CN104800275A - 畜禽用中药多糖免疫增强剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种畜禽用中药多糖免疫增强剂，该中药多糖免疫增强剂是由黄芪、党参、茯苓、香菇制备；黄芪、党参、茯苓、香菇的重量份配比比例为：1:1:1:1。加工方法：将黄芪、党参、茯苓、香菇粉碎成粉末，按重量份配比混合均匀，经过超声细胞粉碎提取，然后通过乙醇溶液进行醇沉处理，之后经过洗涤、烘干后获得棕黄色粉末即为中药多糖免疫增强剂，最后将棕黄色粉末分装入库。本发明可显著改善畜禽的体液免疫反应，呈现免疫增强作用；明显提高畜禽的成活率，而且还可以显著降低料肉比；能对抗病毒对畜禽生长发育的影响，对病毒伤害的畜禽内脏有修复作用；在畜禽体内均能促进对淋巴细胞的转化，增强非特异性细胞免疫的生物学活性。
Description
技术领域
本发明涉及中兽医中兽药领域，具体地说是一种畜禽用中药多糖免疫增强剂。
背景技术
众所周知，随着我国畜禽养殖业规模的日益扩大，所带来的问题也越来越多，传染病愈演愈烈，猪流感、禽流感一度令世人恐慌。特别是猪禽的免疫抑制性疾病不断增多，如目前传染性法氏囊病是鸡场多发的免疫抑制病，感染鸡对多种疫苗的反应均降低；感染PRRS(蓝耳病)的猪对猪瘟疫苗的反应性降低，使抗体滴度降低，甚至不产生抗体。为了进一步控制病原菌的发展，滥用抗生素已成为普遍现象。抗生素的滥用不仅引起二重感染、食品安全和环境污染等方面问题，还进一步诱导耐药菌株的出现，形成恶性循环。这些不良因素严重制约了我国畜禽养殖业的发展。
中药是天然药，对机体可宏观调整平衡；中药配伍讲究君臣佐使，统筹兼顾，多种成份协调配合，标本兼治，毒副作用小。许多动植物药材中含有多糖成分。随着分子生物学、生物化学等学科的发展，中药多糖的多种生物活性逐渐被人们所发现和认识，成为当前新药发展的方向之一，尤其是来源于中草药的植物多糖，具有巨大的开发潜力。
发明内容
本发明的技术任务是提供一种畜禽用中药多糖免疫增强剂。
本发明的技术任务是按以下方式实现的，该中药多糖免疫增强剂是由以下原料制备：黄芪、党参、茯苓、香菇；
各原料的重量份配比为：
黄芪、党参、茯苓、香菇的重量份配比比例为：1：1：1：1；
加工方法：
将黄芪、党参、茯苓、香菇粉碎成粉末，按重量份配比混合均匀，经过超声细胞粉碎提取，然后通过乙醇溶液进行醇沉处理，之后经过洗涤、烘干后获得棕黄色粉末即为中药多糖免疫增强剂，最后将棕黄色粉末分装入库。
该加工方法具体步骤如下：
1)初步粉碎：将黄芪、党参、茯苓、香菇用粉碎机粉碎成粉末，按重量份配比比例1：1：1：1混合均匀；
2)前处理：将混合均匀的粉末放入提取罐中，向提取罐中加入质量百分比浓度80％的乙醇进行回流处理，处理2-4小时后，取出粉末烘干；
3)超声细胞粉碎提取：将上述烘干的粉末放入超声细胞粉碎提取罐中，向超声细胞粉碎提取罐加入蒸馏水，进行超声处理，超声完毕后取出物料过滤，滤液备用；向滤渣中再加入同样量的蒸馏水，重复进行一次超声处理，超声完毕后取出过滤；合并两次的滤液，放入旋转蒸发仪中浓缩；
4)醇沉：向上述浓缩液中加入质量百分比浓度95％乙醇，使溶液中乙醇含量达到质量百分比浓度80％，第一次醇沉，温度10-18℃，静置10-14小时，抽滤；将沉淀用少量双蒸水溶解，再加入质量百分比浓度95％乙醇进行二次醇沉，温度10-18℃，静置10-14小时，抽滤；将两次的沉淀物混合均匀；
5)洗涤干燥：将上述沉淀物依次用无水乙醇、丙酮和乙醚进行洗涤，然后将洗涤后的物料放入离心机，离心处理后的物料放入烘干箱内烘干，得到棕黄色粉末即为中药多糖免疫增强剂；
6)收料、分装：将上述黄色粉末在塑料瓶在洁净区收集，分装，辐射灭菌，检验合格后入库。
所述的步骤3)中超声处理的条件为：超声次数36次，超声功率为800W，粉末与蒸馏水的质量分配比比例1:30。
