CN104860912B - 一种二聚色酮类化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种二聚色酮类化合物及其制备方法和应用，所述二聚色酮类化合物是从傣族药用植物豆科腊肠树（Cassia fistula）的干燥树皮中分离得到，是第一个通过C‑14和C‑5'连接的新颖骨架类型的二聚体色酮，命名为腊肠素B，英文名为Fistulain B，其分子式为C26H24O7，具有下述结构：制备方法是以傣族药用植物豆科腊肠树（Cassia  fistula）的干燥树皮为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、MCI脱色、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤而分离得到。经细胞毒活性实验，该二聚色酮类化合物对部分肿瘤细胞株具有较好的细胞毒活性；同时，对烟草花叶病毒也显示了一定的抑制作用。本发明化合物结构新颖，具有较好的生物活性，可作为抗癌药物和抗烟草花叶病毒的先导化合物。

Description

一种二聚色酮类化合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于民族特色药用植物有效成分提取、分离和结构鉴定技术领域，具体涉及一种二聚色酮类化合物及其制备方法和应用。
背景技术
豆科决明属植物腊肠树（Cassia fistula），是泰国的国花，原产于南亚南部，分布在缅甸、斯里兰卡、印度以及中国大陆的南部、西南部等地，生长于海拔1,000米的地区。在中国傣族民间广泛用于皮肤感染、肥胖症、周期性发热以及肿瘤病等的治疗。而腊肠树在傣语中又叫“锅拢良”，在云南省西双版纳州主治止血，通便，退热。据报道，该植物的不同部位具有抗糖尿病、抗肿瘤、抗炎、抗病毒、抗菌、抗氧化的活性。本发明从腊肠树中分离得到的第一个通过C-14–C-5'连接的新颖骨架类型的二聚体色酮，且该化合物具有显著的细胞毒活性和抗病毒活性。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种二聚色酮类化合物；第二目的在于提供所述二聚色酮类化合物的制备方法；第三目的在于提供所述二聚色酮类化合物在制备抗癌和抗烟草花叶病毒药物中的应用。
本发明的第一目的是这样实现的，所述的二聚色酮类化合物是从豆科植物腊肠树（Cassia fistula）的干燥树皮中分离得到，其分子式为C26H24O7，具有下述结构：
该化合物为黄色胶状物，命名为腊肠素B，英文名为Fistulain B。
本发明的第二目的是这样实现的，所述二聚色酮类化合物的制备方法，是以豆科植物腊肠树（Cassia fistula）的干燥树皮为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、MCI脱色、硅胶柱层析、高效液相色谱制备分离步骤，具体为：
A、浸膏提取：将豆科植物腊肠树（Cassia fistula）的树皮粉碎到20~40目，用有机溶剂超声提取2~5次，每次30~60分钟，合并提取液、过滤，减压浓缩提取液，静置，滤除沉淀物，浓缩成浸膏a；
B、有机溶剂萃取：在浸膏a中加入重量比1~2倍量的水，然后用与水等体积的有机溶剂萃取3~5次，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏b；
C、MCI脱色：在浸膏b加入重量比3~5倍量的甲醇水溶解，上MCI柱，用80%-90%甲醇水洗脱，合并有机相，减压浓缩成浸膏c;
D、硅胶柱层析：浸膏c上硅胶柱层析，装柱硅胶为160~200目，用量为浸膏c重量6~10倍量；以体积配比为1:0~0:1的氯仿和丙酮混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；
E、高效液相色谱分离：将以体积含量为50~90%石油醚－丙酮溶液洗脱得到的洗脱液经高效液相色谱分离纯化，即得所述的二聚色酮类化合物。
以上述方法制备的二聚色酮类化合物的结构是通过以下方法鉴定出来的：
