CN104839377A - 老叶茶叶提取物及其在制备含片中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种老叶茶叶提取物及其在制备含片中的应用，所述老叶茶叶提取物是采用如下的方法制备的：(1)将老叶茶叶，粉碎成茶细粉，加入水，在40～80℃下过滤，收集滤液；将获得的滤液冷却至5～15℃，再次在5～15℃条件下过滤，收集滤液，(2)然后将收集的滤液，减压浓缩至浓度为1.05-1.35g/ml，上大孔树脂，用洗脱液A洗脱，再用洗脱液B洗脱，合并洗脱液；(3)将上述合并的洗脱液，减压浓缩，上大孔树脂，用洗脱液C洗脱，再用洗脱液D洗脱，合并洗脱液，减压浓缩，干燥，即得老叶茶叶提取物。本发明制备方法简单，成本低，不使用有机溶剂，该工艺绿色、无污染、易于工业化，实现了对老叶茶叶的变废为宝，为老叶茶叶新产业的发展奠定了基础。

Description

老叶茶叶提取物及其在制备含片中的应用

技术领域

本发明涉及一种老叶茶叶提取物，及其在制备含片中的应用。

背景技术

茶叶为山茶科植物茶(Camellia sinensis L.)的芽叶，具有独特的营养价值和保健功能，在东汉《神农本草》和明代《本草纲目》中均详细记载了茶叶的药用功效。现代医学研究表明，茶叶含有多种活性成分如茶多酚、茶多糖、生物碱、维生素类、矿物质、微量元素等，其中茶多酚为茶叶中有保健功能的主要成分之一。茶多酚具有清除自由基、抗氧化、抗衰老、抗癌变、防辐射、降血脂和胆固醇、抗动脉粥样硬化以及抑菌等作用。其中茶多酚在体内和体外均具有一定的抗菌和抗炎作用，尤其在抗绿脓杆菌、抑制军团杆菌、百日咳杆菌、杀灭肠道致病菌等方面具有很好的效果。近年来关于茶多酚的抗菌抗炎作用已有较多报道，有研究表明一定浓度的茶多酚可以抑制或减少牙菌斑的数量并减少口腔疾患的发生。

茶叶原产于我国，目前我国茶叶种植面积全球第一，是世界主要的茶叶出口国，在我国河南信阳以产茶而扬名，有悠久的种茶历史，发展当地茶叶是当地农民脱贫致富的骨干项目，是我国传统的重要出口创汇产业。然而目前我国茶叶资源浪费比较严重,一般只采春茶,或采少量秋茶供于茶饮品使用，对于大量的老叶茶叶都没有被利用而全部废弃。如何有效地对老叶茶叶进行开发利用，如何有效地对成分特殊的老叶茶叶进行深加工，近而变废为宝，这对于茶叶产业的发展具有重要和深远的意义。

为了进一步加强对河南信阳茶叶的深加工研究，对所采集老叶茶叶、嫩叶茶叶原料进行成分分析，结果表明老叶茶叶和嫩叶茶叶成分各异，且存在明显差异。其主要差别有：(1)通过对茶叶中主要药理成分茶多酚含量进行测定，其含量随茶树叶片的老化而减少，嫩叶中茶多酚含量约是老叶中的3倍；(2)通过对茶叶中稀土氧化物和重金属进行测定，由于常年空气污染、农药、土壤、环境等长年累月作用，致使老叶茶叶中稀土氧化物和重金属含量明显增加，老叶中稀土氧化物和重金属含量分别约为嫩叶中稀土氧化物和重金属含量的9倍和5倍；(3)通过对茶叶挥发性成分进行测定，其香味也随茶树叶片的老化而减少甚至几乎没有味道，而嫩叶茶叶其挥发性成分较多，具有浓郁茶叶香味。

