CN104800414A - 广东紫珠中总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷的分离方法 - Google Patents
广东紫珠中总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷的分离方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104800414A CN104800414A CN201410036258.7A CN201410036258A CN104800414A CN 104800414 A CN104800414 A CN 104800414A CN 201410036258 A CN201410036258 A CN 201410036258A CN 104800414 A CN104800414 A CN 104800414A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- volume
- total
- ethanol water
- percentage
- kwangtungensis chun
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种广东紫珠中总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷的分离方法：1）将广东紫珠粉末和水或乙醇水溶液混合，提取，浓缩，得浓缩液；2）将浓缩液经过大孔吸附树脂柱，上样量为1/5～2倍柱体积，依次用4～6倍柱体积的水除杂，用3～5倍柱体积、15～25%的乙醇水溶液洗脱大孔吸附树脂柱，得总黄酮葡萄糖醛酸苷；3）用3～5倍柱体积、35～45%的乙醇水溶液洗脱大孔吸附树脂柱，得总苯乙醇苷粗品；4）总苯乙醇苷粗品经过聚酰胺树脂层析柱，最大上样量为1g/mL，用3～6倍柱体积、5～30%的乙醇水溶液洗脱，得总苯乙醇苷。该分离方法能将总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷有效分离，简便实用，适合工业生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种广东紫珠中总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷的分离方法。
背景技术
广东紫珠（Calliscarpa kwangtungensis Chun.）为马鞭草科紫珠属植物，主要分布于江西、广东、广西和贵州等地，资源比较丰富。作为《中国药典》2010版一部新收载品种，具有收敛止血、散瘀、清热解毒的功能，临床上主要用于治疗宫颈糜烂出血、阴道炎和宫颈炎等妇科炎症。广东紫珠中富含苯乙醇苷类成分，主要有金石蚕苷、连翘酯苷B、毛蕊花糖苷、2′-乙酰基连翘酯苷B和2′-乙酰基金石蚕苷（Brandioside）；广东紫珠中黄酮含量相对较低，以黄酮葡萄糖醛酸苷类成分为主，在广东紫珠药材中含量不足5‰。苯乙醇苷类成分生物活性活泼多样，有抗菌、抗炎、保肝、抗病毒、抗氧化、免疫调节、增强记忆力、抗衰老等多种药理活性；黄酮葡萄糖醛酸苷类成分也多具有重要的药理活性，像黄芩苷和灯盏花素等原料药皆为该类成分。因此有必要从广东紫珠中分离和富集这两类成分，为广东紫珠药效物质基础的阐明和创新药物开发奠定基础。
暂没有任何针对广东紫珠中黄酮葡萄糖醛酸苷类成分的分离和富集工艺。聂韡等发明了一种通过大孔吸附树脂对广东紫珠中的总苯乙醇苷进行提取和纯化，该法，先通过水洗除杂，再用中高浓度的乙醇洗脱一步得到总苯乙醇苷粗品。在该专利中，没有意识到黄酮葡萄糖醛酸苷类成分的存在，实际上用该法得到的总苯乙醇苷粗品部位还混有黄酮葡萄糖醛酸苷类成分，且得到的总苯乙醇苷粗品中的苯乙醇苷类成分的含量相对较低，该部位颜色深，水溶性差，HPLC分析易受鞣质干扰。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于克服了现有技术中对广东紫珠中的总苯乙醇苷的提取结果中还混有其他杂质，也未对杂质中存在的总黄酮葡萄糖醛酸苷给予足够重视，以及总苯乙醇苷的纯度不够高的缺陷，而提供了一种广东紫珠中总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷的分离方法。所述的分离方法同时分离和富集了总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷，既开创性地得到了总黄酮葡萄糖醛酸苷部位，并且又显著地提高了总苯乙醇苷的纯度和品质。该分离方法简便实用，适合工业化生产。