本发明化合物为黄色胶状物；紫外光谱（溶剂为甲醇），λ max (log ε ）：218(4.38), 252 (3.74), 278 (3.94), 358 (3.57) nm；红外光谱（溴化钾压片）ν max ：3460, 3172, 2957, 1725, 1650, 1612, 1560, 1438, 1329, 1158, 1046, 963, 782cm–1；高分辨质谱（HRESIMS）显示本发明化合物准分子离子峰m/z 471.1427 [M+Na]+（计算值471.1414），结合13C 和1H NMR谱（图1和图2，碳谱氢谱数据归属见表1）给出其分子式为C26H24O7，不饱和度为15。1H NMR（CDCl3，500 MHz）和13C NMR（CDCl3，125 MHz）数据，见表1。1HNMR谱（图2）中显示了4个甲基信号（δ H 1.12, d, H3-12', 13'; 2.28, s, H3-13; 3.81,s, OMe），2个亚甲基信号（δ H 3.29, s, H2-14; 4.20, s, H2-11），2个单芳香质子信号（δ H6.20, s, H-3; 6.11, s, H-3'），1个1,2,3,5-四取代苯环信号（δ H 6.58, d, J = 1.3Hz, H-6; 6.65, d, J = 1.3 Hz, H-8），1个1,2,3,4-四取代苯环信号（δ H 6.88, d, J =8.6 Hz, H-6'; 7.00, d, J = 8.6 Hz, H-7'）。在碳谱和DEPT谱（图1）中观测到了26个碳原子信号，其中4个甲基，2个亚甲基，7个芳香次甲基和13个季碳信号（包括了3个羰基和6个含氧季碳信号）。其中，3个羰基和10个双键碳占用了8个不饱和度，所以该分子是一个高度芳香化的四环色酮二聚体。以上的波谱数据结合之前从决明属中分离得到的化合物，初步推测，腊肠素B是一个由两个不同的C13色酮化合物组成的异二聚体色酮衍生物。它由A和B片段构成。
根据A片段（O-1 to C-14）的特征信号为一个C13骨架的色酮类化合物（A和B环）。这个推测通过HMBC相关得到证实，即H-3与C-2/C-4/C-10相关，H-6与C-8/C-10相关，H-8与C-6/C-10相关（图3）。其次，还有一个丙酮基和一个羟基基团分别连接在C-5和C-7上，这也通过H2-11与C-6/C-10相关，以及7-OH与C-6/C-7/C-8相关得到确证。这些数据说明了化合物的A片段为一个5-丙酮基-7-羟基-2-色酮衍生物，主要区别是C-14位由原来的甲基变成了亚甲基，推测A片段通过C-14与B片段连接起来。
余下的13个碳原子隶属于B片段。HMBC相关给出了B片段的大致结构为8-甲氧基-2-异丙基色酮（环C和D）。最终，通过H2-14与C-5'/C-6'/C-10'的HMBC相关，确定了A和B片段的连接顺序为C-14和C-5'直接相连。至此，该二聚色酮类化合物的结构得以确定。
表1 化合物的1H和13C NMR数据（溶剂为CDCl3）(125 and 500 MHz)
本发明的第三目的是这样实现的，所述的二聚色酮类化合物在制备抗癌和抗病毒药物中的应用。
本发明化合物是首次从腊肠树树皮中分离出来的，通过核磁共振和质谱测定方法确定为二聚色酮类化合物，并表征了其具体结构。以本发明化合物为原料，对NB4, A549和PC3细胞株具有较好的细胞毒活性，IC50值分别达8.2、5.6、和6.8μ M。经对抗烟草花叶病毒的实验，其相对抑制率在20μM下达到25.6%，略低于阳性对照品南宁霉素的相对抑制率（30.5%），其IC50值为62.9μ M，活性略低于阳性对照品南宁霉素IC50为52.4μ M，说明化合物具有很好的抗烟草花叶病毒活性。本发明化合物结构新颖且活性显著，可作为抗癌或抗病毒药物的先导性化合物，具有一定的应用价值。
附图说明
图1为化合物腊肠素B的核磁共振碳谱（13C NMR）；
图2为化合物腊肠素B的核磁共振氢谱（1H NMR）；
图3化合物腊肠素B的关键HMBC相关。
具体实施方式
下面结合附图对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或改进，均落入本发明的保护范围。
本发明所述的二聚色酮类化合物，是从豆科植物腊肠树（Cassia fistula）的干燥树皮中分离得到，其分子式为C26H24O7，
命名为腊肠素B，英文名为Fistulain B。
本发明所述二聚色酮类化合物的制备方法，是以豆科植物腊肠树（Cassiafistula）的干燥树皮为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、MCI脱色、硅胶柱层析、高效液相色谱制备分离步骤，具体为：
A、浸膏提取：将豆科植物腊肠树（Cassia fistula）的树皮粉碎到20~40目，用有机溶剂超声提取2~5次，每次30~60分钟，合并提取液、过滤，减压浓缩提取液，静置，滤除沉淀物，浓缩成浸膏a；
