CN104905008A

CN104905008A - 一种用于构建营养性肥胖症动物模型的纯化饲料及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN104905008A
Application number: CN201510334971.4A
Authority: CN
Inventors: 刘旭; 张文明; 林艺海; 杨志伟
Original assignee: BEIJING HFK BIOSCIENCE Co Ltd
Current assignee: BEIJING HFK BIOSCIENCE Co Ltd
Priority date: 2015-06-16
Filing date: 2015-06-16
Publication date: 2015-09-16

Abstract

本发明公开了一种用于构建营养性肥胖症动物模型的纯化饲料及其制备方法和应用。该纯化饲料由以下重量份的原料制成：酪蛋白200-300份、胱氨酸3-5份、麦芽糊精100-150份、蔗糖50-100份、纤维素30-80份、豆油20-50份、猪油250-360份、矿物盐预混料10-15份、磷酸氢钙10-20份、碳酸钙5-10份、柠檬酸钾15-30份、维生素预混料10-15份、酒石酸胆碱2-4份、食品级蓝染剂0.06-0.08份。上述纯化饲料，采用成分清楚的纯化原料，加强了油脂含量，配比合理，质量稳定，形态和气味适合采食，用于构建啮齿类动物营养性肥胖症模型，效果显著，重复性好。

Description

一种用于构建营养性肥胖症动物模型的纯化饲料及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于实验动物营养学领域，具体涉及一种用于构建营养性肥胖症动物模型的纯化饲料及其制备方法和应用。

背景技术

肥胖症是由遗传因素和环境因素相互作用而形成的慢性代谢类疾病，随着人类饮食结构的变化，动物性脂肪及高蛋白高胆固醇食物的摄取量不断提高，由饮食结构不合理引起的肥胖症逐渐引起了人们的关注和研究。肥胖引起的动脉粥样硬化、高脂血症、糖尿病等代谢类疾病成为危害人类健康的重要因素之一。研究肥胖症的关键是获得理想的肥胖动物模型，肥胖动物模型主要有饮食诱导肥胖模型和转基因肥胖模型，饮食诱导肥胖模型通过饲喂高脂饮食构建，其成模机理与人类肥胖形成机理相近，是目前肥胖症模型构建的主要方法。研究者用于构建肥胖模型的高脂饲料各有不同，大多是在普通饲料的基础上添加油脂、蔗糖、胆固醇等。

中国专利文献CN1682600A公开了一种构建营养性肥胖动物模型的饲料配方，该配方由以下重量比的原料制成：玉米25-45％，猪油10-20％，酪蛋白8-16％，面粉9-18％，猪肉松5-15％，草粉1-3％，鱼粉3-7％，麸皮1-3％，矿物盐预混料2-3.5％，胆固醇0.5-1％，维生素预混料0.03-0.05％。上述饲料配方中，玉米、草粉、鱼粉、麸皮等原料为天然物质加工制成，成分复杂，成分及含量并不明确，以致饲料成分不清楚，并且不同来源甚至不同批次的原料成分差别较大，造成饲料成分及性质的不稳定性。而饲料配方的不稳定性导致肥胖模型的成模时间、成模效果及模型稳定性有较大差异。因此，制备一种适宜于啮齿类动物造模营养需求且成分清楚的高脂纯化饲料，有助于人类对肥胖症进行深入的研究，从而更好的预防和治疗肥胖症。

发明内容

为此，本发明为了解决现有技术中由于饲料成分不清楚、饲料配方不稳定性从而导致肥胖模型的成模时间、成模效果及模型稳定性的差异问题，提供一种采用高品质纯化原材料、配比合理、饲料成分明确的用于构建营养性肥胖症动物模型的纯化饲料及其制备方法和应用。

为了达到上述目的，本发明的技术方案为：

一种用于构建营养性肥胖症动物模型的高脂纯化饲料，由以下重量份的原料制成：

酪蛋白200-300份、胱氨酸3-5份、麦芽糊精100-150份、蔗糖50-100份、纤维素30-80份、豆油20-50份、猪油250-360份、矿物盐预混料10-15份、磷酸氢钙10-20份、碳酸钙5-10份、柠檬酸钾15-30份、维生素预混料10-15份、酒石酸胆碱2-4份、食品级蓝染剂0.06-0.08份。