本发明提供了一种广东紫珠中总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷的分离方法；所述的分离方法包括以下步骤：
（1）将广东紫珠粉末和水或乙醇水溶液混合，提取，浓缩，得浓缩液；
（2）将所述浓缩液经过大孔吸附树脂柱，所述浓缩液的上样量为1/5～2倍柱体积，依次用水除杂，用体积百分浓度为15%～25%的乙醇水溶液洗脱所述大孔吸附树脂柱，所述的水的体积为4～6倍柱体积，所述的乙醇水溶液的体积为3～5倍柱体积，得总黄酮葡萄糖醛酸苷；
（3）继续用体积百分浓度为35%～45%的乙醇水溶液洗脱大孔吸附树脂柱，乙醇水溶液的体积为3～5倍柱体积，得总苯乙醇苷粗品；
（4）所述总苯乙醇苷粗品经过聚酰胺树脂层析柱，所述总苯乙醇苷粗品的上样量小于或等于1g/mL，用体积百分浓度为5%～30%的乙醇水溶液洗脱所述聚酰胺树脂层析柱，乙醇水溶液的体积为3～6倍柱体积，即得总苯乙醇苷精品；所述上样量为所述总苯乙醇苷粗品的质量与聚酰胺树脂的体积之比。
步骤（1）中，所述的广东紫珠为本领域常规的物质，较佳地为广东紫珠的地上部位。
步骤（1）中，所述的广东紫珠粉末的粒径较佳地为10目～40目。
步骤（1）中，所述的广东紫珠粉末在所述混合之前，较佳地还进行干燥预处理。所述的干燥预处理为本领域常规的干燥预处理操作。所述的广东紫珠粉末在所述干燥预处理后的含水率较佳地为3%-8%，所述的百分比为质量百分比。
步骤（1）中，所述的水或乙醇水溶液的质量较佳地为所述广东紫珠粉末的质量的8～15倍。
步骤（1）中，所述的乙醇水溶液的浓度为本领域常规的用于回流提取的乙醇水溶液的浓度，较佳地为5%～60%，所述的百分比为乙醇占所述的乙醇水溶液的体积百分比。
步骤（1）中，所述的提取较佳地为回流提取，所述的回流提取较佳地为2～4次，每次至少1h，更佳地为2次，其中，第一次回流提取的溶剂用量为所述的广东紫珠粉末的质量的10～15倍，回流提取的时间为1～2h；第二次回流提取的溶剂用量为所述的广东紫珠粉末的质量的8～10倍，回流提取的时间为1～2h。所述的提取后，较佳地还包括过滤。其中，所述的过滤为本领域常规操作，较佳地为趁热过滤。
步骤（1）中，所述的浓缩为本领域常规操作，较佳地包括如下步骤：合并提取液，回收溶剂，即可。所述的回收溶剂的方式较佳地为减压浓缩。
步骤（1）中，所述的浓缩液的浓度较佳地为0.5～5g/mL（生药量/v），所述的生药量是指加入的广东紫珠粉末的质量。
步骤（2）中，所述的大孔吸附树脂柱为本领域常规，较佳地为非极性大孔吸附树脂柱或弱极性大孔吸附树脂柱。所述的非极性大孔吸附树脂柱较佳地为HPD-100、HPD-300或D101。所述的弱极性大孔吸附树脂柱较佳地为AB-8、DA-201或HPD-400。
步骤（2）中，所述浓缩液的上样量较佳地为1～2倍柱体积。
步骤（2）中，所述用水除杂后，较佳地还包括将杂质弃去的操作。
步骤（2）中，所述的用体积百分浓度为15%～25%的乙醇水溶液洗脱的洗脱流速为本领域常规，较佳地为1～5BV/h。BV/h是流速的一种表示方法，即每小时通过的流体相当于树脂柱体积的倍数。
步骤（2）中，所述的用体积百分浓度为15%～25%的乙醇水溶液洗脱之后，较佳地还包括后处理操作。所述的后处理操作较佳地为：将得到的洗脱液浓缩至无醇味，冷冻干燥，即可。其中，所述的浓缩较佳地为减压浓缩；所述的浓缩至无醇味较佳地是指浓缩至乙醇的含量小于或等于5%，所述的百分比为体积百分比。
步骤（3）中，所述的乙醇水溶液洗脱的洗脱流速为本领域常规，较佳地为1～5BV/h。
步骤（3）中，所述的洗脱后较佳地还包括对洗脱液进行浓缩的操作，所述的浓缩的方式较佳地为减压浓缩。
步骤（4）中，所述的聚酰胺树脂层析柱的孔径较佳地为30～100目。
步骤（4）中，所述总苯乙醇苷粗品的上样量较佳地为0.5～1g/mL。步骤（4）中，所述的乙醇水溶液洗脱的洗脱流速为本领域常规，较佳地为1～5BV/h。