B、有机溶剂萃取：在浸膏a中加入重量比1~2倍量的水，然后用与水等体积的有机溶剂萃取3~5次，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏b；
C、MCI脱色：在浸膏b加入重量比3~5倍量的甲醇水溶解，上MCI柱，用80%-90%甲醇水洗脱，合并有机相，减压浓缩成浸膏c;
D、硅胶柱层析：浸膏c上硅胶柱层析，装柱硅胶为160~200目，用量为浸膏c重量6~10倍量；以体积配比为1:0~0:1的氯仿和丙酮混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；
E、高效液相色谱分离：将以体积含量为50~90%石油醚－丙酮溶液洗脱得到的洗脱液经高效液相色谱分离纯化，即得所述的二聚色酮类化合物。
所述A步骤的有机溶剂为70~100%的丙酮、90~100%的乙醇或90~100%的甲醇。
所述B步骤的有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯乙醚或石油醚。
所述D步骤中浸膏c在经硅胶柱层析前，用重量比1.5~3倍量的丙酮或者甲醇溶解，然后用浸膏重0.8~1.2倍的80~100目硅胶拌样。
所述D步骤的氯仿和丙酮混合有机溶剂的体积配比为20:1, 9:1, 8:2, 7:3, 6:4和 1:1。
所述E步骤的高效液相色谱分离纯化是以40~70%的甲醇为流动相，流速10~14ml/min，以21.2´ 250 mm，5mm 的Zorbax PrepHT GF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254nm，每次进样10~100mL，收集10~40min的色谱峰，多次累加后蒸干。
本发明二聚色酮类化合物在制备抗癌药物中的应用。
本发明二聚色酮类化合物在制备抗烟草花叶病毒药物中的应用。
本发明所述的决明属植物不受地区和品种限制，均可以实现本发明。
实施例1
取干燥豆科植物决明属腊肠树（Cassia fistula）的树皮4.4 kg，粗粉碎至30目，用70%的丙酮超声提取4次，每次60分钟，提取液合并；提取液过滤，减压浓缩至体积的1/4；静置，滤除沉淀物，浓缩成120g的浸膏a；在浸膏a中加入250g水，用与水等体积的氯仿萃取5次，合并萃取相，减压浓缩成80g浸膏b；浸膏b用MCI装柱，在浸膏b中加入240g的80%甲醇水溶解，然后上柱，用90%甲醇水2至6升洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得到62g浸膏c；在浸膏c中加入120g的丙酮溶解，然后加入100目硅胶62g拌样，拌样后，用200目硅胶400g装柱；用体积比分别为20:1, 9:1, 8:2, 7:3, 6:4和 1:1的氯仿-丙酮混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分，得到6个部分A-F，其中，对收集到的样品B部分12g，再重复硅胶柱层析，用体积比9:1-1:2的石油醚-丙酮混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分，得到6个部分B1-B6，其中第B3部分，即7:3部分约1.2 g, 再以58%的甲醇为流动相，流速10 ml/min，21.2´250mm，5mm 的ZorbaxPrepHT GF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254 nm，每次进样50mL，收集30min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述新化合物。
实施例2
取干燥豆科植物决明属腊肠树（Cassia fistula）的树皮10kg，粗粉碎至40目，用80%的甲醇冷浸提取4次，每次3天，提取液合并；提取液过滤，减压浓缩至体积的1/4；静置，滤除沉淀物，浓缩成300g浸膏a；在浸膏a中加入350g水，用与水等体积的乙酸乙酯萃取5次，合并萃取相，减压浓缩成210g浸膏b；浸膏b用MCI装柱，在浸膏b中加入600g的80%甲醇水溶解，然后上柱，用90%甲醇水5至15升洗脱，收集洗脱液，减压浓缩得到150g浸膏c；浸膏c中加入300g的丙酮溶解，然后加入100目硅胶150g拌样，用200目硅胶1Kg装柱，拌样后上柱；用体积比分别为20:1, 9:1, 8:2, 7:3, 6:4和 