(51.6mg,77％)。LCMS(ESI):RT 2.77min,[M+H]+423.1,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.14(1H,s),8.56(1H,d,J＝0.8Hz),8.40(1H,br s),8.33(1H,d,J＝5.9Hz),8.25(1H,s),7.19(1H,br s),4.81(1H,七重峰,J＝6.9Hz),3.70(3H,s),2.59(3H,s),2.44(3H,s),1.67(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例316:[2-(2-苯磺酰基-3-甲基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-4-基]-(1-异丙基-2- 甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺
标题化合物，为白色固体(120mg,74％)从N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(100mg,0.33mmol)和2-苯磺酰基-1-甲基-5-三丁基甲锡烷基-1H-咪唑(Bioorg.Med.Chem.Lett.,2000,10,1543)(0.253g,0.495mmol)根据对于实施例312,步骤1描述的类似方法制备。LCMS(ESI):RT 3.17min,[M+H]+489.2,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.20(1H,br s),8.58(1H,s),8.44(1H,d,J＝5.9Hz),8.08(1H,br s),8.03-8.00(2H,m),7.83-7.78(2H,m),7.73-7.68(2H,m),7.46(1H,br s),4.74(1H,七重峰,J＝6.9Hz),4.32(3H,s),2.59(3H,s),1.55(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例317:[2-(2-二甲基氨基噻唑-5-基)嘧啶-4-基]-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪 唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺
标题化合物，为浅黄色固体(104mg,80％)从N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(100mg,0.33mmol)和二甲基-(5-三丁基甲锡烷基噻唑-2-基)胺(实施例A33)(207mg,0.495mmol)根据对于实施例312步骤1描述的类似方法制备。LCMS(ESI):RT 2.44min,[M+H]+395.1,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.11(1H,br s),8.56(1H,s),8.39(1H,br s),8.24(1H,d,J＝5.9Hz),7.99(1H,s),7.01(1H,br s),4.77(1H,七重峰,J＝6.9Hz),3.14(6H,s),2.59(3H,s),1.66(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例318:1-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2- 基]咪唑烷-4-酮
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(200mg,0.66mmol)、咪唑烷-4-酮(569mg,6.6mmol)、碘化亚铜(I)(50mg,0.26mmol)、反式-4-羟基-L-脯氨酸(34mg,0.26mmol)和磷酸钾(280mg,1.32mmol)在DMSO(3mL)中的混合物于80℃加热1.5h。反应混合物以甲醇稀释并所得沉淀通过过滤收集。通过色谱纯化(氧化硅,梯度0-20％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)得到标题化合物，为白色固体(130mg,56％)。LCMS(ESI):RT 1.83min,[M+H]+353.1,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.86(1H,s),8.71(1H,br s),8.51(1H,s),8.49(1H,br s),8.00(1H,d,J＝5.8Hz),6.55(1H,br d,J＝5.6Hz),4.92(2H,br s),4.75(1H,七重峰,J＝6.9Hz),3.98(2H,br s),2.56(3H,s),1.58(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例319:N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6- 胺
步骤1:6-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
于0℃向6-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(280mg,1.8mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液添加氢化钠(60wt％在矿物油中的分散体)(150mg,3.7mmol)。溶液搅拌10分钟并且然后缓慢地添加2-(氯甲氧基)乙基-三甲基-甲硅烷(340mg,2.0mmol)。反应温热至室温1h。混合物以盐水稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。粗物质通过在硅胶上的快速色谱法纯化(溶剂梯度:0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(345mg,66％)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.76(d,J＝0.9Hz,1H),7.84(t,J＝0.9Hz,1H),7.74(d,J＝3.3Hz,1H),6.79(dd,J＝3.4,0.9Hz,1H),5.70(s,2H),3.62–3.49(m,2H),0.98–0.87(m,2H),0.00(s,9H).
步骤2:N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧 基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
向玻璃反应小瓶添加6-氯-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(200mg,0.71mmol)、2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(150mg,0.71mmol)、在叔丁醇(3.0mL)中的叔丁醇钠(210mg,2.1mmol)和氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(摩尔比PdP/P＝1:1)(50mg)。反应小瓶以氮气吹扫5min，密封并于110℃加热2h。反应然后过滤并真空浓缩得到标题化合物(300mg,93％)。LCMS(ESI):[M+H]+455.6.
步骤3:N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧 基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(300mg,0.66mmol)和HCl在1,4二噁烷(4N,5mL)中的混合物于室温搅拌1h。反应混合物经真空浓缩得到粗(6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)甲醇。将其引入甲醇(3mL)，向其中添加10％NaOH/水(1.0mL)。混合物于室温搅拌30min，真空浓缩，通过反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(34mg,16％)。LCMS(ESI):[M+H]+325.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.35(s,1H),9.49(s,1H),8.53(d,J＝0.8Hz,1H),8.09–7.86(m,1H),7.32(dd,J＝3.2,2.0Hz,1H),6.58–6.41(m,2H),4.22(dt,J＝13.2,4.7Hz,2H),3.57–3.34(m,2H),3.17(s,3H),1.96–1.85(m,2H),1.51–1.36(m,2H).
实施例320:N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6- 胺
步骤1:5-氯-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶
5-氯-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶以类似于的方法制备实施例319,步骤1.LCMS(ESI)[M+H]+＝284.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.90(d,J＝0.9Hz,1H),8.69(s,1H),7.99(d,J＝1.0Hz,1H),5.77(s,2H),3.66–3.53(m,2H),0.92(m,J＝8.6,7.5,3.2Hz,2H),0.00(s,J＝1.1Hz,9H).
步骤2:N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向玻璃反应小瓶添加5-氯-3-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(200mg,0.71mmol)、2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(100mg,0.71mmol)、在叔丁醇(3.0mL)中的叔丁醇钠(200mg,2.0mmol)和氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(摩尔比PdP/P＝1:1)(50mg)。反应通过氮气鼓泡脱气5min。反应小瓶经密封并于120℃加热。2h后，反应经过滤，真空浓缩，通过反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(13mg,6％)。LCMS(ESI):[M+H]+326.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64(s,1H),8.63(d,J＝1.0Hz,1H),8.25(s,1H),8.19(s,1H),7.95(d,J＝5.6Hz,1H),6.50(d,J＝5.7Hz,1H),4.21(dt,J＝13.2,4.8Hz,2H),3.57–3.37(m,2H),3.17(s,3H),1.90(m,J＝18.2,8.3,4.4Hz,2H),1.43(m,J＝12.7,8.8,3.8Hz,2H).
实施例321和322:(+)-1-(仲丁基)-6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧 啶-4-基)氨基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺和(-)-1-(仲 丁基)-6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-N-(四氢-2H-吡喃-4- 基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
步骤1:(+/-)-6-溴-1-(仲丁基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酸
标题化合物使用类似于在实施例51中描述的方法制备。
步骤2:(+/-)-6-溴-1-(仲丁基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡 啶-3-甲酰胺
向(±)-6-溴-1-(仲丁基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酸(0.70g,2.4mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(25mL)中的溶液添加N,N-二异丙基乙基胺(0.5mL,3.1mmol)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(1.2g,3.1mmol)和四氢呋喃-4-胺(0.3g,2.8mmol)。反应于室温搅拌1h。反应以饱和碳酸氢钠稀释并且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)纯化得到标题化合物(0.83g,93％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝382.
步骤3:(+)-1-(仲丁基)-6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基) 氨基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺和(-)-1-(仲丁基)-6- ((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H- 吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
微波反应容器装填以(+/-)-6-溴-1-(仲丁基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(0.22g,0.66mmol)、2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-胺(实施例A62)(0.17g,0.66mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(64mg,0.13mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(30mg,0.033mmol)、碳酸铯(0.43mg,1.3mmol)和1,4-二噁烷(3mL)。将反应密封并通过氮气鼓泡脱气20min。反应于100℃搅拌3h。反应混合物然后过滤并真空浓缩。纯化粗产物通过超临界液体色谱得到标题化合物的两个对映异构体(73.6mg,19.8％)。对映异构体1(38.1mg):LCMS(ESI):RT(min)＝9.56,[M+H]＝565.3,方法＝A；1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.22(s,1H),9.08(s,1H),8.69(s,1H),8.47(s,1H),8.44(s,1H),8.37(d,J＝6.0Hz,1H),8.21(s,1H),7.87(d,J＝7.6Hz,1H),7.14(s,1H),4.55(m,1H),4.02(m,1H),3.91(d,J＝11.4Hz,2H),3.41(m,2H),2.01–1.88(m,2H),1.83(d,J＝13.0Hz,2H),1.55(d,J＝6.7Hz,5H),1.39–1.20(m,4H),0.80(t,J＝7.3Hz,3H)。对映异构体2(35.5mg):LCMS(ESI):RT(min)＝9.55,[M+H]＝565.3,方法＝A；1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.21(s,1H),9.08(s,1H),8.69(s,1H),8.47(s,1H),8.43(s,1H),8.37(d,J＝5.9Hz,1H),8.21(s,1H),7.87(d,J＝7.1Hz,1H),7.14(s,1H),4.55(m,1H),4.01(s,1H),3.91(d,J＝10.7Hz,2H),3.41(t,J＝11.0Hz,2H),2.02–1.88(m,2H),1.83(d,J＝13.1Hz,2H),1.55(d,J＝6.7Hz,5H),1.30m,4H),0.80(t,J＝7.3Hz,3H)。
实施例323和324：1-(仲丁基)-6-((2-((3S,4R)-3-氟-4-羟基哌啶-1-基)嘧啶-4- 基)氨基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(异构体1)和1-(仲 丁基)-6-((2-((3S,4R)-3-氟-4-羟基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-N-(四氢-2H-吡喃-4- 基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(异构体2)
向微波反应小瓶中添加6-溴-1-(仲丁基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(实施例321,步骤2)(0.18g,0.47mmol)、(+)-(3S,4R)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟哌啶-4-醇(实施例A66)(0.10g,0.47mmol)、叔丁醇钠(0.14g,1.4mmol)、氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(摩尔比PdP/P＝1:1,60mg)和叔丁醇(4mL)。反应通过氮气鼓泡脱气20min。将反应密封并于120℃搅拌90min。反应经过滤并真空浓缩。粗产物通过超临界液体色谱纯化得到标题化合物的两个立体异构体(55mg,23％)。立体异构体1(18.2mg):LCMS(ESI):RT(min)＝3.3,[M+H]＝512.3,方法＝B；1HNMR(400MHz,DMSO)δ9.77(s,1H),9.02(s,1H),8.32(s,1H),8.16(s,1H),7.95(d,J＝5.6Hz,1H),7.84(d,J＝7.6Hz,1H),6.36(d,J＝5.6Hz,1H),5.10(d,J＝5.1Hz,1H),4.67(d,J＝49.4Hz,1H),4.49(m,1H),4.38(m,1H),4.24(s,1H),4.08–3.95(m,1H),3.88(m,3H),3.60(m,1H),3.40(t,J＝10.9Hz,3H),1.83(m,6H),1.55(m,2H),1.48(d,J＝6.7Hz,3H),0.80(t,J＝7.3Hz,3H)。立体异构体2(18.4mg)；LCMS(ESI):RT(min)＝3.27,[M+H]＝512.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.77(s,1H),9.02(d,J＝0.7Hz,1H),8.33(s,1H),8.16(s,1H),7.95(d,J＝5.7Hz,1H),7.84(d,J＝7.5Hz,1H),6.36(d,J＝5.5Hz,1H),5.10(d,J＝5.1Hz,1H),4.67(d,J＝49.4Hz,1H),4.57–4.44(m,1H),4.38(m,1H),4.27(s,1H),4.01(m,1H),3.88(t,J＝13.7Hz,3H),3.60(m,1H),3.40(m,3H),1.98–1.77(m,4H),1.70(m,2H),1.62–1.46(m,3H),0.79(t,J＝7.3Hz,3H)。
实施例325和326:1-(仲丁基)-6-((2-((3S,4R)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶- 4-基)氨基)-N-(1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(异 构体1)和1-(仲丁基)-6-((2-((3S,4R)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-N- (1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(异构体2)
步骤1:(+/-)-4-(6-溴-1-(仲丁基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺基)哌啶- 1-甲酸叔丁基酯
向(+/-)-6-溴-1-(仲丁基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酸(实施例321,步骤1)(0.80g,2.7mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液添加N,N-二异丙基乙基胺(0.6mL,3.5mmol)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(1.4g,3.5mmol)和4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.54g,2.7mmol)。反应于室温搅拌1h，以饱和碳酸氢钠稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(1.2g,93％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝479.3.
步骤2:(+/-)-6-溴-1-(仲丁基)-N-(1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)-1H-吡咯 并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
向(+/-)-4-(6-溴-1-(仲丁基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(1.2g,2.6mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的溶液添加HCl(4M在1,4-二噁烷中,15mL)。反应于室温搅拌16h并真空浓缩。向剩余物添加二氯乙烷(50mL)、N,N-二异丙基乙基胺(0.9mL,5.2mmol)和3-丙醇酸丙酯(0.6g,8mmol)。反应于室温搅拌10min然后添加三乙氧基硼氢化钠(1.6g,7.7mmol)。反应于室温搅拌过夜。反应以饱和碳酸氢钠稀释并且产物以二氯甲烷萃取(3x)。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(0.6g,50％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝435.2.
步骤3:1-(仲丁基)-6-((2-((3S,4R)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨 基)-N-(1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(异构体1)和 1-(仲丁基)-6-((2-((3S,4R)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-N-(1-(氧杂环 丁烷-3-基)哌啶-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(异构体2)
向微波反应小瓶中添加(+/-)-6-溴-1-(仲丁基)-N-(1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(0.20g,0.46mmol)、(+)-2-((3S,4R)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺(实施例A65)(0.10g,0.46mmol)、叔丁醇钠(0.14g,1.4mmol)、氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(摩尔比PdP/P＝1:1,60mg)和叔丁醇(4mL)。反应通过氮气鼓泡脱气20min。将反应密封并于120℃搅拌90min。反应经过滤并真空浓缩。纯化粗产物通过超临界液体色谱得到标题化合物的两个立体异构体(93.6mg,35％):立体异构体1(43.3mg):LCMS(ESI):RT(min)＝3.11,[M+H]＝581.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.82(s,1H),9.01(d,J＝0.7Hz,1H),8.31(s,1H),8.16(s,1H),7.95(d,J＝5.7Hz,1H),7.85(d,J＝7.7Hz,1H),6.37(d,J＝5.6Hz,1H),4.93(d,J＝46.9Hz,1H),4.64(s,1H),4.54(m,2H),4.48–4.28(m,4H),3.78(m,1H),3.55(m,2H),2.73(m,2H),1.84(m,7H),1.64–1.39(m,5H),0.78(t,J＝7.3Hz,3H)。立体异构体2(50.3mg)；LCMS(ESI):RT(min)＝3.16,[M+H]＝581.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.82(s,1H),9.01(d,J＝0.7Hz,1H),8.31(s,1H),8.16(s,1H),7.95(d,J＝5.7Hz,1H),7.85(d,J＝7.7Hz,1H),6.37(d,J＝5.6Hz,1H),4.93(d,J＝46.9Hz,1H),4.64(s,1H),4.54(m,2H),4.48–4.28(m,4H),3.78(m,1H),3.55(m,2H),2.73(m,2H),1.84(m,7H),1.64–1.39(m,5H),0.78(t,J＝7.3Hz,3H).
实施例327:N-(6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-1- 异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)乙酰胺
步骤1:N-(6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)乙酰胺
向微波反应小瓶中添加6-氯-3-碘代-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(实施例63,步骤2)(0.10g,0.40mmol)、乙酰胺(44mg,0.75mmol)、反式-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺(45mg,0.31mmol)、碘化亚铜(I)(60mg,0.31mmol)、三磷酸钾(0.3g,0.62mmol)和1,4-二噁烷(3mL)。反应通过氮气鼓泡脱气20min，密封并于100℃搅拌2.5h。混合物经过滤并真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-5％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(0.1g,60％)。LCMS(ESI):M+H＝252.
步骤2:N-(6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-1-异丙 基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)乙酰胺
向微波反应小瓶中添加N-(6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)乙酰胺(0.20g,0.79mmol)、2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基-胺(实施例A62)(210mg,0.79mmol,2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(77mg,0.16mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(36mg,0.040mmol)、碳酸铯(0.52g,1.6mmol)和1,4-二噁烷(3mL)。反应通过氮气鼓泡脱气20min，密封并于100℃搅拌90min。混合物经过滤并真空浓缩。纯化粗产物通过超临界液体色谱得到标题化合物(68.5mg,18％)。LCMS(ESI):RT(min)＝4.36,[M+H]＝481.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.17(s,1H),10.09(s,1H),8.81(d,J＝0.8Hz,1H),8.68(d,J＝0.5Hz,1H),8.47(d,J＝0.5Hz,1H),8.36(d,J＝5.9Hz,2H),7.77(s,1H),7.12(s,1H),4.82–4.67(m,1H),2.11(s,3H),1.51(d,J＝6.7Hz,6H),1.39–1.20(m,4H)。
实施例328:N-(6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-1- 异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-2-羟基乙酰胺
步骤1:2-(苄基氧基)-N-(6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)乙酰胺
标题化合物根据在实施例327中描述的类似方法制备。LCMS(ESI):M+H＝358.
步骤2:2-(苄基氧基)-N-(6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基) 氨基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)乙酰胺
微波反应小瓶装填以2-(苄基氧基)-N-(6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)乙酰胺(1.0g,2.8mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基胺(实施例A62)(0.74g,2.8mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(270mg,0.56mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(130mg,0.14mmol)、碳酸铯(1.8g,5.6mmol)和1,4-二噁烷(3mL)。将反应密封并通过氮气鼓泡脱气20min并于100℃搅拌3.5h。反应混合物然后过滤并真空浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱纯化(溶剂梯度:0-5％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(0.3g,20％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝587.
步骤3:N-(6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-1-异丙 基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-2-羟基乙酰胺
2-(苄基氧基)-N-(6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)乙酰胺(0.08g,0.1mmol)和20％氢氧化钯/碳(20％,80mg)在乙醇中的混合物以氢气鼓泡20min并且然后在氢气下搅拌15h。反应然后经硅藻土过滤并真空浓缩。纯化粗产物通过超临界液体色谱得到标题化合物(26.3mg,40％)。LCMS(ESI):RT(min)＝4.22,[M+H]+＝497.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.17(s,1H),9.83(s,1H),8.81(d,J＝0.8Hz,1H),8.68(s,1H),8.52–8.44(m,1H),8.36(d,J＝5.9Hz,2H),7.76(s,1H),7.12(s,1H),5.52(t,J＝6.0Hz,1H),4.75(m,1H),4.08(d,J＝6.0Hz,2H),1.52(d,J＝6.7Hz,6H),1.39–1.22(m,4H)。
实施例329:N4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-N2-(2-甲基-2- (4H-1,2,4-三唑-3-基)丙基)嘧啶-2,4-二胺
3-((4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-基)氨基)-2,2-二甲基丙酰胺(实施例113)(0.2g,0.50mmoL)和N,N-二甲基甲酰胺-二甲基缩醛(2mL)的混合物于85℃搅拌2h。混合物然后冷却至室温并真空浓缩。向剩余物添加40％肼/水(1.0mL)和乙酸(0.5mL)。反应于65℃搅拌1h，冷却至室温并真空浓缩。粗产物通过反相HPLC纯化得到标题化合物(16mg,7％)。LCMS(ESI):RT(min)＝3.42,[M+H]+＝407.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.73(s,1H),9.57(s,1H),8.47(s,1H),8.34(s,1H),7.87(m,2H),6.51(m,1H),6.45–6.04(m,2H),4.70(m,1H),3.63(s,2H),2.55(s,3H),1.53(d,J＝5.7Hz,6H),1.34(s,6H)。
实施例330:N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-3- 吗啉代-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
步骤1:4-(6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)吗啉
向微波反应小瓶中装填6-氯-3-碘代-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(实施例63,步骤2)(0.60g,1.9mmol)、吗啉(0.49g,5.6mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(91mg,0.19mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(86mg,0.094mmol)、碳酸铯(1.3g,4.1mmol)和1,4-二噁烷(2mL)。反应经密封，通过氮气鼓泡脱气20min，并于100℃搅拌2h。反应混合物然后过滤并真空浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(0.08g,15％)。LCMS(ESI):M+H＝281.
步骤2:N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-3-吗啉 代-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
向微波反应小瓶中装填4-(6-氯-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)吗啉(0.080g,0.29mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基胺(实施例A62)(0.076g,0.29mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(28mg,0.06mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(13mg,0.014mmol)、碳酸铯(0.19g,0.57mmol)和1,4-二噁烷(3mL)。将反应密封，通过氮气鼓泡脱气20min并于100℃搅拌90min。反应混合物然后经过滤并真空浓缩。粗产物通过反相HPLC纯化得到标题化合物(16mg,11％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝509.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.13(s,1H),8.67(d,J＝0.5Hz,1H),8.64(d,J＝0.8Hz,1H),8.46(d,J＝0.5Hz,1H),8.36(s,1H),8.33(m,1H),7.12(s,1H),6.95(s,1H),4.67(m,1H),3.87–3.75(m,4H),3.29–3.23(m,1H),3.10–2.98(m,4H),1.50(d,J＝6.7Hz,6H),1.38–1.23(m,4H)。
实施例331:2-(4-(6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)- 1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)乙酰胺
步骤1:2-(4-(6-溴-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)乙 酰胺
6-溴-3-碘代-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(实施例253,步骤9)(1.5g,4.1mmol)、2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)乙酰胺(1.2g,4.5mmol)、2M碳酸钠水溶液(3.1mL,6.2mmol)和双(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(II)(0.3g,0.41mmol)在乙腈(2.5mL)中的混合物脱气20min并于100℃搅拌3h。反应混合物经过滤并真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(0.375g,25％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝362.
步骤2:2-(4-(6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-1-异 丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)乙酰胺
2-(4-(6-溴-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)乙酰胺(0.117g,0.323mmol)、4-氨基-2-氯嘧啶(43mg,0.323mmol)、碳酸铯(211mg,0.646mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(19mg,0.032mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(15mg,0.016mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的混合物通过氮气鼓泡脱气20min。将反应密封并于120℃搅拌3h。反应经过滤并真空浓缩且粗产物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(40mg,30％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝411.
步骤3:2-(4-(6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-1-异 丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)乙酰胺
2-(4-(6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-1H-吡唑-1-基)乙酰胺(40mg,0.097mmol)、1-环丙基磺酰基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑(实施例51,步骤6)(1.2g,4.5mmol)、碳酸钠(2M在水中)(0.7mL,0.15mmol)和4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(36mg,0.12mmol)在乙腈(2.5mL)中的混合物脱气20min并于100℃搅拌3h。反应混合物经过滤并真空浓缩。粗产物通过反相HPLC纯化得到标题化合物(20mg,40％)。LCMS(ESI):RT＝4.74min,[M+H]+＝547.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.20(s,1H),8.83(d,J＝0.8Hz,1H),8.70(s,1H),8.47(s,1H),8.44(s,1H),8.37(d,J＝5.9Hz,1H),8.19(s,1H),7.90(d,J＝0.6Hz,1H),7.78(s,1H),7.44(s,1H),7.26(s,1H),6.49(s,1H),4.89–4.67(m,3H),1.57(m,6H),1.40–1.19(m,4H)。
实施例332:(+/-)-1-(1-(4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基) 氨基)嘧啶-2-基)-1H-咪唑-4-基)乙醇
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(215mg,0.71mmol)、4-乙酰基咪唑(0.1g,0.89mmol)和碳酸铯(0.44g,1.3mmol)在叔丁醇(2.5mL)中的混合物在微波中于150℃辐照30min。反应以饱和碳酸氢钠稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗产物经硅胶筒过滤，以EtOAc洗脱并真空浓缩。于向剩余物添加10mL的甲醇和硼氢化钠(50mg,1.3mmol)。反应于室温搅拌15min，以饱和碳酸氢钠稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过反相HPLC纯化得到标题化合物(0.31g,92％)。LCMS(ESI):RT＝3.53min,[M+H]+＝379.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.39(s,1H),8.59(d,J＝0.8Hz,1H),8.43(d,J＝1.3Hz,1H),8.34(d,J＝5.9Hz,1H),8.21(s,1H),7.70(t,J＝1.1Hz,1H),7.27(s,1H),5.04(d,J＝4.8Hz,1H),4.87–4.64(m,2H),2.59(s,3H),1.62(d,J＝6.9Hz,6H),1.39(d,J＝6.5Hz,3H)。
实施例333:1-异丙基-N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-3-(甲基磺酰基)- 1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
步骤1:6-氯-1-异丙基-3-(甲基磺酰基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
向6-氯-3-碘代-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(实施例63,步骤2)(0.25g,0.78mmol)、甲磺酸(0.37g,3.9mmol)、三氟甲烷磺酸亚铜(I)苯复合物(87mg,0.16mmol)、N,N’-二甲基乙二胺(28mg,0.31mmol)在二甲基亚砜(4mL)中的混合物通过氮气鼓泡脱气20min。反应然后经密封并于110℃搅拌15h。反应以饱和碳酸氢钠稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(0.12g,56％)。LCMS(ESI):M+H＝273.
步骤2:1-异丙基-N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-3-(甲基磺酰基)-1H- 吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
向微波反应小瓶中添加6-氯-1-异丙基-3-(甲基磺酰基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(0.20g,0.7mmol)、2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(0.20g,0.7mmol)、叔丁醇钠(0.2g,2mmol)、氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(摩尔比PdP/P＝1:1,50mg)和叔丁醇(2.5mL)。反应通过氮气鼓泡脱气20min，密封并于120℃搅拌3h。反应经过滤并真空浓缩。粗产物通过反相HPLC纯化得到标题化合物(39mg,10％)。LCMS(ESI):RT＝4.25min,[M+H]+＝445.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.92(s,1H),8.77(d,J＝0.9Hz,1H),8.46(s,1H),7.98(d,J＝5.7Hz,1H),6.80(m,1H),6.37(d,J＝5.7Hz,1H),4.67(m,1H),4.29–4.16(m,2H),3.52–3.33(m,3H),1.89(s,2H),1.54(m,6H),1.50–1.40(m,2H)。
实施例334:(6-((2-(1-(1-氟乙烯基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-1-异丙 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇
步骤1:1-(1-氟乙烯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)- 1H-吡唑
向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(0.80g,4.1mmol)和碳酸铯(1.3g,4.1mmol)在N,N-二甲基甲酰胺中的混合物与1-氯-1,1-二氟乙烷一起鼓泡15min。将反应密封并在1-氯-1,1-二氟乙烷的气氛下于80℃搅拌1h。反应以盐水稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(0.6g,60％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝239.
步骤2:(6-((2-(1-(1-氟乙烯基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-1-异丙基- 1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇
标题化合物根据类似于实施例52的方法使用1-(1-氟乙烯基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑制备。LCMS(ESI):RT＝4.27min,[M+H]+＝395.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.16(s,1H),8.65(d,J＝0.8Hz,1H),8.57(d,J＝1.3Hz,1H),8.46(s,1H),8.37(d,J＝5.9Hz,1H),8.33(d,J＝3.3Hz,1H),7.23(s,1H),5.70(s,1H),5.14(m,1H),5.01(m,1H),4.86(m,1H),4.74(s,2H),1.64(d,J＝6.9Hz,6H)。
实施例335:6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-1-异丙 基-2-甲基-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
步骤1:6-溴-1-异丙基-2-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酸
于-78℃向6-溴-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酸(实施例51,步骤3)(1.36g,4.8mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液添加二异丙基氨化锂(5.9mL,1.8M在庚烷/乙基苯/THF中,10.6mmol)。反应于-78℃搅拌20min然后添加碘甲烷(0.75mL,12mmol)。反应于-78℃搅拌20min并温热至室温。反应然后以饱和氯化铵稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩得到的标题化合物和原料的2:5混合物。粗产物不经纯化直接用于后续步骤。LCMS(ESI):[M+H]+＝297.
步骤2:6-溴-1-异丙基-2-甲基-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡 啶-3-甲酰胺
6-溴-1-异丙基-2-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酸(1.3g,4.4mmol)、4-氨基四氢吡喃(0.54g,5.2mmol)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(2g,5.2mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(2.3mL,13mmol)在N,N-二甲基甲酰胺中于室温搅拌15h。反应以饱和碳酸氢钠稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(0.8g,50％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝380.
步骤3:6-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-1-异丙基- 2-甲基-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
向微波反应小瓶中添加6-溴-1-异丙基-2-甲基-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(0.5g,1mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基胺(实施例A62)(0.3g,1mmol)、碳酸铯(0.9g,3mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(0.1g,0.3mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(0.06g,0.07mmol)和1,4-二噁烷(3mL)。反应通过氮气鼓泡脱气20min，密封并于100℃搅拌3h。反应混合物经过滤并真空浓缩。纯化粗产物通过超临界液体色谱得到标题化合物(20.8mg,3％)。LCMS(ESI):RT＝4.47min,[M+H]+＝565.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.12(s,1H),8.73–8.63(m,2H),8.48(s,1H),8.38(d,J＝5.9Hz,2H),7.83(d,J＝7.8Hz,1H),7.29(s,1H),4.81(m,1H),4.14–3.96(m,1H),3.89(m,2H),2.60(s,3H),1.93–1.77(m,2H),1.64(d,J＝7.0Hz,6H),1.37–1.23(m,4H)。
实施例336:N-(2-(5-氯-1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基- 2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:N-叔丁氧基羰基-N-(2-氯嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯
向2-氯嘧啶-4-胺(4.1g,32mmol)在2-甲基四氢呋喃(150mL)中的混合物添加二碳酸二叔丁基酯(15g,66mmol)和4-N,N-二甲基吡啶(0.2g,1.6mmol)。反应于室温搅拌过夜。反应混合物经真空浓缩并且剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-50％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(10g,定量)。LCMS(ESI):[M+H]+＝330.