步骤（4）中，所述的用体积百分浓度为5%～30%的乙醇水溶液洗脱之后，较佳地还包括后处理操作。所述的后处理操作较佳地为：将得到的洗脱液浓缩至无醇味，冷冻干燥，即可。其中，所述的浓缩至无醇味较佳地是指浓缩至乙醇的含量小于或等于5%，所述的百分比为体积百分比。
在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
本发明所用试剂和原料均市售可得。
本发明的积极进步效果在于：
本发明通过大孔吸附树脂柱同时分离富集了总黄酮葡糖糖醛酸苷和总苯乙醇苷粗品，得到的黄酮葡萄糖醛酸苷类成分的含量达到35%以上，较该类成分在药材中不足5‰的含量提高了近70倍，最终得到的总苯乙醇苷的含量高达70%以上，色泽淡黄、光亮，水溶性极佳，HPLC色谱分析无鞣质干扰，且该法简单、易操作，适合工业化生产。
附图说明
图1为实施例1的总黄酮葡萄醛酸苷的HPLC分析结果。
图2为实施例1的总苯乙醇苷的HPLC分析结果。
图3为对比实施例1的总苯乙醇苷部位的HPLC分析结果。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
下述实施例中：
广东紫珠来源于江西省萍乡广东紫珠栽培基地；
AB-8大孔吸附树脂购自陕西蓝深特种树脂有限公司；
聚酰胺树脂层析柱购自上海摩速科学器材有限公司，柱层析用，80～100目；
D101大孔吸附树脂购自陕西蓝深特种树脂有限公司。
HPLC的检测条件：
仪器：Agilent1260高效液相色谱仪；
色谱柱：Ultimate RP-C18（4.6mm×250mm，5μm）；
流动相：流动相A：乙腈；流动相B：0.5%磷酸水溶液；
流动相梯度条件如下：
| 时间（min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） |
| 0.0 | 5 | 95 |
| 5 | 8 | 92 |
| 20 | 12 | 88 |
| 50 | 15 | 85 |
| 80 | 18 | 82 |
| 110 | 18 | 82 |
流速：1mL/min；
柱温：35℃；
检测波长：210nm；
进样体积：5μL。
实施例1
本实施例中，从广东紫珠中分离富集总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷的步骤如下：
（1）取广东紫珠的地上部位进行干燥，粉碎过30目筛，加入粉末质量10倍的水回流提取2次，每次2h，过滤，合并提取液，减压浓缩至生药量10g/mL的浓度，得浓缩液；
（2）浓缩液上AB-8大孔吸附树脂，上样量为2倍柱体积，用5倍柱体积的水洗脱除杂，再用体积百分浓度20%的乙醇水溶液洗脱4倍柱体积，流速5BV/h对洗脱液减压浓缩至无醇味，冷冻干燥得总黄酮葡萄醛酸苷部位，其中总黄酮葡萄醛酸苷纯度为40%，所述百分比为质量百分比；总黄酮葡萄醛酸苷的HPLC分析结果见图1和表1；
表1实施例1中得到的总黄酮葡萄糖醛酸部位的HPLC检测结果
（3）AB-8柱接着用体积百分浓度40%的乙醇水溶液洗脱4倍柱体积，流速5BV/h对洗脱液减压浓缩至无醇味，烘干得总苯乙醇苷粗品；
（4）总苯乙醇苷粗品上聚酰胺树脂层析柱，上样量为1g/mL（粗品质量/聚酰胺树脂），用体积百分浓度20%的乙醇水溶液洗脱5倍体积，流速5BV/h，洗脱液减压浓缩至无醇味，冷冻干燥，即得总苯乙醇苷精品，该部位色泽淡黄、光亮，水溶性极佳，HPLC分析无鞣质成分干扰，总苯乙醇苷的纯度为75%，所述百分比为质量百分比，总苯乙醇苷的HPLC分析结果见图2和表2。HPLC结果表明，按照本发明的分离方法分离得到的总苯乙醇苷中不含有黄酮葡萄糖醛酸苷类物质。
表2实施例1中总苯乙醇苷的HPLC检测结果
实施例2
本实施例中，从广东紫珠中分离富集总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷的步骤如下：
（1）取广东紫珠的地上部位进行干燥，粉碎过10目筛，加入粉末质量10倍的体积百分浓度60%的乙醇水溶液回流提取2次，每次2h，过滤，合并提取液，减压浓缩至生药量1g/mL的浓度，得浓缩液；
（2）将浓缩液上D101大孔吸附树脂，上样量为1/2倍柱体积，用5倍柱体积的水洗脱除杂，再用体积百分浓度25%的乙醇水溶液洗脱3倍柱体积，流速3BV/h对洗脱液减压浓缩至无醇味，冷冻干燥得总黄酮葡萄醛酸苷部位，其中总黄酮葡萄醛酸苷的纯度为35%，所述百分比为质量百分比；