稀土元素不是生命必须元素，茶叶中稀土含量的高低与土壤母质稀土含量、使用稀土肥料、空气污染、环境等因素有关，在同样的生态条件下，生长期越长，叶片越老，其对稀土元素的积累就越高，残留的超标的稀土对人类的健康构成潜在的威胁，尤其稀土元素在肝脏的蓄积性、对身体的酶系统、自身免疫能力、糖代谢、脂肪代谢等产生明显影响。在2013年第4期《瞭望》杂志在“热点观察”栏目中，有文章“茶叶稀土超标难局”中记载“最近陆续发生的茶叶稀土超标事件，把茶叶质量安全推向了舆论的风口浪尖”，确实近几年来，茶叶稀土超标问题不断暴露，严重影响了茶叶的正常销售和茶叶在消费者心中的形象，损害了我国茶叶产品尤其是种茶在全球市场上的竞争优势。

同样重金属超标严重影响了人体健康，重金属的危害也造成了我国茶叶在对外出口方面受损，重金属超标是导致出口量低的主要原因之一，加强重金属的管理和质量控制从很早以前一直是人们关注的焦点。

因此针对老叶茶叶成分的特殊性，如何有效地对老叶茶叶进行开发利用，如何有效地对老叶茶叶进行中试提取分离实行产业化，并有效解决“规模和残留”问题，这已成为摆在广大科研工作者面前的一大难题。老叶茶叶的有效开发，对于我国茶叶产业的可持续和健康发展具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种老叶茶叶提取物及其在制备含片中的应用，以满足人们的需要。

所述的老叶茶叶提取物，是采用如下的方法制备的：

(1)将老叶茶叶，粉碎成茶细粉，加入水，水的重量用量为茶叶的5-45倍，40℃～100℃下提取10-80分钟，提取1-3次，合并滤液，在40～80℃下过滤，收集滤液；将获得的滤液冷却至5～15℃，再次在5～15℃条件下过滤，收集滤液；在该温度下，降低稀土元素和重金属在滤液中的溶解度。

(2)然后将收集的滤液，减压浓缩至浓度为1.05-1.35g/ml，上大孔树脂，用洗脱液A洗脱，再用洗脱液B洗脱，合并洗脱液，所述大孔树脂为SD500型大孔树脂；

所述的洗脱液A为去离子水，所述的洗脱液B为体积浓度60～75％的乙醇溶液。

(3)将上述合并的洗脱液，减压浓缩至浓度为1.05-1.35g/ml，上大孔树脂，用洗脱液C洗脱，再用洗脱液D洗脱，合并洗脱液，减压浓缩至浓度为1.05-1.35g/ml，喷雾干燥，即得老叶茶叶提取物；所述大孔树脂为D402；

所述的洗脱液C为去离子水，所述的洗脱液D为体积浓度60～75％的乙醇溶液。

采用上述的方法制备的老叶茶叶提取物，采用《食品中污染物限制》标准中规定的方法进行检测，稀土氧化物的≤2.0mg/kg，重金属Pb的含量≤5.0mg/kg，茶多酚含量为30％以上。

《食品中污染物限制》为国家标准，国家标准号为GB2762-2005。

术语“老叶茶叶”，是指除“一芽一叶”“一芽二叶”等直接被加工成商品茶的茶叶外，大多生长2年以上的，利用率极低,常被废弃的茶树的叶子。

本发明获得的老叶茶叶提取物，可以用于制备老叶茶叶含片；

所述的老叶茶叶含片，由以下重量百分比的组分组成：

各组分重量百分比之和100％。

优选的，所述的老叶茶叶含片，由以下重量百分比的组分组成：

各组分重量百分比之和为100％。

进一步优选的，所述的老叶茶叶含片，由以下重量百分比的组分组成：

茶叶提取物22.7％，甘露醇45.4％、聚乙二醇(PEG)6000为15.2％、阿斯巴甜7.6％、柠檬酸7.6％、薄荷脑1.5％。

所述的茶叶含片的制备方法，包括如下步骤：

首先将各成分分别过100目筛，将茶叶提取物、甘露醇、聚乙二醇、阿斯巴甜、柠檬酸，混合均匀，用乙醇制成软材，然后加入浓度为35～75％的重量薄荷脑乙醇溶液，制备成为软材，18目筛制粒，50-60℃干燥1～2小时，用18目筛整粒压片，即可获得所述的茶叶含片。