步骤2:N-叔丁氧基羰基-N-[2-[吡唑-4-基]嘧啶-4-基]氨基甲酸叔丁基酯
向微波试管添加在乙腈(1.8g,9.5mmol)中的N-叔丁氧基羰基-N-(2-氯嘧啶-4-基)氨基甲酸叔丁基酯(2.6g,7.9mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑、2M碳酸钠水溶液(7.9mL,16mmol)、双(二-叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(II)(0.59g,0.79mmol)和乙腈(10mL)。反应通过氮气鼓泡脱气20分钟。将反应密封并并于100℃搅拌2小时。反应以水稀释且产物以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物通过硅胶色谱法纯化(0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(0.45g,22％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝262.
步骤3:N-叔丁氧基羰基-N-[2-[1-(环丙基甲基)吡唑-4-基]嘧啶-4-基]氨基甲酸 叔丁基酯
N-叔丁氧基羰基-N-[2-(1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基]氨基甲酸叔丁基酯(0.40g,1.1mmol)、碳酸铯(0.4g,1.2mmol)和溴甲基环丙烷(0.12mL,1.2mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物于室温搅拌4小时。反应以饱和碳酸氢钠稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(0.20g,43％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝416.
步骤4:2-(5-氯-1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-胺
向N-叔丁氧基羰基-N-[2-[1-(环丙基甲基)吡唑-4-基]嘧啶-4-基]氨基甲酸叔丁基酯(0.2g,0.4mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的溶液添加N-氯琥珀酰亚胺(0.1g,0.7mmol)。反应于60℃搅拌2h。反应然后以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗产物然后通过硅胶塞过滤，以EtOAc洗脱，并浓缩得到N-叔丁氧基羰基-N-[2-[3-氯-1-(环丙基甲基)吡唑-4-基]嘧啶-4-基]氨基甲酸叔丁基酯(0.2g)，为粗的混合物。向剩余物添加HCl(10mL,4M在1,4-二噁烷中)并于60℃搅拌1h。反应然后以饱和碳酸氢钠稀释并以EtOAc(3x)萃取。合并的萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-15％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(0.18g,定量)。LCMS[M+H]+＝250.2.
步骤5:N-(2-(5-氯-1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向微波反应小瓶中添加6-溴-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例46,步骤6)(0.15g,0.60mmol)、2-(5-氯-1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-胺(0.15g,0.60mmol)、碳酸铯(0.39g,1.2mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(58mg,0.12mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(28mg,0.030mmol)和1,4-二噁烷(3mL)。反应通过氮气鼓泡脱气20min，密封并于120℃搅拌2.5h。反应混合物经过滤并真空浓缩。纯化粗产物通过超临界液体色谱得到标题化合物(9mg,3.6％)。LCMS(ESI):RT＝4.60min,[M+H]+＝423.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.98(s,1H),8.55(d,J＝0.7Hz,1H),8.38(d,J＝5.9Hz,1H),8.27(s,1H),8.15(s,1H),7.30(s,1H),4.74(m,1H),4.11(d,J＝7.0Hz,2H),2.58(s,3H),1.59(d,J＝6.9Hz,6H),1.28(m,1H),0.64–0.35(m,4H)。
实施例337:1-异丙基-2-甲基-N-(2-(4-(甲基磺酰基)-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4- 基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
和
实施例338:1-异丙基-2-甲基-N-(2-(4-(甲基亚磺酰基)-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4- 基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向1-异丙基-2-甲基-N-(2-(4-(甲硫基)-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例422)(0.10g,0.263mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液添加TFA(0.02mL,0.3mmol)和3-氯过苯甲酸(0.12g,0.53mmol)。反应于室温搅拌14h。反应经浓缩并且两个产物经分离并通过反相HPLC纯化得到两者的标题化合物:
实施例337(79mg,79％):LCMS(ESI):RT＝3.98min,[M+H]+＝413.2,方法＝B；1HNMR(400MHz,DMSO)δ10.67(s,1H),8.71(s,1H),8.60(s,1H),8.38(m,2H),8.18(br s,1H),7.36(br s,1H),4.78(m,1H),3.22(s,3H),2.60(s,3H),1.62(d,6H).
实施例338(9.5mg,10％):LCMS(ESI):RT＝3.70min,[M+H]+＝397.2.1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.51(s,1H),8.69(d,J＝1.3Hz,1H),8.60(d,J＝0.9Hz,1H),8.39(d,J＝5.9Hz,1H),8.32(d,J＝1.3Hz,1H),8.18(s,1H),7.37(s,1H),4.78(m,1H),2.89(s,3H),2.59(s,3H),1.61(m,6H).
实施例339和340:1-((R)-仲丁基)-6-((2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基) 嘧啶-4-基)氨基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺和1-((S)- 仲丁基)-6-((2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-N-(四氢-2H-吡 喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
步骤1:(+/-)-6-溴-1-(仲丁基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
于0℃向6-溴-5-氮杂吲哚(1.0g,4.9mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(8mL)中的溶液添加氢化钠(60wt％在矿物油中的分散体)(0.23g,5.8mmol)。混合物于0℃搅拌5min，然后添加2-溴丁烷(0.7mL,6.4mmol)，接着于室温搅拌2h。反应然后通过倾倒至饱和氯化铵水溶液上而淬灭。产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。通过在硅胶上快速色谱法纯化粗产物(溶剂梯度:0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(1.5g,定量)。LCMS(ESI):[M+H]+＝253.
步骤2:(+/-)-6-溴-1-(仲丁基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲醛
向N,N-二甲基甲酰胺(100mL)于0℃添加磷酰氯(15mL,160mmol)。反应于0℃搅拌20min，温热至室温并滴加(+/-)-6-溴-1-(仲丁基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(8.0g,32mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液。反应于70℃搅拌2h。混合物然后通过倾倒至饱和碳酸氢钠水溶液上而缓慢地中和。产物以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。通过在硅胶上快速色谱法纯化粗产物(溶剂梯度:0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(6.7g,75％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝281.
步骤3:(+/-)-6-溴-1-(仲丁基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酸
向(+/-)-6-溴-1-(仲丁基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲醛(6.0g,21mmol)在叔丁醇(50mL)中的溶液添加2-甲基-2-丁烯(2M在四氢呋喃中的溶液,18mL,36mmol)。然后添加亚氯酸钠(4.8g,43mmol)和磷酸二氢钠(26g,210mmol)在水(15mL)中的溶液。反应于室温搅拌18h。混合物然后以盐水稀释并通过添加1M HCl/水酸化至pH 2。产物然后以EtOAc(3x)萃取。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗物质(7.7g,定量)不经进一步纯化而使用。LCMS(ESI):[M+H]+＝297；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.17(d,J＝17.2Hz,1H),7.98(s,1H),7.53(s,1H),4.45–4.27(m,1H),1.99–1.83(m,2H),1.64–1.52(m,4H),0.96–0.77(m,4H)。
步骤4:(+/-)-6-溴-1-(仲丁基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡 啶-3-甲酰胺
向(+/-)-6-溴-1-(仲丁基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酸(0.70g,2.4mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(25mL)中的溶液添加N,N-二异丙基乙基胺(0.5mL,3.1mmol)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(1.2g,3.1mmol)和四氢呋喃-4-胺(0.3g,2.8mmol)。反应于室温搅拌1h并且然后以饱和碳酸氢钠稀释。产物以EtOAc(3x)萃取并且合并的有机萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过硅胶快速色谱纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(0.83g,93％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝382.
步骤5:1-((R)-仲丁基)-6-((2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基) 氨基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺和1-((S)-仲丁基)-6- ((2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H- 吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
向微波反应小瓶中添加(+/-)-6-溴-1-(仲丁基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(0.16g,0.48mmol)、(-)-2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺(实施例A63)(0.11g,0.48mmol)、叔丁醇钠(0.11g,0.48mmol)、氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(摩尔比PdP/P＝1:1,60mg)和叔丁醇(4mL)。反应通过氮气鼓泡脱气15min，密封并于120℃搅拌90min。将反应冷却至室温，过滤并真空浓缩。粗产物通过手性超临界液相色谱分离并纯化得到两个立体异构体的标题化合物(84.1mg,34％)。
立体异构体1(实施例339)(40.7mg):LCMS(ESI):RT＝3.65min,[M+H]+＝526.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.82(s,1H),9.02(d,J＝0.7Hz,1H),8.32(s,1H),8.17(s,1H),7.95(d,J＝5.7Hz,1H),7.88(d,J＝7.6Hz,1H),6.37(d,J＝5.7Hz,1H),4.93(d,J＝51.2Hz,1H),4.66(m,1H),4.38(m,2H),4.09–3.94(m,1H),3.90(m,2H),3.55(m,2H),1.96–1.63(m,6H),1.64–1.46(m,5H),0.78(t,J＝7.3Hz,3H).
立体异构体2(实施例340)(43.4mg):LCMS(ESI):RT＝3.69min,[M+H]+＝526.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.82(s,1H),9.02(d,J＝0.7Hz,1H),8.31(s,1H),8.17(s,1H),7.96(d,J＝5.7Hz,1H),7.88(d,J＝7.7Hz,1H),6.37(d,J＝5.6Hz,1H),4.93(d,J＝49.3Hz,1H),4.64(s,1H),4.38(m,2H),4.09–3.95(m,1H),3.90(d,J＝9.9Hz,2H),3.57(m,2H),1.97–1.69(m,6H),1.61–1.44(m,5H),0.79(t,J＝7.3Hz,3H).
实施例341:1-(4-(4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧 啶-2-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
步骤1:2-甲基-1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡 唑-1-基)丙-2-醇
向4,4,5,5-四甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(10.0g,51.5mmol)在氧化异丁烯(5.0mL)和甲醇(2.5mL)中的悬浮液添加碳酸铯(4.8g,15mmol)。反应混合物在密封容器中于110℃加热90min。混合物然后冷却至室温，以二乙醚稀释，并以水洗涤(2x)。有机部分以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩得到标题化合物，为白色固体，其不经进一步纯化而直接使用(7.05g,51％产率)。LCMS(ESI):[M+H]+＝267.2；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.81(s,1H),7.69(s,1H),4.07(s,2H),3.93(s,1H),1.32(s,12H),1.15(s,6H).
步骤2:1-(4-(4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶- 2-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(263.7mg,0.671mmol)、2-甲基-1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-基]丙-2-醇(369.6mg,1.347mmol)、双(二-叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(II)(48.5mg,0.069mmol)、碳酸钾(200.8mg,1.453mmol)、二噁烷(2.5mL)和水(0.25mL)中的混合物在微波辐射下于120℃加热2h。添加双(二-叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(II)(34.1mg,0.048mmol)和2-甲基-1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-基]丙-2-醇(359.3mg,1.350mmol)并且混合物在微波辐射下于130℃加热70min。反应混合物以EtOAc稀释，以水(2x)和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空浓缩。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)接着通过反相HPLC纯化并冻干得到化合物(72.7mg,26％)。LCMS(ESI):RT(min)＝6.40,[M+H]+＝407.5,方法＝C；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.00(s,1H),8.55(d,J＝0.8Hz,1H),8.37(s,1H),8.31(d,J＝5.9Hz,1H),8.24(s,1H),8.03(s,1H),7.17(s,1H),4.81(s,1H),4.76(p,J＝7.0Hz,1H),4.08(s,2H),2.58(s,3H),1.63(d,J＝6.8Hz,6H),1.10(s,6H).
实施例342:2-(4-(4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧 啶-2-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
步骤1:2-甲基-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡 唑-1-基)丙酸乙基酯
向4,4,5,5-四甲基-2-(1H-吡唑-4-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.00g,0.026mol)and碳酸铯(10.07g,0.031mol)在N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液添加2-溴异丁酸乙基酯(4.16mL,0.028mol)。反应混合物于110℃加热过夜并且然后冷却至室温。添加水并且水相以EtOAc(3x)萃取。各有机层经合并，经无水硫酸镁干燥，并真空浓缩得到化合物(6.7g,84％)，其不经进一步纯化而直接使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.88(s,1H),7.83(s,1H),4.16(q,J＝7.2Hz,2H),1.84(s,6H),1.33(s,12H),1.20(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤2:2-(4-(4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶- 2-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙酸乙基酯
使用2-甲基-2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)丙酸乙基酯并根据对于实施例341描述的类似方法，得到标题产物(126.6mg,70％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝449.4.
步骤3:2-(4-(4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶- 2-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基丙-1-醇
向2-(4-(4-((1-异丙基-2-甲基-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基-丙酸乙基酯(126.6mg,0.20mmol)在四氢呋喃(3.0mL)中的溶液添加氢化锂铝(1.0M在四氢呋喃中)(0.40mL,0.40mmol)。反应混合物于室温搅拌30min，并且然后通过连续滴加水(15μL)、15％氢氧化钠水溶液(15μL)和水(50.0μL)而淬灭。所得混合物于室温搅拌30min,并且然后经硫酸镁干燥，过滤，并真空浓缩。粗产物经反相HPLC纯化并冻干得到化合物(7.5mg,9％)。LCMS(ESI):RT(min)＝3.733,[M+H]+＝407.3,方法＝B；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.94(s,1H),8.54(d,J＝0.9Hz,1H),8.36(s,1H),8.30(d,J＝5.8Hz,1H),8.27(s,1H),8.06(s,1H),7.22–7.13(m,1H),4.76(p,J＝6.9Hz,1H),3.62(s,2H),2.58(s,3H),1.62(d,J＝6.9Hz,6H),1.52(s,6H).
实施例343:3-((4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧 啶-2-基)硫)-2,2-二甲基丙酰胺
步骤1:3-((4-氨基嘧啶-2-基)硫)-2,2-二甲基丙酸乙基酯
4-氨基-1H-嘧啶-2-硫酮(401.1mg,3.154mmol)、3-氯-2,2-二甲基-丙酸乙基酯(537.0mg,3.262mmol)、碳酸钾(653.9mg.,4.731mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(10.0mL)的混合物于90℃搅拌16h。反应混合物以EtOAc稀释，以水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空浓缩。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(溶剂梯度:0-100％EtOAc/二氯甲烷)得到化合物，为浅黄色油状物(393.2mg,49％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝256.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.88(d,J＝5.8Hz,1H),6.88(s,2H),6.12(d,J＝5.8Hz,1H),4.04(q,J＝7.1Hz,2H),3.37(s,2H),1.19(s,6H),1.14(t,J＝7.1Hz,3H).
步骤2:3-((4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2- 基)硫)-2,2-二甲基丙酸乙基酯
含6-溴-1-异丙基-2-甲基-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例46,步骤6)(123.4mg,0.4856mmol)、3-((4-氨基嘧啶-2-基)硫)-2,2-二甲基-丙酸乙基酯(107.3mg,0.4203mmol)、碘化亚铜(I)(87.2mg,0.458mmol)、反式-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺(137.0μL,0.843mmol)、碳酸铯(280.4mg,0.852mmol)和1,4-二噁烷(4.0mL)的混合物的反应容器以氮气吹扫并且然后于90℃加热1.5h。反应混合物冷却至室温,以EtOAc稀释，以水(2x)和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空浓缩。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(溶剂梯度:20-100％EtOAc in二氯甲烷)得到53.9mg(30％)的标题化合物。LCMS(ESI):[M+H]+＝429.2.
步骤3:3-((4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2- 基)硫)-2,2-二甲基丙酸
3-((4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-基)硫)-2,2-二甲基丙酸乙基酯(53.9mg,0.126mmol)、四氢呋喃(2.0mL,25mmol)和氢氧化锂(1.0M在水中的溶液)(0.5mL,0.5mmol)的混合物于室温搅拌4h，于50℃搅拌20h，并且然后在微波辐射下于100℃加热4h。反应混合物10％柠檬酸水溶液中和并以二氯甲烷萃取(2x)。合并的各二氯甲烷部分以盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空浓缩得到定量产率的标题化合物，其不经纯化直接进行下去。LCMS(ESI):[M+H]+＝401.2.
步骤4:3-((4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2- 基)硫)-2,2-二甲基丙酰胺
3-((4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-基)硫)-2,2-二甲基丙酸(0.126mmol,0.126mmol)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(66.9mg,0.172mmol)、氯化铵(18.7mg,0.350mmol)、N,N-二异丙基乙基胺(0.15mL,0.86mmol)、4-二甲基氨基吡啶(3mg.,0.025mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL)于室温搅拌3h。反应混合物以EtOAc稀释，以水(2x)和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空浓缩。粗产物经反相HPLC纯化并冻干得到23.3mg(46％产率，经2个步骤)的标题化合物。LCMS(ESI):RT(min)＝4.069,[M+H]+＝400.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.01(s,1H),8.53(d,J＝0.9Hz,1H),8.16(d,J＝5.9Hz,1H),8.10(s,1H),7.20(s,1H),7.15(s,1H),6.88(s,1H),4.71(p,J＝6.9Hz,1H),3.41(s,2H),2.56(s,3H),1.57(d,J＝6.9Hz,6H),1.18(s,6H).
实施例344:1-异丙基-2-甲基-N-(2-(1-(吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧 啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:3-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1- 基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯
4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(111.3mg,0.574mmol)、3-(溴甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(200.0mg,0.734mmol)、碳酸铯(285mg,0.866mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(5.0mL,64mmol)的混合物于50℃搅拌16h。反应混合物在硅藻土上浓缩，并且粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(溶剂梯度:0-50％EtOAc/庚烷)得到133.6mg(62％)的标题化合物。LCMS(ESI):[M+H]+＝378.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.95(s,1H),7.59(s,1H),4.14(d,J＝7.2Hz,2H),3.35–3.31(m,1H),3.29–3.24(m,1H),3.22–3.13(m,1H),3.03–2.92(m,1H),2.74–2.57(m,1H),1.89–1.76(m,1H),1.64–1.48(m,1H),1.38(s,9H),1.25(s,12H).
步骤2:3-((4-(4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶- 2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(102.0mg,0.3099mmol)、3-((4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(133.0mg,0.3525mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]氯化钯(II)，复合物以二氯甲烷(1:1)(25.0mg,0.031mmol)、碳酸铯(222.9mg,0.677mmol)、1,2-二甲氧基乙烷(2.0mL,19mmol)和水(0.2mL,10mmol)的混合物在微波辐射下于140℃加热3h。反应混合物以EtOAc稀释，以水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空浓缩。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到54.7mg(34％)的标题化合物。LCMS(ESI):[M+H]+＝518.3.
步骤3:1-异丙基-2-甲基-N-(2-(1-(吡咯烷-3-基甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4- 基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向3-((4-(4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-基)-1H-吡唑-1-基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(54.7mg,0.106mmol)在二氯甲烷(3.0mL,47mmol)和甲醇(1.0mL,20mmol)中的溶液添加氯化氢(4.0M，在二噁烷中)(0.5mL,2mmol)。反应混合物于室温搅拌1.5h，并且然后真空浓缩。粗产物经由反相HPLC纯化，接着通过制备性超临界液相色谱纯化得到5.22mg(12％)的标题化合物。LCMS(ESI):RT(min)＝3.451,[M+H]+＝418.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.96(s,1H),8.55(s,1H),8.40–8.25(m,3H),8.05(d,J＝3.2Hz,1H),7.17(s,1H),4.76(p,J＝6.7Hz,1H),4.26–4.08(m,2H),3.06(s,2H),2.94–2.70(m,2H),2.58(d,J＝3.2Hz,4H),1.78(s,1H),1.63(d,J＝6.6Hz,6H),1.43(d,J＝10.9Hz,1H).
实施例345:N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-3-(3,5-二甲 基-1H-吡唑-4-基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
步骤1:6-溴-3-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
6-溴-3-碘代-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(实施例253,步骤9)(310.6mg,0.851mmol)、3,5-二甲基吡唑-4-硼酸频哪醇酯(255.9mg,1.118mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]氯化钯(II)，复合以二氯甲烷(1:1)(71.2mg,0.0872mmol)、碳酸钠(2.0mol/L)在水(0.85mL,1.7mmol)和乙腈(3.0mL,57mmol)中的混合物经氮气脱气并在密封小瓶中于100℃加热26h。反应混合物经过滤并且在硅藻土上浓缩。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到186.0mg(66％)的标题化合物。LCMS(ESI):[M+H]+＝333.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.29(s,1H),8.35(s,1H),7.86(s,1H),7.57(s,2H),4.84(p,J＝6.7Hz,1H),2.12(s,6H),1.48(d,J＝6.6Hz,6H).
步骤2:N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-3-(3,5-二甲基- 1H-吡唑-4-基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
6-溴-3-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-1-异丙基-吡咯并[3,2-c]吡啶(186mg,0.558mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基胺(实施例A62)(154.6mg,0.583mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(86.5mg,0.149mmol)、醋酸钯(II)(25.2mg,0.112mmol)、碳酸铯(392.4mg,1.19mmol)和1,4-二噁烷(2.5mL,29mmol)的混合物在氮气气氛下于100℃加热4h。反应混合物冷却至室温，通过PFTE玻璃漏斗过滤，并浓缩至硅藻土上。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)，接着通过制备性超临界液相色谱法纯化得到18.8mg(6％)的标题化合物。LCMS(ESI):RT(min)＝3.820,[M+H]+＝518.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.25(s,1H),10.12(s,1H),8.69(s,1H),8.47(s,1H),8.41–8.35(m,3H),7.42(s,1H),7.16(s,1H),4.78(p,J＝6.7Hz,1H),3.27–3.23(m,1H),2.17(s,6H),1.58(d,J＝6.7Hz,6H),1.40–1.32(m,2H),1.32–1.21(m,2H).
实施例346:N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-3- (4-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
步骤1:N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-3-(4-甲 基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
标题化合物根据那些对于实施例345描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+＝588.0.
步骤2:N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-3-(4-甲 基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-3-(4-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(198mg,0.1685mmol)、氯化氢(4.0mol/L，在二噁烷中)(1.0mL,4.0mmol)和甲醇(3.0mL,70mmol)的混合物于室温搅拌3h。反应混合物经浓缩至干，并且粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到10.8mg(13％)的标题化合物。LCMS(ESI):RT(min)＝4.319,[M+H]+＝504.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.49(s,1H),10.21(s,1H),9.16(s,1H),8.70(s,1H),8.48(s,1H),8.37(d,J＝5.9Hz,1H),7.64(s,1H),7.58(s,1H),7.13(s,1H),4.88–4.74(m,1H),3.27–3.23(m,1H),2.24(s,3H),1.60(d,J＝6.7Hz,6H),1.36(dq,J＝8.2,3.7Hz,2H),1.27(dt,J＝5.9,3.7Hz,2H).
实施例347:1-(4-((1-异丙基-3-(4-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡 啶-6-基)氨基)嘧啶-2-基)-3,3-二甲基哌啶-4-醇
步骤1:4-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑
三氟乙酸(40.0μL,0.519mmol)添加至4-甲基吡唑(0.901g,11.0mmol)在二氢吡喃(2.0mL,22mmol)中的溶液。反应混合物于90℃搅拌20h。混合物冷却至室温，并且然后以氢化钠(60wt％在矿物油中的分散体)(92mg,2.3mmol)淬灭。于室温搅拌10min后，将溶剂真空除去。剩余物悬浮于二氯甲烷中，并过滤通过短的氧化硅塞，以二氯甲烷漂洗。滤液经真空蒸发得到标题化合物(1.5213g,83％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝167.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.60(s,1H),7.27(s,1H),5.29(d,J＝9.9Hz,1H),3.89(d,J＝11.2Hz,1H),3.64–3.51(m,1H),2.00(重叠的s和m,4H),1.88(dd,J＝27.1,13.0Hz,1H),1.64(m,1H),1.51(m,2H).
步骤2:4-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(三丁基甲锡烷基)-1H-吡唑
向4-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑(0.258g,1.55mmol)在四氢呋喃(6mL,70mmol)中的溶液于-78℃添加n-丁基锂(2.5M在己烷中)(0.80mL)。反应于-78℃搅拌50min，并且然后添加三丁基氯化锡(0.60mL,2.2mmol)。反应于-78℃保持2h并且然后以饱和氯化铵水溶液淬灭并温热至室温。反应混合物以水稀释并以EtOAc萃取。有机部分以无水硫酸镁干燥，过滤，并真空浓缩。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(溶剂梯度:0-50％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(520.6mg,74％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝457.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.31(s,1H),5.11(d,J＝8.3Hz,1H),3.81(d,J＝11.4Hz,1H),3.59–3.48(m,1H),2.23(dd,J＝20.7,9.4Hz,1H),2.04(s,3H),1.97(d,J＝12.8Hz,1H),1.90(d,J＝13.3Hz,1H),1.48(m,9H),1.30(dd,J＝14.5,7.3Hz,6H),1.20–0.97(m,6H),0.86(t,J＝7.3Hz,9H).
步骤3:6-溴-1-异丙基-3-(4-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-1H- 吡咯并[3,2-c]吡啶
6-溴-3-碘代-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(实施例253,步骤9)(148.5mg,0.4068mmol)、4-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(三丁基甲锡烷基)-1H-吡唑(230.0mg,0.4799mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(52.5mg,0.0454mmol)、噻吩-2-甲酸铜(I)(85.3mg,0.429mmol)和1,4-二噁烷(2.0mL,23mmol)的混合物以氮气吹扫并在微波辐射下于100℃加热1h。反应混合物以二氯甲烷稀释，通过PFTE玻璃漏斗过滤，并浓缩至氧化硅上。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到化合物(128.1mg,78％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝403.2.
步骤4:1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-哌啶-4-醇
向反应小瓶中添加2-氯嘧啶-4-胺(1.0g,8.0mmol),3,3-二甲基哌啶-4-醇(1.0g,9.0mmol)、三乙基胺(3.0g,30mmol)和2-丙醇(5mL)。容器经密封并在微波辐射下于150℃加热45min。反应混合物冷却至室温，以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并以二氯甲烷萃取。有机层经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩得到标题化合物(1.24g,70％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝223.2；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.69(d,J＝5.6Hz,1H),6.28(s,2H),5.64(d,J＝5.6Hz,1H),4.55(d,J＝4.7Hz,1H),4.33–4.22(m,1H),4.02(dd,J＝12.8,1.7Hz,1H),3.25(dd,J＝9.4,4.6Hz,1H),3.08–2.96(m,1H),2.75(d,J＝13.0Hz,1H),1.66–1.54(m,1H),1.47–1.35(m,1H),0.87(s,3H),0.74(s,3H)。
步骤5:1-(4-((1-异丙基-3-(4-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6- 基)氨基)嘧啶-2-基)-3,3-二甲基哌啶-4-醇
6-溴-1-异丙基-3-(4-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(105.4mg,0.2613mmol)、1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3,3-二甲基-哌啶-4-醇(71.7mg,0.323mmol)、氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基)钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(17.7mg,0.0133mmol)、叔丁醇钠(83.0mg,0.864mmol)和叔丁醇(1.5mL,16mmol)的混合物在密封小瓶中在氮气气氛下于100℃加热2h。反应混合物经通过PFTE玻璃漏斗过滤，以EtOAc稀释，以水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，并真空浓缩。所得物料与氯化氢(4.0mol/L，在二噁烷中)(1.0mL,4.0mmol)和甲醇(3.0mL,70mmol)合并且该混合物于室温搅拌4h。反应混合物经真空浓缩，并且粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到13.5mg(11％)的标题化合物。LCMS(ESI):RT(min)＝3.504,[M+H]+＝461.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.66(s,1H),8.99(s,1H),8.33(s,1H),8.17(s,0H),7.91(d,J＝5.7Hz,1H),7.60(s,1H),7.53(s,1H),6.31(d,J＝5.7Hz,1H),4.74–4.58(m,2H),4.46–4.34(m,1H),4.16–4.04(m,1H),3.40–3.34(m,2H),3.00(d,J＝12.9Hz,1H),2.21(s,3H),1.77–1.67(m,1H),1.55(dd,J＝6.7,1.4Hz,6H),0.95(s,3H),0.82(s,3H).
实施例348:2-(3-(6-((2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨 基)-1-异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-4-甲基-1H-吡唑-1-基)乙醇
步骤1:N-(2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-3-(4- 甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺
标题化合物使用6-溴-1-异丙基-3-(4-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(实施例347,步骤3)和(-)-2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基胺(实施例A63)(74.5mg,0.329mmol)并根据那些对于实施例347,步骤4所描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+＝465.2.
步骤2:2-(3-(6-((2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-1- 异丙基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-4-甲基-1H-吡唑-1-基)乙醇
N-(2-((3R,4S)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-3-(4-甲基-1H-吡唑-5-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-6-胺(38.1mg,0.0820mmol)、2-溴乙醇(9.0μL,0.13mmol)、碳酸铯(55.4mg,0.168mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(2.0mL,26mmol)的混合物于70℃加热16h。添加2-溴乙醇(9.0μL,0.13mmol)并且反应混合物在70℃再维持24h。反应混合物以EtOAc稀释，以水(2x)和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空浓缩。粗产物经反相HPLC纯化并冻干得到化合物(9.1mg,22％)。LCMS(ESI):RT(min)＝3.720,[M+H]+＝509.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.75(s,1H),9.07(d,J＝0.9Hz,1H),8.30(s,1H),7.95(d,J＝5.7Hz,1H),7.58(s,1H),7.55(d,J＝0.9Hz,1H),6.40(d,J＝5.7Hz,1H),5.04–4.85(m,2H),4.72–4.60(m,2H),4.47–4.36(m,1H),4.15(t,J＝5.7Hz,2H),3.82–3.74(m,2H),3.66–3.49(m,2H),3.37(s,3H),3.30–3.25(m,1H),2.20(s,3H),1.85–1.70(m,2H),1.55(dd,J＝6.7,4.2Hz,6H).