（3）D101柱接着用体积百分浓度45%的乙醇水溶液洗脱3倍柱体积，流速3BV/h对洗脱液减压浓缩至无醇味，烘干得总苯乙醇苷粗品；
（4）总苯乙醇苷粗品上聚酰胺树脂层析柱，上样量为0.5g/mL（粗品质量/聚酰胺树脂），用体积百分浓度25%的乙醇水溶液洗脱3倍体积，流速3BV/h洗脱液减压浓缩至无醇味，冷冻干燥，即得总苯乙醇苷精品，该部位色泽淡黄、光亮，水溶性极佳，HPLC分析无鞣质成分干扰，总苯乙醇苷的纯度为70%，所述百分比为质量百分比。
实施例3
本实施例中，从广东紫珠中分离富集总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷的步骤如下：
（1）取广东紫珠的地下部位进行干燥，粉碎过10目筛，加入粉末质量10倍的体积百分浓度60%的乙醇水溶液回流提取2次，每次2h，过滤，合并提取液，减压浓缩至生药量3g/mL的浓度，得浓缩液；
（2）将浓缩液上D101大孔吸附树脂，上样量为1倍柱体积，用4倍柱体积的水洗脱除杂，再用体积百分浓度20%的乙醇水溶液洗脱3倍柱体积，流速3BV/h对洗脱液减压浓缩至无醇味，冷冻干燥得总黄酮葡萄醛酸苷部位，其中总黄酮葡萄醛酸苷的纯度为36%，所述百分比为质量百分比；
（3）D101柱接着用体积百分浓度35%的乙醇水溶液洗脱3倍柱体积，流速3BV/h对洗脱液减压浓缩至无醇味，烘干得总苯乙醇苷粗品；
（4）总苯乙醇苷粗品上聚酰胺树脂层析柱，上样量为1g/mL（粗品质量/聚酰胺树脂），用体积百分浓度20%的乙醇水溶液洗脱5倍柱体积，流速5BV/h洗脱液减压浓缩至无醇味，冷冻干燥，即得总苯乙醇苷精品，该部位色泽淡黄、光亮，水溶性极佳，HPLC分析无鞣质成分干扰，总苯乙醇苷的纯度为72%，所述百分比为质量百分比。
实施例4
本实施例中，从广东紫珠中分离富集总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷的步骤如下：
（1）取广东紫珠的地上部位进行干燥，粉碎过30目筛，加入粉末质量10倍的水回流提取2次，每次2h，过滤，合并提取液，减压浓缩至生药量10g/mL的浓度，得浓缩液；
（2）将浓缩液上AB-8大孔吸附树脂，上样量为2倍柱体积，用6倍柱体积的水洗脱除杂，再用体积百分浓度15%的乙醇水溶液洗脱5倍柱体积，流速5BV/h对洗脱液减压浓缩至无醇味，冷冻干燥得总黄酮葡萄醛酸苷部位，其中总黄酮葡萄醛酸苷纯度为40%，所述百分比为质量百分比；
（3）AB-8柱接着用体积百分浓度40%的乙醇水溶液洗脱5倍柱体积，流速5BV/h对洗脱液减压浓缩至无醇味，烘干得总苯乙醇苷粗品；
（4）总苯乙醇苷粗品上聚酰胺树脂层析柱，上样量为1g/mL（粗品质量/聚酰胺树脂），用体积百分浓度5%的乙醇水溶液洗脱6倍体积，流速5BV/h，洗脱液减压浓缩至无醇味，冷冻干燥，即得总苯乙醇苷精品，该部位色泽淡黄、光亮，水溶性极佳，HPLC分析无鞣质成分干扰，总苯乙醇苷的纯度为70%，所述百分比为质量百分比。
实施例5
本实施例中，从广东紫珠中分离富集总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷的步骤如下：
（1）取广东紫珠的地上部位进行干燥，粉碎过30目筛，加入粉末质量10倍的水回流提取4次，每次1h，过滤，合并提取液，减压浓缩至生药量10g/mL的浓度，得浓缩液；
（2）将浓缩液上AB-8大孔吸附树脂，上样量为1/5倍柱体积，用5倍柱体积的水洗脱除杂，再用体积百分浓度20%的乙醇水溶液洗脱4倍柱体积，流速5BV/h对洗脱液减压浓缩至无醇味，冷冻干燥得总黄酮葡萄醛酸苷部位，其中黄酮葡萄醛酸苷纯度为40%，所述百分比为质量百分比；
（3）AB-8柱接着用体积百分浓度40%的乙醇水溶液洗脱4倍柱体积，流速5BV/h对洗脱液减压浓缩至无醇味，烘干得总苯乙醇苷粗品；
（4）总苯乙醇苷粗品上聚酰胺树脂层析柱，上样量为1g/mL（粗品质量/聚酰胺树脂），用体积百分浓度30%的乙醇水溶液洗脱5倍体积，流速5BV/h，洗脱液减压浓缩至无醇味，冷冻干燥，即得总苯乙醇苷精品，该部位色泽淡黄、光亮，水溶性极佳，HPLC分析无鞣质成分干扰，总苯乙醇苷的纯度为73%，所述百分比为质量百分比。HPLC结果表明，按照本发明的分离方法分离得到的总苯乙醇苷中不含有黄酮葡萄糖醛酸苷类物质。