本工艺采用二次过滤，首先是高温提取、高温过滤，降低茶叶原料和提取液之间的吸附，从而使茶多酚等有效物质进行充分提取，同时将茶叶提取物与茶叶原料物质能有效进行分离；再次通过低温过滤，根据各种物质间溶解度的差异，采用低温过滤，使茶多酚溶解度高的有效物质溶解在低温溶液，而将部分低温析出的稀土元素、金属元素得以过滤，通过温度调节，不仅有效提取活性成分，更能节省能源、简单易行，更适合于工业化大生产。

在本工艺中采用二次上柱，第一次上柱有效将残留稀土元素进行吸附，第二次上柱有效将残留重金属进行吸附，而茶叶提取物活性成分并未被吸附。

在本发明中，根据老叶茶叶提取物的特性将其制备为茶叶含片，开拓出一种新的产品。

本发明优点是：制备方法简单易行，成本低，不使用有机溶剂，避免加入其它特殊试剂引入的特定污染成分，该工艺绿色、无污染、易于工业化，实现了对老叶茶叶的变废为宝，实现了对老叶茶叶的新剂型开发，为老叶茶叶新产业的发展奠定了基础。

附图说明：

图1：一芽一叶照片。

图2：一芽二叶照片。

图3：茶叶老叶照片。

图4：茶叶含片照片。

具体实施方式：

实施例1老叶茶叶提取物的制备

所述的老叶茶叶提取物，是采用如下的方法制备的：

(1)将老叶茶叶，粉碎成茶细粉，加入水，水的重量用量为茶叶的45倍，100℃下提取80分钟，提取3次，合并滤液，80℃下过滤，收集滤液；将获得的滤液冷却至15℃，再次在15℃条件下过滤，收集滤液；所述的茶叶老叶见图4.

(2)将收集的滤液，减压浓缩至浓度为1.35g/ml，上大孔树脂，用洗脱液A洗脱，再用洗脱液B洗脱，合并洗脱液。所述大孔树脂为SD500型大孔树脂；所述的洗脱液A为去离子水，所述的洗脱液B为体积浓度5％的乙醇洗。

(3)将上述合并的洗脱液，减压浓缩至浓度为1.35g/ml，上大孔树脂，用洗脱液C洗脱，再用洗脱液D洗脱，合并洗脱液，减压浓缩至浓度为1.35g/ml，喷雾干燥，即得老叶茶叶提取物；所述大孔树脂为D402大孔树脂；所述的洗脱液C为去离子水，所述的洗脱液D为体积浓度75％的乙醇洗，合并洗脱液，喷雾干燥，得茶叶提取物。

采用上述的方法制备的老叶茶叶提取物，稀土氧化物的含量为2.0mg/kg以下，重金属的含量为5.0mg/kg以下；茶多酚含量为30％以上。

重金属含量测定方法参照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录，采用原子吸收分光光度法测定。

稀土氧化物含量采用等离子体-质谱仪(ICP-MS)方法测定；

茶多酚含量采用分光光度方法测定。

实施例2老叶茶叶提取物的制备

所述的老叶茶叶提取物，是采用如下的方法制备的：

(1)将老叶茶叶，粉碎成茶细粉，加入水，水的重量用量为茶叶的35倍，80℃下提取80分钟，提取2次，合并滤液，60℃下过滤，收集滤液；将获得的滤液冷却至15℃，再次在15℃条件下过滤，收集滤液；在该温度下，降低稀土元素和重金属在滤液中的溶解度。