上述用于构建营养性肥胖症动物模型的高脂纯化饲料中，优选的，由以下重量份的原料制成：

酪蛋白250-300份、胱氨酸3-5份、麦芽糊精120-150份、蔗糖70-100份、纤维素60-80份、豆油20-40份、猪油300-360份、矿物盐预混料10-15份、磷酸氢钙15-20份、碳酸钙5-10份、柠檬酸钾15-25份、维生素预混料10-15份、酒石酸胆碱2-4份、食品级蓝染剂0.06-0.08份。

上述用于构建营养性肥胖症动物模型的高脂纯化饲料中，可选的，由以下重量份的原料制成：

酪蛋白200份、胱氨酸5份、麦芽糊精100份、蔗糖50份、纤维素80份、豆油50份、猪油360份、矿物盐预混料10份、磷酸氢钙20份、碳酸钙10份、柠檬酸钾30份、维生素预混料15份、酒石酸胆碱4份、食品级蓝染剂0.08份。

酪蛋白300份、胱氨酸3份、麦芽糊精150份、蔗糖100份、纤维素30份、豆油20份、猪油250份、矿物盐预混料15份、磷酸氢钙10份、碳酸钙5份、柠檬酸钾15份、维生素预混料10份、酒石酸胆碱2份、食品级蓝染剂0.06份。

酪蛋白250份、胱氨酸4份、麦芽糊精135份、蔗糖75份、纤维素55份、豆油35份、猪油305份、矿物盐预混料12份、磷酸氢钙15份、碳酸钙7份、柠檬酸钾23份、维生素预混料12份、酒石酸胆碱3份、食品级蓝染剂0.07份。

上述用于构建营养性肥胖症动物模型的高脂纯化饲料中，最优的，由以下重量份的原料制成：

酪蛋白290份、胱氨酸4份、麦芽糊精131份、蔗糖89份、纤维素65份、豆油32份、猪油317份、矿物盐预混料13份、磷酸氢钙17份、碳酸钙7份、柠檬酸钾21份、维生素预混料13份、酒石酸胆碱3份、食品级蓝染剂0.07份。

上述用于构建营养性肥胖症动物模型的高脂纯化饲料中，所述矿物盐预混料由以下重量份的原料制成：

氯化钠250-260份、氧化镁40-50份、硫酸镁250-260份、钼酸铵0.1-1份、硫酸铬钾0.5-2份、碱式碳酸铜1-2份、柠檬酸铁20-25份、碳酸锰10-15份、碘化钾0.02-0.04份、氟化钠0.1-0.3份、亚硒酸钠0.02-0.04份、碱式碳酸锌2-3份和蔗糖390-400份。

上述用于构建营养性肥胖症动物模型的高脂纯化饲料中，优选的，所述矿物盐预混料由以下重量份的原料制成：

氯化钠259份、氧化镁42份、硫酸镁258份、钼酸铵0.3份、硫酸铬钾2份、碱式碳酸铜1份、柠檬酸铁22份、碳酸锰13份、碘化钾0.03份、氟化钠0.2份、亚硒酸钠0.03份、碱式碳酸锌2份和蔗糖397份。

上述用于构建营养性肥胖症动物模型的高脂纯化饲料中，所述维生素预混料由以下重量份的原料制成：

维生素A 10-15份、维生素D3 15-25份、维生素E 320-340份、维生素K 4-8份、生物素1-3份、叶酸15-25份、烟酸250-350份、泛酸钙120-180份、维生素B1 55-65份、维生素B2 55-65份、维生素B6 65-75份、维生素B12 0.05-0.15份和蔗糖98900-99200份。

上述用于构建营养性肥胖症动物模型的高脂纯化饲料中，优选的，所述维生素预混料由以下重量份的原料制成：

维生素A 12份、维生素D3 20份、维生素E 336份、维生素K 5份、生物素2份、叶酸20份、烟酸300份、泛酸钙160份、维生素B1 60份、维生素B2 60份、维生素B6 70份、维生素B12 0.1份和蔗糖98955份。