可见，本发明通过大孔吸附树脂柱能一步得到总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷粗品。大孔吸附树脂柱先用水洗脱除去糖类等大极性物质，再通过15%～25%的乙醇水溶液洗脱，得到总黄酮葡糖糖醛酸苷部位，该部位中黄酮葡萄糖醛酸苷类成分含量达到35%以上，较该类成分在药材中不足5‰的含量提高了近70倍；再用体积百分浓度为35%～45%的乙醇水溶液洗脱，得总苯乙醇苷粗品，该类成分的含量达到50%以上。总苯乙醇苷粗品再通过聚酰胺树脂层析柱，能除去色素和鞣质，得到总苯乙醇苷精品，含量高达70%以上，色泽淡黄、光亮，水溶性极佳，HPLC分析无鞣质成分干扰。整个方法操作简便，适合工业化生产。
对比实施例1
本对比实施例按照现有技术中的方法，从广东紫珠中分离总苯乙醇苷部位，具体步骤如下：
（1）取广东紫珠干燥地上部位，粉碎过10目筛，加入粉末质量10倍的体积百分浓度60%的乙醇水溶液回流提取两次，每次2h，过滤，合并提取液，减压浓缩至生药量1g/mL的浓度，得浓缩液；
（2）将浓缩液上D101大孔吸附树脂，上样量为1/2倍柱体积，用5倍柱体积的水洗脱除杂，再用体积百分浓度45%的乙醇水溶液洗脱4倍柱体积，流速3BV/h对洗脱液减压浓缩至无醇味，烘干得总苯乙醇苷部位，利用HPLC法测得其中的苯乙醇苷类成分的含量为50%，黄酮葡萄醛酸苷类成分含量为10%，百分比为质量百分比。HPLC分析结果见图3和表3，可见总黄酮葡萄醛酸苷和总苯乙醇苷这两类成分得不到有效分离，该部位色泽黄褐色，微溶于水，HPLC分析有鞣质干扰。
表3对比实施例1得到的总苯乙醇苷部位的HPLC检测结果
Claims (10)
1.一种广东紫珠中总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷的分离方法，其特征在于，所述的分离富集方法包括以下步骤：
（1）将广东紫珠粉末和水或乙醇水溶液混合，提取，浓缩，得浓缩液；
（2）将所述浓缩液经过大孔吸附树脂柱，所述浓缩液的上样量为1/5～2倍柱体积，依次用水除杂，用体积百分浓度为15%～25%的乙醇水溶液洗脱所述大孔吸附树脂柱，所述的水的体积为4～6倍柱体积，所述的乙醇水溶液的体积为3～5倍柱体积，得总黄酮葡萄糖醛酸苷；
（3）继续用体积百分浓度为35%～45%的乙醇水溶液洗脱所述大孔吸附树脂柱，乙醇水溶液的体积为3～5倍柱体积，得总苯乙醇苷粗品；
（4）所述总苯乙醇苷粗品经过聚酰胺树脂层析柱，所述总苯乙醇苷粗品的上样量小于或等于1g/mL，用体积百分浓度为5%～30%的乙醇水溶液洗脱所述聚酰胺树脂层析柱，乙醇水溶液的体积为3～6倍柱体积，即得总苯乙醇苷精品；所述上样量为所述总苯乙醇苷粗品的质量与聚酰胺树脂的体积之比。
2.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤（1）中，所述的广东紫珠为广东紫珠的地上部位；和/或，所述的广东紫珠粉末的粒径为10目～40目；和/或，所述的广东紫珠粉末在所述混合之前，还进行干燥预处理；
和/或，所述的水或乙醇水溶液的质量为所述广东紫珠粉末的质量的8～15倍；和/或，所述的乙醇水溶液的浓度为5%～60%，所述的百分比为乙醇占所述的乙醇水溶液的体积百分比。
3.如权利要求2所述的分离方法，其特征在于，所述的广东紫珠粉末在所述干燥预处理后的含水率为3%-8%，所述的百分比为质量百分比。
4.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤（1）中，所述的提取为回流提取；所述的回流提取较佳地为2～4次，每次至少1h，更佳地为2次，其中，第一次回流提取的溶剂用量为所述广东紫珠粉末的质量的10～15倍，回流提取的时间为1～2h；第二次回流提取的溶剂用量为所述广东紫珠粉末的质量的8～10倍，回流提取的时间为1～2h；和/或，所述的提取后，还包括过滤；所述的过滤较佳地为趁热过滤。
5.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述的浓缩包括如下步骤：合并提取液，回收溶剂，即可；所述的回收溶剂的方式较佳地为减压浓缩；和/或，所述的浓缩液的浓度为0.5～5g/mL，所述的g/mL为每mL浓缩液中含有的所述广东紫珠粉末的克数。