(2)然后将收集的滤液，减压浓缩至浓度为1.21g/ml，上大孔树脂，用洗脱液A洗脱，再用洗脱液B洗脱，合并洗脱液。所述大孔树脂为SD500型大孔树脂；

所述的洗脱液A为去离子水，所述的洗脱液B为体积浓度70％的乙醇洗。

(3)将上述合并的洗脱液，减压浓缩至浓度为1.21g/ml，上大孔树脂，用洗脱液C洗脱，再用洗脱液D洗脱，合并洗脱液，减压浓缩至浓度为1.21g/ml，喷雾干燥，即得老叶茶叶提取物；所述大孔树脂为D402；

所述的洗脱液C为去离子水，所述的洗脱液D为体积浓度70％的乙醇洗，合并洗脱液，喷雾干燥，得茶叶提取物。

采用上述的方法制备的老叶茶叶提取物，稀土氧化物的含量为2.0mg/kg以下，重金属的含量为5.0mg/kg以下；茶多酚含量为38.03％。

重金属含量测定方法参照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录，采用原子吸收分光光度法测定。

稀土氧化物含量采用等离子体-质谱仪(ICP-MS)方法测定；

茶多酚含量采用分光光度方法测定。

实施例3含片制备

配方：

制备方法：

将上述各个组分分别过100目筛混合均匀，加入重量浓度为70％的薄荷脑的乙醇溶液，制备软材，过18目筛制粒，60℃干燥1小时，用18目筛整粒压片，即得。

实施例4含片制备

配方：

制备方法：

将茶叶提取物、甘露醇、PEG6000、柠檬酸和阿斯巴甜混合均匀后过100目筛，加入重量浓度为30％的薄荷脑的乙醇溶液，制备软材，过18目筛制粒，55℃干燥1小时，用18目筛整粒，压片，即得。

实施例5

配方：

茶叶提取物22.7％，甘露醇45.4％、聚乙二醇(PEG)6000为15.2％、阿斯巴甜7.6％、柠檬酸7.6％、薄荷脑1.5％。

制备方法同实施例1。

实施例6老叶茶叶提取物提取工艺单因素考察

1、实验器材

老叶茶叶(由河南信阳茶益康生物科技有限公司提供)，旋转蒸发器(上海申胜生物技术有限公司)，85-2型恒温磁力搅拌器(上海司乐仪器厂)，SJ3200超声波清洗机(上海洁净超声波设备厂)，HetoLyolab3000冷冻干燥机，循环水式多用真空泵SHB-ⅢA(上海预康科教仪器设备有限公司)，电热恒温水浴锅(上海医疗器械五厂)，GL-21M离心机(上海市离心机械研究所)，UV759紫外可见分光光度计(上海奥谱勒仪器有限公司)，5810真空冷冻离心机，真空干燥箱。Na₂CO₃(AR级，中国医药集团上海化学试剂公司)，福林酚(AR级，中国医药集团上海化学试剂公司)，没食子酸(中国生物制品检定所)。

2、提取方法

称取老叶茶叶适量，每次加水用量为茶叶的5-45倍，于恒温水浴锅中，控制温度40℃-100℃,提取1-3次，每次时间为10-80分钟，过滤提取液，减压浓缩得茶叶粗提取物。以茶多酚为检测指标，进行得率和含量的测定。

2.1提取时间的选择

精密称取茶叶粉末10g共8份，分别置8个250ml三角锥形瓶中，加水150ml，于恒温水浴中加热，温度为80℃，准确控制提取时间，分别于10min,20min,30min,40min，50min,60min,70min,80min取出，冷却，先用4层纱布过滤，将茶叶残渣过滤掉，然后再用滤纸抽滤，得澄清液体。将其减压浓缩，置真空干燥箱中，干燥后研细，备用。

