CN104220451A - 具有hiv成熟抑制活性的c-3环烯三萜类化合物 - Google Patents

具有hiv成熟抑制活性的c-3环烯三萜类化合物 Download PDF

Info

Publication number
CN104220451A
CN104220451A CN201380019696.6A CN201380019696A CN104220451A CN 104220451 A CN104220451 A CN 104220451A CN 201380019696 A CN201380019696 A CN 201380019696A CN 104220451 A CN104220451 A CN 104220451A
Authority
CN
China
Prior art keywords
alkyl
base
alkene
pentamethyl
substituted
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201380019696.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104220451B (zh
Inventor
J.斯维多斯基
N.A.米恩维尔
A.里古尔罗-伦
S-Y.希特
J.陈
Y.陈
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Health Uk Fifth Ltd
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=48946098&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CN104220451(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Priority to CN201610397768.6A priority Critical patent/CN106046106A/zh
Publication of CN104220451A publication Critical patent/CN104220451A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104220451B publication Critical patent/CN104220451B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J53/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton has been modified by condensation with a carbocyclic rings or by formation of an additional ring by means of a direct link between two ring carbon atoms, including carboxyclic rings fused to the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton are included in this class
    • C07J53/002—Carbocyclic rings fused
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/58—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids containing heterocyclic rings, e.g. danazol, stanozolol, pancuronium or digitogenin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J63/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton has been modified by expansion of only one ring by one or two atoms
    • C07J63/008—Expansion of ring D by one atom, e.g. D homo steroids

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

本发明披露了具有药物及生物作用性质的化合物、其药物组合物及使用方法。具体而言，提供具有独特抗病毒活性的C-3环烯三萜类化合物作为HIV成熟抑制剂，所述化合物如式I、II、III及IV的化合物所示：其中X可为C4-8环烷基、C4-8环烯基、C4-9螺环烷基、C4-9螺环烯基、C4-8氧杂环烷基、C4-8二氧杂环烷基、C6-8氧杂环烯基、C6-8二氧杂环烯基、C6-9氧杂螺环烷基或C6-9氧杂螺环烯基环。这些化合物适用于治疗HIV及AIDS。