1:1的氯仿-丙酮混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分，得到6个部分A-F，其中，对收集到的样品B部分32g，再重复硅胶柱层析，用体积比9:1-1:2的石油醚-丙酮混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分，得到6个部分B1-B6，其中第B3部分，即7:3部分约2.8 g, 再以65%的甲醇为流动相，流速10 ml/min，21.2´250mm，5mm 的ZorbaxPrepHT GF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254 nm，每次进样80mL，收集18min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述新化合物。
实施例3
取实施例1制备的化合物，为黄色胶状物；
测定方法为：用核磁共振，结合其它波谱技术鉴定结构。
（1）紫外光谱（溶剂为甲醇），λ max (log ε ）：218 (4.38), 252 (3.74), 278(3.94), 358 (3.57) nm；
（2）红外光谱（溴化钾压片）ν max ： 3460, 3172, 2957, 1725, 1650, 1612,1560, 1438, 1329, 1158, 1046, 963, 782 cm–1；
（3）HRESIMS显示本发明化合物准分子离子峰m/z 471.1427 [M+Na]+（计算值为471.1414），结合13C 和1H NMR谱（图1和图2，碳谱氢谱数据归属见表1）给出其分子式为C26H24O7，不饱和度为15。1H NMR（CDCl3，500 MHz）和13C NMR（CDCl3，125 MHz）数据，见表1。1HNMR谱（图2）中显示了4个甲基信号（δ H 1.12, d, H3-12', 13'; 2.28, s, H3-13; 3.81,s, OMe），2个亚甲基信号（δ H 3.29, s, H2-14; 4.20, s, H2-11），2个单芳香质子信号（δ H6.20, s, H-3; 6.11, s, H-3'），1个1,2,3,5-四取代苯环信号（δ H 6.58, d, J = 1.3Hz, H-6; 6.65, d, J = 1.3 Hz, H-8），1个1,2,3,4-四取代苯环信号（δ H 6.88, d, J =8.6 Hz, H-6'; 7.00, d, J = 8.6 Hz, H-7'）。在碳谱和DEPT谱（图1）中观测到了26个碳原子信号，其中4个甲基，2个亚甲基，7个芳香次甲基和13个季碳信号（包括了3个羰基和6个含氧季碳信号）。其中，3个羰基和10个双键碳占用了8个不饱和度，所以该分子是一个高度芳香化的四环色酮二聚体。以上的波谱数据结合之前从决明属中分离得到的化合物，初步推测，腊肠素B是一个由两个不同的C13色酮化合物组成的异二聚体色酮衍生物。它由A和B片段构成。
根据A片段（O-1 to C-14）的特征信号为一个C13骨架的色酮类化合物（A和B环）。这个推测通过HMBC相关得到证实，即H-3与C-2/C-4/C-10相关，H-6与C-8/C-10相关，H-8与C-6/C-10相关（图3）。其次，还有一个丙酮基和一个羟基基团分别连接在C-5和C-7上，这也通过H2-11与C-6/C-10相关，以及7-OH与C-6/C-7/C-8相关得到确证。这些数据说明了化合物的A片段为一个5-丙酮基-7-羟基-2-色酮衍生物，主要区别是C-14位由原来的甲基变成了亚甲基，推测A片段通过C-14与B片段连接起来。
余下的13个碳原子隶属于B片段。HMBC相关给出了B片段的大致结构为8-甲氧基-2-异丙基色酮（环C和D）。最终，通过H2-14与C-5'/C-6'/C-10'的HMBC相关，确定了A和B片段的连接顺序为C-14和C-5'直接相连。至此，该二聚色酮类化合物结构得以确定，并命名为腊肠素B。
表1 化合物的1H和13C NMR数据（溶剂为CDCl3）(125 and 500 MHz)
No. 13C 1H
2 164.8 s
3 114.2 d 6.20, s
4 180.5 s
5 138.3 s
6 120.5 d 6.58, d (1.3)
7 164.0 s
8 103.3 d 6.65, d (1.3)
9 161.4 s
10 115.6 s
11 50.8 t 4.20, s
12 208.4 s
13 31.0 q 2.28, s
14 36.5 t 3.29, s