实施例349:3-(6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基-1H-咪唑 并[4,5-c]吡啶-1-基)丁腈
步骤1:3-((2-溴-5-硝基吡啶-4-基)氨基)丁腈
2,4-二溴-5-硝基-吡啶(1.0g,3.55mmol)和3-氨基丁腈(328.3mg,3.90mmol)溶解于n-丁醇(20mL)中。滴加三乙基胺(0.59mL,4.26mmol)并且所得混合物于室温搅拌24h。反应经真空浓缩并且所得残余物在乙酸乙酯和水之间分配。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗物质通过在硅胶上的快速色谱法纯化(溶剂梯度:30-60％乙酸乙酯/庚烷)并真空浓缩得到标题化合物(600mg,60％)。LCMS(ESI):[M+H]+287.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.84(s,1H),8.18(d,J＝9.1Hz,1H),7.49(s,1H),4.49–4.37(m,1H),2.94(qd,J＝16.7,6.2Hz,2H),1.32(d,J＝6.4Hz,3H)。
步骤2:3-((5-氨基-2-溴吡啶-4-基)氨基)丁腈
3-((2-溴-5-硝基吡啶-4-基)氨基)丁腈(250mg,0.88mmol)溶解于乙醇(15mL)中。缓慢地添加铁粉(196mg,3.51mmol)和氯化铵(235mg,4.38mmol)，接着添加水(10mL)并将混合物于70℃加热3h。反应混合物经过滤并且真空浓缩得到标题化合物，为浅紫色固体(224mg,定量)。LCMS(ESI):[M+H]+256.2.
步骤3:3-(6-溴-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)丁腈
3-((5-氨基-2-溴吡啶-4-基)氨基)丁腈(130mg,0.51mmol)和乙酰亚胺酸乙基酯盐酸盐(126mg,1.02mmol)引入乙醇(4mL)中并于85℃加热18h。将反应冷却至室温，以2N氨/乙醇中和并真空浓缩。粗物质通过在硅胶上的快速色谱法纯化(溶剂梯度:0-10％乙酸乙酯/庚烷)并真空浓缩得到标题化合物(60mg,40％)。LCMS(ESI):[M+H]+281.2.
步骤4:3-(6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基-1H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-1-基)丁腈
向微波反应小瓶中添加3-(6-溴-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)丁腈(300.0mg,1.07mmol)、2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(157mg,0.75mmol)、双(二苄叉基丙酮)钯(46.3mg,0.081mmol)、碳酸铯(700mg,2.15mmol)、2-(二环己基膦基)2’,4’,6’-三异丙基联苯(53.9mg,0.107mmol)和1,4-二噁烷(1.0mL)。反应小瓶是静密封的并于120℃在微波辐射下加热30min。反应混合物冷却至室温，过滤，并真空浓缩。粗产物通过反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(8.3mg,2％)。LCMS(ESI):RT0.44min,[M+H]+407.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.72(s,1H),8.54(d,J＝0.8Hz,1H),8.29(s,1H),7.96(d,J＝5.7Hz,1H),6.42(d,J＝5.6Hz,1H),5.04–4.93(m,1H),4.25–4.20(m,2H),3.50–3.36(m,2H),3.29(s,3H),3.27–3.23(m,2H),2.61(s,3H),1.96–1.88(m,2H),1.67(d,J＝7.0Hz,3H),1.52–1.32(m,2H).
实施例350和351:(顺式)-3-(6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-2- 甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)环戊烷甲腈和(反式)-3-(6-((2-(4-甲氧基哌啶-1- 基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)环戊烷甲腈
步骤1:3-((2-溴-5-硝基吡啶-4-基)氨基)环戊烷甲腈
3-((2-溴-5-硝基吡啶-4-基)氨基)环戊烷甲腈(710mg,60％)以类似于实施例349,步骤1的方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+312.2；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.97(s,1H),8.10(s,1H),6.91(s,1H),4.25–4.12(m,1H),3.14–3.02(m,1H),2.57–2.38(m,2H),2.38–2.26(m,1H),2.15–2.05(m,2H),1.85–1.71(m,1H).
步骤2:3-((5-氨基-2-溴吡啶-4-基)环戊烷甲腈
3-((5-氨基-2-溴吡啶-4-基)环戊烷甲腈(580mg,90％)从3-((2-溴-5-硝基吡啶-4-基)氨基)环戊烷甲腈以类似于实施例349,步骤2的方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+282.2.
步骤3:3-(6-溴-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)环戊烷甲腈
3-(6-溴-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)环戊烷甲腈(250mg,21％)从3-((5-氨基-2-溴吡啶-4-基)环戊烷甲腈以类似于实施例349,步骤3的方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+307.2.
步骤4:(顺式)-3-(6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基-1H-咪 唑并[4,5-c]吡啶-1-基)环戊烷甲腈和(反式)-3-(6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4- 基)氨基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)环戊烷甲腈
各标题化合物以类似于实施例349的方法，在制备型HPLC上分离的顺式和反式立体异构体。实施例350(11mg,6％):LCMS(ESI):RT 0.44min,[M+H]+433.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,1H),8.53(s,1H),8.20(s,1H),7.99(d,J＝5.7Hz,1H),7.74(s,1H),6.82(s,1H),4.91–4.86(m,1H),4.30–4.20(m,2H),3.47–3.38(m,1H),3.36–3.20(m,5H),3.17(s,1H),2.57(s,3H),2.32–2.16(m,4H),1.90–1.85(m,2H),1.43–1.30(m,2H)。实施例351(11mg,6％):LCMS(ESI):RT 0.43min,[M+H]+433.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.49(s,1H),8.53(s,1H),8.18(s,1H),7.99(d,J＝5.2,3.1Hz,1H),7.69(s,1H),6.77(s,1H),5.11–4.99(m,1H),4.26–4.16(m,2H),3.54–3.38(m,2H),3.35–3.23(m,5H),3.19–3.14(m,1H),2.59(s,3H),2.40–1.95(m,4H),1.92–1.78(m,1H),1.43–1.31(m,2H).
实施例352:3-(6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基-1H-咪唑 并[4，5-c]吡啶-1-基)丁酰胺
步骤1:3-((2-氯-5-硝基吡啶-4-基)氨基)丁酰胺
2,4-二氯-5-硝基-吡啶(472mg,2.45mmol)和3-氨基丁酰胺(250mg,2.45mmol)引入n-丁醇(20mL)中。滴加三乙基胺(0.41mL,2.94mmol)并且所得混合物于室温搅拌24h。所得沉淀物经过滤并且真空干燥得到标题化合物(700mg,100％)。LCMS(ESI):[M+H]+259.2；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.87(s,1H),7.16(s,1H),7.01(s,1H),4.29–4.17(m,1H),2.50–2.39(m,2H),1.24(d,J＝6.4Hz,3H).
步骤2:3-((5-氨基-2-氯吡啶-4-基)氨基)丁酰胺
3-((5-氨基-2-氯吡啶-4-基)氨基)丁酰胺(230mg,40％)从3-((2-氯-5-硝基吡啶-4-基)氨基)丁腈以类似于实施例349,步骤2的方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+＝229.2.
步骤3:3-(6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)丁腈
3-(6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)丁酰胺(140mg,55％)从3-((5-氨基-2-氯吡啶-4-基)氨基)丁酰胺(230mg,1.01mmol)以类似于实施例349,步骤3的方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+＝253.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),7.74(s,1H),5.01–4.87(m,1H),2.90(dd,J＝15.2,9.3Hz,1H),2.74(dd,J＝15.3,5.8Hz,1H),2.62(s,3H),1.54(d,J＝7.0Hz,3H).
步骤4:3-(6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基-1H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-1-基)丁酰胺
3-(6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)丁腈(3.8mg,1％)从3-(6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)丁酰胺(280.0mg,1.11mmol)以类似于实施例349,步骤4的方法制备。LCMS(ESI):RT 2.96min,[M+H]+425.3,方法＝B；1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ9.74(s,1H),8.48(s,1H),8.41(s,1H),7.95(d,J＝5.7Hz,1H),6.39(d,J＝5.7Hz,1H),5.01–4.89(m,1H),4.32–4.16(m,2H),3.46–3.36(m,3H),3.30(s,4H),2.95(dd,J＝15.3,9.5Hz,1H),2.70(dd,J＝15.4,5.1Hz,1H),2.58(s,3H),1.98–1.85(m,2H),1.58(d,J＝7.0Hz,3H),1.53–1.37(m,2H).
实施例353:4-(1-(6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基-1H-咪 唑并[4,5-c]吡啶-1-基)乙基)苯甲腈
步骤1:4-(1-((2-氯-5-硝基吡啶-4-基)氨基)乙基)苯甲腈
4-(1-((2-氯-5-硝基吡啶-4-基)氨基)乙基)苯甲腈(900mg,60％)从2,4-二氯-5-硝基-吡啶(1.0g,5.18mmol)和4-(1-氨基乙基)苯甲腈(833.25mg,5.70mmol)以类似于实施例349,步骤1的方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+303.2；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.89(s,1H),8.47(d,J＝7.3Hz,1H),7.90–7.78(m,2H),7.78–7.62(m,2H),6.86(s,1H),5.17(p,J＝6.9Hz,1H),1.60(d,J＝6.8Hz,3H).
步骤2:4-(1-((5-氨基-2-氯吡啶-4-基)氨基)乙基)苯甲腈
4-(1-((5-氨基-2-氯吡啶-4-基)氨基)乙基)苯甲腈(230mg,30％)从4-(1-((2-氯-5-硝基吡啶-4-基)氨基)乙基)苯甲腈(900mg,3.0mmol)以类似于实施例349,步骤2的方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+＝273.3.
步骤3:4-(1-(6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)乙基)苯甲腈
4-(1-(6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)乙基)苯甲腈(350mg,60％)从4-(1-((5-氨基-2-氯吡啶-4-基)氨基)乙基)苯甲腈(500mg,2.0mmol)以类似于实施例349,步骤3的方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+＝297.3.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.63(s,1H),7.85(d,2H),7.45(d,J＝8.1Hz,2H),7.35(s,1H),6.07(q,J＝7.1Hz,1H),2.57(s,3H),1.95(d,J＝7.1Hz,4H).
步骤4:4-(1-(6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基-1H-咪唑并 [4,5-c]吡啶-1-基)乙基)苯甲腈
4-(1-(6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)乙基)苯甲腈(57mg,24％)从4-(1-(6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)乙基)苯甲腈(150.0mg,0.505mmol)以类似于实施例349,步骤4的方法制备。LCMS(ESI):RT 3.58min,[M+H]+469.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62(d,J＝2.6Hz,1H),8.57(s,1H),7.92(d,J＝5.7Hz,1H),7.89(s,1H),7.85(d,J＝8.4Hz,2H),7.34(d,J＝8.2Hz,2H),6.42(d,J＝5.6Hz,1H),6.00(q,J＝7.1Hz,1H),4.03–3.93(m,2H),3.53–3.31(m,2H),3.29(s,3H),3.20–3.06(m,2H),2.49(s,1H),1.98(d,J＝7.1Hz,3H),1.73–1.64(m,2H),1.32–1.15(m,2H).
实施例354:4-(1-(6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基-1H-咪 唑并[4,5-c]吡啶-1-基)乙基)苯甲酰胺
向4-(1-(6-((2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-1-基)乙基)苯甲腈(实施例353)(40mg,0.085mmol)在甲酸(3mL)中的溶液添加氢氯酸水溶液(12mol/L)(6mL,73mmol)。反应小瓶然后密封，于70℃加热2h，冷却至室温并真空浓缩。粗产物通过反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(6.1mg,14％)。LCMS(ESI):RT3.16min,[M+H]+487.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(s,1H),8.55(s,1H),7.90(d,J＝5.6Hz,2H),7.88–7.82(m,2H),7.32(s,1H),7.22(d,J＝8.2Hz,2H),6.40(d,J＝5.7Hz,1H),5.94(q,J＝7.2Hz,1H),4.05–3.97(m,2H),3.37–3.29(m,1H),3.25(s,4H),3.19–3.07(m,2H),2.53(s,3H),1.98(d,J＝7.1Hz,3H),1.71(s,2H),1.24(d,J＝3.1Hz,2H).
实施例355:1-(1H-吲唑-4-基甲基)-N-[2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-基]-2- 甲基-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:2-氯-5-硝基-N-[(1-四氢吡喃-2-基吲唑-4-基)甲基]吡啶-4-胺
向圆底烧瓶添加2,4-二氯-5-硝基吡啶(0.26g,1.35mmol)在四氢呋喃(3mL)和三乙基胺(0.27g,2.69mmol)中的溶液。接着伴随搅拌于0℃以一份添加(1-四氢吡喃-2-基吲唑-4-基)甲胺(WO 2013026914)(0.311g,1.35mmol)。所得溶液于室温搅拌4h。所得混合物经真空浓缩得到标题化合物(0.52g,99％)，为黄色固体，其不经进一步纯化而使用。LCMS(ESI):RT(min)＝1.28,[M+H]+＝388,方法＝I.
步骤2:6-氯-N4-[(1-四氢吡喃-2-基吲唑-4-基)甲基]吡啶-3,4-二胺
向圆底烧瓶添加2-氯-5-硝基-N-[(1-四氢吡喃-2-基吲唑-4-基)甲基]吡啶-4-胺(0.160g,0.413mmol)、氯化铵(0.11g,2.06mmol)、铁粉(0.092g,1.65mmol)、乙醇(1.92mL)和水(0.483mL)。混合物加热至70℃保持2h。将反应冷却至室温，并通过硅藻土过滤并真空浓缩。所得残余物溶解于乙酸乙酯(10mL)并搅拌15min。无水硫酸镁添加至溶液并再持续搅拌10min。将悬浮液通过硅藻土垫过滤并真空浓缩得到标题化合物(0.13g,88％)，为棕色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝0.93,[M+H]+＝358,方法＝I.
步骤3:6-氯-2-甲基-1-[(1-四氢吡喃-2-基吲唑-4-基)甲基]咪唑并[4,5-c]吡啶
向反应小瓶中添加6-氯-N4-[(1-四氢吡喃-2-基吲唑-4-基)甲基]吡啶-3,4-二胺(0.29g,0.81mmol)、乙酰亚胺酸乙基酯盐酸盐(0.12g,0.97mmol)和乙醇(4mL.)。将反应容器密封并于85℃加热18h。将反应冷却至室温，以2N氨/乙醇中和并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(洗脱剂：10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(0.22g,72％)，为褐色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝0.98,[M+H]+＝382,方法＝I.
步骤4:1-(1H-吲唑-4-基甲基)-N-[2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-基]-2-甲基- 咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向微波反应小瓶中添加6-氯-2-甲基-1-[(1-四氢吡喃-2-基吲唑-4-基)甲基]咪唑并[4,5-c]吡啶(43mg,0.1126mmol)、2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(35.17mg,0.169mmol)、氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(摩尔比PdP/P＝1:1)(4.5mg,0.006mmol)、2-(二环己基膦基)3,6-二甲氧基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯(6.2mg,0.011mmol)、碳酸铯(81mg,0.248mmol)和1,4-二噁烷(1mL)。将小瓶密封，以氮气吹扫并于120℃经历微波辐照60min。反应经硅藻土垫过滤并通过硅胶色谱法纯化(洗脱剂：10％甲醇/二氯甲烷)得到N-[2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-基]-2-甲基-1-[(1-四氢吡喃-2-基吲唑-4-基)甲基]咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(39mg)，将其引入1,4-二噁烷(1mL)中并以HCl(4N在1,4-二噁烷中)(0.07mL,0.282mmol)处理。混合物加热至100℃保持2h并且然后通过反相HPLC纯化得到标题化合物(8.3mg,25％)。LCMS(ESI):RT 3.24min,[M+H]+470.3,方法＝E；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.73(s,1H),8.60(d,J＝0.9Hz,1H),8.22(s,1H),8.00(s,1H),7.89(d,J＝5.6Hz,1H),7.48(d,J＝8.4Hz,1H),7.24(dd,J＝8.4,7.0Hz,1H),6.37(d,J＝7.1Hz,1H),6.31(d,J＝5.6Hz,1H),5.77(s,2H),3.87(d,J＝12.7Hz,2H),3.10(s,3H),2.91(t,J＝11.2Hz,2H),2.45(s,3H),1.36(s,2H),1.09–0.87(m,2H).
实施例356:1-苄基-N-[2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-基]-2-甲基-咪唑并[4， 5-c]吡啶-6-胺
步骤1：N-苄基-2-氯-5-硝基吡啶-4-胺
向圆底烧瓶添加2,4-二氯-5-硝基吡啶(0.115g,0.60mmol)在四氢呋喃(32mL)和三乙基胺(0.12g,1.19mmol)的溶液，接着伴随搅拌于0℃滴加苄基胺(0.064g,0.60mmol)。所得溶液于室温搅拌1h，真空浓缩并通过硅胶色谱纯化(洗脱剂：10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(0.112g,71％)，为黄色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝1.24,[M+H]+＝264,方法＝I；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.07(t,J＝6.3Hz,1H),8.89(s,1H),7.40–7.35(m,4H),7.35–7.22(m,1H),6.94(s,1H),4.69(d,J＝6.3Hz,2H).
步骤2:N4-苄基-6-氯吡啶-3,4-二胺
向圆底烧瓶添加N-苄基-2-氯-5-硝基-吡啶-4-胺(0.112g,0.425mmol)、氯化铵(0.113g,2.12mmol)、铁粉(0.094g,1.7mmol)、乙醇(2mL)和水(0.5mL)。混合物加热至70℃保持2h。将反应冷却至室温，并通过硅藻土过滤并真空浓缩。所得残余物溶解于乙酸乙酯(10mL)并搅拌15min。无水硫酸镁添加至该溶液并再持续搅拌10min。悬浮液通过硅藻土垫过滤并浓缩得到标题化合物(0.10g,100％)，为棕色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝0.83,[M+H]+＝234,方法＝I.
步骤3:1-苄基-6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
向反应小瓶中添加N4-苄基-6-氯吡啶-3,4-二胺(0.10g,0.43mmol)、乙酰亚胺酸乙基酯盐酸盐(0.063g,0.51mmol)和乙醇(4mL.)。容器经密封于85℃加热18h。将反应冷却至室温，以2N氨/乙醇中和并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(洗脱剂：10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(0.073g,66％)，为褐色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝0.94,[M+H]+＝258,方法＝I.
步骤4:1-苄基-N-[2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-基]-2-甲基-咪唑并[4,5-c] 吡啶-6-胺
向微波反应小瓶中添加1-苄基-6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(73mg,0.28mmol)、2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(88.5mg,0.43mmol)、氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(摩尔比PdP/P＝1:1)(11.3mg,0.014mmol)、2-(二环己基膦基)3,6-二甲氧基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯(15.5mg,0.028mmol)、碳酸铯(184mg,0.567mmol)和1,4-二噁烷(1mL)。容器经密封，以氮气吹扫并经历于120℃的微波辐照60min。反应经硅藻土垫过滤并通过硅胶色谱纯化(洗脱剂：10％甲醇/二氯甲烷)，接着反相HPLC纯化得到标题化合物(22.1mg,18％)。LCMS(ESI):RT3.53min,[M+H]+430.2,方法＝E；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.72(s,1H),8.56(d,J＝0.9Hz,1H),8.22(s,1H),7.92(d,J＝5.6Hz,1H),7.42–7.25(m,3H),7.14–7.04(m,2H),6.35(d,J＝5.7Hz,1H),5.42(s,2H),4.02(d,J＝13.5Hz,2H),3.21(s,3H),3.17(td,J＝9.7,4.9Hz,2H),2.47(s,3H),1.64(d,J＝11.8Hz,2H),1.21(d,J＝9.1Hz,2H).
实施例357:1-[(1S)-1-(1H-苯并咪唑-5-基)乙基]-N-[2-(4-甲氧基-1-哌啶基) 嘧啶-4-基]-2-甲基-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:(S)-N-(1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-2-氯-5-硝基吡啶-4-胺
伴随搅拌于0℃向圆底烧瓶添加2,4-二氯-5-硝基吡啶(0.50g,2.59mmol)在四氢呋喃(10mL)和三乙基胺(0.52g,5.18mmol)中的溶液接着添加(1S)-1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙胺(WO 2013026914)(0.635g,2.59mmol)。所得溶液于室温搅拌4h，真空浓缩并通过硅胶色谱纯化(洗脱剂：10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(0.80g,97％)，为黄色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝0.84,[M+H]+＝318,方法＝I；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.88(s,1H),8.50(d,J＝7.0Hz,1H),8.21(s,1H),7.69(s,1H),7.58(d,J＝8.3Hz,1H),7.31(dd,J＝8.3,1.6Hz,1H),6.96(s,1H),5.15(t,J＝6.8Hz,1H),3.17(d,J＝4.4Hz,2H),1.63(d,J＝6.7Hz,3H).
步骤2:(S)-N4-(1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-6-氯吡啶-3,4-二胺
向圆底烧瓶添加(S)-N-(1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-2-氯-5-硝基吡啶-4-胺(0.80g,2.52mmol)、氯化铵(0.673g,12.59mmol)、铁粉(0.562g,10.07mmol)、乙醇(12mL)和水(1mL)。混合物加热至70℃保持2h，冷却至室温，并通过硅藻土过滤并真空浓缩。所得残余物溶解于乙酸乙酯(10mL)并搅拌15min。无水硫酸镁添加至该溶液并再持续搅拌10min。悬浮液通过硅藻土垫过滤，浓缩并通过硅胶色谱纯化(洗脱剂：10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(0.37g,43％)，为棕色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝0.46,[M+H]+＝288,方法＝I；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.16(s,1H),7.62–7.47(m,2H),7.37(s,1H),7.21(d,J＝8.6Hz,1H),6.08(d,J＝11.0Hz,2H),4.93(s,2H),4.70(t,J＝6.7Hz,1H),3.08(d,J＝8.0Hz,2H),1.52(d,J＝6.7Hz,3H),1.18(t,J＝7.3Hz,2H).
步骤3:(S)-1-(1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5- c]吡啶
向反应小瓶中添加(S)-N4-(1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-6-氯吡啶-3,4-二胺(0.19g,0.66mmol)、乙基乙酰亚胺酸酯盐酸盐(0.815g,6.6mmol)和乙醇(10mL.)。将反应容器密封并于85℃加热18h。将反应冷却至室温，以2N氨/乙醇中和并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(洗脱剂：10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(0.12g,58％)，为褐色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝0.61,[M+H]+＝312,方法＝I.
步骤4:1-[(1S)-1-(1H-苯并咪唑-5-基)乙基]-N-[2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶- 4-基]-2-甲基-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向反应小瓶中添加(S)-1-(1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(43mg,0.1126mmol)、2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(35.17mg,0.169mmol)、氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(摩尔比PdP/P＝1:1)(50mg,0.062mmol,0.45当量),叔丁醇钠(40mg,0.414mmol,3.0当量)和叔丁醇(5mL)。该悬浮液以氮气吹扫，密封并于125℃加热1h。将反应冷却至室温，并通过硅藻土过滤，真空浓缩并通过反相HPLC纯化得到标题化合物(4.9mg,7％)。LCMS(ESI):RT3.38min,[M+H]+484.3,方法＝E；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.59(s,1H),8.55(s,1H),8.18(s,1H),8.01(s,1H),7.88(d,J＝5.7Hz,1H),7.55(d,J＝8.4Hz,1H),7.33(s,1H),7.02(dd,J＝8.5,1.8Hz,1H),6.37(d,J＝5.7Hz,2H),5.99(d,J＝7.2Hz,1H),4.06–3.93(m,2H),3.19(s,3H),3.19–2.99(m,3H),2.03(d,J＝7.1Hz,3H),1.63(s,2H),1.20(d,J＝10.5Hz,2H).
实施例358:1-((1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)-N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶- 4-基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
和
实施例359:1-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶- 4-基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:N-((1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)-2-氯-5-硝基吡啶-4-胺和N-((1H-苯并 [d]咪唑-5-基)甲基)-2-氯-5-硝基吡啶-4-胺
伴随搅拌于0℃向圆底烧瓶添加2,4-二氯-5-硝基吡啶(0.41g,2.13mmol,1.00当量)在四氢呋喃(3mL)和三乙基胺(0.43g,4.25mmol,2当量)中的溶液。接着添加(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲胺和(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲胺(WO 2013026914)(0.492g,213mmol)的1:1混合物。所得溶液于室温搅拌1h，真空浓缩并通过硅胶色谱纯化(洗脱剂：10％甲醇/二氯甲烷)得到N-((1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)-2-氯-5-硝基吡啶-4-胺和N-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-2-氯-5-硝基吡啶-4-胺(0.55g,85％)的混合物，为黄色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝1.04,1.08,[M+H]+＝304.3,方法＝I.
步骤2:N4-((1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)-6-氯吡啶-3,4-二胺和N4-((1H-苯并 [d]咪唑-5-基)甲基)-6-氯吡啶-3,4-二胺
向圆底烧瓶添加N-((1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)-2-氯-5-硝基吡啶-4-胺和N-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-2-氯-5-硝基吡啶-4-胺(0.55g,1.81mmol)、氯化铵(0.484g,9.06mmol)、铁(0.404g,7.24mmol)、乙醇(8.5mL)和水(2.1mL)的混合物。混合物加热至70℃保持2h。将反应冷却至室温，并通过硅藻土过滤并真空浓缩。剩余物溶解于乙酸乙酯(10mL)并搅拌15min。将无水硫酸镁添加至该溶液并再持续搅拌10min。悬浮液通过硅藻土垫过滤并浓缩得到的混合物N4-((1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)-6-氯吡啶-3,4-二胺和N4-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-6-氯吡啶-3,4-二胺(0.32g,65％)，为棕色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝0.62,0.69[M+H]+＝274.3,方法＝I.
步骤3:1-((1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)-6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶 和1-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
向反应小瓶中添加N4-((1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)-6-氯吡啶-3,4-二胺和N4-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-6-氯吡啶-3,4-二胺(0.32g,1.2mmol)、乙基乙酰亚胺酸酯盐酸盐(0.220g,1.8mmol)和乙醇(12mL.)的混合物。将反应容器密封并于85℃加热18h。将反应冷却至室温，以2N氨/乙醇中和并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(洗脱剂：10％甲醇/二氯甲烷)得到1-((1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)-6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶和1-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶的混合物(0.14g,40％)，为褐色固体。LCMS(ESI):RT(min)＝0.77,0.82,[M+H]+＝298.3,方法＝I.
步骤4:1-((1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)-N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4- 基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
和
1-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-2-甲 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向反应小瓶中添加1-((1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)-6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶和1-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-6-氯-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(70mg,0.235mmol)的混合物,2-(4-甲氧基-1-哌啶基)嘧啶-4-胺(实施例3,步骤2)(54mg,0.259mmol),氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(摩尔比PdP/P＝1:1)(50mg,0.062mmol),叔丁醇钠(68mg,0.705mmol)and叔丁醇(5mL)。反应小瓶以氮气吹扫and heated to 125℃1.5h。将反应冷却至室温，并通过硅藻土过滤，浓缩并且两个产物通过反相HPLC纯化得到标题化合物：1-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(2.4mg,2.1％)。LCMS(ESI):RT 2.83min,[M+H]+470.3,方法＝E.1-((1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)-N-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(7.5mg,6.8％)。LCMS(ESI):RT 2.82min,[M+H]+470.3,方法＝E；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.96(s,1H),8.60(s,1H),8.25(d,J＝9.1Hz,2H),7.91(d,J＝5.8Hz,1H),7.20(s,1H),7.03(dd,J＝8.2,1.7Hz,1H),6.55–6.44(m,1H),6.39(d,J＝5.9Hz,1H),5.54(s,2H),4.02–3.90(m,2H),3.10(s,3H),1.53(s,2H),1.14(d,J＝8.7Hz,2H).
实施例360:1-异丙基-2-甲基-N-(2-(3-甲基异噻唑-5-基)嘧啶-4-基)-1H-咪唑 并[4,5-c]吡啶-6-胺
含三丁基-(3-甲基异噻唑-5-基)甲锡烷(153mg,0.393mmol)、N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(79.4mg,0.262mmol)、双(二-叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(II)(22.3mg,0.0315mmol)和N,N-二甲基乙酰胺(1.5mL,16mmol)的反应小瓶经历于130℃的微波辐照30分钟，接着于130℃再照射45分钟。反应混合物通过硅藻土过滤并真空浓缩。粗物质通过在硅胶上的快速色谱法纯化(溶剂梯度:0-7％甲醇/二氯甲烷)接着通过反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(13.8mg,14％)，为白色固体。LCMS(ESI):RT 4.56min,[M+H]+366.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.29(s,1H),8.58(d,J＝1.1Hz,1H),8.42(d,J＝6.0Hz,1H),8.37(s,1H),7.78(s,1H),7.30(s,1H),4.79(p,J＝6.9Hz,1H),2.59(s,3H),2.51(s,3H),1.66(d,J＝6.9Hz,6H).
