CN104718995A - 姬菇固体液化菌种的制作方法 - Google Patents
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- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G18/00—Cultivation of mushrooms
Abstract
本发明涉及菌菇栽培工艺领域，特别涉及一种姬菇固体液化菌种的制作方法，将一级液体菌种接种于培养瓶中培养得液体种；制备固体培养料，所得的液体种于菌种瓶进行培养，培养温度为22-25℃，避光培养，培养湿度为50-60%，培养20-30天菌种即可长满菌瓶；挑选长满没有杂菌的菌瓶，将菌种在粉碎机中粉碎，接种到无菌水中，直接生产接种。本发明菌种制作方法，具有发菌快，能够比固体菌种发菌快1/3，不需要经过3-4次扩接，减少了扩接过程中的染菌问题，节约了扩繁所需要的时间；生长点比普通液体菌种生长点多，发菌一致，菌龄比较一致，出菇会比较整齐，且质量好，子实体产量能够提高20-30%；采用无菌水对菌丝进行液化，霉菌等杂菌也不会生长，污染可以减少5-10%。
Description
技术领域
本发明涉及菌菇栽培工艺领域，特别涉及一种姬菇固体液化菌种的制作方法。
背景技术
目前，食用菌菌种分为固体种和液体种两种，固体种操作简单，容易观察，能够有效防止接入污染的菌种，但是固体菌种也具有发菌慢的特性，产量低、出菇不整齐、发菌阶段容易感染杂菌。传统的液体菌种通过摇床制作一级种，需要经过3-4次扩接，然后用于接种，用此液体菌种可以有效加快发菌速度，但操作复杂，极易出现大批次污染的问题。
发明内容
本发明针对固体菌种和传统液体菌种的优缺点，本发明保留原有菌种的优点，改进缺点，提出了一种固体液化菌种的制作方法。
本发明的技术方案是：
一种姬菇固体液化菌种的制作方法，包括如下步骤：
步骤1：将一级液体菌种接种于培养瓶中培养，22-25℃下静置培养2-3天，菌块生长正常，无染菌的情况下调节振荡器转速200r/min，培养5-10天即得液体种；
步骤2：制备固体培养料，接种步骤1所得的液体种于菌种瓶进行培养，培养温度为22-25℃，避光培养，培养湿度为50-60%，培养20-30天菌种即可长满菌瓶；
步骤3：挑选长满没有杂菌的菌瓶，将菌种在粉碎机中粉碎，接种到无菌水中，直接生产接种。
在以上方案的基础上，步骤1中所述的液体菌种的培养液为：1L培养料配方为：土豆200g，麸皮20g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.5g。
在以上方案的基础上，步骤2中所述的固体培养料按照以下质量百分比混合，1mm以下锯末60-70%，麸皮20-30%，玉米面5%，轻质碳酸钙1-2%，石膏1-2%，石灰0.5-1%。
其中优选的，步骤2中所述的菌种瓶采用500ml透明玻璃菌种瓶，盖子采用透气瓶盖，装料高度为瓶口以下2-3cm；中央打一个直径1-1.5cm，距瓶底2-4cm的孔洞。
优选的，步骤3中所述的菌种粉碎后，通过100目筛过滤，再接种到无菌水中。
优选的，步骤3中所述的无菌水经过灭菌温度为121℃，灭菌时间为30-40min的灭菌。
本发明的有益效果是：
本发明保留原有固体菌种与液体菌种的优点，改进其缺点，将固体菌种与液体菌种相结合进行菌种生产，通过改变培养基对菌种进行复壮，保持菌种的活力，防止其退化，根据菌丝顶端生长的特点，对其进行粉碎，粉碎后利用菌种顶端生长的特点扩大了菌种的萌发点，因此可以改变液体培养基使其不必进行再培养，使得菌种能够发菌一致，菌龄相对一致，而且菌种的制作过程中改变了传统的液体培养基，即使接种过程少量菌种溅落在菌种袋外由于培养基的改变，也不容易产生杂菌，减少污染。
1） 具有发菌快，能够比固体菌种发菌快1/3，同时解决了液体菌种扩接的问题，不需要经过3-4次扩接，减少了扩接过程中的染菌问题，节约了扩繁所需要的时间；
2） 本发明固体培养阶段是对菌丝的复壮，菌丝生长活力强，经过液化后菌丝流动性强，生长点比普通液体菌种生长点多，发菌一致， 菌龄比较一致，出菇会比较整齐，且质量好，子实体产量能够提高20-30%；
3） 采用无菌水对菌丝进行液化，无菌水基本不含营养物质，生产接种时对于滴落在接种口外面的菌种由于培养基是水不提供营养，霉菌等杂菌也不会生长，污染可以减少5-10%。
具体实施方式