所述的步骤5)中沉淀物与无水乙醇、丙酮和乙醚的重量份配比比例为：1：2：2：2。
本发明的畜禽用中药多糖免疫增强剂和现有技术相比，可显著改善畜禽的体液免疫反应，呈现免疫增强作用；明显提高畜禽的成活率，而且还可以显著降低料肉比；该中药多糖免疫增强剂在一定程度上能对抗病毒对畜禽生长发育的影响，对病毒伤害的畜禽内脏有修复作用；该中药多糖免疫增强剂在畜禽体内均能促进对淋巴细胞的转化，显著增强非特异性细胞免疫的生物学活性。
附图说明
附图1为畜禽用中药多糖免疫增强剂的工艺流程框图。
具体实施方式
实施例1：
该畜禽用中药多糖免疫增强剂的加工方法具体步骤如下：
1)初步粉碎：将黄芪、党参、茯苓、香菇用粉碎机粉碎成粉末，按重量份配比比例1：1：1：1混合均匀；
2)前处理：将混合均匀的粉末放入提取罐中，向提取罐中加入质量百分比浓度80％的乙醇进行回流处理，处理2、3或4小时后，取出粉末烘干；
3)超声细胞粉碎提取：将上述烘干的粉末放入超声细胞粉碎提取罐中，向超声细胞粉碎提取罐加入蒸馏水，粉末与蒸馏水的质量分配比比例1:30，进行超声处理，超声次数36次，超声功率为800W；超声完毕后取出物料过滤，滤液备用；向滤渣中再加入同样量的蒸馏水，重复进行一次超声处理，超声次数36次，超声功率为800W，超声完毕后取出过滤；合并两次的滤液，放入旋转蒸发仪中浓缩；
4)醇沉：向上述浓缩液中加入质量百分比浓度95％乙醇，使溶液中乙醇含量达到质量百分比浓度80％，第一次醇沉，温度10-18℃，静置10-14小时，抽滤；将沉淀用少量双蒸水溶解，再加入质量百分比浓度95％乙醇进行二次醇沉，温度10-18℃，静置10-14小时，抽滤；将两次的沉淀物混合均匀；
5)洗涤干燥：将上述沉淀物依次用无水乙醇、丙酮和乙醚进行洗涤，沉淀物与无水乙醇、丙酮和乙醚的重量份配比比例为：1：2：2：2；然后将洗涤后的物料放入离心机，离心处理后的物料放入烘干箱内烘干，得到棕黄色粉末即为中药多糖免疫增强剂；
6)收料、分装：将上述黄色粉末在塑料瓶在洁净区收集，分装，辐射灭菌，检验合格后入库。
使用方法：将成品畜禽用中药多糖免疫增强剂均匀混入畜禽饲料中供畜禽使用，或溶解于畜禽饮用水中供畜禽饮用即可。
实验效果：
选360只1日龄海兰褐公鸡，随机分为3组。2～3组为接种REV组，均于1日龄大腿内侧肌肉接种REV病毒稀释液，500TCID50/只。3组于1日龄时分别饮服该中药多糖免疫增强剂。1组为健康对照组，不接种REV，不饮服中药；2组为REV组阳性对照，接种REV，不饮服中药。饲养期间免疫如下：7日龄，所有鸡均免疫Lasota(齐鲁动物保健品有限公司生产)、NDV灭活疫苗(英特威公司生产)、H5-AIV灭活疫苗(齐鲁动物保健品有限公司生产)，各种疫苗按说明书使用。14、21、28日龄所有鸡用IBDV饮水免疫(英特威公司生产)。49日龄时试验结束，剖杀所有鸡只。
表一中药多糖免疫增强剂对35、42、49日龄鸡新城疫HI效价的影响
表一结果显示：对于1日龄感染REV导致免疫功能下降的鸡，饮服中药多糖免疫增强剂后，5、6和7周鸡NDV抗体水平虽然仍未达到健康对照鸡水平，但却显著高于同样经REV感染但未添加中药的REV阳性对照组鸡，对NDV HI抗体滴度的统计学差异显著(P＜0.05)。中药多糖免疫增强剂对REV病鸡均可显著改善体液免疫反应，呈现不同程度的免疫增强作用。
表二中药多糖免疫增强剂对35、42、49日龄鸡禽流感(H5-AIV)HI效价的影响
表二结果显示：中药多糖免疫增强剂对不同免疫功能状态下鸡的H5-AIV抗体水平的影响与NDV相似。即对于1日龄感染REV的鸡，在H5-AIV的抗体反应中，用药组均显著好于REV阳性对照组(P＜0.05)。中药多糖免疫增强剂具有较强的促进NDV和AIV-H9疫苗抗体生成的能力。
表三中药多糖免疫增强剂对免疫抑制鸡器官指数的影响