实施例361:(5-(4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧 啶-2-基)噻唑-2-基)甲醇
向微波小瓶添加N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(50mg,0.165mmol)、噻唑-2-基甲醇(57mg,0.495mmol)和醋酸钯(II)(2mg,0.008mmol)。混合物通过氮气鼓泡脱气20min。添加磷酸三钾(71mg,0.330mmol)、丁基二-1-金刚烷基膦(6mg,0.0165mmol)和1-甲基-2-吡咯烷酮(0.7mL)并密封反应容器并于室温搅拌15min接着于125℃搅拌24h。反应然后冷却至室温，以水稀释并且以二氯甲烷萃取(3x)。合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。粗产物通过反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(13.6mg,22％)。LCMS(ESI):RT4.13min,[M+H]+382.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.17(s,1H),8.54(d,J＝1.3Hz,1H),8.28(s,1H),8.18(d,J＝5.8Hz,1H),7.83(d,J＝3.3Hz,1H),7.75(d,J＝3.2Hz,1H),7.09(s,1H),5.71(s,2H),4.72(p,J＝6.9Hz,1H),2.57(s,3H),1.55(d,J＝6.9Hz,6H).
实施例362:N-(2-(3,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基- 1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向微波小瓶添加N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(70mg,0.231mmol)、3,5-二甲基吡唑-4-硼酸频哪醇酯(106mg,0.462mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]氯化钯(II)、复合以二氯甲烷(1:1)(38mg,0.046mmol)、碳酸钠(2.0mol/L在水中)(491μL,0.983mmol)和1,4-二噁烷(3mL)。该小瓶经密封并经历于130℃的微波辐照40分钟。反应混合物冷却至室温，以乙酸乙酯稀释，以水(2x)和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。粗产物通过反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(16.1mg,19％)，为浅粉色固体。LCMS(ESI):RT 3.45min,[M+H]+363.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.17(s,1H),8.54(d,J＝1.3Hz,1H),8.28(s,1H),8.18(d,J＝5.8Hz,1H),7.83(d,J＝3.3Hz,1H),7.75(d,J＝3.2Hz,1H),7.09(s,1H),5.71(s,3H),4.72(p,J＝6.9Hz,1H),3.27(s,3H),2.57(s,3H),1.55(d,J＝6.9Hz,6H).
实施例363:N-(2-(3-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:(1-甲基-3-硝基-1H-吡唑-4-基)硼酸
向反应小瓶中添加4-溴-1-甲基-3-硝基-吡唑(500mg,2.427mmol)、醋酸钾(1254mg,12.136mmol)、双联频哪醇基二硼烷(1300mg,4.854mmol)、1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁-钯(II)二氯化物-二氯甲烷复合物(104mg,0.121mmol)和2-甲基四氢呋喃(12mL)并将反应加热至90℃。7h后，将反应冷却至室温，通过硅藻土过滤，并真空浓缩。粗物质通过在硅胶上的快速色谱法纯化(溶剂梯度:0-100％EtOAc/庚烷)得到标题化合物(83.7mg,20％)，为灰白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝172.0；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.19(s,2H),7.86(s,1H),3.93(s,3H).
步骤2:1-异丙基-2-甲基-N-(2-(1-甲基-3-硝基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1H- 咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
1-异丙基-2-甲基-N-(2-(1-甲基-3-硝基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺以类似于制备实施例51,步骤7的方法。LCMS(ESI)[M+H]+＝394.2.
步骤3:N-(2-(3-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H- 咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
铁粉(13.4mg,0.240mmol)、氯化铵(18.6mg,0.347mmol)和1-异丙基-2-甲基-N-(2-(1-甲基-3-硝基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(23.5mg,0.060mmol)在水(300μL)和乙醇(900μL)中的混合物于80℃加热2h。反应混合物冷却至室温，过滤，真空浓缩并通过反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(5.1mg,23％)。LCMS(ESI):RT 3.27min,[M+H]+364.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.85(s,1H),8.55(d,J＝0.9Hz,1H),8.26(d,J＝5.8Hz,1H),7.91(d,J＝5.5Hz,2H),7.24(s,1H),5.78(s,2H),4.74(p,J＝6.9Hz,1H),3.66(s,3H),2.58(s,3H),1.60(d,J＝6.9Hz,6H).
实施例364:N-(2-(3-(1H-吡唑-5-基)哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基- 1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向玻璃反应小瓶添加3-(1H-吡唑-5-基)哌啶(103.5mg,0.68mmol),N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(207.3mg,0.68mmol)、碳酸钾(191.1mg,1.37mmol)和1-甲基-2-吡咯烷酮(5.0mL)。反应小瓶密封并于80℃搅拌过夜。反应混合物冷却至室温，以水稀释，以二氯甲烷萃取，并且有机层经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(67.2mg,23.5％)。LCMS(ESI):RT 4.07min,[M+H]+418.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.51(s,1H),9.65(s,1H),8.49(d,J＝0.9Hz,1H),8.29(s,1H),7.96(d,J＝5.6Hz,1H),6.46(d,J＝5.8Hz,1H),6.13(s,1H),4.83–4.69(m,2H),4.67–4.59(m,1H),3.27(s,2H),3.03(t,J＝12.9Hz,2H),2.54(s,3H),2.11–2.00(m,1H),1.72(dt,J＝20.8,11.9Hz,2H),1.44(dd,J＝14.4,6.9Hz,6H).
实施例365:1-异丙基-2-甲基-N-(2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1H-咪 唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向微波反应小瓶添加1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑(82.5mg,0.396mmol)、N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(100.0mg,0.33mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(38.2mg,0.033mmol,1M醋酸钾/水(1.0mL)和乙腈(1.0mL)。反应小瓶经密封并于130℃在微波辐射下加热20min。反应混合物冷却至室温，以水稀释并且以乙酸乙酯萃取。有机层以盐水洗涤经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(35.7mg,31％)。LCMS(ESI):RT 3.76min,[M+H]+349.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.00(s,1H),8.55(d,J＝0.9Hz,1H),8.41(s,1H),8.30(d,J＝5.8Hz,1H),8.25(s,1H),8.02(d,J＝0.7Hz,1H),7.14(s,1H),4.76(p,J＝6.9Hz,1H),3.92(s,3H),2.58(s,3H),1.63(d,J＝6.9Hz,6H).
实施例366:1-异丙基-N-(2-异噁唑-4-基)嘧啶-4-基)-2-甲基-1H-咪唑并[4,5- c]吡啶-6-胺
向微波小瓶添加4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)异噁唑(51.2mg,0.26mmol)、N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(53.0mg,0.175mmol)、双(二-叔丁基(4-二甲基氨基苯基)膦)二氯钯(II)(13.05mg,0.0175mmol)、1M碳酸钠/水(0.35mL)和乙腈(2.0mL)。反应小瓶以氮气吹扫5分钟，密封并于100℃加热24小时。反应混合物冷却至室温，以水稀释，以乙酸乙酯萃取，并且有机洗液经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。粗物质通过在硅胶上的快速色谱法纯化(溶剂梯度:0-50％甲醇/二氯甲烷)接着通过反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(8.3mg,14％)。LCMS(ESI):RT 3.99min,[M+H]+336.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.02(s,1H),9.11(s,1H),8.79(s,1H),8.60(d,J＝0.8Hz,1H),8.03(s,1H),6.70(s,1H),4.89(s,1H),2.61(s,3H),1.55(d,J＝6.9Hz,6H).
实施例367:N-(2-(2H-1,2,3-三唑-2-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑 并[4,5-c]吡啶-6-胺
向反应小瓶中添加1H-1,2,3-三唑(45.61mg,0.66mmol)、N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(200mg,0.66mmol)、碳酸钾(91.29mg,0.66mmol)和1-甲基-2-吡咯烷酮(5.0mL)。将反应容器密封并于80℃加热72h。反应混合物冷却至室温，以水稀释，以二氯甲烷萃取并真空浓缩。粗物质通过在硅胶上的快速色谱法纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)接着通过反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(46.3mg,14％)。LCMS(ESI):RT 4.07min,[M+H]+336.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.59(s,1H),9.10(s,1H),8.56(d,J＝0.9Hz,1H),8.43(d,J＝5.9Hz,1H),8.20(s,1H),7.22(s,1H),4.77(p,J＝6.8Hz,1H),2.58(s,3H),1.69(d,J＝6.9Hz,6H).
实施例368:1-异丙基-2-甲基-N-(2-(3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)嘧啶-4-基)- 1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-甲腈
向反应小瓶中添加N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(689mg,2.275mmol)、氰化钾(183mg,2.73mmol)、1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷(26.9mg,0.23mmol)、二甲基亚砜(5.8g,74mmol)和水(0.45mL,24.75mmol)。将反应容器密封并于60℃加热1h。反应混合物冷却至室温，以水稀释并且以乙酸乙酯萃取。有机层以盐水洗涤经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。粗物质通过在硅胶上的快速色谱法纯化(溶剂梯度:0-50％甲醇/二氯甲烷)并真空浓缩得到标题化合物(667.4mg,100％)。
步骤2:4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-甲酰 胺
向在二甲基亚砜(2.26mL,31.86mmol)和水(2.0mL)中的4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-甲腈(667.4mg,2.275mmol)添加碳酸钾(635.3mg,4.55mmol)和过氧化氢(50％水溶液)(0.66mL,11.38mmol)。于室温搅拌反应3h并真空浓缩。粗物质通过在硅胶上的快速色谱法纯化(溶剂梯度:0-50％甲醇/二氯甲烷)并真空浓缩得到标题化合物(908.2mg,100％)。
步骤3:(E)-N-(1-(二甲基氨基)亚乙基)-4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5- c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-甲酰胺
向在甲苯(30mL)中的4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-甲酰胺(225mg,0.564mmol)添加N,N-二甲基乙酰胺二甲基乙缩醛(0.35mL,2.2mmol)。反应烧瓶固定以回流冷凝器并且将反应于95℃加热20h。粗物质经真空浓缩得到标题化合物(214mg,定量产率)。
步骤4:1-异丙基-2-甲基-N-(2-(3-甲基-1H-1,2,4-三唑-5-基)嘧啶-4-基)-1H- 咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
将(E)-N-(1-(二甲基氨基)亚乙基)-4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-甲酰胺(107mg,0.28mmol)引入乙酸(3.0mL)并冷却至0℃。添加肼(10.12mg,0.31mmol)并将反应缓慢地加热至95℃并在该温度保持5h。粗物质通过在硅胶上的快速色谱法纯化(溶剂梯度:0-20％甲醇/二氯甲烷)接着通过反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(7.2mg,7％)。LCMS(ESI):RT 3.78min,[M+H]+350.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.27(s,1H),9.13(s,1H),8.53(s,1H),8.47–8.39(m,1H),7.20(s,1H),4.76(p,J＝7.0Hz,1H),2.57(s,3H),2.42(s,3H),1.70(d,J＝6.9Hz,6H)。
下表4中的各化合物根据如在本文另一实施例中所描述的类似的试验方法(使用适当取代的试剂)制备，这样的实施例在合成方法栏中列为参考(例如，根据在实施例12中描述的类似试验方法制备的表4中的化合物将会在合成方法柱中标记为具有“12”)。
表4
下表5中的各化合物根据如下所述的一般方法制备：
一般方法：
适当取代的胺(1当量.,0.13mmol)称重进入1打兰圆锥形小瓶。向该小瓶添加溶解在沸腾的异丙醇中的N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(0.667当量.,0.087mmol)至浓度为约35mM。然后添加三乙基胺(2当量.,0.26mmol)。反应于110℃继续过夜或者直到UPLC分析表明转化完全。反应混合物经减压浓缩。任何Boc-保护的物质任选地通过在4M HCl中震荡2小时脱保护，并且然后减压除去酸性溶剂。在除去所有的挥发物之后，粗产物溶解于二氯甲烷(2mL)并以碳酸氢钠(2x 1mL)洗涤。有机部分经分离并减压浓缩。粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到所需的产物。
实施例A90:(±)-6-氟-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷
(±)-6-氟-1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸苄基酯(TetrahedronLetters,53,(2012),2971–2975)(1.29g,4.37mmol)和10％钯/碳(129mg)在工业级甲基化酒精(25mL)中的混合物中在氢气气氛下搅拌16h，然后通过硅藻土垫过滤。滤液经真空浓缩得到无色油状物(672mg,95％)。LCMS(ESI):[M+H]+162.
实施例A91:(±)-顺式-5-氟-3,3-二甲基哌啶-4-醇
步骤1:3,3-二甲基-4-三甲基甲硅烷基氧基-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁基酯
将三甲基甲硅烷基氯(0.74mL,5.9mmol),并且然后将三乙基胺(1.6mL,12mmol)添加至3,3-二甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯(1.1g,4.9mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的混合物。反应混合物于80℃在氮气下加热16h。反应混合物冷却至室温并以碳酸氢钠水溶液(50mL)稀释。混合物水溶液以环己烷(2×50mL)萃取。将有机萃取物合并，以盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。粗剩余物通过色谱法纯化(氧化硅，梯度：0-20％乙酸乙酯/环己烷)得到无色油状物(781mg,53％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.60–4.53(m,1H),3.92–3.85(m,2H),3.26(bs,2H),1.46(s,9H),1.00(s,6H),0.20(s,9H).
步骤2:5-氟-3,3-二甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯
于0℃(970mg,2.7mmol)分份逐渐添加至3,3-二甲基-4-三甲基甲硅烷基氧基-3,6-二氢-2H-吡啶-1-甲酸叔丁基酯(781mg,2.6mmol)在乙腈(13mL)中的溶液。搅拌2h后，反应混合物经真空浓缩。剩余物吸收在盐水(50mL)中并以乙酸乙酯萃取(2×50mL)。将有机萃取物合并，经硫酸镁干燥，过滤并且真空浓缩得到无色油状物(620mg,97％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.11(ddd,J＝47.7,10.6,7.24,1H),4.83–4.52(m,1H),4.07–3.85(m,1H),3.21–2.84(m,2H),1.50(s,9H),1.19(s,3H),1.12(s,3H).
步骤3:(±)-顺式-5-氟-4-羟基-3,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
于0℃(1.0M在四氢呋喃中的溶液)(3.0mL,3.0mmol)滴加至5-氟-3,3-二甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯(620mg,2.5mmol)在无水四氢呋喃(10mL)中的溶液并将混合物搅拌2h。反应混合物以6M氢氧化钠(3mL)逐渐淬灭并剧烈搅拌1h。反应混合物经真空浓缩。剩余物吸收在水(50mL)中并以乙酸乙酯萃取(3×50mL)。将有机萃取物合并，以盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩得到无色油状物。该油状物通过色谱法纯化(氧化硅,溶剂梯度:20-60％乙酸乙酯/环己烷)得到无色油状物(401mg,64％)，为外消旋混合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.78–4.56(m,1H),4.27–2.93(m,6H),1.46(s,9H),1.43(s,6H).
步骤4:(±)-顺式-5-氟-3,3-二甲基哌啶-4-醇
将三氟乙酸(2mL)添加至(±)-顺式-5-氟-4-羟基-3,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(474mg,1.9mmol)在二氯甲烷(2mL)中的溶液。于室温搅拌30min后，反应混合物装载至SCX柱上。该柱以甲醇洗涤并且然后以2M氨/甲醇洗脱。碱性级分经真空浓缩得到对映异构体的混合物，为无色油状物(282mg,99％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.73–4.58(m,1H),3.45–3.38(m,1H),3.24–3.17(m,1H),2.85(ddd,J＝28.1,14.0,3.0Hz,1H),2.74(dd,J＝13.4,1.2Hz,1H),2.35(dd,J＝13.4,1.4Hz,1H),1.88(bs,2H),1.00(d,J＝2.1Hz,3H),0.98(s,3H).
实施例A92:(3RS,4SR)-3-氟-4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸苄基酯(对映异构体的 混合物)
和
实施例A93:(3RS,4RS)-3-氟-4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸苄基酯(对映异构体的 混合物)
于-78℃经15min将甲基溴化镁(1.4M在四氢呋喃:甲苯,1:3中)(61mL,85.4mmol)添加至3-氟-4-氧代哌啶-1-甲酸苄基酯(J.Med.Chem.,2008,51,4239)(16.5g,65.6mmol)在四氢呋喃(200mL)中的溶液。经2h将混合物温热至-20℃，然后通过添加饱和氯化铵淬灭。水相以乙酸乙酯萃取两次，并且合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:50-100％二乙醚/戊烷)得到标题化合物，为无色油状物。
实施例A92(对映异构体的混合物，相对立体化学已知):(3RS,4SR)-3-氟-4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸苄基酯(8.0g,46％)。1H NMR(CDCl3):δ7.37-7.32(5H,m),5.13(2H,s),4.28(1H,br d,J＝47Hz),4.04-3.88(1H,m),3.69-3.64(1H,m),3.52-3.33(2H,m),2.00(1H,br s),1.82-1.77(1H,m),1.59-1.51(1H,m),1.31(3H,d,J＝0.8Hz)。
实施例A93(对映异构体的混合物，相对立体化学已知):(3RS,4RS)-3-氟-4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸苄基酯(3.33g,19％)。1H NMR(CDCl3):δ7.36-7.35(5H,m),5.13(2H,brs),4.29-4.07(2H,m),3.92-3.80(1H,m),3.55-3.43(1H,m),3.30-3.17(1H,m),1.90-1.80(1H,m),1.75(1H,br s),1.52-1.46(1H,m),1.32(3H,d,J＝2.2Hz).
实施例A94和A95:(3R*,4S*)-3-氟-4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸苄基酯(对映异构 体1)和(3R*,4S*)-3-氟-4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸苄基酯(对映异构体2)
实施例A92的对映异构体(7.72g)通过手性超临界液相色谱分离：
实施例A94(为单个未知对映异构体，相对立体化学已知并且任意指定绝对立体化学):(3.4g)[α]D+0.6°(c 3.2,甲醇)。
实施例A95(为单个未知对映异构体，相对立体化学已知并且任意指定绝对立体化学):(2.84g)[α]D 0.0°(c 6.2,甲醇).
实施例A96:(3RS4SR)-3-氟-4-甲基哌啶-4-醇(对映异构体的混合物)
(3RS,4SR)-3-氟-4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸苄基酯(实施例A92,3.8g,14.2mmol)溶解于乙醇(100mL)中并且混合物以氮气吹扫。添加氢氧化钯/碳(20％,0.3g)并且混合物在氢气氛围下搅拌16h。混合物以氮气吹扫，过滤通过Celite垫并且滤液经真空浓缩得到标题化合物，为无色胶状物，为对映异构体的混合物(定量)。1H NMR(CDCl3):δ4.29(1H,ddd,J＝48.4,7.2,3.5Hz),3.13-3.06(1H,m),3.00-2.91(2H,m),2.71-2.64(1H,m),2.18(2H,br s),1.80-1.72(1H,m),1.60-1.53(1H,m),1.28(3H,d,J＝1.3Hz).
实施例A97:(+)-(3R*,4S*)-3-氟-4-甲基哌啶-4-醇(绝对立体化学未知)
标题化合物(相对立体化学已知并且任意指定绝对立体化学)从(3R*,4S*)-3-氟-4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸苄基酯的较早洗脱的对映异构体(实施例A94)(3.4g,12.72mmol)通过与在实施例A96中描述的类似方法制备。[α]D+16.9°(c 2.6,甲醇)。1H NMR(CDCl3):δ4.29(1H,ddd,J＝48.4,7.2,3.5Hz),3.13-3.06(1H,m),3.00-2.91(2H,m),2.71-2.64(1H,m),2.10(2H,br s),1.80-1.72(1H,m),1.60-1.53(1H,m),1.28(3H,d,J＝1.2Hz).
实施例A98:(-)-(3R*,4S*)-3-氟-4-甲基哌啶-4-醇(绝对立体化学未知)
标题化合物(相对立体化学已知并且任意指定绝对立体化学)从(3R*,4S*)-3-氟-4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸苄基酯的较晚洗脱的对映异构体(实施例A95)(2.846g,10.64mmol)通过与在实施例A96中描述的类似方法制备。[α]D-13.7°(c 3.35,甲醇)。1H NMR(CDCl3):δ4.30(1H,ddd,J＝48.4,7.2,3.5Hz),3.14-3.07(1H,m),3.01-2.92(2H,m),2.72-2.65(1H,m),1.92(2H,br s),1.80-1.73(1H,m),1.60-1.54(1H,m),1.29(3H,d,J＝1.3Hz).
实施例A99:(3RS,4SR)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟-4-甲基哌啶-4-醇(对映异构 体的混合物)
(3RS,4SR)-3-氟-4-甲基哌啶-4-醇(1.89g,14.2mmol)(实施例A96),2-氯-4-氨基嘧啶(1.838g,14.2mmol)和三乙基胺(3.9mL,28mmol)在异丙醇(30mL)中的混合物在微波辐射下于150℃加热1h。冷却的反应混合物经真空浓缩。剩余物溶解于二氯甲烷和甲醇(30:1,124mL)的混合物，向其中添加碳酸钾(5.5g)并且搅拌混合物10min。混合物经过滤并且滤液真空浓缩。通过氧化硅上的色谱纯化(溶剂梯度50-100％乙酸异丙基酯/二氯甲烷，然后50-100％乙酸乙酯/乙酸异丙基酯)得到产物，为对映异构体的混合物，为白色固体(2.09g,65％)。1H NMR(CDCl3):δ7.92(1H,d,J＝5.6Hz),5.76(1H,d,J＝5.6Hz),4.56(2H,br s),4.48-4.40(1H,m),4.33(1H,ddd,J＝47,9.1,4.5Hz),4.15-4.09(1H,m),3.59(1H,ddd,J＝12.6,8.8,5.4Hz),3.47(1H,ddd,J＝13.4,10.6,3.3Hz),1.95(1H,dd,J＝2.7,1.9Hz),1.88-1.81(1H,m),1.62-1.55(1H,m),1.33(3H,t,J＝1.0Hz).
实施例A100:(-)-(3R*,4S*)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟-4-甲基哌啶-4-醇(绝 对立体化学未知)
标题化合物(2.093g,73％)(作为单个的未知的立体异构体，相对立体化学已知且任意指定绝对立体化学)从(+)-(3R*,4S*)-3-氟-4-甲基哌啶-4-醇(实施例A97)1.679g,12.6mmol)通过与在实施例A99中描述的类似方法制备。[α]D-16°(c 1.16,甲醇)。1H NMR(CDCl3):δ7.93(1H,d,J＝5.6Hz),5.76(1H,d,J＝5.6Hz),4.55(2H,br s),4.48-4.26(2H,m),4.16-4.09(1H,m),3.63-3.56(1H,m),3.51-3.44(1H,m),1.94(1H,dd,J＝2.7,1.9Hz),1.88-1.81(1H,m),1.63-1.55(1H,m),1.33(3H,t,J＝0.9Hz).
实施例A101:(+)-(3R*,4S*)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟-4-甲基哌啶-4-醇(绝 对立体化学未知)
标题化合物(1.684g,70％)(作为单个的未知的立体异构体，相对立体化学已知且任意指定绝对立体化学)从(-)-(3R*,4S*)-3-氟-4-甲基哌啶-4-醇(实施例A98)1.417g,10.64mmol)通过与在实施例A99中描述的类似方法制备。[α]D+17°(c 1.17,甲醇)。1H NMR(CDCl3):δ7.93(1H,d,J＝5.6Hz),5.76(1H,d,J＝5.6Hz),4.55(2H,br s),4.48-4.26(2H,m),4.16-4.09(1H,m),3.63-3.56(1H,m),3.51-3.44(1H,m),1.94(1H,dd,J＝2.7,1.9Hz),1.88-1.81(1H,m),1.63-1.55(1H,m),1.33(3H,t,J＝0.9Hz).
实施例A102:(3RS,4SR)-3-氟-4-甲氧基-4-甲基哌啶-1-甲酸苄基酯(对映异构体的混合物)
氢化钠(60wt％在矿物油中的分散体)(0.16g,4.0mmol)分份添加至(3RS,4SR)-3-氟-4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸苄基酯(实施例A92)(0.27g,1.0mmol)、硫酸二甲酯(0.38mL,4.0mmol)和18-冠醚-6(10mg)在四氢呋喃(8mL)中的溶液。反应混合物于室温搅拌16h然后通过添加饱和氯化铵淬灭。水相以乙酸乙酯萃取两次，并且合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:5-25％乙酸乙酯/环己烷)得到标题化合物，为对映异构体的混合物，无色油状物(定量)。1H NMR(CDCl3):δ7.37-7.31(5H,m),5.13(2H,br s),4.29(1H,br d,J＝47Hz),3.96(1H,br s),3.68(1H,br s),3.50(1H,br s),3.30(3H,s),3.27-3.20(1H,m),1.92(1H,brs),1.41(1H,br s),1.30(3H,s).
实施例A103:(3RS,4SR)-3-氟-4-甲氧基-4-甲基哌啶(对映异构体的混合物)
标题化合物(51.4mg,35％2个步骤)，作为对映异构体的混合物，从(3RS,4SR)-3-氟-4-甲氧基-4-甲基哌啶-1-甲酸苄基酯(实施例A102)通过与在实施例A96中描述的类似方法制备。1H NMR(CDCl3):δ4.33(1H,ddd,J＝48,7.2,3.2Hz),3.30(3H,s),3.19-3.12(1H,m),2.95-2.86(2H,m),2.69-2.63(1H,m),1.92-1.85(1H,m),1.76(1H,br s),1.47-1.40(1H,m),1.27(3H,d,J＝1.1Hz).
实施例A104:1-(4-氨基嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇
4-羟基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(3.2g,14.9mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液添加三氟乙酸(5mL)并且反应混合物于室温搅拌2h。反应混合物装载至SCX-2筒上并以甲醇洗涤。产物以氨在甲醇中的溶液(2M)洗脱。洗脱液经真空浓缩并且剩余物溶解于异丙醇(20mL)中。添加2-氯-4-氨基嘧啶(1.83g,14.1mmol)和三乙基胺(4.14mL,29.7mmol)，并且反应混合物在密封小瓶中于120℃加热48h。反应混合物经由快速色谱法在硅胶上纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/乙酸乙酯)。LCMS(ESI):[M+H]+209.
实施例A105:6-氯-2-[(S)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟- 1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
标题化合物(1.1g,95％)从(S)-乳酰胺(558mg,6.26mmol)和6-氯-N4-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)吡啶-3,4-二胺(实施例A82,步骤2)(1g,4.17mmol)根据对于实施例A72描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+378.
实施例A106:6-氯-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((R)-2,2,2-三氟- 1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
标题化合物(2.1g,91％)从(R)-乳酰胺(2.5g,10.4mmol)和6-氯-N4-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)吡啶-3,4-二胺(实施例A60,步骤2)(1.4g,15.6mmol)根据对于实施例A72描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+378.
实施例A107:6-氯-2-[(S)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((R)-2,2,2-三氟- 1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶
标题化合物(0.8g,99％)从(S)-乳酰胺(2.5g,10.4mmol)和6-氯-N4-((R)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)吡啶-3,4-二胺(实施例60,步骤2)(1.4g,15.6mmol)根据对于实施例A72描述的类似方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+378
实施例A108和A109:(5RS,6SR)-6-氟-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁基 酯(对映异构体的混合物)和(5RS,6SR)-6-氟-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁基 酯(对映异构体的混合物)
步骤1:2-(丙-2-炔-1-基氧基)四氢-2H-吡喃
向吹扫并保持以氮气惰性气氛的3000-mL 4-颈圆底烧瓶中放置丙-2-炔-1-醇(100g,1.78mol)在二氯甲烷(1000mL)中的溶液，接着伴随搅拌于0℃添加樟脑磺酸(20g,86.21mmol)。伴随搅拌于0℃向其中滴加3,4-二氢-2H-吡喃(158g,1.88mol)在二氯甲烷(500mL)中的溶液。所得溶液于室温搅拌过夜，通过添加2000mL的水/冰淬灭并且以3x2000mL的二氯甲烷萃取。合并的有机层以3x1000mL饱和碳酸氢钠水溶液和3x1000mL的盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。纯化粗产物通过减压(10mm Hg)蒸馏并且各级分于84℃收集，得到152g(61％)的标题化合物，为无色油状物。
步骤2:3-氟-4-羟基-4-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙-1-炔-1-基)哌啶-1- 甲酸叔丁基酯
向吹扫并保持于氮气的惰性气氛下的3000-mL 4-颈圆底烧瓶放置2-(丙-2-炔-1-基氧基)四氢-2H-吡喃(77.4g,552.15mmol)在四氢呋喃(1000mL)中的溶液，接着伴随搅拌于-78℃滴加n-丁基锂(2.5M)(221.2mL,1.20当量)。混合物于-20℃搅拌30min。伴随搅拌于-20℃向其中滴加3-氟-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯(100g,460.33mmol)在四氢呋喃(500mL)中的溶液。所得溶液于-20℃搅拌1h，通过添加1000mL的氯化铵水溶液淬灭并以3x1000mL的乙酸乙酯萃取。合并的有机层以2x1000mL的盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。剩余物在硅胶柱上纯化(溶剂梯度:5％-20％乙酸乙酯/石油醚)得到101g(61％)的标题化合物，为无色油状物。
步骤3:3-氟-4-羟基-4-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙基)哌啶-1-甲酸叔丁 基酯
向吹扫并保持于氮气的惰性气氛下的2000-mL 3颈圆底烧瓶放置3-氟-4-羟基-4-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙-1-炔-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(101g,282.58mmol)、甲醇(1000mL)和钯/碳(40g)。向上述引入H2(气体)并且所得溶液于室温搅拌过夜。反应经过滤并真空浓缩得到91g(89％)的标题化合物，为无色油状物。
步骤4:3-氟-4-羟基-4-(3-羟基丙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯
向5000-mL 4-颈圆底烧瓶中放置3-氟-4-羟基-4-(3-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)丙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(91g,251.76mmol)在二氯甲烷(1000mL)中的溶液。于0℃向上述溶液引入氯化氢(气体)。在氯化氢(气体)下于0℃混合物搅拌2h。固体通过过滤收集。固体以1000mL的二氯甲烷稀释并向该混合物添加三乙基胺(76.4g,755.02mmol)和二碳酸二叔丁基酯(60.4g,276.75mmol)。所得溶液于室温搅拌过夜并且然后以1000mL的二氯甲烷稀释。所得混合物以1x1000mL的氢氯酸水溶液(1N)、1x1000mL的碳酸氢钠水溶液、1x1000mL的盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩得到31g(44％)的标题化合物，为无色油状物。
步骤5:(5RS,6SR)-6-氟-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁基酯(对映异构 体的混合物)和(5RS,6SR)-6-氟-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁基酯(对映异构 体的混合物)
向吹扫并保持以氮气惰性气氛的500-mL 3颈圆底烧瓶放置3-氟-4-羟基-4-(3-羟基丙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(31g,111.78mmol)在二氯甲烷(300mL)中的溶液、三乙基胺(33.9g,335.01mmol)、4-二甲基氨基吡啶(700mg,5.73mmol)，接着于0℃分多批添加4-甲基苯-1-磺酰氯(25.5g,133.76mmol)。所得溶液于室温搅拌过夜并且然后以1000mL的二氯甲烷稀释。所得混合物以1x1000mL的1N HCl水溶液、1x1000mL的碳酸氢钠水溶液、1x1000mL的盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。剩余物通过硅胶柱色谱法纯化(溶剂梯度:10％-20％乙酸乙酯/石油醚)。粗产物通过制备性HPLC纯化得到两个标题化合物中每一个，均为对映异构体的混合物，相对立体化学任意指定。
实施例A108:(5RS,6SR)-6-氟-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁基酯(10.04g,35％)，为白色固体。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ1.4(s,9H),1.5-1.6(m,1H),1.72-1.80(m,2H),1.92-2.08(m,3H),3.21-3.30(m,1H),3.43-3.45(m,1H),3.59-3.63(m,1H),3.88-3.93(m,3H),4.19-4.24(m,0.5H),4.35-4.40(m,0.5H)。
实施例A109:(5RS,6SR)-6-氟-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-甲酸叔丁基酯(4.937g,17％)，为白色固体。1H NMR(300MHz,CDCl3):δ1.4(s,9H),1.5(m,1H),1.6-1.7(m,1H),1.86-1.98(m,3H),2.00-2.13(m,1H),3.15-3.22(m,1H),3.23-3.49(m,1H),3.75(m,1H),3.84-3.89(m,2H),3.95-4.02(m,1H),4.12(m,0.5H),4.25(m,0.5H).