本发明的具体实施方式如下：
实施例1：
首先，制备姬菇菌种，
姬菇固体液化菌种的制作方法，包括如下步骤：
步骤1：将一级液体菌种接种（接种前紫外灯消毒20min，于超净工作台中接种，每瓶接种4-5块面积为3mm*3mm的菌种块）于培养瓶中培养，22-25℃下静置培养2-3天，菌块生长正常，无染菌的情况下调节振荡器转速200r/min，培养5-10天即得液体种；步骤1中所述的液体菌种的培养液为：1L培养料配方为：土豆200g，麸皮20g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.5g。培养液煮好后分装到1000ml摇瓶中，每瓶培养料200-300ml，于121℃条件下灭菌30min。
步骤2：制备固体培养料，接种步骤1所得的液体种于菌种瓶进行培养，步骤2中所述的固体培养料按照以下质量百分比混合，1mm以下锯末62%，麸皮30%，玉米面5%，轻质碳酸钙1%，石膏1%，石灰1%。菌种瓶采用500ml透明玻璃菌种瓶，盖子采用透气瓶盖，装料高度为瓶口以下2-3cm。中央打一个直径1-1.5cm左右，距瓶底2-4cm的孔洞。将制作好的菌种瓶放于灭菌锅中， 121℃条件下灭菌90min。灭菌完毕冷却至室温，在百级净化无菌条件下接种制作好的固体液化菌种，每袋接种菌液30-40ml。培养温度为22-25℃，避光培养，培养湿度为50-60%，培养20-30天菌种即可长满菌瓶。
步骤3：挑选长满没有杂菌的菌瓶，将菌种在粉碎机中粉碎，接种到无菌水中，直接生产接种。所述的无菌水经过灭菌温度为121℃，灭菌时间为30-40min的灭菌。
采用固体液化菌种接种姬菇2000包在青岛华盛绿能农业科技有限公司双网双膜大棚进行出菇实验，姬菇菌袋为聚乙烯22*35cm，栽培料填装高度为25cm左右，装满栽培料后在中央打一个2cm*2.5cm的孔洞，扎口，进行常压灭菌18h，焖置8h。
本发明由于菌种流动性强萌发点多，培养15-20天左右菌丝即可长满菌袋，比现有技术提前10-15天。发菌结束后移入光伏连栋大棚进行出菇，采取一端开袋出菇，温度为16-18℃，湿度为85-95%，15天左右即可采收第一茬，经过养菌后再出第二茬菇。
实验采取对比实验方法，分为三组，采用固体接种法接种2000包姬菇菌包，采用液体接种法接种2000包姬菇菌包。同时制作，同时接种，同条件培养与出菇，养菌条件均为22-25℃，在青岛华盛绿能农业科技有限公司智能养菌室内进行避光培养，水分湿度为50-60%，统一发菌。固体接种的菌包长满需要25-30天的时间，液体接种的菌包需要20-25天长满菌包，而采用固体液化接种的菌包需要15-20天左右长满菌包。菌包长满后经过7天左右的后熟时间即可用于大棚出菇，出菇期为15天左右，此后用于菌丝再培养经过10-15天左右即可用于生产第二潮菇，统计两潮的鲜菇量计算其生物转化率，生物转化率=（鲜菇重量／干料重）*100%。
经过实验，采用固体接种的姬菇生物转化率为115-120%，液体接种的姬菇生物转化率为120-130%，固体液化菌种接种的姬菇生物转化率为140-150%，比现有技术产量提高20-30%，而且出菇整齐，劳动量减少30-40%。
实施例2：
姬菇固体液化菌种的制作方法，包括如下步骤：
步骤1：将一级液体菌种接种（接种前紫外灯消毒20min，于超净工作台中接种，每瓶接种4-5块面积为3mm*3mm的菌种块）于培养瓶中培养，22-25℃下静置培养2-3天，菌块生长正常，无染菌的情况下调节振荡器转速200r/min，培养5-10天即得液体种；步骤1中所述的液体菌种的培养液为：1L培养料配方为：土豆200g，麸皮20g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.5g。培养基煮好后分装到1000ml摇瓶中，每瓶培养料200-300ml，于121℃条件下灭菌30min。
步骤2：制备固体培养料，接种步骤1所得的液体种于菌种瓶进行培养，步骤2中所述的固体培养料按照以下质量百分比混合，1mm以下锯末68%，麸皮23.5%，玉米面5%，轻质碳酸钙1.2%，石膏1.5%，石灰0.8%。菌种瓶采用500ml透明玻璃菌种瓶，盖子采用透气瓶盖，装料高度为瓶口以下2-3cm。中央打一个直径1-1.5cm左右，距瓶底2-4cm的孔洞。将制作好的菌种瓶放于灭菌锅中，121℃条件下灭菌90min。灭菌完毕冷却至室温，在百级净化条件下接种制作好的固体液化菌种，每袋接种菌液30-40ml。培养温度为22-25℃，避光培养，培养湿度为50-60%，培养20-30天菌种即可长满菌瓶。