2.2提取次数的选择

精密称取茶叶粉末10g共3份，分别置3个250ml三角锥形瓶中，加水100ml，于恒温水浴中加热提取，温度为80℃。分别提取1、2、3次，每次20min。将每次提取液先用4层纱布过滤，将茶叶残渣过滤掉，然后再用滤纸抽滤，得澄清液体。将其减压浓缩，置真空干燥箱中，干燥后研细，备用。

2.3料液比的选择

精密称取茶叶粉末10g共5份，分别置5个250ml三角锥形瓶中，加水量分别为50ml、150ml、250ml、350ml、450ml，于恒温水浴中加热提取，温度为80℃，提取时间20min。将每次提取液先用4层纱布过滤，将茶叶残渣过滤掉，然后再用滤纸抽滤，得澄清液体。将其减压浓缩，置真空干燥箱中，干燥后研细，备用。

2.4提取温度的选择

精密称取茶叶粉末10g共5份，分别置5个150ml三角锥形瓶中，加水量分别为100ml水，于恒温水浴中加热提取，提取温度分别为40℃、50℃、60℃、80℃、100℃，提取时间20min。将每次提取液先用4层纱布过滤，将茶叶残渣过滤掉，然后再用滤纸抽滤，得澄清液体。将其减压浓缩，置真空干燥箱中，干燥后研细，备用。

3、结果

经过对不同提取时间所制备样品进行测定，以茶多酚提取得率和含量乘积为考察指标，结果见表1。

表1不同提取时间测定结果

提取时间(min)	含量与得率乘积
		10.00	266.89
20.00	293.77
		30.00	289.59
40.00	282.5
		50.00	310.56
60.00	402.63
		70.00	424.56
80.00	466.25

经过对不同提取次数所制备样品进行测定，以茶多酚提取得率和含量乘积为考察指标，结果见表2。

表2不同提取次数测定结果

提取次数	含量与得率乘积
		1	303.4
2	401.07
		3	424.12

经过对不同料液比所制备样品进行测定，以茶多酚提取得率和含量乘积为考察指标，结果见表3。

表3不同料液比测定结果

料液比	含量与得率乘积
		5	228.57
15	290.12
		25	376.26
35	397.3
		45	386.73

经过对不同温度所制备样品进行测定，以茶多酚提取得率和含量乘积为考察指标，结果见表4。

表4不同提取温度测定结果

提取温度(℃)	含量与得率乘积
		40	266.49
50	215.05
		60	314.57
80	360.79
		100	269.1

分别对各单因素进行考察，由上表可知各单因素均呈现出不同的影响结果，提取时间在80min时，提取率最高；提取次数为2次和3次时，几乎接近；料液比为35倍时，提取率最高；提取温度在80℃时，提取率最高。结合工业生产时实际能耗问题，确定其最终工艺为：料液比为35倍，提取次数为2次，提取时间在80min，提取温度在80℃时茶多酚的提取率最优。

实施例7

大孔树脂的选择

1、实验器材

Tb-214精密电子天平(北京赛多利斯仪器公司)，A微型涡旋混合仪(上海沪西分析仪器厂)，Allegra^tm 64r Centrifuge高速离心机(美国Beckman)，759紫外分光光度计(上海奥普勒仪器有限公司)，微量移液器(Gilson公司、Eppendorf公司)，SD500、D113、CD-180、

D317型大孔吸附树脂(第二军医大学惠赠)。

2、大孔吸附树脂预处理

取SD500、D113、CD-180、D317四种型号的大孔吸附树脂，即用1.0mol/L的HC1溶液和1.0mol/L的NaOH溶液交替处理三次，并冲洗干净，备用。

3、实验方法

取老叶茶叶1000g，粉碎，按上述提取方法，经过高温提取，二次过滤，滤液合并，减压浓缩至相对密度为1.21(50℃)。将上述溶液分别加在4种型号大孔树脂上，去离子水洗，60％乙醇洗，收集合并过柱液和洗脱液，真空旋转浓缩干燥，即得柱后干浸膏。计算过柱前后稀土氧化物的含量变化，结果见表1。