Description

具有HIV成熟抑制活性的C-3环烯三萜类化合物
对相关申请的交叉参考
本非临时申请要求2013年2月6日提交的美国非临时申请系列号13/760,726以及2012年2月15日提交的美国临时申请系列号61/599,040的权益。
技术领域
本发明涉及用于对抗HIV的新颖化合物，且更具体而言，涉及用作HIV成熟抑制剂的衍生自桦木酸的化合物及其它结构相关的化合物，且涉及含有其的药物组合物，以及其制备方法。
背景技术
HIV-1(人免疫缺陷病毒-1)感染仍然是一个主要医学问题，2007年底全世界估计有4500-5000万人感染。HIV及AIDS(获得性免疫缺陷综合征)的病例数目快速上升。2005年，报道约500万例新感染，且310万人死于AIDS。用于治疗HIV的现有药物包括核苷逆转录酶(RT)抑制剂或已批准的单一丸剂组合：齐多夫定(zidovudine)(或AZT或)、去羟肌苷(didanosine)(或)、司他夫定(stavudine)(或)、拉米夫定(lamivudine)(或3TC或)、扎西他滨(zalcitabine)(或DDC或)、阿巴卡韦丁二酸盐(abacavir succinate)(或)、泰诺福韦酯反丁烯二酸盐(Tenofovirdisoproxil fumarate salt)(或)、恩曲他滨(emtricitabine)(或)、(含有-3TC加AZT)、(含有阿巴卡韦、拉米夫定及齐多夫定)、(含有阿巴卡韦及拉米夫定)、(含有及)；非核苷逆转录酶抑制剂：奈韦拉平(nevirapine)(或)、地拉韦啶(delavirdine)(或)及依法韦仑(efavirenz)(或)、及依曲韦林(etravirine)；及拟肽类蛋白酶抑制剂或已批准制剂：沙奎那韦(saquinavir)、茚地那韦(indinavir)、利托那韦(ritonavir)、那非那韦(nelfinavir)、安普那韦(amprenavir)、洛匹那韦(lopinavir)、(洛匹那韦及利托那韦)、地瑞那韦(darunavir)、阿扎那韦(atazanavir)及替拉那韦(tipranavir)和cobicistat；及整合酶抑制剂，诸如雷特格韦(raltegravir)及进入抑制剂，诸如恩夫韦地(enfuvirtide)(T-20)及马拉维若(maraviroc)
这些药物中的每一种在单独使用时仅能够短暂地限制病毒复制。然而，当组合使用时，这些药物对病毒血症及疾病进展具有深远影响。实际上，最近已记录AIDS患者的死亡率由于广泛应用组合疗法而显著降低。然而，尽管这些结果令人印象深刻，但组合药物疗法最终可能对30％至50％患者无效。药物效能不足、不顺应、组织渗透受限制及某些细胞类型内的药物特异性限制(例如大部分核苷类似物在静止细胞中不能磷酸化)可说明敏感病毒未被完全抑制。此外，当存在亚适药物浓度时，HIV-1的高复制速率及快速周转与频繁引入的突变的组合导致出现抗药性变异体及治疗失败。因此，需要展现特殊抗性模式及有利药物动力学以及安全分布的新颖抗HIV剂以提供更多治疗选择。改善的HIV融合抑制剂及HIV进入复合受体拮抗剂为许多研究人员正在进一步研究的新类别抗HIV剂的两个实例。
HIV附着抑制剂为结合于HIV表面醣蛋白gp120且干扰表面蛋白gp120与宿主细胞受体CD4的相互作用的另一亚类抗病毒化合物。因而，其在HIV生命周期的单一阶段防止HIV附着于人类CD4T细胞且阻断HIV复制。已改良HIV附着抑制剂的性质以尽力获得具有最大效用及效力的化合物作为抗病毒剂。具体地，US 7,354,924及US 2005/0209246阐述了HIV附着抑制剂。
另一类新兴HIV治疗化合物称为HIV成熟抑制剂。成熟是HIV复制或HIV生命周期中多达10个或10个以上步骤的最后一个，在该步骤中HIV因最终导致衣壳(Capsid，CA)蛋白释放的gag蛋白中的由若干HIV蛋白酶介导的断裂事件而变得具有感染性。成熟抑制剂防止HIV衣壳适当组装及成熟、防止形成保护性外壳、或防止出现于人类细胞中。相反，产生无感染性病毒，从而阻止了随后的HIV感染周期。
现已显示桦木酸的某些衍生物展现作为HIV成熟抑制剂的有效抗HIV活性。举例而言，US 7,365,221揭示单酰化桦木醇(betulin)及二氢桦木醇衍生物及其作为抗HIV剂的用途。如'221参考文献中所论述，用某些经取代的酰基(诸如3',3'-二甲基戊二酰基及3',3'-二甲基丁二酰基)使桦木酸(1)发生酯化可产生具有增强活性的衍生物(Kashiwada,Y.等人，J.Med.Chem.39:1016-1017(1996))。美国专利5,679,828中也描述作为有效抗HIV剂的酰化桦木酸及二氢桦木酸衍生物。用丁二酸使桦木醇的3位碳发生酯化也产生能够抑制HIV-1活性的化合物(Pokrovskii,A.G.等人，Gos.Nauchnyi TsentrVirusol.Biotekhnol.“Vector”9:485-491(2001))。
提及用衍生自桦木酸的化合物治疗HIV感染的其它参考文献包括US2005/0239748及US 2008/0207573，以及WO2006/053255、WO2009/100532及WO2011/007230。
已在研发中的一种HIV成熟化合物已作为贝韦立马(Bevirimat)或PA-457得到鉴定，其化学式为C36H56O6且IUPAC名为3β-(3-羧基-3-甲基-丁酰氧基)羽扇-20(29)-烯-28-酸(3β-(3-carboxy-3-methyl-butanoyloxy)lup-20(29)-en-28-oic acid)。
本文也参考Bristol-Myers Squibb于2011年6月2日提交的标题为“MODIFIED C-3BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV MATURATIONINHIBITORS”的申请USSN 13/151,706(US 2012-0142707)和2011年6月2日提交的标题为“C-28AMIDES OF MODIFIED C-3BETULINIC ACIDDERIVATIVES AS HIV MATURATION INHIBITORS”的申请USSN13/151,722(US 2012-0142653)。也参考2012年1月27日提交的标题为“C-28AMINES OF C-3MODIFIED BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIVMATURATION INHIBITORS”的申请USSN 13/359,680。此外，还参考2012年1月27日提交的标题为“C-17AND C-3MODIFIED TRITERPENOIDSWITH HIV MATURATION INHIBITORY ACTIVITY”的申请USSN13/359,727。
本领域现在需要用作HIV成熟抑制剂的新颖化合物以及含有这些化合物的新颖药物组合物。
发明内容
本发明提供以下式I、II、III及IV的化合物，包括其药学上可接受的盐；其药物制剂；及其在罹患或易感染诸如HIV的病毒的患者中的用途。式I至IV的化合物为有效抗病毒剂，尤其为HIV抑制剂。它们用于治疗HIV及AIDS。
本发明的一个实施方案涉及一种化合物，包括其药学上可接受的盐，该化合物选自：
式I化合物
式II化合物
式III化合物
及
式IV化合物
其中R1为异丙烯基或异丙基；
J及E独立地为-H或-CH3，且当存在双键时，E不存在；
X选自：C4-8环烷基、C4-8环烯基、C4-9螺环烷基、C4-9螺环烯基、C4-8氧杂环烷基、C4-8二氧杂环烷基、C6-8氧杂环烯基、C6-8二氧杂环烯基、C6环二烯基、C6氧杂环二烯基、C6-9氧杂螺环烷基及C6-9氧杂螺环烯基环，其中X经A取代，其中A为选自以下的至少一个成员：-H、-卤素、-羟基、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、-C1-6烷基-Q、-经烷基取代的C1-6烷基-Q、-CN、-CF2Q、-NR8R9、-COOR2及-CONR2R2；
X也可选自：
及
其中Q选自：芳基、杂芳基、经取代的杂芳基、-OR2、-COOR3、-NR2R2、-SO2R7、-CONHSO2R3及-CONHSO2NR2R2；
R2为-H、-C1-6烷基、-经烷基取代的C1-6烷基或-经芳基取代的C1-6烷基；
Y选自：-COOR2、-C(O)NR2SO2R3、-C(O)NHSO2NR2R2、-NR2SO2R2、-SO2NR2R2、-C3-6环烷基-COOR2、-C2-6烯基-COOR2、-C2-6炔基-COOR2、-C1-6烷基-COOR2、-经烷基取代的C1-6烷基、-COOR2、-CF2-COOR2、-NHC(O)(CH2)n-COOR2、-SO2NR2C(O)R2、-四唑及-CONHOH，
其中n＝1-6；
W不存在，或为CH2或CO；
R3为-C1-6烷基或-经烷基取代的C1-6烷基；
R4选自：-H、-C1-6烷基、-C1-6烷基-C(OR3)2-C3-6环烷基、-经取代的C1-6烷基、-C1-6烷基-C3-6环烷基、-C1-6烷基-Q1、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q1、芳基、杂芳基、经取代的杂芳基、-COR6、-COCOR6、-SO2R7、-SO2NR2R2、
及
条件是当W为CO时，R4或R5不可为COR6或COCOR6；
其中Q1选自杂芳基、经取代的杂芳基、卤素、-CF3、-OR2、-COOR2、-NR8R9、-CONR10R11及-SO2R7；
R5选自-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-经C1-6烷基取代的烷基、-C1-6烷基-NR8R9、-COR10、-COR6、-COCOR6、-SO2R7及-SO2NR2R2；
条件是，R4或R5中仅一个可选自-COR6、-COCOR6、-SO2R7及-SO2NR2R2；
或若W不存在或为CH2，则R4及R5可与相邻N一起形成
R6选自：-H、-C1-6烷基、-经C1-6烷基取代的烷基、-C3-6环烷基、-经取代的C3-6环烷基-Q2、-C1-6烷基-Q2、-经C1-6烷基取代的烷基-Q2、-C3-6环烷基-Q2、芳基-Q2、-NR13R14及-OR15；
其中Q2选自芳基、杂芳基、经取代的杂芳基、-OR2、-COOR2、-NR8R9、-SO2R7、-CONHSO2R3及-CONHSO2NR2R2；
R7选自-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基、-C3-6环烷基、-CF3、芳基及杂芳基；
R8及R9独立地选自：-H、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基、芳基、杂芳基、经取代的芳基、经取代的杂芳基、-C1-6烷基-Q2及-COOR3，
且R8及R9也可独立地选自：
及
或R8及R9与相邻N一起形成选自以下的环：
及
条件是，R8或R9中仅一个可为-COOR3；
R10及R11独立地选自-H、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基及-C3-6环烷基，
或R10及R11与相邻N一起形成环，诸如：
R12选自：-C1-6烷基、-C1-6烷基-OH、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基、-C3-6环烷基、-COR7、-COONR22R23、-SOR7及-SONR24R25；
R13及R14独立地选自：-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-经取代的C1-6烷基、-C1-6烷基-Q3、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q3、经取代的C1-6烷基-Q3及
或R13及R14与相邻N一起形成选自以下的环：
及
Q3选自杂芳基、经取代的杂芳基、-NR20R21、-CONR2R2、-COOR2、-OR2及-SO2R3；
R15选自：-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-经取代的C1-6烷基、-C1-6烷基-Q3、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q3及-经取代的C1-6烷基-Q3；
R16选自-H、-C1-6烷基、-NR2R2及-COOR3；
R17选自-H、-C1-6烷基、-COOR3及芳基；
R18选自-COOR2及-C1-6烷基-COOR2；
R19选自-H、-C1-6烷基、-C1-6烷基-Q4、-COR3、-COOR3，其中Q4选自-NR2R2及-OR2；
R20及R21独立地选自-H、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基-OR2及-COR3，
或R20及R21与相邻N一起形成选自以下的环：
及
条件是，R20或R21中仅一个可为-COR3；
R22及R23独立地选自：H、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基及-C1-6环烷基，
或R22及R23与相邻N一起形成选自以下的环：
R24及R25独立地选自：-H、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基、-C1-6烷基-Q5、-C1-6环烷基、芳基、经取代的芳基、杂芳基及经取代的杂芳基，
且Q5选自卤素及SO2R3。
在另一实施方案中，提供一种治疗感染病毒的哺乳动物的方法，尤其是其中该病毒为HIV时，该方法包含向该哺乳动物给予抗病毒有效量的选自以上式I化合物、式II化合物、式III化合物及式IV化合物的化合物及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。式I、II、III和/或IV的化合物任选可与抗病毒有效量的另一种AIDS治疗剂组合给予，另一种AIDS治疗剂选自：(a)AIDS抗病毒剂；(b)抗感染剂；(c)免疫调节剂；及(d)其它HIV进入抑制剂。
本发明的另一个实施方案为一种药物组合物，其包含抗病毒有效量的选自式I化合物、式II化合物、式III化合物及式IV化合物的化合物及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂及稀释剂；且任选与抗病毒有效量的选自以下的另一种AIDS治疗剂组合：(a)AIDS抗病毒剂；(b)抗感染剂；(c)免疫调节剂；及(d)其它HIV进入抑制剂。
在本发明的另一个实施方案中，本文提供一种或多种制备式I、II、III及IV化合物的方法。
本文也提供适用于制备本文中的式I、II、III及IV化合物的中间体化合物。
本发明涉及这些以及下文所述的其它重要目标。
具体实施方式
由于本发明化合物可能具有不对称中心且因此以非对映异构体与对映异构体的混合物形式存在，因此除其混合物以外，本发明也包括式I化合物、式II化合物及式III化合物的单独非对映异构形式及对映异构形式。
定义
除非在本申请中另有说明，否则一或多个以下术语可用于本文中且应具有以下含义：
“H”是指氢，包括其同位素，诸如氘。
如本文及权利要求中所使用的术语“C1-6烷基”(除非另外规定)是指直链或支链烷基，诸如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基等。
“C1-C4氟烷基”是指经F取代的C1-C4烷基，其中至少一个H原子被F原子取代，且各H原子可独立地被F原子取代；
“卤素”是指氯、溴、碘或氟。
“芳基”或“Ar”基团是指具有完全共轭的π电子系统的全碳单环或稠环多环(即共享一对相邻碳原子的环)基团。芳基的实例为但不限于苯基、萘基及蒽基。芳基可经取代或未经取代。取代时，取代基优选为选自以下中的一个或多个：烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂脂族环基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂脂族环基氧基、硫羟基、硫代芳氧基、硫代杂芳氧基、硫代杂脂族环基氧基、氰基、卤素、硝基、羰基、O-氨甲酰基、N-氨甲酰基、C-酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲基、脲基、氨基及-NRxRy(其中Rx及Ry独立地选自氢、烷基、环烷基、芳基、羰基、C-羧基、磺酰基、三卤代甲基)，及组合而成的5或6元杂脂族环。
如本文所使用，“杂芳基”是指环中具有一或多个选自氮、氧及硫的原子且另外具有完全共轭的π电子系统的单环或稠环(即共享一对相邻原子的环)基团。除非另外指示，否则杂芳基可于杂芳基内的碳或氮原子处连接。应注意，如本领域已知，若母体杂芳基的N-氧化物在化学上可行，则术语杂芳基意欲涵盖该N-氧化物。杂芳基的实例为但不限于呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、噻唑基、咪唑基、唑基、二唑基、噻二唑基、苯并噻唑基、三唑基、四唑基、异唑基、异噻唑基、吡咯基、吡喃基、四氢吡喃基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、嘌呤基、咔唑基、苯并唑基、苯并咪唑基、吲哚基、异吲哚基、吡嗪基、二嗪基、吡嗪、三嗪基、四嗪基及四唑基。取代时，取代基优选为选自以下中的一个或多个：烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂脂族环基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂脂族环基氧基、硫代烷氧基、硫羟基、硫代芳氧基、硫代杂芳氧基、硫代杂脂族环基氧基、氰基、卤素、硝基、羰基、O-氨甲酰基、N-氨甲酰基、C-酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲基、脲基、氨基及-NRxRy，其中Rx及Ry如上文所定义。
如本文所使用，“杂脂族环”基团是指环中具有一或多个选自氮、氧及硫的原子的单环或稠环基团。各环选自提供稳定键排列的环且不意欲涵盖不存在的系统。所述环也可具有一或多个双键。然而，所述环不具有完全共轭的π电子系统。杂脂族环基的实例为但不限于氮杂环丁烷基、哌啶基、哌嗪基、咪唑啉基、噻唑烷基、3-吡咯烷-1-基、吗啉基、硫吗啉基及四氢吡喃基。取代时，取代基优选为选自以下中的一个或多个：烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂脂族环基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂脂族环基氧基、硫羟基、硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代杂芳氧基、硫代杂脂族环基氧基、氰基、卤素、硝基、羰基、硫代羰基、O-氨甲酰基、N-氨甲酰基、O-硫代氨甲酰基、N-硫代氨甲酰基、C-酰氨基、C-硫代酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲磺酰氨基、三卤代甲磺酰基、甲硅烷基、脒基、胍基、脲基、膦酰基、氨基及-NRxRy，其中Rx及Ry如上文所定义。
“烷基”是指饱和脂族烃，包括直链及支链基团。烷基优选具有1至20个碳原子(每当本文陈述数值范围(例如“1至20”)时，其是指该基团(在此情况下为烷基)可含有1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等，至多且包含20个碳原子)。其更优选为具有1至10个碳原子的中等大小烷基。其最优选为具有1至4个碳原子的低级烷基。烷基可经取代或未经取代。取代时，取代基优选为独立选自以下的一个或多个：三卤代烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂脂族环基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂脂族环基氧基、硫羟基、硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代杂芳氧基、硫代杂脂族环基氧基、氰基、卤素、硝基、羰基、硫羰基、O-氨甲酰基、N-氨甲酰基、O-硫代氨甲酰基、N-硫代氨甲酰基、C-酰氨基、C-硫代酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲磺酰氨基、三卤代甲磺酰基，及组合而成的5或6元杂脂族环。
“环烷基”是指其中一或多个环不具有完全共轭的π电子系统的全碳单环或稠环(即共享一对相邻碳原子的环)基团。环烷基的实例为但不限于环丙烷、环丁烷、环戊烷、环戊烯、环己烷、环己烯、环庚烷、环庚烯及金刚烷。环烷基可经取代或未经取代。取代时，取代基优选为独立选自以下的一个或多个：烷基、芳基、杂芳基、杂脂族环基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂脂族环基氧基、硫羟基、硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代杂芳氧基、硫代杂脂族环基氧基、氰基、卤素、硝基、羰基、硫羰基、O-氨甲酰基、N-氨甲酰基、O-硫代氨甲酰基、N-硫代氨甲酰基、C-酰氨基、C-硫代酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲磺酰氨基、三卤代甲磺酰基、甲硅烷基、脒基、胍基、脲基、膦酰基、氨基及-NRxRy，其中Rx及Ry如上文所定义。
如本文所定义，“烯基”是指具有至少两个碳原子及至少一个碳碳双键的烷基。
如本文所定义，“炔基”是指具有至少两个碳原子及至少一个碳碳三键的烷基。
“羟基”是指-OH基团。
如本文所定义，“烷氧基”是指-O-烷基及-O-环烷基。
如本文所定义，“芳氧基”是指-O-芳基及-O-杂芳基。
“杂芳氧基”是指杂芳基-O-基团，其中杂芳基如本文所定义。
“杂脂族环基氧基”是指杂脂族环-O-基团，其中杂脂族环基如本文所定义。
“硫羟基”是指-SH基团。
如本文所定义，“硫代烷氧基”是指-S-烷基及-S-环烷基。
如本文所定义，“硫代芳氧基”是指-S-芳基及-S-杂芳基。
“硫代杂芳氧基”是指杂芳基-S-基团，其中杂芳基如本文所定义。
“硫代杂脂族环基氧基”是指杂脂族环-S-基团，其中杂脂族环基如本文所定义。
“羰基”是指-C(＝O)-R"基团，其中R"选自氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基(经由环碳键合)及杂脂族环基(经由环碳键合)，各自如本文所定义。
“醛”基是指R"为氢的羰基。
“硫代羰基”是指-C(＝S)-R"基团，其中R"如本文所定义。
“酮基”是指-CC(＝O)C-基团，其中处于C＝O任一侧或两侧的碳可以为烷基、环烷基、芳基或者杂芳基或杂脂族环基的碳。
“三卤代甲烷羰基”是指Z3CC(＝O)-基团，其中该Z为卤素。
“C-羧基”是指-C(＝O)O-R"基团，其中R"如本文所定义。
“O-羧基”是指R"C(-O)O-基团，其中R"如本文所定义。
“羧酸”基团是指C-羧基，其中R"为氢。
“三卤代甲基”是指-CZ3基团，其中Z为如本文所定义的卤素基团。
“三卤代甲磺酰基”是指Z3CS(＝O)2-基团，其中Z如上文所定义。
“三卤代甲磺酰氨基”是指Z3CS(＝O)2NRx-基团，其中Z如上文所定义，且Rx为H或(C1-6)烷基。
“亚磺酰基”是指-S(＝O)-R"基团，其中R"为(C1-6)烷基。
“磺酰基”是指-S(＝O)2R"基团，其中R"为(C1-6)烷基。
“S-磺酰氨基”是指-S(＝O)2NRXRY，其中RX及RY独立地为H或(C1-6)烷基。
“N-磺酰氨基”是指R"S(＝O)2NRX-基团，其中RX为H或(C1-6)烷基。
“O-氨甲酰基”是指-OC(＝O)NRxRy基团，其中RX及RY独立地为H或(C1-6)烷基。
“N-氨甲酰基”是指RxOC(＝O)NRy基团，其中Rx及Ry独立地为H或(C1-6)烷基。
“O-硫代氨甲酰基”是指-OC(＝S)NRxRy基团，其中Rx及Ry独立地为H或(C1-6)烷基。
“N-硫代氨甲酰基”是指RxOC(＝S)NRy-基团，其中Rx及Ry独立地为H或(C1-6)烷基。
“氨基”是指-NH2基团。
“C-酰氨基”是指-C(＝O)NRxRy基团，其中Rx及Ry独立地为H或(C1-6)烷基。
“C-硫代酰氨基”是指-C(＝S)NRxRy基团，其中Rx及Ry独立地为H或(C1-6)烷基。
“N-酰氨基”是指RxC(＝O)NRy-基团，其中Rx及Ry独立地为H或(C1-6)烷基。
“脲基”是指-NRxC(＝O)NRyRy2基团，其中Rx、Ry及Ry2独立地为H或(C1-6)烷基。
“胍基”是指-RxNC(＝N)NRyRy2基团，其中Rx、Ry及Ry2独立地为H或(C1-6)烷基。
“脒基”是指RxRyNC(＝N)-基团，其中Rx及Ry独立地为H或(C1-6)烷基。
“氰基”是指-CN基团。
“甲硅烷基”是指-Si(R")3，其中R"为(C1-6)烷基或苯基。
“膦酰基”是指P(＝O)(ORx)2，其中Rx为(C1-6)烷基。
“肼基”是指-NRxNRyRy2基团，其中Rx、Ry及Ry2独立地为H或(C1-6)烷基。
“4、5或6元环环状N-内酰胺”基团是指或
“螺”基团为其中各环只是经由一个原子连接的二环有机基团。各环在性质上可能不同或相同。连接原子也被称为螺原子，最通常为季碳(“螺碳”)。
“氧代螺”或“氧杂螺”基团为二环结构内含有氧的螺基团。“二氧代螺”或“二氧杂螺”基团在二环结构内具有两个氧。
任何两个相邻R基团可组合形成稠合至最初带有所述R基团的环的另一芳基、环烷基、杂芳基或杂环。
本领域已知杂芳基系统中的氮原子可“参与杂芳基环双键”，且这是指包含5元环杂芳基的两个互变异构结构中的双键形式。由此指示氮是否可经取代，如本领域的化学工作者所充分了解的那样。本发明的揭示内容及权利要求是基于已知的一般化学键合原理。应了解，权利要求不涵盖基于文献已知不稳定或不能存在的结构。
本文所揭示的化合物的药学上可接受的盐及前药处于本发明的范畴内。如本文及权利要求中所使用的术语“药学上可接受的盐”意欲包括无毒碱加成盐。适合盐包括衍生自有机酸及无机酸的盐，诸如(但不限于)盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸、甲磺酸、乙酸、酒石酸、乳酸、亚磺酸、柠檬酸、顺丁烯二酸、反丁烯二酸、山梨酸、乌头酸、水杨酸、邻苯二甲酸等。如本文所使用的术语“药学上可接受的盐”也意欲包括酸性基团(诸如羧酸根)与抗衡离子形成的盐，诸如铵盐、碱金属盐(尤其钠或钾)、碱土金属盐(尤其钙或镁)；及与诸如低级烷基胺(甲胺、乙胺、环己胺等)的适合有机碱形成的盐；或与经取代的低级烷基胺(例如经羟基取代的烷基胺，诸如二乙醇胺、三乙醇胺或三(羟甲基)氨基甲烷)形成的盐；或与诸如哌啶或吗啉的碱形成的盐。
如上所述，本发明化合物也包括“前药”。如本文所使用的术语“前药”涵盖术语“前药酯”及术语“前药醚”。
如上文所述，本发明涉及一种化合物，包括其药学上可接受的盐，该化合物选自：
式I化合物
式II化合物
式III化合物
及式IV化合物
其中R1为异丙烯基或异丙基；
J及E独立地为-H或-CH3，且当存在双键时，E不存在；
X选自：C4-8环烷基、C4-8环烯基、C4-9螺环烷基、C4-9螺环烯基、C4-8氧杂环烷基、C4-8二氧杂环烷基、C6-8氧杂环烯基、C6-8二氧杂环烯基、C6环二烯基、C6氧杂环二烯基、C6-9氧杂螺环烷基及C6-9氧杂螺环烯基环，其中X经A取代，其中A为选自以下的至少一个成员：-H、-卤素、-羟基、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、-C1-6烷基-Q、-经烷基取代的C1-6烷基-Q、-CN、-CF2Q、-NR8R9、-COOR2及-CONR2R2；
X也可选自：
及
其中Q选自：芳基、杂芳基、经取代的杂芳基、-OR2、-COOR3、-NR2R2、-SO2R7、-CONHSO2R3及-CONHSO2NR2R2；
R2为-H、-C1-6烷基、-经烷基取代的C1-6烷基或-经芳基取代的C1-6烷基；
Y选自：-COOR2、-C(O)NR2SO2R3、-C(O)NHSO2NR2R2、-NR2SO2R2、-SO2NR2R2、-C3-6环烷基-COOR2、-C2-6烯基-COOR2、-C2-6炔基-COOR2、-C1-6烷基-COOR2、-经烷基取代的C1-6烷基、-COOR2、-CF2-COOR2、-NHC(O)(CH2)n-COOR2、-SO2NR2C(O)R2、-四唑及-CONHOH，
其中n＝1-6；
W不存在，或为CH2或CO；
R3为-C1-6烷基或-经烷基取代的C1-6烷基；
R4选自：-H、-C1-6烷基、-C1-6烷基-C(OR3)2-C3-6环烷基、-经取代的C1-6烷基、-C1-6烷基-C3-6环烷基、-C1-6烷基-Q1、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q1、芳基、杂芳基、经取代的杂芳基、-COR6、-COCOR6、-SO2R7、-SO2NR2R2、
及
条件是当W为CO时，R4或R5不可为COR6或COCOR6；
其中Q1选自杂芳基、经取代的杂芳基、卤素、-CF3、-OR2、-COOR2、-NR8R9、-CONR10R11及-SO2R7；
R5选自-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-经C1-6烷基取代的烷基、-C1-6烷基-NR8R9、-COR10、-COR6、-COCOR6、-SO2R7及-SO2NR2R2；
条件是，R4或R5中仅一个可选自-COR6、-COCOR6、-SO2R7及-SO2NR2R2；
或若W不存在或为CH2，则R4及R5可与相邻N一起形成
R6选自：-H、-C1-6烷基、-经C1-6烷基取代的烷基、-C3-6环烷基、-经取代的C3-6环烷基-Q2、-C1-6烷基-Q2、-经C1-6烷基取代的烷基-Q2、-C3-6环烷基-Q2、芳基-Q2、-NR13R14及-OR15；
其中Q2选自芳基、杂芳基、经取代的杂芳基、-OR2、-COOR2、-NR8R9、-SO2R7、-CONHSO2R3及-CONHSO2NR2R2；
R7选自-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基、-C3-6环烷基、-CF3、芳基及杂芳基；
R8及R9独立地选自：-H、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基、芳基、杂芳基、经取代的芳基、经取代的杂芳基、-C1-6烷基-Q2及-COOR3，
且R8及R9也可独立地选自：
及
或R8及R9与相邻N一起形成选自以下的环：
及
条件是，R8或R9中仅一个可为-COOR3；
R10及R11独立地选自-H、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基及-C3-6环烷基，
或R10及R11与相邻N一起形成环，诸如：
R12选自：-C1-6烷基、-C1-6烷基-OH、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基、-C3-6环烷基、-COR7、-COONR22R23、-SOR7及-SONR24R25；
R13及R14独立地选自：-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-经取代的C1-6烷基、-C1-6烷基-Q3、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q3、经取代的C1-6烷基-Q3及
或R13及R14与相邻N一起形成选自以下的环：
及
Q3选自杂芳基、经取代的杂芳基、-NR20R21、-CONR2R2、-COOR2、-OR2及-SO2R3；
R15选自：-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-经取代的C1-6烷基、-C1-6烷基-Q3、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q3及-经取代的C1-6烷基-Q3；
R16选自-H、-C1-6烷基、-NR2R2及-COOR3；
R17选自-H、-C1-6烷基、-COOR3及芳基；
R18选自-COOR2及-C1-6烷基-COOR2；
R19选自-H、-C1-6烷基、-C1-6烷基-Q4、-COR3、-COOR3，其中Q4选自-NR2R2及-OR2；
R20及R21独立地选自-H、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基-OR2及-COR3，
或R20及R21与相邻N一起形成选自以下的环：
及
条件是，R20或R21中仅一个可为-COR3；
R22及R23独立地选自：H、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基及-C1-6环烷基，
或R22及R23与相邻N一起形成选自以下的环：
R24及R25独立地选自：-H、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基、-C1-6烷基-Q5、-C1-6环烷基、芳基、经取代的芳基、杂芳基及经取代的杂芳基，
且Q5选自卤素及SO2R3。
甚至更优选的化合物包括其中R1为异丙烯基的化合物。
也优选的是其中W不存在的化合物。
此外，优选的化合物包括由式I所涵盖的那些化合物。其中，X为C4-8环烯基、C4-9螺环烷基或C4-9螺环烯基的那些化合物甚至更优选。
其中Y处于对位的式I化合物也是优选的。
A为至少一个选自-H、-OH、-卤素、-C1-3烷基及-C1-3烷氧基的成员的式I化合物也是优选的，其中-卤素选自-Cl、-F及-Br，其中-F更优选。A为-H甚至更优选。
Y为-COOR2的式I化合物也是优选的，且Y为-COOH的式I化合物更优选。
优选的类别的化合物(包括其药学上可接受的盐)包括以下结构：
及
优选作为本发明的一部分的其它化合物(包括其药学上可接受的盐)包括以下：
及
根据所有上述各种实施方案，本发明化合物可以含有本领域技术人员可利用的药学上可接受的无毒载体、赋形剂及稀释剂的剂量单位制剂的形式经口、肠胃外(包括皮下注射、静脉内、肌内、胸骨内注射或输注技术)、通过吸入喷雾或经直肠及以其它方式给药。也可包括一种或多种辅料。
因而，根据本发明，进一步提供一种用于治疗病毒感染(诸如HIV感染及AIDS)的治疗方法及药物组合物。该治疗包括向需要该治疗的患者给予药物组合物，该药物组合物含有抗病毒有效量的一种或多种式I、式II和/或式III化合物以及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。如本文所使用的术语“抗病毒有效量”是指组合物及方法的各活性组分的总量足以显示有意义的患者益处，即抑制、改善或治愈以抑制HIV感染为特征的急性病状。当应用于单独给予的单独活性成分时，该术语是指单独该成分。当应用于组合时，该术语是指产生治疗效应的活性成分的组合量，无论是组合给药、连续给药或是同时给药。如本文及权利要求中所使用的术语“治疗”是指预防、改善或治愈与HIV感染相关的疾病。
本发明的药物组合物可呈可经口给药的悬浮液或片剂形式；以及经鼻喷雾、无菌可注射制剂，例如呈无菌可注射水溶液或油性悬浮液或栓剂形式。药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂可用于药物组合物中，且其为药物制备技术中可利用的。
当以悬浮液形式经口给药时，这些组合物根据药物配制技术中通常已知的技术来制备，且可含有用于赋予体积的微晶纤维素、作为悬浮剂的海藻酸或海藻酸钠、作为粘度增强剂的甲基纤维素及本领域已知的甜味剂/调味剂。作为立即释放片剂，这些组合物可含有微晶纤维素、磷酸二钙、淀粉、硬脂酸镁及乳糖和/或本领域已知的其它赋形剂、粘合剂、增容剂、崩解剂、稀释剂及润滑剂。
可使用适合的无毒、肠胃外可接受的稀释剂或溶剂，诸如甘露糖醇、1,3-丁二醇、水、林格氏溶液(Ringer's solution)或等张氯化钠溶液或适合的分散剂或湿润剂及悬浮剂，诸如无菌无刺激性不挥发性油，包括合成甘油一酯或甘油二酯，及脂肪酸，包括油酸，根据已知技术来配制可注射溶液或悬浮液。
本文所述的化合物可以每公斤体重约1至100毫克的剂量范围以分次给药形式经口给予人类，通常为期较长时段，诸如数天、数周、数月或甚至数年。一个优选剂量范围为每公斤体重约1至10毫克，经口分次给药。另一优选剂量范围为每公斤体重约1至20毫克，分次给药。然而，应了解，用于任何特定患者的特定剂量及给药频率均可改变，且将视各种因素而定，包括所用特定化合物的活性、该化合物的代谢稳定性及作用时长、年龄、体重、一般健康情况、性别、饮食、给药模式及时间、排泄速率、药物组合、特定病状的严重程度及经受治疗的主体。
本文也涵盖本文所述的式I、II、III和/或IV化合物与一种或多种用于治疗AIDS的其它药剂的组合。举例而言，不论是在暴露前和/或暴露后的时段，本发明化合物可与有效量的诸如以下非限制性表格中的AIDS抗病毒剂、免疫调节剂、抗感染剂或疫苗组合而有效地给药：
抗病毒剂
免疫调节剂
抗感染剂
此外，本文所述的本发明化合物可与HIV进入抑制剂组合使用。所述HIV进入抑制剂的实例论述于以下文献中：DRUGS OF THE FUTURE 1999,24(12)，第1355至1362页；CELL，第9卷，第243至246页，1999年10月29日；及DRUG DISCOVERY TODAY，第5卷，第5期，2000年5月，第183至194页；及Inhibitors of the entry of HIV into host cells.Meanwell,Nicholas A.；Kadow,John F.,Current Opinion in Drug Discovery&Development(2003),6(4),451-461。具体而言，所述化合物可与附着抑制剂、融合抑制剂及以CCR5或CXCR4复合受体为目标的趋化因子受体拮抗剂组合利用。US 7,354,924及US 7,745,625中也阐述HIV附着抑制剂。
应了解，本申请的化合物与AIDS抗病毒剂、免疫调节剂、抗感染剂、HIV进入抑制剂或疫苗的组合的范畴不限于上表中的清单，而是原则上包括与用于治疗AIDS的任何药物组合物的任何组合。
优选组合为用本发明化合物及HIV蛋白酶抑制剂和/或非核苷HIV逆转录酶抑制剂同时或交替治疗。该组合中任选存在的第四组分为核苷HIV逆转录酶抑制剂，诸如AZT、3TC、ddC或ddI。优选的HIV蛋白酶抑制剂为(活性成分阿扎那韦)。通常给予300至600mg的剂量，每天一次。此抑制剂可与低剂量利托那韦(50至500mg)一起共同给药。另一优选HIV蛋白酶抑制剂为另一有用的HIV蛋白酶抑制剂为茚地那韦，其为N-(2(R)-羟基-1-(S)-二氢茚基)-2(R)-苯基甲基-4-(S)-羟基-5-(1-(4-(3-吡啶基-甲基)-2(S)-N'-(叔丁基甲酰氨基)-哌嗪基))-戊烷酰胺乙醇化物的硫酸盐，且根据U.S.5,413,999合成。茚地那韦通常以800mg的剂量给药，每天三次。其它优选蛋白酶抑制剂为那非那韦及利托那韦。另一优选HIV蛋白酶抑制剂为沙奎那韦，其是以600或1200mg的剂量给药，每天三次。优选非核苷HIV逆转录酶抑制剂包括依法韦仑。这些组合可能对限制HIV扩散及感染程度具有出乎意料的作用。优选组合包括含有以下的组合：(1)茚地那韦与依法韦仑，及任选的AZT和/或3TC和/或ddI和/或ddC；(2)茚地那韦，及AZT和/或ddI和/或ddC和/或3TC中的任一个，尤其茚地那韦及AZT及3TC；(3)司他夫定及3TC和/或齐多夫定；(4)泰诺福韦酯反丁烯二酸盐及恩曲他滨。
在所述组合中，本发明化合物及其它活性剂可分别或联合给药。此外，给予一种成分可在给予其它药剂之前、同时或之后进行。
一般化学方法(合成方法)
本发明包含式I、式II、式III及式IV的化合物、其药物制剂及其在罹患或易受HIV感染的患者中的用途。式I、式II、式III及式IV的化合物也包括其药学上可接受的盐。用于构建式I、式II、式III及式IV化合物的一般操作及用于其合成的中间体描述于以下方案中(在缩写之后)。
缩写
在本发明的说明书及实施例中可使用一或多个以下缩写，其中大部分为本领域技术人员所熟知的常规缩写：
Bz2O＝苯甲酸酐
TBTU＝O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓四氟硼酸盐
HATU＝2-(1H-7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐甲铵
DCE＝二氯乙烷
DCM＝二氯甲烷
CDI＝羰基二咪唑
prep.HPLC＝制备型高效液相色谱法
rt＝室温
DIPEA＝二异丙基乙胺
DMAP＝4-二甲基氨基吡啶
DMSO＝二甲亚砜
THF＝四氢呋喃
KHMDS＝双(三甲基甲硅烷基)胺基钾
min＝分钟
h＝小时
sat.＝饱和的
TEA＝三乙胺
EtOAc＝乙酸乙酯
TFA＝三氟乙酸
PCC＝氯铬酸吡锭
TLC＝薄层色谱法
Tf2NPh＝(三氟甲磺酰基)甲烷磺酰胺
二烷＝1,4-二烷
PG＝保护基
atm＝大气压
mol＝摩尔
mmol＝毫摩尔
mg＝毫克
μg＝微克
μl＝毫升
μm＝微米
mm＝毫米
HOAc＝乙酸
MeOH＝甲醇
DMF＝N,N-二甲基甲酰胺
TBAF＝四丁基氟化铵
TBDMSCl＝叔丁基二甲基氯硅烷
RBF＝圆底烧瓶
DI＝去离子化
术语“C-3”及“C-28”是指三萜核心的某些位置，如根据IUPAC规则加以编号(下文关于示例性三萜桦木醇来描述位置)：
当在方法的方案及一般描述中提及化合物系列时，维持相同编号。
制备式I、II、III及IV的化合物的一般化学方案：
制备式I、II、III及IV的化合物的一般化学方案：
式I化合物可由市售(Aldrich、其它)桦木酸依据以下方案中所述的化学方法来制备。其后描述式II、III及IV的化合物。
一般反应方案如下所阐述：
方案1
式I化合物可由桦木酸如方案1中所述来制备。桦木酸在C-3羟基无保护基下可完成Curtis重排，得到C-17异氰酸酯，经酸水解后即可得到C-17胺。接着，用胺保护基(即F-moc、Boc)选择性地保护C-17胺，接着在标准条件(即PCC，戴斯-马丁试剂(Dess-Martin reagent)等)下将C-3羟基氧化成酮。使酮转化成其三氟甲磺酸酯可通过本领域技术人员已知的方法完成。接着脱除氨基中的保护基，产生C-17上未经取代的胺。经由三氟甲磺酸酯与相应硼酸之如上文所述的铃木偶联(Suzuki coupling)来引入C-3部分。或者，可使三氟甲磺酸酯与相应硼酸进行偶联，随后脱除C-17胺的保护基。一旦脱除保护基，则C-17氨基可通过本领域技术人员已知的方法(诸如烷基化、还原胺化、酰化等)进一步衍生化。这些方法中有若干描述于以下方案(方案2至7)中。在一些情况下，需要对可经保护基官能化的任何官能团去除掩蔽的额外步骤(即当Y为COOH时，总是以相应酯COOR的形式掩蔽直至此最后步骤)。
C-17伯胺可使用本领域技术人员已知的标准方法进一步修饰。一些实例显示于以下方案中。
方案2
C-17酰胺可通过羧酸与C-17伯胺在适当偶联试剂(诸如HATU、DCC及本领域技术人员已知的其它偶联试剂)存在下，在碱(诸如许尼希碱(Hunig'sbase)、TEA等)存在下，在适当溶剂(DCM、THF、DMF等)中反应来制备。羧酸酯水解而得到苯甲酸。或者，一些酰胺可通过用相应羧酸氯化物试剂代替酸来处理C-17伯胺而制备。类似地，磺胺及磺酰胺可由C-17伯胺，通过使用磺酰氯作为磺酰化剂来制备。
方案3
C-17脲可由相应氨甲酰氯或异氰酸酯在碱(诸如许尼希碱、TEA等)存在下，在适当溶剂(DCM、THF、DMF等)中反应来制备。C-17氨基甲酸酯可以类似方式，使用氯甲酸酯代替氨甲酰氯来制备。
方案4
可在还原胺化条件(例如NaBH(OAc)3)下，在AcOH/NaOAc或Ti(OPr)4存在下，在溶剂(诸如THF、1,4-二烷、DCE或DCM)中用醛处理C-17伯胺，得到C-17仲胺。
方案5
一些C-17胺可由C-17伯胺在碱存在下经烷基化试剂(R-LG)(其中LG为离去基，诸如(但不限于)Br、Cl、I、甲磺酸酯基、甲苯磺酸酯基或三氟甲磺酸酯基)烷基化来制备。在一些情况下可能需要加热。羧酸酯水解得到苯甲酸产物。
方案6
在一些情况下，也可通过延长反应时间且加热反应混合物来形成二烷基化产物。
方案7
或者，一些C-17胺可通过1,4加成至迈克尔受体(Michael acceptors)来制备。
取代基R、R'及R"可含有能通过本领域技术人员已知的方法进一步修饰的官能团(即COOH、COOR、OH、NHR)。视官能团性质而定，修饰可在最后脱除羧酸保护基之前或之后进行。
或者，可使用上述一些方法或本领域技术人员已知的其它标准方法进一步修饰(即烷基化、酰化、磺酰化等)C-17仲胺。
式II化合物可使用上文关于式I化合物所述的化学方法制备，其中一个额外步骤包括如方案8中所示使双键饱和。
方案8
或者，可控制烯烃氢化以保持A-环不饱和度，如方案9中所示。
方案9
式III化合物可用与上文关于式I及式II化合物所述相同的方式，使用齐墩果酸或熊果酸代替桦木酸作为起始物质来制备。
式IV化合物可由桦木醇或桦木酸制备，如以下方案中所述：
实施例
以下实施例说明式I、II、III及IV的化合物的典型合成，如上文概述。这些实施例仅具说明性且不意欲以任何方式限制本发明。试剂及起始物质容易为本领域普通技术人员所获得。
化学方法
典型操作及所选实施例的表征：
除非另外说明，否则直接使用如自商业来源所获得的溶剂及试剂，且反应在氮气气氛下进行。在硅胶60(0.040至0.063粒径；EM Science供应)上进行快速色谱。在Bruker DRX-500f上于500MHz(或Bruker AV 400MHz、Bruker DPX-300B或Varian Gemini 300，300MHz，如所述)记录1H NMR光谱。化学位移以相对于δTMS＝0的δ标度(ppm)报导。对于以下溶剂中的残余质子，使用以下内标：CDCl3(δH 7.26)、CD3OD(δH 3.30)、乙酸-d4(乙酸d4)(δH11.6、2.07)、DMSO混合物或DMSO-D6_CDCl3(δH 2.50及8.25)(比率为75％:25％)，及DMSO-D6(δH 2.50)。采用标准首字母缩写词描述多重性模式：s(单峰)、br.s(宽单峰)、d(双重峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、m(多重峰)、b(宽)、app(表观)。偶合常数(J)以赫兹表示。所有液相色谱(LC)数据均在使用SPD-10AV UV-Vis检测器的Shimadzu LC-10AS液相色谱仪上记录，质谱(MS)数据使用用于LC的Micromass Platform以电喷雾模式测定。
LC/MS方法：
方法1
起始％B＝0,最终％B＝100,经2分钟梯度，在100％B下保持
流速＝1mL/min
波长＝220nm
溶剂A＝90％水,10％乙腈,0.1％TFA
溶剂B＝10％水,90％乙腈,0.1％TFA
柱＝Phenomenex Luna C18,3μm,2.0×30mm
方法2
起始％B＝0,最终％B＝100,经2分钟梯度，在100％B下保持
流速＝1mL/Min
波长＝220nm
溶剂A＝90％水,10％甲醇/0.1％TFA
溶剂B＝10％水,90％甲醇/0.1％TFA
柱＝Phenomenex Luna C18,3μm,2.0×30mm
方法3
起始％B＝0,最终％B＝100,经2分钟梯度，在100％B下保持
流速＝1mL/Min
波长＝220nm
溶剂A＝95％水,5％甲醇/10Mm乙酸铵
溶剂B＝5％水,95％甲醇/10Mm乙酸铵
柱＝Phenomenex Luna C18,3μm,2.0×30mm
方法4
起始％B＝30,最终％B＝100,梯度时间＝2min
流速＝0.8mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeOH-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeOH-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝Xbridge Phenyl 2.1×50mm 2.5μm
方法5
起始％B＝30,最终％B＝100,梯度时间＝2min
流速＝1mL/min
波长＝220
溶剂A＝5％MeOH-95％H2O-10mM NH4OAc
溶剂B＝95％MeOH-5％H2O-10mM NH4OAc
柱＝Phenomenex LUNA C182.0×30mm 3μm
方法6
起始％B＝0,最终％B＝100,梯度时间＝4min
流速＝0.8mL/min
波长＝220
溶剂对＝MeOH:H2O:(0.1％TFA)
溶剂A＝10％MeOH-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeOH-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝Xbridge Phenyl 2.1×50mm 2.5μm
方法7
起始％B＝10,最终％B＝100,梯度时间＝3min
流速＝0.8mL/min
波长＝220
溶剂A＝5％MeOH-95％H2O-10mM NH4OAc
溶剂B＝95％MeOH-5％H2O-10mM NH4OAc
柱＝Phenomenex LUNA C182.0×50mm 3μm
方法8
起始％B＝20,最终％B＝100,梯度时间＝2min
流速＝0.8mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeOH-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeOH-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝Xbridge Phenyl 2.1×50mm 2.5μm
方法9
起始％B＝50,最终％B＝100,梯度时间＝6min
流速＝0.8mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeOH-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeOH-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝PHENOMENEX-LUNA 2.0×50mm 3μm
方法10
起始％B＝30,最终％B＝100,梯度时间＝3min
流速＝0.8mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeOH-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeOH-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝PHENOMENEX-C182.0×50mm 3μm
方法11
起始％B＝0,最终％B＝100,梯度时间＝4min
流速＝0.8mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeOH-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeOH-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝PHENOMENEX-C182.0×50mm 3μm
方法12
起始％B＝40,最终％B＝100,梯度时间＝4min
流速＝0.8mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeOH-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeOH-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝PHENOMENEX-C182.0×50mm 3μm
方法13
起始％B＝50,最终％B＝100,梯度时间＝4min
流速＝0.8mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeOH-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeOH-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝PHENOMENEX-C182.0×50mm 3μm
方法14
起始％B＝75,最终％B＝100,梯度时间＝2min
流速＝1.0mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeOH-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeOH-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝PHENOMENEX-C182.0×30mm 3μm
方法15
起始％B＝50,最终％B＝90,梯度时间＝4min
流速＝0.8mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeOH-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeOH-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝PHENOMENEX-C182.0×50mm 3μm
方法16
起始％B＝50,最终％B＝100,梯度时间＝3min
流速＝0.8mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeOH-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeOH-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝PHENOMENEX-C182.0×50mm 3μm
方法17
起始％B＝25,最终％B＝100,梯度时间＝2min
流速＝1.0mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeOH-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeOH-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝PHENOMENEX-C182.0×30mm 3μm
方法18
起始％B＝50,最终％B＝100,梯度时间＝4min
流速＝0.8mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeOH-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeOH-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝PHENOMENEX-C182.0×30mm 3μm
方法19
起始％B＝50,最终％B＝100,梯度时间＝4min
流速＝0.8mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeOH-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeOH-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝PHENOMENEX-C182.0×50mm 3μm
方法20
起始％B＝0,最终％B＝80,梯度时间＝4min
流速＝0.8mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeOH-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeOH-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝PHENOMENEX-C182.0×50mm 3μm
方法21
起始％B＝0,最终％B＝100,梯度时间＝3min
流速＝0.8mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeOH-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeOH-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝PHENOMENEX-C182.0×50mm 3μm
制备型HPLC
方法1
起始％B＝25,最终％B＝100,经10分钟梯度，在100％B下保持
流速＝25mL/min
溶剂A＝10％ACN-90％H2O-0.1％TFA
溶剂B＝90％ACN-10％H2O-0.1％TFA
柱＝X-bridge Phenyl 19×100mm 5μm
方法2
起始％B＝25,最终％B＝100,经12分钟梯度，在100％B下保持
流速＝25mL/min
溶剂A＝10％ACN-90％H2O-0.1％TFA
溶剂B＝90％ACN-10％H2O-0.1％TFA
柱＝X-bridge Phenyl 19×100mm 5μm
方法3
起始％B＝30,最终％B＝100,经12分钟梯度，在100％B下保持
流速＝25mL/min
溶剂A＝10％ACN-90％H2O-0.1％TFA
溶剂B＝90％ACN-10％H2O-0.1％TFA
柱＝X-bridge Phenyl 19×100mm 5μm
方法4
起始％B＝15,最终％B＝100,经20分钟梯度，在100％B下保持
流速＝40mL/min
溶剂A＝10％ACN-90％H2O-0.1％TFA
溶剂B＝90％ACN-10％H2O-0.1％TFA
柱＝Waters Sunfire 30×100mm 5μm
方法5
起始％B＝15,最终％B＝100,经15分钟梯度，在100％B下保持
流速＝40mL/min
溶剂A＝10％ACN-90％H2O-0.1％TFA
溶剂B＝90％ACN-10％H2O-0.1％TFA
柱＝Waters Sunfire 30×100mm 5μm
方法6
起始％B＝20,最终％B＝80,经20分钟梯度
流速＝40mL/min
溶剂A＝10％ACN-90％H2O-0.1％TFA
溶剂B＝90％ACN-10％H2O-0.1％TFA
柱＝Waters Sunfire 30×100mm 5μm
方法7
起始％B＝20,最终％B＝75,经25分钟梯度
流速＝40mL/min
溶剂A＝10％ACN-90％H2O-0.1％TFA
溶剂B＝90％ACN-10％H2O-0.1％TFA
柱＝Waters Sunfire 30×100mm 5μm
方法8
起始％B＝25,最终％B＝90,经15分钟梯度
流速＝40mL/min
溶剂A＝10％ACN-90％H2O-0.1％TFA
溶剂B＝90％ACN-10％H2O-0.1％TFA
柱＝Waters Sunfire 30×100mm 5μm
方法9
起始％B＝25,最终％B＝80,经20分钟梯度
流速＝40mL/min
溶剂A＝10％ACN-90％H2O-0.1％TFA
溶剂B＝90％ACN-10％H2O-0.1％TFA
柱＝Waters Sunfire 30×100mm 5μm
方法10
起始％B＝20,最终％B＝100,经15分钟梯度
流速＝40mL/min
溶剂A＝10％ACN-90％H2O-0.1％TFA
溶剂B＝90％ACN-10％H2O-0.1％TFA
柱＝Waters Sunfire 30×100mm 5μm
方法11
起始％B＝10,最终％B＝85,经12分钟梯度
流速＝40mL/min
溶剂A＝10％ACN-90％H2O-0.1％TFA
溶剂B＝90％ACN-10％H2O-0.1％TFA
柱＝Waters Sunfire 30×100mm 5μm
方法12
起始％B＝40,最终％B＝100,经12分钟梯度，在100％B下保持
流速＝25mL/min
溶剂A＝5％MeOH-95％H2O-10mM乙酸铵
溶剂B＝95％MeOH-5％H2O-10mM乙酸铵
柱＝X-bridge Phenyl 19×100mm 5μm
方法13
起始％B＝10,最终％B＝100,梯度时间＝10min
流速＝25mL/min
波长＝220
溶剂A＝5％MeCN-95％H2O-10mM NH4OAc
溶剂B＝95％MeCN-5％H2O-10mM NH4OAc
柱＝Xbridge OBD Prep Shield RP-1819×100mm 5μm
方法14
起始％B＝10,最终％B＝100,梯度时间＝10min
流速＝25mL/min
波长＝220
溶剂A＝5％MeCN-95％H2O-10mM NH4OAc
溶剂B＝95％MeCN-5％H2O-10mM NH4OAc
柱＝Xbridge Prep C1819×100mm 5μm
方法15
起始％B＝10,最终％B＝100,梯度时间＝10min
流速＝40mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeCN-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeCN-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝WATERS-Sunfire 30×100mm S5
方法16
起始％B＝10,最终％B＝90,梯度时间＝15min
流速＝40mL/min
波长＝220
溶剂A＝10％MeCN-90％H2O(0.1％TFA)
溶剂B＝90％MeCN-10％H2O(0.1％TFA)
柱＝Waters-Sunfire 30×100mm S5
手性SFC方法1
手性SFC方法2
关键中间体1通过以下方法制备：
方法1：中间体1
制备三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯
步骤1：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-异氰酸基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-醇
向桦木酸(10g，21.90mmol)于1,4-二烷(100mL)中的悬浮液中添加三乙胺(9.16mL，65.7mmol)及叠氮磷酸二苯酯(7.08mL，32.8mmol)。加热该混合物至回流。加热后，所有固体均溶解。加热混合物26小时之后，冷却该混合物至室温且在减压下浓缩。残余物用100mL水稀释且用二氯甲烷(3×100mL)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥。通过过滤移除干燥剂且在减压下浓缩滤液。使用0-15％EtOAc/己烷梯度及Thomson 240g硅胶柱，通过快速色谱纯化残余物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩。浓缩纯度较低的第二批产物，且使用Thomson 240g柱及相同梯度再纯化。将含有预期产物的级份与第一批产物合并，得到呈白色固体状的标题化合物(7.76g，17.10mmol，78％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝4.75(s,1H),4.67-4.62(m,1H),3.20(dt,J＝11.3,5.6Hz,1H),2.55(td,J＝10.9,5.9Hz,1H),2.17-2.03(m,1H),1.92-1.76(m,4H),1.69(s,3H),1.06(s,3H),0.98(s,3H),0.95(s,3H),0.85(s,3H),0.78(s,3H),1.74-0.66(m,20H)。
步骤2：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-醇盐酸盐
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-异氰酸基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-醇(7.76g，17.10mmol)于1,4-二烷(100mL)中的溶液中添加HCl(37％)(21.07mL，257mmol)。将该混合物加热至60℃并保持15小时，接着冷却至室温且在减压下浓缩。将残余物溶解于二氯甲烷及甲醇中且再浓缩两次，得到灰白色泡沫状的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-醇盐酸盐(7.75g，16.70mmol，98％产率)。粗产物不经纯化即用于下一步骤。
步骤3：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-羟基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-基)氨基甲酸叔丁酯
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-醇盐酸盐(7.75g，16.7mmol)于1,4-二烷(100mL)中的溶液中添加水(25mL)、碳酸氢钠(4.21g，50.2mmol)及Boc酸酐(5.82mL，25.08mmol)。将该混合物在室温搅拌16小时，接着将该混合物用100mL水稀释且用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在减压下浓缩，得到灰白色泡沫状的((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-羟基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-基)氨基甲酸叔丁酯。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝4.74(d,J＝1.6Hz,1H),4.64-4.62(m,1H),4.34(br.s.,1H),3.24-3.18(m,1H),2.63-2.35(m,3H),2.06-1.93(m,1H),1.71(s,3H),1.46(s,9H),1.04(s,3H),0.99(s,3H),0.98(s,3H),0.86(s,3H),0.79(s,3H),1.77-0.68(m,22H)。
步骤4：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-基)氨基甲酸叔丁酯
向所得((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-羟基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-基)氨基甲酸叔丁酯于二氯甲烷(100mL)中的溶液中添加氯铬酸吡锭(4.69g，21.74mmol)。将该混合物在室温搅拌5小时，接着再添加1.0g PCC且该混合物在室温搅拌1小时。该混合物经由硅胶与硅藻土的柱塞过滤，且用25％乙酸乙酯/己烷溶液洗涤。在减压下浓缩滤液，得到呈淡黄色泡沫状的((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-基)氨基甲酸叔丁酯。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δ＝4.74(d,J＝1.7Hz,1H),4.63(t,J＝1.7Hz,1H),4.34(br.s.,1H),2.65-2.34(m,5H),2.05-1.88(m,2H),1.71(s,3H),1.47(s,9H),1.10(s,3H),1.08(s,3H),1.05(s,3H),0.99(s,3H),0.96(s,3H),1.76-0.93(m,18H)。
步骤5：制备三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯
将所得((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-基)氨基甲酸叔丁酯于THF(100mL)中的溶液冷却至-78℃。向溶液中添加KHMDS(0.91M，于THF中)(40.4mL，36.8mmol)。在-78℃下搅拌混合物20分钟，接着经由套管添加1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基)磺酰基甲磺酰胺(7.47g，20.90mmol)于THF(100mL)中的溶液。将该混合物在-78℃下搅拌5小时，接着用100mL水淬灭且用乙酸乙酯(3×75mL)萃取。将合并的有机层用硫酸镁干燥。通过过滤除去干燥剂且在减压下浓缩滤液。将残余物溶解于少量DCM及甲醇中，且通过过滤除去所形成的黄色固体。再次浓缩滤液且用甲醇处理，且通过过滤再次移除所形成的固体。浓缩滤液且使其吸附于硅胶，接着通过快速色谱法使用0至50％乙酸乙酯/己烷梯度及Thomson 240g硅胶柱加以纯化。合并含有已脱除保护基的产物的级份且在减压下浓缩，得到产物混合物。使用0-10％EtOAc/己烷梯度及240g Thomson硅胶柱，通过快速色谱再纯化此混合物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(1.31g，1.99mmol，经三个步骤的产率为11.9％)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝5.57(dd,J＝6.7,1.8Hz,1H),4.73(s,1H),4.62(s,1H),4.32(br.s.,1H),2.64-2.31(m,3H),2.16(dd,J＝17.0,6.8Hz,1H),2.04-1.94(m,1H),1.70(s,3H),1.45(s,9H),1.13(s,3H),1.06(s,3H),1.03(s,3H),0.97(s,3H),0.93(s,3H),1.82-0.86(m,18H)。
步骤6：制备三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯
向三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(0.2g，0.304mmol)于二氯甲烷(2mL)中的溶液中添加三氟乙酸(0.5mL，6.49mmol)。将该混合物在室温搅拌1.5小时，接着在减压下浓缩。残余物用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)稀释且用二氯甲烷(3×20mL)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥。通过过滤移除干燥剂。浓缩滤液且吸附至硅胶且使用12-100％乙酸乙酯/己烷梯度及12g Thomson硅胶柱加以纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，获得呈灰白色固体状的三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(0.109g，0.195mmol，64.3％产率)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝5.57(dd,J＝6.8,1.9Hz,1H),4.73(d,J＝1.6Hz,1H),4.63-4.60(m,1H),2.54(td,J＝10.9,5.3Hz,1H),2.17(dd,J＝17.1,6.9Hz,1H),2.08-1.99(m,1H),1.70(s,3H),1.13(s,3H),1.08(s,3H),1.03(s,3H),0.97(s,3H),0.93(s,3H),1.82-0.91(m,20H)。