实施例A110:间-(3R,4s,5S)-3,5-二氟-4-羟基哌啶
步骤1:3-氟-4-氧代哌啶-1,3-二羧酸1-叔丁基酯3-甲基酯
于0℃在四氢呋喃(30mL)中的4-氧代哌啶-1,3-二羧酸1-叔丁基酯3-甲基酯(2.65g,10.3mmol)(WO 2005077369 A1)添加至60％氢化钠在矿物油(453mg,11.3mmol)中的浆料并搅拌30min。反应混合物温热至室温并在搅拌1小时。然后添加N,N-二甲基甲酰胺(30mL)，接着添加(3.65g,10.3mmol)。于室温搅拌2h后，反应混合物以盐水(300mL)稀释。混合物以乙酸乙酯萃取(5×30mL)。将有机萃取物合并，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。粗剩余物通过色谱法纯化(氧化硅,溶剂梯度:20-100％乙酸乙酯/环己烷)得到标题化合物，为对映异构体的混合物(2.42g,85％)，为无色油状物：1H NMR(400MHz,CDCl3):δ4.52–4.19(m,1H),4.05–3.49(m,3H),3.85(s,3H),2.99–2.65(m,2H),1.48(s,9H).
步骤2:3,5-二氟-4-氧代哌啶-1,3-二羧酸1-叔丁基酯3-甲基酯
将三甲基甲硅烷基氯(1.34mL,10.5mmol)，接着三乙基胺(2.94mL,21.1mmol)添加至3-氟-4-氧代哌啶-1,3-二羧酸1-叔丁基酯3-甲基酯(2.42g,8.80mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(9mL)中的混合物。立即形成沉淀并且再将N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，辅助搅拌。并于室温将反应混合物再搅拌10min并以碳酸氢钠水溶液(50mL)稀释。混合物水溶液以环己烷(2×50mL)萃取。将有机萃取物合并，以盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩得到浅黄色油状物。该油状物溶解于乙腈(35mL)中并添加(3.27g,9.20mmol)。于室温搅拌16h后，反应混合物经真空浓缩。剩余物吸收在盐水(50mL)中并以乙酸乙酯萃取(2×50mL)。将有机萃取物合并，经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。粗剩余物通过色谱法纯化(氧化硅,溶剂梯度:15-100％乙酸乙酯/环己烷)得到标题化合物，为两个非对映异构体的混合物。
第一洗脱的非对映异构体(643mg,25％)，为无色油状物:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.76–4.58(m,1H),4.57–4.19(m,2H),3.92(s,3H),3.62–3.30(m,1H),3.09–2.98(m,1H),1.47(s,9H).
第二洗脱的非对映异构体分离为水合物(930mg,36％)，为白色固体:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.12–4.93(m,1H),4.56–4.21(m,3H),3.91(s,3H),3.62–3.33(m,3H),1.47(s,9H).
步骤3:3,5-二氟-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯
氢氧化锂一水合物(184mg,4.39mmol),添加至3,5-二氟-4-氧代哌啶-1,3-二羧酸1-叔丁基酯3-甲基酯的第一洗脱的非对映异构体(步骤2,643mg,2.19mmol)在甲醇(20mL)和水(20mL)中的溶液。于室温搅拌30min后，反应混合物经真空浓缩以除去甲醇。剩余物水溶液以0.2M氢氯酸(25mL,5mmol)稀释并以二乙醚(2×50mL)萃取。将有机萃取物合并，经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩得到3,5-二氟-4-氧代哌啶-1,3-二羧酸1-叔丁基酯，为浅黄色油状物(566mg,92％)。在乙腈(15mL)中的粗的酸(298mg,0.11mmol)于80℃在微波辐射下加热5min。反应溶液然后立即用于后续步骤中。一个等份经真空浓缩，得到标题化合物，为浅黄色油状物。1H NMR(400MHz,乙腈-d3)δ6.52(bs,1H),5.07–4.92(m,1H),4.44–4.20(m,2H),3.80–3.60(m,1H),3.27–2.99(m,1H),1.44(s,9H).
步骤4:间-(3R,4s,5S)-3,5-二氟-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯和
(±)-(3RS,5RS)-3,5-二氟-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
来自步骤3的3,5-二氟-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯(～0.11mmol)的溶液以甲醇(15mL)稀释并冷却至0℃。将硼氢化钠(48mg,0.13mmol)缓慢地添加至该溶液并且混合物于0℃搅拌2h。添加若干滴的饱和氯化铵水溶液以淬灭反应溶液并且所得混合物经真空浓缩。剩余物吸收在饱和氯化铵水溶液(30mL)中并以乙酸乙酯萃取(2×50mL)。将有机萃取物合并，经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。粗剩余物通过色谱法纯化(氧化硅,溶剂梯度:50-75％二乙醚/环己烷)得到标题化合物s.
第一洗脱化合物，(±)-(3RS,5RS)-3,5-二氟-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯，为对映异构体的混合物(80mg,31％):1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.89–4.57(m,2H),4.11–3.17(m,5H),2.33(bs,1H),1.47(s,9H).
第二洗脱化合物，间-(3R,4s,5S)-3,5-二氟-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯，为单个间位异构体(68mg,27％):1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.73–4.53(m,2H),4.18–4.04(m,2H),4.00–3.85(m,1H),3.36(ddd,J＝26.4,14.3,2.7Hz,2H),2.69(d,J＝8.3Hz,1H),1.47(s,9H).
步骤5:间-(3R,4s,5S)-3,5-二氟-4-羟基哌啶
来自步骤4的间-(3R,4s,5S)-3,5-二氟-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(80mg,0.34mmol)在氢氯酸(4M，在二噁烷中,10mL)中于室温搅拌1h。反应混合物经真空浓缩得到白色固体。固体溶解于甲醇中并装载至SCX柱上。该柱以甲醇洗涤并且然后以2M氨/甲醇洗脱。碱性级分经真空浓缩并剩余物通过色谱法纯化(氧化硅,溶剂梯度:5-15％2M氨在甲醇中/二氯甲烷)得到标题间位化合物(21mg,54％)，为白色固体:1H NMR(400MHz,吡啶-d5)δ7.55(bs,1H),4.87–4.70(m,2H),4.36–4.25(m,1H),3.45–3.38(m,2H),3.01–2.91(m,2H).
实施例A111:(±)-(3RS,5RS)-3,5-二氟哌啶-4-醇(对映异构体的混合物)
在氢氯酸(4M，在二噁烷中,10mL)中(±)-(3RS,5RS)-3,5-二氟-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(实施例A110,步骤4)(80mg,0.34mmol)于室温搅拌1h。反应混合物经真空浓缩得到白色固体。固体溶解于甲醇中并装载至SCX柱上。标题化合物以甲醇洗涤并且然后以2M氨/甲醇洗脱。碱性级分经真空浓缩得到白色固体。固体通过色谱法纯化(氧化硅,溶剂梯度:5-15％2M氨在甲醇中/乙酸乙酯)得到标题化合物，为对映异构体的混合物(22mg,48％)，为白色固体:1H NMR(400MHz,吡啶-d5)δ7.76(bs,1H),5.11–4.90(m,2H),4.26–4.15(m,1H),3.49–3.41(m,1H),3.40–3.32(m,1H),2.95–2.80(m,2H),2.66(bs,1H).
实施例607和608:[2-((3RS,4SR)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-(1-异 丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(绝对立体化学未知)的对映异构体
(±)-[2-((顺式)-3-氟-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(实施例524)经由制备性手性SFC分离得到各标题化合物，为单个立体异构体，相对立体化学已知并且任意指定绝对立体化学。LCMS(ESI):RT2.14min[M+H]+400,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ9.72(s,1H),8.50(s,1H),8.33(bs,1H)7.95(d,J＝5.7Hz,1H),6.45(d,J＝5.7Hz,1H),5.00–4.86(m,1H),4.77–4.66(m,1H),4.48–4.43(m,1H),3.62–3.18(m,4H),3.36(s,3H),2.56(s,3H),1.84–1.66(m,2H),1.57(d,J＝6.9Hz,6H).
实施例609:(R)-1-[6-[2-(2-甲磺酰基-2-甲基丙氧基)嘧啶-4-基氨基]-1-((S)- 2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]乙醇
步骤1:2-(2-甲磺酰基-2-甲基丙氧基)嘧啶-4-基胺
微波反应小瓶装填有在丙-2-醇(1mL)中的4-氨基-2-氯嘧啶(100mg,0.774mmol,1.0当量)、2-甲磺酰基-2-甲基丙-1-醇(353mg,2.33mmol,3.0当量)和碳酸钾(160.3mg,1.16mmol,1.5当量)。反应于室温搅拌1min并在微波辐射下于200℃再加热2.5h(BiotageInitiator,最大压力设置为22bar)。反应混合物经冷却并通过快速柱色谱纯化(溶剂梯度:0-10％2M氨在甲醇中/乙酸乙酯)得到标题化合物(163mg,86％)。LCMS(ESI):[M+H]+246.3.
步骤2:[2-(2-甲磺酰基-2-甲基丙氧基)嘧啶-4-基]-[2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基 氧基)乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺
反应容器填充有6-氯-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例A83),(200mg,0.529mmol)、2-(2-甲磺酰基-2-甲基丙氧基)嘧啶-4-基胺(130.1mg,0.529mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(50.4mg,0.106mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(24.2mg,0.0265mmol)、碳酸铯(344.9mg,1.06mmol)和二噁烷(5ml)。反应混合物经脱气，置于氩气下并于110℃加热3h。反应混合物冷却至室温，过滤并且滤液在乙酸乙酯和水之间分配。有机层经分离，经无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。剩余物通过快速柱色谱纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/乙酸乙酯)得到标题化合物(110.5mg,36％)。LCMS(ESI):[M+H]+587.6.
步骤3:(R)-1-[6-[2-(2-甲磺酰基-2-甲基丙氧基)嘧啶-4-基氨基]-1-((S)-2,2, 2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]乙醇
[2-(2-甲磺酰基-2-甲基丙氧基)嘧啶-4-基]-[2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(111mg,0.19mmol)溶解于氢氯酸在甲醇中(2ml,1.25M)并且反应混合物于室温搅拌3h。反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液稀释并产物以乙酸乙酯萃取(3×15ml)。合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。所得剩余物经历制备性反相-HPLC得到标题化合物，为白色固体(55mg,57％)。LCMS(ESI):RT＝2.86min,[M+H]+503,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.32(1H,br s),8.72(1H,s),8.46(1H,br s),8.17(1H,d,J＝5.9Hz),7.06(1H,br s),5.97(1H,d,J＝7.1Hz),5.92-5.84(1H,m),5.07-5.01(1H,m),4.46(2H,dd,J＝11.3Hz),3.06(3H,s),1.84(3H,d,J＝7.1Hz),1.63(3H,d,J＝6.3Hz),1.42(3H,s),1.41(3H,2s).
实施例610:2,2-二氟-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨 基)嘧啶-2-基氨基]丙酰胺
步骤1:2,2-二氟-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧 啶-2-基氨基]丙酸乙基酯
标题化合物(390mg,定量)从(2-氯嘧啶-4-基)-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(275mg,0.908mmol)使用类似于实施例46的方法制备。LCMS(ESI):[M+H]+420.4.
步骤2:2,2-二氟-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧 啶-2-基氨基]丙酸
反应容器填充有在四氢呋喃:水(3:1ml分别)中的2,2-二氟-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨基]丙酸乙基酯(394mg,0.908mmol)和氢氧化锂水合物(114mg,2.72mmol)。反应混合物于室温搅拌1分钟然后在微波辐射下于120℃加热3h。反应经真空浓缩并通过反相HPLC纯化并接着冻干得到标题化合物(95.3mg,27％)。LCMS(ESI):[M+H]+392.4.
步骤3:2,2-二氟-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧 啶-2-基氨基]丙酰胺
反应容器填充有在N,N-二甲基甲酰胺(5.0ml)中的2,2-二氟-3-[4-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基氨基]丙酸(95.3mg,0.243mmol)。添加氯化铵(26mg,0.487mmol)、2-(1H-7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(138.8mg,0.365mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(187μl,0.365mmol)并且反应混合物于室温搅拌24h。反应混合物经真空浓缩并通过快速柱色谱法纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/乙酸乙酯)。产物通过制备性反相HPLC进一步纯化并接着冻干得到标题化合物(42.6mg,45％)。LCMS(ESI):RT 1.92min,[M+H]+391.4,方法F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(1H,s),8.49(1H,s),8.23(1H,br s),8.15(1H,br s),7.94(1H,br s),7.92(1H,d,J＝5.8Hz),6.77(1H,br s),6.62(1H,br s),4.80-4.70(1H,m),4.12-4.03(2H,m),2.57(3H,s),1.55(6H,d,J＝7.0Hz).
实施例611:(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲基-2-甲 基氨基噻唑-5-基)嘧啶-4-基]胺
步骤1:甲基-(4-甲基噻唑-2-基)胺
氯丙酮(3.0mL,36.1mmol)和N-甲硫基脲(3.26g,36.1mmol)在乙醇(40mL)中的混合物于75℃加热3h。混合物冷却至室温并且然后真空浓缩。剩余物在二乙醚和氨水之间分配。水相以另外的二乙醚萃取并且合并的有机萃取物以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:30-100％乙酸乙酯/环己烷)得到标题化合物，为无色固体(3.97g,86％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ6.05(1H,q,J＝1.1Hz),5.79(1H,br s),2.95(3H,s),2.23(3H,d,J＝1.1Hz).
步骤2:甲基-(4-甲基-5-三丁基甲锡烷基噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基酯
标题化合物从甲基-(4-甲基噻唑-2-基)胺通过在Org.Lett.,2002,4,4209中对于甲基-(5-三丁基甲锡烷基噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基酯描述的类似方法制备。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ3.55(3H,s),2.36(3H,s),1.58(9H,s),1.55-1.49(6H,m),1.37-1.28(6H,m),1.13-1.08(6H,m),0.88(9H,t,J＝7.3Hz).
步骤3:(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)-[2-(4-甲基-2-甲基氨 基噻唑-5-基)嘧啶-4-基]胺
标题化合物从N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)和甲基-(4-甲基-5-三丁基甲锡烷基噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基酯通过类似于实施例312中描述的方法制备。LCMS(ESI):RT 2.20min；[M+H]+395.1,方法F.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.86(1H,s),8.54(1H,s),8.26(1H,d,J＝5.8Hz),8.16(1H,br s),7.85(1H,q,J＝4.7Hz),7.06(1H,br s),4.75(1H,七重峰,J＝6.9Hz),2.86(3H,d,J＝4.7Hz),2.63(3H,s),2.58(3H,s),1.63(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例612:{1-异丙基-6-[2-(4-甲基-2-甲基氨基噻唑-5-基)嘧啶-4-基氨基]- 1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基}甲醇
标题化合物从(2-氯嘧啶-4-基)-[1-异丙基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(实施例A49)和甲基-(4-甲基-5-三丁基甲锡烷基噻唑-2-基)氨基甲酸叔丁基酯通过类似于实施例312中描述的方法制备。LCMS(ESI):RT 2.13；min[M+H]+411.1,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.91(1H,s),8.63(1H,s),8.27(1H,d,J＝5.8Hz),8.21(1H,br s),7.86(1H,q,J＝4.7Hz),7.08(1H,br s),5.69(1H,t,J＝5.8Hz),4.96(1H,七重峰,J＝6.9Hz),4.73(2H,d,J＝5.8Hz),2.86(3H,d,J＝4.8Hz),2.63(3H,s),1.66(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例613:{1-异丙基-6-[2-(3-甲基-2-甲基氨基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-4-基氨 基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基}甲醇
步骤1:(1-甲基-1H-咪唑-2-基)氨基甲酸叔丁基酯
二碳酸二叔丁基酯(1.07g,4.88mmol)在四氢呋喃(6mL)中的溶液添加至1-甲基-1H-咪唑-2-基胺(WO2011/071716)(0.395g,4.07mmol)在四氢呋喃(4mL)中的悬浮液。混合物于室温搅拌16h并且然后真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度2-8％甲醇/乙酸乙酯)得到标题化合物，为乳状固体(0.615g,77％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ11.11(1H,br s),6.67(1H,br s),6.54(1H,br s),3.50(3H,s),1.52(9H,s).
步骤2:甲基-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)氨基甲酸叔丁基酯
氢化钠(60wt％在矿物油中的分散体)(187mg,4.67mmol)分份添加至(1-甲基-1H-咪唑-2-基)氨基甲酸叔丁基酯(0.615g,3.12mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的溶液。所得悬浮液于室温搅拌30min并且然后冷却至0℃。2min添加碘甲烷(0.233mL,3.74mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中的溶液经并且然后混合物于室温搅拌16h。反应混合物经真空浓缩。剩余物在氯化铵水溶液和乙酸乙酯之间分配。水相以另外的乙酸乙酯萃取，并且合并的有机萃取物经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:0-4％甲醇/乙酸乙酯)得到标题化合物，为乳状固体(0.279g,42％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ6.91(1H,d,J＝1.4Hz),6.76(1H,d,J＝1.4Hz),3.48(3H,s),3.22(3H,s),1.43(9H,br s).
步骤3:甲基-(1-甲基-5-三丁基甲锡烷基-1H-咪唑-2-基)氨基甲酸叔丁基酯
于-78℃叔丁基锂(1.7M在戊烷中)(0.274mL,0.466mmol)滴加至甲基-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)氨基甲酸叔丁基酯(89.6mg,0.424mmol)在四氢呋喃(3mL)中的溶液。混合物于-78℃for 30min并且然后添加三丁基三氯化锡(0.114mL,0.424mmol)。反搅拌应混合物经90min温热至0℃。添加饱和氯化铵溶液并且反应混合物在水和乙酸乙酯之间分配。水相以另外的乙酸乙酯萃取，合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物。LCMS(ESI):[M-tBu++2H+]446.
步骤4:{1-异丙基-6-[2-(3-甲基-2-甲基氨基-3H-咪唑-4-基)嘧啶-4-基氨基]- 1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基}甲醇
标题化合物从(2-氯嘧啶-4-基)-[1-异丙基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(实施例A49)和甲基-(1-甲基-5-三丁基甲锡烷基-1H-咪唑-2-基)氨基甲酸叔丁基酯通过类似于实施例312中描述的方法制备。LCMS(ESI):RT 1.84min；[M+H]+394.2,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.92(1H,s),8.63(1H,s),8.34(1H,br s),8.26(1H,d,J＝5.8Hz),7.50(1H,s),7.11(1H,br s),6.14(1H,br s),5.70(1H,t,J＝5.8Hz),4.97(1H,七重峰,J＝6.9Hz),4.73(2H,d,J＝5.7Hz),3.77(3H,s),2.84(3H,d,J＝4.8Hz),1.63(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例614:[2-(2-氨基噻唑-5-基)嘧啶-4-基]-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并 [4,5-c]吡啶-6-基)胺
步骤1:噻唑-2-基-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)氨基甲酸叔丁基酯
氢化钠(60wt％在矿物油中的分散体)(80mg,2.0mmol)分份添加至噻唑-2-基-氨基甲酸叔丁基酯(0.266g,1.33mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的溶液。混合物于室温搅拌30min并且然后冷却至0℃。添加2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基氯(0.282mL,1.6mmol)并且然后混合物于室温搅拌16h。反应混合物在氯化铵水溶液和乙酸乙酯之间分配。水相以另外的乙酸乙酯萃取，并且合并的有机萃取物以水洗涤，然后以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度2-10％乙酸乙酯/环己烷)得到标题化合物，为无色固体(0.389g,88％)。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.47(1H,d,J＝3.6Hz),6.97(1H,d,J＝3.6Hz),5.59(2H,s),3.72-3.68(2H,m),1.61(9H,s),1.00-0.96(2H,m),0.00(9H,s).
步骤2:(5-三丁基甲锡烷基噻唑-2-基)-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)氨基甲 酸叔丁基酯
于-78℃.n-丁基锂(2.5M在己烷中)(0.466mL,1.165mmol)滴加至噻唑-2-基-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)氨基甲酸叔丁基酯(0.35g,1.059mmol)在四氢呋喃(4mL)中的溶液。混合物于-78℃搅拌30min并且然后添加在四氢呋喃(1mL)中的三丁基三氯化锡(0.288mL,1.059mmol)。反应混合物经1h温热至0℃。添加饱和氯化铵溶液并且反应混合物在水和乙酸乙酯之间分配。水相以另外的乙酸乙酯萃取，合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩得到标题化合物和四丁基锡(0.911g)的混合物。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.38(1H,s),5.60(2H,s),3.73-3.68(2H,m),1.62(9H,s),1.61-1.53(6H,m),1.41-1.30(12H,m),1.14-1.10(2H,m),0.97-0.89(9H,m),0.00(9H,s).
步骤3:[2-(2-氨基噻唑-5-基)嘧啶-4-基]-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5- c]吡啶-6-基)胺
标题化合物从N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)和(5-三丁基甲锡烷基噻唑-2-基)-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)氨基甲酸叔丁基酯通过与实施例312中描述的类似方法制备。LCMS(ESI):RT 2.02min；[M+H]+367.1,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.00(1H,s),8.54(1H,s),8.41(1H,br s),8.22(1H,d,J＝5.7Hz),7.82(1H,s),7.48(2H,br s),7.04(1H,br s),4.76(1H,七重峰,J＝6.9Hz),2.58(3H,s),1.65(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例615:{6-[2-(2-氨基噻唑-5-基)嘧啶-4-基氨基]-1-异丙基-1H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-2-基}甲醇
标题化合物从(2-氯嘧啶-4-基)-[1-异丙基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(实施例A49)和(5-三丁基甲锡烷基噻唑-2-基)-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)氨基甲酸叔丁基酯通过与实施例312中描述的类似方法制备。LCMS(ESI):RT 1.94min[M+H]+383.0,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.10(1H,s),8.64(1H,s),8.47(1H,br s),8.24(1H,d,J＝5.9Hz),7.85(1H,s),7.54(2H,br s),7.04(1H,br s),5.71(1H,s),4.99(1H,七重峰,J＝6.9Hz),4.74(2H,s),1.67(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例616:[2-(±)-(反式-3-氟-4-甲磺酰基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-(1-异丙 基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(对映异构体的混合物)
步骤1:(±)-顺式-3-氟-4-(甲苯-4-磺酰基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯
于0℃经5min将p-甲苯磺酰氯(0.442g,2.32mmol)添加至顺式-3-氟-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.484g,2.2mmol)在吡啶(1mL)中的溶液。混合物于室温搅拌5h然后以乙酸乙酯稀释。混合物以并冷却的1M HCl洗涤。水相以另外的乙酸乙酯萃取，并且合并的有机萃取物以水洗涤，然后饱和碳酸氢钠，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度10-60％乙酸乙酯/环己烷)得到标题化合物，为白色固体(0.573g,70％)。1H NMR(CDCl3):δ7.81(2H,d,J＝8.3Hz),7.35(2H,d,J＝8.3Hz),4.75-4.52(2H,m),3.94-3.68(2H,m),3.39-3.07(2H,m),2.45(3H,s),2.12-2.04(1H,m),1.74-1.68(1H,m),1.44(9H,s).
步骤2:(±)-反式-3-氟-4-甲基硫烷基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(对映异构体的混合 物)
于0℃经3min将硫甲醇钠(0.189g,2.69mmol)添加至顺式-3-氟-4-(甲苯-4-磺酰基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.502g,1.34mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1.5mL)中的溶液。混合物于室温搅拌16h然后以环己烷稀释。混合物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:2-20％乙酸乙酯/环己烷)得到标题化合物，为无色油状物(0.288g,86％)。1H NMR(CDCl3):δ4.52-4.35(1H,m),4.06-3.93(1H,m),3.70-3.64(1H,m),3.32-3.14(2H,m),2.86-2.79(1H,m),2.21(3H,s),2.14-2.06(1H,m),1.61-1.52(1H,m),1.46(9H,s).
步骤3:(±)-反式-3-氟-4-甲磺酰基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(对映异构体的混合 物)
于0℃将在二氯甲烷(2mL)中的3-氯过苯甲酸(77％,0.648g,2.89mmol)添加至(±)-反式-3-氟-4-甲基硫烷基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.288g,1.15mmol)在二氯甲烷(8mL)中的溶液。混合物于室温搅拌2h然后以二氯甲烷稀释。混合物相继以偏亚硫酸氢钠溶液、然后以碳酸钠溶液洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:20-60％乙酸乙酯/环己烷)得到标题化合物，为无色固体(0.322g,90％)。1H NMR(CDCl3):δ4.92-4.73(1H,m),4.53(1H,br s),4.25(1H,br s),3.21-3.08(1H,m),3.03(3H,d,J＝1.8Hz),2.82-2.70(2H,m),2.33-2.26(1H,m),1.82-1.71(1H,m),1.47(9H,s).
步骤4:(±)-反式-3-氟-4-甲磺酰基哌啶(对映异构体的混合物)
于0℃向(±)-反式-3-氟-4-甲磺酰基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.322g,1.14mmol)在二氯甲烷(2mL)中的溶液添加三氟乙酸(1mL)。混合物温热至室温并搅拌2h。添加甲苯并且反应混合物经真空浓缩(2x)。剩余物溶解于甲醇并装载于SCX筒上。该筒以甲醇洗涤，然后以1M氨/甲醇洗脱得到标题化合物，为无色固体(0.197g,95％)。1H NMR(CDCl3):δ4.81(1H,dtd,J＝48.6,10.0,5.3Hz),3.51-3.46(1H,m),3.23-3.17(1H,m),3.16-3.07(1H,m),3.02(3H,d,J＝1.8Hz),2.65(1H,ddd,J＝15.6,10.2,5.4Hz),2.58(1H,td,J＝12.6,2.7Hz),2.35-2.28(1H,m),1.78-1.66(1H,m),1.52(1H,br s).
步骤5:[2-(±)-(反式-3-氟-4-甲磺酰基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-(1-异丙基-2- 甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(对映异构体的混合物)
标题化合物从N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)和(±)-反式-3-氟-4-甲磺酰基哌啶通过与在实施例46中描述的类似方法制备。LCMS(ESI):RT 2.12min；[M+H]+448.2,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.81(1H,s),8.52(1H,s),8.25(1H,br s),8.01(1H,d,J＝5.7Hz),6.57(1H,br d,J＝5.4Hz),5.00-4.70(4H,m),3.90-3.81(1H,m),3.23-3.16(1H,m),3.10-3.03(4H,m),2.56(3H,s),2.23-2.16(1H,m),1.67-1.58(1H,m),1.57and 1.56(6H,2d,J＝6.9Hz).
实施例617:[2-(±)-(顺式-3-氟-4-甲基硫烷基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-(1-异丙 基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(对映异构体的混合物)
步骤1:(±)-顺式-3-氟-4-甲基硫烷基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(对映异构体的混合 物)
于0℃经3min将硫甲醇钠(0.146g,2.08mmol)添加至反式-3-氟-4-三氟甲磺酰基氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(WO2011/084402)(0.366g,1.04mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1.5mL)中的溶液。混合物于室温搅拌16h，然后以环己烷稀释。混合物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:2-25％乙酸乙酯/环己烷)得到标题化合物，为无色油状物(0.249g,96％)。1H NMR(CDCl3):δ4.73(1H,br d,J＝47Hz),4.27(1H,br s),4.10-3.96(1H,m),3.14-3.02(1H,m),2.92(1H,br s),2.83-2.72(1H,m),2.17(3H,s),2.00-1.90(1H,m),1.83-1.77(1H,m),1.46(9H,s).