表1过柱前后稀土氧化物的变化

通过对上述4种树脂进行考察和实验验证，结果可知，SD500脱除效果最好，使茶叶老叶提取物符合要求。

实施例8

大孔树脂的选择

1、实验器材

Tb-214精密电子天平(北京赛多利斯仪器公司)，A微型涡旋混合仪(上海沪西分析仪器厂)，Allegra^tm 64r Centrifuge高速离心机(美国Beckman)，759紫外分光光度计(上海奥普勒仪器有限公司)，微量移液器(Gilson公司、Eppendorf公司)，D101、AB-8型大孔吸附树脂(沧州宝恩吸附材料科技有限公司)、HPD100、S-8、HP-20、X-5、D751、D403、D401、D402型大孔吸附树脂(第二军医大学惠赠)。

2、大孔吸附树脂预处理

取10种型号的大孔吸附树脂，用95％乙醇浸泡24h，然后湿法装柱，用95％的乙醇以2BV·h^-1的流速冲洗层析柱，至流出液加2倍蒸馏水不产生明显浑浊为止；继续用2-3BV的5％盐酸溶液浸泡并冲洗层析柱，以蒸馏水洗至流出液呈中性；最后用2-3BV的5％NaOH溶液浸泡并冲洗层析柱，以蒸馏水洗至流出液呈中性。95％乙醇浸泡备用。3、实验方法

取老叶茶叶500g，粉碎，按上述提取方法，经过高温提取，二次过滤，滤液合并，减压浓缩至相对密度为1.21(50℃)。上述溶液，按体积分成两等份，一份真空旋转浓缩干燥，即得柱前干浸膏，称重；另一份过大孔树脂，去离子水洗，60％乙醇洗，收集合并过柱液和洗脱液，真空旋转浓缩干燥，即得柱后干浸膏。计算过柱前后干浸膏得率及过柱前后重金属的含量变化，重金属含量测定方法参照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录，采用原子吸收分光光度法测定。结果见表1和表2。

表1过柱前后茶叶干膏得率变化

注：提取物回收率＝(柱前干膏得率-柱后干膏得率)/柱前干膏得率×100

表2过柱前后茶叶干膏重金属含量变化

注：重金属脱除率＝(柱前重金属含量-柱后重金属含量)/柱前重金属含量×100％

通过对上述10种树脂进行考察和实验验证，由结果可知，D101、AB-8、HPD100、S-8、HP-20、X-5柱前干浸膏和柱后干浸膏比较，其回收率较低，说明上柱后样品损伤较大；D751、D403、D401、D402其回收率较高，最高为树脂D402其回收率为95.98％。同样经过对柱前、柱后重金属Pb含量进行测定，结果表明，D402和D751对重金属脱除率较高，分别为97.93％和96.23％。综合上述结果，选择D402大孔树脂对老叶茶叶提取物进行处理。世界各国对于药品中重金属含量均有严格限定，我国药典对重金属含量也有明确限定，本研究通过对大孔树脂的筛选，筛选出适合于茶叶老叶提取物的方法，使茶叶老叶提取物符合要求，建立有效控制老叶茶叶的提取工艺技术，对于提高安全性、推动茶叶产业国际化有着重要的意义。

实施例9

含片制备工艺研究

1、茶叶含片辅料筛选

根据茶叶老叶提取物特殊的口感和味道，根据成型性、流动性、可行性，以及原料的成本，对常用辅料进行筛选，常用辅料，稀释剂主要包括淀粉、糖粉、糊精、乳糖、可压性淀粉、微晶纤维素、甘露醇等；粘合剂主要包括蒸馏水、乙醇、淀粉浆、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、甲基纤维素和乙基纤维素、羟丙甲纤维素、明胶溶液、蔗糖溶液、聚乙烯毗咯烷酮(PVP)的水溶液或醇溶液等；崩解剂主要包括干淀粉、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯比咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂主要包括硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉、氢化植物油、聚乙二醇类与月挂醇硫酸镁；片剂中还加入一些着色剂、矫味剂等辅料以改善口味和外观。