步骤3：挑选长满没有杂菌的菌瓶，将菌种在粉碎机中粉碎，通过100目筛过滤，接种到无菌水中，直接生产接种。所述的无菌水经过灭菌温度为121℃，灭菌时间为30-40min的灭菌。
采用姬菇新型液体菌种接种姬菇菌10000袋，姬菇菇菌袋为聚乙烯22*35cm，栽培料填装高度为25cm左右，装满栽培料后在中央打一个2cm*2.5cm的孔洞，扎口，进行常压灭菌。灭菌完毕冷却至室温，在百级净化条件下接种制作好的固体液化菌种，每袋接种菌液30-40ml。接种完毕放入青岛华盛绿能农业科技有限公司菌包工厂智能培养房，温度为18-22℃，湿度为60-70%，培养20天左右菌丝即可长满菌袋，比现有技术提前10-15天。发菌结束后移入即墨市普东镇农户大棚进行出菇，在每个袋口划一个“十”字小口，温度为13-15℃，湿度为80-90%，15-20天左右即可采收第一茬，经过养菌后再出第二茬菇。
实验采取对比实验方法，分为三组，采用固体接种法接种2000包姬菇菌包，采用液体接种法接种2000包姬菇菌包。同时制作，同时接种，同条件培养与出菇，养菌条件均为22-25℃，在青岛华盛绿能农业科技有限公司智能养菌室内进行避光培养，水分湿度为50-60%，统一发菌。菌包培养过程中接种固体菌种与固体液化菌种的污染率低，固体菌种接种口由于有菌丝布满培养料不容易感染杂菌。液体菌种接种的菌包经常会由于接种枪的原因将菌液滴落在接种口，由于培养基营养丰富，染菌机率大大增大。固体液化菌种接种的菌包由于培养基为无菌水，流动性强，接入菌种后直接全部渗到培养料中而且即使由于接种枪的原因使得部分菌液滴落在接种口外，由于培养基为无菌水无营养也不适合杂菌生长，从而不容易感染杂菌。固体接种的菌包长满需要25-30天的时间，液体接种的菌包需要20-25天长满菌包，而采用固体液化接种的菌包需要15-20天左右长满菌包。菌包长满后经过7天左右的后熟时间即可用于大棚出菇，出菇期为15天左右，此后用于菌丝再培养经过10-15天左右即可用于生产第二潮菇，统计两潮的鲜菇量计算其生物转化率，生物转化率=（鲜菇重量／干料重）*100%。
经过实验，采用固体接种的姬菇生物转化率为110-120%，液体接种的姬菇生物转化率为120-130%，固体液化菌种接种的姬菇生物转化率为130-140%，比现有技术产量提高20-30%，而且出菇整齐，劳动量减少。
Claims (6)
1.一种姬菇固体液化菌种的制作方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤1：将一级液体菌种接种于培养瓶中培养，22-25℃下静置培养2-3天，菌块生长正常，无染菌的情况下调节振荡器转速200r/min，培养5-10天即得液体种；
步骤2：制备固体培养料，接种步骤1所得的液体种于菌种瓶进行培养，培养温度为22-25℃，避光培养，培养湿度为50-60%，培养20-30天菌种即可长满菌瓶；
步骤3：挑选长满没有杂菌的菌瓶，将菌种在粉碎机中粉碎，接种到无菌水中，直接生产接种。
2.根据权利要求1所述的姬菇固体液化菌种的制作方法，其特征在于，步骤1中所述的液体菌种的培养液为：1L培养料配方为：土豆200g，麸皮20g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.5g。
3.根据权利要求1所述的姬菇固体液化菌种的制作方法，其特征在于，步骤2中所述的固体培养料按照以下质量百分比混合，1mm以下锯末60-70%，麸皮20-30%，玉米面5%，轻质碳酸钙1-2%，石膏1-2%，石灰0.5-1%。
4.根据权利要求1所述的姬菇固体液化菌种的制作方法，其特征在于，步骤2中所述的菌种瓶采用500ml透明玻璃菌种瓶，盖子采用透气瓶盖，装料高度为瓶口以下2-3cm；中央打一个直径1-1.5cm，距瓶底2-4cm的孔洞。
5.根据权利要求1所述的姬菇固体液化菌种的制作方法，其特征在于，步骤3中所述的菌种粉碎后，通过100目筛过滤，再接种到无菌水中。
6.根据权利要求1所述的姬菇固体液化菌种的制作方法，其特征在于，步骤3中所述的无菌水经过灭菌温度为121℃，灭菌时间为30-40min的灭菌。
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