步骤2:(±)-顺式-3-氟-4-甲基硫烷基哌啶(对映异构体的混合物)
标题化合物(121mg,88％)从(±)-顺式-3-氟-4-甲基硫烷基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(231mg,0.928mmol)通过与在实施例616,步骤4中描述的类似方法制备。1H NMR(CDCl3):δ4.67(1H,br d,J＝48Hz),3.36-3.28(1H,m),3.15-3.10(1H,m),2.84-2.63(3H,m),2.17(3H,s),1.90-1.78(3H,m).
步骤3:[2-(±)-(顺式-3-氟-4-甲基硫烷基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-(1-异丙基- 2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(对映异构体的混合物)
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(84.5mg,0.279mmol)、(±)-顺式-3-氟-4-甲基硫烷基哌啶(50mg,0.335mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.0726mL,0.419mmol)在异丙醇(2mL)中的混合物于150℃在微波辐射下加热2h。冷却的反应混合物以甲醇稀释并装载至SCX筒上。该筒以甲醇洗涤并且然后以1M氨/甲醇洗脱。在真空浓缩后，所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:2-7％2M甲醇性氨/二氯甲烷)得到标题化合物，为白色固体(107mg,93％)。LCMS(ESI):RT2.50min；[M+H]+416.1,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.68(1H,s),8.46(1H,s),8.27(1H,br s),7.91(1H,d,J＝5.7Hz),6.41(1H,br d,J＝5.6Hz),4.96-4.79(2H,m),4.73-4.62(2H,m),3.25-2.98(3H,m),2.52(3H,s),2.10(3H,s),1.87-1.81(1H,m),1.77-1.67(1H,m),1.53(6H,d,J＝6.9Hz).
实施例618:[2-(±)-(顺式-3-氟-4-甲基亚磺酰基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-(1-异 丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(非对映异构体的混合物)
于0℃经5min在二氯甲烷(1mL)中的3-氯过苯甲酸(77％,53.7mg,0.24mmol)添加至[2-(顺式-3-氟-4-甲基硫烷基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-(1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)胺(99.6mg,0.24mmol)在二氯甲烷(5mL)中的溶液。混合物于0℃搅拌20min然后通过在氧化硅上的色谱法纯化(溶剂梯度:2-12％2M甲醇性氨/二氯甲烷)得到标题化合物，为白色固体(70.1mg,68％)。LCMS(ESI):RT 1.88and 1.93min；[M+H]+432.1,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.76(1H,s),8.52(1H,s),8.33(1H,br d,J＝5.8Hz),7.98(1H,d,J＝5.6Hz),6.50(1H,br s),5.28-5.07(2H,m),4.99-4.92(1H,m),4.79-4.68(1H,m),3.29-2.96(3H,m),2.66and 2.65(3H,2s),2.57(3H,s),2.00-1.65(2H,m),1.58(6H,br d,J＝6.8Hz).
实施例619:(3RS,4SR)-3-氟-1-[4-(2-羟甲基-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡 啶-6-基氨基)嘧啶-2-基]-4-甲基哌啶-4-醇(对映异构体的混合物)
步骤1:[6-(2-氯嘧啶-4-基氨基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]甲醇
于0℃氢氯酸(1.25M在甲醇中)(8mL)添加至(2-氯嘧啶-4-基)-[1-异丙基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(实施例A49)(0.527g,1.308mmol)在甲醇(2mL)中的悬浮液。混合物于室温搅拌4.5h并且然后真空浓缩。剩余物溶解于甲醇和水(40mL,4:1)的混合物并装载至SCX筒上。该筒以甲醇和水(4:1)的混合物洗涤，然后以甲醇洗涤并且然后以1M氨在甲醇中/二氯甲烷(3:1)洗脱。真空浓缩得到标题化合物，为白色固体(0.398g,96％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝319和321.
步骤2:(3RS,4SR)-3-氟-1-[4-(2-羟甲基-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6- 基氨基)嘧啶-2-基]-4-甲基哌啶-4-醇(对映异构体的混合物)
[6-(2-氯嘧啶-4-基氨基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基]甲醇(63.8mg,0.20mmol)、(3RS,4SR)-3-氟-4-甲基哌啶-4-醇(实施例A96)(40.3mg,0.30mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.0595mL,0.34mmol)在异丙醇(3mL)中的混合物于150℃在微波辐射下加热2h。冷却的反应混合物以甲醇稀释并装载至SCX筒上。该筒以甲醇洗涤并且然后以1M氨/甲醇洗脱。浓缩后，所得残余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:2-14％2M甲醇性氨/二氯甲烷)得到标题化合物，为对映异构体的混合物，为白色固体(64.5mg,78％)。LCMS(ESI):RT 1.92min；[M+H]+416.1,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.79(1H,s),8.60(1H,s),8.41(1H,br s),7.97(1H,d,J＝5.7Hz),6.46(1H,br d,J＝5.5Hz),5.68(1H,t,J＝5.8Hz),4.96(1H,七重峰,J＝6.9Hz),4.82(1H,s),4.71(2H,d,J＝5.7Hz),4.43-4.26(2H,m),4.16-4.10(1H,m),3.66-3.59(1H,m),3.53-3.46(1H,m),1.75-1.67(1H,m),1.59and1.58(6H,2d,J＝6.9Hz),1.58-1.50(1H,m),1.25(3H,s).
实施例620:(3R*,4S*)-3-氟-1-{4-[2-((R)-1-羟基乙基)-1-((S)-2,2,2-三氟- 1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}-4-甲基哌啶-4-醇(绝对立体 化学未知)
步骤1:(3R*,4S*)-3-氟-4-甲基-1-{4-[2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]- 1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}哌啶-4- 醇(绝对立体化学未知)
6-氯-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例A83)(391mg,1.035mmol)、(-)-(3R*,4S*)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟-4-甲基哌啶-4-醇(实施例A100)(233mg,1.035mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(99mg,0.207mmol)、三(二苄叉基丙酮)二钯(0)(47.4mg,0.052mmol)、碳酸铯(673mg,2.07mmol)和二噁烷(10mL)的混合物在密封小瓶中110℃加热4h。冷却的反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。水相以另外的乙酸乙酯萃取并且合并的有机相以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:2-8％2M甲醇性氨/二氯甲烷)得到标题化合物(定量)，为单个的未知的立体异构体，相对立体化学已知并且任意指定绝对立体化学。LCMS(ESI):[M+H]+568.
步骤2:(3R*,4S*)-3-氟-1-{4-[2-((R)-1-羟基乙基)-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲 基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}-4-甲基哌啶-4-醇(绝对立体化学 未知)
于0℃向(3R*,4S*)-3-氟-4-甲基-1-{4-[2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}哌啶-4-醇(1.035mmol)在二氯甲烷(15mL)中的溶液添加三氟乙酸(1.5mL)。混合物温热至室温并搅拌1h。添加甲苯并且反应混合物经真空浓缩(2x)。向剩余物添加3％乙腈/水(50mL)和4滴的三氟乙酸。所得溶液装载至C18筒上并以3-21％乙腈(在0.5％三氟乙酸/水)洗脱。含有各级分的产物经部分真空浓缩，然后以甲醇稀释并装载于SCX筒上。该筒以甲醇洗涤，并且然后以1M氨/甲醇洗脱得到标题化合物，为白色固体(0.249g,50％,2个步骤)，为单个的未知的立体异构体，相对立体化学已知并且任意指定绝对立体化学。LCMS(ESI):RT 2.39min；[M+H]+484.2,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.85(1H,s),8.69(1H,s),8.36(1H,br s),7.99(1H,d,J＝5.7Hz),6.52(1H,br d,J＝5.6Hz),5.96(1H,d,J＝7.1Hz),5.89(1H,七重峰,J＝8.0Hz),5.02(1H,quintet,J＝6.7Hz),4.82(1H,s),4.43-4.24(2H,m),4.15-4.09(1H,m),3.61-3.53(1H,m),3.49-3.42(1H,m),1.85(3H,d,J＝7.2Hz),1.72-1.64(1H,m),1.63(3H,d,J＝6.5Hz),1.55-1.48(1H,m),1.24(3H,s).
实施例621:(3R*,4S*)-3-氟-1-{4-[2-((R)-1-羟基乙基)-1-((S)-2,2,2-三氟- 1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基]嘧啶-2-基}-4-甲基哌啶-4-醇(绝对立体 化学未知)
标题化合物的另一非对映异构体通过6-氯-2-[(R)-1-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1-((S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶(实施例A83)和(+)-(3R*,4S*)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟-4-甲基哌啶-4-醇(实施例A101)的反应通过与在实施例620中描述的类似方法制备。LCMS(ESI):RT 2.41min；[M+H]+484.2,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.84(1H,s),8.69(1H,s),8.32(1H,br s),7.99(1H,d,J＝5.7Hz),6.52(1H,brd,J＝5.6Hz),5.96(1H,d,J＝6.9Hz),5.89(1H,m),5.02(1H,五重峰,J＝6.6Hz),4.81(1H,s),4.38-4.23(2H,m),4.12-4.06(1H,m),3.65-3.58(1H,m),3.51-3.45(1H,m),1.85(3H,d,J＝7.2Hz),1.72-1.64(1H,m),1.63(3H,d,J＝6.4Hz),1.56-1.49(1H,m),1.24(3H,s).
实施例622:(±)-{6-[2-(顺式-3-氟-4-甲基硫烷基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]- 1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基}甲醇(对映异构体的混合物)
步骤1:(±)-[2-(顺式-3-氟-4-甲基硫烷基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-[1-异丙基- 2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(对映异构体的混合物)
(2-氯嘧啶-4-基)-[1-异丙基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(实施例A49)(157mg,0.391mmol)、顺式-3-氟-4-甲基硫烷基哌啶(实施例617,步骤2)(70mg,0.469mmol)和N,N-二异丙基乙基胺(0.101mL,0.586mmol)在异丙醇(2mL)中的混合物于150℃在微波辐射下加热2h。冷却的反应混合物在二氯甲烷和稀碳酸氢钠之间分配。水相以另外的二氯甲烷萃取并且合并的有机相以水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。剩余物通过色谱法在氧化硅上纯化(溶剂梯度:2-7％2M甲醇性氨/二氯甲烷)得到标题化合物，为无色胶状物(167mg,83％)。LCMS(ESI):[M+H]+516.
步骤2:(±)-{6-[2-(顺式-3-氟-4-甲基硫烷基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]-1-异 丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基}甲醇(对映异构体的混合物)
于0℃向(±)-[2-(顺式-3-氟-4-甲基硫烷基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-[1-异丙基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(50.6mg,0.098mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液添加三氟乙酸(1mL)。混合物温热至室温并搅拌4h。添加甲苯并且反应混合物经真空浓缩(2x)。剩余物溶解于甲醇并装载于SCX筒上。该筒以甲醇洗涤，并且然后以1M氨/甲醇洗涤。通过在氧化硅上进行色谱进一步纯化(溶剂梯度:2-10％2M甲醇性氨/二氯甲烷)得到标题化合物，为无色固体(30.8mg,73％)，为对映异构体的混合物。LCMS(ESI):RT 2.37min；[M+H]+432.1,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.78(1H,s),8.60(1H,s),8.38(1H,br s),7.97(1H,d,J＝5.7Hz),6.46(1H,br d,J＝5.5Hz),5.68(1H,t,J＝5.8Hz),5.02-4.84(3H,m),4.76-4.71(3H,m),3.24-3.03(3H,m),2.15(3H,s),1.92-1.72(2H,m),1.60(6H,2d,J＝6.8Hz).
实施例623:{6-[2-(顺式-3-氟-4-甲基亚磺酰基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]-1- 异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基}甲醇(非对映异构体的混合物)
步骤1:[2-(顺式-3-氟-4-甲基亚磺酰基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-[1-异丙基-2- (四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺
于0℃将在二氯甲烷(2mL)中的3-氯过苯甲酸(77％,45.4mg,0.202mmol)添加至[2-(顺式-3-氟-4-甲基硫烷基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-[1-异丙基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(实施例622,步骤1)(116mg,0.202mmol)在二氯甲烷(8mL)中的溶液。混合物于0℃搅拌15min，然后通过在氧化硅上的色谱法纯化(溶剂梯度:2-10％2M甲醇性氨/二氯甲烷)得到标题化合物，为无色胶状物(91.7mg,85％)。LCMS(ESI):[M+H]+532.
步骤2:{6-[2-(顺式-3-氟-4-甲基亚磺酰基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基]-1-异丙 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基}甲醇(非对映异构体的混合物)
标题化合物(35.5mg,46％)(非对映异构体的混合物)从[2-(顺式-3-氟-4-甲基亚磺酰基哌啶-1-基)嘧啶-4-基]-[1-异丙基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(91.7mg,0.172mmol)通过与在实施例622中描述的类似方法制备。LCMS(ESI):RT 1.81和1.86min[M+H]+448.2,方法F.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.81(1H,s),8.61(1H,s),8.36(1H,br d,J＝5.4Hz),7.99(1H,d,J＝5.7Hz),6.51-6.49(1H,m),5.69(1H,t,J＝5.7Hz),5.28-5.22(1H,m),5.15-5.08(1H,m),5.00-4.93(2H,m),4.72(2H,d,J＝5.5Hz),3.29-2.97(3H,m),2.67and 2.66(3H,2s),2.01-1.68(2H,m),1.62-1.59(6H,m).
实施例624:4-(4-((2-(羟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基) 嘧啶-2-基)环己-3-烯醇
步骤1:N-(2-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-(((四 氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例A49)(0.5099g,1.266mmol)、2-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-烯-8-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(501.0mg,1.883mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(110.1mg,0.09528mmol)、碳酸铯(685.9mg,2.08mmol)、1,4-二噁烷(4.0mL,47mmol)和水(0.2mL,10mmol)的混合物在氮气下于100℃搅拌2h并且然后于110℃过夜。反应混合物以乙酸乙酯稀释，以水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发。粗产物经由快速色谱法在硅胶上纯化(12g氧化硅,溶剂梯度:0-100％乙酸乙酯/二氯甲烷)得到442.8mg(69％)的标题化合物。LCMS(ESI):[M+H]+＝507.4；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.10(s,1H),8.69(s,1H),8.66(s,1H),8.32(d,J＝5.8Hz,1H),7.12(t,J＝3.0Hz,1H),7.04(d,J＝5.8Hz,1H),4.99–4.86(m,2H),4.82–4.69(m,2H),3.99–3.88(m,4H),3.84–3.72(m,1H),3.61–3.48(m,1H),2.86–2.71(m,2H),2.49–2.45(m,2H),1.84(t,J＝6.5Hz,2H),1.74–1.65(m,2H),1.63(s,6H),1.51(d,J＝10.5Hz,4H).
步骤2:4-(4-((2-(羟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶- 2-基)环己-3-烯酮
N-(2-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(442.8mg,0.8741mmol)、乙醇(6.0mL,100mmol)和氯化氢(5M，在水中)(1.5mL,7.5mmol)的混合物于60℃加热4小时，并且然后冷却至室温。反应混合物经浓缩以除去乙醇，以二氯甲烷稀释，以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发得到280.9mg(85％)的标题化合物,，其不经纯化直接进行下去。LCMS(ESI):[M+H]+＝379.2.
步骤3:4-(4-((2-(羟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶- 2-基)环己-3-烯醇
向4-(4-((2-(羟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-基)环己-3-烯酮(60.4mg,0.160mmol)在甲醇(3.0mL,70mmol)中的溶液添加硼氢化钠(13.9mg,0.364mmol)。反应混合物于室温搅拌1h。反应混合物以二氯甲烷稀释，以饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经硫酸镁干燥，过滤，并真空蒸发.粗产物经由反相HPLC纯化并冻干得到20.3mg(33％)的标题化合物。LCMS(ESI):RT(min)＝3.037,[M+H]+＝381.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.01(s,1H),8.68(s,1H),8.62(s,1H),8.30(d,J＝5.8Hz,1H),7.16(s,1H),7.01(d,J＝5.9Hz,1H),5.68(s,1H),4.98(p,J＝6.8Hz,1H),4.73(s,2H),4.69(d,J＝3.8Hz,1H),3.86(s,1H),2.86–2.75(m,1H),2.52(s,2H),2.21–2.10(m,1H),1.96–1.86(m,1H),1.70–1.54(m,7H).
实施例625:N-(2-(3-氯-1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基- 2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
步骤1:N-(2-(1-(环丙基甲基)-3-硝基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2- 甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
1-(环丙基甲基)-3-硝基-1H-吡唑-4-基硼酸(实施例251,步骤3)(86mg,0.40mmol)、N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(实施例46,步骤7)(61.8mg,0.20mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(48mg,0.040mmol)和碳酸钠(130mg,1.23mmol)在二噁烷(8mL)和水(0.1mL)中的混合物于90℃加热5h。将反应冷却至室温，过滤，并真空浓缩。剩余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(80mg,45％)，为棕色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝434.
步骤2:N-(2-(3-氨基-1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2- 甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
向反应小瓶中添加N-(2-(1-(环丙基甲基)-3-硝基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(120mg,0.28mmol)、铁粉(62mg,1.11mmol)、氯化铵(86mg,1.61mmol)、水(0.1mL)和乙醇(7mL)。并将反应混合物于80℃搅拌8h。将反应冷却至室温，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度：0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(80mg,72％)，为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝404.
步骤3:N-(2-(3-氯-1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
N-(2-(3-氨基-1-(环丙基甲基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(40mg,0.10mmol)在乙腈(1mL)中的溶液于0℃滴加至亚硝酸叔丁基酯(12.4mg,0.12mmol)和氯化铜(I)(11.8mg,0.12mmol)在乙腈(3mL)中的预冷却溶液。并将反应混合物于室温搅拌1h并于60℃在油浴中搅拌2h。将反应冷却至室温，过滤，并真空浓缩。所得残余物经反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(2.2mg,5％)，为灰白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝423,RT(min)＝1.470,方法＝N；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.95(s,1H),8.55(s,1H),8.35(m,2H),8.18(s,1H),7.34-7.32(d,J＝5.4Hz,1H),4.78-4.69(m,1H),4.01-3.98(d,J＝7.2Hz,2H),2.58(s,3H),1.57-1.55(d,J＝6.9Hz,6H),1.31-1.28(m,1H),0.59-0.56(m,2H),0.42-0.39(m,2H)。
实施例626和实施例627:(±)-(顺式)-1-(4-(2-(羟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并 [4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基)-3-(三氟甲基)哌啶-4-醇和(±)-(反式)-1-(4-(2- (羟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基)-3-(三氟甲基)哌啶- 4-醇
步骤1:3-(三氟甲基)吡啶-4-醇
4-溴-3-(三氟甲基)吡啶氢溴化物(1.0g,3.26mmol)和醋酸钾(1.6g,16.3mmol)在乙酸(11mL)中的混合物在微波辐射下于160℃加热3h。反应冷却至室温后，溶液以水稀释并且以碳酸钠水溶液将pH值调节至8。所得溶液以乙酸乙酯萃取(2x)且合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩得到标题化合物(370mg,70％)，为灰白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝164.
步骤2:3-(三氟甲基)哌啶-4-醇 盐酸盐
向高压槽式反应器添加3-(三氟甲基)吡啶-4-醇(100mg,0.61mmol)、氧化铂(IV)(15mg,0.07mmol)、氢氯酸(0.1mL)和甲醇(6mL)。反应混合物在氢气下(30atm)于50℃搅拌5h。将反应冷却至室温，过滤并真空浓缩得到标题化合物(120mg,95％)，为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝170.
步骤3:1-(4-(1-异丙基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c] 吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基)-3-(三氟甲基)哌啶-4-醇
(2-氯嘧啶-4-基)-[1-异丙基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基]胺(实施例A49)(238mg,0.59mmol)、3-(三氟甲基)哌啶-4-醇盐酸盐(100mg,0.49mmol)和碳酸钾(205mg,1.48mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中的混合物在微波辐射下于120℃加热90min。将反应冷却至室温，过滤，并真空浓缩得到标题化合物(300mg粗,94％)，为棕色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝536.
步骤4:(±)-(顺式)-1-(4-(2-(羟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基 氨基)嘧啶-2-基)-3-(三氟甲基)哌啶-4-醇和(±)-(反式)-1-(4-(2-(羟甲基)-1-异丙基- 1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基)-3-(三氟甲基)哌啶-4-醇
1-(4-(1-异丙基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基)-3-(三氟甲基)哌啶-4-醇(320mg,0.60mmol)溶解于1,4-二噁烷中的HCl(4M,10mL)。并将反应混合物于室温搅拌30min。以碳酸钠水溶液将pH调节至10并且所得溶液以乙酸乙酯萃取(2x)并合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。剩余物经反相HPLC纯化并冻干得到标题化合物(55.7mg,21％)和(2.7mg,1％)，各为对映异构体的混合物，立体化学未知，为白色固体。
实施例626(异构体1):LCMS(ESI)[M+H]+＝452,RT(min)＝1.470,方法＝M；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.79(s,1H),8.61(s,1H),8.34(s,1H),8.01(d,J＝5.6Hz,1H),6.51(d,J＝5.6Hz,1H),5.71-5.69(m,1H),5.18-5.17(d,J＝4.0Hz,1H),4.99-4.91(m,1H),4.72-4.71(d,J＝6.0Hz,3H),4.58-4.54(d,J＝16Hz,1H),4.25(s,1H),3.34-3.29(m,2H),2.53-2.51(m,1H),1.73-1.71(m,2H),1.59-1.56(m,6H)。
实施例627(异构体2):LCMS(ESI)[M+H]+＝452,RT(min)＝1.70,方法＝M；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.80(s,1H),8.61(s,1H),8.30(s,1H),8.02-8.00(d,J＝5.6Hz,1H),6.56(d,J＝5.6Hz,1H),5.69(m,1H),5.17-5.16(d,J＝6.0Hz,1H),4.99-4.91(m,1H),4.76-4.71(m,3H),4.56-4.52(d,J＝16Hz,1H),3.88(s,1H),3.22-3.09(m,2H),2.33-2.25(m,1H),1.96-1.93(m,1H),1.59-1.57(m,6H),1.52-1.44(m,1H).
实施例628和实施例629:(1-异丙基-6-(2-((±)-(顺式)-4-甲氧基-3-(三氟甲 基)哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇和(1-异丙基-6-(2- ((±)-(反式)-4-甲氧基-3-(三氟甲基)哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡 啶-2-基)甲醇
步骤1:4-羟基-3-(三氟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯
3-(三氟甲基)哌啶-4-醇盐酸盐(实施例626,步骤2)(350mg,1.70mmol)、二碳酸二叔丁基酯(483mg,2.21mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(881mg,6.82mmol)在乙腈(5mL)中的混合物于室温搅拌4h。将溶剂真空除去并且所得残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-20％EtOAc/石油)得到标题化合物(310mg,68％)，为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝270.
步骤2:-4-甲氧基-3-(三氟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯
4-羟基-3-(三氟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(300mg,1.11mmol)和氢化钠(112mg,60％，在油状物中,4.67mmol)在四氢呋喃(10mL)中的混合物于0℃搅拌1h。向反应混合物添加碘甲烷(316mg,2.23mmol)并且混合物于室温搅拌3h。反应以水(5mL)淬灭，以EtOAc(2x)萃取，以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩得到标题化合物(300mg,95％)，为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝284.
步骤3:4-甲氧基-3-(三氟甲基)哌啶 盐酸盐
向反应小瓶中添加-4-甲氧基-3-(三氟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(300mg,1.06mmol)和在1,4-二噁烷中的氯化氢(4M,10mL)。并将反应混合物搅拌2h于室温。将溶剂真空除去得到标题化合物(190mg,82％)，为灰白色固体，其不经纯化直接使用。
步骤4:1-异丙基-N-(2-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-2-((四 氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
标题化合物(150mg,60％)从4-甲氧基-3-(三氟甲基)哌啶盐酸盐(100mg,0.46mmol)根据类似于实施例626,步骤3的方法生成。LCMS(ESI):[M+H]+＝550.
步骤5:(1-异丙基-6-(2-((±)-(顺式)-4-甲氧基-3-(三氟甲基)哌啶-1-基)嘧 啶-4-基氨基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇和(1-异丙基-6-(2-((±)-(反式)-4-甲 氧基-3-(三氟甲基)哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇
各标题化合物(70.5mg,24％和6.1mg,2％))从1-异丙基-N-(2-(4-甲氧基-3-(三氟甲基)哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(340mg,0.62mmol)根据类似于实施例626,步骤4的方法生成。
实施例628(异构体1):LCMS(ESI):[M+H]+＝466,RT(min)＝1.743,方法＝N；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.78(s,1H),8.61(s,1H),8.29(s,1H),8.02-8.00(d,J＝5.6Hz,1H),6.56(d,J＝5.6Hz,1H),5.71-5.68(m,1H),4.97-4.92(m,1H),4.72-4.66(m,3H),4.53-4.49(m,1H),3.85(s,1H),3.35(s,3H),3.32-3.16(m,2H),2.87-2.68(m,1H),2.04-2.00(m,1H),1.63-1.57(m,7H).
实施例629(异构体2):_LCMS(ESI):[M+H]+＝466,RT(min)＝1.700,方法＝N；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.79(s,1H),8.61(s,1H),8.29(s,1H),8.02-8.00(d,J＝5.6Hz,1H),6.56(s,1H),5.71-5.69(m,1H),4.99-4.91(m,1H),4.72-4.71(d,J＝6.0Hz,2H),4.65-4.60(m,1H),4.45-4.41(m,1H),3.69-3.62(m,1H),3.33(s,3H),3.29(m,2H),2.51-2.50(m,1H),2.17-2.11(m,1H),1.60-1.57(m,6H),1.52-1.43(m,1H)。
实施例630:(±)-(反式)-1-(4-(2-(羟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶- 6-基氨基)嘧啶-2-基)-3-甲基哌啶-4-醇(对映异构体的混合物)
步骤1:(±)-(反式)-1-苄基-3-甲基哌啶-4-醇
1-苄基-3-甲基哌啶-4-酮(10.0g,49.2mmol)、磷酸(4.83g,49.3mmol)和四氢硼酸钠(3.73g,98.6mmol)在甲醇(40mL)和水(90mL)中的混合物于室温搅拌8h。溶液以氢氧化钠水溶液(4M,20mL)稀释，以乙酸乙酯萃取(2x)，以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(8.5g,84％)，为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝206.
步骤2:(±)-(反式)-3-甲基哌啶-4-醇
向反应小瓶中添加(±)-(反式)-1-苄基-3-甲基哌啶-4-醇(800mg,3.90mmol)、甲醇(15mL)和钯/碳(100mg,20％)。反应混合物在氢气气氛(1atm)于室温搅拌8h。反应经过滤并经真空浓缩得到标题化合物(400mg,89％)，为无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝116.
步骤3:(±)-(反式)-1-(4-(1-异丙基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H- 咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基)-3-甲基哌啶-4-醇
标题化合物(520mg,48％)从(±)-(反式)-3-甲基哌啶-4-醇(260mg,2.26mmol)根据类似于实施例626,步骤3的方法生成。LCMS(ESI):[M+H]+＝482.
步骤4:(±)-(反式)-1-(4-(2-(羟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基 氨基)嘧啶-2-基)-3-甲基哌啶-4-醇
标题化合物(115.8mg,47％)从(±)-(反式)-1-(4-(1-异丙基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基)-3-甲基哌啶-4-醇(300mg,0.62mmol)根据类似于实施例626,步骤3.的方法生成，为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝398.1,RT(min)＝2.02,方法＝M；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.72(s,1H),8.60(s,1H),8.38(s,1H),7.97-7.95(d,J＝5.6Hz,1H),6.44-6.43(d,J＝5.2Hz,1H),5.72-5.69(m,1H),4.97-4.94(m,1H),4.72-4.70(m,3H),4.67-4.64(m,1H),4.57-4.56(m,1H),3.23-3.19(m,1H),3.06-2.99(m,1H),2.66-2.60(m,1H),1.90-1.86(m,1H),1.61-1.58(m,6H),1.40-1.35(m,2H),0.97-0.95(d,J＝5.4Hz,3H).
实施例631:(±)-(顺式)-1-(4-(2-(羟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶- 6-基氨基)嘧啶-2-基)-3-甲基哌啶-4-醇(对映异构体的混合物)
步骤1:(±)-(顺式)-1-苄基-3-甲基哌啶-4-醇
在0℃将三-仲丁基硼氢化锂在四氢呋喃(1M,29.6mL)中的溶液滴加至1-苄基-3-甲基哌啶-4-酮(5.0g,24.6mmol)在四氢呋喃(20mL)中的预冷却的溶液。并将反应混合物于0℃搅拌3h。所得溶液以水稀释并以乙酸乙酯萃取两次，以盐水洗涤，经硫酸钠干燥并真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(3.7g,73％)，为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝206.
步骤2:(±)-(顺式)-3-甲基哌啶-4-醇
方法和纯化方法类似于实施例630,步骤2使用(±)-(顺式)-1-苄基-3-甲基哌啶-4-醇(500mg,2.44mmol)得到标题化合物(200mg,71％)as colorless oil.LCMS(ESI):[M+H]+＝116
步骤3:(±)-(顺式)-1-(4-(1-异丙基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H- 咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基)-3-甲基哌啶-4-醇
方法和纯化方法类似于实施例626,步骤3使用(±)-(顺式)-3-甲基哌啶-4-醇(170mg,1.48mmol)得到标题化合物(300mg,42％)，为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝482.