一种上述用于构建营养性肥胖症动物模型的高脂纯化饲料的制备方法，包含步骤如下：

(1)配制矿物盐预混料和维生素预混料；

(2)称取特定重量份的各原料，将胱氨酸、矿物盐预混料、磷酸氢钙、碳酸钙、柠檬酸钾、维生素预混料、酒石酸胆碱和食品级蓝染剂进行预混；

(3)除豆油、猪油以外的各原料投入混合机中混合，加入豆油、猪油，再加入适量水，混合均匀、冷却；

(4)将上述冷却后的混料挤压成颗粒，然后包装、灭菌。

上述的制备方法中，所述步骤(3)中将猪油加热完全溶解后，将豆油混入猪油中，均匀的加入混合机。

上述的制备方法中，所用原材料使用前进行营养和卫生指标的检测，过80-100目筛，选取符合使用要求的备用。

上述高脂纯化饲料在构建营养性肥胖症动物模型中的用途。

上述用途中，所述动物为啮齿类动物。

上述用途中，所述啮齿类动物为大鼠或小鼠。

与现有技术相比，本发明具有以下优点：

1、本发明的用于构建营养性肥胖症动物模型的高脂纯化饲料，采用纯化原料，成分清楚，配比合理，质量稳定，效果显著，重复性好。

2、本发明的用于构建营养性肥胖症动物模型的高脂纯化饲料，加强了饲料中的油脂含量，同时保证其它营养指标达到相应标准，蛋白和脂肪具有特定的水平20-30％蛋白和30-40％脂肪，能够满足啮齿类动物营养性肥胖症模型的构建，形态和气味适合采食，饲料的微生物、重金属、农残等指标均符合国家标准GB14924.1-2001和GB14924.2-2001。

附图说明

下面将通过附图和具体实例做进一步说明。

图1是模型组和对照组的体重对比曲线图；

图2是模型组和对照组体内脂肪含量分布对比柱形图；

图3是模型组和对照组血清胆固醇、低密度脂蛋白、甘油三酯含量对比柱形图；

图4是模型组和对照组血清游离脂肪酸含量对比柱形图；

图5是模型组和对照组葡萄糖耐受实验对比曲线图；

图6是模型组和对照组胰岛素拮抗实验对比曲线图；

图7是模型组和对照组解剖对比图；

上述图中，*为P＜0.05，差异显著。

具体实施方式

实施例1

饲料配制加工

所用原材料使用前进行营养和卫生指标的检测，过80-100目筛，选取符合使用要求的备用。

取以下重量份的原料配制矿物盐预混料：

取以下重量份的原料配制维生素预混料：

高脂纯化饲料的制备：

1)、称量：按照以下重量份称量原料：酪蛋白290份、胱氨酸4份、麦芽糊精131份、蔗糖89份、纤维素65份、豆油32份、猪油317份、矿物盐预混料13份、磷酸氢钙17份、碳酸钙7份、柠檬酸钾21份、维生素预混料13份、酒石酸胆碱3份、食品级蓝染剂0.07份。

2)、预混：将比例较少的胱氨酸、矿物盐预混料、磷酸氢钙、碳酸钙、柠檬酸钾、维生素预混料、酒石酸胆碱和食品级蓝染剂进行预混；

3)、混料：将除豆油、猪油以外的原材料投入混合机中混合5分钟；

4)、加油：将猪油在80℃的条件下加热至完全溶解，然后将豆油混入猪油中，均匀的加入粉料中混合5分钟；

5)、加水：加入2重量份的清洁水充分混合5分钟；

6)、晾料：将混合好的饲料摊开放置于干净容器中冷却至猪油充分凝固；

7)、制粒：小型制粒机将混合好的粉料挤压成直径12mm的圆柱状颗粒；

8)、包装、灭菌、制得。

实施例2

饲料配制加工

取以下重量份的原料配制矿物盐预混料：

氯化钠260份、氧化镁50份、硫酸镁250份、钼酸铵1份、硫酸铬钾0.5份、碱式碳酸铜2份、柠檬酸铁25份、碳酸锰10份、碘化钾0.04份、氟化钠0.3份、亚硒酸钠0.04份、碱式碳酸锌2份和蔗糖400份。