2′ 168.2 s
3′ 106.5 d 6.11, s
4′ 181.5 s
4a′
5′ 132.0 s
6′ 125.6 d 6.88, d (8.6)
7′ 122.5 d 7.00, d (8.6)
8′ 152.6 s
8a′
9′ 148.8 s
10′ 123.1 s
11′ 33.1 d 2.66, q (6.8)
12′ 18.7 q 1.12, d (6.8)
13' 18.7 q 1.12, d (6.8)
7-OH 10.17, br s
8′-OMe 55.9 q 3.81, s
实施例4
取实施例2制备的化合物，为黄色胶状物。测定与实施例3相同，确认实施例2制备的化合物为所述二聚色酮类化合物——腊肠素B。
实施例5
取实施例1和2所制备的任一二聚色酮类化合物腊肠素B进行细胞毒活性检测试验，试验情况如下：
细胞株: 白血病细胞(NB4)、肺癌细胞(A549)、人神经母细胞瘤细胞(SHSY5Y)、前列腺癌细胞(PC3)、乳腺癌细胞(MCF7) 均由中国科学院上海药物研究所提供。
实验设计: 以上细胞与不同浓度化合物温育72小时, 每株细胞的实验均重复一次, 用两次实验的结果进行数据处理, 采用改良MTT 法及SRB 法评价化合物对细胞增殖的抑制程度, 计算抑制率, 根据抑制率采用Logit方法计算IC50, 比较化合物的体外抗肿瘤活性。
细胞的增殖抑制率 = (空白对照OD值-加药孔的OD值) /空白对照OD值×100%。
(a) 改良MTT 法
取处于对数生长期的悬浮细胞, 将细胞浓度调整为4×104/ml, 加入96 孔培养板, 90 µ L/孔。阳性对照为顺铂, 用生理盐水溶解。每孔分别加入10μl 不同浓度的样品(1号试液-5号试液)。加样组及对照组均设4 个复孔, 加样组、阳性对照组的高浓度组还设培养基的加药平行孔, 每块板均设有4 个空白对照孔 (仅加培养基)。样品的终浓度分别为10-2、10-1、1、10 及102 µ g/mL, 相应DMSO的终浓度分别为0.1%、0.01%、0.001%、0.0001%、0.00001%。样品在终浓度102 µ g/mL时, 用0.1% DMSO作为溶剂对照, 其余浓度均用生理盐水作阴性对照。阳性对照药顺铂的终浓度为10-1、1、10 µ g/mL。细胞在37℃, 5% CO2 培养箱中分别孵育48h 后, 加入MTT (5 mg/ml, Sigma), 10 µ L/孔。继续培养4 h后, 加入三联液 [10% SDS – 5%异丁醇 – 0.012mol/L HCL (w/v/v)], 100 µ L/孔, 放置过夜后用酶标仪在570 nm、630 nm双波长下测定各孔的OD 值。
(b) SRB 法
取处于对数生长期的贴壁细胞株, 用25%胰酶常规消化后, 再用15%小牛血清完全RPMI-1640培养基将细胞浓度调整为5×104/mL, 加入96 孔培养板, 90 μ L/孔。细胞在37℃, 5% CO2培养箱中分别孵育24h 后加入阳性对照、阴性对照以及受试样品(各受试浓度同上MTT 法，10 μ L/孔)，样品的终浓度分别为10-2、10-1、1、10、102 μ g/mL, 相应DMSO 的终浓度分别为0.1%、0.01%、0.001%、0.0001%、0.00001%。样品在终浓度102 μ g/mL时用0.1%DMSO 作为溶剂对照, 其余浓度均用生理盐水作阴性对照。阳性对照药顺铂的终浓度为10-1、1、10 μg/mL, 阴性对照为等体积的生理盐水。加样组及对照组均设4复孔, 加样组、阳性对照组的高浓度组还设培养基的加药平行孔, 每块板均设有4个空白对照孔 (仅加培养基)。将96 孔培养板置于37℃, 5% CO2 培养箱中孵育 (细胞与样品作用) 48h 后, 加入4℃、50%的TCA (三氯乙酸) 50 μ L/孔。加完TCA后, 将96 孔培养板置于4℃孵育1小时, 取出培养板, 轻轻倾去板内液体。用自来水轻轻冲洗5遍 (将自来水由烧杯中轻轻倒入板中,轻晃后再将水倒去), 置于空气中风干至不见水痕。然后加入配制好的0.4% SRB (用1%乙酸稀释), 50 μ L/孔, 于室温下静置染色30分钟后倾去SRB 溶液, 用1%乙酸冲洗4遍, 以除去未与蛋白质结合的染料。置于空气中风干至无水痕后, 加入10 mM 未缓冲Tris (缓血氨酸) 溶液150 μ L/孔 (PH10, 用三蒸水配制), 将染料溶解后, 于振荡器上振荡5分钟,用酶标仪在570nm 波长下读取各孔OD 值。
(c) 实验结果