方法2：中间体1
制备三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯
步骤1：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲醛
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(羟甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-醇(20g，45.2mmol)于乙腈(200ml)及DCM(300ml)中的悬浮液中添加4埃(angstrom)分子筛(5g)且混合物在室温下搅拌10分钟。接着向混合物中添加NMO(15.88g，136mmol)及TPAP(0.794g，2.259mmol)。深绿色混合物在氮气下搅拌过夜。再添加NMO(2.0g)及TPAP(0.08g)且混合物在室温下搅拌7小时。混合物经由硅胶与硅藻土的垫过滤，依次用二氯甲烷、25％EtOAc/己烷洗涤。滤液在减压下浓缩且使用Thomson 240g硅胶柱及15-20％乙酸乙酯/己烷梯度纯化。分离出呈白色泡沫状的标题产物(17.6g，40.1mmol，89％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝9.68(d,J＝1.5Hz,1H),4.77(d,J＝2.0Hz,1H),4.66-4.63(m,1H),2.89(td,J＝11.2,5.8Hz,1H),2.56-2.36(m,2H),2.16-2.03(m,2H),1.97-1.84(m,2H),1.71(s,3H),1.08(s,3H),1.03(s,3H),1.00(s,3H),0.97(s,3H),0.94(s,3H),1.83-0.87(m,18H)。
步骤2：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲醛(17.6g，36.1mmol)于t-BuOH(100ml)中的溶液中添加2-甲基-2-丁烯(40ml，476mmol)。经1.25小时逐滴添加亚氯酸钠(15g，133mmol)及磷酸二氢钠一水合物(25g，181mmol)于水(200mL)中的溶液且混合物在室温下再搅拌45分钟。混合物用饱和氯化铵水溶液(100mL)稀释且用乙酸乙酯(3×125mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤且经硫酸钠干燥。通过过滤移除干燥剂且在减压下浓缩滤液。使用300g Thomson硅胶柱及10-50％乙酸乙酯/己烷梯度纯化残余物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈白色泡沫状的((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(16.4g，36.1mmol，100％)。LCMS:m/e 453.2(M-H)-,2.61min(方法3)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝10.02(br.s.,1H),4.75(d,J＝1.8Hz,1H),4.64-4.61(m,1H),3.02(td,J＝10.8,4.8Hz,1H),2.55-2.36(m,3H),2.33-2.19(m,2H),2.08-1.86(m,4H),1.70(s,3H),1.08(s,3H),1.02(s,3H),1.00(s,3H),0.98(s,3H),0.93(s,3H),1.82-0.90(m,15H)。
步骤3：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-异氰酸基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(16.41g，36.1mmol)于1,4-二烷(200mL)中的溶液中添加三乙胺(15.09mL，108mmol)及叠氮磷酸二苯酯(11.67mL，54.2mmol)。混合物加热至回流并维持18.5小时，接着冷却至室温且在减压下浓缩。将残余物分成两部分且使用0-15％乙酸乙酯/己烷梯度及Thomson 240g硅胶柱纯化以纯化各部分。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈灰白色泡沫状的((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-异氰酸基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮(10.3g，22.80mmol，63.2％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝4.75(d,J＝2.0Hz,1H),4.66-4.63(m,1H),2.60-2.36(m,4H),2.17-2.04(m,1H),1.69(s,3H),1.10(s,3H),1.08(s,3H),1.04(s,3H),0.95(s,6H),2.01-0.71(m,20H)。
步骤4：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮盐酸盐
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-异氰酸基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮(10.3g，22.80mmol)于1,4-二烷(100mL)中的溶液中添加HCl(37％)(28.1mL，342mmol)。混合物加热至60℃并保持15.5小时，接着冷却至室温且在减压下浓缩。残余物用饱和碳酸氢钠水溶液(150mL)稀释且用二氯甲烷(3×100mL)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩。使用20-60％乙酸乙酯/己烷(含有0.1％三乙胺)梯度，通过快速色谱纯化残余物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈黄色泡沫状的((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮盐酸盐(5.4g，11.68mmol，51.2％产率)。LCMS:m/e 426.5(M+H)+,1.59min(方法1)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝4.73(d,J＝2.3Hz,1H),4.60(dd,J＝2.4,1.4Hz,1H),2.58-2.37(m,3H),2.11-1.98(m,1H),1.94-1.87(m,1H),1.69(d,J＝0.5Hz,3H),1.09(s,3H),1.08(s,3H),1.03(s,3H),0.97(s,3H),0.94(s,3H),1.79-0.91(m,20H)。
步骤5：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-基)氨基甲酸叔丁酯
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮(5.25g，12.33mmol)于1,4-二烷(50mL)中的溶液中添加氢氧化钠(1N)(24.67mL，24.67mmol)，随后添加一缩二碳酸二叔丁酯(di-tert-butyl dicarbonate)(3.15mL，13.57mmol)。混合物在室温下搅拌2小时，接着添加30mL甲醇、50mL二氯甲烷及20mL水以有助于溶解混合物。在室温下搅拌1.5小时之后，反应不完全，因此添加一缩二碳酸二叔丁酯(0.3g)且混合物在室温下搅拌3小时。再次添加一缩二碳酸二叔丁酯(0.3g)且混合物在室温下搅拌16小时。由于仍存在痕量起始物质，因此向混合物中添加一缩二碳酸二叔丁酯(1g)且继续搅拌6小时，此时TLC显示无起始物质。混合物用水(75mL)稀释且用二氯甲烷(3×100mL)萃取。合并的有机层用水(100mL)洗涤，接着用硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩。使用0-10％乙酸乙酯/己烷梯度及240g硅胶柱纯化残余物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈白色泡沫状的((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-基)氨基甲酸叔丁酯(5.85g，11.13mmol，90％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝4.72(s,1H),4.62(s,1H),4.33(br.s.,1H),2.64-2.32(m,5H),2.06-1.84(m,2H),1.69(s,3H),1.45(s,9H),1.08(s,3H),1.06(s,3H),1.03(s,3H),0.97(s,3H),0.94(s,3H),1.74-0.86(m,18H)。
步骤6：制备三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯
将含有((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-基)氨基甲酸叔丁酯(1.2g，2.282mmol)及1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基)磺酰基甲烷磺酰胺(1.019g，2.85mmol)于THF(20ml)中的溶液的烧瓶冷却至-78℃。向溶液中添加KHMDS(0.91M，于THF中)(5.52mL，5.02mmol)。混合物在-78℃下搅拌1小时，接着温热至室温且搅拌1小时。反应混合物接着用饱和氯化铵水溶液(30mL)淬灭且用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合并的有机层经硫酸镁干燥。通过过滤移除干燥剂且在减压下浓缩滤液。使用0-12％乙酸乙酯/己烷梯度及Thomson 80g硅胶柱纯化粗物质。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈白色泡沫状的三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(0.9g，1.368mmol，59.9％产率)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝5.57(dd,J＝6.7,1.8Hz,1H),4.73(s,1H),4.62(s,1H),4.32(br.s.,1H),2.64-2.31(m,3H),2.16(dd,J＝17.0,6.8Hz,1H),2.04-1.94(m,1H),1.70(s,3H),1.45(s,9H),1.13(s,3H),1.06(s,3H),1.03(s,3H),0.97(s,3H),0.93(s,3H),1.82-0.86(m,18H)。
步骤7：与上文关于方法1中的步骤6所述相同的实验操作。
或者，中间体(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-异氰酸基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮可依据如下所示的方案，由桦木酸制备：
步骤1：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-异氰酸基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-醇
使用桦木酸作为起始物质，使用上文方法1步骤1中所述的相同条件制备标题化合物。
步骤2：经45分钟将PCC(11.80g，54.8mmol)分三份添加至24g粗(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-异氰酸基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-醇于二氯甲烷(200ml)中的溶液中。混合物在室温下搅拌4小时，接着再添加1g PCC且混合物在室温下进一步搅拌2小时。混合物经由硅胶与硅藻土的柱塞过滤且柱塞用乙酸乙酯:己烷的1:1溶液洗涤。在减压下浓缩滤液，得到粗产物，其不经额外纯化即用于下一步骤。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝4.76-4.74(m,1H),4.65-4.63(m,1H),2.62-2.36(m,3H),2.16-2.03(m,1H),1.69(s,3H),1.10(s,3H),1.08(s,3H),1.04(s,3H),0.96(s,6H),1.95-0.91(m,21H)。
制备6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯
步骤1：制备6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯
将6-氧代螺[3.3]庚烷-2,2-二甲酸二异丙酯(如Tetrahedron:Asymmetry.2008,19,2924-293中所述制备)(5.36g，18.98mmol)于THF(40mL)中的溶液冷却至-78℃。向溶液中添加KHMDS(0.91M，于THF中)(31.3mL，28.5mmol)。在-78℃下搅拌混合物30分钟，接着经由套管添加1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺(8.48g，23.73mmol)于THF(40mL)中的溶液。在-78℃下搅拌4.5小时之后，向混合物中再添加2.0g 1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺且在-78℃进一步搅拌。搅拌1小时之后，混合物用水(100mL)稀释，温热至室温且用乙酸乙酯(3×75mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在减压下浓缩。残余物吸附至硅胶上且使用Thomson 240g硅胶柱及0-12％乙酸乙酯/己烷梯度，通过快速色谱纯化。合并含有产物的级份且在减压下浓缩，得到呈澄清无色油状的6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(1.16g，2.80mmol，14.74％产率)，在室温下，在真空下部分地固化。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝5.53(s,1H),5.14-5.03(m,2H),2.95(s,2H),2.77(s,4H),1.27(d,J＝6.3Hz,6H),1.26(d,J＝6.3Hz,6H)。注意：样品中也存在少量杂质且在光谱的芳族区域中可见。存在杂质的产物用于反应顺序的下一步骤。
步骤2：制备6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯
向含有6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(1.16g，2.80mmol)的圆底烧瓶中添加双(频哪醇合)二硼烷(0.782g，3.08mmol)、乙酸钾(0.687g，7.00mmol)及PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(0.069g，0.084mmol)。混合物用二烷(10mL)稀释，用N2冲洗且加热至70℃并保持22小时。混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释且用二氯甲烷(3×30mL)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩。使用0-10％乙酸乙酯/己烷梯度及Thomson 40g硅胶柱，通过快速色谱纯化残余物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈黄色油状的6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(1.044g，2.66mmol，95％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝6.86(s,1H),5.05(dd,J＝11.8,6.3Hz,2H),2.70(s,4H),2.61(s,2H),1.26(s,12H),1.23(d,J＝6.3Hz,1H),1.23(d,J＝6.3Hz,1H)。
制备6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯
步骤1：制备6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯
将6-氧代螺[3.3]庚烷-甲酸甲酯(如Tetrahedron:Asymmetry.2008,19,2924-2930中所述制备)(0.599g，3.56mmol)于THF(6mL)中的溶液冷却至-78℃。向溶液中添加KHMDS(0.91M，于THF中)(4.89mL，4.45mmol)。在-78℃下搅拌混合物30分钟，接着经由套管添加1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺(1.527g，4.27mmol)于THF(6mL)中的溶液。在-78℃下搅拌4小时之后，反应混合物用水(20mL)稀释，温热至室温且用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合并的有机层以盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且在减压下浓缩。使用0-10％EtOAc/己烷梯度及Thomson 40g硅胶柱，通过快速色谱纯化残余物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈澄清淡黄色油状的6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-甲酸甲酯(0.242g，0.806mmol，22.6％产率)。1H NMR显示两种非对映异构体的混合物(0.4:1比率)，其不经分离且不经额外纯化即用于下一步骤。异构体1(次要):1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝5.58(s,1H),3.71(s,3H),3.14-3.05(m,1H),2.90(s,2H),2.60-2.52(m,2H),2.47-2.40(m,2H)。异构体2(主要):1HNMR(500MHz,氯仿-d)δ＝5.48(s,1H),3.70(s,3H),3.14-3.05(m,1H),2.94(s,2H),2.60-2.52(m,2H),2.47-2.40(m,2H)。
步骤2：制备6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯
向含有6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯(0.242g，0.806mmol)(非对映异构体的0.4:1混合物)的小瓶中添加双(频哪醇合)二硼烷(0.225g，0.887mmol)、乙酸钾(0.198g，2.015mmol)及PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(0.020g，0.024mmol)。混合物用1,4-二烷(5mL)稀释，用氮气冲洗且将小瓶密封且加热至70℃并保持23小时。将混合物冷却至室温且经由硅胶与硅藻土的柱塞过滤(用25％EtOAc/己烷洗涤)。滤液在减压下浓缩,得到呈褐色油状的6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯(0.224g，0.806mmol，100％产率)。1H NMR显示两种非对映异构体的混合物(0.8:1比率)，其不经分离，但可用于下一步骤而无需额外纯化。异构体1(次要):1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝7.02(s,1H),3.68(s,3H),3.05(dq,J＝17.6,8.7Hz,1H),2.55(s,2H),2.53-2.46(m,2H),2.41-2.32(m,2H),1.29-1.26(m,12H)。异构体2(主要):1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝6.81(s,1H),3.68(s,3H),3.05(dq,J＝17.6,8.7Hz,1H),2.66(s,2H),2.53-2.46(m,2H),2.41-2.32(m,2H),1.28-1.26(m,12H)。
(注意：1.29-1.26ppm的多重峰中也可看出存在过量的双(频哪醇合)二硼烷，且在后续步骤之后将其移除)。
实施例1
制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸盐酸盐
步骤1：铃木偶联-制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯
向含有三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(1.54g，2.76mmol)的小瓶中添加6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(1.044g，2.66mmol)、碳酸钠一水合物(0.856g，6.90mmol)及四(三苯基膦)钯(0)(0.096g，0.083mmol)。混合物用1,4-二烷(12mL)及水(3mL)稀释，接着用氮气冲洗且将小瓶密封且加热至85℃。加热5.5小时之后，将混合物冷却至室温。混合物用水(40mL)稀释且用二氯甲烷(3×40mL)萃取。合并的有机相经硫酸钠干燥。通过过滤移除干燥剂且在减压下浓缩滤液。使用0-50％乙酸乙酯/己烷梯度及Thomson 80g硅胶柱，通过快速色谱纯化残余物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈灰白色固体状的6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(1.19g，1.766mmol，63.9％产率)。LCMS:m/e 674.7(M+H)+,2.30min(方法1)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝5.87(s,1H),5.52(dd,J＝6.4,1.8Hz,1H),5.13-5.01(m,2H),4.73(br.s.,1H),4.61(br.s.,1H),2.74-2.66(m,4H),2.63-2.51(m,3H),2.14-1.99(m,2H),1.70(s,3H),1.27-1.23(m,12H),1.15(s,3H),1.07(br.s.,3H),1.06(s,3H),0.97(s,3H),0.83(s,3H),1.76-0.80(m,20H)。
步骤2：制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯
及
6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,6,7,7a,8,11b,12,13,13a-十四氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH,11aH,13bH)-亚基)螺[3.3]庚烷-2,2-二甲酸二异丙酯
向可密封的烧瓶中添加6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(0.05g，0.074mmol)、4-(2-氯乙基)硫吗啉1,1-二氧化物盐酸盐(0.052g，0.223mmol)、碘化钾(0.032g，0.193mmol)及磷酸钾盐(0.079g，0.371mmol)。混合物用乙腈(1mL)稀释，用氮气冲洗，密封且加热至120℃并保持18.5小时。将混合物冷却至室温，在减压下浓缩且使用0-50％乙酸乙酯/己烷梯度及Thomson 12g硅胶柱纯化。合并含有产物的级份且在减压下浓缩，得到24mg呈灰白色泡沫状的两种化合物的混合物。通过超临界流体色谱分离两种化合物，得到两种区域异构体产物：6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(6.6mg，0.0079mmol，10.7％产率)及6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,6,7,7a,8,11b,12,13,13a-十四氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH,11aH,13bH)-亚基)螺[3.3]庚烷-2,2-二甲酸二异丙酯(9.1mg，0.0109mmol，14.7％产率)。对于6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯而言，LCMS:m/e 835.7(M+H)+,2.24min方法1)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝5.87(s,1H),5.54-5.49(m,1H),5.13-5.01(m,2H),4.72(s,1H),4.60(s,1H),3.12-2.99(m,9H),2.75-2.43(m,12H),2.10(dd,J＝17.9,6.5Hz,1H),1.69(s,3H),1.25(t,J＝6.1Hz,12H),1.15(s,3H),1.07(s,6H),0.97(s,3H),0.82(s,3H),2.02-0.77(m,20H)。
对于6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,6,7,7a,8,11b,12,13,13a-十四氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH,11aH,13bH)-亚基)螺[3.3]庚烷-2,2-二甲酸二异丙酯而言，LCMS:m/e 835.7(M+H)+,2.23min(方法1)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝5.87(d,J＝10.1Hz,1H),5.73(d,J＝9.9Hz,1H),5.10-5.01(m,2H),4.72(s,1H),4.61(s,1H),3.13-2.94(m,10H),2.87-2.73(m,2H),2.71-2.43(m,9H),1.69(s,3H),1.24(dd,J＝6.2,2.4Hz,12H),1.10(s,3H),1.08(s,3H),1.04(s,3H),0.94(s,3H),0.93(s,3H),2.01-0.80(m,21H)。
步骤3：向6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(6.6mg，7.90μmol)于1,4-二烷(1ml)中的溶液中添加NaOH(10N)(0.05ml，0.500mmol)且将混合物加热至85℃并保持23.25小时。将混合物冷却至室温，接着用1,4-二烷(0.5mL)及甲醇(1mL)稀释。接着通过添加1N HCl而将混合物酸化且进一步用水(2mL)稀释。通过过滤收集所形成的固体，得到呈白色固体状的6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸盐酸盐(4.0mg，5.0μmol，63％产率)。LCMS:m/e 751.6(M+H)+,1.62min(方法1)。1H NMR(500MHz,乙酸-d4,)δ＝5.98(s,1H),5.61(d,J＝4.4Hz,1H),4.83(s,1H),4.73(s,1H),3.45(d,J＝11.8Hz,1H),3.34-3.01(m,12H),2.98-2.91(m,1H),2.84(s,4H),2.71-2.63(m,2H),1.77-1.74(m,3H),1.27-1.25(m,3H),1.21(s,3H),1.14(s,3H),1.11(s,3H),0.93(s,3H),2.32-0.87(m,21H)。
实施例2
制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,6,7,7a,8,11b,12,13,13a-十四氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH,11aH,13bH)-亚基)螺[3.3]庚烷-2,2-二甲酸盐酸盐
向6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,6,7,7a,8,11b,12,13,13a-十四氢-1H-环戊二烯并[a]-9-(5bH,11aH,13bH)-亚基)螺[3.3]庚烷-2,2-二甲酸二异丙酯(9.1mg，10.90μmol)于1,4-二烷(1ml)中的溶液中添加NaOH(10N)(0.05ml，0.500mmol)且将混合物加热至85℃。加热23.25h之后，将混合物冷却至室温，接着用1,4-二烷(0.5mL)及甲醇(1mL)稀释。接着通过添加1N HCl而将混合物酸化且进一步用水(2mL)稀释。通过过滤收集所形成的固体，得到呈白色固体状的6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,6,7,7a,8,11b,12,13,13a-十四氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基(5bH,11aH,13bH)-亚基)螺[3.3]庚烷-2,2-二甲酸盐酸盐(6mg，7.6μmol，70％产率)。LCMS:m/e 751.6(M+H)+,1.98min(方法1)。1H NMR(500MHz,乙酸-d4)δ＝5.92(d,J＝9.9Hz,1H),5.81(d,J＝9.8Hz,1H),4.84(br.s.,1H),4.74(s,1H),3.45(br.s.,1H),3.36-3.00(m,13H),2.98-2.79(m,3H),2.74(d,J＝7.7Hz,4H),1.76(s,3H),1.26(s,3H),1.17(s,3H),1.12(s,3H),1.09(s,3H),1.02(s,3H),2.32-0.87(m,20H)。
实施例3
制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸盐酸盐
步骤1：铃木偶联-制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯
向含有三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(0.418g，0.749mmol)的小瓶中添加6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯(0.250g，0.899mmol)、碳酸钠一水合物(0.232g，1.874mmol)及四(三苯基膦)钯(0)(0.026g，0.022mmol)。混合物用1,4-二烷(4mL)及水(1mL)稀释，接着用氮气冲洗且将小瓶密封且加热至85℃。加热5.5小时之后，将混合物冷却至室温，在减压下浓缩，吸附至硅胶且使用0-45％乙酸乙酯/己烷梯度及40g Thomson硅胶柱色谱加以纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈灰白色固体状的6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯(0.31g，0.554mmol，73.9％产率)。1H NMR显示两种非对映异构体的混合物(0.8:1比率)，其不经分离且不经额外纯化即用于下一步骤。LCMS:m/e 560.47(M+H)+,2.46min(方法2)。非对映异构体混合物：1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝6.00(s,0.45H,次要非对映异构体),5.84(s,0.55H,主要非对映异构体),5.54(td,J＝6.1,2.2Hz,1H),4.75(d,J＝2.0Hz,1H),4.62(dd,J＝2.3,1.3Hz,1H),3.71(m,3H),3.13-2.99(m,1H),2.70-2.31(m,7H),2.18-1.84(m,4H),1.72(s,3H),1.18(d,J＝3.5Hz,3H),1.10-1.08(m,6H),0.99(s,3H),0.85(s,3H),1.68-0.83(m,19H)。
步骤2：制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯
向可密封的小瓶中添加6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯(0.25g，0.447mmol)、4-(2-氯乙基)硫吗啉1,1-二氧化物盐酸盐(0.25g，1.068mmol)、碘化钾(0.222g，1.340mmol)及磷酸钾盐(0.474g，2.233mmol)。混合物用乙腈(4mL)稀释，用氮气冲洗，接着密封且加热至100℃并保持15.5小时。混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释且用二氯甲烷(3×40mL)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩。使用40g Thomson硅胶柱及6-50％乙酸乙酯/己烷梯度，通过色谱纯化残余物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈灰白色泡沫状的6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯(0.20g，0.277mmol，62.1％产率)。1HNMR显示两种非对映异构体的混合物(0.8:1比率)，其不经分离且不经额外纯化即用于下一步骤。LCMS:m/e 721.7(M+H)+,2.04min(方法1)。
步骤3：向6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯(0.025mg，0.035mmol)于1,4-二烷(2ml)中的溶液中添加NaOH(10N)(0.2ml，2.000mmol)。混合物温热至65℃并保持15小时，接着冷却至室温。通过添加HCl溶液(0.2mL浓HCl于2mL水中的溶液)。向此溶液中缓慢添加水直至其变得混浊。接着静置混合物且固体自溶液中沉淀出来。通过过滤收集固体且首先用水洗涤，且接着用乙醚洗涤，得到呈灰白色固体状的6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸盐酸盐(22.8mg，0.031mmol，89％产率)。1HNMR显示0.8:1比率的非对映异构体混合物。LCMS:m/e 707.7(M+H)+,1.90min(方法1)。非对映异构体混合物：1H NMR(500MHz,乙酸-d4)δ＝6.08(s,0.45H),5.90(s,0.55H),5.63-5.56(m,1H),4.89(s,1H),4.74(s,1H),3.53-3.08(m,16H),2.72-2.34(m,7H),1.76(s,3H),1.28(s,3H),1.22(d,J＝4.6Hz,3H),1.14(s,3H),1.12(s,3H),0.92(s,3H),2.24-0.87(m,17H)。
实施例4
制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA
步骤1：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯
向含有三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(0.109g，0.195mmol)的可密封小瓶中添加4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸酯(0.078g，0.293mmol)、水合碳酸钠(0.073g，0.586mmol)及四(三苯基膦)钯(0)(6.77g，5.86μmol)。混合物用1,4-二烷(2mL)及水(0.5mL)稀释，接着用氮气冲洗，密封且于油浴中加热至85℃。20.5小时之后，将混合物冷却至室温，用水(10mL)稀释且用二氯甲烷(3×10mL)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥。通过过滤移除干燥剂且在减压下浓缩滤液。残余物吸附至硅胶且使用12g Thomson硅胶柱及10％-80％乙酸乙酯/己烷梯度，通过色谱加以纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈灰白色固体状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,4,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯(0.035g，0.064mmol，32.7％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝5.35(br.s.,1H),5.19(d,J＝5.8Hz,1H),4.73(s,1H),4.60(br.s.,1H),3.69(s,3H),2.55(td,J＝10.7,5.1Hz,2H),2.31(d,J＝2.3Hz,2H),2.22-1.94(m,6H),1.70(s,3H),1.07(s,3H),1.79-0.81(m,34H)。
步骤2：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯
向可密封小瓶中添加4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯(0.035g，0.064mmol)、4-(2-氯乙基)硫吗啉1,1-二氧化物盐酸盐(0.045g，0.192mmol)、碘化钾(0.032g，0.192mmol)及磷酸钾盐(0.068g，0.319mmol)。混合物用乙腈(1mL)稀释，用氮气冲洗，密封且加热至110℃。加热21.75小时之后，将混合物冷却至室温。粗混合物用水(10mL)稀释且用二氯甲烷(3×10mL)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥。通过过滤移除干燥剂且在减压下浓缩滤液。残余物吸附至硅胶且使用12g Thomson硅胶柱及10-80％EtOAc/己烷梯度，通过色谱加以纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈澄清膜状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯(0.0295g，0.042mmol，65.1％产率)。LCMS:m/e709.7(M+H)+,1.90min(方法1)。
步骤3：向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯(0.029g，0.041mmol)于1,4-二烷(2ml)中的溶液中添加氢氧化钠(1N)(0.204ml，0.204mmol)。混合物温热至70℃。加热混合物16小时之后，将其冷却至室温且通过添加1mL 1N HCl酸化。接着添加水直至固体形成。通过过滤收集固体，溶于1,4-二烷及甲醇中，且通过制备型HPLC(方法2，保留时间：6.6分钟)纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈白色固体状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA(0.014g，0.02mmol，41％产率)。LCMS:m/e695.6(M+H)+,1.75min(方法1)。1H NMR(400MHz,乙酸,d4)δ＝5.37(br.s.,1H),5.22(d,J＝6.0Hz,1H),4.80(s,1H),4.70(s,1H),3.50-3.42(m,1H),3.32-3.03(m,11H),2.93-2.84(m,1H),2.63-2.54(m,1H),1.72(s,3H),1.22(s,3H),1.08(s,3H),1.02-0.92(m,9H),2.37-0.79(m,28H)。
实施例5
制备6-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚烷-2,2-二甲酸TFA
步骤1：制备6-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚烷-2,2-二甲酸二异丙酯
向6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(0.057g，0085mmol)于乙醇(2ml)、14-二烷(2ml)及乙酸(0.02ml，0.349mmol)中的溶液中添加氢氧化钯(20％，于碳上)(0.072g，0.103mmol)。混合物在1个大气压之氢气下搅拌过夜。搅拌混合物15小时之后，将其经由硅藻土柱塞(用MeOH洗涤)过滤，接着在减压下浓缩滤液。残余物用15mL饱和NaHCO3水溶液稀释且用二氯甲烷(3×15mL)萃取。合并的有机层用硫酸钠干燥。通过过滤移除干燥剂且在减压下浓缩滤液，得到呈灰白色固体状的6-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚烷-2,2-二甲酸二异丙酯(0.057g，0.085mmol，100％产率)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝5.33(d,J＝5.7Hz,1H),5.11-5.02(m,2H),3.80-3.72(m,1H),3.68-3.60(m,1H),2.66(s,2H),2.44(s,2H),2.99-0.64(m,62H)。
步骤2：制备6-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚烷-2,2-二甲酸二异丙酯
向可密封小瓶中添加6-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚烷-2,2-二甲酸二异丙酯(0.057g，0.085mmol)、4-(2-氯乙基)硫吗啉1,1-二氧化物盐酸盐(0.060g，0.255mmol)、碘化钾(0.028g，0.170mmol)及磷酸钾盐(0.090g，0.425mmol)。混合物用乙腈(1.5mL)稀释，用氮气冲洗，密封且加热至100℃。加热15小时之后，使混合物吸附至硅胶且使用Thomson 12g硅胶柱及12-100％乙酸乙酯/己烷梯度，通过快速色谱加以纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈灰白色泡沫状的6-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚烷-2,2-二甲酸二异丙酯(0.04g，0.048mmol，56.1％产率)。LCMS:m/e 839.8(M+H)+,2.33min(方法1)。
步骤3：向6-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚烷-2,2-二甲酸二异丙酯(0.04g，0.048mmol)于1,4-二烷(2ml)中的溶液中添加氢氧化钠(10N)(0.095ml，0.953mmol)且将混合物加热至85℃。加热混合物15小时之后，将其冷却至室温且通过添加1N HCl使其呈酸性。混合物接着用甲醇及二烷稀释，经由玻璃棉柱塞过滤且通过制备型HPLC(方法1，保留时间：5.1分钟)纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈灰白色固体状的6-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚烷-2,2-二甲酸三氟乙酸(0.025g，0.029mmol，60％产率)。LCMS:m/e 755.6(M+H)+,1.67min(方法1)。1H NMR(400MHz,乙酸-d4)δ＝5.38(d,J＝5.8Hz,1H),2.76(s,2H),2.53(s,2H),1.21(s,3H),1.05(s,3H),0.96(s,3H),0.89(d,J＝6.0Hz,6H),0.81(d,J＝6.5Hz,3H),3.47-0.67(m,44H)。
实施例6
制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-羧基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸
步骤1：制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((苯甲氧基)羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯
以下操作是从J.Am.Chem.Soc.2002,124,8001-8006改进得到。向含6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(0.095g，0.229mmol)的圆底烧瓶中添加双(频哪醇合)二硼烷(0.064g，0.252mmol)、苯酚钾(0.045g，0.344mmol)、三苯基膦(3.61mg，0.014mmol)及双(三苯基膦)二氯化钯(II)(4.83mg，6.88μmol)。混合物用甲苯(2mL)稀释，用氮气冲洗，接着加热至50℃并保持3小时。将混合物冷却至室温且TLC显示所有起始物质都已耗尽。向混合物中添加5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-9-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-苯甲酯(0.149g，0.220mmol)、磷酸钾盐(0.146g，0.688mmol)及PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(5.62mg，6.88μmol)。混合物用DMF(2.000mL)稀释，用氮气冲洗，接着加热至80℃。将混合物再加热90小时之后，将其冷却至室温且在减压下浓缩，接着溶于DCM及MeOH中且经由硅胶与硅藻土的柱塞过滤。在减压下浓缩滤液，且使用0-25％乙酸乙酯/己烷梯度及12g硅胶柱，通过快速色谱加以纯化。纯化所得的主要分离物含有产物混合物，因此使用较慢的0-5、5-5、5-10％乙酸乙酯/己烷梯度及12g硅胶柱，通过快速色谱进一步纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈无色泡沫状的6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((苯甲氧基)羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(0.053g，0.047mmol(基于70％纯度)，20.4％产率)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝7.40-7.30(m,5H),5.86(s,1H),5.51(dd,J＝6.4,1.8Hz,1H),5.19-5.02(m,4H),4.73(d,J＝1.5Hz,1H),4.60(s,1H),3.08-2.98(m,1H),2.73-2.66(m,4H),2.62-2.54(m,2H),1.69(s,3H),2.53-0.74(m,49H)。该物质无需另外纯化即用于下一步骤。
步骤2：制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯。
向含有6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((苯甲氧基)羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(0.053g，0.047mmol(基于70％纯度))于DCE(2ml)中的溶液的圆底烧瓶中添加三乙胺(10.43μl，0.075mmol)、叔丁基二甲基硅烷(0.016ml，0.094mmol)及乙酸钯(II)(2.63mg，0.012mmol)。混合物用氮气冲洗，接着加热至60℃并保持4.5小时。将另外3mg乙酸钯(II)随16μL叔丁基二甲基硅烷一起添加。混合物用氮气冲洗，接着加热至60℃并保持额外2.5小时。将混合物冷却至室温且经由硅藻土及硅胶的柱塞过滤，接着用25％EtOAc/己烷洗涤。在减压下浓缩滤液，得到呈无色澄清泡沫状的6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(0.026g，0.021mmol(基于65％纯度)，44.2％产率)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝5.86(s,1H),5.51(dd,J＝6.3,1.7Hz,1H),5.13-5.01(m,2H),4.73(s,1H),4.60(s,1H),3.06(td,J＝10.8,4.1Hz,1H),2.73-2.66(m,4H),2.62-2.55(m,2H),1.69(s,3H),0.96(s,9H),2.54-0.76(m,49H),0.30-0.28(m,6H)。该物质无需另外纯化即用于下一步骤。
步骤3：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(6,6-双(异丙氧基羰基)螺[3.3]庚-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸。
向6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(0.026g，0.021mmol(基于65％纯度))于THF(2ml)中的溶液中添加TBAF(75％，于水中)(10.81mg，0.031mmol)。混合物在室温下搅拌30分钟，接着用15mL 1N HCl稀释且用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在减压下浓缩，得到(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(6,6-双(异丙氧基羰基)螺[3.3]庚-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(0.024g，0.021mmol(基于60％纯度)，100％产率)。该物质无需另外纯化即用于下一步骤。LCMS:m/e 701.5(M-H)-,3.35min(方法3)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ＝10.58(br.s.,1H),5.87(s,1H),5.52(d,J＝4.8Hz,1H),5.13-5.02(m,2H),4.75(s,1H),4.62(br.s.,1H),3.07-2.97(m,1H),2.70(s,4H),2.63-2.55(m,2H),1.70(s,3H),2.54-0.77(m,49H)。该物质无需另外纯化即用于下一步骤。
步骤4：向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(6,6-双(异丙氧基羰基)螺[3.3]庚-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(0.025g，0.021mmol(基于60％纯度))于1,4-二烷(2ml)中的溶液中添加NaOH(1N)(0.25ml，0.250mmol)。混合物加热至75℃并保持66小时，接着冷却至室温。LC/MS无结论。向混合物中添加5mL 1N HCl，接着混合物用二氯甲烷(3×15mL)萃取且用硫酸钠干燥。通过过滤移除干燥剂且在减压下浓缩滤液。残余物再次溶于1,4-二烷(3mL)中且添加0.1mL10N NaOH。混合物加热至75℃并保持16.5小时，接着冷却至室温。向混合物中添加10mL 1N HCl，接着混合物用10mL水进一步稀释且用二氯甲烷(3×20mL)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩。将残余物溶于DMSO中且通过制备型HPLC(方法12，保留时间：10.2分钟)纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈白色固体状的6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-羧基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸(0.015g，0.021mmol(基于86％纯度)，99％产率)。LCMS:m/e 617.4(M-H)-,2.42min(方法3)。1H NMR(500MHz,乙酸-d4)δ＝5.93(s,1H),5.58(d,J＝4.6Hz,1H),4.76(br.s.,1H),4.62(br.s.,1H),3.08-2.99(m,1H),2.81(s,4H),2.69-2.59(m,2H),1.71(s,3H),2.40-0.80(m,37H)。
制备4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯-1,1-二甲酸二乙酯
步骤1：制备4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯-1,1-二甲酸二乙酯
将含有4-氧代环己烷-1,1-二甲酸二乙酯(0.505g，2.084mmol)及1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基)磺酰基甲烷磺酰胺(0.819g，2.293mmol)于THF(10ml)中的溶液的烧瓶冷却至-78℃。向溶液中添加KHMDS(0.5M，于甲苯中)(6.25mL，3.13mmol)。混合物在-78℃下搅拌1.5小时，接着温热至室温且搅拌1小时。反应混合物接着用饱和氯化铵水溶液(30mL)淬灭且用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合并的有机层经硫酸镁干燥，过滤，且在减压下浓缩。使用0-20％乙酸乙酯/己烷梯度，通过快速色谱纯化残余物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到仍含有杂质的产物。使用0-50％甲苯/己烷梯度、随后使用0-10％乙酸乙酯/己烷对残余物再纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈无色澄清油状的预期产物(0.417g，1.114mmol，53.4％产率)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝5.82-5.75(m,1H),4.29-4.18(m,4H),2.84-2.75(m,2H),2.50-2.41(m,2H),2.35-2.30(m,2H),1.31-1.26(m,6H)。
步骤2：制备4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯-1,1-二甲酸二乙酯
向含有4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯-1,1-二甲酸二乙酯(0.4g，1.069mmol)的烧瓶中添加双(频哪醇合)二硼烷(0.285g，1.122mmol)、乙酸钾(0.262g，2.67mmol)及1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁二氯化钯(II)(0.026g，0.032mmol)。混合物用1,4-二烷(10mL)稀释，用氮气冲洗且加热至70℃并保持5小时。混合物冷却至室温，用水(25mL)稀释且用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在减压下浓缩。使用40g硅胶柱及0-20％乙酸乙酯/己烷梯度，通过快速色谱纯化残余物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈无色澄清油状的标题化合物。该物质无需另外纯化即用于下一步骤。
实施例7
制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1,1-二甲酸TFA
步骤1：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1,1-二甲酸二乙酯
向含有三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(0.25g，0.448mmol)的可密封小瓶中添加4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯-1,1-二甲酸二乙酯(0.374g，0.531mmol)、水合碳酸钠(0.167g，1.345mmol)及四(三苯基膦)钯(palladium tetrakis)(0.016g，0.013mmol)。混合物用1,4-二烷(4mL)及水(1mL)稀释，接着用氮气冲洗且密封且于油浴中加热至85℃。加热5小时之后，将混合物冷却至室温，用水(20mL)稀释且用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在减压下浓缩。使用10-50％乙酸乙酯/己烷梯度，通过快速色谱纯化残余物。回收得到白色固体4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1,1-二甲酸二乙酯(0.032g，0.05mmol，11.3％产率)，为次要分离物。LCMS:m/e 634.6(M+H)+,2.10min(方法1)。
步骤2：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1,1-二甲酸二乙酯
向可密封小瓶中添加4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1,1-二甲酸二乙酯(0.032g，0.050mmol)、4-(2-氯乙基)硫吗啉1,1-二氧化物盐酸盐(0.035g，0.151mmol)、碘化钾(0.025g，0.151mmol)及磷酸钾盐(0.078g，0.367mmol)。混合物用乙腈(1mL)稀释，用氮气冲洗，且密封且加热至100℃。加热15.5小时之后，将混合物冷却至室温，混合物用水(10mL)稀释且用二氯甲烷(3×10mL)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩。使用10-85％乙酸乙酯/己烷梯度，通过快速色谱纯化残余物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈无色澄清膜状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1,1-二甲酸二乙酯(0.031g，0.039mmol，77％产率)。LCMS:m/e 795.7(M+H)+,2.21min(方法1)。
步骤3：向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1,1-二甲酸二乙酯(0.031g，0.039mmol)于1,4-二烷(2ml)中的溶液中添加NaOH(1N)(0.312ml，0.312mmol)。混合物加热至70℃并保持23小时，接着冷却至室温。LC/MS显示存在单水解产物，因此添加NaOH(10N)(0.05mL，0.500mmol)且将混合物加热至70℃并保持额外18.5小时。将混合物冷却至室温，用甲醇、二烷及水稀释，接着通过制备型HPLC(方法3，保留时间：4.8分钟)纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈白色固体状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1,1-二甲酸TFA(12.4mg，0.014mmol，35％产率)。LCMS:m/e 739.6(M+H)+,1.50min(方法1)。1H NMR(400MHz,乙酸,d4)δ＝5.37(br.s.,1H),5.20(d,J＝5.3Hz,1H),4.79(s,1H),4.69(s,1H),3.47(d,J＝12.3Hz,1H),3.32-3.01(m,11H),2.86(br.s.,1H),2.64(br.s.,2H),1.71(s,3H),1.21(s,3H),1.08(s,3H),0.96(s,3H),0.93(s,3H),0.93(br.s.,3H),2.29-0.87(m,26H)。
实施例8
制备4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA
步骤1：制备4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯
向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.1g，0.178mmol)于乙醇(5ml)、1,4-二烷(2ml)及乙酸(0.051ml，0.890mmol)中的溶液中添加10％钯/碳(0.095g，0.089mmol)。对混合物抽真空且用氮气再填充三次，接着在1个大气压之氢气下搅拌16小时。对混合物抽真空且用氮气冲洗，接着经由硅藻土过滤且在减压下浓缩，得到呈灰白色固体状的预期产物(0.100g，0.178mmol，100％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝5.36(br.s.,1H),5.19(d,J＝5.8Hz,1H),4.19-4.11(m,2H),2.57-2.47(m,1H),2.31(dd,J＝2.9,2.1Hz,2H),2.17(dd,J＝4.6,2.6Hz,2H),2.12-0.70(m,52H)。
步骤2：制备4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯
向可密封小瓶中添加4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.1g，0.177mmol)、4-(2-氯乙基)硫吗啉1,1-二氧化物盐酸盐(0.125g，0.532mmol)、碘化钾(0.088g，0.532mmol)及磷酸钾盐(0.188g，0.887mmol)。混合物用乙腈(2mL)稀释且用氮气冲洗，接着将小瓶密封且加热至100℃并保持15.5小时。将混合物冷却至室温且用水(20mL)稀释，接着用二氯甲烷(3×20mL)萃取。合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩。残余物吸附至硅胶，接着使用20-50％乙酸乙酯/己烷梯度及25g硅胶柱，通过快速色谱加以纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈灰白色泡沫状的4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.059g，0.081mmol，45.9％产率)。LCMS:m/e725.6(M+H)+,2.24min(方法1)。
步骤3：向4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.059g，0.081mmol)于1,4-二烷(2ml)中的溶液中添加氢氧化钠(1N)(0.407ml，0.407mmol)。混合物加热至70℃并保持16小时，接着冷却至室温。通过制备型HPLC(方法3，保留时间：5.7分钟)纯化混合物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到预期产物。仍有少量杂质，因此随后通过制备型HPLC(方法4，保留时间：12.7分钟)进行第二次纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈白色固体状的4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-1-异丙基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA(0.012g，0.015mmol，18.5％产率)。LCMS:m/e697.6(M+H)+,1.92min(方法1)。1H NMR(400MHz,乙酸-d4)δ＝5.37(br.s.,1H),5.23(d,J＝6.0Hz,1H),3.41(d,J＝12.3Hz,1H),3.35-3.02(m,11H),2.63-2.54(m,1H),1.22(s,3H),1.06(s,3H),0.89(d,J＝6.8Hz,3H),0.81(d,J＝6.5Hz,3H),2.40-0.76(m,39H)。
实施例9及实施例10
制备(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA及
(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA
步骤1：制备及分离4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯之非对映异构体
向含有4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸(0.025g，0.036mmol)于THF(1ml)中的悬浮液的小瓶中添加N,N'-二异丙基氨甲酰亚胺(Z)-2-(三甲基甲硅烷基)乙酯((Z)-2-(trimethylsilyl)ethyl N,N'-diisopropylcarbamimidate)(0.017g，0.070mmol)。将小瓶密封且加热至70℃且加热后，固体完全溶解。加热4.5小时之后，将混合物冷却至室温。LC/MS显示起始物质与产物以混合物存在。由于小瓶的密封开始失效，因此添加1mL 1,4-二烷且将混合物再次加热至70℃。加热混合物21小时(总计)之后，将混合物冷却至室温。LC/MS仍显示存在起始物质，因此另外添加30mg N,N'-二异丙基氨甲酰亚胺(Z)-2-(三甲基甲硅烷基)乙酯且将混合物进一步加热至70℃。加热7小时之后，将混合物冷却至室温。使用0-50％乙酸乙酯/己烷梯度及12g硅胶柱，通过快速色谱纯化混合物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈白色泡沫状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸2-(三甲基甲硅烷基)乙酯。通过SFC(手性SFC方法1)分离非对映异构体混合物且在减压下浓缩含有各分离物的级份，得到4.7mg异构体1及6.1mg异构体2。异构体1:1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝5.35(br.s.,1H),5.18(d,J＝4.5Hz,1H),4.71(br.s.,1H),4.59(br.s.,1H),4.21-4.14(m,2H),3.16-2.95(m,8H),2.75-2.39(m,6H),2.30(br.s.,2H),2.17(br.s.,2H),1.69(s,3H),1.06(s,3H),0.98(br.s.,3H),0.96(br.s.,3H),0.90(s,3H),0.86(s,3H),2.04-0.83(m,27H),0.065-0.04(m,9H)。异构体2:1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝5.35(br.s.,1H),5.21-5.16(m,1H),4.71(br.s.,1H),4.60(br.s.,1H),4.21-4.14(m,2H),3.14-2.97(m,8H),2.74-2.42(m,6H),2.30(br.s.,2H),2.25-2.08(m,2H),1.69(s,3H),1.06(s,3H),0.96(br.s.,3H),0.95(s,3H),0.94(s,3H),0.86(s,3H),2.03-0.83(m,27H),0.065-0.04(m,9H)。
步骤2：向前一步骤的两种异构体各自于1,4-二烷(0.25mL)中的溶液中添加TBAF(75％，于水中)(50mg，0.143mmol)。混合物温热至60℃。4.5小时之后，将混合物冷却至室温，接着用甲醇及二烷稀释且通过制备型HPLC(方法5，保留时间：异构体1：9.7分钟，异构体2：9.6分钟)纯化。合并含有各产物的级份且在减压下浓缩，得到呈灰白色固体状的异构体1(2.4mg，2.9μmol，49％产率)及异构体2(4.5mg，5.5μmol，93％产率)的游离羧酸。
实施例9：(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA：LCMS:m/e 695.6(M+H)+,1.65min(方法1)。1H NMR(400MHz,乙酸)δ＝5.38(br.s.,1H),5.23(d,J＝4.5Hz,1H),4.82(s,1H),4.71(s,1H),3.50-3.43(m,1H),3.35-3.02(m,11H),2.96-2.88(m,1H),2.64-2.54(m,1H),1.73(s,3H),1.23(s,3H),1.09(s,3H),1.02(s,3H),0.96(br.s.,3H),0.95(br.s.,3H),2.42-0.90(m,28H)。
实施例10：(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA：LCMS:m/e 695.6(M+H)+,1.63min(方法1)。1H NMR(400MHz,乙酸)δ＝5.38(br.s.,1H),5.23(d,J＝5.5Hz,1H),4.81(s,1H),4.71(s,1H),3.48(d,J＝11.8Hz,1H),3.36-3.04(m,11H),2.95-2.83(m,1H),2.66-2.55(m,1H),1.73(s,3H),1.23(s,3H),1.09(s,3H),0.99(s,6H),0.95(s,3H),2.41-0.92(m,28H)。
制备及纯化(R)-及(S)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯
步骤1：制备4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸苯甲酯