表三结果显示：人工感染REV对免疫器官造成不同程度损伤，抑制脾脏、胸腺和法氏囊的发育，其免疫器官指数均低于正常对照组；在感染后对胸腺表现显著性抑制，与对照组比较差异显著(P<0.05)。饮服中药多糖免疫增强剂可在一定程度上促进脾脏、胸腺和法氏囊的发育，其重量和免疫器官指数高于REV阳性对照组(P<0.05)，说明中药多糖免疫增强剂对REV引起鸡体免疫器官(脾脏、胸腺和法氏囊)的损伤均有一定的修复作用。
表四中药多糖免疫增强剂对49日龄健康鸡免疫器官指数的影响
| 组别 | 胸腺指数 | 法氏囊指数 | 脾脏指数 |
| 对照组 | 4.77±0.28a | 3.06±0.42a | 2.03±0.19a |
| 多糖免疫增强剂 | 5.85±0.31b | 4.52±0.33b | 2.61±0.23b |
表四结果显示：在49日龄时，鸡胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数的值与对照组比较，服用中药多糖免疫增强剂组鸡胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数明显优于对照组。
表五中药多糖免疫增强剂对健康鸡成活率和料肉比的影响
表五结果显示：应用中药多糖免疫增强剂后，鸡的成活率明显提高，而且还可以显著降低料肉比。
通过上面具体实施方式，所述技术领域的技术人员可容易的实现本发明。但是应当理解，本发明并不限于上述的几种具体实施方式。在公开的实施方式的基础上，所述技术领域的技术人员可任意组合不同的技术特征，从而实现不同的技术方案。
Claims (4)
1.畜禽用中药多糖免疫增强剂，其特征在于，该中药多糖免疫增强剂是由以下原料制备：黄芪、党参、茯苓、香菇；
各原料的重量份配比为：
黄芪、党参、茯苓、香菇的重量份配比比例为：1：1：1：1；
加工方法：
将黄芪、党参、茯苓、香菇粉碎成粉末，按重量份配比混合均匀，经过超声细胞粉碎提取，然后通过乙醇溶液进行醇沉处理，之后经过洗涤、烘干后获得棕黄色粉末即为中药多糖免疫增强剂，最后将棕黄色粉末分装入库。
2.畜禽用中药多糖免疫增强剂的加工方法，其特征在于，该加工方法步骤如下：
1)初步粉碎：将黄芪、党参、茯苓、香菇用粉碎机粉碎成粉末，按重量份配比比例1：1：1：1混合均匀；
2)前处理：将混合均匀的粉末放入提取罐中，向提取罐中加入质量百分比浓度80％的乙醇进行回流处理，处理2-4小时后，取出粉末烘干；
3)超声细胞粉碎提取：将上述烘干的粉末放入超声细胞粉碎提取罐中，向超声细胞粉碎提取罐加入蒸馏水，进行超声处理，超声完毕后取出物料过滤，滤液备用；向滤渣中再加入同样量的蒸馏水，重复进行一次超声处理，超声完毕后取出过滤；合并两次的滤液，放入旋转蒸发仪中浓缩；
4)醇沉：向上述浓缩液中加入质量百分比浓度95％乙醇，使溶液中乙醇含量达到质量百分比浓度80％，第一次醇沉，温度10-18℃，静置10-14小时，抽滤；将沉淀用少量双蒸水溶解，再加入质量百分比浓度95％乙醇进行二次醇沉，温度10-18℃，静置10-14小时，抽滤；将两次的沉淀物混合均匀；
5)洗涤干燥：将上述沉淀物依次用无水乙醇、丙酮和乙醚进行洗涤，然后将洗涤后的物料放入离心机，离心处理后的物料放入烘干箱内烘干，得到棕黄色粉末即为中药多糖免疫增强剂；
6)收料、分装：将上述黄色粉末在塑料瓶在洁净区收集，分装，辐射灭菌，检验合格后入库。
3.根据权利要求2所述的畜禽用中药多糖免疫增强剂，其特征在于，所述的步骤3)中超声处理的条件为：超声次数36次，超声功率为800W，粉末与蒸馏水的质量分配比比例1:30。
4.根据权利要求2所述的畜禽用中药多糖免疫增强剂，其特征在于，所述的步骤5)中沉淀物与无水乙醇、丙酮和乙醚的重量份配比比例为：1：2：2：2。
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