取以下重量份的原料配制维生素预混料：

维生素A 15份、维生素D3 25份、维生素E 320份、维生素K 8份、生物素1份、叶酸15份、烟酸250份、泛酸钙120份、维生素B1 65份、维生素B2 65份、维生素B6 75份、维生素B12 0.05份和蔗糖99200份。

高脂纯化饲料的制备：

1)、称量：按照以下重量份称量原料：酪蛋白200份、胱氨酸5份、麦芽糊精100份、蔗糖50份、纤维素80份、豆油50份、猪油360份、矿物盐预混料10份、磷酸氢钙20份、碳酸钙10份、柠檬酸钾30份、维生素预混料15份、酒石酸胆碱4份、食品级蓝染剂0.08份。

3)、混料：将除豆油、猪油以外的原材料投入混合机中混合3分钟；

4)、加油：将猪油在75℃的条件下加热至完全溶解，然后将豆油混入猪油中，均匀的加入粉料中混合5分钟；

5)、加水：加入1重量份的清洁水充分混合3分钟；

7)、制粒：小型制粒机将混合好的粉料挤压成颗粒；

8)、包装、灭菌、制得。

实施例3

饲料配制加工

取以下重量份的原料配制矿物盐预混料：

氯化钠250份、氧化镁40份、硫酸镁260份、钼酸铵0.1份、硫酸铬钾1份、碱式碳酸铜1.5份、柠檬酸铁20份、碳酸锰15份、碘化钾0.02份、氟化钠0.3份、亚硒酸钠0.02份、碱式碳酸锌3份和蔗糖390份。

取以下重量份的原料配制维生素预混料：

维生素A 10份、维生素D3 15份、维生素E 340份、维生素K 4份、生物素3份、叶酸25份、烟酸350份、泛酸钙180份、维生素B1 55份、维生素B2 55份、维生素B6 65份、维生素B12 0.07份和蔗糖98900份。

高脂纯化饲料的制备：

1)、称量：按照以下重量份称量原料：酪蛋白300份、胱氨酸3份、麦芽糊精150份、蔗糖100份、纤维素30份、豆油20份、猪油250份、矿物盐预混料15份、磷酸氢钙10份、碳酸钙5份、柠檬酸钾15份、维生素预混料10份、酒石酸胆碱2份、食品级蓝染剂0.06份。

3)、混料：将除豆油、猪油以外的原材料投入混合机中混合4分钟；

4)、加油：将猪油在85℃的条件下加热至完全溶解，然后将豆油混入猪油中，均匀的加入粉料中混合5分钟；

5)、加水：加入3重量份的清洁水充分混合4分钟；

8)、包装、灭菌、制得。

实施例4

饲料配制加工

取以下重量份的原料配制矿物盐预混料：

氯化钠255份、氧化镁45份、硫酸镁255份、钼酸铵0.5份、硫酸铬钾2份、碱式碳酸铜1.5份、柠檬酸铁23份、碳酸锰14份、碘化钾0.03份、氟化钠0.2份、亚硒酸钠0.03份、碱式碳酸锌2份和蔗糖395份。

取以下重量份的原料配制维生素预混料：

维生素A 13份、维生素D3 17维生素E 330、维生素K 7、生物素2、叶酸18、烟酸300份、泛酸钙150份、维生素B1 61份、维生素B2 59份、维生素B672份、维生素B12 0.12份和蔗糖99000份。

高脂纯化饲料的制备：

1)、称量：按照以下重量份称量原料：酪蛋白250份、胱氨酸4份、麦芽糊精135份、蔗糖75份、纤维素55份、豆油35份、猪油305份、矿物盐预混料12份、磷酸氢钙15份、碳酸钙7份、柠檬酸钾23份、维生素预混料12份、酒石酸胆碱3份、食品级蓝染剂0.07份。