6.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤（2）中，所述的大孔吸附树脂柱为非极性大孔吸附树脂柱或弱极性大孔吸附树脂柱；
和/或，所述的用体积百分浓度为15%～25%的乙醇水溶液洗脱的洗脱流速为1～5BV/h；
和/或，所述的用体积百分浓度为15%～25%的乙醇水溶液洗脱之后，还包括后处理操作；
和/或，所述浓缩液的上样量为1～2倍柱体积。
7.如权利要求6所述的分离方法，其特征在于，所述的非极性大孔吸附树脂柱为HPD-100、HPD-300或D101；所述的弱极性大孔吸附树脂柱为AB-8、DA-201或HPD-400；所述的后处理操作包括：将得到的洗脱液浓缩至无醇味，冷冻干燥，即可。
8.如权利要求7所述的分离方法，其特征在于，所述的浓缩为减压浓缩；所述的浓缩至无醇味为浓缩至乙醇的含量小于或等于5%，所述的百分比为体积百分比。
9.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤（3）中，所述的用体积百分浓度为35%～45%的乙醇水溶液洗脱的洗脱流速为1～5BV/h；和/或，所述的用体积百分浓度为35%～45%的乙醇水溶液洗脱后还包括对洗脱液进行浓缩的操作，较佳地为减压浓缩。
10.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于，步骤（4）中，所述的聚酰胺树脂层析柱的孔径为30～100目；和/或，所述总苯乙醇苷粗品的上样量为0.5～1g/mL；和/或，所述的用体积百分浓度为5%～30%的乙醇水溶液洗脱的洗脱流速为1～5BV/h；和/或，所述的用体积百分浓度为5%～30%的乙醇水溶液洗脱之后，还包括后处理操作；所述的后处理操作较佳地为：将得到的洗脱液浓缩至无醇味，冷冻干燥，即可；所述的浓缩至无醇味较佳地为浓缩至乙醇的含量小于或等于5%，所述的百分比为体积百分比。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410036258.7A CN104800414B (zh) | 2014-01-26 | 2014-01-26 | 广东紫珠中总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷的分离方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410036258.7A CN104800414B (zh) | 2014-01-26 | 2014-01-26 | 广东紫珠中总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷的分离方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104800414A true CN104800414A (zh) | 2015-07-29 |
| CN104800414B CN104800414B (zh) | 2019-03-26 |
Family
ID=53685898
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410036258.7A Active CN104800414B (zh) | 2014-01-26 | 2014-01-26 | 广东紫珠中总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷的分离方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104800414B (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107149631A (zh) * | 2017-05-08 | 2017-09-12 | 中国药科大学 | 一种广东紫珠提取物的分离制备方法及其用途 |
| CN108484695A (zh) * | 2018-04-08 | 2018-09-04 | 湖南中医药大学 | 一种从密蒙花中同时提取苯乙醇苷和黄酮类化合物的方法 |