经过对所制备含片的有无异味、无沙粒感、无刺激性、口感清凉、酸甜适中的特点。

在前期大量辅料筛选预实验基础上，通过口感、成型性、流动性、可行性，以及原料的成本，最终将含片的辅料配方限定在如下几种成分：甘露醇、聚乙二醇(PEG)6000、阿斯巴甜、柠檬酸、薄荷脑等辅料，并用乙醇作为粘合剂。

2、茶叶含片辅料用量选择

2.1 PEG6000用量的选择

精密称量主药茶叶提取物3g，在其它组分不变的条件下，分别与不同用量PEG6000混合均匀，以适量85％乙醇作为润湿剂制粒、干燥、整粒后压片。通过考察制粒难易、颗粒流动性、是否黏冲、片剂的外观、硬度等来筛选PEG6000的用量。结果见表1。

表1 PEG-6000的用量考察

聚乙二醇(PEG6000)易溶于水和乙醇，制成的颗粒压缩成型性好，随着聚乙二醇(PEG6000)用量的增加，颗粒的流动性、黏冲程度和片子的硬度都有所改善，在配方中当其用量为3.0g或4.0g时，所压制茶叶含片较好。

2.2甘露醇用量的选择

精密称量主药茶叶提取物3g，在其它组分不变的条件下，分别与不同用量甘露醇混合均匀，以适量的85％乙醇作为润湿剂制粒、干燥、整粒后压片。通过考察制粒难易、颗粒流动性、是否黏冲、片剂的外观和硬度等来筛选甘露醇的用量。结果见表2。

表2甘露醇的用量考察

甘露醇常用作口含片的填充剂，在加入甘露醇后，虽在制粒方面有所改善，但是片子的硬度会有所下降，因此在配方设计时，当甘露醇的用量在5.0g时，制剂效果较好。

2.3润湿剂的选择

中药提取物制粒常用“乙醇-水”作为润湿剂，随着乙醇浓度的增大，润湿后所产生的黏性降低，因此在茶叶提取物制粒过程中，由于醇度对制粒是主要影响因素之一，因此分别采用50％、75％、85％、95％四个条件进行制粒，结果见表3。由表3可知，在醇度为85％时，所制备粒度最佳，压片流动性最好。

表3醇度考察

2.4矫味剂的选择

阿斯巴甜化学名为天门冬酰氯苯丙酸甲酯，为二肽类甜味剂，可与柠檬酸进行配比，制成受大众欢迎的酸甜口味，在制粒和压片过程中加入阿斯巴甜和柠檬酸，因其用量较少，其对片剂颗粒制备和压片影响较小，其用量可集中在0.5-1.5g区间。同时加入微量薄荷脑进行矫味。

2.5正交试验确定辅料的最佳用量^[3]

在单因素考察的基础上，选取甘露醇(A)、PEG6000(B)、阿斯巴甜(C)、柠檬酸(D)的用量作为考察因素，确定正交试验的因素和水平，如表4所示。

表4辅料配方因素与水平表

精密称取茶叶提取物30g，按照正交试验因素水平表，设计各茶叶含片处方，并将其各成分精密称定，同时加入微量薄荷脑，分别过100目筛，采用等量递加法混合均匀，用适量85％乙醇溶液制软材，18目筛制粒，50-60℃干燥1小时，用18目筛整粒，然后进行压片。以口感和崩解时限^[4]的评分总分为指标进行分析，评分标准见表5，结果见表6和表7。