将含有4-氧代环己烷甲酸苯甲酯(6.0g，25.8mmol)(关于制备，参见Bioorg.Med.Chem.Lett.2008,18,5107-5110)及1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺(10.15g，28.4mmol)的圆底烧瓶抽真空且用氮气回填三次。混合物用THF(100mL)稀释且冷却至-78℃。经20分钟向混合物中缓慢添加KHMDS(0.5M，于甲苯中)(64.6mL，32.3mmol)。混合物在-78℃下搅拌30分钟，接着移除冰浴且在室温下搅拌1.5小时。混合物用水(150mL)稀释且用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在减压下浓缩，得到呈淡红色油状的粗4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸苯甲酯。粗产物无需另外纯化即用于下一步骤。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝7.42-7.29(m,5H),5.79-5.76(m,1H),5.18-5.13(m,2H),2.70-2.61(m,1H),2.52-2.34(m,4H),2.20-2.13(m,1H),1.99-1.90(m,1H)。
步骤2：制备4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯
向含有粗制4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸苯甲酯(9.40g，25.8mmol)的烧瓶中添加双(频哪醇合)二硼烷(6.88g，27.1mmol)、乙酸钾(6.33g，64.5mmol)及1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁二氯化钯(II)(0.637g，0.774mmol)。对混合物抽真空且用氮气填充3次，接着用1,4-二烷(100mL)稀释且加热至70℃并保持21.5小时。混合物冷却至室温，用水(100mL)稀释且用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在减压下浓缩。使用0-30％乙酸乙酯/己烷梯度及300g硅胶柱，通过快速色谱纯化残余物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到4.26g呈无色澄清油状的产物。将样品分配且一份(1.0g)使用0-7％丙酮/己烷梯度，通过快速色谱再次加以纯化。合并含有产物的级份且在减压下浓缩，得到呈无色澄清油状的0.7g 4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯。第二份(2.9g)通过手性SFC(手性SFC方法2)纯化，得到两种分开的对映异构体：对映异构体1:(R)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯:0.883g；及对映异构体2:(S)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯:0.932g。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝7.42-7.32(m,5H),6.59-6.55(m,1H),5.15(s,2H),2.65-2.58(m,1H),2.42-2.37(m,2H),2.34-2.26(m,1H),2.20-2.03(m,2H),1.71-1.59(m,1H),1.28(s,12H)。
制备1-羟基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯
步骤1：制备1-羟基-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸苯甲酯
将含有4-氧代环己烷甲酸苯甲酯(0.25g，1.076mmol)及1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺(0.481g，1.345mmol)于THF(10ml)中的溶液的圆底烧瓶冷却至-78℃。向溶液中添加KHMDS(0.5M，于甲苯中)(4.74mL，2.368mmol)(尽管烧瓶配备有隔膜，但对自反应混合物中排除空气无特别关注)。混合物在-78℃下搅拌1小时，接着温热至室温且搅拌1.5小时。TLC仍显示存在痕量起始物质，因此再添加0.1g 1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基))甲烷磺酰胺且混合物在室温下进一步搅拌1小时，接着混合物用水(30mL)稀释且用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在减压下浓缩。使用0-40％乙酸乙酯/己烷梯度及25g硅胶柱，通过快速色谱纯化残余物。合并含有主要产物的级份且在减压下浓缩，得到呈澄清膜状的1-羟基-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸苯甲酯(0.101g，0.266mmol，24.7％产率)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝7.43-7.32(m,5H),5.70(dt,J＝5.0,2.2Hz,1H),5.24(s,2H),3.17(s,1H),2.82-2.75(m,1H),2.72-2.63(m,1H),2.40-2.28(m,2H),2.13(ddd,J＝13.3,10.9,6.2Hz,1H),1.96(ddt,J＝13.3,6.0,2.6Hz,1H)。
步骤2：制备1-羟基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯
向含有1-羟基-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸苯甲酯(0.1g，0.263mmol)的烧瓶中添加双(频哪醇合)二硼烷(0.070g，0.276mmol)、乙酸钾(0.065g，0.657mmol)及1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁二氯化钯(II)(6.49g，7.89μmol)。混合物用1,4-二烷(2mL)稀释，用氮气冲洗且加热至70℃并保持16小时。混合物冷却至室温，用水(20mL)稀释且用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在减压下浓缩，得到粗1-羟基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯。113mg粗产物无需另外纯化即进入下一步骤。LCMS:m/e 359.3(M+H)+,1.79min(方法1)。
实施例11
制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-1-羟基环己-3-烯甲酸TFA
步骤1：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-1-羟基环己-3-烯甲酸苯甲酯
将烧瓶中含有的1-羟基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯(0.113g，0.221mmol)及三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(0.082g，0.147mmol)用1,4-二烷(1ml)及水(0.25ml)稀释。向混合物中添加水合碳酸钠(0.075g，0.605mmol)且混合物用氮气除气5分钟。向混合物中添加四(三苯基膦)钯(palladium tetrakis)(5.10mg，4.41μmol)，接着烧瓶用氮气再填充三次来净化。混合物加热至85℃并保持4小时，接着冷却至室温且使用20-80％乙酸乙酯/己烷梯度及25g硅胶柱，通过快速色谱加以纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈灰白色泡沫状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,4,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-1-羟基环己-3-烯甲酸苯甲酯(0.053g，0.083mmol，56.3％产率)。LCMS:m/e 640.6(M+H)+,1.91min(方法1)。
步骤2：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-1-羟基环己-3-烯甲酸苯甲酯
向可密封小瓶中添加4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-1-羟基环己-3-烯甲酸苯甲酯(0.053g，0.083mmol)、4-(2-氯乙基)硫吗啉1,1-二氧化物盐酸盐(0.078g，0.331mmol)、碘化钾(0.041g，0.248mmol)及磷酸钾盐(0.088g，0.414mmol)。混合物用乙腈(1.5mL)稀释且用氮气冲洗，接着密封且加热至100℃并保持15.25小时。混合物冷却至室温且过滤以移出固体，用二氯甲烷洗涤。在减压下浓缩滤液且吸附至硅胶，接着使用20-80％乙酸乙酯/己烷梯度及12g硅胶柱，通过快速色谱加以纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈无色澄清膜状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-1-羟基环己-3-烯甲酸苯甲酯(0.029g，0.036mmol，43.7％产率)。LCMS:m/e 801.7(M+H)+,1.92min(方法1)。
步骤3：向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-1-羟基环己-3-烯甲酸苯甲酯(28.8mg，0.036mmol)于1,4-二烷(2ml)中的溶液中添加NaOH(1N)(0.2ml，0.200mmol)。混合物加热至75℃后维持4.5小时，接着冷却至室温。混合物用甲醇稀释且通过制备型HPLC纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈白色固体状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-1-羟基环己-3-烯甲酸TFA(16mg，0.018mmol，51.2％产率)。LCMS:m/e 711.6(M+H)+,1.54min(方法1)。1H NMR(500MHz,乙酸-d4)δ＝5.33(br.s.,1H),5.32-5.28(m,1H),4.84(s,1H),4.74(s,1H),3.50(dt,J＝12.8,3.3Hz,1H),3.36-3.06(m,11H),2.93-2.86(m,1H),2.75-2.69(m,1H),2.52-2.39(m,1H),1.76(s,3H),1.26(s,3H),1.13(s,3H),2.34-0.93(m,35H)。
C-3环己烯、C-17胺形成的一般操作(实施例12-16)
实施例12
制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌嗪-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA
步骤1：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯
向含有三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(1.22g，2.187mmol)的烧瓶中添加磷酸钾盐(1.393g，6.56mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.613g，2.187mmol)、2-二环己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-联苯(S-phos)(0.067g，0.164mmol)及乙酸钯(II)(0.025g，0.109mmol)。混合物用1,4-二烷(10mL)及水(1mL)稀释，用氮气冲洗，接着密封且加热至75℃。加热15小时之后，将混合物冷却至室温且在减压下浓缩。残余物用水(40mL)稀释且用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在减压下浓缩。使用10-70％EtOAc/己烷梯度及80g硅胶柱，通过快速色谱纯化残余物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈灰白色固体状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,4,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(806mg，1.434mmol，65.6％产率)。LCMS:m/e562.7(M+H)+,2.17min(方法1)。
步骤2：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯
向可密封小瓶中添加4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.1g，0.178mmol)、1-溴-2-氯乙烷(0.148ml，1.780mmol)及磷酸钾盐(0.189g，0.890mmol)。混合物用乙腈(1.5mL)稀释，用氮气冲洗，接着密封且加热至120℃。加热17.5小时之后，将混合物冷却至室温且通过过滤移除一些固体。在减压下浓缩滤液，得到呈粗产物形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯，其无需另外纯化即用于下一步骤。LCMS:m/e588.7(M+H)+,2.30min(方法1)。
步骤3：制备4-(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌嗪-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯
向含有粗4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.094g，0.16mmol)的烧瓶中添加1-甲烷磺酰基-哌嗪(0.131g，0.800mmol)。混合物用1,4-二烷(2mL)稀释且添加许尼希碱(0.168mL，0.960mmol)。混合物连接至回流冷凝器上且加热至100℃并保持24小时，接着冷却至室温，在减压下浓缩且吸附至硅胶。使用12g硅胶柱及20-80％乙酸乙酯/己烷梯度，通过快速色谱纯化混合物。合并含有产物的级份且在减压下浓缩，得到呈灰白色固体状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌嗪-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯。LCMS:m/e 752.8(M+H)+,2.22min(方法1)。
步骤4：向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌嗪-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(75mg，0.100mmol)于1,4-二烷(2ml)中的溶液中添加氢氧化钠(1N)(0.499ml，0.499mmol)。混合物加热至75℃并保持3小时，接着冷却至室温，且通过制备型HPLC(方法8，保留时间：9.2分钟)纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈白色固体状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌嗪-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA(51mg，0.061mmol，61％产率)。LCMS:m/e724.7(M+H)+,1.72min(方法1)。1H NMR(500MHz,乙酸-d4)δ＝5.38(br.s.,1H),5.25-5.21(m,1H),4.83(s,1H),4.72(s,1H),3.69-3.49(m,8H),3.36(br.s.,4H),2.92(s,3H),2.87-2.78(m,1H),2.64-2.56(m,1H),1.73(s,3H),1.17(s,3H),1.08(s,3H),2.39-0.84(m,37H)。
实施例13
制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA
步骤1及2与上文关于4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌嗪-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA的制备所述相同。
步骤3：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯
向含有粗4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.055g，0.094mmol)于1,4-二烷(2ml)中的悬浮液的烧瓶中添加许尼希碱(0.098ml，0.561mmol)，随后添加4-(甲磺酰基)哌啶(0.076g，0.468mmol)。混合物加热至100℃并保持20.5小时，接着冷却至室温且使用20-80％乙酸乙酯/己烷梯度及12g硅胶柱，通过快速色谱加以纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈灰白色固体状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.036g，0.048mmol，51.2％产率)。LCMS:m/e751.7(M+H)+,2.29min(方法1)。
步骤4：向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.036g，0.048mmol)于1,4-二烷(2ml)中的溶液中添加氢氧化钠(1N)(0.240ml，0.240mmol)且将混合物加热至75℃。加热24小时之后，将混合物冷却至室温且再搅拌24小时，接着用甲醇及二烷稀释且通过制备型HPLC(方法9，保留时间：10.96分钟)纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈白色固体状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA(0.026g，0.031mmol，65％产率)。LCMS:m/e723.7(M+H)+,1.65min(方法1)。
实施例14
制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-吗啉代乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA
步骤1及2与上文关于4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌嗪-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA的制备所述相同。
步骤3：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-吗啉代乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯
向含有4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.202g，0.344mmol)于1,4-二烷(3ml)中的悬浮液的烧瓶中添加许尼希碱(0.421ml，2.408mmol)，随后添加吗啉(0.150g，1.720mmol)。混合物加热至100℃并保持15.5小时，接着冷却至室温。使用0-40％乙酸乙酯/己烷梯度及25g硅胶柱，通过快速色谱直接纯化混合物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈白色泡沫状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-吗啉代乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.148g，0.219mmol，63.7％产率)。LCMS:m/e675.8(M+H)+,2.06min(方法1)。
步骤4：向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-吗啉代乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.02g，0.030mmol)于1,4-二烷(1ml)中的溶液中添加氢氧化钠(1N)(0.148ml，0.148mmol)且将混合物加热至75℃。加热混合物17.5小时之后，将其冷却至室温且通过制备型HPLC(方法8，保留时间：8.6分钟)纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈白色固体状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-吗啉代乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA(19mg，0.025mmol，83％产率)。LCMS:m/e647.7(M+H)+,1.69min(方法1)。1H NMR(500MHz,乙酸-d4)δ＝5.41(br.s.,1H),5.28-5.23(m,1H),4.85(s,1H),4.74(s,1H),3.97(br.s.,4H),3.80-3.67(m,4H),3.41(br.s.,4H),2.87-2.77(m,1H),2.66-2.59(m,1H),1.76(s,3H),1.16(s,3H),1.10(s,3H),1.06-0.93(m,9H),2.44-0.74(m,28H)。
实施例15
制备(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA
步骤1：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸(R)-苯甲酯
向含有三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(0.65g，1.165mmol)的小瓶中添加磷酸钾盐(0.742g，3.50mmol)、(R)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯(0.8g，2.338mmol)(上文制备的对映异构体1)、2-二环己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-联苯(S-phos)(0.072g，0.175mmol)及乙酸钯(II)(0.026g，0.117mmol)。混合物用1,4-二烷(10mL)及水(1mL)稀释，用氮气冲洗，接着将小瓶密封且加热至75℃。加热6小时之后，将混合物冷却至室温，用水(20mL)及盐水(20mL)稀释，且用二氯甲烷(5×40mL)萃取。有机层经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩。使用10-60％乙酸乙酯/己烷梯度及40g硅胶柱，通过快速色谱纯化残余物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈灰白色固体状的(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯(0.488g，0.782mmol，67.1％产率)。LCMS:m/e 624.65(M+H)+,2.18min(方法1)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝7.40-7.30(m,5H),5.35(br.s.,1H),5.18(dd,J＝6.2,1.8Hz,1H),5.14(s,2H),4.73(d,J＝2.0Hz,1H),4.60(s,1H),2.65-2.50(m,2H),2.38-2.30(m,2H),2.25-1.94(m,5H),1.70(s,3H),1.07(s,3H),0.96(s,3H),0.94(s,3H),0.92(s,3H),0.86(s,3H),1.80-0.83(m,23H)。
步骤2：制备(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯
向可密封小瓶中添加(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯(0.075g，0.120mmol)、1-溴-2-氯乙烷(0.100ml，1.202mmol)及磷酸钾盐(0.128g，0.601mmol)。混合物用乙腈(1.5mL)稀释，用氮气冲洗，接着将小瓶密封且加热至120℃。加热24小时之后，将混合物冷却至室温且过滤以移出固体。固体用二氯甲烷洗涤且在减压下浓缩滤液，得到呈灰白色固体状的(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯，其无需另外纯化即用于下一步骤。LCMS:m/e 650.7(M+H)+,2.22min(方法1)。
步骤3：制备(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯TFA
向含有4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸(R)-苯甲酯(78mg，0.12mmol)于1,4-二烷(2ml)中的悬浮液的烧瓶中添加许尼希碱(0.126ml，0.720mmol)及4-(甲磺酰基)哌啶(98mg，0.600mmol)。附接有回流冷凝器的烧瓶被加热至100℃并保持23小时，接着冷却至室温，用水(10mL)稀释且用二氯甲烷(3×10mL)萃取。有机层经硫酸钠干燥，过滤且在减压下浓缩。残余物通过制备型HPLC(方法10)纯化。合并含有预期产物的级份且在氮气流下浓缩，得到呈白色泡沫状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸(R)-苯甲酯TFA(44.5mg，0.048mmol，40.0％产率)。LCMS:m/e 813.75(M+H)+,2.09min(方法1)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝7.39-7.30(m,5H),5.35(br.s.,1H),5.17(d,J＝4.6Hz,1H),5.14(s,2H),4.78(s,1H),4.70(s,1H),3.45-3.21(m,5H),3.19-3.09(m,1H),3.07-2.98(m,1H),2.90(s,3H),2.81-2.54(m,4H),1.69(s,3H),1.11(s,3H),1.02(s,3H),0.93(s,3H),0.93(s,3H),0.87(s,3H),2.40-0.82(m,32H)。
步骤4：向(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯(0.04g，0.049mmol)于1,4-二烷(2ml)中的溶液中添加氢氧化钠(1N)(0.246ml，0.246mmol)。混合物加热至60℃并保持5小时，接着冷却至室温。混合物用甲醇及二烷稀释且通过制备型HPLC(方法11，保留时间：8.89分钟)纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈白色固体状的(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA(27mg，0.032mmol，65％产率)。LCMS:m/e723.8(M+H)+,2.02min(方法1)。1H NMR(500MHz,乙酸-d4)δ＝5.41(br.s.,1H),5.26(d,J＝4.6Hz,1H),4.86(s,1H),4.75(s,1H),3.87-3.68(m,6H),3.47-3.39(m,1H),3.23(q,J＝9.8Hz,2H),3.02(s,3H),2.86-2.78(m,1H),2.67-2.59(m,1H),1.76(s,3H),1.16(s,3H),1.10(s,3H),1.02(s,3H),1.01(s,3H),0.96(s,3H),2.49-0.87(m,32H)。此化合物的结构通过X射线结晶学技术来确认。
实施例16
制备(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA
步骤1：制备(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯
向含有三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(0.05g，0.090mmol)的小瓶中添加磷酸钾盐(0.057g，0.269mmol)、(S)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯(0.062g，0.181mmol)(上文制备的对映异构体2)、2-二环己基膦基-2',6'-二甲氧基-1,1'-联苯(S-phos)(5.52g，0.013mmol)及乙酸钯(II)(2.013g，8.96μmol)。混合物用1,4-二烷(1mL)及水(0.1mL)稀释，用氮气冲洗，接着密封且加热至75℃。加热6小时之后，将混合物冷却至室温，用二氯甲烷稀释，且经硫酸钠干燥。通过过滤移除干燥剂且在减压下浓缩滤液。使用10-60％乙酸乙酯/己烷梯度及12g硅胶柱，通过快速色谱纯化残余物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈灰白色固体状的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯(0.042g，0.067mmol，75％产率)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝7.42-7.31(m,5H),5.37(br.s.,1H),5.21-5.17(m,1H),5.16(s,2H),4.75(d,J＝1.9Hz,1H),4.62(s,1H),2.65-2.52(m,2H),2.39-2.32(m,2H),2.22-2.15(m,2H),2.10-1.96(m,3H),1.71(s,3H),1.09(s,3H),0.98(s,6H),0.91(s,3H),0.88(s,3H),1.82-0.83(m,23H)。
步骤2：制备(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯
向可密封小瓶中添加(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯(0.042g，0.067mmol)、1-溴-2-氯乙烷(0.056ml，0.673mmol)及磷酸钾盐(0.071g，0.337mmol)。混合物用乙腈(1mL)稀释，用氮气冲洗，接着密封且加热至120℃。加热23小时之后，将混合物冷却至室温且过滤反应混合物以移出固体。固体用二氯甲烷洗涤且在减压下浓缩滤液，得到呈灰白色固体状的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯。粗产物无需另外纯化即用于下一步骤。LCMS:m/e 650.8(M+H)+,2.26min(方法1)。
步骤3：制备(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯
向含有(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯(0.044g，0.067mmol)于1,4-二烷(2ml)中的悬浮液的烧瓶中添加许尼希碱(0.070ml，0.402mmol)，随后添加4-(甲磺酰基)哌啶盐酸盐(0.067g，0.335mmol)。烧瓶附接至回流冷凝器且加热至95℃并保持15小时，接着冷却至室温。粗混合物吸附至硅胶且使用10-75％乙酸乙酯/己烷梯度及12g硅胶柱，通过快速色谱加以纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈无色澄清膜状的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯(0.033g，0.041mmol，60.6％产率)。LCMS:m/e 813.8(M+H)+,2.17min(方法1)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝7.40-7.29(m,5H),5.37-5.33(m,1H),5.16(dd,J＝6.1,1.7Hz,1H),5.14(s,2H),4.71(d,J＝1.7Hz,1H),4.59(s,1H),3.17-3.06(m,2H),2.83(s,3H),2.86-2.78(m,1H),2.65-2.53(m,4H),2.49-2.42(m,2H),2.38-2.30(m,2H),2.19-2.12(m,4H),1.69(s,3H),1.08(s,3H),0.96(s,6H),0.89(s,3H),0.85(s,3H),2.12-0.82(m,29H)。
步骤4：向(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯(0.033g，0.041mmol)于1,4-二烷(2ml)中的溶液中添加氢氧化钠(1N)(0.203ml，0.203mmol)。混合物加热至60℃并保持4小时，接着冷却至室温。混合物用甲醇稀释，经由玻璃棉柱塞过滤且通过制备型HPLC(方法8，保留时间：8.44分钟)纯化。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈白色固体状的(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA(21.0mg，0.025mmol，61％产率)。LCMS:m/e723.6(M+H)+,1.57min(方法1)。1H NMR(500MHz,乙酸-d4)δ＝5.41(br.s.,1H),5.25(d,J＝4.7Hz,1H),4.86(s,1H),4.75(s,1H),3.83-3.67(m,6H),3.44-3.37(m,1H),3.22-3.12(m,2H),3.02(s,3H),2.87-2.78(m,1H),2.66-2.59(m,1H),2.44-2.32(m,3H),1.76(s,3H),1.17(s,3H),1.10(s,3H),1.04(s,3H),0.98(s,3H),0.96(s,3H),2.28-0.90(m,29H)。
实施例17
制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸盐酸盐
步骤1：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯
向含有三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(0.25g，0.448mmol)的可密封小瓶中添加4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.138g，0.493mmol)、水合碳酸钠(0.167g，1.345mmol)及四(三苯基膦)钯(palladium tetrakis)(0.016g，0.013mmol)。混合物用1,4-二烷(4mL)及水(1mL)稀释，接着用氮气冲洗且密封且于油浴中加热至85℃。加热5小时之后，将混合物冷却至室温，用水(20mL)稀释且用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤且在减压下浓缩。使用6-50％乙酸乙酯/己烷梯度及40g硅胶柱，通过快速色谱纯化残余物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈灰白色固体状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,4,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.119，0.212mmol，47.3％产率)。LCMS:m/e562.6(M+H)+,2.13min(方法1)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ＝5.35(br.s.,1H),5.19(d,J＝6.1Hz,1H),4.73(d,J＝1.9Hz,1H),4.60(s,1H),4.15(q,J＝7.1Hz,2H),2.58-2.47(m,2H),2.33-2.27(m,2H),2.23-1.94(m,6H),1.70(s,3H),1.27(t,3H),1.07(s,3H),1.79-0.82(m,34H)。
步骤2：向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.02g，0.036mmol)于1,4-二烷(1ml)中的悬浮液中添加氢氧化钠(1N)(0.2ml，0.200mmol)且将混合物加热至70℃。加热混合物15.5小时之后，将其冷却至室温。混合物用甲醇稀释且可见固体。添加2mL 1N HCl且通过过滤收集所形成的固体且用水洗涤。分离出呈灰白色固体状的预期产物4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸盐酸盐(0.02g，0.033mmol，94％产率)。LCMS:m/e534.6(M+H)+,1.74min(方法1)。1H NMR(500MHz,乙酸-d4)δ＝5.41(br.s.,1H),5.27-5.24(m,1H),4.88(s,1H),4.74(s,1H),2.88-2.79(m,1H),2.67-2.59(m,1H),1.77(s,3H),1.18(s,3H),1.08(s,3H),2.43-0.92(m,37H)。
实施例18
制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-羟乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA
步骤1：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-羟乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯
向可密封小瓶中添加4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.156g，0.278mmol)、溴乙醇(0.059ml，0.833mmol)、碘化钾(0.138g，0.833mmol)及磷酸钾盐(0.295g，1.388mmol)。混合物用乙腈(2mL)稀释，用氮气冲洗，接着密封且加热至100℃。加热15小时之后，将混合物冷却至室温。LC/MS仍显示存在起始物质，因此再添加0.059mL溴乙醇，混合物用1mL乙腈稀释，且密封且加热至120℃。再加热混合物20小时之后，将其冷却至室温，且用10mL水稀释。通过过滤收集所形成的固体且用水洗涤，得到呈灰白色固体状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-羟乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.145g，0.239mmol，86％产率)。LCMS:m/e606.7(M+H)+,2.18min(方法1)。
步骤2：向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-羟乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯(0.013g，0.022mmol)于1,4-二烷(1ml)中的溶液中添加NaOH(1N)(0.2ml，0.200mmol)。混合物加热至75℃并保持15小时，接着冷却至室温。混合物通过制备型HPLC(方法6，保留时间：14.0分钟)纯化且合并含有产物的级份且在减压下浓缩。产物通过制备型HPLC(方法7，保留时间：16.9分钟)第二次纯化，以获得更高的纯度。在减压下浓缩含有各产物的级份，得到4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-羟乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA(4.6mg，6.6μmol，30％产率)。LCMS:m/e 578.6(M+H)+,1.71min(方法1)。1H NMR(500MHz,乙酸-d4)δ＝5.38(br.s.,1H),5.25-5.21(m,1H),4.82(s,1H),4.71(s,1H),4.05-3.93(m,2H),3.42-3.36(m,1H),3.32-3.24(m,1H),2.85(td,J＝10.9,5.3Hz,1H),2.64-2.56(m,1H),1.74(s,3H),1.13(s,3H),1.09(s,3H),1.03-0.90(m,9H),2.40-0.89(m,29H)。
通过此方法制备纯的非对映异构体，仅在实施例19的步骤1中使用(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯作为起始物质且在实施例20的步骤1中使用(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸苯甲酯作为起始物质。或者，它们可自上述混合物中分离。
实施例19
制备(R)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-羟乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA
LCMS:m/e 578.7(M+H)+,1.75min(方法1)。1H NMR(500MHz,乙酸-d4)δ＝5.38(br.s.,1H),5.22(dd,J＝6.1,1.6Hz,1H),4.82(s,1H),4.71(s,1H),4.06-3.94(m,2H),3.42-3.37(m,1H),3.32-3.25(m,1H),2.86(td,J＝11.0,5.5Hz,1H),2.63-2.56(m,1H),1.74(s,3H),1.13(s,3H),1.09(s,3H),1.01(s,3H),0.95(s,3H),0.92(s,3H),2.41-0.85(m,29H)。
实施例20
制备(S)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-羟乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸TFA
LCMS:m/e 578.6(M+H)+,1.67min(方法1)。1H NMR(500MHz,乙酸-d4)δ＝5.38(br.s.,1H),5.23(d,J＝4.9Hz,1H),4.82(s,1H),4.71(s,1H),4.05-3.91(m,2H),3.39-3.33(m,1H),3.30-3.24(m,1H),2.92-2.83(m,1H),2.64-2.56(m,1H),1.74(s,3H),1.13(s,3H),1.08(s,3H),0.99(s,3H),0.98(s,3H),0.93(s,3H),2.41-0.83(m,29H)。
实施例21
制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-N-(甲磺酰基)环己-3-烯甲酰胺TFA
步骤1：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酰氯
向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸(0.1g，0.144mmol)于二氯甲烷(4ml)中的悬浮液中添加亚硫酰氯(0.105ml，1.439mmol)。混合物连接至回流冷凝器且加热至回流。固体未完全溶解，因此添加DCE(3mL)且连接至回流冷凝器的混合物温热至60℃。仍剩有固体，因此添加THF(2mL)且混合物进一步加热至70℃。固体从未完全溶解，但无论如何，允许反应混合物回流。加热4小时之后，将混合物冷却至室温。由于向分析样品中添加甲醇来帮助溶解用于分析的产物，因此LC/MS显示甲酯。在减压下浓缩混合物，接着用二氯甲烷稀释且再浓缩两次。粗产物无需另外纯化即用于下一步骤。LCMS:m/e 709.7(M+MeOH)+,2.08min(方法1)。
步骤2：向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酰氯(103mg，0.144mmol)于1,2-二氯甲烷(3ml)中的悬浮液中添加许尼希碱(0.252ml，1.440mmol)。向溶液中添加甲烷磺酰胺(68.5mg，0.720mmol)(使用之前，通过与甲苯共沸来脱水)于1,2-二氯乙烷(1.5mL)及DMF(2mL)中的溶液。添加DMAP(3.52mg，0.029mmol)且将混合物温热至50℃并保持40小时。混合物用乙醇及二烷稀释且通过制备型HPLC(方法5，保留时间：9.2分钟)纯化。合并含有产物的级份且在减压下浓缩，得到预期产物，该产物仍混杂有少量母体羧酸。通过制备型HPLC(方法16，保留时间：10.610.6分钟)再纯化产物。合并含有预期产物的级份且在减压下浓缩，得到呈白色固体状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-N-(甲磺酰基)环己-3-烯甲酰胺TFA(10.4mg，0.011mmol，7.74％产率)。LCMS:m/e 772.5(M+H)+,1.70min(方法1)。1H NMR(400MHz,乙酸-d4)δ＝5.39(br.s.,1H),5.24(d,J＝5.8Hz,1H),4.81(s,1H),4.71(s,1H),3.52-3.44(m,1H),3.30(s,3H),3.34-3.03(m,12H),2.86(d,J＝4.8Hz,1H),2.61-2.48(m,1H),1.73(s,3H),1.23(s,3H),1.10(s,3H),1.05-0.92(m,9H),2.39-0.88(m,27H)。
实施例A1
制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸
步骤1：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸
在氮气下，在约4℃，将重铬酸吡锭(PDC 3.87g，10.29mmol)一次性添加至(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-羟基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(2.35g，5.15mmol)于DMF(45mL)中的经冷却溶液中。快速搅拌悬浮液，形成橙色溶液，但快速变成深褐色，所有PDC都溶于反应混合物中。反应混合物保持于冰浴中，且经8小时使其缓慢温热至室温。其后，在室温下继续搅拌48小时。PDC反应混合物获得暗淡的深褐色外观，但未观测到PPT。将粗DMF反应溶液倾倒于经剧烈搅拌的乙酸乙酯(400mL)中，产生呈浅褐色固体状的PPT。悬浮液经由大直径过滤漏斗中的硅胶(型号-H)短垫(约1"厚)过滤。澄清滤液用0.1N HCl(200mL)洗涤，接着用水(3×200mL)洗涤。移除所有挥发性溶剂，得到2.1gm(88％)白色固体。MS:m/e 477.21(M+Na)+,6.2min(方法9)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.76(d,J＝2.3Hz,1H),4.63(s,1H),3.06-2.98(m,1H),2.55-2.37(m,2H),2.28(s,2H),1.99(d,J＝6.5Hz,2H),1.95-1.87(m,1H),1.71(s,3H),1.64(t,J＝11.4Hz,2H),1.59-1.20(m,16H),1.08(s,3H),1.03(s,3H),1.00(s,3H),0.99(s,3H),0.94(s,3H)。
步骤2：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-异氰酸基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)酮。
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(2.1g，4.62mmol)于二烷(20ml)中的溶液中添加叠氮磷酸二苯酯(DPPA 1.294ml，6.00mmol)及N,N-二异丙基乙胺(2.092ml，12.01mmol)，形成澄清溶液。混合物在室温下搅拌40分钟，随后在氮气气氛下，在102℃油浴中浸渍16小时。将粗混合物蒸发至干燥，再溶于100mL DCM中，用水洗涤3次。通过硅胶色谱，用20％乙酸乙酯/己烷混合物洗脱来纯化产物，得到1.91gm(92％产率)标题产物。MS:m/e 452.35(M+H)+,5.58min(方法10)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.76(d,J＝2.0Hz,1H),4.66-4.64(m,1H),2.60-2.47(m,2H),2.43(dd,J＝7.5,4.5Hz,1H),2.11(br.s.,1H),1.96-1.77(m,5H),1.76-1.70(m,1H),1.69(d,J＝0.5Hz,3H),1.64-1.42(m,10H),1.42-1.29(m,4H),1.23-1.15(m,1H),1.10(s,3H),1.09(s,3H),1.04(s,3H),0.96(s,6H)。
步骤3：制备氯化(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-铵
在5分钟期间内，在室温下向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-异氰酸基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮(2.1g，4.65mmol)于二烷(30ml)中的溶液中添加7ml浓HCl。澄清溶液搅拌10分钟，形成稍微混浊的混合物。继续搅拌总共6小时且反应混合物变成2层混合物。在高真空下移除所有挥发性溶剂。将经干燥的粗物质溶于DCM(15mL)中，倾倒于硅胶(型号-H)的短垫(约1"厚)上，用500mL 20％乙酸乙酯/己烷洗涤，随后用DCM:乙酸乙酯的2:1混合物(0.5L)洗涤。浓缩后，获得淡色胶状物。该物质在高真空下干燥，得到1.55gm(72％产率)。MS:m/e 426.40M+,4.11min(方法11)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.24(br.s.,3H),4.83(br.s.,1H),4.66(br.s.,1H),2.62-2.17(m,4H),2.16-1.78(m,5H),1.77-1.31(m,17H),1.30-1.16(m,5H),1.09(s,3H),1.03(s,3H),0.99(br.s.,3H),0.93(s,3H)。
步骤4：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮
向氯化(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-铵(462mg，1.000mmol)于DCM(6ml)中的溶液中添加10ml碳酸氢钠饱和溶液。剧烈搅拌2相混合物，分离DCM层，将其用另一份6mL饱和碳酸氢钠溶液洗涤。混合物用10mL DCM萃取三次。合并的DCM级份最后用5mL DI水洗涤。蒸发且干燥后，分离出浓稠的半固体。此粗物质不经进一步纯化即用于下一步骤中。
步骤5：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-基)氨基甲酸叔丁酯
向游离碱(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮(394mg，0.926mmol)于2ml THF中的混合物中添加一缩二碳酸二叔丁酯(400mg，2mmol)，所得溶液在室温下搅拌48小时。通过添加由4mL 0.5MHCl及4mL半饱和氯化铵溶液组成的8mL混合物来对反应混合物进行后处理。使有机残余物萃取于乙酸乙酯(25mL×3)中，合并的有机萃取物用DI水(25mL)洗涤一次。蒸发溶剂，得到455mg(93％)期望的产物，其适于无需进一步纯化即进入下一制备步骤。MS:m/e 548.45(M+Na)+,5.87min(方法12)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.76-4.70(m,1H),4.65-4.59(m,1H),4.39-4.27(m,1H),2.68-2.30(m,5H),2.06-1.84(m,2H),1.69(s,5H),1.54(s,9H),1.45(s,16H),1.08(s,3H),1.06(s,3H),1.04(s,3H),0.98(s,3H),0.94(s,3H)。
步骤6：制备三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯
标题化合物如上文关于制备中间体1的方法2步骤6所述制备(72.3％产率)。
步骤7：制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯
在氮气下，向三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(517mg，0.786mmol)、6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(364mg，0.928mmol)、水合碳酸钠(292mg，2.358mmol)及四(三苯基膦)钯(27.2mg，0.024mmol)的混合物中添加二烷(4ml)及水(1ml)，形成非常淡的黄色的悬浮液。将混合物冷却至-78℃，抽真空/净化(N2)循环重复三次。反应混合物浸于85℃油浴中且在其中持续2小时。反应混合物用0.5N HCl与半饱和氯化铵溶液的8mL 1:1混合物淬灭。使有机残余物萃取于乙酸乙酯(3×25mL)中。通过制备型HPLC，使用方法14分离出期望的产物，得到标题化合物(101mg，17％)。MS:m/e774.6(M+H)+,7.9min(方法14)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.87(br.s,1H),5.52(dd,J＝6.4,1.9Hz,1H),5.08(dt,J＝10.5,6.2Hz,2H),4.72(s,1H),4.62(d,J＝1.5Hz,1H),4.45-4.22(m,1H),2.70(s,3H),2.59(d,J＝2.3Hz,2H),2.50-2.31(m,2H),2.14-2.06(m,1H),2.05-1.91(m,1H),1.69(s,3H),1.67-1.52(m,7H),1.45(s,9H),1.47-1.42(m,2H),1.25(m,12H),1.15(s,3H),1.06(s,3H),1.05(s,3H),0.97(s,3H),0.82(s,3H)。
步骤8：向6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(15mg，0.019mmol)于二烷(2ml)与MeOH(1ml)中的溶液中添加1N NaOH(1ml，1mmol)。混合物在50℃下搅拌4小时。真空移除溶剂。将粗产物溶于二烷(1mL)及MeOH(1mL)中。逐滴添加H2O，通过过滤收集所形成的固体，得到期望的产物(88％产率)。MS:m/e 688.6(M-H)-,2.72min(方法5)。1H NMR(400MHz,METHANOL-d4)δ5.88(s,1H),5.57-5.52(m,1H),4.74(d,J＝1.8Hz,1H),4.61(s,1H),2.69(s,2H),2.68-2.48(m,4H),2.33-2.25(m,1H),2.14(dd,J＝17.9,6.7Hz,1H),1.99-1.83(m,2H),1.77-0.81(m,19H),1.70(s,3H),1.45(s,9H),1.16(s,3H),1.09(s,3H),1.08(s.,3H),1.00(s,3H),0.86(s,3H)。
实施例A2及实施例A3
制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-3a-((2-(1,1,1-三氟-N-苯基甲基磺酰氨基)乙基)氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸及
6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(N-(5-氯吡啶-2-基)-1,1,1-三氟甲基磺酰氨基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸
步骤1：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮。
将氯化(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-铵(1.09g，2.359mmol)及三磷酸钾(2.7g，12.72mmol)于1,2-二氯乙烷(12ml)及乙腈(24ml)中的混合物置放于厚壁的可再密封容器中。反应容器与其内含物一起用氮气冲洗，密封且温热至130℃并保持36小时。将粗反应混合物冷却至室温，经由硅胶(型号-H)的短垫(约1"厚)过滤，用乙酸乙酯(150mL)洗涤。将滤液浓缩成自由流动的固体(1.1g，定量)，其无需进一步纯化即进入下一步骤。MS:m/e 452.35(M+H)+,3.12min(方法21)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.77(d,J＝2.5Hz,1H),4.62(dd,J＝2.5,1.5Hz,1H),2.74-2.56(m,2H),2.55-2.36(m,3H),2.10-2.00(m,1H),1.96-1.86(m,1H),1.85-1.75(m,1H),1.74-1.67(m,2H),1.68(s,3H),1.55-1.24(m,16H),1.16-1.10(m,1H),1.08(s,3H),1.07(s,3H),1.04(s,3H),0.98(s,3H),0.96(d,J＝2.8Hz,2H),0.94(s,3H)。
步骤2：制备三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(N-(5-氯吡啶-2-基)-1,1,1-三氟甲基磺酰氨基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯。
在氮气下，将(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮(353mg，0.781mmol)与N-(5-氯吡啶-2-基)-1,1,1-三氟-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺(338mg，0.860mmol)于THF(2ml)中混合。在-78℃在氮气下搅拌溶液。添加0.5M双(三甲基甲硅烷基)胺基钾储备溶液，且混合物在-78℃下搅拌1小时。通过硅胶色谱，用乙酸乙酯与己烷的混合物洗脱来纯化期望的产物(230mg，35％)。MS:m/e 844.3/846.3(M+H)+,6.47min(方法15)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ(关键指纹信号)8.45(d,J＝2.0Hz,1H),7.76(dd,J＝8.7,2.6Hz,1H),7.48(d,J＝8.5Hz,1H),5.57(d,J＝6.5Hz,1H),4.80-4.57(m,3H),3.71-3.65(m,1H),2.80-2.73(m,1H),2.73-2.49(m,2H),2.45-2.29(m,1H),2.26-2.12(m,2H),2.08-1.94(m,2H),1.93-1.80(m,2H),1.80-1.72(m,3H),1.71-1.65(m,6H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-74.84(s),-74.85(s)。
步骤3：制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(N-(5-氯吡啶-2-基)-1,1,1-三氟甲基磺酰氨基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯。
如上文所述，使三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(N-(5-氯吡啶-2-基)-1,1,1-三氟甲基磺酰氨基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(226mg，0.268mmol)经由铃木偶联与6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(126mg，0.321mmol)偶联，得到期望的产物(77mg，30％)。MS:m/e960.45/962.45(M+H)+,4.41min(方法16)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.45(d,J＝2.8Hz,1H),7.75(dd,J＝8.7,2.6Hz,1H),7.48(d,J＝8.5Hz,1H),5.87(s,1H),5.52(dd,J＝6.4,1.9Hz,1H),5.14-5.01(m,2H),4.68(d,J＝2.3Hz,1H),4.59(d,J＝1.3Hz,1H),4.29-4.13(m,2H),2.70(s,4H),2.59(d,J＝2.8Hz,4H),2.44-2.06(m,2H),1.91-1.74(m,2H),1.72-1.34(m,19H),1.30-1.21(m,16H),1.15(s,3H),1.07(s,3H),1.03(s,3H),0.92(s,3H),0.84(s,3H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-73.66(s)。
类似的6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-3a-((2-(1,1,1-三氟-N-苯基甲基磺酰氨基)乙基)氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯以类似方式如下制备：使用步骤2中的1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺，首先得到中间体三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-3a-((2-(1,1,1-三氟-N-苯基甲基磺酰氨基)乙基)氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯，接着进行如上文所述的铃木偶联。MS:m/e 925.5(M+H)+,2.84min(方法17)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.48-7.38(m,3H),7.37-7.28(m,1H),5.87(s,1H),5.52(dd,J＝6.4,1.9Hz,1H),5.14-5.01(m,2H),4.71(d,J＝1.8Hz,1H),4.60(d,J＝1.3Hz,1H),3.89(br.s.,2H),2.70(s,3H),2.59(d,J＝2.5Hz,2H),2.54(dd,J＝12.5,6.0Hz,4H),2.15-2.06(m,1H),1.96-1.70(m,4H),1.68(s,4H),1.65-1.29(m,13H),1.25(dd,J＝6.3,5.0Hz,11H),1.15(s,3H),1.07(s,3H),1.06(s,3H),0.93(s,3H),0.84(s,3H)。
步骤4：向6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-3a-((2-(1,1,1-三氟-N-苯基甲基磺酰氨基)乙基)氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(15mg，0.016mmol)于二烷(2ml)与MeOH(1ml)中的溶液中添加1N NaOH(1ml，1mmol)。混合物在50℃下搅拌3小时。混合物通过1N HCl(1mL)中和至约pH 6且通过过滤收集所形成的固体。使用方法14，通过制备型HPLC纯化粗产物，得到呈固体状的6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-3a-((2-(1,1,1-三氟-N-苯基甲基磺酰氨基)乙基)氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸(42％产率)。MS:m/e 841.5(M+H)+,2.52min(方法4)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.52-7.43(m,5H),5.93(s,1H),5.56-5.52(m,1H),4.72(d,J＝1.8Hz,1H),4.60(s,1H),3.99(s.,2H),2.77-2.65(m,4H),2.63-2.51(m,5H),2.15(dd,J＝17.8,6.5Hz,1H),1.92-1.83(m,2H),1.78-0.94(m,19H),1.69(s,3H),1.16(s,3H),1.11(s,3H),1.09(s,3H),0.98(s,3H),0.87(s,3H)。19F NMR(376MHz,甲醇-d4)δ-75.37(s.,3F)。
实施例A3的步骤4以类似方式进行：向6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(N-(5-氯吡啶-2-基)-1,1,1-三氟甲基磺酰氨基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(32mg，0.033mmol)于二烷(2ml)及MeOH(1ml)中的溶液中添加1N NaOH(1ml，1mmol)。混合物在50℃下搅拌3小时。混合物通过1N HCl(1mL)中和至约pH 6且通过过滤收集所形成的固体。使用方法14，通过制备型HPLC纯化粗产物，得到呈固体状的6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(N-(5-氯吡啶-2-基)-1,1,1-三氟甲基磺酰氨基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸(47％产率)。MS:m/e 876.5(M+H)+,2.56min(方法4)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.53(d,J＝2.3Hz,1H),8.00(dd,J＝8.7,2.6Hz,1H),7.57(d,J＝8.5Hz,1H),5.92(s,1H),5.54(dd,J＝6.4,1.9Hz,1H),4.71(d,J＝1.3Hz,1H),4.60(s,1H),4.34-4.17(m,2H),2.76-2.65(m,6H),2.62-2.53(m,2H),2.43-2.33(m,1H),2.15(dd,J＝17.9,6.7Hz,1H),1.86(五重峰,J＝10.6Hz,1H),1.79-0.94(m,20H),1.68(s,3H),1.16(s,3H),1.09(s,3H),1.06(s,3H),0.97(s,3H),0.88(s,3H)。19F NMR(376MHz,甲醇-d4)δ-75.55(s.,3F)。
实施例A4
制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-吗啉代乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸
步骤1：制备三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-氯乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯。
在氮气下，在-78℃，向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮(357mg，0.790mmol)于THF(3ml)中的溶液中添加三氟甲磺酸酐(0.320ml，1.9mmol)，随后添加0.5M双(三甲基甲硅烷基)胺基钾储备溶液(1.897ml，0.948mmol)，形成暗淡悬浮液。在-78℃继续搅拌60分钟。通过添加4mL 1.0N HCl与4mL半饱和氯化铵溶液的8mL混合物来对反应混合物进行后处理。经淬灭的混合物在室温下搅拌30分钟，有机物质萃取于乙酸乙酯中。粗混合物在硅胶柱上用乙酸乙酯/己烷的混合物洗脱来分离，得到73mg(15％)期望的产物。MS:m/e 620.3/622.3(M+H)+,3.93min(方法18)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-74.85。
步骤2：制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-氯乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯
在装有空气冷凝器及三通旋塞阀/气球配置的50mL圆底烧瓶中，将先前经干燥的三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-氯乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(73mg，0.118mmol)与6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(55.4mg，0.141mmol)混合。向此混合物中添加水合碳酸钠(43.8mg，0.353mmol)、四(三苯基膦)钯(4.08mg，3.53μmol)及二烷(2mL)，随后添加水(0.5mL)。混合物快速浸于干冰浴中直至完全冷冻。重复标准抽真空/净化循环4次。在氮气下，使冷冻固体在室温下融化，形成颜色非常浅的柠檬黄溶液。一旦溶液变得几乎均匀，即将其浸于85℃油浴中。使反应在85℃保持2小时。LCMS分析显示期望的产物呈水与甲醇加合物形式。粗反应混合物用4mL饱和氯化铵与4mL 0.5NHCl的混合物淬灭，使氮丙啶变回氯乙基开环形式。期望的产物通过硅胶色谱，用乙酸乙酯与己烷的混合物洗脱来加以纯化，得到19mg(22％)。MS:m/e736.5/738.5(M+H)+,4.53min(方法19)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.87(s,1H),5.52(dd,J＝6.5,2.0Hz,1H),5.07(dq,J＝17.1,6.3Hz,2H),4.72(d,J＝2.0Hz,1H),4.62-4.57(m,1H),3.73-3.62(m,2H),2.86-2.72(m,2H),2.70(s,3H),2.59(d,J＝2.5Hz,2H),2.17-1.82(m,4H),1.80-1.70(m,3H),1.69(s,3H),1.66-1.28(m,18H),1.25(dd,J＝6.3,5.0Hz,12H),1.15(s,3H),1.07(s,3H),1.06(s,3H),0.96(s,3H),0.82(s,3H)。
步骤3：制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-吗啉代乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯。
在室温下，向6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-氯乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(18mg，0.024mmol)于三氟化硼乙醚的苯溶液(2体积％BF3·Et2O，2ml)中的溶液中添加吗啉(75μl，0.857mmol)，形成混浊混合物。混合物在81℃保持2小时。反应混合物用氯化铵于0.5N HCl中的饱和溶液稀释，有机物质用乙酸乙酯(25mL)萃取三次。合并有机萃取物且用碳酸氢钠溶液洗涤，浓缩有机物质，且通过硅胶色谱，用乙酸乙酯与己烷的混合物洗脱来加以纯化，得到8.1mg(40％)期望的产物。MS:m/e 787.6(M+H)+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.87(s,1H),5.55-5.49(m,1H),5.15-5.00(m,2H),4.72(br.s.,1H),4.59(br.s.,1H),3.73(t,J＝4.4Hz,4H),2.70(s,4H),2.59(d,J＝2.3Hz,3H),2.56-2.34(m,6H),2.10(dd,J＝17.9,6.7Hz,1H),1.92-1.72(m,4H),1.70(s,4H),1.67-1.28(m,14H),1.25(dd,J＝6.3,5.0Hz,14H),1.15(m,5H),1.10(m,5H),1.07(m,5H),0.97(s,3H),0.82(s,3H)。
步骤4：向6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-吗啉代乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(9mg，0.011mmol)于1,4-二烷(1ml)与MeOH(0.5ml)中的溶液中添加1N NaOH(0.5ml，0.500mmol)。混合物在50℃下搅拌3小时。使用方法14，通过制备型HPLC纯化粗产物，得到呈固体状的期望的产物(74％产率)。MS:m/e 703.6(M+H)+,2.42min(方法4)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ5.96(s,1H),5.54(dd,J＝6.1,1.6Hz,1H),4.81(s,1H),4.70(s,1H),3.80-3.67(m,4H),3.15-3.01(m,2H),2.94-2.76(m,2H),2.76-2.58(m,8H),2.52(br.s.,2H),2.22-2.14(m,1H),2.10-1.87(m,2H),1.83-1.07(m,19H),1.76(s,3H),1.24(s,3H),1.18(s,4H),1.09(s,6H),0.85(s,3H)。
关键中间体：三氟甲磺酸酯1
制备三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯：
步骤1：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮
在压力容器中，(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮(4.0g，9.4mmol)、K3PO4(9.97g，47.0mmol)于1,2-二氯乙烷(300ml)及乙腈(30ml)中的悬浮液用氮气冲洗，密封，且在130℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，经由硅胶垫过滤且用EtOAc冲洗。将滤液真空浓缩，得到呈固体状的粗氮丙啶(4.0g，94％)，其不经纯化即用于下一步骤。MS:m/e452.5(M+H)+,2.63min(方法4)。
步骤2：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮(4.0g，8.85mmol)及硫吗啉1,1-二氧化物(4.79g，35.4mmol)于甲苯(30ml)中的溶液添加三氟化硼乙醚(1ml于100ml甲苯中，10ml)，形成黄色悬浮液。超声处理混合物2分钟，接着在室温下搅拌5天。反应混合物用EtOAc(200mL)稀释，用NaHCO3(200mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且真空浓缩。粗产物通过硅胶柱(160gm)，用20-50％EtOAc/己烷洗脱来纯化，得到呈固体状的期望的酮(2.95g，57％)。MS:m/e 587.5(M+H)+,2.39min(方法4)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.74-4.70(m,1H),4.62-4.59(m,1H),3.11-2.99(m,7H),2.72-2.36(m,H),1.98-0.82(m.23H),1.69(s,3H),1.08(s,6H),1.04(s,3H),0.98(s,3H),0.95(s,3H)。
步骤3：在-78℃，向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮(2.95g，5.03mmol)于THF(50ml)中的溶液中添加KHMDS(1M于THF中，7.54ml，7.54mmol)。黄色溶液在-78℃下搅拌30分钟。添加1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺(1.89g，5.28mmol)于THF(10ml)中的溶液。所得微红色反应混合物在-78℃下搅拌2小时，接着温热至室温且在室温下搅拌过夜(20h)。反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(50mL)淬灭。所分离的水层用EtOAc(2×100mL)萃取。合并的有机层以盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且真空浓缩。粗产物通过硅胶柱(160gm)，用20-80％EtOAc/己烷洗脱来纯化，得到呈固体状的三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(三氟甲磺酸酯1)(2.78g，77％)。MS:m/e 719.5(M+H)+,2.60min(方法4)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.57(dd,J＝6.8,2.0Hz,1H),4.76-4.71(m,1H),4.64-4.61(m,1H),3.13-3.02(m,7H),2.85-2.75(m,1H),2.73-2.64(m,2H),2.62-2.52(m,2H),2.17(dd,J＝17.1,6.8Hz,1H),2.00-0.86(m,22H),1.70(s,3H),1.13(s,3H),1.08(s,3H),1.03(s,3H),0.98(s,3H),0.93(s,3H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-74.84(s,3F)。
关键中间体：三氟甲磺酸酯2
制备三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯：
步骤1：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮
在压力容器中，(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮(5.0g，11.07mmol)、4-(甲磺酰基)哌啶盐酸盐(4.42g，22.14mmol)、NaI(1.659g，11.07mmol)及K3PO4(4.70g，22.14mmol)于甲苯(50ml)及CH3CN(50ml)中的悬浮液用氮气冲洗，密封且在125℃下搅拌24小时。将反应混合物真空浓缩，且将残余物分配于EtOAc(100mL)与H2O(100mL)之间。所分离的水层用EtOAc(2×100mL)萃取。合并的有机层以盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且真空浓缩。粗产物通过硅胶柱(240gm)，用40-80％EtOAc/己烷洗脱来纯化，得到呈固体状的期望的酮(4.26g，63％)。MS:m/e 615.6(M+H)+,2.40min(方法4)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.67(d,J＝2.3Hz,1H),4.54(dd,J＝2.3,1.5Hz,1H),3.07(dd,J＝16.7,11.7Hz,2H),2.88-2.78(m,1H),2.81(s,3H),2.61-2.30(m,7H),2.14-2.02(m,3H),1.98-1.70(m,9H),1.69-0.94(m,16H),1.65(s,3H),1.06(s,3H),1.03(s,3H),0.99(s,3H),0.93(s,3H),0.90(s,3H)。
步骤2：在-78℃，向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮(4.26g，6.93mmol)于THF(80ml)中的溶液中添加KHMDS(1M，于THF中)(10.39ml，10.39mmol)。所得橙色浆液在-78℃下搅拌20分钟。添加1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺(2.72g，7.62mmol)于THF(20ml)中的溶液。所得橙色反应混合物在-78℃下搅拌2小时。反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(100mL)淬灭。所分离的水层用EtOAc(3×100mL)萃取。合并的有机层以盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且真空浓缩。粗产物通过硅胶柱(240gm)，用40-100％EtOAc/己烷洗脱来纯化，得到呈固体状的三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(三氟甲磺酸酯2)(3.5g，68％)。MS:m/e 747.4(M+H)+,2.82min(方法4)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.56(dd,J＝6.7,1.9Hz,1H),4.73(d,J＝2.0Hz,1H),4.60(dd,J＝2.1,1.4Hz,1H),3.17-3.07(m,2H),2.88-2.79(m,1H),2.85(s,3H),2.69-2.54(m,3H),2.52-2.42(m,2H),2.19-2.07(m,4H),2.03-0.88(m,24H),1.69(s,3H),1.12(s,3H),1.08(s,3H),1.02(s,3H),0.96(s,3H),0.91(s,3H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-74.85(s,3F)。
用于制备C-3α位经取代的环己烯羧酸化合物的一般操作
步骤1：制备环己烯基氧基三甲基硅烷
在压力容器中，丙烯酸酯(1eq)、(丁-1,3-二烯-2-基氧基)三甲基硅烷(1.1eq)于甲苯中的溶液用氮气冲洗，密封且在150℃加热1至3天。反应混合物冷却至室温且真空浓缩，得到粗产物，其不经纯化即用于下一步骤。
步骤2：制备酮
向步骤1之粗产物(1eq)于THF中的溶液中添加0.005N HCl(0.005eq)。混合物在室温下搅拌过夜。混合物用EtOAc萃取，依次用饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且真空浓缩。粗产物通过硅胶柱，用0-50％EtOAc/己烷洗脱来纯化，得到期望的酮。
步骤3：制备三氟甲磺酸酯
在-78℃向步骤2的酮(1eq)及1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)-甲烷磺酰胺(1.1eq)于THF中的溶液中添加KHMDS(1M，于THF中)(1.3eq)。所得黄色至橙色溶液在-78℃下搅拌2小时。反应混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭。混合物用EtOAc萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且真空浓缩。粗产物通过硅胶柱，用0-25％EtOAc/己烷洗脱来纯化，得到期望的三氟甲磺酸酯。
步
骤4：制备硼酸酯
在压力容器中，步骤3的三氟甲磺酸酯(1eq)、双(频哪醇合)二硼烷(1.1eq)、KOAc(2.5eq)及PdCl2(dppf)-CH2Cl2加合物(0.03eq)于1,4-二烷中的混合物用氮气冲洗，密封且在70℃加热2小时。混合物用水稀释且用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且真空浓缩。粗产物通过硅胶柱，用0-25％EtOAc/己烷洗脱来纯化，得到期望的硼酸酯。
步骤5：铃木偶联
三氟甲磺酸酯(1eq)、步骤4的硼酸酯(1eq)、Na2CO3·H2O(3eq)及Pd(Ph3P)4(0.06eq)于二烷及H2O(4:1)中的混合物用氮气冲洗，密封且在65℃加热2小时，颜色变为暗褐色。将反应混合物真空浓缩，且残余物分配于EtOAc与H2O之间。用EtOAc萃取分离的水层。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且真空浓缩。粗产物通过硅胶柱，用30-80％EtOAc/己烷洗脱来加以纯化，得到期望的酯。
步骤6：制备羧酸
步骤5的酯于1,4-二烷、MeOH及1N NaOH(2:1:1)中的溶液在60℃下搅拌1至2小时。反应混合物通过制备型HPLC纯化，得到最终产物。
实施例A5
制备1-氰基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸
步骤1：制备1-氰基-4-((三甲基甲硅烷基)氧基)环己-3-烯甲酸乙酯
依照一般操作步骤1中所述的操作，使用2-氰基丙烯酸乙酯作为反应物且使1,4-二烷作为溶剂回流来制备标题化合物。粗物质直接用于步骤2。
步骤2：制备1-氰基-4-氧代环己烷甲酸乙酯
依照一般操作步骤2中所述的操作，使用1-氰基-4-((三甲基甲硅烷基)氧基)环己-3-烯甲酸乙酯作为反应物来制得呈油状的标题化合物(96％产率)。MS:m/e 196.15(M+H)+,2.75min(方法20)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.33(q,J＝7.3Hz,2H),2.76-2.66(m,2H),2.59-2.44(m,4H),2.36-2.27(m,2H),1.37(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤3：制备1-氰基-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸乙酯
依照一般操作步骤3中所述的操作，使用1-氰基-4-氧代环己烷甲酸乙酯作为反应物来制得呈油状的标题化合物(64％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.81(ddt,J＝4.6,3.1,1.6Hz,1H),4.32(q,J＝7.0Hz,2H),2.93-2.85(m,1H),2.80-2.67(m,2H),2.58-2.48(m,1H),2.40-2.33(m,1H),2.31-2.22(m,1H),1.36(t,J＝7.2Hz,3H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-73.61(s,3F)。
步骤4：制备1-氰基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸乙酯
依照一般操作步骤4中所述的操作，使用1-氰基-4-((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸乙酯作为反应物来制得呈油状的标题化合物(97％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.50-6.46(m,1H),4.29(q,J＝7.0Hz,2H),2.78-2.58(m,2H),2.52-2.32(m,2H),2.24-2.17(m,1H),1.95(ddd,J＝13.2,10.8,5.6Hz,1H),1.34(t,J＝7.2Hz,3H),1.27(s,12H)。
步骤5：制备1-氰基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯
依照一般操作步骤5中所述的操作，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及1-氰基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸乙酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈非对映异构体混合物形式的产物(固体，61％产率)。MS:m/e 748.6(M+H)+,2.99min(方法4)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.35(d,J＝1.8Hz,1H),5.28-5.23(m,1H),4.73(d,J＝1.8Hz,1H),4.61(s,1H),4.29(q,J＝7.0Hz,2H),3.13-3.01(m,8H),2.80-2.46(m,9H),2.33-2.15(m,2H),2.08-0.82(m,22H),1.70(s,3H),1.34(t,J＝7.2Hz,3H),1.07(s,3H),0.97(s,3H),1.03-0.92(m,6H),0.86(s,3H)。
步骤6：依照一般操作步骤6中所述的操作，使用1-氰基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙酯作为反应物来制备1-氰基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸。分离出呈非对映异构体混合物形式的标题化合物(固体，84％产率)。MS:m/e 720.6(M+H)+,2.82min(方法4)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.35(s.,1H),5.24(s.,1H),4.78(s.,1H),4.66(s,1H),3.23-2.40(m,13H),2.29-0.81(m,34H),1.70(s,3H),1.14(s,3H),1.01(s.,3H),0.88(s,3H)。
实施例A6
制备1-氰基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸
步骤1：制备1-氰基-4-((三甲基甲硅烷基)氧基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照一般操作步骤1中所述的操作，使用2-氰基丙烯酸甲酯作为反应物且使用1,4-二烷作为溶剂，在90℃下来制备标题化合物。
步骤2：制备1-氰基-4-氧代环己烷甲酸甲酯
依照一般操作步骤2中所述的操作，使用1-氰基-4-((三甲基甲硅烷基)氧基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈油状的粗物质。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ3.90(s,3H),2.76-2.65(m,2H),2.59-2.44(m,4H),2.38-2.26(m,2H)。
步骤3：制备1-氰基-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照一般操作步骤3中所述的操作，使用1-氰基-4-氧代环己烷甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈油状的产物(51％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.81(qd,J＝3.1,2.0Hz,1H),3.88(s,3H),2.94-2.84(m,1H),2.82-2.67(m,2H),2.59-2.47(m,1H),2.42-2.33(m,1H),2.31-2.22(m,1H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-73.62(s,3F)。
步骤4：制备1-氰基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照一般操作步骤4中所述的操作，使用1-氰基-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。获得呈油状的产物(62％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.51-6.46(m,1H),3.85(s,3H),2.78-2.59(m,2H),2.52-2.33(m,2H),2.25-2.17(m,1H),1.96(ddd,J＝13.1,10.8,5.8Hz,1H),1.27(s,12H)。
步骤5：制备1-氰基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照一般操作步骤5中所述的操作，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及1-氰基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈非对映异构体混合物形式的产物(固体，61％产率)。MS:m/e 762.6(M+H)+,3.01min(方法4)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.34(d,J＝2.0Hz,1H),5.28-5.22(m,1H),4.71(d,J＝2.0Hz,1H),4.60-4.57(m,1H),3.85(s,3H),3.17-3.06(m,3H),2.87-2.78(m,2H),2.84(s.3H),2.74-2.40(m,10H),2.33-0.78(m,27H),1.69(s,3H),1.07(s,3H),1.01-0.93(m,6H),0.96(s,3H),0.85(s,3H)。
步骤6：依照一般操作步骤6中所述的操作，使用1-氰基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备1-氰基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸。分离出呈非对映异构体混合物形式的产物(固体，50％产率)。MS:m/e 748.6(M+H)+,2.97min(方法4)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.36(s.,1H),5.24(d,J＝5.5Hz,1H),4.80(s,1H),4.67(s,1H),3.31-3.13(m,3H),3.12-2.89(m,6H),2.86(s,3H),2.78-2.45(m,5H),2.33-0.85(m,29H),1.70(s,3H),1.17(s,3H),1.02-0.94(m,6H),1.00(s,3H),0.87(s,3H)。
实施例A7
制备1-氯-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸
步骤1：制备1-氯-4-((三甲基甲硅烷基)氧基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照一般操作步骤1中所述的操作，使用2-氯丙烯酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。
步骤2：制备1-氯-4-氧代环己烷甲酸甲酯
依照一般操作步骤2中所述的操作，使用1-氯-4-((三甲基甲硅烷基)氧基)环己-3-烯甲酸甲酯制备标题化合物。分离出呈油状的产物(46％产率)。MS:m/e 191.1(M+H)+,2.95min(方法6)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ3.86(s,3H),2.80-2.71(m,2H),2.55-2.39(m,6H)。
步骤3：制备1-氯-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照一般操作步骤3中所述的操作，使用1-氯-4-氧代环己烷甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈油状的产物(47％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.74-5.70(m,1H),3.84(s,3H),3.07-2.99(m,1H),2.83-2.65(m,2H),2.53-2.29(m,3H)。
步骤4：制备1-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照一般操作步骤4中所述的操作，使用1-氯-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈油状的产物(28％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.45-6.41(m,1H),3.81(s,3H),3.00-2.91(m,1H),2.71-2.63(m,1H),2.50-2.10(m,4H),1.27(s,12H)。
步骤5：制备1-氯-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照一般操作步骤5中所述的操作，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及1-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈非对映异构体混合物形式的产物。MS:m/e 743.5(M+H)+,3.01min(方法4)。
步骤6：依照一般操作步骤6中所述的操作，使用1-氯-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备1-氯-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸。分离出呈非对映异构体混合物形式的产物(固体，10％产率)。MS:m/e 729.5(M+H)+,2.96min(方法4)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.28(s.,1H),5.21(d,J＝4.3Hz,1H),4.75(s,1H),4.63(s,1H),3.16-0.68(m,41H),1.70(s,3H),1.13(s,3H),1.00(s,3H),1.00-0.94(m,6H),0.87(s,3H)。
实施例A8
制备1-氯-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸
步骤1至步骤4–与实施例A7所述相同。
步骤5：制备1-氯-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照一般操作步骤5中所述的方法，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及1-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈非对映异构体混合物形式的产物，其不经纯化即用于下一步骤。MS:m/e 771.5(M+H)+,3.06min(方法4)。
步骤6：依照一般操作步骤6中所述的操作，使用1-氯-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备1-氯-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸。分离出呈非对映异构体混合物形式的产物(固体，7％产率)。MS:m/e 757.5(M+H)+,2.90min(方法4)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.31(s,1H),5.24(d,J＝5.0Hz,1H),4.78(s,1H),4.65(s,1H),3.35-2.40(m,14H),2.87(s,3H),2.32-0.82(m,28H),1.71(s,3H),1.17(s,3H),1.01(s,6H),0.97-0.95(m,3H),0.88(s,3H)。
实施例A9
制备1-氟-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸
步骤1：制备1-氟-4-((三甲基甲硅烷基)氧基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照一般操作步骤1中所述的操作，使用2-氟丙烯酸甲酯作为反应物来制备标题化合物(不经进一步纯化即用于下一步骤)。
步骤2：制备1-氟-4-氧代环己烷甲酸甲酯
依照一般操作步骤2中所述的操作，使用1-氟-4-((三甲基甲硅烷基)氧基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈油状的产物(34％产率)。MS:m/e 175.1(M+H)+,2.04min(方法6)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ3.77(s,3H),2.68-2.56(m,2H),2.40-2.15(m,6H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-168.02(s,1F)。
步骤3：制备1-氟-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照一般操作步骤3中所述的操作，使用1-氟-4-氧代环己烷甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈油状的产物(16％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.74-5.70(m,1H),3.85(s,3H),2.94-2.77(m,1H),2.73-2.57(m,2H),2.47-2.38(m,1H),2.35-2.10(m,2H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-73.77(s,3F),-163.80(s,1F)。
步骤4：制备1-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照一般操作步骤4中所述的操作，使用1-氯-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈油状的产物。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.48-6.44(m,1H),3.81(s,3H),2.81-2.64(m,1H),2.55-2.42(m,1H),2.37-2.28(m,2H),2.15-2.07(m,1H),2.01-1.82(m,1H),1.27(s,12H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-161.94(s,1F)。
步骤5：制备1-氟-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照一般操作步骤5中所述的操作，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及1-氯-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈非对映异构体混合物形式的产物，其不经进一步纯化即用于下一步骤。MS:m/e 755.5(M+H)+,2.94min(方法4)。
步骤6：依照一般操作步骤6中所述的操作，使用1-氯-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备1-氟-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸。分离出呈非对映异构体混合物形式的产物(固体，23％产率)。MS:m/e 741.6(M+H)+,2.77min(方法4)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.30(s,1H),5.23(d,J＝4.5Hz,1H),4.76(s,1H),4.64(s,1H),3.24-2.73(m,6H),2.85(s,3H),2.61-0.80(m,36H),1.69(s,3H),1.14(s,3H),1.00(s,3H),1.00-0.92(m,6H),0.86(s,3H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-157.26,-158.46(m,1F)。
实施例A10
制备1-(2-羟乙基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸
步骤1：制备8-((三甲基甲硅烷基)氧基)-2-氧杂螺[4.5]癸7-烯-1-酮
依照一般操作步骤1中所述的操作，使用3-亚甲基二氢呋喃亚甲基二氢呋喃-2(3H))-酮作为反应物来制备标题化合物。
步骤2：制备2-氧杂螺[4.5]癸烷-1,8-二酮
依照一般操作步骤2中所述的操作，使用8-((三甲基甲硅烷基)氧基)-2-氧杂螺[4.5]癸-7-烯-1-酮作为反应物来制备标题化合物。分离出呈固体状的产物(48％产率)。MS:m/e 169.1(M+H)+,1.43min(方法6)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.38(t,J＝7.0Hz,2H),2.77(ddd,J＝15.0,8.1,5.8Hz,2H),2.40-2.31(m,2H),2.31(t,J＝7.0Hz,2H),2.26-2.18(m,2H),1.99-1.91(m,2H)。
步骤3：制备三氟甲磺酸1-氧代-2-氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基酯
依照一般操作步骤3中所述的操作，使用2-氧杂螺[4.5]癸烷-1,8-二酮作为反应物来制备标题化合物。分离出呈油状的产物(83％产率)。MS:m/e 301.1(M+H)+,3.81min(方法6)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.80(dt,J＝5.7,2.8Hz,1H),4.42-4.30(m,2H),2.65-2.57(m,1H),2.57-2.38(m,2H),2.27-2.14(m,3H),2.09(ddd,J＝13.6,10.5,6.5Hz,1H),1.84(ddt,J＝13.5,5.6,2.7Hz,1H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-73.83(s,3F)。
步骤4：制备8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-2-氧杂螺[4.5]癸-7-烯-1-酮
依照一般操作步骤4中所述的操作，使用三氟甲磺酸1-氧代-2-氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈固体状的产物(52％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.53(dd,J＝4.6,2.1Hz,1H),4.35-4.23(m,2H),2.53-2.33(m,2H),2.18-2.02(m,4H),1.83(ddd,J＝13.1,11.6,5.6Hz,1H),1.69-1.62(m,1H),1.32-1.23(m,12H)。
步骤5：制备8-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氧杂螺[4.5]癸-7-烯-1-酮
依照一般操作步骤5中所述的操作，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-2-氧杂螺[4.5]癸-7-烯-1-酮作为反应物，在85℃下来制备标题化合物。获得呈非对映异构体混合物形式的产物且不经进一步纯化即用于下一步骤。MS:m/e 721(M+H)+,2.72min(方法4)。
步骤6：依照一般操作步骤6中所述的操作，使用8-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氧杂螺[4.5]癸-7-烯-1-酮作为反应物来制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-1-(2-羟乙基)环己-3-烯甲酸。获得呈非对映异构体混合物形式的产物(固体，13％)。MS:m/e 739.5(M+H)+,2.64min(方法4)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ5.30(s,1H),5.18(d,J＝4.5Hz,1H),4.72(s,1H),4.62(s,1H),3.65-3.57(m,2H),3.18-3.00(m,8H),2.79-2.64(m,4H),2.60-2.50(m,2H),2.37-0.83(29H),1.71(s,3H),1.14(s,3H),1.03(s,3H),0.98-0.94(m,6H),0.90(s,3H)。
实施例A11
制备1-(2-羟乙基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸
步骤1至步骤4–与实施例A10中所述相同。
步骤5：制备8-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氧杂螺[4.5]癸-7-烯-1-酮
依照一般操作步骤5中所述的操作，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-2-氧杂螺[4.5]癸-7-烯-1-酮作为反应物来制备标题化合物。分离出呈非对映异构体形式的产物(固体，59％产率)。MS:m/e 749.7(M+H)+,4.10min(方法7)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.35(d,J＝2.8Hz,1H),5.24-5.19(m,1H),4.72(d,J＝2.0Hz,1H),4.59(dd,J＝2.3,1.5Hz,1H),4.37-4.25(m,2H),3.12(dd,J＝14.6,12.0Hz,2H),2.87-2.78(m,1H),2.84(s,3H),2.67-2.53(m,3H),2.50-2.40(m,3H),2.33-0.90(m,35H),1.70(s,3H),1.09(s,3H),0.98-0.92(m,6H),0.96(s,3H),0.86(s,3H)。
步骤6：依照一般操作步骤6中所述的操作，使用8-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氧杂螺[4.5]癸-7-烯-1-酮作为反应物来制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-1-(2-羟乙基)环己-3-烯甲酸。分离出呈非对映异构体混合物形式的产物(固体，51％产率)。MS:m/e 767.6(M+H)+,2.35min(方法4)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.32(s,1H),5.17(d,J＝5.5Hz,1H),4.73(s,1H),4.61(s,1H),3.78-3.72(m,2H),3.20-3.12(m,2H),2.89-2.80(m,1H),2.85(s,3H),2.78-2.45(m,6H),2.27-0.92(m,35H),1.69(s,3H),1.11(s,3H),0.97(s,3H),0.95-0.90(m,6H),0.86(s,3H)。
实施例A12
制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-1-(羟甲基)环己-3-烯甲酸
步骤1：制备1-(羟甲基)-4-((三甲基甲硅烷基)氧基)环己-3-烯甲酸乙酯
依照一般操作步骤1中所述的操作，使用2-(羟甲基)丙烯酸乙酯作为反应物来制备标题化合物。
步骤2
a:制备1-(羟甲基)-4-氧代环己烷甲酸乙酯
依照一般操作步骤2中所述的操作，使用1-(羟甲基)-4-((三甲基甲硅烷基)氧基)环己-3-烯甲酸乙酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈固体状的产物(39％产率)。MS:m/e 201.1(M+H)+,1.40min(方法2)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.28(q,J＝7.0Hz,2H),3.74(d,J＝6.3Hz,2H),2.54-2.33(m,6H),2.08(t,J＝6.4Hz,1H),1.83-1.72(m,2H),1.32(t,J＝7.2Hz,3H)。
b:制备苯甲酸(1-(乙氧基羰基)-4-氧代环己基)甲酯
向步骤2a的1-(羟甲基)-4-氧代环己烷甲酸乙酯(200mg，1mmol)于吡啶(5mL)中的溶液中添加DMAP(24.4mg，0.2mmol)。混合物加热至50℃且添加苯甲酸酐(249mg，1.1mmol)。反应混合物在50℃下搅拌3小时。将反应混合物真空浓缩。残余物溶于CH2Cl2(10mL)中，用NaHCO3(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且真空浓缩。粗产物通过硅胶柱，用20％EtOAc/己烷洗脱来加以纯化，得到呈油状的期望的产物(288mg，95％)。MS:m/e 305.1(M+H)+,3.75min(方法6)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.03-7.99(m,2H),7.62-7.56(m,1H),7.49-7.43(m,2H),4.45(s,2H),4.28(q,J＝7.0Hz,2H),2.61-2.38(m,6H),1.90-1.80(m,2H),1.28(t,J＝7.0Hz,3H)。
步骤3：制备苯甲酸(1-(乙氧基羰基)-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯-1-基)甲酯
依照一般操作步骤3中所述的操作，使用苯甲酸(1-(乙氧基羰基)-4-氧代环己基)甲酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈油状的产物(89％产率)。MS:m/e 437.2(M+H)+,4.30min(方法6)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.03-7.98(m,2H),7.62-7.56(m,1H),7.48-7.42(m,2H),5.79(td,J＝3.3,1.8Hz,1H),4.47-4.38(m,2H),4.21(qd,J＝7.2,2.1Hz,2H),2.91-2.83(m,1H),2.58-2.27(m,4H),1.94(ddd,J＝13.4,8.5,6.4Hz,1H),1.24(t,J＝7.0Hz,3H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-73.84(s,3F)。
步骤4：制备苯甲酸(1-(乙氧基羰基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯-1-基)甲酯
依照一般操作步骤4中所述的操作，使用苯甲酸(1-(乙氧基羰基)-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯-1-基)甲酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈油状的产物(90％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.00(dd,J＝8.3,1.3Hz,2H),7.59-7.54(m,1H),7.44(d,J＝8.0Hz,2H),6.56-6.52(m,1H),4.45-4.36(m,2H),4.17(q,J＝7.0Hz,2H),2.76-2.68(m,1H),2.28-2.19(m,3H),2.04-1.96(m,1H),1.91-1.83(m,1H),1.27(s,12H),1.21(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤5：制备苯甲酸(4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-1-(乙氧基羰基)环己-3-烯-1-基)甲酯
依照一般操作步骤5中所述的操作，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及苯甲酸(1-(乙氧基羰基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯-1-基)甲酯作为反应物，在85℃下来制备标题化合物。获得呈非对映异构体混合物形式的产物，其不经纯化即用于下一步骤。MS:m/e857.6(M+H)+,2.97min(方法4)。
步骤6：依照一般操作步骤6中所述的操作，使用苯甲酸(4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-1-(乙氧基羰基)环己-3-烯-1-基)甲酯作为反应物来制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-1-(羟甲基)环己-3-烯甲酸。获得呈非对映异构体混合物形式的产物(固体，10％)。MS:m/e 725.6(M+H)+,2.61min(方法4)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.30(s,1H),5.17(s,1H),4.72(s,1H),4.60(s,1H),3.11-3.04(m,2H),2.78-0.83(m,41H)1.70(s,3H),1.27(s,3H),1.06(s,3H),0.97-0.90(m,6H),0.85(s,3H)。
实施例A13
制备1-(羟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸
步骤1至步骤4–与实施例A12中所述相同。
步骤5：制备苯甲酸(1-(乙氧基羰基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1-基)甲酯
依照一般操作步骤5中所述的操作，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及苯甲酸(1-(乙氧基羰基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯-1-基)甲酯作为反应物来制备标题化合物。获得呈非对映异构体混合物形式的产物。MS:m/e 885.6(M+H)+,2.80min(方法4)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.01(dd,J＝8.3,1.3Hz,2H),7.58-7.52(m,1H),7.46-7.40(m,2H),5.35(s,1H),5.19(d,J＝5.8Hz,1H),4.71(d,J＝1.8Hz,1H),4.58(s,1H),4.49-4.38(m,2H),4.21-4.14(m,2H),3.11(t,J＝12.3Hz,2H),2.87-2.77(m,1H),2.83(s,3H),2.72-2.53(m,4H),2.51-2.41(m,2H),2.27-0.78(m,33H),1.69(s,3H),1.22(t,J＝7.0Hz,3H),1.07(s,3H),0.96(s,3H),0.97-0.90(m,6H),0.85(s,3H)。
步骤6：依照一般操作步骤6中所述的操作，使用苯甲酸(1-(乙氧基羰基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1-基)甲酯作为反应物来制备1-(羟甲基)-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸。获得呈非对映异构体混合物形式的产物(固体，47％)。MS:m/e 753.5(M+H)+,2.32min(方法4)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.31(s,1H),5.18(s.1H),4.74(s,1H),4.63(s,1H),3.65(s,2H),3.17(t,J＝11.3Hz,2H),2.93-2.66(m,5H),2.85(s,3H),2.62-2.49(m,2H),2.27-0.82(m,33H).1.69(s,3H),1.14(s,3H),0.99(s,3H),0.97-0.90(m,6H),0.86(s,3H)。
实施例A14
制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((3-(1,1-二氧化硫吗啉代)丙基)氨基)甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸
步骤1：制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲醛
在-15℃向乙二酰氯(47.0mL，94mmol)于CH2Cl2中的2M溶液中逐滴添加DMSO(13.7mL，192mmol)于CH2Cl2(20mL)中的溶液。5分钟之后，在-15℃添加(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13bR)-3a-(羟甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-醇(4.43g，10.01mmol)于DMSO(30ml)与CH2Cl2(50ml)混合物中的溶液。15分钟后添加三乙胺(56mL)且再继续搅拌10分钟。将反应混合物温热至室温。通过添加水(100mL)将反应混合物淬灭，且反应混合物用CH2Cl2萃取(70mL×3)。合并的有机层用盐水(30mL×3)洗涤，经MgSO4干燥，过滤且浓缩。使用硅胶色谱，用乙酸乙酯与己烷的混合物洗脱来纯化粗物质，得到呈固体状的产物(3.3g，75％)。LCMS:m/e 461.15(M+Na)+,2.91min(方法2)。
步骤2：制备三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-甲酰基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯
依照关于制备中间体1的方法1步骤5所述的操作，使用(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲醛作为起始物质来制备标题化合物。(71％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ9.69(d,J＝1.8Hz,1H),5.58(dd,J＝6.7,2.1Hz,1H),4.89-4.54(m,2H),2.90(td,J＝11.0,5.8Hz,1H),2.28-2.00(m,3H),2.00-1.64(m,7H),1.60-1.55(m,3H),1.53-1.18(m,11H),1.14(s,3H),1.08(d,J＝7.8Hz,1H),1.03(s,3H),1.00(s,3H),0.97(s,3H),0.93(s,3H)。
步骤3：制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-甲酰基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯
依照上文关于制备实施例1所述的方法步骤1，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-甲酰基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯作为反应物来制备标题化合物(83％产率)。MS:m/e 687.5(M+H)+,4.16min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ9.68(d,J＝1.3Hz,1H),5.86(s,1H),5.51(dd,J＝6.1,1.9Hz,1H),5.16-4.97(m,2H),4.77(d,J＝1.5Hz,1H),4.64(s,1H),2.89(td,J＝11.1,5.9Hz,1H),2.74-2.66(m,4H),2.61-2.49(m,2H),2.21-2.01(m,3H),1.96-1.18(m,33H),1.17(s,3H),1.05(m,4H),0.98(s,3H),0.94(s,3H),0.81(s,3H)。
步骤4：制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((3-(1,1-二氧化硫吗啉代)丙基)氨基)甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯
向步骤3的6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-甲酰基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(100mg，0.146mmol)于DCE(2ml)中的溶液中添加乙酸(0.017ml，0.291mmol)及4-(3-氨基丙基)硫吗啉1,1-二氧化物(56.0mg，0.291mmol)。混合物在室温下搅拌2小时，接着向混合物中添加三乙酰氧基硼氢化钠(154mg，0.728mmol)且搅拌24小时。混合物用7mL饱和NaHCO3稀释且用二氯甲烷(3×7mL)萃取。合并有机层且经Na2SO4干燥。通过过滤移除干燥剂且在减压下浓缩滤液。粗产物在硅胶柱上用乙酸乙酯与己烷的混合物洗脱来纯化。合并含有预期产物的级份，得到呈白色固体状的标题化合物(90mg，71.6％产率)。MS:m/e 863.9(M+H)+,3.03min(方法2)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.85(s,1H),5.54-5.43(m,1H),5.14-4.96(m,2H),4.68(d,J＝2.0Hz,1H),4.57(s,1H),3.12-2.90(m,9H),2.83-2.63(m,7H),2.63-2.50(m,4H),2.42(td,J＝11.0,5.8Hz,1H),2.28-2.17(m,1H),2.13-2.03(m,1H),1.98-1.29(m,17H),1.27-1.18(m,16H),1.13(s,3H),1.09-1.00(m,10H),0.97(s,3H),0.84-0.75(m,3H)。
步骤5：向6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((3-(1,1-二氧化硫吗啉代)丙基)氨基)甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸二异丙酯(90mg，0.104mmol)于二烷(3ml)及MeOH(2ml)中的溶液中添加1N NaOH(2ml，2mmol)。混合物在50℃下搅拌12小时。使用方法14，通过制备型HPLC纯化粗产物。合并含有预期产物的级份且浓缩，得到呈白色固体状的6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((3-(1,1-二氧化硫吗啉代)丙基)氨基)甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸(2mg，2.46％)。MS:m/e 779.5(M+H)+,2.31min(方法2)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.02(s,1H),5.48(d,J＝4.5Hz,1H),4.71(s,1H),4.60(s,1H),3.12(d,J＝4.8Hz,5H),3.01(br.s.,4H),2.91(br.s.,5H),2.72-2.64(m,1H),2.57-2.49(m 6H),2.17-1.96(m,2H),1.82(d,J＝5.8Hz,5H),1.67(m,8H),1.53-1.17(m,12H),1.13(s,3H),1.05(m,6H),0.97(s,3H),0.78(s,3H)。
实施例A15
制备2-(3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-3-烯-1-基)乙酸
步骤1：制备2-(3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环戊-3-烯-1-基)乙酸甲酯
依照关于制备中间体1的方法2步骤6所述的操作，使用2-(3-氧代环戊基)乙酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。(50.1％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.66(q,J＝2.1Hz,1H),3.73(br.s.,3H),3.29-3.13(m,1H),2.95-2.78(m,1H),2.67-2.57(m,2H),2.49-2.40(m,1H),2.40-2,28(m,1H),1.77-1.63(m,1H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-73.53(s,3F)。
步骤2：制备2-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环戊-2-烯-1-基)乙酸甲酯
依照上述制备6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯的方法步骤2，使用2-(3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环戊-3-烯-1-基)乙酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。(65.0％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.44(q,J＝2.0Hz,1H),3.72-3.62(m,3H),3.24-3.09(m,1H),2.77-2.65(m,1H),2.49-2.38(m,1H),2.38-2.24(m,1H),2.21-2.09(m,2H),1.52-1.38(m,1H),1.29(s,12H)。
步骤3：制备2-(3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-2-烯-1-基)乙酸甲酯
依照上述制备实施例1步骤1的方法，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及2-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环戊-2-烯-1-基)乙酸甲酯作为反应物来制备呈非对映异构体混合物形式的标题化合物(55.7％产率)。MS:m/e 531.5(M-16)+,2.69min(方法3)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ5.54(s,1H),5.50-5.44(m,1H),4.73(s,1H),4.60(s,1H),3.67(s,3H),3.14(t,J＝7.0Hz,1H),2.81-2.61(m,1H),2.59-2.27(m,5H),2.16-1.96(m,4H),1.79-1.18(m,20H),1.09-1.02(m,11H),0.96(s,3H),0.85(s,3H)。
步骤4：制备2-(3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-2-烯-1-基)乙酸甲酯
依照上述实施例1步骤2的方法，使用2-(3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-2-烯-1-基)乙酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈非对映异构体混合物形式的产物(定量产率)。MS:m/e 709.8(M+H)+,3.126min(方法3)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.60-5.52(m,1H),5.50-5.45(m,1H),4.71(br.s.,1H),4.59(br.s.,1H),3.76-3.59(m,3H),3.17-2.96(m,13H),2.76-2.52(m,4H),2.50-2.27(m,3H),2.22-1.98(m,3H),1.95-1.21(m,20H),1.13-1.01(m,11H),0.94(s,3H),0.83(s,3H)。
步骤5：依照上述制备实施例4步骤3的方法，使用2-(3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-2-烯-1-基)乙酸甲酯作为反应物，通过制备型HPLC及方法8纯化，来制备2-(3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-2-烯-1-基)乙酸。获得呈非对映异构体混合物形式的产物(3％产率)。MS:m/e 695.8(M+H)+,2.542min(方法3)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ5.68-5.54(m,1H),5.51-5.38(m,1H),4.74(br.s.,1H),4.64(s,1H),3.22-3.00(m,9H),2.98-2.69(m,5H),2.65-2.31(m,2H),2.31-2.18(m,2H),2.06(m,2H),1.97-1.83(m,9H),1.77-1.68(m,3H),1.66-1.22(m,12H),1.17(s,3H),1.09(m,2H),1.02(m,6H),0.87(s,3H)。
实施例A16
制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-甲基环己-1,3-二烯甲酸
步骤1：制备2-甲基-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-2,4-二烯甲酸乙酯
依照关于制备中间体1的方法2步骤6所述的操作，使用2-甲基-4-氧代环己-2-烯甲酸乙酯作为反应物来制备标题化合物。(62.7％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.93(t,J＝1.3Hz,1H),4.30-4.09(m,2H),2.83-2.68(m,2H),2.62-2.43(m,2H),2.18(t,J＝1.9Hz,3H),1.37-1.20(m,3H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-73.63(s,3F)。
步骤2：制备2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-1,3-二烯甲酸乙酯
依照制备6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯的方法(上述步骤2，PCT申请第65页至67页)，使用2-甲基-4-(((三氟乙基)磺酰基)氧基)环己-2,4-二烯甲酸乙酯作为反应物来制备标题化合物。(57.8％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.64(t,J＝1.6Hz,1H),4.28-4.15(m,2H),2.46-2.32(m,2H),2.29-2.19(m,2H),2.18(t,J＝1.8Hz,3H),1.38-1.25(m,15H)。
步骤3：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-甲基环己-1,3-二烯甲酸乙酯
依照上述制备实施例1步骤1的方法，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-1,3-二烯甲酸乙酯作为反应物来制备标题化合物。MS:m/e557.4(M-16)+,2.47min(方法2).1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.65(s,1H),5.28(d,J＝5.8Hz,1H),4.72(s,1H),4.59(s,1H),4.25-4.16(m,2H),2.62-2.48(m,1H),2.48-2.34(m,2H),2.31-2.17(m,2H),2.15(s,3H),2.09-1.97(m,2H),1.80-1.35(m,17H),1.35-1.18(m,9H),1.18-1.04(m,6H),1.02-1.00(s,3H),0.96(s,3H),0.89(s,3H)。
步骤4：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-甲基环己-1,3-二烯甲酸乙酯
依照上文关于制备6-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(((3-(1,1-二氧化硫吗啉代)丙基)氨基)甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)螺[3.3]庚-5-烯-2,2-二甲酸(实施例A14)的步骤2所述的方法，使用4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-甲基环己-1,3-二烯甲酸乙酯作为反应物来制备标题化合物(定量产率)。MS:m/e 735.8(M+H)+,3.41min(方法3)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.65(s,1H),5.28(dd,J＝6.0,1.5Hz,1H),4.71(s,1H),4.59(s,1H),4.19(q,J＝7.1Hz,2H),3.15-2.97(m,8H),2.73-2.51(m,4H),2.50-2.38(m,3H),2.22(q,J＝8.3Hz,2H),2.15(s,3H),2.06-1.18(m,25H),1.11-1.04(m,6H),1.00(s,3H),0.98-0.95(m,6H),0.88(s,3H)。
步骤5：依照上文关于制备实施例4的步骤3所述的方法，使用4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-甲基环己-1,3-二烯甲酸乙酯作为反应物来制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-甲基环己-1,3-二烯甲酸(5.46％产率)。粗物质通过制备型HPLC用方法14纯化，得到标题化合物(83％产率)。MS:m/e 707.7(M+H)+,2.573min(方法3)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.70(s,1H),5.32(br.s.,1H),4.78(br.s.,1H),4.65(br.s.,1H),3.29-3.00(m,9H),2.94-2.63(m,4H),2.53-2.42(m,2H),2.35-2.24(m,2H),2.22(s,3H),2.15-2.01(m,6H),2.01-1.81(m,4H),1.72(m,3H),1.67-1.17(m,15H),1.04-0.96(m,9H),0.91(s,3H)。
中间体A
制备(R)-2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-4H-1,3-二氧杂环己烯-2-甲酸乙酯
步骤1：制备1-甲基-2,5,7-三氧杂二环[2.2.2]辛烷-6-酮。使用Gelas及Thiallier[Carbohydrate Research,30(1973)21-34]的操作来制备5-甲基-3,6,8-三氧杂二环[3.2.1]辛烷-4-酮与1-甲基-2,5,7-三氧杂二环[2.2.2]辛烷-6-酮的混合物。通过在35微米汞柱下，在小于56℃的浴温下对胶黏状混合物物质进行真空升华来实现异构体混合物的进一步分离。挥发性更大、对称的期望的[2.2.2]产物以硬固体形式冷凝(43％)，另一种不对称的[3.2.1]]异构体以胶黏状浓稠物质残留在罐中(45％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.80-4.77(m,1H),4.14(d,J＝1.5Hz,4H),1.57(s,3H)。