| CN116173090A (zh) * | 2021-11-26 | 2023-05-30 | 上海医药工业研究院 | 红果参精制物及其制备方法、红果参提取物的应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101623394A (zh) * | 2009-01-22 | 2010-01-13 | 九芝堂股份有限公司 | 一种裸花紫珠提取物及其制备方法、制剂和用途 |
| CN101797307A (zh) * | 2010-04-09 | 2010-08-11 | 广州中医药大学 | 一种含苯乙醇苷的枇杷叶紫珠提取物及其制备方法 |
| CN102973732A (zh) * | 2012-12-20 | 2013-03-20 | 江西省林业科学院 | 大孔树脂富集纯化广东紫珠中总苯乙醇苷的方法 |
-
2014
- 2014-01-26 CN CN201410036258.7A patent/CN104800414B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101623394A (zh) * | 2009-01-22 | 2010-01-13 | 九芝堂股份有限公司 | 一种裸花紫珠提取物及其制备方法、制剂和用途 |
| CN101797307A (zh) * | 2010-04-09 | 2010-08-11 | 广州中医药大学 | 一种含苯乙醇苷的枇杷叶紫珠提取物及其制备方法 |
| CN102973732A (zh) * | 2012-12-20 | 2013-03-20 | 江西省林业科学院 | 大孔树脂富集纯化广东紫珠中总苯乙醇苷的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| SHI YT等: "Comparative analysis of three Callicarpa herbs using high performance liquid chromatography with diode array detector and electrospray ionization-trap mass spectrometry method", 《JOURNAL OF PHARMACEUTICAL AND BIOMEDICAL ANALYSIS》 * |
| 聂等: "大孔树脂分离纯化广东紫珠中苯乙醇苷的工艺研究", 《中草药》 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107149631A (zh) * | 2017-05-08 | 2017-09-12 | 中国药科大学 | 一种广东紫珠提取物的分离制备方法及其用途 |
| CN108484695A (zh) * | 2018-04-08 | 2018-09-04 | 湖南中医药大学 | 一种从密蒙花中同时提取苯乙醇苷和黄酮类化合物的方法 |
| CN108484695B (zh) * | 2018-04-08 | 2021-12-07 | 湖南中医药大学 | 一种从密蒙花中同时提取苯乙醇苷和黄酮类化合物的方法 |
| CN116173090A (zh) * | 2021-11-26 | 2023-05-30 | 上海医药工业研究院 | 红果参精制物及其制备方法、红果参提取物的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104800414B (zh) | 2019-03-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101220062A (zh) | 一种同时制备甜菊苷和莱鲍迪苷a的方法 | |
| CN102846784B (zh) | 鸡矢藤水提取物、其制备方法和用途 | |
| CN103550273A (zh) | 一种从人参中提取低农残人参皂苷的方法 | |
| Yu et al. | Purification of high-purity glycyrrhizin from licorice using hydrophilic interaction solid phase extraction coupled with preparative reversed-phase liquid chromatography | |