实验结果表明：经对白血病急性早幼粒NB4细胞、肺腺癌A549细胞、人骨髓神经母细胞瘤SHSY5Y细胞、人前列腺癌PC3细胞、人乳腺癌MCF7细胞的细胞毒活性实验，腊肠素B对NB4, A549和PC3细胞株具有较好的细胞毒活性，IC50值分别达8.2、5.6、和6.8 μ M。
表2 化合物腊肠素B的细胞毒活性
Compounds NB4 A549 SHSY5Y PC3 MCF7
腊肠素B 8.2 5.6 >10 6.8 >10
Taxol 0.02 0.02 0.1 0.1 0.05
实施例6
取实施例1和2所制备的任一二聚色酮类化合物进行抗烟草花叶病毒活性试验，其试验方法和结构如下：
采用半叶法，在药剂的质量浓度均为50 mg/L时对本发明化合物进行抗烟草花叶病毒活性测定。在5～6龄烤烟的植株上，选取适用于测试的叶片(叶行正常，无病无虫)，先将叶片均匀撒上细金刚砂，用毛笔将备用的烟草花叶病毒源(3.0×10-3)均匀抹在撒有金刚砂的叶片上，待所有中选的叶片接毒结束后，立即放在盛有药液的培养皿中处理20 min，取出，擦去叶片上水珠和药液，将两个半叶复原排放在铺有卫生纸保湿的玻璃缸中，并盖上玻璃盖，控温(23 ± 2)℃，放在温室自然光照射，2～3 d即可见枯斑．每个处理都设另一半叶为对照，另外设有1组为商品宁南霉素的处理作为对比，按下公式计算相对抑制率。
XI％=(CK-T)／CK×100％
X：相对抑制率(％)，CK：浸泡于清水中半片接毒叶的枯斑数(个)，T浸泡于药液中半片接毒叶的枯斑数(个)。
经对抗烟草花叶病毒的实验，其相对抑制率在20μM下达到25.6%，略低于阳性对照品南宁霉素的相对抑制率（30.5%），其IC50值为62.9 μ M，活性略低于阳性对照品南宁霉素IC50为52.4 μ M，说明化合物具有很好的抗烟草花叶病毒活性。

Claims (4)

1.一种二聚色酮类化合物，其特征在于所述二聚色酮类化合物是从豆科植物腊肠树（Cassia fistula）的干燥树皮中分离得到，命名为腊肠素B，英文名为Fistulain B，其分子式为C26H24O7，具有下述结构：
。
2.一种权利要求1所述二聚色酮类化合物的制备方法，其特征在于以豆科植物腊肠树（Cassia fistula）的干燥树皮为原料，经浸膏提取、有机溶剂萃取、MCI脱色、硅胶柱层析、高效液相色谱制备分离步骤，具体为：
A、浸膏提取：将豆科植物腊肠树（Cassia fistula）的树皮粉碎到20~40目，用有机溶剂超声提取2~5次，每次30~60分钟，合并提取液、过滤，减压浓缩提取液，静置，滤除沉淀物，浓缩成浸膏a；该步骤所述有机溶剂为70~100%的丙酮、90~100%的乙醇或90~100%的甲醇；
B、有机溶剂萃取：在浸膏a中加入重量比1~2倍量的水，然后用与水等体积的有机溶剂萃取3~5次，合并有机溶剂萃取相，减压浓缩成浸膏b；该步骤所述有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醚或石油醚；
C、MCI脱色：在浸膏b加入重量比3~5倍量的甲醇水溶液溶解，上MCI柱，用80%-90%甲醇水溶液洗脱，合并有机相，减压浓缩成浸膏c；
D、硅胶柱层析：浸膏c在经硅胶柱层析前，用重量比1.5~3倍量的丙酮或者甲醇溶解，然后用浸膏重0.8~1.2倍的80~100目硅胶拌样，将处理后的浸膏c上硅胶柱层析，装柱硅胶为160~200目，用量为浸膏c重量6~10倍量；以体积配比为20:1, 9:1, 8:2, 7:3, 6:4 和 1:1的氯仿和丙酮混合有机溶剂梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，经TLC监测，合并相同的部分；
E、高效液相色谱分离：将以体积含量为50~90%石油醚－丙酮溶液洗脱得到的洗脱液经高效液相色谱分离纯化，高效液相色谱分离纯化是以40~70%的甲醇为流动相，流速10~14ml/min，以21.2×250mm，5mm的Zorbax PrepHT GF反相制备柱为固定相，紫外检测器检测波长为254nm，每次进样10~100mL，收集10~40min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得所述的二聚色酮类化合物。
3.一种权利要求1所述的二聚色酮类化合物在制备抗NB4、A549、PC3细胞株药物中的应用。
4.一种权利要求1所述的二聚色酮类化合物在制备抗烟草花叶病毒药物中的应用。
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