步骤2：制备5-羟基-2-甲基-1,3-二烷-2-甲酸乙酯。通过将金属钠(0.05g，2.175mmol)溶解于无水乙醇(15mL)中来制备乙醇钠溶液。向其中添加步骤1的1-甲基-2,5,7-三氧杂二环[2.2.2]辛烷-6-酮(1.29g，8.95mmol)，形成澄清溶液。允许开环反应在室温下进行5小时。通过在搅拌下添加酸性Dowex树脂(50W 8X-200，相当于钠用量的大致当量)来淬灭反应混合物。过滤混合物且浓缩成糖浆2.1gm(82％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.32(q,J＝7.1Hz,2H),3.99-3.89(m,1H),3.57-3.49(m,2H),1.54(s,3H),1.36(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤3：制备2-甲基-5-氧代-1,3-二烷-2-甲酸乙酯。在氮气下，向已冷却(-78℃)的DCM溶剂(10mL)中添加2M乙二酰氯储备溶液(6.03mL，12.05mmol)，随后缓慢添加二甲亚砜(0.927mL，13.06mmol)。一旦气体停止逸出，则再继续搅拌20分钟，形成雪白的悬浮液。经由套管，在2分钟期间内将粗5-羟基-2-甲基-1,3-二烷-2-甲酸乙酯(步骤2，1.91g，10.04mmol)于5mL DCM中的溶液转移至冷的Swern溶液中。使反应在-78℃进行30分钟，随后缓慢添加三乙胺(3.36mL，24.10mmol)。所得浅色悬浮液在-78℃再搅拌30分钟，接着在4℃(冰浴)搅拌15分钟。Rx用饱和碳酸氢钠溶液(20mL)淬灭，随后用DCM萃取(5×25mL)。合并有机层，蒸发成油性物质(1.81gm，96％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.45-4.37(m,2H),4.31(q,J＝7.3Hz,2H),4.33-4.26(m,2H),1.58(s,3H),1.36(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤4：制备2-甲基-5-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-4H-1,3-二氧杂环己烯-2-甲酸乙酯。向2-甲基-5-氧代-1,3-二烷-2-甲酸乙酯(350mg，1.860mmol)及N,N-二甲基吡啶-4-胺(250mg，2.046mmol)于DCM(4ml)中的已冷却(-78℃)溶液中添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.356ml，2.046mmol)及三氟甲磺酸酐(0.344ml，2.046mmol)，形成微红色悬浮液。混合物于干冰浴中，在氮气下搅拌，使得浴温在4小时期间内升至-15℃。粗反应混合物用20mLDCM稀释，形成澄清溶液，随后添加20mL己烷，形成浅色悬浮液。使其经由硅胶(型号-H)的短垫(约1/2")快速过滤，用DCM与己烷的1:1v/v混合物洗涤，收集滤液，在真空下，在低于环境温度的温度(约15-17℃)下浓缩，得到半固体。仅对其短暂干燥，随后储存于-20℃冰箱中，待用于下一步骤而无需进一步纯化。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.93(t,J＝1.6Hz,1H),4.56(dd,J＝15.1,1.5Hz,1H),4.35(dd,J＝14.9,1.9Hz,1H),4.30(q,J＝7.2Hz,2H),1.68(s,3H),1.34(t,J＝7.2Hz,3H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-72.61。
步骤5：向2-甲基-5-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-4H-1,3-二氧杂环己烯-2-甲酸乙酯(68mg，0.212mmol)的粗样品(步骤4)中添加试剂：乙酸钾(50.0mg，0.510mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(64.7mg，0.255mmol)及1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁二氯化钯(II)二氯甲烷复合物(8.67mg，10.62μmol)，及最后的二烷(2ml)。将反应容器快速冷却至-78℃，用氮气净化4次。将冷冻混合物温热成亮橙色溶液。将其于60℃油浴中浸渍100分钟。自油浴中移出烧瓶，冷却至室温且经由短硅胶垫过滤，用DCM与己烷的1:1混合物洗涤。在室温下蒸发所有挥发性溶剂且粗产物对于下一步骤而言足够的纯，而无需进一步纯化。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.04(t,J＝1.8Hz,1H),4.45-4.39(m,1H),4.30(dd,J＝15.7,1.9Hz,1H),4.31-4.24(m,2H),1.64(s,3H),1.32(t,J＝7.2Hz,3H),1.27(s,12H)。
实施例A17
制备5-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-甲基-4H-1,3-二氧杂环己烯-2-甲酸
步骤1：制备5-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-甲基-4H-1,3-二氧杂环己烯-2-甲酸乙酯
依照制备实施例1的步骤1中所述的方法，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)-4H-1,3-二氧杂环己烯-2-甲酸乙酯作为反应物来制备标题化合物。分离出呈非对映异构体混合物形式的产物(13.3％产率)。MS:m/e 741.55(M+H)+,2.72min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.35-6.30(m,1H),5.36(d,J＝5.5Hz,1H),4.73(s,1H),4.60(s,1H),4.42(ddd,J＝15.4,7.6,1.4Hz,1H),4.33-4.21(m,2H),4.20-4.12(m,1H),3.14-3.00(m,11H),2.80-2.47(m,2H),2.12-1.73(m,2H),1.69(s,3H),1.62(s,3H),1.55-1.19(m,11H),1.10-1.02(m,12H),1.00-0.94(m,6H),0.92-0.87(m,3H),0.86-0.78(m,6H)。
步骤2：依照针对制备实施例4的步骤3所述的方法，使用5-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-甲基-4H-1,3-二氧杂环己烯-2-甲酸乙酯作为反应物来制备5-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-甲基-4H-1,3-二氧杂环己烯-2-甲酸。粗物质通过制备型HPLC用方法13纯化，得到呈非对映异构体混合物形式的标题化合物(17.8％产率)。MS:m/e 713.8(M+H)+,2.41min(方法3)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.41-6.27(m,1H),5.41-5.29(m,1H),4.79-4.70(m,1H),4.67-4.61(m,1H),4.54-4.39(m,1H),4.29-4.12(m,1H),3.14(br.s.,13H),2.39-1.81(m,15H),1.71(s,3H),1.65-1.2(m,10H),1.11(br.s.,3H),1.01(br.s.,6H),0.90(br.s.,3H),0.83(br.s.,3H)。
实施例A18
制备3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸
步骤1：制备(1S,5S,6R)-3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯
依照WO 2012/003497中所述的操作，使用(±)-((1R,5S,6R)-3-氧代二环[3.1.0]己烷-6-甲酸乙酯(外消旋片段，除非另有说明)作为反应物来制备标题化合物(34.5％％产率)。且依照WO2011/075515中所述的操作制备(±)-(1R,5S,6R)-3-氧代二环[3.1.0]己烷-6-甲酸乙酯。MS:m/e 301.05(M+H)+,2.689min(方法8)1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.89(d,J＝1.8Hz,1H),4.24-4.05(m,2H),3.01(ddd,J＝18.1,7.2,1.8Hz,1H),2.70(d,J＝18.3Hz,1H),2.41(dq,J＝7.1,2.6Hz,1H),2.19(td,J＝7.2,3.3Hz,1H),1.41-1.33(m,1H),1.30-1.20(m,3H),19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-73.22(s,3F)。
步骤2：制备3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)二环[3.1.0]己-2-烯6-甲酸乙酯
依照制备6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯的步骤2中所述的方法，使用(±)-(1S,5S,6R)-3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯作为反应物来制备标题化合物(定量产率)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ6.67(q,J＝2.0Hz,1H),4.27-3.98(m,2H),2.89-2.72(m,1H),2.63-2.53(m,1H),2.54-2.41(m,1H),2.28(td,J＝6.2,3.3Hz,1H),1.33-1.15(m,16H)。
步骤3：制备3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯
依照制备实施例1的步骤1中所述的方法，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,13,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,3-二氧杂硼杂环戊-2-基)二环[3.1.0]己-2-烯6-甲酸乙酯作为反应物来制备标题化合物。获得呈非对映异构体混合物形式的标题化合物(54％产率)。MS:m/e 721.55(M+H)+,2.901min(方法8)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ5.81(dd,J＝6.3,1.5Hz,1H),5.50-5.37(m,1H),4.72(d,J＝2.0Hz,1H),4.60(d,J＝0.8Hz,1H),4.19-4.05(m,3H),3.11-3.00(m,7H),2.97-2.82(m,1H),2.74-2.43(m,6H),2.17(td,J＝6.6,3.1Hz,1H),2.09-2.01(m,2H),2.00-1.73(m,3H),1.70(s,3H),1.66-1.18(m,20H),1.16-1.01(m,11H),0.97(m,3H),0.83(m,3H)。
步骤4：依照针对制备实施例4的步骤3所述的方法，使用3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯作为反应物来制备3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸。粗物质通过制备型HPLC用方法13纯化，得到呈非对映异构体混合物形式的标题化合物(43.1％产率)。MS:m/e693.55(M+H)+,2.649min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.86(s,1H),5.43(d,J＝4.5Hz,1H),4.76(s,1H),4.65(s,1H),3.20-3.01(m,8H),3.00-2.81(m,3H),2.78-2.56(m,5H),2.51(d,J＝2.3Hz,1H),2.24-1.74(m,12H),1.71(s,3H),1.65-1.19(m,9H),1.15(s,3H),1.12(s,3H),1.07-1.02(m,2H),1.02-0.99(m,6H),0.80(s,3H)。
实施例A19及A20
制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-3-烯-1,2-二甲酸，异构体1及异构体2
步骤1：制备4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环戊-3-烯-1,2-二甲酸二甲酯
依照WO 2012/003497中所述的操作，使用4-氧代-环戊烷-反-1,2-二甲酸二甲酯作为反应物来制备标题化合物(72.3％产率)。MS:m/e 301.05(M+H)+,2.689min(方法8)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ5.71(q,J＝2.1Hz,1H),4.08-3.98(m,1H),3.78(d,J＝1.7Hz,6H),3.73-3.67(m,1H),3.06-2.91(m,2H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-73.3(s,3F)。
步骤2：制备4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环戊-3-烯-反-1,2-二甲酸二甲酯
依照针对制备6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯的步骤2中所述的方法，使用4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环戊-3-烯-反-1,2-二甲酸二甲酯作为反应物来制备标题化合物(56.8％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.36(q,J＝2.3Hz,1H),4.13-4.04(m,1H),3.69(d,J＝2.5Hz,6H),3.59-3.47(m,1H),3.04-2.85(m,1H),2.72(d,J＝7.3Hz,1H),1.36-1.15(m,12H)。
步骤3：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-3-烯-1,2-二甲酸二甲酯
依照制备实施例1的步骤1中所述的方法，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,13,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环戊-3-烯-反-1,2-二甲酸二甲酯作为反应物来制备标题化合物。获得呈非对映异构体混合物形式的标题化合物(72.7％产率)。MS:m/e 753.6(M+H)+,2.96min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.55(s,1H),5.53-5.49(m,1H),4.71(d,J＝1.8Hz,1H),4.59(s,1H),4.05-3.99(m,1H),3.75-3.70(m,6H),3.57-3.46(m,1H),3.14-3.00(m,8H),2.98-2.41(m,7H),2.08(d,J＝6.5Hz,1H),2.00-1.71(m,5H),1.69(s,3H),1.66-1.29(m,13H),1.13-1.00(m,13H),0.96(s,3H),0.87-0.81(m,3H)。
步骤4：依照制备实施例4的步骤3中所述的方法，使用4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-3-烯-反-1,2-二甲酸二甲酯作为反应物来制备标题化合物。异构体通过制备型HPLC用方法13纯化且分离：
实施例A19:异构体1:(2.2％产率),MS:m/e 725.55(M+H)+,2.534min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.66(br.s.,1H),5.44(br.s.,1H),4.76-4.70(m,1H),4.68(br.s.,1H),3.70(br.s.,1H),3.23-3.04(m,9H),2.98(br.s.,2H),2.91-2.76(m,4H),2.66(br.s.,1H),2.00-1.78(m,7H),1.71(s,3H),1.66-1.38(m,11H),1.29(d,J＝6.8Hz,4H),1.16(br.s.,3H),1.10(br.s.,3H),1.02(br.s.,3H),0.99(br.s.,3H),0.86(br.s.,3H)。
实施例A20:异构体2:(5％产率),MS:m/e 725.55(M+H)+,2.517min(方法8)。1H NMR(400MHz,二氯甲烷-d2)δ5.76(br.s.,1H),5.55(br.s.,1H),4.75(br.s.,1H),4.68(br.s.,1H),3.72-3.59(m,1H),3.25-2.98(m,11H),2.91(br.s.,4H),2.62(br.s.,1H),2.17-1.86(m,8H),1.71(s,3H),1.68-1.24(m,14H),1.22(s,3H),1.14-1.07(m,6H),1.04(br.s.,3H),0.88(br.s.,3H)。
实施例A21及实施例A22
制备3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-2-烯甲酸及
3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-3-烯甲酸
步骤1：制备3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环戊-2-烯甲酸乙酯和3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环戊-3-烯甲酸乙酯
依照WO 2012/003497中所述的操作，使用3-氧代环戊烷甲酸乙酯作为反应物来制备标题化合物。获得呈两种异构体的混合物形式的产物(84％产率)。MS:m/e 289.08(M+H)+,2.20min(方法3)。3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环戊-2-烯甲酸乙酯：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.72(q,J＝2.1Hz,1H),4.27-4.05(m,2H),3.67-3.56(m,1H),2.78-2.71(m,2H),2.43-2.17(m,2H),1.36-1.18(m,3H)。3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环戊-3-烯甲酸乙酯：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.60(五重峰,J＝2.3Hz,1H),4.20-4.04(m,2H),3.35-3.21(m,1H),3.06-2.93(m,1H),2.88-2.79(m,1H),2.71-2.57(m,2H),1.31-1.20(m,3H)。两种结构的19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-73.3(s,3F)。
步骤2：制备3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环戊-2-烯甲酸乙酯及3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环戊-3-烯甲酸乙酯
依照制备6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯的步骤2中所述的方法，使用3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环戊-2-烯甲酸乙酯与3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环戊-3-烯甲酸乙酯的混合物作为反应物来制备标题化合物。获得呈两种异构体的混合物形式的产物(69.9％产率)。3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环戊-2-烯甲酸乙酯：1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ6.53-6.37(m,1H),4.24-4.04(m,2H),3.75-3.55(m,1H),2.69-2.56(m,1H),2.52-2.40(m,1H),2.28-2.06(m,2H),1.33-1.19(m,15H)。3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环戊-3-烯甲酸乙酯：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.53-6.34(m,1H),4.24-4.04(m,2H),3.13(tt,J＝9.3,7.3Hz,1H),2.91-2.68(m,4H),1.32-1.24(m,15H)。
步骤3：制备3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-2-烯甲酸乙酯及
3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-3-烯甲酸乙酯
依照制备实施例1的步骤1中所述的方法，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环戊-2-烯甲酸乙酯与3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环戊-3-烯甲酸乙酯的混合物作为反应物来制备标题化合物。获得呈两种异构体的混合物形式的产物(77％产率)。MS:m/e 709.65(M+H)+,2.961min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.71-5.32(m,2H),4.73(d,J＝2.0Hz,1H),4.61(d,J＝1.3Hz,1H),4.23-4.09(m,2H),3.71-2.08(m,19H),2.00-1.73(m,4H),1.71(s,3H),1.67-1.18(m,18H),1.14-1.04(m,11H),1.00-0.95(m,3H),0.89-0.83(m,3H)。
步骤4：依照制备实施例4的步骤3中所述的方法，使用3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-2-烯甲酸乙酯与3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-3-烯甲酸乙酯的混合物作为反应物来制备标题化合物。通过制备型HPLC用方法13纯化且分离产物，得到两种异构体产物：
实施例A21：3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-2-烯甲酸:(1.7％产率),MS:m/e 681.55(M+H)+,2.63min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.71-5.44(m,2H),4.73(s,1H),4.62(s,1H),3.67(br.s.,1H),3.19-3.01(m,8H),2.88-2.47(m,7H),2.24-2.06(m,3H),1.72(s,3H),1.50-1.21(m,16H),1.16-1.03(m,14H),0.99(s,3H),0.90(br.s.,3H)。
实施例A22：3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-3-烯甲酸:(2.1％产率)。MS:m/e 681.55(M+H)+,2.65min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.68-5.44(m,2H),4.78-4.69(m,1H),4.65-4.57(m,1H),3.09(m,8H),2.95-2.42(m,8H),2.30-1.77(m,3H),1.71(s,3H),1.67-1.20(m,17H),1.17-1.02(m,13H),1.00-0.97(m,3H),0.87(s,3H)。
实施例A23及实施例A24
制备2-(3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-2-烯-1-基)-2,2-二氟乙酸及
2-(3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-3-烯-1-基)-2,2-二氟乙酸
步骤1：制备2,2-二氟-2-(3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环戊-2-烯-1-基)乙酸乙酯和2,2-二氟-2-(3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环戊-3-烯-1-基)乙酸乙酯
依照WO 2012/003497中所述的操作，使用2,2-二氟-2-(3-氧代环戊基)乙酸乙酯(如下文所述制备)作为反应物来制备标题化合物。获得呈异构体混合物形式的产物(36.6％产率)。异构体1：2,2-二氟-2-(3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环戊-2-烯-1-基)乙酸乙酯：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.71-5.55(m,1H),4.48-4.26(m,2H),3.66-3.43(m,1H),2.66-2.57(m,2H),2.32-2.13(m,2H),1.41-1.34(m,3H)。异构体2：2,2-二氟-2-(3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环戊-3-烯-1-基)乙酸乙酯：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.72-5.56(m,1H),4.49-4.28(m,2H),3.32-3.09(m,1H),2.92-2.62(m,4H),1.43-1.26(m,3H)。
两种结构的19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-71.69，-75.04(m,3F),-108.53，-114.83(m,2F)。
Kumadaki等人[Journal of Fluorine Chemistry 125(2004)509-515]的方法适合于制备2,2-二氟-2-(3-氧代环戊基)乙酸乙酯。向厚壁的可再密封管中放置环戊-2-烯酮(190mg，2.314mmol)及2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(900mg，4.43mmol)于THF(5mL)中的混合物，随后放置约800mg根据Brewster Brewster及Groening的方法(Org.Synthesis Coll.第II卷(1948)445-446)制备的铜催化剂。悬浮液用氮气冲洗且温热至75℃并保持2小时。冷却至室温之后，添加TMEDA(0.4mL)且容器用氮气冲洗，再密封且温热至75℃并保持另外的16小时。用5mL三氯甲烷及5mL己烷稀释，搅拌悬浮液且经硅胶(型号-H，约1/2"厚)的短垫过滤且用乙酸乙酯与己烷的混合物洗涤。在室温下，在稍微的真空(25-30mmHg)下浓缩滤液，得到浅橙色物质。在此真空条件下容易地移除少量的未反应环戊-2-烯酮。所得物质不经进一步纯化即用于下一步骤(49％)。MS:m/e 207.10(M+H)+,3.06min(方法20)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.37(q,J＝7.3Hz,2H),3.10-2.89(m,2H),2.50-2.32(m,2H),2.31-2.15(m,2H),2.12-1.97(m,1H),1.38(t,J＝7.2Hz,3H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)d-110.90，-111.94(m,1F),-113.16，-114.39(m,1F)。
步骤2：制备2,2-二氟-2-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环戊-2-烯-1-基)乙酸乙酯及2,2-二氟-2-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环戊-3-烯-1-基)乙酸乙酯
依照制备6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯的步骤2中所述的方法，使用2,2-二氟-2-(3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环戊-2-烯-1-基)乙酸乙酯与2,2-二氟-2-(3-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环戊-3-烯-1-基)乙酸乙酯的混合物作为反应物来制备标题化合物。获得呈异构体混合物形式的产物(37％产率)。异构体1：2,2-二氟-2-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环戊-2-烯-1-基)乙酸乙酯：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.34(q,J＝2.2Hz,1H),4.44-4.26(m,2H),3.50(dddd,J＝14.2,9.4,4.9,2.4Hz,1H),2.66-2.62(m,2H),2.13-1.91(m,2H),1.36(td,J＝7.2,0.8Hz,3H),1.28(d,J＝3.3Hz,12H)。异构体2：2,2-二氟-2-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环戊-3-烯-1-基)乙酸乙酯：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.41(s,1H),4.42-4.25(m,2H),3.15-2.92(m,1H),2.67-2.41(m,4H),1.40-1.33(m,3H),1.31-1.26(m,12H)。
步骤3：制备2-(3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-2-烯-1-基)-2,2-二氟乙酸乙酯及
2-(3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-3-烯-1-基)-2,2-二氟乙酸乙酯
依照制备实施例1的步骤1中所述的方法，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及2,2-二氟-2-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环戊-2-烯-1-基)乙酸乙酯与2,2-二氟-2-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环戊-3-烯-1-基)乙酸乙酯的混合物作为反应物来制备标题化合物。获得呈异构体混合物形式的产物(100％产率)。MS:m/e 759.55(M+H)+,2.86min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.57-5.51(m,1H),5.48(dd,J＝4.3,1.8Hz,1H),4.73(d,J＝1.8Hz,1H),4.61(s,1H),4.40-4.26(m,2H),3.18-2.90(m,9H),2.81-2.33(m,9H),2.15-1.73(m,6H),1.71(s,3H),1.67-1.32(m,14H),1.30-1.18(m,3H),1.15-1.02(m,11H),0.98(s,3H),0.86(s,3H)。
步骤4：依照制备实施例4的步骤3中所述的方法，使用2-(3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-2-烯-1-基)-2,2-二氟乙酸乙酯与2-(3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环戊-3-烯-1-基)-2,2-二氟乙酸乙酯的混合物作为反应物来制备标题化合物。产物通过制备型HPLC用方法13纯化且分离，得到两种异构体。试验性地指定结构如下：
实施例A23:异构体1:(13％产率)。MS:m/e 731.55(M+H)+,2.72min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.72(br.s.,1H),5.44(br.s.,1H),4.74(s,1H),4.69(s,1H),3.31-2.96(m,11H),2.92-2.17(m,7H),2.11-1.88(m,6H),1.72(s,3H),1.65-1.26(m,13H),1.24(br.s.,3H),1.19(m,3H),1.06(d,J＝11.5Hz,6H),0.82(s,3H),0.85-0.79(m,3H)。
实施例A24:异构体2:(10.4％)。MS:m/e 731.55(M+H)+,2.72min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.83(br.s.,1H),5.43(d,J＝6.3Hz,1H),4.74(s,1H),4.70(s,1H),3.26-2.54(m,18H),2.24(d,J＝7.3Hz,3H),2.14-1.82(m,9H),1.74(s,3H),1.68-1.40(m,10H),1.23(br.s.,6H),1.07(d,J＝9.5Hz,6H),0.81(s,3H)。
实施例A25
制备2-(4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1-基)乙酸
步骤1：制备2-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯
依照WO 2012/003497中所述的操作，使用2-(4-氧代环己基)乙酸乙酯作为反应物来制备标题化合物(80.0％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.89-5.62(m,1H),4.24-4.07(m,2H),2.53-2.41(m,1H),2.40-2.34(m,2H),2.32(d,J＝7.0Hz,2H),2.22-2.09(m,1H),2.01-1.89(m,2H),1.58-1.49(m,1H),1.28(td,J＝7.1,2.6Hz,3H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-73.897(s,3F)。
步骤2：制备2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯
依照针对制备6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯的步骤2中所述的方法，使用2-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯作为反应物来制备标题化合物(99％产率)。MS:m/e 295.2(M+H)+,2.28min(方法3)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.54(d,J＝2.3Hz,1H),4.15(q,J＝7.3Hz,2H),2.41-1.99(m,7H),1.93-1.71(m,2H),1.38-1.22(m,15H)。
步骤3：制备2-(4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯
依照制备实施例1的步骤1中所述的方法，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯作为反应物来制备标题化合物。获得呈非对映异构体混合物形式的产物(42.7％产率)。MS:m/e 737.65(M+H)+,2.939min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.32(br.s.,1H),5.19(d,J＝5.8Hz,1H),4.72(d,J＝1.8Hz,1H),4.61(d,J＝1.5Hz,1H),4.21-4.09(m,2H),3.15-2.96(m,8H),2.77-2.54(m,4H),2.52-2.40(m,1H),2.34-2.08(m,4H),2.03-1.72(m,7H),1.70(s,3H),1.61-1.39(m,9H),1.39-1.19(m,10H),1.12-1.04(m,7H),1.01-0.97(m,6H),0.96-0.91(m,3H),0.87(s,3H)。
步骤4：依照制备实施例4的步骤3中所述的方法，使用2-(4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯作为反应物来制备2-(4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1-基)乙酸。粗物质通过制备型HPLC用方法15纯化，得到呈非对映异构体混合物形式的标题化合物(19.9％产率)。MS:m/e 709.6(M+H)+,2.679min(方法8)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ5.34(br.s.,1H),5.22(d,J＝6.3Hz,1H),4.87(s,1H),4.76(s,1H),3.30-3.17(m,8H),3.16-3.07(m,3H),3.02-2.90(m,1H),2.80(td,J＝11.0,5.4Hz,1H),2.28(d,J＝7.0Hz,2H),2.25-2.00(m,9H),1.90-1.80(m,4H),1.78(s,3H),1.75-1.23(m,15H),1.20(s,3H),1.17(d,J＝2.8Hz,1H),1.13(s,3H),1.03(s,1.5H),1.01(s,1.5H),1.00(s,1.5H),0.97(s,1.5H),0.95(s,3H)。
实施例A26
制备(6S)-3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸
步骤1：制备3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸
依照制备实施例1的步骤2中所述的方法，使用3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯作为反应物来制备标题化合物。获得呈单一异构体形式的产物(29.9％产率)。MS:m/e 721.55(M+H)+,2.879min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.86-5.69(m,1H),5.48-5.32(m,1H),4.71(d,J＝1.8Hz,1H),4.60(d,J＝1.5Hz,1H),4.23-3.99(m,2H),3.16-2.97(m,9H),2.96-2.80(m,1H),2.75-2.39(m,7H),2.16(td,J＝6.6,3.1Hz,1H),2.09-1.99(m,2H),1.98-1.72(m,5H),1.69(s,3H),1.65-1.30(m,11H),1.29-1.21(m,5H),1.11(dd,J＝5.3,2.5Hz,2H),1.07(s,1.5H),1.06(s,3H),1.03(d,J＝1.3Hz,3H),0.97(s,1.5H),0.97(s,3H),0.83(s,1.5H),0.82(s,1.5H)。
步骤2：依照制备实施例4的步骤3中所述的方法，使用3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯作为反应物来制备3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸化合物。粗物质通过制备型HPLC用方法15纯化，得到呈单一异构体形式的标题化合物(此异构体可见于制备实施例A18时所获得的异构体混合物中)。以任意方式指定立体化学结构。MS:m/e 693.55(M+H)+,2.65min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.94(s,1H),5.48(d,J＝4.8Hz,1H),4.82(s,1H),4.73(s,1H),3.27-3.00(m,9H),2.97-2.84(m,3H),2.80-2.58(m,3H),2.28-2.13(m,2H),2.10-1.87(m,6H),1.82-1.74(m,1H),1.71(s,3H),1.68-1.25(m,13H),1.22(s,3H),1.16(s,3H),1.11-1.07(m,2H),1.06(s,6H),0.99(d,J＝2.3Hz,1H),0.76(s,3H)。
实施例A27及实施例A28
制备3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸(异构体1及异构体2)
步骤1：制备3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯
依照上述制备实施例1步骤1中所述的方法，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)二环[[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯作为反应物来制备标题化合物(86.6％产率)。MS:m/e 543.5(M-16)+,2.87min。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.84-5.72(m,1H),5.47-5.32(m,1H),4.72(s,1H),4.59(s,1H),4.24-3.99(m,2H),3.09-2.74(m,1H),2.67-2.40(m,3H),2.26-2.10(m,1H),2.09-1.92(m,3H),1.69(s,3H),1.67-1.65(m,1H),1.64-1.31(m,9H),1.29-1.22(m,5H),1.17-1.05(m,4H),1.02(s,6H),0.98-0.93(m,7H),0.82(m,3H)。
步骤2：制备3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯
向经火焰干燥的75mL可再密封厚壁容器中放置3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯(0.453g，0.809mmol)及经火焰干燥的磷酸钾(0.859g，4.05mmol)，随后放置1,2-二氯乙烷(24ml)及乙腈(12ml)。反应混合物用氮气冲洗，密封且温热至130℃并保持36小时。粗反应混合物冷却至室温且经由短硅胶垫过滤，用乙酸乙酯洗涤，获得非常浅的橙色的溶液，将其蒸发至干燥。获得白色固体(0.3g，0.512mmol，63.3％)，且按原样使用。MS:m/e 586.55(M+H)+,2.791min。
步骤3：制备3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯
依照制备(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9(5bH)-酮的步骤1中所述的方法，使用4-(甲磺酰基)哌啶及3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(氮丙啶-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯作为反应物来制备标题化合物。获得呈非对映异构体混合物形式的产物(33.2％产率)。MS:m/e 749.6(M+H)+,2.794min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.84-5.75(m,1H),5.49-5.38(m,1H),4.69(br.s.,1H),4.59(br.s.,1H),4.19-4.04(m,2H),3.12(dd,J＝15.6,12.8Hz,1H),2.98-2.74(m,7H),2.68-2.51(m,5H),2.45(d,J＝7.5Hz,4H),2.22-2.10(m,3H),2.09-1.74(m,8H),1.69(s,3H),1.65-1.30(m,12H),1.26(m,6H),1.06(br.s.,5.5H),1.02(s,3H),0.98-0.92(m,4.5H),0.85-0.78(m,3H)。
步骤4：依照制备实施例4的步骤3中所述的方法，使用3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸乙酯作为反应物来制备3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)二环[3.1.0]己-2-烯-6-甲酸(异构体1及异构体2)。粗物质通过制备型HPLC用方法15纯化，得到两种异构体：
实施例A27:异构体1:(16.3％),MS:m/e 721.6(M+H)+,2.613min(方法8)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ5.82(d,J＝1.5Hz,1H),5.53-5.37(m,1H),4.85(br.s.,1H),4.74(br.s.,1H),3.26-3.16(m,4H),3.04(t,J＝9.3Hz,1H),2.97(s,3H),2.95-2.82(m,2H),2.82-2.71(m,2H),2.67-2.52(m,2H),2.48-2.35(m,2H),2.26-1.98(m,9H),1.98-1.74(m,5H),1.76(s,3H),1.71-1.30(m,12H),1.20(s,3H),1.18-1.13(m,1H),1.09(s,3H),1.06(s,6H),1.02(br.s.,1H),0.89(s,3H)。
实施例A28:异构体2:(13.4％),MS:m/e 721.6(M+H)+,2.649min(方法8)。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ5.83(d,J＝1.8Hz,1H),5.47(dd,J＝6.4,1.9Hz,1H),4.86(s,1H),4.75(s,1H),3.29-3.17(m,4H),3.04(d,J＝9.0Hz,1H),2.98(s,3H),2.94-2.71(m,4H),2.68-2.57(m,2H),2.44(dq,J＝6.6,2.2Hz,2H),2.27-1.97(m,9H),1.94-1.79(m,4H),1.78(s,3H),1.74-1.26(m,14H),1.22(s,3H),1.11(s,6H),1.04-1.00(m,4H),0.89(s,3H)。
实施例A29
制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-1,3-二烯甲酸
步骤1：制备4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-1,3-二烯甲酸甲酯
依照制备中间体1的方法2的步骤6中所述的操作，使用4-氧代环己-1-烯甲酸甲酯及4-氧代环己-2-烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物(53.9％产率)。依照Tet.Lett.第53卷,第7期,第819-821页中所述的操作制备4-氧代环己-1-烯甲酸甲酯及4-氧代环己-2-烯甲酸甲酯。m/e 287.05(M+H)+,2.435min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.96(dt,J＝6.3,1.5Hz,1H),6.07(dt,J＝6.4,1.4Hz,1H),3.78(s,3H),2.81-2.73(m,2H),2.67-2.59(m,2H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-73.55(s,3F)。
步骤2：制备4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-1,3-二烯甲酸甲酯
依照制备6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯的步骤2中所述的方法，使用4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-1,3-二烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物(46.6％产率)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.00(dt,J＝5.3,1.5Hz,1H),6.75(dt,J＝5.3,1.6Hz,1H),3.74(s,3H),2.42-2.35(m,2H),2.34-2.27(m,2H),1.26(s,12H)。
步骤3：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-1,3-二烯甲酸甲酯
依照制备实施例1步骤1中所述的方法，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-1,3-二烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。(60.8％产率)。MS:m/e529.5(M-16)+,2.816min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.99(d,J＝5.8Hz,1H),5.78(d,J＝5.8Hz,1H),5.27(dd,J＝6.0,1.8Hz,1H),4.70(d,J＝2.0Hz,1H),4.57(d,J＝1.3Hz,1H),3.72(s,3H),2.52(td,J＝10.8,5.3Hz,1H),2.48-2.39(m,1H),2.36-2.29(m,1H),2.09-1.95(m,2H),1.76-1.20(m,22H),1.66(s,3H),1.05(s,3H),0.98(s,3H),0.94(s,6H),0.86(s,3H)。
步骤4：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-1,3-二烯甲酸甲酯
依照制备实施例1的步骤2中所述的方法，使用4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-1,3-二烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物(30.9％产率)。MS:m/e 707.7(M+H)+,3.20min(方法2)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.00(d,J＝5.8Hz,1H),5.78(d,J＝5.8Hz,1H),5.30-5.23(m,1H),4.68(d,J＝2.0Hz,1H),4.57(d,J＝1.3Hz,1H),3.73(s,3H),3.11-2.95(m,9H),2.67-2.50(m,4H),2.47-2.39(m,3H),2.34-2.27(m,1H),2.14-1.01(m,22H),1.66(s,3H),1.23(s,3H),1.04(s,3H),0.95(s,3H),0.94(s,3H),0.86(s,3H)。
步骤5：依照制备实施例4的步骤3中所述的方法，使用4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-1,3-二烯甲酸甲酯作为反应物来制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-1,3-二烯甲酸。粗物质通过制备型HPLC用方法13纯化，得到标题化合物(34％产率)。MS:m/e 693.51(M+H)+,2.2min(方法2)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.08(d,J＝5.5Hz,1H),5.81(d,J＝5.5Hz,1H),5.29(d,J＝4.8Hz,1H),4.73(s,1H),4.63(s,1H),3.19-2.89(m,10H),2.83-2.66(m,3H),2.49-2.27(m,4H),2.16-1.02(m,22H),1.69(s,3H),1.13(s,3H),1.01(s,3H),1.00(s,3H),0.97(s,3H),0.89(s,3H)。
实施例A30
制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(苯磺酰基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-1,3-二烯甲酸
步骤1：制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(苯磺酰基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-1,3-二烯甲酸甲酯
将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-1,3-二烯甲酸甲酯(200mg，0.366mmol)及(乙烯基磺酰基)苯(80mg，0.476mmol)溶于甲苯(1ml)中。溶液温热至90℃并保持9小时。将粗反应混合物施加于12gm硅胶柱上，用0-10％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂加以纯化，得到呈白色固体状的标题化合物(100mg，0.14mmol，38.2％)。MS:m/e 714.53(M+H)+,2.46min(方法2)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.03-7.89(m,2H),7.73-7.66(m,1H),7.66-7.57(m,2H),7.08-7.01(m,1H),5.83(d,J＝5.5Hz,1H),5.30(d,J＝1.8Hz,1H),4.70(d,J＝2.5Hz,1H),4.65-4.55(m,1H),3.82-3.71(m,3H),3.42-3.24(m,2H),3.03-2.86(m,1H),2.86-2.70(m,1H),2.56-2.40(m,3H),2.40-2.26(m,1H),2.09-2.00(m,1H),1.98-1.85(m,1H),1.85-1.73(m,2H),1.71-1.67(m,3H),1.67-1.38(m,7H),1.37-1.11(m,12H),1.10-1.07(m,3H),1.04-1.01(m,3H),0.98(d,J＝3.3Hz,3H),0.97-0.94(m,3H),0.92-0.89(m,3H)。
步骤2：依照制备实施例4的步骤3中所述的方法，使用4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(苯磺酰基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-1,3-二烯甲酸甲酯作为反应物来制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(苯磺酰基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-1,3-二烯甲酸。粗物质通过制备型HPLC用方法13纯化，得到标题化合物(11.3％产率)。MS:m/e 700.55(M+H)+,2.838min(方法8)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ8.05-7.92(m,2H),7.78-7.67(m,1H),7.65-7.53(m,2H),7.17(d,J＝5.8Hz,1H),5.86(d,J＝5.8Hz,1H),5.47-5.21(m,1H),4.71(d,J＝2.0Hz,1H),4.60(s,1H),3.33(td,J＝6.1,2.0Hz,2H),2.92(dt,J＝12.7,6.2Hz,1H),2.85-2.68(m,1H),2.53-2.29(m,6H),2.24-1.85(m,5H),1.84-1.70(m,3H),1.69(s,3H),1.67-1.11(m,13H),1.09(s,3H),1.03(s,3H),1.00(s,3H),0.95(s,3H),0.91(s,3H)。
实施例A31
制备1-乙酰氨基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸
步骤1：制备1-乙酰氨基-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照制备中间体1的方法2的步骤6中所述的操作，使用1-乙酰氨基-4-氧代环己烷甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。依照Journal of Chem.Soc.,Perkin Trans.I,1999,第3375-3379页中所述的操作制备1-乙酰氨基-4-氧代环己烷甲酸酯(84.0％产率)。MS:m/e 346.1(M+H)+,2.213min(方法？)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.24(s,1H),5.69(td,J＝3.3,1.4Hz,1H),3.82-3.58(m,3H),2.87-2.67(m,1H),2.61-2.44(m,2H),2.42-2.33(m,2H),2.19-2.07(m,1H),2.01-1.94(m,3H)。19F NMR(376MHz,氯仿-d)δ-74.02(s,3F)。
步骤2：制备1-乙酰氨基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照制备6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)螺[3.3]庚-5-烯-2-甲酸甲酯的步骤2中所述的方法，使用1-乙酰氨基-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物(48.4％产率)。MS:m/e325.25(M+H)+,2.126min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.42(br.s.,1H),5.90(s,1H),3.83-3.59(m,3H),2.65(d,J＝18.8Hz,1H),2.35(d,J＝18.1Hz,1H),2.25(d,J＝11.0Hz,2H),2.13-2.03(m,1H),1.98-1.90(m,3H),1.88-1.75(m,1H),1.36-1.18(m,12H)。
步骤3：制备1-乙酰氨基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照制备实施例1的步骤1中所述的方法，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-3a-((3-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,13,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及1-乙酰氨基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。获得呈非对映异构体混合物形式的产物(65.7％产率)。MS:m/e 766.8(M+H)+,2.72min(方法3)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.82(d,J＝3.0Hz,1H),5.26(br.s.,1H),5.21-5.12(m,1H),4.70(d,J＝2.0Hz,1H),4.58(d,J＝1.3Hz,1H),3.78-3.68(m,3H),3.14-2.90(m,7H),2.75-2.42(m,6H),2.40-2.19(m,3H),2.13-2.05(m,1H),1.98(d,J＝2.0Hz,3H),1.95-1.69(m,6H),1.68(s,3H),1.65-1.30(m,7H),1.25(m,11H),1.10-1.01(m,6H),0.98-0.87(m,6H),0.87-0.83(m,3H)。
步骤4：依照制备实施例4的步骤3中所述的操作，使用1-乙酰氨基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备1-乙酰氨基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧化硫吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸。粗物质通过制备型HPLC用方法13纯化，得到呈非对映异构体混合物形式的标题化合物(41.5％产率)。MS:m/e 752.55(M+H)+,2.53min(方法8)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ6.38-6.05(m,1H),5.27(br.s.,1H),5.22(d,J＝5.0Hz,1H),4.73(br.s.,1H),4.62(s,1H),3.26-2.90(m,9H),2.89-2.49(m,5H),2.46-2.23(m,3H),2.22-2.06(m,4H),2.00(m,2H),1.97(s,3H),1.90(d,J＝7.2Hz,4H),1.70(s,3H),1.63-1.15(m,14H),1.11(br.s.,3H),1.03-0.97(m,6H),0.94(br.s.,3H),0.87(br.s.,3H)。
实施例A32
制备1-乙酰氨基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸
步骤1：制备1-乙酰氨基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯
依照制备实施例1的步骤1中所述的方法，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯(三氟甲磺酸酯-2)及1-乙酰氨基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。获得呈非对映异构体混合物形式的产物(58.3％产率)。MS:m/e 794.6(M+H)+,2.718min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.71(d,J＝5.5Hz,1H),5.28(br.s.,1H),5.22(s,1H),4.73(br.s.,1H),4.60(br.s.,1H),3.75(s,3H),3.15(d,J＝10.5Hz,2H),2.92-2.79(m,4H),2.73-2.53(m,4H),2.52-2.22(m,7H),2.20-2.08(m,5H),2.03(br.s.,1H),2.00(d,J＝1.8Hz,3H),1.98-1.75(m,7H),1.70(s,3H),1.68-1.20(m,15H),1.14-1.04(m,6H),1.00-0.91(m,6H),0.86(s,3H)。
步骤2：依照制备实施例4的步骤3中所述的方法，使用1-乙酰氨基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备1-乙酰氨基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸。粗物质通过制备型HPLC用方法13纯化，得到呈非对映异构体混合物形式的标题化合物(41.9％产率)。MS:m/e 780.55(M+H)+,2.57min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ6.22(br.s.,1H),5.36-5.24(m,1H),5.21(br.s.,1H),4.85-4.70(m,1H),4.63(s,1H),3.30-3.09(m,2H),2.87(m,5H),2.81-2.50(m,5H),2.42(br.s.,2H),2.27-2.03(m,10H),1.98(m,4H),1.92(m,5H),1.91-1.68(m,4H),1.70(s,3H),1.65-1.19(m,12H),1.14(s,3H),1.08-0.91(m,9H),0.86(br.s.,3H)。
实施例A33
制备2-(4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1-基)乙酸
步骤1：制备2-(4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1-基)乙酸乙酯
依照制备实施例1的步骤1中所述的方法，使用三氟甲磺酸(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基酯及1-乙酰氨基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备标题化合物。获得呈非对映异构体混合物形式的标题化合物(29.3％产率)。MS:m/e 765.55(M+H)+,3.03min(方法8)。1H NMR(500MHz,氯仿-d)δ5.30(s,1H),5.20-5.16(m,1H),4.72(d,J＝1.8Hz,1H),4.59(d,J＝1.2Hz,1H),4.17-4.11(m,2H),3.12(t,J＝11.9Hz,2H),2.87-2.78(m,1H),2.83(s,3H),2.70-2.55(m,3H),2.52-2.43(m,2H),2.32-0.94(m,40H),1.69(s,3H),1.07(s,3H),0.97-0.91(m,6H),0.96(s,3H),0.85(s,3H)。
步骤2：依照制备实施例4的步骤3中所述的方法，使用1-乙酰氨基-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲酯作为反应物来制备2-(4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-((2-(4-(甲磺酰基)哌啶-1-基)乙基)氨基)-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯-1-基)乙酸。粗物质通过制备型HPLC用方法13纯化，得到呈非对映异构体混合物形式的标题化合物(39.4％产率)。MS:m/e 737.55(M+H)+,2.928min(方法8)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ5.31(s,1H),5.17(d,J＝6.3Hz,1H),4.73(s,1H),4.62(s,1H),3.18(t,J＝12.4Hz,2H),2.90-2.68(m,5H),2.84(s,3H),2.58-2.50(m,1H),2.32-1.02(m,37H).1.69(s,3H),1.13(s,3H),0.98(s,3H),0.98-0.90(m,6H),0.85(s,3H)。
实施例的生物学数据
·“μM”表示微摩尔浓度；
·“mL”表示毫升；
·“μl”表示微升；
·“mg”表示毫克；
·“μg”表示微克；
下文描述用于获得表1至表2中所报导的结果的材料及实验操作。
HIV细胞培养测定：MT-2细胞及293T细胞获自NIH AIDS Research andReference Reagent Program。MT-2细胞于补充有10％热灭活胎牛血清、100μg/ml青霉素G(penicillin G)及至多100个单位/毫升链霉素(streptomycin)的RPMI 1640培养基中繁殖。293T细胞于补充有10％热灭活胎牛血清(FBS)、100个单位/毫升青霉素G及100μg/ml链霉素的DMEM培养基中繁殖。NL4-3的原病毒DNA克隆获自NIH AIDS Research and Reference Reagent Program。使用重组NL4-3病毒(其中来自NL4-3的nef基因区段被海肾荧光素酶(Renillaluciferase)基因置换)作为参考病毒。此外，将残基Gag P373转化成P373S。简而言之，重组病毒通过转染NL4-3的已改变原病毒克隆而制备。根据制造商说明书，使用得自Invitrogen(Carlsbad,CA)的LipofectAMINE PLUS在293T细胞中进行转染。使用荧光素酶活性作为标记来滴定MT-2细胞中的病毒。通过修改制造商方案，使用得自Promega(Madison,WI)的双荧光素酶试剂盒(Dual Luciferase kit)定量荧光素酶。将经稀释的被动裂解液(Passive Lysissolution)与再悬浮的荧光素酶测定试剂及再悬浮的Stop&Glo底物预混合(比率为2:1:1)。将50μL混合物添加至测定板上的各吸出孔中，且立即在Wallac TriLux(Perkin-Elmer)上测量荧光素酶活性。通过在抑制剂的连续稀释液存在下测量经NLRluc重组体感染4至5天的细胞中的荧光素酶活性来定量抑制剂对重组病毒的抗病毒活性。化合物的EC50数据示于表2中。
结果
表1
以上描述仅为说明性的且不应理解为以任何方式限制本发明的范围或基本原理。实际上，除本文中所示及所述的内容外，本领域技术人员根据实施例及以上描述将显而易知对本发明的各种修改。预期所述修改也落入所附权利要求的范围内。