步骤4:(±)-(顺式)-1-(4-(2-(羟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基 氨基)嘧啶-2-基)-3-甲基哌啶-4-醇(对映异构体的混合物)
方法和纯化方法类似于实施例626,步骤4使用(±)-(顺式)-1-(4-(1-异丙基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基)-3-甲基哌啶-4-醇(300mg,0.62mmol)得到标题化合物(61.4mg,25％)，为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝398.1,RT(min)＝1.25,方法＝R；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.71(s,1H),8.59(s,1H),8.42(s,1H),7.94(d,J＝5.6Hz,1H),6.38(d,J＝5.6Hz,1H),5.70-5.67(m,1H),4.98-4.94(m,1H),4.71(d,J＝6Hz,2H),4.63(d,J＝4Hz,1H),4.09-4.01(m,1H),3.99-3.92(m,1H),3.75(s,1H),3.68-3.61(m,1H),3.41-3.35(m,1H),1.65-1.58(m,3H),1.58-1.57(m,6H),0.87(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例632:(1-异丙基-6-(2-((±)-(顺式)-4-甲氧基-3-甲基哌啶-1-基)嘧啶- 4-基氨基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇(对映异构体的混合物)
步骤1:(±)-(顺式)-1-苄基-4-甲氧基-3-甲基哌啶
(±)-(顺式)-1-苄基-3-甲基哌啶-4-醇(实施例631,步骤1)(2.0g,9.74mmol)和氢化钠(500mg,60％，在油中,12.5mmol)在四氢呋喃(30mL)中的混合物于0℃搅拌30min。添加碘甲烷(2.2g,15.5mmol)并于室温持续搅拌16h。反应以水(5mL)淬灭，并且水层以乙酸乙酯萃取两次，以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物，为对映异构体的混合物(700mg,33％)，为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝220.
步骤2:(±)-(顺式)-4-甲氧基-3-甲基哌啶
方法和纯化方法类似于实施例630,步骤2使用(±)-(顺式)-1-苄基-4-甲氧基-3-甲基哌啶(500mg,2.28mmol)得到标题化合物，为对映异构体的混合物(200mg,68％)，为无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝130.
步骤3:1-异丙基-N-(2-((±)-(顺式)-4-甲氧基-3-甲基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)- 2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
方法和纯化方法类似于实施例626,步骤3使用(±)-(顺式)-4-甲氧基-3-甲基哌啶(150mg,1.16mmol)得到标题化合物(200mg,35％)，为浅黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝496.
步骤4:(1-异丙基-6-(2-((±)-(顺式)-4-甲氧基-3-甲基哌啶-1-基)嘧啶-4-基 氨基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇(对映异构体的混合物)
方法和纯化方法类似于实施例626,步骤4，使用1-异丙基-N-(2-((±)-(顺式)-4-甲氧基-3-甲基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(200mg,0.4mmol)得到标题化合物，为对映异构体的混合物(21.6mg,13％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝412,RT(min)＝1.17,方法＝Q；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.75(s,1H),8.59(s,1H),8.39(s,1H),7.94(d,J＝5.6Hz,1H),6.41(d,J＝5.6Hz,1H),5.70-5.67(m,1H),4.98-4.94(m,1H),4.7(d,J＝5.6Hz,2H),3.81-3.75(m,3H),3.65-3.60(m,1H),3.42-3.40(m,1H),3.32-3.30(m,3H),1.97-1.94(m,1H),1.82-1.77(m,1H),1.62-1.59(m,7H),0.87(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例633:(3RS,4RS)-4-环丙基-3-氟-1-(4-((2-(羟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑 并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-基)哌啶-4-醇(对映异构体的混合物)
步骤1:(3RS,4RS)-4-环丙基-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(对映异构体 的混合物)
于室温在氮气下将环丙基溴化镁在四氢呋喃(0.5M,9.2mL)中的溶液滴加至3-氟-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯(500mg,2.3mmol)在四氢呋喃(20mL)中的溶液。并将反应混合物于室温搅拌14h。溶液以饱和氯化铵淬灭，以乙酸乙酯萃取两次，以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩得到标题化合物(510mg,粗,85％)，为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝260.
步骤2:(3RS,4RS)-4-环丙基-3-氟哌啶-4-醇2,2,2-三氟乙酸酯(对映异构体的混 合物)
4-环丙基-3-氟-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(510mg,1.97mmol)和2,2,2-三氟乙酸(2mL,26.93mmol)在二氯甲烷(20mL)中的混合物于室温搅拌2h。将溶剂真空除去得到标题化合物(400mg,crude,74％)，为黑色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝160.
步骤3:(3RS,4RS)-4-环丙基-3-氟-1-(4-((1-异丙基-2-(((四氢-2H-吡喃-2-基) 氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-基)哌啶-4-醇(对映异构体的混 合物)
方法和纯化方法类似于实施例626,步骤3使用4-环丙基-3-氟哌啶-4-醇2,2,2-三氟乙酸盐(400mg粗)得到标题化合物(100mg)，为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝526.
步骤4:(3RS,4RS)-4-环丙基-3-氟-1-(4-((2-(羟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-基)哌啶-4-醇(对映异构体的混合物)
方法和纯化方法类似于实施例626,步骤4使用4-环丙基-3-氟-1-(4-(1-异丙基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基)哌啶-4-醇(100mg,0.19mmol)得到标题化合物(16mg,19％)，为白色固体，为对映异构体的混合物，相对立体化学已知。LCMS(ESI):[M+H]+＝442.1,RT(min)＝1.45,方法＝R；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.79(s,1H),8.60(s,1H),8.40(s,1H),7.98-7.97(d,J＝5.7Hz,1H),6.48-6.46(d,J＝5.7Hz,1H),5.70-5.67(m,1H),4.98-4.93(m,1H),4.72-4.70(d,J＝5.4Hz,2H),4.49-4.38(m,3H),4.25-4.10(m,1H),3.75-3.60(m,1H),3.55-3.40(m,1H),1.64-1.50(m,8H),1.05-1.03(m,1H),0.56-0.54(m,1H),0.33-0.10(m,3H)。
实施例634:(6-(2-((±)-(顺式)-3-氯-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇(对映异构体的混合物)
步骤1:4-(三甲基甲硅烷基氧基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁基酯
4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯(6.0g,30.1mmol)、三乙基胺(9.14g,90.3mmol)和三甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯(10.0g,45.2mmol)在甲苯(15mL)中的混合物于0℃搅拌30min并于25℃搅拌90min。所得溶液以水稀释并以乙酸乙酯萃取两次，以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩得到标题化合物(7.6g,93％)，为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝272.
步骤2:3-氯-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯
4-(三甲基甲硅烷基氧基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁基酯(500mg,1.84mmol)、1-氯吡咯烷-2,5-二酮(500mg,3.74mmol)和乙酸钠(270mg,3.29mmol)在丙酮(4mL)和水(1mL)中的混合物于0℃搅拌2h。溶液以二氯甲烷稀释(20mL)并以磺酸钠水溶液洗涤。有机层真空浓缩并且所得残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-20％乙酸乙酯/庚烷)得到标题化合物(150mg,35％)，为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝234.
步骤3:(±)-(顺式)-3-氯-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
方法和纯化方法类似于实施例631,步骤1使用3-氯-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯(2.5g,10.7mmol)得到标题化合物(2g,79％)，为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝236.
步骤4:(±)-(顺式)-3-氯-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
方法和纯化方法类似于实施例632,步骤1使用(±)-(顺式)-3-氯-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(850mg,3.61mmol)得到标题化合物(300mg,33％)，为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝250.
步骤5:(±)-(顺式)-3-氯-4-甲氧基哌啶2,2,2-三氟乙酸盐
方法和纯化方法类似于实施例633,步骤2使用(±)-(顺式)-3-氯-4-甲氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(300mg,1.2mmol)得到标题化合物(500mg,粗)，为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝150.
步骤6:N-(2-((±)-(顺式)-3-氯-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2- ((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
方法和纯化方法类似于实施例626,步骤3使用(±)-(顺式)-3-氯-4-甲氧基哌啶2,2,2-三氟乙酸盐(210mg,0.8mmol)得到标题化合物(150mg,36％)，为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝516.
步骤7:(6-(2-((±)-(顺式)-3-氯-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基)-1-异丙 基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇(对映异构体的混合物)
方法和纯化方法类似于实施例626,步骤4使用N-(2-((±)-(顺式)-3-氯-4-甲氧基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(50mg,0.097mmol)得到标题化合物(15mg,36％)，为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝432,RT(min)＝2.92,方法＝R；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.79(s,1H),8.60(s,1H),8.36(s,1H),7.98-7.96(d,J＝6.0Hz,1H),6.48-6.46(d,J＝6.0Hz,1H),5.70-5.67(m,1H),5.15-4.80(m,1H),4.73-4.70(d,J＝6.0Hz,2H),4.61-4.58(m,2H),4.39-4.35(m,1H),3.75-3.70(m,2H),3.34(s,4H),1.79-1.78(m,2H),1.61-1.59(d,J＝6.0Hz,6H).
实施例635:6-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基)-N-(四氢- 2H-吡喃-4-基)-1-(1,1,1-三氟丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
步骤1:1,1,2,2,3,3,4,4,4-九氟丁烷-1-磺酸1,1,1-三氟丙-2-基酯
将1,1,2,2,3,3,4,4,4-九氟丁烷-1-磺酰氟(72.7g,0.241mol)滴加至1,1,1-三氟丙-2-醇(20g,0.175mol)和三乙基胺(17.7g,0.175mol)在二氯甲烷(200mL)中的预冷却的-40℃溶液中。所得混合物于室温搅拌16小时。将溶剂真空除去并且所得残余物通过减压蒸馏纯化(2mm Hg,于35℃收集级分)得到标题化合物(42g,60％)，为无色液体。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ5.22-5.10(m,1H),1.69-1.67(m,3H).
步骤2:6-氯-3-碘代-1-(1,1,1-三氟丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
6-氯-3-碘代-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(实施例63,步骤1)(2.00g,7.18mmol)、碳酸铯(5.00g,15.3mmol)、1,1,2,2,3,3,4,4,4-九氟丁烷-1-磺酸1,1,1-三氟丙-2-基酯(6.00g,15.2mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(40mL)中的混合物于室温搅拌16h。溶液以水稀释并以乙酸乙酯萃取两次。合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-10％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物(1.7g,63％)，为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝375.
步骤3:6-氯-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1-(1,1,1-三氟丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2- c]吡啶-3-甲酰胺
6-氯-3-碘代-1-(1,1,1-三氟丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶(400mg,1.07mmol)、醋酸钯(24mg,0.11mmol)、(9,9-二甲基-9H-呫吨-4,5-二基)双(二苯基膦)(64mg,0.11mmol)、噁烷-4-胺(1.8g,17.8mmol)和三乙基胺(320mg,3.16mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物于60℃在一氧化碳气氛(1atm)下搅拌150min。冷却至室温后，溶液以乙酸乙酯稀释并以盐水洗涤，以无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-75％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物(103mg,26％)，为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝376.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.13(s,1H),8.40(s,1H),8.10(m,1H),8.01(s,1H),5.87-5.80(m,1H),4.06-3.98(m,1H),3.92-3.89(m,2H),3.43-3.38(m,2H),1.84-1.81(m,2H),1.76(d,J＝6.8Hz,3H),1.59-1.53(m,2H)。
步骤4:6-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基氨基)-N-(四氢-2H- 吡喃-4-基)-1-(1,1,1-三氟丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
6-氯-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1-(1,1,1-三氟丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(50mg,0.13mmol)、2-(1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基胺(实施例A62)(40mg,0.15mmol)、二环己基(2',4',6'-三异丙基-3,6-二甲氧基联苯-2-基)膦(15mg,0.03mmol)、第三代BrettPhos预催化剂(12mg,0.01mmol)和碳酸铯(80mg,0.25mmol)在1,4-二噁烷(7mL)中的混合物在微波辐射下于100℃加热40min。冷却至室温后，溶液经真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化(洗脱液：100％EtOAc)得到标题化合物(18mg,22％)，为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝605,RT(min)＝1.48,方法＝N；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.31(s,1H),9.12(s,1H),8.72(s,1H),8.48(s,2H),8.39(m,1H),8.34(s,1H),8.03(d,J＝7.6Hz,1H),7.10(d,J＝7.6Hz,1H),5.77-5.74(m,1H),4.05-4.01(m,1H),3.93-3.90(m,2H),3.44-3.32(m,2H),3.26-3.22(m,1H),1.85-1.80(m,5H),1.60-1.54(m,2H),1.38-1.34(m,2H),1.28-1.21(m,2H)。
实施例636:6-(2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基)-N-(四氢-2H-吡 喃-4-基)-1-(1,1,1-三氟丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
步骤1:1-(4-氨基嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇
2-氯嘧啶-4-胺(2.0g,15.4mmol)、4-甲基哌啶-4-醇(1.94g,16.8mmol)和碳酸钾(6.36g,46.0mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的混合物于100℃搅拌8h。冷却至室温后，溶液以水(100mL)稀释并以乙酸乙酯萃取十次。合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(1.9g,59％)，为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝209.
步骤2:6-(2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)嘧啶-4-基氨基)-N-(四氢-2H-吡喃-4- 基)-1-(1,1,1-三氟丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
6-氯-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1-(1,1,1-三氟丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(实施例635,步骤3)40mg,0.11mmol)、1-(4-氨基嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇(32mg,0.15mmol)、二环己基(2',4',6'-三异丙基-3,6-二甲氧基联苯-2-基)膦(12mg,0.02mmol)、第三代BrettPhos预催化剂(10mg,0.01mmol)和碳酸铯(68mg,0.21mmol)在1,4-二噁烷(6mL)中的混合物于120℃搅拌1.5h。冷却至室温后，溶液经真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度：0-10％甲醇/二氯甲烷)得到标题化合物(25.6mg,44％)，为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝548,RT(min)＝1.83,方法＝L；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.80(s,1H),9.04(s,1H),8.43(s,1H),8.28(s,1H),8.05(m,1H),7.94(d,J＝5.6Hz,1H),6.29(d,J＝5.6Hz,1H),5.46-5.43(m,1H),4.38(s,1H),4.17-4.16(m,2H),4.03-4.00(m,1H),3.92-3.89(m,2H),3.56-3.34(m,4H),1.84-1.77(m,5H),1.56-1.50(m,6H),1.15(s,3H)。
实施例637:1-(仲丁基)-6-((2-((3S,4R)-3-氟-4-羟基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨 基)-N-((3SR,4SR)-3-氟四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(4个非对 映异构体的混合物)
标题化合物以类似于实施例323的方法制备。LCMS(ESI):RT 3.23min,[M+H]+530.3,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.77(s,1H),9.03(s,1H),8.34(s,2H),8.02(d,J＝7.7Hz,1H),7.95(d,J＝5.7Hz,1H),6.36(d,J＝5.6Hz,1H),5.10(d,J＝5.1Hz,1H),4.71(m,2H),4.51(m,1H),4.44–4.15(m,3H),3.95(m,3H),3.69–3.46(m,3H),3.39(m,1H),1.93(m,3H),1.68(m,3H),1.49(m,3H),0.80(m,3H).
实施例638:1-(仲丁基)-6-((2-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨基)-N- (四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
向微波反应小瓶中添加6-溴-1-(仲丁基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(0.19g,0.50mmol)、1-(4-氨基嘧啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-醇(实施例636,步骤1)(0.10g,0.50mmol)、叔丁醇钠(0.15g,1.5mmol)、氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]共混物(摩尔比PdP/P＝1:1,50mg)和叔丁醇(4mL)。反应通过氮气鼓泡脱气20min，密封并于100℃搅拌60min。将反应冷却至室温，过滤并真空浓缩。粗产物通过超临界液相色谱纯化得到标题化合物，为对映异构体的混合物(158mg,62％)。LCMS(ESI):RT 3.35min,[M+H]+508.4,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.72(s,1H),9.01(s,1H),8.37(s,1H),8.15(s,1H),7.93(d,J＝5.6Hz,1H),7.85(d,J＝7.7Hz,1H),6.31(d,J＝5.6Hz,1H),4.43–4.29(m,2H),4.19(m,2H),4.00(s,1H),3.90(m,2H),3.42(m,5H),1.95–1.77(m,3H),1.51(m,7H),1.17(s,3H),0.80(t,J＝7.3Hz,3H).
实施例639和实施例640：6-((2-((3S,4R)-3-氟-4-羟基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨 基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1-(1,1,1-三氟丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺 的两个立体异构体
向微波反应小瓶中添加6-氯-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1-(1,1,1-三氟丙-2-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(实施例635,步骤3)(0.10g,0.27mmol)、(+)-(3S,4R)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟哌啶-4-醇(实施例A66)(0.10g,0.47mmol)、叔丁醇钠(79mg,0.80mmol)、氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(摩尔比PdP/P＝1:1,60mg)和叔丁醇(4mL)。反应通过氮气鼓泡脱气5min。将反应密封并于100℃搅拌30min。反应经过滤并滤液经真空浓缩。粗混合物通过超临界液相色谱法纯化得到两个标题化合物，为单个的未知的立体异构体(22mg,15％)。
立体异构体1(11mg):LCMS(ESI):RT(min)＝3.39,[M+H]＝552.2,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.85(s,1H),9.05(s,1H),8.41(s,1H),8.28(s,1H),7.97(m,2H),6.34(d,J＝5.7Hz,1H),5.55–5.37(m,1H),5.09(d,J＝5.1Hz,1H),4.69(m,1H),4.57(m,2H),4.33(d,J＝13.4Hz,1H),4.02(d,J＝7.3Hz,1H),3.90(m,3H),3.52(m,1H),3.41(m,2H),1.90–1.47(m,8H).
立体异构体2(11mg)；LCMS(ESI):RT(min)＝3.41,[M+H]＝552.23,方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.83(s,1H),9.05(s,1H),8.35(s,1H),8.27(s,1H),7.97(m,2H),6.35(d,J＝5.7Hz,1H),5.43(m,1H),5.09(d,J＝5.1Hz,1H),4.70(m,1H),4.58(m,2H),4.27(m,1H),4.02(d,J＝7.3Hz,1H),3.90(m,3H),3.52(m,1H),3.41(m,2H),1.79(m,4H),1.68(m,2H),1.55(m,2H).
实施例641:1-(1-(仲丁基)-6-((2-((3S,4R)-3-氟-4-羟基哌啶-1-基)嘧啶-4- 基)氨基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)吡咯烷-2-酮
步骤1:1-(6-氯-1-异丙基-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-3-羟基-吡咯烷-2-酮
向微波反应小瓶中添加6-氯-3-碘代-1-仲丁基-吡咯并[3,2-c]吡啶(0.40g,1.2mmol)、吡咯烷-2-酮(0.12g,1.4mmol)、碘化亚铜(I)(0.11g,0.60mmol)、(反式)-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺(87mmol,0.60mmol)、三磷酸钾(0.86g,1.8mmol)和1,4-二噁烷(3mL)。反应小瓶经密封并并通过氮气鼓泡脱气20min。反应然后于100℃搅拌2h。混合物经过滤并浓缩。粗产物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-100％乙酸乙酯/庚烷)得到标题化合物，为对映异构体的混合物(0.21g,60％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝382.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.80(s,1H),7.75(s,1H),7.72(s,1H),4.58(m,1H),3.94(t,J＝7.0Hz,2H),2.16(m,2H),1.85–1.72(m,2H),1.42(d,J＝6.7Hz,3H),0.71–0.65(m,3H).
步骤2:1-(1-(仲丁基)-6-((2-((3S,4R)-3-氟-4-羟基哌啶-1-基)嘧啶-4-基)氨 基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)吡咯烷-2-酮
向微波反应小瓶中添加1-(6-氯-1-异丙基-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-基)-3-羟基-吡咯烷-2-酮(0.20g,0.69mmol)、(+)-(3S,4R)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟哌啶-4-醇(实施例A66)(0.10g,0.47mmol)、叔丁醇钠(0.20g,2.1mmol)、氯{[BrettPhos][2-(2-氨基乙基苯基]钯(II)]}/[BrettPhos]混合物(摩尔比PdP/P＝1:1,60mg)和叔丁醇(4mL)。反应通过氮气鼓泡脱气5min。将反应密封并于120℃搅拌1.5h。反应经过滤并真空浓缩。粗产物通过超临界液体色谱纯化得到标题化合物，为两个非对映异构体的混合物(0.11g,32％)。LCMS(ESI):RT(min)＝3.01,[M+H]＝468.2,方法＝B.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.71(s,1H),8.75(s,1H),8.28(s,1H),7.94(s,1H),7.58(s,1H),6.35(d,J＝5.5Hz,1H),5.11(d,J＝5.1Hz,1H),4.67(m,1H),4.52(m,1H),4.42–4.21(m,2H),3.96(t,J＝7.0Hz,2H),3.87(m,1H),3.60(m,1H),3.39(m,1H),2.46(m,2H),2.21–2.10(m,2H),1.92–1.79(m,2H),1.70(m,2H),1.44(m,3H),0.75(m,3H).
实施例642和实施例643：1-(1-(4-((1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶- 6-基)氨基)嘧啶-2-基)-1H-咪唑-4-基)乙醇的两个对映异构体
N-(2-氯嘧啶-4-基)-1-异丙基-2-甲基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(215mg,0.71mmol)、4-乙酰基咪唑(0.1g,0.89mmol)和碳酸铯(0.44g,1.3mmol)在叔丁醇(2.5mL)的混合物在微波中于150℃加热30min。反应以饱和碳酸氢钠稀释并以乙酸乙酯萃取(3x)。合并的萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物经过滤通过硅胶筒(以乙酸乙酯洗脱)并真空浓缩。于0℃向剩余物添加10mL的甲醇和硼氢化钠(50mg,1.3mmol)。反应于室温搅拌15min。反应以饱和碳酸氢钠稀释并以乙酸乙酯萃取(3x)。合并的萃取物以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗产物通过超临界液体色谱纯化得到标题化合物，为单个对映异构体，绝对立体化学未知(合并产率：23mg,7.4％).
实施例642(对映异构体1)(12mg):LCMS(ESI):RT(min)＝3.69,[M+H]＝379.2,方法＝B.1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.39(s,1H),8.59(d,J＝0.8Hz,1H),8.43(d,J＝1.3Hz,1H),8.33(d,J＝5.9Hz,1H),8.21(s,1H),7.70(t,J＝1.1Hz,1H),7.27(s,1H),5.04(d,J＝4.8Hz,1H),4.77(m,1H),4.71(m,1H),2.59(s,3H),1.62(d,J＝6.9Hz,6H),1.39(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例643(对映异构体2)(11mg):LCMS(ESI):RT(min)＝3.69,[M+H]＝379.2,方法＝B.1H NMR(400MHz,DMSO)δ10.39(s,1H),8.59(d,J＝0.8Hz,1H),8.43(d,J＝1.3Hz,1H),8.34(d,J＝5.9Hz,1H),8.21(s,1H),7.70(t,J＝1.1Hz,1H),7.28(s,1H),5.04(d,J＝4.8Hz,1H),4.89–4.60(m,2H),2.59(s,3H),1.62(d,J＝6.9Hz,6H),1.39(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例644:(±)-(顺式)-1-(4-(1-((S)-3,3-二氟丁-2-基)-2-(羟甲基)-1H-咪 唑并[4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基)-3-氟哌啶-4-醇
步骤1:(S)-1-(甲氧基(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯
(S)-2-(叔丁氧基羰基氨基)丙酸(20.0g,106mmol)、O-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(80.0g,210mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(54.6g,422mmol)和O,N-二甲基羟基胺盐酸盐(15.6g,160mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(200mL)中的混合物于室温搅拌2天。溶液以水(300mL)和石油醚(200mL)稀释。固体通过过滤收集并溶解于二氯甲烷(200mL)，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩得到标题化合物(17g,63％)，为灰白色固体.LCMS(ESI):[M+H]+＝233.
步骤2:(S)-3-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁基酯
于-16℃在氮气气氛下甲基溴化镁(3M,168mmol)在四氢呋喃(56mL)中的溶液滴加至(S)-1-(甲氧基(甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基氨基甲酸叔丁基酯(14.0g,60.3mmol)在四氢呋喃(200mL)的溶液。所得混合物于室温搅拌过夜。将溶液冷却至0℃并以饱和氯化铵淬灭并以乙酸乙酯萃取两次。合并的有机层以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩得到标题化合物(10.0g,89％)，为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝188.
步骤3:(2S)-3-羟基丁-2-基氨基甲酸叔丁基酯
(S)-3-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁基酯(5.0g,26.7mmol)和硼氢化钠(1.12g,29.5mmol)在四氢呋喃(65mL)和甲醇(20mL)的混合物于室温搅拌1h。溶液以乙醚(200mL)和柠檬酸(10％,100mL)稀释。所得溶液以乙酸乙酯萃取(2x)并合并的有机层以碳酸氢钠(水溶液)和盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩得到标题化合物(5.03g,99％)，为黄色粗油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝190.
步骤4:(3S)-3-氨基丁-2-醇盐酸盐
向反应小瓶中添加(2S)-3-羟基丁-2-基氨基甲酸叔丁基酯(5.0g,26.4mmol)、乙醚(22mL)和在1,4-二噁烷中的氢氯酸(4M,8mL)。并将反应混合物于室温搅拌36h。所得溶液经真空浓缩得到标题化合物(3.0g,90％)，为灰白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝90.
步骤5:(3S)-3-(2-溴-5-硝基吡啶-4-基氨基)丁-2-醇
2,4-二溴-5-硝基吡啶(5.43g,19.3mmol)、(3S)-3-氨基丁-2-醇盐酸盐(3.61g,28.7mmol)和三乙基胺(14mL)在四氢呋喃(50mL)中的混合物于室温搅拌8h。溶液以水(50mL)稀释并以二氯甲烷(2x)萃取并且合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-30％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物(4.92g,88％)，为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝290.
步骤6:(S)-3-(2-溴-5-硝基吡啶-4-基氨基)丁-2-酮
(3S)-3-(2-溴-5-硝基吡啶-4-基氨基)丁-2-醇(3g,10.3mmol)和Dess-Martinperiodinane(8.8g,20.8mmol)在二氯甲烷(30mL)中的混合物于室温搅拌3h。溶液以亚硫酸氢钠(50mL)和碳酸氢钠(50mL)淬灭并以二氯甲烷(2x)萃取。合并的有机层以盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩得到标题化合物(2.5g,86％)，为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝288.
步骤7:(S)-2-溴-N-(3,3-二氟丁-2-基)-5-硝基吡啶-4-胺
(S)-3-(2-溴-5-硝基吡啶-4-基氨基)丁-2-酮(4.90g,17.0mmol)和二乙基氨基硫三氟化物(13.2g,81.7mmol)在二氯甲烷(50mL)中的混合物于室温搅拌过夜。溶液以碳酸氢钠淬灭，以二氯甲烷(2x)萃取。合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩得到标题化合物(4.0g,75％)，为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝310.
步骤8:(S)-6-溴-N4-(3,3-二氟丁-2-基)吡啶-3,4-二胺
标题化合物(0.75g,46％)从(S)-2-溴-N-(3,3-二氟丁-2-基)-5-硝基吡啶-4-胺(1.8g,5.80mmol)根据类似于实施例265,步骤2的方法合成。LCMS(ESI):[M+H]+＝280.
步骤9:(S)-2-(6-溴-4-(3,3-二氟丁-2-基氨基)吡啶-3-基氨基)-2-氧代乙酸乙 酯
标题化合物(0.9g,94％)从(S)-6-溴-N4-(3,3-二氟丁-2-基)吡啶-3,4-二胺(0.7g,2.50mmol)根据类似于实施例265,步骤3的方法合成。LCMS(ESI):[M+H]+＝380.
步骤10:(S)-(6-溴-1-(3,3-二氟丁-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)乙酸甲 酯
标题化合物(295mg,62％)从(S)-2-(6-溴-4-(3,3-二氟丁-2-基氨基)吡啶-3-基氨基)-2-氧代乙酸乙酯(500mg,1.32mmol)根据类似于实施例265,步骤4的方法合成。LCMS(ESI):[M+H]+＝362.
步骤11:(S)-(6-溴-1-(3,3-二氟丁-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇
标题化合物(210mg,81％)从乙酸(S)-(6-溴-1-(3,3-二氟丁-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲基酯(295mg,0.81mmol)根据类似于实施例265,步骤5的方法合成。LCMS(ESI):[M+H]+＝320.
步骤12:(±)-(顺式)-1-(4-(1-((S)-3,3-二氟丁-2-基)-2-(羟甲基)-1H-咪唑并 [4,5-c]吡啶-6-基氨基)嘧啶-2-基)-3-氟哌啶-4-醇
标题化合物(88.9mg,33％)从(S)-(6-溴-1-(3,3-二氟丁-2-基)-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇(190mg,0.59mmol)和(±)-顺式-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟哌啶-4-醇(实施例A 85)(126mg,0.59mmol)根据类似于实施例636,步骤2的方法合成。LCMS(ESI):[M+H]+＝452.2,RT(min)＝1.469,方法＝L；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.80(s,1H),8.63(s,1H),8.36(s,1H),7.97-7.95(d,J＝5.7Hz,1H),6.46-6.44(d,J＝5.7Hz,1H),5.85(s,1H),5.29-5.11(m,2H),4.76-4.52(m,4H),4.34(m,1H),3.88(m,1H),3.58-3.40(m,1H),3.25(m,1H),1.73(m,8H).