4)、加油：将猪油在90℃的条件下加热至完全溶解，然后将豆油混入猪油中，均匀的加入粉料中混合5分钟；

5)、加水：加入2重量份的清洁水充分混合5分钟；

8)、包装、灭菌、制得。

实施例5实验效果说明

1.实验方法

C57BL/6J雄性小鼠200只，随机分为两组，模型组和对照组，每组100只，从7周龄开始模型组饲喂本发明的高脂纯化饲料(实施例1制备)，对照组饲喂普通饲料，至22周龄结束实验；每周称取体重；16周龄时检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、低密度脂蛋白(LDL-c)；18周龄做口服葡萄糖耐受实验(OGTT)；19周龄时解剖做脂肪分布分析；21周龄时做胰岛素拮抗实验(ITT)。

2.结果处理

实验数据采用SPSS19.0软件进行统计分析，数值以平均数±标准差(x±SD)表示，两组间比较用t检验，显著水平为P＜0.05。

3.结果分析

经过10-16周左右的高脂纯化饲料饲喂，模型组体重及体脂含量显著高于对照组(图1、2)；模型组的TC、LDL-c、FFA显著高于对照组(图3、4)；OGTT及ITT表明，模型组具有更高的糖耐量并且产生了胰岛素拮抗(图5、6)。模型组表现出稳定的体重和体脂升高、血脂升高、具有更高的糖耐量和胰岛素拮抗，这些显著特征与人类肥胖症的特征一致。通过饲喂本配方的高脂纯化饲料C57小鼠食源性肥胖模型构建成功(图7)，说明我们设计的高脂纯化饲料是可用于啮齿类动物构建稳定有效肥胖症动物模型的优质饲料。

Claims

1.一种用于构建营养性肥胖症动物模型的高脂纯化饲料，其特征在于，由以下重量份的原料制成：

2.根据权利要求1所述的高脂纯化饲料，其特征在于，由以下重量份的原料制成：

3.根据权利要求2所述的高脂纯化饲料，其特征在于，由以下重量份的原料制成：

4.根据权利要求1-3所述的高脂纯化饲料，其特征在于，所述矿物盐预混料由以下重量份的原料制成：

氯化钠250-260份、氧化镁40-50份、硫酸镁250-260份、钼酸铵0.1-1份、硫酸铬钾0.5-2份、碱式碳酸铜1-2份、柠檬酸铁20-25份、碳酸锰10-15份、碘化钾0.02-0.04份、氟化钠0.1-0.3份、亚硒酸钠0.02-0.04份、碱式碳酸锌2-3份和蔗糖390-400份，优选：氯化钠259份、氧化镁42份、硫酸镁258份、钼酸铵0.3份、硫酸铬钾2份、碱式碳酸铜1份、柠檬酸铁22份、碳酸锰13份、碘化钾0.03份、氟化钠0.2份、亚硒酸钠0.03份、碱式碳酸锌2份和蔗糖397份。

5.根据权利要求1-4任一项所述的高脂纯化饲料，其特征在于，所述维生素预混料由以下重量份的原料制成：

维生素A 10-15份、维生素D315-25份、维生素E 320-340份、维生素K 4-8份、生物素1-3份、叶酸15-25份、烟酸250-350份、泛酸钙120-180份、维生素B155-65份、维生素B255-65份、维生素B665-75份、维生素B120.05-0.15份和蔗糖98900-99200份，优选：维生素A 12份、维生素D320份、维生素E 336份、维生素K 5份、生物素2份、叶酸20份、烟酸300份、泛酸钙160份、维生素B160份、维生素B260份、维生素B670份、维生素B120.1份和蔗糖98955份。

6.一种权利要求1-5任一项所述的用于构建营养性肥胖症动物模型的高脂纯化饲料的制备方法，其特征在于，包含步骤如下：

(1)配制矿物盐预混料和维生素预混料；

(4)将上述冷却后的混料挤压成颗粒，然后包装、灭菌。

7.根据权利要求6所述的用于构建营养性肥胖症动物模型的高脂纯化饲料的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中将猪油加热完全溶解后，将豆油混入猪油中，均匀的加入混合机。

8.权利要求1-5任一项所述高脂纯化饲料在构建营养性肥胖症动物模型中的用途。

9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，所述动物为啮齿类动物。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，所述啮齿类动物为大鼠或小鼠。