Claims (19)

1.化合物，包括其药学上可接受的盐，该化合物选自：
其中R1为异丙烯基或异丙基；
J及E独立地为-H或-CH3，且当存在双键时，E不存在；
X选自：C4-8环烷基、C4-8环烯基、C4-9螺环烷基、C4-9螺环烯基、C4-8氧杂环烷基、C4-8二氧杂环烷基、C6-8氧杂环烯基、C6-8二氧杂环烯基、C6环二烯基、C6氧杂环二烯基、C6-9氧杂螺环烷基及C6-9氧杂螺环烯基环，其中X经A取代，其中A为选自以下的至少一个成员：-H、-卤素、-羟基、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、-C1-6烷基-Q、-经烷基取代的C1-6烷基-Q、-CN、-CF2Q、-NR8R9、-COOR2及-CONR2R2；
X也可选自：
其中Q选自：芳基、杂芳基、经取代的杂芳基、-OR2、-COOR3、-NR2R2、-SO2R7、-CONHSO2R3及-CONHSO2NR2R2；
R2为-H、-C1-6烷基、-经烷基取代的C1-6烷基或-经芳基取代的C1-6烷基；
Y选自：-COOR2、-C(O)NR2SO2R3、-C(O)NHSO2NR2R2、-NR2SO2R2、-SO2NR2R2、-C3-6环烷基-COOR2、-C2-6烯基-COOR2、-C2-6炔基-COOR2、-C1-6烷基-COOR2、-经烷基取代的C1-6烷基、-COOR2、-CF2-COOR2、-NHC(O)(CH2)n-COOR2、-SO2NR2C(O)R2、-四唑及-CONHOH，
其中n＝1-6；
W不存在，或为CH2或CO；
R3为-C1-6烷基或-经烷基取代的C1-6烷基；
R4选自：-H、-C1-6烷基、-C1-6烷基-C(OR3)2-C3-6环烷基、-经取代的C1-6烷基、-C1-6烷基-C3-6环烷基、-C1-6烷基-Q1、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q1、芳基、杂芳基、经取代的杂芳基、-COR6、-COCOR6、-SO2R7、-SO2NR2R2、
条件是当W为CO时，R4或R5不可为COR6或COCOR6；
其中Q1选自杂芳基、经取代的杂芳基、卤素、-CF3、-OR2、-COOR2、-NR8R9、-CONR10R11及-SO2R7；
R5选自-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-经C1-6烷基取代的烷基、-C1-6烷基-NR8R9、-COR10、-COR6、-COCOR6、-SO2R7及-SO2NR2R2；
条件是，R4或R5中仅一个可选自-COR6、-COCOR6、-SO2R7及-SO2NR2R2；
或若W不存在或为CH2，则R4及R5可与相邻N一起形成
R6选自：-H、-C1-6烷基、-经C1-6烷基取代的烷基、-C3-6环烷基、-经取代的C3-6环烷基-Q2、-C1-6烷基-Q2、-经C1-6烷基取代的烷基-Q2、-C3-6环烷基-Q2、芳基-Q2、-NR13R14及-OR15；
其中Q2选自芳基、杂芳基、经取代的杂芳基、-OR2、-COOR2、-NR8R9、-SO2R7、-CONHSO2R3及-CONHSO2NR2R2；
R7选自-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基、-C3-6环烷基、-CF3、芳基及杂芳基；
R8及R9独立地选自：-H、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基、芳基、杂芳基、经取代的芳基、经取代的杂芳基、-C1-6烷基-Q2及-COOR3，
且R8及R9也可独立地选自：
或R8及R9与相邻N一起形成选自以下的环：
条件是，R8或R9中仅一个可为-COOR3；
R10及R11独立地选自-H、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基及-C3-6环烷基，或R10及R11与相邻N一起形成环，诸如：
R12选自：-C1-6烷基、-C1-6烷基-OH、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基、-C3-6环烷基、-COR7、-COONR22R23、-SOR7及-SONR24R25；
R13及R14独立地选自：-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-经取代的C1-6烷基、-C1-6烷基-Q3、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q3、经取代的C1-6烷基-Q3及
或R13及R14与相邻N一起形成选自以下的环：
Q3选自杂芳基、经取代的杂芳基、-NR20R21、-CONR2R2、-COOR2、-OR2及-SO2R3；
R15选自：-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-经取代的C1-6烷基、-C1-6烷基-Q3、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q3及-经取代的C1-6烷基-Q3；
R16选自-H、-C1-6烷基、-NR2R2及-COOR3；
R17选自-H、-C1-6烷基、-COOR3及芳基；
R18选自-COOR2及-C1-6烷基-COOR2；
R19选自-H、-C1-6烷基、-C1-6烷基-Q4、-COR3、-COOR3，其中Q4选自-NR2R2及-OR2；
R20及R21独立地选自-H、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基-OR2及-COR3，
或R20及R21与相邻N一起形成选自以下的环：
条件是，R20或R21中仅一个可为-COR3；
R22及R23独立地选自：H、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基及-C1-6环烷基，
或R22及R23与相邻N一起形成选自以下的环：
R24及R25独立地选自：-H、-C1-6烷基、-经取代的C1-6烷基、-C1-6烷基-Q5、-C1-6环烷基、芳基、经取代的芳基、杂芳基及经取代的杂芳基，
且Q5选自卤素及SO2R3。
2.如权利要求1要求保护的化合物，其中该化合物具有式I。
3.如权利要求1要求保护的化合物，其中该化合物具有式II。
4.如权利要求1要求保护的化合物，其中该化合物具有式III。
5.如权利要求2要求保护的化合物，其中R1为异丙烯基。
6.如权利要求5要求保护的化合物，其中X选自C4-8环烯基、C4-9螺环烷基及C4-9螺环烯基。
7.如权利要求6要求保护的化合物，其中Y为-COOR2。
8.如权利要求7要求保护的化合物，其中Y为-COOH。
9.如权利要求6要求保护的化合物，其中A为-H。
10.如权利要求2要求保护的化合物，其中该化合物具有选自以下的通式结构：
11.化合物，包括其药学上可接受的盐，该化合物选自：
12.药物组合物，其包含抗病毒有效量的一种或多种如权利要求1要求保护的化合物以及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
13.药物组合物，其包含抗病毒有效量的一种或多种如权利要求10要求保护的化合物以及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
14.药物组合物，其包含抗病毒有效量的一种或多种如权利要求11要求保护的化合物以及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
15.如权利要求12的药物组合物，其用于治疗HIV感染，其另外包含抗病毒有效量的AIDS治疗剂，该AIDS治疗剂选自：(a)AIDS抗病毒剂；(b)抗感染剂；(c)免疫调节剂；及(d)另一种HIV进入抑制剂。
16.一种治疗感染HIV病毒的哺乳动物的方法，包括给予所述哺乳动物抗病毒有效量的如权利要求1要求保护的化合物以及一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
17.如权利要求1要求保护的化合物，其中W不存在。
18.如权利要求1要求保护的化合物，其中该化合物具有式IV。
19.中间体化合物，其选自：
CN201380019696.6A 2012-02-15 2013-02-13 具有hiv成熟抑制活性的c-3环烯三萜类化合物 Expired - Fee Related CN104220451B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610397768.6A CN106046106A (zh) 2012-02-15 2013-02-13 具有hiv成熟抑制活性的c‑3环烯三萜类化合物