表5含片评分标准

表6 L₉(3⁴)正交试验直观分析表

表7正交试验方差分析表

由直观分析表知，影响该含片的因素的大小为B>D>C>A，即PEG6000>柠檬酸>阿斯巴甜>甘露醇，且根据方差分析表知，因素B和因素D有显著性差异，由此确定辅料的最佳组合为：A₃B₁C₂D₂，即当主药的用量为30g时，用60g的甘露醇作为填充，加入20gPEG6000，10g阿斯巴甜和10g的柠檬酸。

综上，茶叶含片的成型工艺为：称取茶叶提取物，粉碎后过100目筛，按最佳辅料用量比例称取甘露醇、PEG6000、柠檬酸和阿斯巴甜，同时加入微量薄荷脑，等量递加法混合均匀后，过100目筛，以85％乙醇做黏合剂过18目筛制粒，45℃真空干燥1h，20目筛整粒后压成直径1cm、平均片重0.75g的片剂，即得。

实施例10

将老叶茶叶，粉碎成茶细粉，加入水，水的重量用量为茶叶的45倍，100℃下提取80分钟，提取3次，合并滤液，80℃下过滤，收集滤液；如果不将滤液降低温度进行过滤，采用常规温度如30℃进行过滤，测定其稀土元素和重金属含量，结果表明其含量是分别是冷却至15℃所得滤液中含量的1.26倍和1.33倍，而茶多酚含量并没有影响。

Claims (9)

1.老叶茶叶提取物，其特征在于，是采用如下的方法制备的：

(1)将老叶茶叶，粉碎成茶细粉，加入水，在40～80℃下过滤，收集滤液；将获得的滤液冷却至5～15℃，再次在5～15℃条件下过滤，收集滤液；

(2)然后将收集的滤液，减压浓缩至浓度为1.05-1.35g/ml，上大孔树脂，用洗脱液A洗脱，再用洗脱液B洗脱，合并洗脱液；

(3)将上述合并的洗脱液，减压浓缩，上大孔树脂，用洗脱液C洗脱，再用洗脱液D洗脱，合并洗脱液，减压浓缩，干燥，即得老叶茶叶提取物。

2.根据权利要求1所述的老叶茶叶提取物，其特征在于，步骤(1)中，水的重量用量为茶叶的5-45倍，40℃～100℃下提取10-80分钟，提取1-3次，合并滤液。

3.根据权利要求1所述的老叶茶叶提取物，其特征在于，步骤(2)中，所述大孔树脂为SD500型大孔树脂。

4.根据权利要求3所述的老叶茶叶提取物，其特征在于，所述的洗脱液A为去离子水，所述的洗脱液B为体积浓度60～75％的乙醇溶液。

5.根据权利要求1所述的老叶茶叶提取物，其特征在于，步骤(3)中，合并的洗脱液，减压浓缩至浓度为1.05-1.35g/ml，上大孔树脂，用洗脱液C洗脱，再用洗脱液D洗脱，合并洗脱液，减压浓缩至浓度为1.05-1.35g/ml，喷雾干燥，得老叶茶叶提取物，所述大孔树脂为D402；所述的洗脱液C为去离子水，所述的洗脱液D为体积浓度60～75％的乙醇溶液。

6.根据权利要求1～5任一项所述的老叶茶叶提取物，其特征在于，采用《食品中污染物限制》标准中规定的方法进行检测，稀土氧化物的含量≤2.0mg/kg，重金属Pb的含量≤5.0mg/kg,茶多酚含量为30％以上。

7.一种老叶茶叶含片，其特征在于，由以下重量百分比的组分组成：

各组分重量百分比之和100％。

8.一种老叶茶叶含片，其特征在于，由以下重量百分比的组分组成：

各组分重量百分比之和为100％。

9.一种老叶茶叶含片，其特征在于，由以下重量百分比的组分组成：

权利要求1-6任一项所述的茶叶提取物22.7％，甘露醇45.4％、聚乙二醇(PEG)6000为15.2％、阿斯巴甜7.6％、柠檬酸7.6％、薄荷脑1.5％。