实施例645:(3RS,4SR)-3-氟-1-(4-((2-(羟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c] 吡啶-6-基)氨基)嘧啶-2-基)-3-甲基哌啶-4-醇(对映异构体的混合物)
步骤1:叔丁基-3-甲基-4-(三甲基甲硅烷基氧基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸酯
三氟甲烷磺酸三甲基甲硅烷基酯(25g,112mmol)滴加至叔丁基-3-甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸酯(20g,93.8mmol)和三乙基胺(22g,223mmol)在甲苯(200mL)中的预冷却的0℃溶液。所得混合物于0℃搅拌4h。该溶液以水(100mL)淬灭并以乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机层合并，以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩得到标题化合物(25g,75％)，为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝286.
步骤2:3-氟-3-甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯
于0℃ 3-甲基-4-(三甲基甲硅烷基氧基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁基酯(1.14g,3.99mmol)和(1.56g,4.40mmol)在乙腈(20mL)中的混合物搅拌1h。该溶液以水(20mL)稀释并以乙酸乙酯(2x)萃取。合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。所得残余物通过硅胶色谱法纯化(溶剂梯度:0-10％乙酸乙酯/石油醚)得到标题化合物(0.7g,76％)，为无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝232.
步骤3:3-氟-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
3-氟-3-甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯(600mg,2.59mmol)和硼氢化钠(118mg,3.11mmol)在甲醇(15mL)中的混合物于室温搅拌3h。将该溶液以氢氧化钠(4M,4mL)淬灭并以乙醚萃取(3x)。合并的有机层以盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩得到标题化合物(490mg,80％)，为无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝234.
步骤4:3-氟-3-甲基哌啶-4-醇 盐酸盐
向反应小瓶中添加3-氟-4-羟基-3-甲基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(490mg,2.10mmol)、乙醚(15mL)和氢氯酸(4M，在二噁烷中,3mL)。所得混合物于室温搅拌过夜。反应沉淀通过过滤收集得到标题化合物(300mg,84％)，为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝134.
步骤5：(3RS,4SR)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟-3-甲基哌啶-4-醇(对映异构体的 混合物)和(3RS,4RS)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟-3-甲基哌啶-4-醇(对映异构体的混合 物)
3-氟-3-甲基哌啶-4-醇盐酸盐(3g,17.7mmol)、2-氯嘧啶-4-胺(1.76g,13.6mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(5.29g,40.9mmol)在DMSO(15mL)中的混合物于80℃搅拌20h。所得混合物经真空浓缩。所得残余物经反相HPLC纯化并冻干得到两个标题化合物，为对映异构体的灰白色固体混合物，相对立体化学已知。
(3RS,4SR)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟-3-甲基哌啶-4-醇(对映异构体的混合物)(500mg,16％):LCMS(ESI):[M+H]+＝227.1,RT(min)＝1.126,方法＝R；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.71-7.69(d,J＝5.7Hz,1H),6.36(s,2H),5.69-5.67(d,J＝5.7Hz,1H),4.93-4.91(d,J＝6.6Hz,1H),4.69-4.51(m,2H),3.50-3.30(m,1H),2.96-2.81(m,2H),1.63-1.60(m,2H),1.33-1.26(d,J＝21Hz,3H).
(3RS,4RS)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟-3-甲基哌啶-4-醇(对映异构体的混合物)(100mg,3％):LCMS(ESI):[M+H]+＝227.1,RT(min)＝1.359,方法＝L；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.71-7.70(d,J＝5.4Hz,1H),6.36(s,2H),5.69-5.68(d,J＝5.4Hz,1H),5.23-5.21(d,J＝4.5Hz,1H),3.77-3.62(m,5H),1.81-1.73(m,1H),1.46-1.38(m,1H),1.27-1.19(d,J＝22.5Hz,3H).
步骤6:(3RS,4SR)-3-氟-1-(4-((2-(羟甲基)-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶- 6-基)氨基)嘧啶-2-基)-3-甲基哌啶-4-醇(对映异构体的混合物)
标题化合物(25.5mg,30％)从(3RS,4SR)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-3-氟-3-甲基哌啶-4-醇异构体1(46.6mg,0.206mmol)和(6-溴-1-异丙基-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-2-基)甲醇(实施例A 49,步骤2)(73mg,0.206mmol)合成，根据与实施例636,步骤2类似的方法。LCMS(ESI):[M+H]+＝416.1,RT(min)＝1.049,方法＝N；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.75(s,1H),8.60(s,1H),8.35(s,1H),7.96-7.95(d,J＝5.7Hz,1H),6.47-6.45(d,J＝5.7Hz,1H),5.68(m,1H),5.03-4.94(m,2H),4.75-4.64(m,4H),3.59-3.48(m,1H),3.18-3.04(m,2H),1.72(m,2H),1.60(m,6H),1.31-1.39(d,J＝24Hz,3H).
实施例646:1-仲丁基-6-(2-((±)-顺式-5-氟-4-羟基-3,3-二甲基哌啶-1-基)嘧 啶-4-基氨基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
步骤1：5,5-二甲基-4-(三甲基甲硅烷基氧基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁基 酯
标题化合物(7.5g,77％)从3,3-二甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯(7.35g,32.4mmol)合成，根据与实施例645,步骤1类似的方法。LCMS(ESI):[M+H]+＝300.
步骤2：5-氟-3,3-二甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯
标题化合物(1.4g,23％)从5,5-二甲基-4-(三甲基甲硅烷基氧基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁基酯(7.5g,25.0mmol)合成，根据实施例645，步骤2类似的方法。LCMS(ESI):[M+H]+＝246.
步骤3:(±)-(顺式)-5-氟-4-羟基-3,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
标题化合物(1.0g,71％)从5-氟-3,3-二甲基-4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁基酯1.4g,5.71mmol)合成为对映异构体的混合物，根据与实施例631,步骤1类似的方法。LCMS(ESI):[M+H]+＝248.
步骤4:(±)-(顺式)-5-氟-3,3-二甲基哌啶-4-醇盐酸盐
标题化合物(1.36g,57％)从(±)-(顺式)-5-氟-4-羟基-3,3-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(3.2g,12.9mmol)合成为对映异构体的混合物，根据与实施例645,步骤4类似的方法。LCMS(ESI):[M+H]+＝148.
步骤5:(±)-(顺式)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-5-氟-3,3-二甲基哌啶-4-醇
标题化合物(700mg,43％)从(±)-(顺式)-5-氟-3,3-二甲基哌啶-4-醇盐酸盐(1.36g,7.41mmol)合成为对映异构体的混合物，根据与实施例645,步骤5类似的方法。LCMS(ESI):[M+H]+＝241.
步骤6:1-仲丁基-6-(2-((±)-顺式-5-氟-4-羟基-3,3-二甲基哌啶-1-基)嘧啶- 4-基氨基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺
标题化合物(43.9mg,55％)根据与实施例636,步骤2类似的方法，合成为(±)-(顺式)-1-(4-氨基嘧啶-2-基)-5-氟-3,3-二甲基哌啶-4-醇(30mg,0.12mmol)的两个非对映异构体和6-溴-1-(仲丁基)-N-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-3-甲酰胺(实施例321,步骤2)(47.5mg,0.12mmol)的混合物。LCMS(ESI):[M+H]+＝540.2,RT(min)＝1.548,方法＝N；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.80(s,1H),9.02(s,1H),8.33(s,1H),8.18(s,1H),7.94(d,J＝5.7Hz,1H),7.87(m,1H),6.35(d,J＝5.7Hz,1H),5.16-5.13(m,1H),4.89-4.66(m,1H),4.48-4.31(m,1H),4.29-3.89(m,5H),3.83-3.68(m,1H),3.50-3.30(m,4H),1.90-1.80(m,4H),1.57-1.48(m,5H),0.98-0.90(m,6H),0.80-0.71(m,3H).
下表5中的各化合物根据如在本文另一实施例中所描述的类似的试验方法(使用适当取代的试剂)制备，这样的实施例在合成方法栏中列为参考。
表5.
生化试验
本发明描述的示例性化合物根据下面的测试进行测试。报道于表4-5中的酶数据一般为多个试验的代表。
EGFR T790M L858R:
在5μM腺苷-5’-三磷酸(ATP)和变化浓度的测试化合物的存在下于50mM 2-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]乙磺酸(HEPES),pH 7.5,10mM MgCl2,4mM MnCl2,0.01％Brij-35,1mM二硫苏糖醇(DTT),0.5％二甲基亚砜(DMSO)中，十个nM EGFR T790M L858R酶(LifeTechnologies,PV4879)磷酸化1μM 5-FAM-EEPLYWSFPAKKK-CONH2肽底物(FL-Peptide 22,Caliper Life Sciences,760366)。反应于室温(22℃)进行30分钟并以80mM 2,2’,2”,2”’-(乙烷-1,2-二基二次氮基)四乙酸(EDTA)终止。使用Caliper迁移率检测方法检测产物，其中产物和底物在电泳上分离并测量。针对化合物的对数浓度对百分比活性作图，并且各点拟合为Morrison方程(如下所示)以产生表观Ki。对于竞争性抑制剂，使用Cheng-Prusoff转化将该表观Ki进一步转化为Ki：Ki＝表观Ki/(1+[ATP]/ATP的Km)，其中[ATP]＝5μM，且ATP的Km＝1.3μM。
Morrison方程：
EGFR del746-750T790M
在5μM腺苷-5’-三磷酸(ATP)和变化浓度的测试化合物的存在下于50mM 2-[4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基]乙磺酸(HEPES),pH 7.5,10mM MgCl2,4mM MnCl2,0.01％Brij-35,1mM二硫苏糖醇(DTT),0.5％二甲基亚砜(DMSO)中，五个nM EGFR del746-750T790M酶(CarnaBiosciences,08-528)磷酸化1μM 5-FAM-EEPLYWSFPAKKK-CONH2肽底物(FL-Peptide 22,Caliper Life Sciences,760366)。反应于室温(22℃)进行30分钟并以80mM 2,2’,2”,2”’-(乙烷-1,2-二基二次氮基)四乙酸(EDTA)终止。使用Caliper迁移率检测方法检测产物，其中产物和底物在电泳上分离并测量。针对化合物的对数浓度对百分比活性作图，并且各点拟合为Morrison方程(如下所示)以产生表观Ki。对于竞争性抑制剂，使用Cheng-Prusoff转化将该表观Ki进一步转化为Ki：Ki＝表观Ki/(1+[ATP]/ATP的Km)，其中[ATP]＝5μM且ATP的Km＝2.1μM
Morrison方程:
数据表I:EGFR(T790M/L858R)生化活性
数据表II:EGFR(T790M/d746-750)生化活性
H1975 pEGFR MSD细胞实验
背景:这些实验目的在于确定细胞。化合物抑制H1975(L585R/T790M)突变EGFR表达细胞中的磷-EGFR的能力使用Meso Scale Discovery 384孔pEGFR Tyr1068测试试剂盒(Meso Scale Discovery Catalog#N31CB-1)确定。
细胞培养:NCI-H1975(ATCC Catalog#CRL-5908)细胞保持在含有RPMI 1640,10％FBS,4mM L-葡糖胺,1％青霉素-链霉素和4.5g/L葡萄糖的培养基中。所有的细胞培养试剂都购自Invitrogen/Gibco。细胞于37℃在5％CO2下培养并且如ATCC推荐进行分裂。
细胞铺板和血清饥饿(Serum Starvation)：H1975细胞收集并铺板进入灭菌细胞培养基处理的384孔板(Greiner catalog#781091)，密度为30,000个细胞/孔(在50ul培养培养基中)并置于37℃在5％CO2下的温育箱中六个小时。六个小时后，抽吸培养培养基并以不含血清的培养培养基置换。细胞然后以不含血清的媒介物在37℃和5％CO2下温育过夜。
实验方法：次日，测试化合物以二甲基亚砜(DMSO)顺序稀释并且添加至在不含血清的培养基中的细胞中(最终DMSO浓度0.5％)。实验板然后于37℃和5％CO2温育1小时。化合物温育1小时后，然后对温育细胞进行溶胞并且根据MSD pEGFR测试试剂盒实验程序处理。将细胞溶胞产物添加至预涂覆了针对磷酸化EGFR的抗体的测试板。样品中的磷酸化EGFR于4℃过夜结合至捕捉抗体。检测抗体(抗全EGFR，以电化学荧光的SULFO-TAG标记)添加至结合的溶胞产物并于室温温育1小时。添加MSD读出缓冲器(MSD Read Buffer)使得当向板电极施加电压时，结合至电极表面的标记发光。MSD扇形仪表装置(MSD SectorInstrument)测量光的密度，并定量测量样品中磷酸化-EGFR的量。相对于未处理的对照，利用不同浓度的测试化合物计算对EGFR磷酸化的百分比抑制。EC50值使用4参数逻辑非线性回归剂量-响应模型进行计算。
H1975增殖试验
背景：该实验目的在于确定化合物H1975(EGFR T790M/L858R)细胞增殖的能力。
细胞培养:NCI-H1975(ATCC Catalog#CRL-5908)细胞保持在含RPMI 1640,10％FBS,4mM L-葡糖胺、1％青霉素-链霉素和4.5g/L葡萄糖的培养基中。所有的细胞培养试剂都购自Invitrogen/Gibco。细胞于37℃在5％CO2下培养并且如ATCC推荐进行分裂。
试验方法:H1975细胞收集并铺板进入灭菌细胞培养基处理的384孔板(Greinercatalog#781091)，密度为10000个细胞/孔(在50μL培养培养基中)并置于37℃在5％CO2下的温育箱中过夜。次日，测试化合物以二甲基亚砜(DMSO)顺序稀释并且添加至培养培养基中的细胞(最终DMSO浓度0.5％，最终实验体积50μL)。实验板然后于37℃和5％CO2温育72小时。72小时后，将25μL的重构Promega Cell Titer-Glo试剂(Promega Catalog#G7572)添加至所有的孔中。然后各板在Perkin Elmer Envision多标记微孔板阅读器(Multi-labelplate reader)上使用荧光模式读数。相对于未处理的对照，利用不同浓度的测试化合物计算对增殖的百分比抑制。EC50值使用4参数逻辑非线性回归剂量-响应模型进行计算。
数据表III:H1975pEGFR MSD活性
数据表IV：H1975抗增殖性活性

Claims (22)

1.式(I)化合物
其中，
X为CR3或N；
R1为C3-C7杂环烃基、杂芳基、芳基、-O(C1-C6烃基)或-NRaRb，其中所述C3-C7杂环烃基和杂芳基可被1至5个Rf基团进一步取代；
R2为氢、-(CH2)m芳基、-(CH2)m杂芳基、C1-C6烃基、烃基氨基、烃氧基或–CH2O(C1-C3烃基)，其中所述芳基为苯基，且所述杂芳基为吡唑基；
R3为氢、C1-C3烃基、CN、COOH、-(CH2)mC(O)NRaRb或杂芳基，其中所述杂芳基为吡唑基、咪唑基或具有2个环碳原子和3个选自N和O的环杂原子的单环杂芳基基团；
R4为氢、C3-C7杂环烃基、C3-C7环烃基、C1-C6烃基、-(CH2)m苯基或-(CH2)m杂芳基；
其中各Ra独立地为H或C1-C6烃基；各Rb独立地为H、C1-C6烃基、-(CH2)mC3-C7环烃基、-(CH2)mC3-C7杂环烃基或-(CH2)m杂芳基，其中所述C3-C7杂环烃基和杂芳基可以进一步被选自以下的1至3个基团取代：卤代、羟基、C1-C3烃基、氨基、氧代、酰胺基、磺酰基、烃氧基和酰基；Ra和Rb一起可以形成C3-C7杂环烃基或杂芳基环；
其中各Rf独立地选自C1-C3烃基、烃氧基、氨基、羟基、烃基氨基、酰胺基、脲、氧代、卤代、吡唑基、咪唑基、三唑基、CN、-NHC(O)(C1-C3烃基)、酰基、磺酰基、磺酰胺基、-(CH2)mC3-C7杂环烃基、-C(O)ORa；
各m独立地为0、1、2或3；
或其可药用盐；
其中除非另有说明，
所述杂环烃基是指含有2至12个环碳原子和1至3个环杂原子的单环或多环非芳香族环体系，其中所述杂原子选自N、O、S、N-氧化物、氧化硫和二氧化硫；
所述杂芳基是指含有1至9个碳和至少一个杂原子的芳香环体系，其中所述杂原子选自N、O和S；
所述芳基是指苯基或萘基；
所述烃基氨基是指基团-NR’R”，其中R’为H、C1-C6烃基或C3-C6环烃基，且R”为C1-C6烃基或C3-C6环烃基；
所述烃氧基是指基团-OR’，其中R’为C1-C4烃基或C3-C6环烃基；
所述酰胺基是指基团-C(O)NR’R”,其中R’和R”各自独立地为H、C1-C6烃基或C3-C6环烃基；
所述酰基是指基团-C(O)R’，其中R’为烃基、C3-C6环烃基或杂环烃基；且
所述脲是指基团-NR’C(O)NR”，其中R’和R”各自独立地为H、C1-C6烃基或C3-C6环烃基。
2.权利要求1的化合物，其中X为N；或其可药用盐。
3.权利要求1的化合物，其中X为CR3；或其可药用盐。
4.权利要求1-3中任一项的化合物，其中R1为C3-C7杂环烃基；或其可药用盐。
5.权利要求1-3中任一项的化合物，其中R1为杂芳基；或其可药用盐。
6.权利要求1-3中任一项的化合物，其中R1为-NRaRb；或其可药用盐。
7.权利要求1-3中任一项的化合物，其中R2为C1-C6烃基；或其可药用盐。
8.权利要求1-3中任一项的化合物，其中R2为氢、-(CH2)m芳基、杂芳基、烃基氨基、烃氧基或–(CH2)mO(C1-C3烃基)，其中所述芳基为苯基，且所述杂芳基为吡唑基；或其可药用盐。
9.权利要求1-3中任一项的化合物，其中R4为氢或C1-C6烃基。
10.权利要求1或3中任一项的化合物，其中R3为氢、C1-C3烃基、杂芳基或–(CH2)mC(O)NRaRb，其中所述杂芳基为吡唑基、咪唑基或具有2个环碳原子和3个选自N和O的环杂原子的单环杂芳基基团；或其可药用盐。
11.根据1-3中任一项的化合物，其中R1为选自以下的C3-C7杂环烃基：哌啶基、哌嗪基和吡咯烷基，其中所述C3-C7杂环烃基可以进一步被1至5个选自以下的Rf基团取代：C1-C3烃基、烃氧基、卤代、羟基、磺酰基和磺酰胺基；或其可药用盐。
12.根据1-3中任一项的化合物，其中R1为吡唑基，其中所述吡唑基可以进一步被1至5个选自以下的Rf基团取代：C1-C3烃基、烃氧基、卤代、羟基、磺酰基和磺酰胺基；或其可药用盐。
13.权利要求1-3中任一项的化合物，其中R2为氢或C1-C3烃基；或其可药用盐。
14.权利要求10的化合物，其中R3为氢、C1-C3烃基或-C(O)NH2；或其可药用盐。
15.权利要求1-3和14中任一项的化合物，其中R4为氢或异丙基，Rf为F；或其可药用盐。
16.化合物或其可药用盐，所述化合物选自：
17.药物组合物，其包含根据前述权利要求中任一项的化合物以及可药用载体。
18.根据权利要求1-16中任一项的化合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
19.权利要求18的用途，其中所述癌症为非小细胞肺癌。
20.权利要求1-16的化合物或其可药用盐，其用于治疗。
21.抗肿瘤剂和根据权利要求1-16中任一项的化合物或其可药用盐的组合在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
22.权利要求21的用途，其中所述癌症为非小细胞肺癌。
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Families Citing this family (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IN2012DN01325A (zh) 2009-08-20 2015-06-05 Karus Therapeutics Ltd
GB201204125D0 (en) 2012-03-08 2012-04-25 Karus Therapeutics Ltd Compounds
EP2818472A1 (en) * 2013-06-27 2014-12-31 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Imidazo[4,5-c]pyridine and pyrrolo[3,2-c]pyridine compounds as G-protein-coupled receptor kinase 5 (GRK5) modulators
WO2014210354A1 (en) 2013-06-28 2014-12-31 Genentech, Inc. Azaindazole compounds as inhibitors of t790m containing egfr mutants
ES2779152T3 (es) 2013-10-07 2020-08-13 Kadmon Corporation Llc Derivados de (2-(5-isoindolin-2-il)pirimidin-4-il)-amina como inhibidores de Rho-quinasa para tratar enfermedades autoinmunes
TWI659021B (zh) 2013-10-10 2019-05-11 亞瑞克西斯製藥公司 Ｋｒａｓ ｇ１２ｃ之抑制劑
US10016439B2 (en) * 2014-01-31 2018-07-10 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Fused imidazole compounds
GB201402431D0 (en) 2014-02-12 2014-03-26 Karus Therapeutics Ltd Compounds
EP3327006B1 (en) 2014-03-28 2020-05-20 Calitor Sciences, LLC Substituted heteroaryl compounds and methods of use
CN105085489B (zh) 2014-11-05 2019-03-01 益方生物科技（上海）有限公司 嘧啶或吡啶类化合物、其制备方法和医药用途
US11312690B2 (en) 2015-07-24 2022-04-26 University Of Lousville Research Foundation, Inc. Compounds, compositions, methods for treating diseases, and methods for preparing compounds
GB201514754D0 (en) 2015-08-19 2015-09-30 Karus Therapeutics Ltd Compounds
GB201514760D0 (en) 2015-08-19 2015-09-30 Karus Therapeutics Ltd Compounds and method of use
GB201514751D0 (en) 2015-08-19 2015-09-30 Karus Therapeutics Ltd Compounds
GB201514758D0 (en) 2015-08-19 2015-09-30 Karus Therapeutics Ltd Formulation
EP3347097B1 (en) 2015-09-11 2021-02-24 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Substituted aminopyrimidine derivatives as modulators of the kinases jak, flt3 and aurora
CN108779117B (zh) * 2015-12-27 2021-08-31 重庆复创医药研究有限公司 一类激酶抑制剂
CN107266451B (zh) * 2016-04-07 2021-12-31 上海医药工业研究院 瑞布昔利布中间体的制备方法
JP2020505327A (ja) 2016-12-23 2020-02-20 アルビナス・オペレーションズ・インコーポレイテッドＡｒｖｉｎａｓ Ｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ， Ｉｎｃ． Ｅｇｆｒタンパク質分解標的化キメラ分子およびその関連する使用方法
SI3568396T1 (sl) * 2017-01-11 2021-04-30 Leo Pharma A/S Novi derivati amino-imidazopiridina koz zaviralci Janus kinaze in njihova farmacevtska uporaba
US11358959B2 (en) 2017-01-26 2022-06-14 Araxes Pharma Llc Benzothiophene and benzothiazole compounds and methods of use thereof
JP7327802B2 (ja) 2017-01-26 2023-08-16 アラクセス ファーマ エルエルシー 縮合ヘテロ－ヘテロ二環式化合物およびその使用方法
EP3573971A1 (en) 2017-01-26 2019-12-04 Araxes Pharma LLC 1-(3-(6-(3-hydroxynaphthalen-1-yl)benzofuran-2-yl)azetidin-1yl)prop-2-en-1-one derivatives and similar compounds as kras g12c modulators for treating cancer
WO2018140514A1 (en) 2017-01-26 2018-08-02 Araxes Pharma Llc 1-(6-(3-hydroxynaphthalen-1-yl)quinazolin-2-yl)azetidin-1-yl)prop-2-en-1-one derivatives and similar compounds as kras g12c inhibitors for the treatment of cancer
WO2018140512A1 (en) 2017-01-26 2018-08-02 Araxes Pharma Llc Fused bicyclic benzoheteroaromatic compounds and methods of use thereof
JOP20180011A1 (ar) 2017-02-16 2019-01-30 Gilead Sciences Inc مشتقات بيرولو [1، 2-b]بيريدازين
GB201705263D0 (en) * 2017-03-31 2017-05-17 Probiodrug Ag Novel inhibitors
CN110831933A (zh) 2017-05-25 2020-02-21 亚瑞克西斯制药公司 喹唑啉衍生物作为突变kras、hras或nras的调节剂
AU2018271990A1 (en) 2017-05-25 2019-12-12 Araxes Pharma Llc Covalent inhibitors of KRAS
ES2969536T3 (es) * 2017-06-30 2024-05-21 Beijing Tide Pharmaceutical Co Ltd Inhibidor de la proteína cinasa asociada a rho, composición farmacéutica que lo comprende, y su método de preparación y uso
WO2019121562A1 (en) 2017-12-18 2019-06-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Bifunctional inhibitors with egfr having a e3 ubiquitin ligase moiety
TW201945357A (zh) 2018-02-05 2019-12-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 化合物
WO2019162323A1 (en) 2018-02-21 2019-08-29 Boehringer Ingelheim International Gmbh New benzimidazole compounds and derivatives as egfr inhibitors
TWI721483B (zh) 2018-07-13 2021-03-11 美商基利科學股份有限公司 吡咯并[1,2-b]嗒𠯤衍生物
US20210317127A1 (en) * 2018-08-01 2021-10-14 Araxes Pharma Llc Heterocyclic spiro compounds and methods of use thereof for the treatment of cancer
CN114007698B (zh) 2019-06-24 2024-01-09 勃林格殷格翰国际有限公司 作为egfr抑制剂的大环化合物和衍生物
KR20220097385A (ko) * 2019-10-30 2022-07-07 얀센 사이언시즈 아일랜드 언리미티드 컴퍼니 3-니트로-n-(2,2,2-트리플루오로에틸)-4-피리딘아민의 합성
CN113004252B (zh) * 2019-12-20 2023-06-09 江苏先声药业有限公司 一种芳基并咪唑类衍生物及其用途
JP2023508976A (ja) 2019-12-23 2023-03-06 ブループリント メディシンズ コーポレイション Ｅｇｆｒの変異型の阻害剤
EP4237423A1 (en) 2020-11-02 2023-09-06 Boehringer Ingelheim International GmbH Substituted 1h-pyrazolo[4,3-c]pyridines and derivatives as egfr inhibitors
CA3210395A1 (en) * 2021-03-02 2022-09-09 Nathanael S. Gray Covalent egfr inhibitors and methods of use thereof
CN117858872A (zh) 2021-06-22 2024-04-09 缆图药品公司 用于治疗癌症的杂环egfr抑制剂
WO2023283130A1 (en) 2021-07-04 2023-01-12 Newave Pharmaceutical Inc. Isoquinoline derivatives as mutant egfr modulators and uses thereof
WO2023134266A1 (zh) * 2022-01-17 2023-07-20 苏州浦合医药科技有限公司 2-哌啶基或2-吡唑基取代的嘧啶化合物作为egfr抑制剂
WO2023146786A1 (en) * 2022-01-28 2023-08-03 Bridgene Biosciences, Inc. Imidazopyridine inhibitors of tyrosine kinase
WO2023211238A1 (ko) * 2022-04-29 2023-11-02 보로노이 주식회사 헤테로아릴 유도체 화합물 및 이의 용도
WO2023241618A1 (zh) * 2022-06-14 2023-12-21 南京明德新药研发有限公司 氨基嘧啶类化合物及其应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1469874A (zh) * 2000-09-15 2004-01-21 ��̩��˹ҩ��ɷ����޹�˾ 可用作蛋白激酶抑制剂的吡唑化合物

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5559235A (en) 1991-10-29 1996-09-24 Glaxo Wellcome Inc. Water soluble camptothecin derivatives
US5342947A (en) 1992-10-09 1994-08-30 Glaxo Inc. Preparation of water soluble camptothecin derivatives
US5681835A (en) 1994-04-25 1997-10-28 Glaxo Wellcome Inc. Non-steroidal ligands for the estrogen receptor
US5491237A (en) 1994-05-03 1996-02-13 Glaxo Wellcome Inc. Intermediates in pharmaceutical camptothecin preparation
GB9716557D0 (en) 1997-08-06 1997-10-08 Glaxo Group Ltd Benzylidene-1,3-dihydro-indol-2-one derivatives having anti-cancer activity
US7547779B2 (en) 2003-10-06 2009-06-16 Glaxo Group Limited Preparation of 1,6-disubstituted azabenzimidazoles as kinase inhibitors
JP2007523145A (ja) 2004-02-20 2007-08-16 アストラゼネカ アクチボラグ ゴナドトロピン放出ホルモン（ｇｎｒｈ）アンタゴニストとしてのピロール誘導体
JP2009532379A (ja) 2006-03-31 2009-09-10 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト ＰＴＰａｓｅのチアジアゾリジノン阻害剤
EP2206707B1 (en) 2007-10-24 2014-07-23 Astellas Pharma Inc. Azolecarboxamide compound or salt thereof
EP2480551A1 (en) 2009-09-23 2012-08-01 Pfizer Inc. Gpr 119 modulators
US20110207736A1 (en) * 2009-12-23 2011-08-25 Gatekeeper Pharmaceuticals, Inc. Compounds that modulate egfr activity and methods for treating or preventing conditions therewith
WO2011106276A1 (en) 2010-02-25 2011-09-01 Merck Sharp & Dohme Corp. Task channel antagonists
US8653089B2 (en) 2011-02-09 2014-02-18 F. Hoffmann-La Roche Ag Heterocyclic compounds and methods of use

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1469874A (zh) * 2000-09-15 2004-01-21 ��̩��˹ҩ��ɷ����޹�˾ 可用作蛋白激酶抑制剂的吡唑化合物

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Novel mutant-selective EGFR kinase inhibitors against EGFR T790M;Wenjun Zhou et al.;《Nature》;20091231;第462卷;第1070-1074页 *

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