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261599040P 2012-02-15 2012-02-15
US61/599,040 2012-02-15
US13/760,726 US8906889B2 (en) 2012-02-15 2013-02-06 C-3 cycloalkenyl triterpenoids with HIV maturation inhibitory activity
US13/760,726 2013-02-06
PCT/US2013/025897 WO2013123019A1 (en) 2012-02-15 2013-02-13 C-3 cycloalkenyl triterpenoids with hiv maturation inhibitory activity

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610397768.6A Division CN106046106A (zh) 2012-02-15 2013-02-13 具有hiv成熟抑制活性的c‑3环烯三萜类化合物

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104220451A true CN104220451A (zh) 2014-12-17
CN104220451B CN104220451B (zh) 2016-06-29

Family

ID=48946098

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201380019696.6A Expired - Fee Related CN104220451B (zh) 2012-02-15 2013-02-13 具有hiv成熟抑制活性的c-3环烯三萜类化合物
CN201610397768.6A Pending CN106046106A (zh) 2012-02-15 2013-02-13 具有hiv成熟抑制活性的c‑3环烯三萜类化合物

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610397768.6A Pending CN106046106A (zh) 2012-02-15 2013-02-13 具有hiv成熟抑制活性的c‑3环烯三萜类化合物

Country Status (26)

Country Link
US (1) US8906889B2 (zh)
EP (1) EP2814834B1 (zh)
JP (1) JP6155285B2 (zh)
KR (1) KR20140123584A (zh)
CN (2) CN104220451B (zh)
AR (1) AR089996A1 (zh)
AU (1) AU2013221725B2 (zh)
BR (1) BR112014019672A8 (zh)
CA (1) CA2864656A1 (zh)
CL (1) CL2014002141A1 (zh)
CO (1) CO7061077A2 (zh)
EA (1) EA024361B1 (zh)
ES (1) ES2656984T3 (zh)
HK (1) HK1204608A1 (zh)
IL (1) IL234077A (zh)
MX (1) MX2014009235A (zh)
MY (1) MY166793A (zh)
NZ (1) NZ631408A (zh)
PE (1) PE20142315A1 (zh)
PH (1) PH12014501816A1 (zh)
PT (1) PT2814834T (zh)
SG (1) SG11201404748XA (zh)
TW (1) TW201336863A (zh)
UY (1) UY34627A (zh)
WO (1) WO2013123019A1 (zh)
ZA (1) ZA201406724B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106905264A (zh) * 2017-04-12 2017-06-30 连云港杰瑞药业有限公司 一种合成阿扎拉韦中间体的方法
CN109153700A (zh) * 2016-02-04 2019-01-04 Viiv保健英国第五有限公司 作为hiv-1抑制剂的c-3和c-17修饰的三萜类化合物

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8889854B2 (en) 2012-05-07 2014-11-18 Bristol-Myers Squibb Company C-17 bicyclic amines of triterpenoids with HIV maturation inhibitory activity
EP2953960A1 (en) 2013-02-06 2015-12-16 Bristol-Myers Squibb Company C-19 modified triterpenoids with hiv maturation inhibitory activity
CA2944778C (en) 2014-04-11 2022-06-14 ViiV Healthcare UK (No.4) Limited Triterpenoids with hiv maturation inhibitory activity
WO2015195776A1 (en) 2014-06-19 2015-12-23 Bristol-Myers Squibb Company Betulinic acid derivatives with hiv maturation inhibitory activity
AU2015346314B2 (en) * 2014-11-14 2018-04-12 VIIV Healthcare UK (No.5) Limited Extended betulinic acid analogs
US9969767B2 (en) 2014-11-14 2018-05-15 VIIV Healthcare UK (No.5) Limited Oxolupene derivatives
KR20170092581A (ko) 2014-11-14 2017-08-11 비브 헬스케어 유케이 (넘버5) 리미티드 Ｃ１７-아릴 치환된 베툴린산 유사체
AU2016248235A1 (en) * 2015-04-14 2017-10-19 Viiv Healthcare Uk (No 4) Limited Crystalline forms of modified triterpenoid hydrochloride salts with HIV maturation inhibitor activity
KR20180028534A (ko) * 2015-07-28 2018-03-16 글락소스미스클라인 인털렉츄얼 프로퍼티 (넘버 2) 리미티드 Hiv 감염을 예방하거나 치료하기 위한 베투인 유도체
CN108026139A (zh) 2015-07-28 2018-05-11 葛兰素史克知识产权第二有限公司 用于预防或治疗hiv感染的白桦脂醇衍生物
KR20180054826A (ko) 2015-09-24 2018-05-24 글락소스미스클라인 인털렉츄얼 프로퍼티 (넘버 2) 리미티드 Hiv 성숙 억제 활성을 갖는 화합물
EP3405474A1 (en) * 2016-01-20 2018-11-28 Glaxosmithkline Intellectual Property (No. 2) Limited Amine derivatives of lupanes with hiv maturation inhibitory activity
KR20200052925A (ko) * 2017-09-13 2020-05-15 엠욘 인코퍼레이티드 우르솔산 모르폴린 및 디에탄올아민 염
EP4321164A3 (en) 2018-04-24 2024-04-17 ViiV Healthcare UK (No.5) Limited Compounds with hiv maturation inhibitory activity
CN109705189B (zh) * 2018-12-29 2020-06-05 中国医学科学院药用植物研究所 具有式i所示结构的三萜衍生物及其制备方法和应用
EA202192111A1 (ru) 2019-02-11 2022-01-26 Хетеро Лабс Лимитед Новые тритерпеновые производные в качестве ингибиторов вич
WO2020229398A1 (de) 2019-05-14 2020-11-19 Bayer Aktiengesellschaft (1-alkenyl)-substituierte pyrazole und triazole als schädlingsbekämpfungsmittel

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009020732A1 (en) * 2007-08-03 2009-02-12 Advanced Life Sciences, Inc. Lupane-type triterpenoids modified at 30-position and analogues thereof
WO2009100532A1 (en) * 2008-02-14 2009-08-20 Virochem Pharma Inc. NOVEL 17ß LUPANE DERIVATIVES
WO2011153319A1 (en) * 2010-06-04 2011-12-08 Bristol-Myers Squibb Company C-28 amides of modified c-3 betulinic acid derivatives as hiv maturation inhibitors
WO2011153315A1 (en) * 2010-06-04 2011-12-08 Bristol-Myers Squibb Company Modified c-3 betulinic acid derivatives as hiv maturation inhibitors

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5413999A (en) 1991-11-08 1995-05-09 Merck & Co., Inc. HIV protease inhibitors useful for the treatment of AIDS
US5962527A (en) 1995-03-21 1999-10-05 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Method and composition for treating cancers
US5869535A (en) 1995-03-21 1999-02-09 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Method and composition for selectively inhibiting melanoma
US5679828A (en) 1995-06-05 1997-10-21 Biotech Research Labs, Inc. Betulinic acid and dihydrobetulinic acid derivatives and uses therefor
US20040110785A1 (en) 2001-02-02 2004-06-10 Tao Wang Composition and antiviral activity of substituted azaindoleoxoacetic piperazine derivatives
US7365221B2 (en) 2002-09-26 2008-04-29 Panacos Pharmaceuticals, Inc. Monoacylated betulin and dihydrobetulin derivatives, preparation thereof and use thereof
US20050014730A1 (en) 2003-04-02 2005-01-20 Carlson Robert M. Anti-fungal formulation of triterpene and essential oil
US7745625B2 (en) 2004-03-15 2010-06-29 Bristol-Myers Squibb Company Prodrugs of piperazine and substituted piperidine antiviral agents
US20050239748A1 (en) 2004-03-17 2005-10-27 Panacos Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical salts of 3-O-(3',3'-dimethylsuccinyl) betulinic acid
TW200628161A (en) 2004-11-12 2006-08-16 Panacos Pharmaceuticals Inc Novel betulin derivatives, preparation thereof and use thereof
WO2008127364A2 (en) 2006-10-13 2008-10-23 Myriad Genetics, Inc. Antiviral compounds and use thereof
WO2008115281A2 (en) 2006-10-16 2008-09-25 Myriad Genetics, Inc. Compounds for treating viral infections
CA2711424A1 (en) * 2008-01-03 2009-07-09 Virochem Pharma Inc. Novel lupane derivatives
US9067966B2 (en) 2009-07-14 2015-06-30 Hetero Research Foundation, Hetero Drugs Ltd. Lupeol-type triterpene derivatives as antivirals
SG181803A1 (en) 2009-12-17 2012-07-30 Merck Sharp & Dohme Aminopyrimidines as syk inhibitors
AP2013006706A0 (en) 2010-07-02 2013-02-28 Gilead Sciences Inc Napht-2-ylacetic acid derivatives to treat AIDS
CA2826113C (en) * 2011-01-31 2018-09-04 Bristol-Myers Squibb Company C-17 and c-3 modified triterpenoids with hiv maturation inhibitory activity
RS54352B1 (en) 2011-01-31 2016-02-29 Bristol-Myers Squibb Company C-28 AMINES OF C-3 MODIFIED BETULINIC ACID DERIVATIVES AS HIV INVESTIGATION INHIBITORS
KR20140069167A (ko) * 2011-09-21 2014-06-09 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항바이러스 활성을 갖는 신규 베툴린산 유도체
US8889854B2 (en) 2012-05-07 2014-11-18 Bristol-Myers Squibb Company C-17 bicyclic amines of triterpenoids with HIV maturation inhibitory activity
EP2953960A1 (en) * 2013-02-06 2015-12-16 Bristol-Myers Squibb Company C-19 modified triterpenoids with hiv maturation inhibitory activity

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009020732A1 (en) * 2007-08-03 2009-02-12 Advanced Life Sciences, Inc. Lupane-type triterpenoids modified at 30-position and analogues thereof
WO2009100532A1 (en) * 2008-02-14 2009-08-20 Virochem Pharma Inc. NOVEL 17ß LUPANE DERIVATIVES
WO2011153319A1 (en) * 2010-06-04 2011-12-08 Bristol-Myers Squibb Company C-28 amides of modified c-3 betulinic acid derivatives as hiv maturation inhibitors
WO2011153315A1 (en) * 2010-06-04 2011-12-08 Bristol-Myers Squibb Company Modified c-3 betulinic acid derivatives as hiv maturation inhibitors

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109153700A (zh) * 2016-02-04 2019-01-04 Viiv保健英国第五有限公司 作为hiv-1抑制剂的c-3和c-17修饰的三萜类化合物
TWI719126B (zh) * 2016-02-04 2021-02-21 英商Ｖｉｉｖ醫療保健英國(Ｎｏ 5)有限公司 作為hiv-1抑制劑之c-3及c-17改質三萜系化合物
CN109153700B (zh) * 2016-02-04 2021-03-09 Viiv保健英国第五有限公司 作为hiv-1抑制剂的c-3和c-17修饰的三萜类化合物
CN106905264A (zh) * 2017-04-12 2017-06-30 连云港杰瑞药业有限公司 一种合成阿扎拉韦中间体的方法
CN106905264B (zh) * 2017-04-12 2019-06-07 连云港杰瑞药业有限公司 一种合成阿扎拉韦中间体的方法

Also Published As

Publication number Publication date
WO2013123019A1 (en) 2013-08-22
AR089996A1 (es) 2014-10-01
HK1204608A1 (zh) 2015-11-27
US8906889B2 (en) 2014-12-09
PT2814834T (pt) 2017-12-06
NZ631408A (en) 2015-06-26
BR112014019672A2 (zh) 2017-06-20
SG11201404748XA (en) 2014-09-26
EP2814834B1 (en) 2017-09-13
BR112014019672A8 (pt) 2017-07-11
EP2814834A1 (en) 2014-12-24
MX2014009235A (es) 2014-11-10
CN106046106A (zh) 2016-10-26
UY34627A (es) 2013-09-02
CA2864656A1 (en) 2013-08-22
AU2013221725A1 (en) 2014-10-02
CN104220451B (zh) 2016-06-29
JP6155285B2 (ja) 2017-06-28
IL234077A (en) 2016-11-30
US20130210787A1 (en) 2013-08-15
EA024361B1 (ru) 2016-09-30
AU2013221725B2 (en) 2016-10-27
TW201336863A (zh) 2013-09-16
JP2015510515A (ja) 2015-04-09
KR20140123584A (ko) 2014-10-22
MY166793A (en) 2018-07-23
ES2656984T3 (es) 2018-03-01
EA201491531A1 (ru) 2014-11-28
CL2014002141A1 (es) 2014-10-03
PE20142315A1 (es) 2015-01-16
IL234077A0 (en) 2014-09-30
PH12014501816A1 (en) 2014-11-17
CO7061077A2 (es) 2014-09-19
ZA201406724B (en) 2016-08-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104220451B (zh) 具有hiv成熟抑制活性的c-3环烯三萜类化合物
CN103429607B (zh) 具有hiv成熟抑制活性的c-17和c-3经修饰的三萜系化合物
CN103339141B (zh) 作为hiv成熟抑制剂的c-3修饰的桦木酸衍生物的c-28胺
CN105102468A (zh) 用于治疗hiv的c-3烷基和烯基修饰的桦木酸衍生物
TWI659964B (zh) 具有ｈｉｖ成熟抑制活性之三萜化合物
CN105121454A (zh) 具有hiv成熟抑制活性的c-19经修饰的三萜类化合物
CN103038245A (zh) 作为hiv成熟抑制剂的c-3经修饰的桦木酸衍生物
CN102985438A (zh) 作为hiv成熟抑制剂的经修饰c-3桦木酸衍生物的c-28酰胺
JP2017533937A (ja) オキソルペン誘導体
JP6620149B2 (ja) 拡張ベツリン酸類似体

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20180521

Address after: The Middlesex County

Patentee after: Health UK fifth Limited

Address before: new jersey

Patentee before: Squibb Bristol Myers Co.

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20160629

Termination date: 20200213