| CN103483402A (zh) | 甜菊苷及莱鲍迪苷a的提纯制备方法 | |
| KR101480820B1 (ko) | 향류크로마토그래피를 이용하여 인삼 추출물로부터 진세노사이드 디올 및 트리올을 일단계로 동시에분리하는 방법 | |
| CN104725450A (zh) | 一种从素馨花中提取高纯度橄榄苦苷的方法 | |
| CN104800414A (zh) | 广东紫珠中总黄酮葡萄糖醛酸苷和总苯乙醇苷的分离方法 | |
| CN103830306B (zh) | 一种忍冬叶有效提取物的制备方法 | |
| CN108042590B (zh) | 一种低农残人参茎叶提取物及其制备方法 | |
| CN104610401B (zh) | 一种从黄芩中同时提取黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的方法 | |
| CN102973732A (zh) | 大孔树脂富集纯化广东紫珠中总苯乙醇苷的方法 | |
| CN102040635B (zh) | 一种连翘酯苷b和金石蚕苷单体的高效分离纯化方法 | |
| CN106939028B (zh) | 炔苷类化合物及其提取分离方法和应用 | |
| CN102670935B (zh) | 一种从藠头中提取总皂苷的方法 | |
| CN109824658B (zh) | 一种从忧遁草中提取、分离纯化3种黄酮苷的方法 | |
| CN109134557A (zh) | 从多穗石柯叶片中提取根皮苷的方法 | |
| CN109053851B (zh) | 一种含冬青素a的提取物及其提取方法 | |
| CN104193793B (zh) | 采用模拟移动床制备西洋参果中人参皂苷Rb3的方法 | |
| CN109336942B (zh) | 一种从人参中提取纯化竹节参皂苷ⅵ的方法 | |
| CN102920727A (zh) | 制备富含牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷提取物的方法 | |
| CN101879265A (zh) | 一种虎眼万年青总皂苷、多糖的联产工艺 | |
| CN106046098B (zh) | 一种乙酰基人参皂苷Rd及其制备方法 | |
| CN104311615A (zh) | 从陇蜀杜鹃叶中提取分离金丝桃苷和棉花皮素-3-O-β-D-半乳糖苷的方法 | |
| CN103232513B (zh) | 一种制备甘遂甾醇的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| EXSB | Decision made by sipo to initiate substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20160505 Address after: 222047 Jiangning economic and Technological Development Zone, Jiangsu, Lianyungang industrial city Applicant after: Kangyuan Pharmceutical Co., Ltd. Applicant after: Shanghai Institute of pharmaceutical industry Applicant after: China State Institute of Pharmaceutical Industry Address before: 200040 Beijing West Road, Shanghai, No. 1320, No. Applicant before: Shanghai Institute of pharmaceutical industry Applicant before: China State Institute of Pharmaceutical Industry |
|
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |