CN105121454A - 具有hiv成熟抑制活性的c-19经修饰的三萜类化合物 - Google Patents
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Abstract
本发明描述具有药物和生物作用性质的化合物、其药物组合物和使用方法。具体而言,得到具有独特抗病毒活性的C-19经修饰类三萜化合物作为HIV成熟抑制剂,如由式I和式II的化合物代表:
Description
相关申请的交叉引用
本申请要求2013年2月6日提出申请的第61/761,403号美国临时申请的优先权,该临时申请以引用方式并入本文中。
技术领域
本发明涉及可用于抗HIV的新颖化合物,且更具体而言涉及可用作HIV成熟抑制剂的衍生自桦木酸的化合物和其它结构相关化合物,涉及含有这些化合物的药物组合物以及其制备方法。
现有技术
HIV-1(人类免疫缺陷病毒-1)感染仍是主要医学问题,且在2010年底世界范围内估计有45-50百万人感染。HIV及AIDS(获得性免疫缺陷综合症)的病例数已迅速增长。2005年报导约5.0百万新感染病例,且3.1百万人死于AIDS。当前用于治疗HIV的可用药物包括核苷逆转录酶(RT)抑制剂或已批准的单一药丸组合:齐多夫定(或AZT或立妥威)、去羟肌苷(或惠妥滋)、司他夫定(或赛瑞特)、拉米夫定(或3TC或益平维)、扎西他滨(或DDC或赫韦德)、琥珀酸阿巴卡韦(abacavirsuccinate)(或济而刚)、替诺福韦酯富马酸盐(Tenofovirdisoproxilfumaratesalt)(或惠立妥)、恩曲他滨(或FTC-依米特瓦)、卡贝兹(含有-3TC和AZT)、三协唯(含有阿巴卡韦、拉米夫定及齐多夫定)、恩普替康(含有阿巴卡韦和拉米夫定)、特鲁瓦达(含有及);非核苷逆转录酶抑制剂:奈韦拉平(或维乐命)、地拉韦啶(或瑞斯瑞普特)及依法韦仑(或萨斯迪瓦)、阿托普拉 及依曲韦林;拟肽蛋白酶抑制剂或已批准的制剂:沙奎那韦、茚地那韦、利托那韦、奈非那韦、安普那韦、洛匹那韦、快利佳(洛匹那韦和利托那韦)、地瑞那韦、阿扎那韦(瑞塔滋)及替拉那韦(捷伏滋)及可比西他(cobicistat);整合酶抑制剂诸如雷特格韦(宜升瑞);和进入抑制剂诸如恩夫韦地(T-20)(福艾)和马拉维若(塞恩瑞)。
单独使用这些药物的一种只能暂时抑制病毒的复制。然而,当联合使用时,这些药物对病毒血症及疾病进展具有显著影响。实际上,近年来已报道AIDS患者死亡率的显著降低是联合疗法广泛应用的结果。然而,尽管有这些骄人的结果,但联合药物疗法对30%至50%的患者最终可能失败。敏感病毒的不完全抑制可能归因于药物效能不足、无依从性、有限的组织穿透性及药物特异性限制于某些细胞类型(例如,大多数核苷类似物不能在静止细胞中磷酸化)。此外,HIV-1的高复制速率和快速转换再加上突变种的频繁参入导致在次佳药物浓度时产生耐药性变体和治疗失败。因此,需要具有不同耐药模式、良好的药代动力学以及安全性的新颖抗HIV剂,以提供更多的治疗选择。改进的HIV融合抑制剂和HIV进入辅助受体拮抗剂是许多研究者正进一步研究的新型抗HIV剂的两个实例。
HIV粘附抑制剂是抗病毒化合物的又一子类,其结合于HIV表面糖蛋白gp120,干扰表面蛋白gp120与宿主细胞受体CD4之间的相互作用。因此,其阻止HIV粘附于人类CD4T细胞,阻断HIV生命周期的第一阶段中的HIV复制。HIV粘附抑制剂的性质已经得到改进,以获得具有最大效用和功效的抗病毒化合物。具体而言,US7,354,924及US7,745,625说明了HIV粘附抑制剂。
用于治疗HIV的另一类新兴的化合物称为HIV成熟抑制剂。成熟是在HIV复制或HIV生命周期中的多达10个或更多步骤中的最后一步,其中由于gag蛋白中的若干HIV蛋白酶介导的裂解事件最终导致衣壳(CA)蛋白的释放而使HIV具有传染性。成熟抑制剂阻止HIV衣壳正确组装及成熟,阻止形成保护性外层,或阻止摆脱人类细胞。相反,产生非感染性病毒,从而阻止HIV感染的后续周期。
现已证明桦木酸的某些衍生物具有强的作为HIV成熟抑制剂的抗HIV活性。例如,US7,365,221公开了单酰化的桦木醇和二氢桦木醇衍生物及其作为抗HIV剂的用途。如在‘221参考文献中所论述,用某些取代的酰基,例如3’,3’-二甲基戊二酰基及3’,3’-二甲基琥珀酰基,对桦木酸(1)进行酯化,产生具有增强活性的衍生物(Kashiwada,Y.等人,J.Med.Chem.39:1016-1017(1996))。高效抗-HIV药物酰化的桦木酸和二氢桦木酸衍生物亦描述于第5,679,828号美国专利中。用琥珀酸对桦脑3位碳上的羟基进行酯化亦可得到能够抑制HIV-1活性的化合物(Pokrovskii,A.G.等人,KhimiyayInteresakhUstoichiVogoRazvitiya,第9卷,第3册,第485页至第491页(2001))。
用衍生自桦木酸的化合物治疗HIV感染的用途的其它参考文献包括US2005/0239748、US2008/0207573以及WO2006/053255、WO2009/100532和WO2011/007230。
已将研发中的一种HIV成熟化合物确定为贝韦立马(Bevirimat)或PA-457,其化学式为C36H56O6,IUPAC名称为3β-(3-羧基-3-甲基-丁酰氧基)羽扇豆-20(29)-烯-28-羧酸。
本文亦参考以下申请:由Bristol-MyersSquibb于2011年6月2日提交的标题为“MODIFIEDC-3BETULINICACIDDERIVATIVESASHIVMATURATIONINHIBITORS”USSN13/151,706的申请(现为US2012-0142707)及2011年6月2日提交的标题为“C-28AMIDESOFMODIFIEDC-3BETULINICACIDDERIVATIVESASHIVMATURATIONINHIBITORS”USSN13/151,722的申请(现为US2012-0142653)。亦参考2012年1月27日提交的标题为“C-28AMINESOFC-3MODIFIEDBETULINICACIDDERIVATIVESASHIVMATURATIONINHIBITORS”USSN13/359,680的申请(现为U.S.2013-0029954)。另外,亦参考2012年1月27日提交的标题为“C-17ANDC-3MODIFIEDTRITERPENOIDSWITHHIVMATURATIONINHIBITORYACTIVITY”USSN13/359,727的申请(现为U.S.2013-0035318)及2013年3月13日提交的标题“C-17BICYCLICAMINESOFTRITERPENOIDSWITHHIVMATURATIONINHIBITORYACTIVITY”,USSN13/799,479的申请(现为U.S.2013-0296554)。
现在本领域需要的是可用作HIV成熟抑制剂的新化合物以及含有这些化合物的新的药物组合物。
发明概述
本发明提供下式I和式II的化合物(包括其可药用盐)、其药物组合物和其在遭受病毒(例如HIV)或对其敏感的患者中的用途。式I和式II的化合物是有效抗病毒剂,尤其作为HIV抑制剂。其可用于治疗HIV和AIDS。
本发明的一种实施方案是涉及化合物,包括其可药用盐,其选自:
式I化合物
式II化合物
其中X选自:苯基、杂芳基环、C4-8环烷基、C4-8环烯基、C4-9螺环烷基、C4-9螺环烯基、C4-8氧杂环烷基、C4-8二氧杂环烷基、C6-8氧杂环烯基、C6-8二氧杂环烯基、C6环二烯基、C6氧杂环二烯基、C6-9氧杂螺环烷基和C6-9氧杂螺环烯基环;
并且进一步其中X被A取代,其中A是至少一个选自以下的成员:-H、-卤素、-羟基、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、-C1-6烷基-Q1、-被烷基取代的C1-6烷基-Q1、-CN、-CF2Q1、-NR2R2、-COOR2和-CONR2R2;
其中Q1选自:芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-OR2、-COOR3、-NR2R2、-SO2R7、-CONHSO2R3和-CONHSO2NR2R2;
Y选自:-COOR2、-C(O)NR2SO2R3、-C(O)NHSO2NR2R2、-NR2SO2R2、-SO2NR2R2、-C3-6环烷基-COOR2、-C2-6烯基-COOR2、-C2-6炔基-COOR2、-C1-6烷基-COOR2、-被烷基取代的C1-6烷基、-COOR2、CF2-COOR2、-NHC(O)(CH2)n-COOR2、-SO2NR2C(O)R2、-四唑和-CONHOH,
其中n=1至6;
R1选自:
W不存在或是-CH2或-CO;
Z选自:-NR28R29、-OR30、-COOR2、-CONR18R19、F、Cl、Br和I;
U选自:-NR28R29、-OR30、-COOR2、-CONR18R19、F、Cl、Br、I、芳基和杂芳基;
R2选自:-H、苄基、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基和-被芳基取代的C1-6烷基;
R3是苄基、-C1-6烷基或-被烷基取代的C1-6烷基;
R4选自:-H、-C1-6烷基、-C1-6烷基-C(OR3)2-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-C3-6环烷基、-C1-6烷基-Q2、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q2、芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-COR6、-COCOR6、-SO2R7、-SO2NR2R2、
其中Q2选自:杂芳基、被取代的杂芳基、F、Cl、Br、I、-CF3、-OR2、-COOR2、-NR8R9、-CONR10R11和-SO2R7;
R5选自:-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-被C1-6烷基取代的烷基、-C1-6烷基-NR8R9、-COR6、-COCOR6、-SO2R7和-SO2NR2R2;
条件是当W是CO时,R4或R5不能是-COR6或-COCOR6;
另一条件是R4或R5中只有一个可选自-COR6、-COCOR6、-SO2R7和-SO2NR2R2;
或当W不存在或是CH2时,则R4和R5可连同毗邻N一起形成
R6选自:-C1-6烷基、-被C1-6烷基取代的烷基、-C3-6环烷基、-C3-6被取代的环烷基-Q3、-C1-6烷基-Q3、-被C1-6烷基-取代的烷基-Q3、-C3-6环烷基-Q3、芳基-Q3、-NR13R14和-OR15;
其中Q3选自:芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-OR2、-COOR2、-NR8R9、SO2R7、-CONHSO2R3和-CONHSO2NR2R2;
R7选自:-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C3-6环烷基、-CF3、芳基和杂芳基;
R8和R9独立地选自:-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、芳基、杂芳基、被取代的芳基、被取代的杂芳基和-C1-6烷基-Q2;
R8也可以是-COOR3;
R8和R9也可独立地选自:
或R8和R9连同毗邻N一起形成选自如下的环:
V选自:-CR24R25、-SO2、-O和-NR12;
M选自:-CHR24R25、-NR26R27、-SO2R7、-SO2NR3R3和-OH;
R10和R11独立地选自:-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基和-C3-6环烷基,
或R10和R11连同毗邻N一起形成环,例如
R12选自:-C1-6烷基、-C1-6烷基-OH;-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C3-6环烷基、-COR7、-COONR18R19、-SOR7和-SONR20R21;
R13和R14独立地选自:-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q4、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q4、C1-6被取代的烷基-Q4和
或R13和R14连同毗邻N一起形成选自如下的环:
R15选自:-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q4、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q4和-C1-6被取代的烷基-Q4;
Q4选自:杂芳基、被取代的杂芳基、-NR2R2、-CONR2R2、-COOR2、-OR2和-SO2R3;
R16选自:-H、-C1-6烷基、-NR2R2和-COOR3;
R17选自:-H、-C1-6烷基、-COOR3和芳基;
R18和R19独立地选自:H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基和-C1-6环烷基;
R18也可以是-COOR3;
或R18和R19连同毗邻N一起形成选自如下的环:
R20和R21独立地选自:H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q5、-C1-6环烷基、芳基、被取代的芳基、杂芳基和被取代的杂芳基,
Q5选自卤素和SO2R3;
R24和R25选自:-H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基、-SO2R3、-SO2NR2R2或-OH、-NR2R2、-NR2SO2R3、-NR2COR3和-NR2CONR2R2;
条件是R24和R25中只有一个可选自:-OH、-NR2R2、-NR2SO2R3、-NR2COR3和-NR2CONR2R2;
R26和R27独立地选自:-H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基、-C1-3烷基芳基、C1-3烷基杂芳基、-CO2R2和-SO2R7;
条件是R26和R27中只有一个可选自-CO2R2或-SO2R7;
R28和R29独立地选自:-H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6烷基-Q6、-COC1-6烷基-Q6、-COOR3;-COCF3;
R28也可选自-COOR3和-CONR18R19;
或R28和R29连同毗邻N一起形成选自如下的环:
R30选自:H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基、-C3-6环烷基和-C1-6烷基-Q6;
其中Q6选自:H、-OR2、-COOR2、-COCOOR2、-NR31R32;
R31和R32独立地选自:-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6被取代的烷基-OR2和-COR3,
或R31和R32连同毗邻N一起形成选自如下的环:
R33选自:-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基和-C1-6被取代的烷基-Q7,
其中Q7选自-COOR2和-COONR2R2。
在进一步的实施方案中,本发明提供用于治疗病毒感染、尤其其中该病毒是HIV的哺乳动物的方法,其包括给该哺乳动物施用抗病毒有效量的选自上文式I和式II的化合物,和一种或多种可药用载剂、赋形剂或稀释剂。任选地,可将式I和/或式II化合物与抗病毒有效量的另一AIDS治疗剂组合施用,该另一AIDS治疗剂选自:(a)AIDS抗病毒剂;(b)抗感染剂;(c)免疫调节剂;和(d)其它HIV进入抑制剂。
本发明的另一实施方案是药物组合物,其包含抗病毒有效量的选自式I和式II的化合物和一种或多种可药用载剂、赋形剂和稀释剂;且任选与抗病毒有效量的另一AIDS治疗剂组合,该另一AIDS治疗剂选自:(a)AIDS抗病毒剂;(b)抗感染剂;(c)免疫调节剂;和(d)其它HIV进入抑制剂。
在本发明的另一实施方案中,本发明提供一种或多种用于制备本文式I和式II的化合物的方法。
本文也提供可用于制备本文式I和式II的化合物的中间化合物。
本发明涉及这些实施方案以及下文描述的其它重要方案。
实施方案详述
由于本发明化合物可具有不对称中心,因此作为非对映异构体和对映异构体的混合物存在,除其混合物以外,本发明也包括式I和式II的化合物的单一非对映异构体和对映异构体形式。
定义
在申请中除非其它地方另外明确说明,否则在本文可使用以下术语中的一个或多个,并具有以下含义:
“H”是指氢,包括其同位素,例如氘。
本文和权利要求中所用的术语“C1-6烷基”(除非另有说明)意指直链或支链烷基,例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基等。
“C1-C4氟烷基”是指被F取代的C1-C4烷基,其中至少一个H原子被F原子替代,且每一H原子可独立地被F原子替代;
“卤素”是指氯、溴、碘或氟。
“芳基”或“Ar”基团是指具有完全共轭π电子体系的全碳单环或稠合多环(即,共享毗邻碳原子对的环)基团。芳基的实例是(但不限于)苯基、萘基和蒽基。芳基是可被取代的或未被取代的。当被取代时,取代基优选选自以下中的一个或多个:烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂脂环基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂脂环氧基、硫醇基、硫代芳氧基、硫代杂芳氧基、硫代杂脂环氧基、氰基、卤素、硝基、羰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、C-酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲基、脲基、氨基和-NRxRy,其中Rx和Ry独立地选自:氢、烷基、环烷基、芳基、羰基、C-羧基、磺酰基、三卤代甲基,且其组合时为五或六元杂脂环族环。
本文所用“杂芳基”是指除了具有完全共轭π电子体系外,在环中具有一或多个选自氮、氧和硫的原子的单环或稠合环(即,共享毗邻原子对的环)基团。除非另外表明,否则杂芳基可在杂芳基内的碳或氮原子处连接。应注意,术语杂芳基意欲涵盖母体杂芳基的N-氧化物,如果本领域已知该N-氧化物化学上是可行的。杂芳基的实例是(但不限于)呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、噻唑基、咪唑基、噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、苯并噻唑基、三唑基、四唑基、异噁唑基、异噻唑基、吡咯基、吡喃基、四氢吡喃基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、嘌呤基、咔唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、吲哚基、异吲哚基、吡嗪基、二嗪基、吡嗪、三嗪基、四嗪基和四唑基。当被取代时,取代基优选选自以下中的一个或多个:烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂脂环基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂脂环氧基、硫代烷氧基、硫醇基、硫代芳氧基、硫代杂芳氧基、硫代杂脂环氧基、氰基、卤素、硝基、羰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、C-酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲基、脲基、氨基和-NRxRy,其中Rx和Ry如上所定义。
本文所用“杂脂环基”是指在环中具有一或多个选自氮、氧和硫的原子的单环或稠合环基团。环是选自提供稳定键布置的那些且并不意欲涵盖将不存在的体系。所述环也可具有一或多个双键。然而,所述环不具有完全共轭π电子体系。杂脂环基的实例是(但不限于)氮杂环丁基、哌啶基、哌嗪基、咪唑啉基、噻唑烷基、3-吡咯烷-1-基、吗啉基、硫代吗啉基和四氢吡喃基。当被取代时,取代基优选是选自以下中的一个或多个:烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂脂环基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂脂环氧基、硫醇基、硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代杂芳氧基、硫代杂脂环氧基、氰基、卤素、硝基、羰基、硫羰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、O-硫代氨基甲酰基、N-硫代氨基甲酰基、C-酰氨基、C-硫代酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲磺酰氨基、三卤代甲磺酰基、甲硅烷基、脒基、胍基、脲基、膦酰基、氨基和-NRxRy,其中Rx和Ry如上所定义。
“烷基”是指包含直链和支链基团的饱和脂肪族烃。优选地,烷基具有1至20个碳原子(无论数值范围如何;例如,本文所述“1-20”意指基团,在此情形下烷基可含有1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等,直至并包括20个碳原子)。更优选地,其是具有1至10个碳原子的中等大小的烷基。更优选地,其是具有1至4个碳原子的低级烷基。所述烷基可以是被取代的或未被取代的。当被取代时,取代基优选是各自选自以下中的一个或多个:三卤代烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂脂环基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂脂环氧基、硫醇基、硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代杂芳氧基、硫代杂脂环氧基、氰基、卤素、硝基、羰基、硫羰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、O-硫代氨基甲酰基、N-硫代氨基甲酰基、C-酰氨基、C-硫代酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲磺酰氨基、三卤代甲磺酰基,且其组合时为五元或六元杂脂环族环。
“环烷基”是指所有碳单环或稠合环(即共享毗邻碳原子对的环)基团,其中一或多个环不具有完全共轭π电子体系。环烷基的实例是(但不限于)环丙烷、环丁烷、环戊烷、环戊烯、环己烷、环己烯、环庚烷、环庚烯和金刚烷。环烷基可以是被取代的或未被取代的。当被取代时,取代基优选是个别地选自以下中的一个或多个:烷基、芳基、杂芳基、杂脂环基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、杂脂环氧基、硫醇基、硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代杂芳氧基、硫代杂脂环氧基、氰基、卤素、硝基、羰基、硫羰基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、O-硫代氨基甲酰基、N-硫代氨基甲酰基、C-酰氨基、C-硫代酰氨基、N-酰氨基、C-羧基、O-羧基、亚磺酰基、磺酰基、磺酰氨基、三卤代甲磺酰氨基、三卤代甲磺酰基、甲硅烷基、脒基、胍基、脲基、膦酰基、氨基和-NRxRy,且Rx和Ry如上所定义。
“烯基”是指如本文所定义的具有至少两个碳原子和至少一个碳-碳双键的烷基。
“炔基”是指如本文所定义的具有至少两个碳原子和至少一个碳-碳三键的烷基。
“羟基”是指-OH基团。
“烷氧基”是指如本文所定义的-O-烷基与-O-环烷基两者。
“芳氧基”是指如本文所定义的-O-芳基与-O-杂芳基两者。
“杂芳氧基”是指杂芳基-O-基团,且杂芳基如本文所定义。
“杂脂环氧基”是指杂脂环基-O-基团,且杂脂环基如本文所定义。
“硫醇基”是指-SH基团。
“硫代烷氧基”是指如本文所定义的S-烷基与-S-环烷基两者。
“硫代芳氧基”是指如本文所定义的-S-芳基与-S-杂芳基两者。
“硫代杂芳氧基”是指杂芳基-S-基团,且杂芳基如本文所定义。
“硫代杂脂环氧基”是指杂脂环基-S-基团,且杂脂环基如本文所定义。
“羰基”是指-C(=O)-R”基团,其中R”选自:氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基(经由环碳键接)和杂脂环基(经由环碳键接),每一个均如本文所定义。
“醛”基团是指R”是氢的羰基。
“硫羰基”是指-C(=S)-R”基团,其中R”如本文所定义。
“酮”基团是指-CC(=O)C-基团,其中在C=O的任一侧或两侧的碳可是烷基、环烷基、芳基或杂芳基或杂脂环基的碳。
“三卤代甲基羰基”是指Z3CC(=O)-基团且该Z是卤素。
“C-羧基”是指-C(=O)O-R”基团,其中R”如本文所定义。
“O-羧基”是指R”C(-O)O-基团,其中R”如本文所定义。
“羧酸”基团是指R”是氢的C-羧基。
“三卤代甲基”是指-CZ3基团,其中Z是如本文所定义的卤素。
“三卤代甲磺酰基”是指Z3CS(=O)2-基团,且Z如上所定义。
“三卤代甲磺酰氨基”是指Z3CS(=O)2NRx-基团,其中Z如上所定义且Rx是H或(C1-6)烷基。
“亚磺酰基”是指-S(=O)-R”基团,其中R”是(C1-6)烷基。
“磺酰基”是指-S(=O)2R”基团,其中R”是(C1-6)烷基。
“S-磺酰氨基”是指-S(=O)2NRXRY,其中RX和RY独立地是H或(C1-6)烷基。
“N-磺酰氨基”是指R”S(=O)2NRX-基团,其中Rx是H或(C1-6)烷基。
“O-氨基甲酰基”是指-OC(=O)NRxRy基团,其中RX和RY独立地是H或(C1-6)烷基。
“N-氨基甲酰基”是指RxOC(=O)NRy基团,其中Rx和Ry独立地是H或(C1-6)烷基。
“O-硫代氨基甲酰基”是指-OC(=S)NRxRy基团,其中Rx和Ry独立地是H或(C1-6)烷基。
“N-硫代氨基甲酰基”是指RxOC(=S)NRy-基团,其中Rx和Ry独立地是H或(C1-6)烷基。
“氨基”是指-NH2基团。
“C-酰氨基”是指-C(=O)NRxRy基团,其中Rx和Ry独立地是H或(C1-6)烷基。
“C-硫代酰氨基”是指-C(=S)NRxRy基团,其中Rx和Ry独立地是H或(C1-6)烷基。
“N-酰氨基”是指RxC(=O)NRy-基团,其中Rx和Ry独立地是H或(C1-6)烷基。
“脲基”是指-NRxC(=O)NRyRy2基团,其中Rx、Ry和Ry2独立地是H或(C1-6)烷基。
“胍基”是指-RxNC(=N)NRyRy2基团,其中Rx、Ry和Ry2独立地是H或(C1-6)烷基。
“脒基”是指RxRyNC(=N)-基团,其中Rx和Ry独立地是H或(C1-6)烷基。
“氰基”是指-CN基团。
“甲硅烷基”是指-Si(R”)3,其中R”是(C1-6)烷基或苯基。
“膦酰基”是指P(=O)(ORx)2,其中Rx是(C1-6)烷基。
“肼基”是指-NRxNRyRy2基团,其中Rx、Ry和Ry2独立地是H或(C1-6)烷基。
“4、5或6元环状N-内酰胺”基团是指
任两个毗邻R基团可组合以形成与初始具有那些R基团的环稠合的另一芳基、环烷基、杂芳基或杂环。
本领域已知杂芳基体系中的氮原子可“参与杂芳基环双键”,且此是指在包含五元环杂芳基的两个互变异构结构中的双键形式。此指示氮是否可如本领域化学家所了解被取代的。本申请和本申请的权利要求是基于化学键接的已知一般原理。应理解,申请权利要求不涵盖基于文献已知不稳定或不能存在的结构。
本文所公开化合物的可药用盐和前药是在本发明的范围内。本文和权利要求中所用的术语“可药用盐”意欲包括无毒碱加成盐。合适的盐包括衍生自有机酸和无机酸的那些,例如(但不限于)盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸、甲磺酸、乙酸、酒石酸、乳酸、亚磺酸、柠檬酸、马来酸、富马酸、山梨酸、乌头酸、水杨酸、邻苯二甲酸等。本文所用术语“可药用盐”亦意欲包括酸性基团(例如羧酸根)与例如铵、碱金属盐(尤其钠或钾)、碱土金属盐(尤其钙或镁)等抗衡离子的盐,和与适宜有机碱(例如低级烷基胺(甲胺、乙胺、环己胺等)或被取代的低级烷基胺(例如被羟基取代的烷基胺,例如二乙醇胺、三乙醇胺或三(羟基甲基)-氨基甲烷)或与例如哌啶或吗啉等碱的盐。
如上所述,本发明化合物亦包括“前药”。本文所用术语“前药”涵盖术语“前药酯”和术语“前药醚”二者。
术语“C-19”和“C-3”是指按照IUPAC规则编号的三萜核心的某些位置(下文针对示例性三萜:桦脑标出的位置):
如上文所述,本发明涉及化合物,包括其可药用盐,其选自:
式I化合物
式II化合物
其中X选自:苯基、杂芳基环、C4-8环烷基、C4-8环烯基、C4-9螺环烷基、C4-9螺环烯基、C4-8氧杂环烷基、C4-8二氧杂环烷基、C6-8氧杂环烯基、C6-8二氧杂环烯基、C6环二烯基、C6氧杂环二烯基、C6-9氧杂螺环烷基和C6-9氧杂螺环烯基环;
且进一步其中X被A取代,其中A是至少一个选自如下的成员:-H、-卤素、-羟基、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、-C1-6烷基-Q1、-被烷基取代的C1-6烷基-Q1、-CN、-CF2Q1、-NR2R2、-COOR2和-CONR2R2;
其中Q1选自:芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-OR2、-COOR3、-NR2R2、-SO2R7、-CONHSO2R3和-CONHSO2NR2R2;
Y选自:-COOR2、-C(O)NR2SO2R3、-C(O)NHSO2NR2R2、-NR2SO2R2、-SO2NR2R2、-C3-6环烷基-COOR2、-C2-6烯基-COOR2、-C2-6炔基-COOR2、-C1-6烷基-COOR2、-被烷基取代的C1-6烷基、-COOR2、CF2-COOR2、-NHC(O)(CH2)n-COOR2、-SO2NR2C(O)R2、-四唑和-CONHOH,
其中n=1至6;
R1选自:
W不存在或是-CH2或-CO;
Z选自:-NR28R29、-OR30、-COOR2、-CONR18R19、F、Cl、Br和I;
U选自:-NR28R29、-OR30、-COOR2、-CONR18R19、F、Cl、Br、I、芳基和杂芳基;
R2选自:-H、苄基、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基和-被芳基取代的C1-6烷基;
R3是苄基、-C1-6烷基或-被烷基取代的C1-6烷基;
R4选自:-H、-C1-6烷基、-C1-6烷基-C(OR3)2-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-C3-6环烷基、-C1-6烷基-Q2、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q2、芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-COR6、-COCOR6、-SO2R7、-SO2NR2R2、
其中Q2选自:杂芳基、被取代的杂芳基、F、Cl、Br、I、-CF3、-OR2、-COOR2、-NR8R9、-CONR10R11和-SO2R7;
R5选自:-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-被C1-6烷基取代的烷基、-C1-6烷基-NR8R9、-COR6、-COCOR6、-SO2R7和-SO2NR2R2;
条件是当W是CO时,R4或R5不能是COR6或COCOR6;
另一条件是R4或R5中只有一个可选自:-COR6、-COCOR6、-SO2R7和-SO2NR2R2;
或当W不存在或是CH2时,则R4和R5可连同毗邻N一起形成
R6选自:-C1-6烷基、-被C1-6烷基-取代的烷基、-C3-6环烷基、-C3-6被取代的环烷基-Q3、-C1-6烷基-Q3、-被C1-6烷基-取代的烷基-Q3、-C3-6环烷基-Q3、芳基-Q3、-NR13R14和-OR15;
其中Q3选自:芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-OR2、-COOR2、-NR8R9、SO2R7、-CONHSO2R3和-CONHSO2NR2R2;
R7选自:-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C3-6环烷基、-CF3、芳基和杂芳基;
R8和R9独立地选自:-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、芳基、杂芳基、被取代的芳基、被取代的杂芳基、-C1-6烷基-Q2和-COOR3;
R8也可以是-COOR3;
R8和R9也可独立地选自:
或R8和R9连同毗邻N一起形成选自如下的环:
V选自:-CR24R25、-SO2、-O和-NR12;
M选自:-CHR24R25、-NR26R27、-SO2R7、-SO2NR3R3和-OH;
R10和R11独立地选自:-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基和-C3-6环烷基,
或R10和R11连同毗邻N一起形成环,例如
R12选自:-C1-6烷基、-C1-6烷基-OH;-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C3-6环烷基、-COR7、-COONR18R19、-SOR7和-SONR20R21;
R13和R14独立地选自:-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q4、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q4、C1-6被取代的烷基-Q4和
或R13和R14连同毗邻N一起形成选自如下的环:
R15选自:-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q4、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q4和-C1-6被取代的烷基-Q4;
Q4选自:杂芳基、被取代的杂芳基、-NR2R2、-CONR2R2、-COOR2、-OR2和-SO2R3;
R16选自:-H、-C1-6烷基、-NR2R2和-COOR3;
R17选自:-H、-C1-6烷基、-COOR3和芳基;
R18和R19独立地选自:H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基和-C1-6环烷基;
R18也可以是-COOR3;
或R18和R19连同毗邻N一起形成选自如下的环:
R20和R21独立地选自:H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q5、-C1-6环烷基、芳基、被取代的芳基、杂芳基和被取代的杂芳基,
Q5选自:卤素和SO2R3;
R24和R25独立地选自:-H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基、-SO2R3、-SO2NR2R2或-OH、-NR2R2、-NR2SO2R3、-NR2COR3和-NR2CONR2R2;
条件是R24和R25中只有一个可选自:-OH、-NR2R2、-NR2SO2R3、-NR2COR3和-NR2CONR2R2;
R26和R27独立地选自:-H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基、-C1-3烷基芳基、C1-3烷基杂芳基、-CO2R2和-SO2R7;
条件是R26和R27中只有一个可选自:-CO2R2或-SO2R7;
R28和R29独立地选自:H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6烷基-Q6、-COC1-6烷基-Q6、-COOR3;-COCF3;
R28也可选自-COOR3和-CONR18R19;
或R28和R29连同毗邻N一起形成选自如下的环:
R30选自:H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基、-C3-6环烷基和-C1-6烷基-Q6;
其中Q6选自:H、-OR2、-COOR2、-COCOOR2和-NR31R32;
R31和R32独立地选自:-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6被取代的烷基-OR2和-COR3,
或R31和R32连同毗邻N一起形成选自如下的环:
R33选自:-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基和-C1-6被取代的烷基-Q7,
其中Q7选自-COOR2和-COONR2R2。
特别是,其中X是苯基的式I和II的化合物是优选的。
其中A是-H或卤素,特别是-F,的化合物也是优选的。
其它优选的是Y是-COOR2的化合物。R2是-H也是优选的。
还优选选自如下的化合物,包括其可药用盐:
根据上文描述的所有不同的实施方案,本发明化合物可经口、非肠道(包括皮下注射、静脉内、肌内、胸骨内注射或输注技术)、通过吸入喷雾或通过直肠和其它方式,以含有对本领域普通技术人员而言可用的无毒可药用载体、赋形剂和稀释剂的剂量单位形式施用。也可包括一种或多种佐剂。
因此,本发明进一步提供用于治疗病毒感染例如HIV感染和AIDS的治疗方法和药物组合物。该治疗包括向需要该治疗的患者施用含有抗病毒有效量的一种或多种式I和式II的化合物和一种或多种可药用载剂、赋形剂或稀释剂的药物组合物。本文所用术语“抗病毒有效量”意指足以显示有意义的患者益处,即以抑制HIV感染为特征的抑制、减轻或治愈急性病况的所述组合物和方法的每一活性组份的总量。当向个体施用单独施用的活性成份时,该术语是指此单独活性成份。当组合施用时,该术语是指产生治疗效果的活性成份的组合量,不论是组合、序贯或同时施用。本文和权利要求中所用的术语”治疗(treat、treating、treatment)”意指预防、减轻或治愈与HIV感染相关的疾病。
本发明的药物组合物可以是口服施用的悬浮液或片剂、以及鼻喷雾、无菌可注射制剂,例如作为无菌可注射水性或油性悬浮液,或栓剂的形式。可药用载体、赋形剂或稀释剂可用于药物组合物,并且是药物制剂技术中所用的那些。
当作为悬浮液口服施用时,根据药物制剂领域中通常已知的技术制备这些组合物,并且这些组合物可含有用于使体积增大的微晶纤维素、作为悬浮剂的海藻酸或海藻酸钠、作为粘度增强剂的甲基纤维素和本领域已知的甜味剂/矫味剂。作为速释片剂,这些组合物可含有微晶纤维素、磷酸二钙、淀粉、硬脂酸镁和乳糖和/或本领域已知的其它赋形剂、粘合剂、增量剂、崩解剂、稀释剂和润滑剂。
可根据已知技术使用适宜无毒、非肠道可接受的稀释剂或溶剂,例如甘露醇、1,3-丁二醇、水、林格氏溶液(Ringer’ssolution)或等渗氯化钠溶液,或适宜分散或润湿和悬浮剂,例如,包括合成甘油单酯或甘油二酯的无菌、温和、不挥发油,和脂肪酸,包括油酸,来配制可注射溶液或悬浮液。
本文所述的化合物可以约1mg/kg体重至100mg/kg体重的剂量范围以分开剂量通常经延长时期,例如数天、数周、数月或甚至数年,口服施用于人类。一优选剂量范围是分多剂口服约1mg/kg体重至10mg/kg体重。另一优选剂量范围是分多剂口服约1mg/kg体重至20mg/kg体重。然而,应理解,对于任一特定患者,具体剂量和给药频率可能会不同并且取决于多种因素,包括所用具体化合物的活性、该化合物的代谢稳定性和作用时间、患者年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药模式和时间、排泄速率、药物组合、具体病况的严重程度和接受治疗的主体。
本文也包括本文所述的式I和II的化合物与一种或多种可用于治疗AIDS的其它药物的组合。例如,无论在暴露前和/或暴露后的阶段,本发明化合物可有效地与有效量的AIDS抗病毒剂、免疫调节剂、抗感染剂或疫苗,例如以下非限制性表中的那些,组合施用:
抗病毒剂类
此外,本文所述的本发明化合物可与HIV进入抑制剂组合使用。这些HIV进入抑制剂的实例论述于DRUGSOFTHEFUTURE1999,24(12),第1355页至第1362页;CELL,第9卷,第243页至第246页,1999年10月29日;和DRUGDISCOVERYTODAY,第5卷,第5册,2000年5月,第183页至第194页和InhibitorsoftheentryofHIVintohostcells,Meanwell,NicholasA.;Kadow,JohnF.CurrentOpinioninDrugDiscovery&Development(2003),6(4),451-461。具体而言,这些化合物可与附着抑制剂(attachmentinhibitor)、融合抑制剂和针对CCR5或CXCR4共受体的趋化因子受体拮抗剂组合使用。HIV附着抑制剂也公开于US7,354,924和US2005/0209246中。
应理解,本申请的化合物与AIDS抗病毒剂、免疫调节剂、抗感染剂、HIV进入抑制剂或疫苗的组合的范围并不限于上表中的列示,而是原则上包括与任一可用于治疗AIDS的药物组合物的任何组合。
优选组合是用本发明化合物和HIV蛋白酶抑制剂和/或非核苷HIV逆转录酶抑制剂同时或交替治疗。所述组合中的可选第四组份是HIV逆转录酶的核苷抑制剂,例如AZT、3TC、ddC或ddI。优选的HIV蛋白酶抑制剂是(活性成份阿扎那韦)。通常每天一次施用300mg至600mg的剂量。此可与低剂量的利托那韦(50mg至500mg)共同施用。另一优选的HIV蛋白酶抑制剂是另一可用的HIV蛋白酶抑制剂是茚地那韦,其是N-(2(R)-羟基-1-(S)-茚满基)-2(R)-苯基甲基-4-(S)-羟基-5-(1-(4-(3-吡啶基-甲基)-2(S)-N’-(叔丁基甲酰氨基)-哌嗪基))-戊酰胺乙醇化物的硫酸盐并且是根据U.S.5,413,999合成的。茚地那韦通常以800mg的剂量一天3次施用。其它优选的蛋白酶抑制剂是奈非那韦和利托那韦。另一优选HIV蛋白酶抑制剂是沙奎那韦,其以600mg或1200mg的剂量每日三次(tid)施用。优选的非核苷HIV逆转录酶抑制剂包括依法韦仑。这些组合对于限制HIV感染的散布和程度可具有意想不到的效果。优选的组合包括具有以下的那些:(1)茚地那韦与依法韦仑,和任选的AZT和/或3TC和/或ddI和/或ddC;(2)茚地那韦,和AZT和/或ddI和/或ddC和/或3TC中的任一者,特别是,茚地那韦和AZT和3TC;(3)司他夫定和3TC和/或齐多夫定;(4)替诺福韦酯富马酸盐和恩曲他滨。
在这些组合中,本发明化合物与其它活性剂可单独施用或结合施用。另外,一种药物可在其它药物施用前、同时或施用后施用。
缩写:
NBS=N-溴琥珀酰亚胺
TBDMS=叔丁基二甲基甲硅烷
PTFE=聚四氟乙烯
NMO=4-甲基吗啉-N-氧化物
THF=四氢呋喃
TLC=薄层色谱
DCM=二氯甲烷
DCE=二氯乙烷
TFA=三氟乙酸
LCMS=液相色谱质谱
Prep=制备型
HPLC=高效液相色谱
DAST=(二乙基氨基)三氟化硫
TEA=三乙胺
DIPEA=N,N-二异丙基乙胺
HATU=[O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐];
DMAP=二甲基氨基吡啶
TMS=三甲基甲硅烷基
NMR=核磁共振
DPPA=二苯基磷酰基叠氮化物
AIBN=偶氮二异丁腈
TBAF=四丁基氟化铵
DMF=二甲基甲酰胺
TBTU=O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓四氟硼酸盐
min=分钟
h=小时
sat.=饱和
TEA=三乙胺
EtOAc=乙酸乙酯
TFA=三氟乙酸
PCC=氯铬酸吡啶鎓盐
TLC=薄层色谱
Tf2NPh=(三氟甲基磺酰基)甲磺酰胺
二噁烷=1,4-二噁烷
PG=保护基团
atm=大气压
mol=摩尔
mmol=毫摩尔
mg=毫克
μg=微克
μl=微升
μm=微米
mm=毫米
实施例
以下实施例说明如上文所概述的式I和II的化合物的典型合成。这些实施例仅为说明性的,并非意欲以任何方式限制本发明。所述试剂和原料都是本领域普通技术人员容易获得的。
化学
所选实施例的典型步骤和表征:
除非另有说明,否则溶剂和试剂是如自商业来源所获得直接使用,并且反应是在氮气氛下进行的。闪式色谱在硅胶60(0.040-0.063粒径;EMScience供应)上进行。用BrukerDRX-500f于500MHz下记录1HNMR光谱(或用BrukerAV400MHz、BrukerDPX-300B或VarianGemini300于300MHz下,如所述)。化学位移是相对于δTMS=0的δ标度以ppm表示。对以下溶剂中的残余质子使用以下内标:CDCl3(δH7.26)、CD3OD(δH3.30)、乙酸-d4(乙酸d4)(δH11.6,2.07)、DMSO混合物或DMSO-D6_CDCl3((H2.50和8.25)(比率75%∶25%)和DMSO-D6(δH2.50)。采用标准首字母缩写词来描述多重性模式:s(单峰)、br.s(宽单峰)、d(双重峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、m(多重峰)、b(宽峰)、app(表观)。偶合常数(J)是以赫兹(Hertz)表示。所有液相色谱(LC)数据均是在ShimadzuLC-10AS液相色谱仪上使用SPD-10AVUV-Vis检测器记录,且质谱(MS)数据是使用用于LC的MicromassPlatform以电喷雾模式测定。
LC/MS方法:
方法1
开始%B=0,最终%B=100,2分钟梯度,在100%B下保持
流速=4mL/min
波长=220nm
溶剂A=95%水、5%甲醇、10mM乙酸铵
溶剂B=5%水、95%甲醇、10mM乙酸铵
柱=XbridgeC185μm4.6×50mm
方法2
开始%B=0,最终%B=100,2分钟梯度,在100%B下保持
流速=4mL/min
波长=220nm
溶剂A=95%水、5%甲醇、10mM乙酸铵
溶剂B=5%水、95%甲醇、10mM乙酸铵
柱=PhenomenexLunaC18,5μm,3.0×50mm
方法3
开始%B=0,最终%B=100,2分钟梯度,在100%B下保持
流速=1mL/min
波长=220nm
溶剂A=95%水、5%乙腈、10mM乙酸铵
溶剂B=5%水、95%乙腈、10mM乙酸铵
柱=PhenomenexLunaC18,3μm,2.0×30mm
方法4
开始%B=0,最终%B=100,2分钟梯度,在100%B下保持
流速=1mL/min
波长=220nm
溶剂A=95%水、5%甲醇、10mM乙酸铵
溶剂B=5%水、95%甲醇、10mM乙酸铵
柱=PhenomenexLunaC18,3μm,2.0×30mm
方法5
开始%B=0,最终%B=100,2分钟梯度,在100%B下保持
流速=1mL/min
波长=220nm
溶剂A=90%水、10%甲醇、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%甲醇、0.1%TFA
柱=PhenomenexLunaC18,3μm,2.0×30mm
方法6
开始%B=0,最终%B=100,2分钟梯度,在100%B下保持
流速=1mL/min
波长=220nm
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%乙腈、90%水、0.1%TFA
柱=PhenomenexLunaC18,3μm,2.0×30mm
制备型HPLC方法:
制备型HPLC方法1
开始%B=25,最终%B=100,10分钟梯度,在100%B下保持
流速=25mL/min
溶剂A=5%MeOH-95%H2O-10mM乙酸铵
溶剂B=95%MeOH-5%H2O-10mM乙酸铵
柱=XBridgePhenyl19×100mmS5
制备型HPLC方法2
开始%B=0,最终%B=100,20分钟梯度,在100%B下保持4分钟
流速=50mL/min
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×150mm
制备型HPLC方法3
开始%B=0,最终%B=100,15分钟梯度,在100%B下保持4分钟
流速=50mL/min
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×150mm
制备型HPLC方法4
开始%B=15,最终%B=100,20分钟梯度,在100%B下保持4分钟
流速=50mL/min
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×150mm
制备型HPLC方法5
开始%B=15,最终%B=100,10分钟梯度,在100%B下保持4分钟
流速=50mL/min
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×150mm
制备型HPLC方法6
开始%B=15,最终%B=100,30分钟梯度,在100%B下保持4分钟
流速=50mL/min
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×150mm
制备型HPLC方法7
开始%B=15,最终%B=100,20分钟梯度,在100%B下保持4分钟
流速=50mL/min
溶剂A=95%水、5%乙腈、10mM乙酸铵
溶剂B=5%水、95%乙腈、10mM乙酸铵
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×150mm
制备型HPLC方法8
开始%B=15,最终%B=100,30分钟梯度,在100%B下保持15分钟
流速=50mL/min
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×150mm
制备型HPLC方法9
开始%B=25,最终%B=100,10分钟梯度,在100%B下保持
溶剂A=5%MeOH-95%H2O-10mM乙酸铵
流速=25mL/min
溶剂B=95%MeOH-5%H2O-10mM乙酸铵
柱=Waters-SunfireOBD19×100mmS5
制备型HPLC方法10
开始%B=20,最终%B=100,20分钟梯度,在100%B下保持5分钟
流速=50mL/min
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×150mm
制备型HPLC方法11
开始%B=20,最终%B=100,30分钟梯度,在100%B下保持4分钟
流速=50mL/min
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×150mm
制备型HPLC方法12
开始%B=0,最终%B=100,20分钟梯度,在100%B下保持4分钟
流速=50mL/min
溶剂A=95%水、5%乙腈、10mM乙酸铵
溶剂B=5%水、95%乙腈、10mM乙酸铵
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×150mm
制备型HPLC方法13
开始%B=0,最终%B=100,15分钟梯度,在100%B下保持4分钟
流速=50mL/min
溶剂A=95%水、5%乙腈、10mM乙酸铵
溶剂B=5%水、95%乙腈、10mM乙酸铵
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×150mm
制备型HPLC方法14
开始%B=0,最终%B=100,10分钟梯度,在100%B下保持4分钟
流速=50mL/min
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×150mm
制备型HPLC方法15
开始%B=0,最终%B=100,20分钟梯度,在100%B下保持4分钟
流速=50mL/min
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersXBfidgePhenyl,5μm,30×100mm
制备型HPLC方法16
开始%B=0,最终%B=100,30分钟梯度,在100%B下保持4分钟
流速=50mL/min
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×150mm
制备型HPLC方法17
开始%B=0,最终%B=100,30分钟梯度,在100%B下保持4分钟
流速=50mL/min
溶剂A=95%水、5%MeOH、10mM碳酸氢铵
溶剂B=5%水、95%MeOH、10mM碳酸氢铵
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×150mm
制备型HPLC方法18
开始%B=20,最终%B=60,10分钟梯度,在100%B下保持5min
流速=20mL/min
溶剂A=水-20mM乙酸铵
溶剂B=95%乙腈-5%H2O-20mM乙酸铵
柱=XBridgePhenylC1819×200mmS5
制备型HPLC方法19
开始%B=0,最终%B=100,40分钟梯度,在100%B下保持4分钟
流速=50mL/min
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×150mm
制备型HPLC方法20
开始%B=30,最终%B=100,15分钟梯度,在100%B下保持
流速=25mL/min
溶剂A=5%MeOH-95%H2O-10mM乙酸铵
溶剂B=95%MeOH-5%H2O-10mM乙酸铵
柱=XBridgePhenyl19×100mmS5
制备型HPLC方法21
开始%B=15,最终%B=90,20分钟梯度,在100%B下保持
流速=40mL/min
溶剂A=90%水-10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水-90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersSunfireC18,5μM,30×100mm
制备型HPLC方法22
开始%B=25,最终%B=90,15分钟梯度,在100%B下保持
流速=40mL/min
溶剂A=90%水-10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水-90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersSunfireC18,5μM,30×100mm
制备型HPLC方法23
开始%B=30,最终%B=100,20分钟梯度,在100%B下保持10分钟
流速=50mL/min
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×100mm
制备型HPLC方法24
开始%B=30,最终%B=100,12分钟梯度,在100%B下保持8分钟
流速=50mL/min
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersSunfireC18,5μm,30×100mm
制备型HPLC方法25
开始%B=20,最终%B=100,15分钟梯度,在100%B下保持5分钟
流速=50mL/min
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersXBridgePhenyl,5μm,30×100mm
制备型HPLC方法26
开始%B=20,最终%B=100,10分钟梯度,在100%B下保持15分钟
流速=50mL/min
溶剂A=90%水、10%乙腈、0.1%TFA
溶剂B=10%水、90%乙腈、0.1%TFA
柱=WatersXBridgePhenyl,5μm,30×100mm
关键中间体的制备:
中间体1至4可如以下反应方案中所示制备:
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-羟基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
向桦木酸(12g,26.3mmol)和碳酸钾(7.26g,52.6mmol)的DMF(150mL)悬浮液中添加苄基溴(3.28mL,27.6mmol)。将该混合物加热至60℃保持3.5h,然后将其冷却至室温。在冷却过程中开始沉淀出固体。用水(200mL)稀释该混合物并通过过滤来收集所形成固体,得到白色固体形式的标题化合物(13.92g,25.5mmol,产率97%)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.39-7.28(m,5H),5.16-5.06(m,2H),4.71(d,J=1.83Hz,1H),4.59(s,1H),3.17(ddd,J=11.44,5.65,5.49Hz,1H),3.01(td,J=10.99,4.88Hz,1H),2.27(ddd,J=12.36,3.20,3.05Hz,1H),2.21-2.13(m,1H),1.93-1.81(m,2H),1.67(s,3H),0.95(s,3H),0.93(s,3H),1.71-0.82(m,20H),0.79(s,3H),0.75(s,3H),0.74(s,3H)。
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-9-羟基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(7.1g,12.98mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中添加PCC(4.20g,19.48mmol)。搅拌5分钟后,混合物变成深绯红色。将混合物进一步搅拌5.5h。通过硅藻土/硅胶垫过滤该混合物,用二氯甲烷,然后用乙酸乙酯∶己烷的1∶1混合物洗涤该垫。在减压下浓缩滤液,得到白色泡沫状的标题化合物(6.92g,12.7mmol,产率98%)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.38-7.28(m,5H),5.17-5.06(m,2H),4.72(d,J=1.83Hz,1H),4.59(s,1H),3.01(td,J=10.99,4.88Hz,1H),2.51-2.43(m,1H),2.42-2.34(m,1H),2.28(dt,J=12.59,3.17Hz,1H),2.21(td,J=12.28,3.51Hz,1H),1.94-1.82(m,3H),1.67(s,3H),1.05(s,3H),1.01(s,3H),1.73-0.95(m,17H),0.94(s,3H),0.89(s,3H),0.78(s,3H)。
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-9-(三氟甲基磺酰氧基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(中间体1)的制备
将(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代-1-(丙-1-烯-2-基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(29.0g,53.2mmol)的THF(200mL)溶液冷却至-78℃。向该溶液中添加KHMDS(0.5M于甲苯中)(213mL,106mmol)。将该黄色溶液在-78℃下搅拌25分钟并经由插管添加1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基)磺酰基甲磺酰胺(20.92g,58.6mmol)的THF(70mL)和甲苯(30mL)溶液。将该溶液在-78℃下搅拌3h。然后,另外添加1.0g1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基)磺酰基甲磺酰胺并在-78℃下搅拌混合物。搅拌1h后,用水(300mL)淬灭混合物并用乙酸乙酯(3×200mL)萃取混合物。用MgSO4干燥合并的有机层。通过过滤去除干燥剂,并在减压下浓缩滤液,得到黄色固体形式的标题化合物(40.0g,59.1mmol)。通过硅胶TLC,5%EtOAc/己烷并使用Hanessian染色可见产物Rf=0.57。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.29-7.41(m,5H),5.54(dd,J=6.71,1.53Hz,1H),5.13-5.18(m,1H),5.05-5.12(m,1H),4.72(d,J=1.53Hz,1H),4.59(s,1H),3.02(td,J=10.99,4.58Hz,1H),2.25-2.31(m,1H),2.22(td,J=12.21,3.36Hz,1H),2.14(dd,J=17.09,6.71Hz,1H),1.81-1.96(m,2H),1.67(s,3H),1.10(s,3H),1.00(s,3H),0.94(s,3H),0.91-1.77(m,17H),0.88(s,3H),0.77(s,3H)。
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-9-(三氟甲基磺酰氧基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(6.21g,9.18mmol)的二噁烷(25mL)溶液中添加2-丙醇(25mL)和水(15mL),随后添加碳酸钠单水合物(3.42g,27.5mmol)、4-甲氧基羰基苯基硼酸(2.478g,13.77mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(0.318g,0.275mmol)。将烧瓶附接至回流冷凝器,用N2冲洗并加热至回流过夜。然后将该混合物冷却至室温并用水(75mL)稀释。用乙酸乙酯(3×75mL)萃取混合物并用盐水(75mL)洗涤。用MgSO4干燥合并的有机层,过滤并在减压下浓缩。将残余物吸收至硅胶中并通过硅胶闪式色谱使用0-20%乙酸乙酯/己烷梯度纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的标题化合物(4.16g,6.28mmol,产率68.4%)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.92(d,J=8.24Hz,2H),7.40-7.29(m,5H),7.19(d,J=8.24Hz,2H),5.28(dd,J=6.10,1.83Hz,1H),5.19-5.07(m,2H),4.73(d,J=1.83Hz,1H),4.60(s,1H),3.90(s,3H),3.04(td,J=10.91,4.73Hz,1H),2.20-2.32(m,2H),2.09(dd,J=17.24,6.26Hz,1H),1.95-1.82(m,2H),1.69(s,3H),0.97(s,3H),0.95(s,3H),0.92(s,3H),0.91(s,3H),1.75-0.87(m,17H),0.82(s,3H)。
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(中间体2)的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(3.82g,5.76mmol)的二氯乙烷(100mL)溶液中添加三乙胺(1.285mL,9.22mmol)、叔丁基二甲基甲硅烷(1.912mL,11.52mmol)和乙酸钯(II)(0.647g,2.88mmol)。用N2冲洗混合物并加热至60℃。2h后,将反应冷却至室温,通过硅藻土/硅胶垫过滤以去除固体,用25%的EtOAc/己烷溶液洗涤这些固体。在减压下浓缩滤液并用乙酸(25mL)、THF(10mL)和水(3mL)处理。搅拌1h后,通过过滤来收集所形成固体并用水洗涤,得到白色固体形式的标题化合物(3.62g,5.27mmol,产率91%)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δppm7.94(d,J=8.28Hz,2H),7.21(d,J=8.28Hz,2H),5.30(dd,J=6.15,1.63Hz,1H),4.75(d,J=1.76Hz,1H),4.62(s,1H),3.92(s,4H),3.08(td,J=10.92,4.27Hz,1H),2.35-2.22(m,2H),2.17-2.06(m,1H),2.02-1.84(m,2H),1.71(s,3H),1.01(s,6H),0.99(br.s.,3H),0.98(s,9H),0.94(s,6H),1.78-0.90(m,16H),0.32-0.28(m,6H)。
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(3.12g,4.54mmol)的二噁烷(25mL)溶液中添加TBAF(75重量%于水中)(2.375g,6.81mmol)并在室温下搅拌该混合物4h。用1NHCl(25mL)和水(5mL)稀释反应混合物并用二氯甲烷(3×100mL)萃取。经Na2SO4干燥合并的有机层,过滤并在减压下部分地浓缩至约10mL体积。向该经部分地浓缩的混合物中添加1NHCl(50mL)。通过过滤来收集所形成固体并用水洗涤,得到白色固体形式的标题化合物(2.58g,4.50mmol,产率99%)。LCMS:m/e571.47(M-H)-,3.60min(方法2)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm9.80(br.s.,1H),7.92(d,J=8.24Hz,2H),7.18(d,J=8.24Hz,2H),5.32-5.26(m,1H),4.75(s,1H),4.62(br.s.,1H),3.90(s,3H),3.07-2.99(m,1H),2.33-2.21(m,2H),2.10(dd,J=17.09,6.10Hz,1H),2.06-1.94(m,2H),1.70(s,3H),1.01(br.s.,3H),1.00(br.s.,3H),0.98(s,3H),0.91(s,6H),1.79-0.89(m,17H)。
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-异氰酸根合-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(10g,17.46mmol)于1,4-二噁烷(200mL)中的浆液中添加三乙胺(4.38mL,31.4mmol),随后添加二苯基磷酰基叠氮化物(5.82mL,26.2mmol)。将所得白色浆液加热至100℃。5h后,将该反应冷却至室温,然后用EtOAc稀释并用1NNaOH(2×70mL)洗涤。用EtOAc(2×150mL)萃取合并的水层。经Na2SO4干燥合并的有机层,过滤并浓缩成浆液(75mL),将其在冰箱中放置过夜。过滤浆液并用Et2O洗涤白色固体产物。将液体滤液浓缩成黄色浆液,将其过滤并用Et2O洗涤,得到更多的白色固体产物。合并该两批白色固体并在真空中干燥,得到白色固体形式的标题化合物(8.6g,15.09mmol,产率86%)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm8.0(2H,d,J=8.2Hz),7.2(2H,d,J=8.2Hz),5.3(1H,d,J=4.6Hz),4.8(1H,s),4.7(1H,s),3.9(3H,s),2.6(1H,td,J=10.8,5.8Hz),2.1-2.2(2H,m),1.8-2.0(4H,m),1.7-1.8(1H,m),1.7(3H,s),1.5-1.7(5H,m),1.4-1.5(5H,m),1.3-1.4(2H,m),1.2-1.3(2H,m),1.1(3H,s),1.1-1.1(1H,m),1.0(3H,s),1.0(3H,s),1.0(3H,br.s.),1.0(3H,br.s.)。13CNMR(氯仿-d)δppm14.2,15.4,16.2,19.2,19.5,20.8,21.0,24.7,27.4,29.0,29.2,33.3,36.0,37.2,39.0,39.0,40.3,41.5,41.8,47.8,49.0,49.2,51.7,52.6,66.8,71.3,110.2,121.3,123.7,127.6,128.2,129.8,146.0,148.4,148.6,166.9。
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(中间体3)的制备
向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-异氰酸根合-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(5.47g,9.60mmol)于THF(100mL)中的混浊溶液中添加浓盐酸(19.83mL,240mmol)。在室温下将所得均匀混合物搅拌72h,将反应混合物浓缩至干燥,得到白色固体形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯HCl(4.98g,8.58mmol,产率89%)。LCMS:m/e544.5(M+H)+,3.26min(方法3)。1HNMR(500MHz,1∶1CDCl3∶MeOD,MeOD锁场)δppm7.9(2H,d,J=8.5Hz),7.3(1H,t,J=7.8Hz),7.2(2H,d,J=8.5Hz),7.1(1H,t,J=7.3Hz),5.3(1H,d,J=4.6Hz),4.8(1H,s),4.7(1H,br.s.),3.9(2H,s),3.6(2H,dt,J=15.6,6.6Hz),3.3(1H,dt,J=3.1,1.6Hz),2.6(1H,td,J=11.0,6.1Hz),2.1(1H,dd,J=17.1,6.4Hz),2.0(1H,d,J=13.4Hz),1.9-2.0(1H,m),1.8-1.9(2H,m),1.7-1.7(3H,m),1.6-1.7(3H,m),1.5-1.6(3H,m),1.5-1.5(2H,m),1.4(1H,br.s.),1.3-1.4(1H,m),1.2-1.3(1H,m),1.1-1.2(2H,m),1.1-1.1(1H,m),1.0(3H,s),1.0(3H,s),0.9(3H,s),0.9(3H,s)。
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代-4-硫代吗啉基)乙基)氨基)-1-异丙烯基-5a,5b,8,8,11a-五甲基2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(中间体4)的制备
将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-1-异丙烯基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(600mg,1.10mmol)、4-(2-氯乙基)硫代吗啉1,1-二氧化物(600mg,2.56mmol)(如WO2002045652中所述制备)、无水磷酸钾(3.00g,14.1mmol)和碘化钾(10mg,0.060mmol)于乙腈(50mL)中的混合物放置于150mLAceGlass可再封压力容器中。用氮气覆盖白色悬浮液。将容器密封并升温至115至125℃,保持48h。通过短硅胶床过滤粗制反应物并用乙酸乙酯洗涤。在真空中浓缩滤液并通过硅胶色谱纯化,用乙酸乙酯和己烷(0-50%)洗脱,得到无色泡沫状的标题化合物(566mg,73%)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δ7.95(d,J=8.2Hz,2H),7.22(d,J=8.2Hz,2H),5.31(d,J=4.6Hz,1H),4.74(d,J=1.8Hz,1H),4.62(s,1H),3.93(s,3H),3.22-2.99(m,9H),2.79-2.55(m,4H),2.52-2.42(m,1H),2.18-2.09(m,1H),1.99-1.02(m,20H),1.72(s,3H),1.11(s,3H),1.01(s.,3H),1.10(s,3H),0.95(s,3H),0.95(s.,3H)。LCMS:m/e705.51(M+H)+,3.01min(方法4)。
中间体5是如以下反应方案中所示制备的:
步骤1:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-9-(三氟甲基磺酰氧基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(17.2g,25.4mmol)的1,4-二噁烷(100mL)悬浮液中添加2-丙醇(100mL)、水(40mL)、碳酸钠单水合物(9.45g,76mmol)、4-叔丁氧基羰基苯基硼酸(8.46g,38.1mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(0.881g,0.762mmol)。将含有混合物的烧瓶附接至回流冷凝器,用氮气吹扫并加热至回流(油浴温度90℃)。加热后,混合物中的固体溶解,且混合物变成绯红色。加热3.5h后,将混合物冷却至室温。冷却后形成晶体,通过过滤将其收集并用水洗涤。将晶体溶解于DCM和EtOH中并在减压下浓缩。将残余物溶解于DCM中并通过硅藻土/硅胶塞。在减压下浓滤液缩,得到浅灰色泡沫状的预期产物(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(13.8g,19.57mmol,产率77%)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δ7.87(d,J=8.2Hz,2H),7.40-7.29(m,5H),7.16(d,J=8.2Hz,2H),5.26(dd,J=6.3,1.7Hz,1H),5.16(d,J=12.2Hz,1H),5.09(d,J=12.2Hz,1H),4.73(d,J=2.1Hz,1H),4.60(s,1H),3.03(td,J=10.9,4.7Hz,1H),2.32-2.20(m,2H),2.08(dd,J=17.1,6.4Hz,1H),1.95-1.82(m,2H),1.68(s,3H),1.58(s,9H),0.97(s,3H),0.95(s,3H),0.90(s,3H),0.90(s,3H),1.76-0.88(m,17H),0.82(s,3H)。
步骤2:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(中间体5)的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(13.8g,19.57mmol)的DCE(200mL)溶液中添加三乙胺(4.37mL,31.3mmol)、叔丁基二甲基甲硅烷(6.49mL,39.1mmol)和乙酸钯(II)(1.099g,4.89mmol)。用氮气吹扫混合物并加热至60℃。加热3.5h后,将混合物冷却至室温并通过硅胶硅藻土垫过滤,用二氯甲烷、随后用25%乙酸乙酯/己烷洗涤该垫。在减压下浓缩滤液。用200mL水稀释混合物并用二氯甲烷(3×200mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层,过滤并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(13.75g,18.86mmol,产率96%)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δ=7.87(d,J=7.9Hz,2H),7.16(d,J=7.9Hz,2H),5.26(d,J=4.9Hz,1H),4.73(d,J=1.5Hz,1H),4.60(s,1H),3.06(td,J=10.9,4.7Hz,1H),2.31-2.22(m,2H),2.09(dd,J=17.2,6.3Hz,1H),1.98-1.82(m,2H),1.69(s,3H),1.58(s,9H),0.99(s,6H),0.96(br.s.,3H),0.96(s,9H),0.91(s,6H),1.76-0.88(m,17H),0.28(s,6H)。
中间体6是如以下反应方案中所示制备的:
步骤1.(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(3-氟-4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
用N2冲洗(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-9-(三氟甲基磺酰氧基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(4.0g,5.91mmol)、3-氟-4-(甲氧基羰基)苯基硼酸(1.287g,6.50mmol)、碳酸钠单水合物(2.198g,17.73mmol)和Pd(PPh3)4(0.205g,0.177mmol)于1,4-二噁烷(24mL)和水(6mL)中的悬浮液并将该混合物加热至回流。加热2h后,将混合物冷却至室温。然后用水(40mL)稀释反应混合物并用二氯甲烷(3×40mL)萃取。用Na2SO4干燥合并的有机层。通过过滤去除干燥剂并在减压下浓缩滤液。将残余物溶解于DCM中并通过硅藻土/硅胶垫过滤,用25%的EtOAc/己烷溶液洗涤。在减压下浓缩滤液,得到深灰色泡沫状的标题化合物(3.59g,5.27mmol,产率89%)。该粗产物不经额外纯化即用于下一步骤。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.80(1H,t,J=7.8Hz),7.29-7.42(5H,m),6.96(1H,d,J=7.9Hz),6.91(1H,d,J=11.9Hz),5.28-5.33(1H,m),5.16(1H,d,J=12.5Hz),5.09(1H,d,J=12.2Hz),4.73(1H,s),4.59(1H,br.s.),3.92(3H,s),3.03(1H,td,J=10.8,4.7Hz),2.20-2.33(2H,m),2.09(1H,dd,J=17.1,6.4Hz),1.81-1.97(2H,m),1.68(3H,s),0.96(3H,s),0.92(3H,s),0.92(3H,s),0.91(3H,s),0.81(3H,s),0.79-1.75(17H,m)。
步骤2.(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(3-氟-4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(3-氟-4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(3.59g,5.27mmol)的DCE(25mL)溶液中添加TEA(1.176mL,8.44mmol)、叔丁基二甲基甲硅烷(1.749mL,10.54mmol)和乙酸钯(II)(0.118g,0.527mmol)。用N2冲洗混合物并加热至60℃保持1h。将混合物冷却至室温并通过硅藻土和硅胶塞过滤(用25%的EtOAc/己烷溶液洗涤)。在减压下浓缩滤液,用25mL二噁烷稀释残余物并添加TBAF(75%于水中)(2.76g,7.91mmol)。在室温下搅拌该混合物30分钟,然后用50mL1NHCl稀释。通过过滤来收集所形成固体并用水洗涤,得到白色固体状的标题化合物(2.95g,4.99mmol,产率95%)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δppm7.83(1H,t,J=7.9Hz),6.90-7.00(2H,m),5.34(1H,dd,J=6.1,1.6Hz),4.77(1H,d,J=2.0Hz),4.64(1H,s),3.94(3H,s),3.04(1H,td,J=10.7,4.8Hz),2.24-2.34(2H,m),2.13(1H,dd,J=17.3,6.3Hz),1.96-2.06(2H,m),1.72(3H,s),1.03(3H,s),1.02(3H,s),0.98(3H,s),0.93-0.96(6H,m),0.91-1.80(17H,m)。
步骤3.2-氟-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-异氰酸根合-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(3-氟-4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(2.95g,4.99mmol)的甲苯(50mL)和TEA(1.39mL,9.99mmol)溶液中添加叠氮磷酸二苯酯(1.614mL,7.49mmol)并将混合物加热至回流。3h后,在减压下浓缩反应混合物,将其吸附至硅胶中,并通过闪式色谱使用0-10%EtOAc/己烷梯度纯化,得到白色固体形式的标题化合物。该物质不经额外纯化即用于下一步骤。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.81(1H,t,J=7.8Hz),6.96(1H,dd,J=7.9,1.5Hz),6.92(1H,dd,J=11.9,1.5Hz),5.31(1H,dd,J=6.3,1.7Hz),4.75(1H,s),4.64(1H,s),3.92(3H,s),2.55(1H,td,J=10.8,5.8Hz),2.05-2.16(2H,m),1.76-1.92(4H,m),1.68(3H,s),1.09-1.11(3H,m),0.97(3H,s),0.96(3H,s),0.94(3H,s),0.92(3H,s),0.88-1.75(16H,m)。
步骤4.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯二盐酸盐(中间体6)的制备
向粗制2-氟-4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-异氰酸根合-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(2.93g,4.99mmol)的THF(35mL)溶液中添加12NHCl(10mL,121mmol)。搅拌该混合物24h后,用水(100mL)稀释混合物直至沉淀出固体。通过过滤来收集固体并用水洗涤,得到灰白色固体形式的标题化合物(2.75g,4.33mmol,产率87%),其不经额外纯化即用于下一步骤。LCMS:m/e562(M+H)+,1.96min(方法5)。
用于制备C-30胺(实施例1至6)的一般反应方案.
实施例1至6是按照以下反应方案由中间体2或5制备的:
实施例1
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-羧基苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
步骤1:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-溴丙-1-烯-2-基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(0.315g,0.458mmol)的CCl4(5mL)溶液中添加NBS(0.102g,0.573mmol)。在室温下搅拌该混合物16h,然后通过硅藻土垫过滤(用DCM洗涤)并在减压下浓缩滤液。将残余物装载至12g硅胶柱上并通过闪式色谱使用0-10%乙酸乙酯/己烷梯度纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-溴丙-1-烯-2-基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(0.205g,0.268mmol,产率58.4%)。LCMS:m/e765,767.5(M+H)+,4.78min(方法1)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δ7.91(d,J=8.2Hz,2H),7.18(d,J=8.2Hz,2H),5.30-5.25(m,1H),5.13(s,1H),5.04(s,1H),4.01-3.96(m,2H),3.89(s,3H),3.09(td,J=11.2,4.1Hz,1H),2.31-2.24(m,2H),2.17-2.05(m,2H),1.86(dd,J=12.4,7.8Hz,1H),0.96(s,9H),1.80-0.76(m,32H),0.31-0.27(m,6H)。
步骤2:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
向含有(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-溴丙-1-烯-2-基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(26mg,0.034mmol)的烧瓶中添加2-吗啉代乙胺(0.056mL,0.430mmol)。将所形成浆液溶解于DCE(1mL)中并在室温下搅拌过夜。在室温下搅拌该混合物18.5h后,在氮气流下将其浓缩并通过制备型HPLC(方法1)纯化。合并含有产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(17.6mg,0.025mmol,产率74.0%)。LCMS:m/e701.6(M+H)+,2.37min(方法1)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.91(d,J=8.24Hz,2H),7.17(d,J=8.24Hz,2H),5.27(d,J=4.58Hz,1H),5.06(s,1H),4.97(s,1H),3.90(s,3H),3.73(t,J=4.27Hz,3H),3.40-3.50(m,2H),2.86-3.00(m,3H),2.59-2.72(m,2H),2.53(br.s.,4H),2.24-2.37(m,2H),2.05-2.16(m,2H),1.88-1.96(m,1H),1.61-1.75(m,2H),1.03-1.57(m,16H),1.00(s,3H),0.97(s,3H),0.96(s,3H),0.91(s,6H)。
步骤3:保护基团去除
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(17.6mg,0.025mmol)的1,4-二噁烷(1mL)溶液中添加1NNaOH(0.126mL,0.126mmol)。将混合物加热至75℃,保持19.5h,然后冷却至室温。向混合物中添加5mL1NHCl并在减压下浓缩混合物。通过制备型HPLC(方法1)纯化残余物,得到灰白色固体形式的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-羧基苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(6.4mg,9.32μmol,产率37.1%)。LCMS:m/e687.5(M+H)+,1.99min(方法1)。1HNMR(500MHz,乙酸d4)δppm8.03(d,J=8.24Hz,2H),7.30(d,J=8.55Hz,2H),5.38(d,J=4.88Hz,1H),5.23(s,1H),5.07(s,1H),3.96(br.s.,4H),3.69-3.90(m,6H),3.45(br.s.,4H),2.96-3.07(m,1H),2.30-2.40(m,2H),1.10(s,3H),1.08-2.24(m,20H),1.07(s,3H),1.06(s,3H),1.01(s,3H),1.00(s,3H)。
实施例2
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-羧基苯基)-1-(3-(2-羟基乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
步骤1:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-溴丙-1-烯-2-基)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯的制备
经1h向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(2.0g,2.74mmol)的CCl4(10mL)溶液中分多份添加NBS(0.57g,3.20mmol)。在室温下搅拌该混合物6h。通过硅藻土垫过滤混合物(用DCM洗涤)并在减压下浓缩。将残余物装载至90g硅胶柱上并通过闪式色谱用0-10%乙酸乙酯/己烷梯度纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的标题化合物(1.29g,1.60mmol,产率58.4%)。LCMS:m/e807,809.4(M+H)+,6.31min(方法1)。
步骤2:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-(2-羟基乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-溴丙-1-烯-2-基)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(0.125g,0.155mmol)的DCE(2mL)溶液中添加乙醇胺(0.093mL,1.547mmol)。在室温下搅拌该混合物20.5h,然后在减压下浓缩并通过制备型HPLC(方法1)纯化。合并含有产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的标题化合物(56mg,0.083mmol,产率53.7%)。LCMS:m/e674.4(M+H)+,2.45min(方法1)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δ7.87(d,J=8.2Hz,2H),7.15(d,J=8.2Hz,2H),5.26(d,J=4.9Hz,1H),5.15(s,1H),5.08(s,1H),3.93-3.80(m,2H),3.50(br.s.,2H),3.07-2.90(m,3H),1.58(s,9H),0.99(s,6H),0.97(s,3H),0.90(s,6H),2.43-0.84(m,22H)。
步骤3:保护基团的去除
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-(2-羟基乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(0.025g,0.037mmol)的DCM(0.5mL)溶液中添加TFA(0.1mL,1.298mmol)。在室温下搅拌该混合物16.25h,然后在氮气流下浓缩。通过制备型HPLC(方法1)来纯化残余物。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-羧基苯基)-1-(3-(2-羟基乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(8.0mg,0.013mmol,产率34.9%)。LCMS:m/e618.3(M+H)+,2.00min(方法1)。1HNMR(400MHz,乙酸-d4)δppm8.03(d,J=8.03Hz,2H),7.29(d,J=8.03Hz,2H),5.37(d,J=5.27Hz,1H),5.25(s,1H),5.18(s,1H),4.02(t,J=4.77Hz,2H),3.75-3.92(m,2H),3.37-3.44(m,2H),2.98-3.07(m,1H),2.29-2.42(m,2H),1.11-2.24(m,20H),1.10(s,3H),1.06(s,6H),1.00(s,3H),0.99(s,3H)。
实施例3
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-羧基苯基)-1-(3-(二甲基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
步骤2:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-(二甲基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-溴丙-1-烯-2-基)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(0.125g,0.155mmol)的DCE(1mL)溶液中添加二甲胺(2M于THF中)(0.773mL,1.547mmol)。在室温下搅拌该混合物21h后,在减压下将其浓缩并通过制备型HPLC(方法1)纯化。合并含有产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-(二甲基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(74mg,0.112mmol,产率72.7%)。LCMS:m/e658.6(M+H)+,2.75min(方法1)。
步骤3:向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-(二甲基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(25mg,0.038mmol)的DCM(0.5mL)溶液中添加TFA(0.1mL,1.298mmol)。在室温下搅拌该混合物16.5h,然后在氮气流下浓缩。将残余物溶解于甲醇和二噁烷中并通过制备型HPLC纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-羧基苯基)-1-(3-(二甲基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(5.8mg,9.64μmol,产率25.4%)。LCMS:m/e602.4(M+H)+,2.05min(方法1)。1HNMR(400MHz,乙酸-d4)δppm7.99(d,J=8.28Hz,2H),7.25(d,J=8.28Hz,2H),5.38(s,1H),5.33(d,J=4.77Hz,1H),5.26(s,1H),3.89(d,J=14.05Hz,1H),3.73(d,J=14.31Hz,1H),2.93-3.03(m,1H),2.93(s,6H),0.99-2.40(m,22H),1.05(s,3H),1.03(s,6H),0.97(s,3H),0.95(s,3H)。
实施例4
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-羧基苯基)-1-(3-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
步骤2:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-溴丙-1-烯-2-基)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(0.125g,0.155mmol)的DCE(2mL)溶液中添加N,N,N’-三甲基乙二胺(0.201mL,1.547mmol)。在室温下搅拌该混合物20h,然后在减压下浓缩并通过制备型HPLC(方法1)纯化。合并含有产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(64mg,0.090mmol,产率57.9%)。LCMS:m/e713.5(M-H)-,2.76min(方法1)。
步骤3:向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(0.025g,0.035mmol)的DCM(0.5mL)溶液中添加TFA(0.1mL,1.298mmol)。在室温下搅拌该混合物16.5h,然后在氮气流下浓缩。将残余物溶解于甲醇和二噁烷中并通过制备型HPLC(方法1)纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-羧基苯基)-1-(3-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(17.8mg,0.027mmol,产率77%)。LCMS:m/e657.4(M-H)-,2.16min(方法1)。1HNMR(400MHz,乙酸-d4)δppm7.99(d,J=8.28Hz,2H),7.25(d,J=8.28Hz,2H),5.42(s,1H),5.31-5.35(m,1H),5.31(s,1H),3.83-4.00(m,2H),3.77(s,4H),2.88-3.00(m,10H),2.25-2.39(m,2H),0.99-2.24(m,20H),1.05(s,3H),1.03(s,6H),0.97(s,3H),0.95(s,3H)。
实施例5
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-羧基苯基)-1-(3-(2-(二甲基氨基)乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
步骤2:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-(2-(二甲基氨基)乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-溴丙-1-烯-2-基)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(0.125g,0.155mmol)的DCE(2mL)溶液中添加N,N-二甲基乙二胺。在室温下搅拌该混合物21h,然后在减压下浓缩并通过制备型HPLC(方法1)纯化。合并含有产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-(2-(二甲基氨基)乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(78mg,0.111mmol,产率71.9%)。LCMS:m/e699.5(M-H)-,2.53min(方法1)。
步骤3:向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-(2-(二甲基氨基)乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(25mg,0.036mmol)的DCM(0.5mL)溶液中添加TFA(0.1mL,1.298mmol)。在室温下搅拌该混合物15.5h,然后在氮气流下浓缩并通过制备型HPLC(方法1)来纯化残余物。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩。分离出白色固体形式的产物(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-羧基苯基)-1-(3-(2-(二甲基氨基)乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(4.7mg,7.29μmol,产率20%)。LCMS:m/e643.4(M-H)-,2.08min(方法1)。1HNMR(500MHz,乙酸)δppm8.03(d,J=8.24Hz,2H),7.30(d,J=8.24Hz,2H),5.38(d,J=4.88Hz,1H),5.23(s,1H),5.10(s,1H),3.70-3.90(m,6H),2.99(s,6H),2.97-3.08(m,1H),2.30-2.40(m,2H),1.08-2.24(m,20H),1.10(s,3H),1.07(s,6H),1.01(s,3H),1.00(s,3H)。
实施例6
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-(2-羧基乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-9-(4-羧基苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
步骤2:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-(3-乙氧基-3-氧代丙基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-溴丙-1-烯-2-基)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(0.125g,0.155mmol)的DCE(2mL)和三乙胺(0.216mL,1.547mmol)溶液中添加β-丙氨酸乙基酯盐酸盐(0.238g,1.547mmol)。在室温下搅拌该混合物22h,然后升温至40℃并再搅拌6h。将混合物冷却至室温并在室温下搅拌90h,然后在减压下浓缩。通过制备型HPLC(方法1)来纯化残余物。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到灰白色固体形式的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-(3-乙氧基-3-氧代丙基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(73mg,0.100mmol,产率64.6%)。LCMS:m/e728.5(M-H)-,2.57min(方法1)。
步骤3:向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-(3-乙氧基-3-氧代丙基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(0.035g,0.048mmol)的DCM(0.5mL)溶液中添加TFA(0.1mL,1.298mmol)。在室温下搅拌该混合物21.5h,然后在氮气流下去除溶剂。将粗产物溶解于0.5mL二噁烷中并将0.4mL1NNaOH添加至混合物中。将其升温至75℃,保持18.25h,然后冷却至室温。用1mL甲醇稀释混合物并通过制备型HPLC(方法1)纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-(2-羧基乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-9-(4-羧基苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(11mg,0.017mmol,产率35.5%)。LCMS:m/e644.4(M-H)-,1.91min(方法1)。1HNMR(500MHz,乙酸-d4)δppm8.03(d,J=8.24Hz,2H),7.30(d,J=8.24Hz,2H),5.37(d,J=5.19Hz,1H),5.25(s,1H),5.19(s,1H),3.86-3.91(m,1H),3.78-3.83(m,1H),3.50(t,J=6.71Hz,2H),2.98-3.07(m,1H),2.94(t,J=6.71Hz,2H),2.30-2.40(m,2H),2.12-2.23(m,2H),1.10-2.10(m,18H),1.10(s,3H),1.07(s,6H),1.01(s,3H),1.00(s,3H)。
实施例7
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-1-(3-(二甲基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-1-(3-(二甲基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸叔丁基酯的制备
向含有(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-(二甲基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(50mg,0.076mmol)的小瓶中添加草酰氯(2M于DCM中)(2mL,4.00mmol)。在室温下搅拌该混合物2h,然后在减压下浓缩。将残余物溶解于DCM中并在减压下再浓缩2次。用DCE(2mL)稀释粗产物并添加DIEA(0.066mL,0.380mmol)、N,N-二甲基乙二胺(0.022mL,0.204mmol)和DMAP(1mg,8.19μmol)。在室温下搅拌该混合物18.5h,然后在减压下浓缩。粗产物未经纯化即用于下一步骤。LCMS:m/e726.6(M-H)-,2.87min(方法1)。
步骤2:向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-1-(3-(二甲基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸叔丁基酯(55.3mg,0.076mmol)的DCM(1mL)溶液中添加TFA(0.1mL,1.298mmol)。在室温下搅拌该混合物15h,然后在氮气流下浓缩并通过制备型HPLC(方法1)来纯化残余物。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩。分离出白色固体形式的预期产物4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-1-(3-(二甲基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(24.8mg,0.037mmol,产率48.6%)。LCMS:m/e672.4(M+H)+,2.10min(方法1)。1HNMR(500MHz,乙酸-d4)δppm8.03(d,J=8.24Hz,2H),7.29(d,J=8.24Hz,2H),5.40(s,1H),5.37(d,J=5.19Hz,1H),5.29(s,1H),3.91(d,J=14.34Hz,1H),3.68-3.80(m,3H),3.33-3.42(m,2H),3.09-3.17(m,1H),2.99(s,6H),2.96(s,6H),2.50-2.57(m,1H),1.08-2.23(m,21H),1.08(s,3H),1.07(s,3H),1.04(s,3H),1.01(s,3H),0.99(s,3H)。
实施例8
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)丙-1-烯-2-基)-3a-(2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-溴丙-1-烯-2-基)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(0.125g,0.155mmol)的DCE(2mL)溶液中添加N,N,N’三甲基乙二胺(0.201mL,1.547mmol)。在室温下搅拌该混合物20h,然后在减压下浓缩并通过制备型HPLC(方法1)纯化。合并含有产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(64mg,0.090mmol,产率57.9%)。LCMS:m/e713.5(M-H)-,2.76min(方法1)。
步骤2:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)丙-1-烯-2-基)-3a-(2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸叔丁基酯的制备
向含有(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(0.037g,0.052mmol)的小瓶中添加草酰氯(2M于DCM中)(2mL,4.00mmol)。在室温下搅拌该混合物2.5小时并在减压下浓缩。将残余物溶解于DCM中并再浓缩2次。用DCE(2mL)和DIEA(0.045mL,0.259mmol)稀释粗制残余物,添加N,N-二甲基氨基乙胺(0.011mL,0.103mmol)和DMAP(1mg,8.19μmol)并搅拌该混合物18.5h,然后在减压下浓缩,得到粗产物,其未经额外纯化即直接用于下一步骤。LCMS:m/e786.65(M+H)+,2.77min(方法1)。
步骤3:向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)丙-1-烯-2-基)-3a-(2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸叔丁基酯(40.8mg,0.052mmol)的DCM(1mL)溶液中添加TFA(0.1mL,1.298mmol)。在室温下搅拌该混合物15h,然后在氮气流下浓缩并通过制备型HPLC(方法1)来纯化残余物。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)丙-1-烯-2-基)-3a-(2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(27mg,0.037mmol,产率71.2%)。LCMS:m/e729.64(M+H)+,2.14min(方法1)。1HNMR(500MHz,乙酸-d4)δppm8.03(d,J=7.93Hz,2H),7.29(d,J=8.24Hz,2H),5.43(s,1H),5.37(d,J=4.88Hz,1H),5.31(s,1H),4.00(d,J=14.34Hz,1H),3.88(d,J=14.34Hz,1H),3.82(br.s.,4H),3.73(t,J=5.65Hz,2H),3.33-3.42(m,2H),3.08-3.18(m,1H),3.01(s,3H),2.98(s,6H),2.95(s,6H),2.51-2.58(m,1H),2.13-2.23(m,2H),1.09-2.13(m,19H),1.08(s,3H),1.07(s,3H),1.04(s,3H),1.01(s,3H),1.00(s,3H)。
实施例9
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-羧基乙基氨基甲酰基)-1-(3-(2-(二甲基氨基)乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-(叔丁氧基羰基(2-(二甲基氨基)乙基)氨基)丙-1-烯-2-基)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-(2-(二甲基氨基)乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(45mg,0.064mmol)的1,4-二噁烷(2mL)溶液中添加氢氧化钠(1N)(0.25mL,0.250mmol)和Boc2O(0.030mL,0.128mmol)。在室温下搅拌该混合物17.5h,然后用水(4mL)稀释并用二氯甲烷(3×5mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层,过滤并在减压下浓缩。将残余物溶解于1,4-二噁烷(1mL)中并用1N氢氧化钠(0.2mL,0.2mmol)处理。搅拌该混合物97h,然后用甲醇稀释并通过制备型HPLC纯化。合并含有产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-(叔丁氧基羰基(2-(二甲基氨基)乙基)氨基)丙-1-烯-2-基)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸。LCMS:m/e799.6(M-H)-,2.76min(方法1)。
步骤2:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-(叔丁氧基羰基(2-(二甲基氨基)乙基)氨基)丙-1-烯-2-基)-3a-(3-乙氧基-3-氧代丙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸叔丁基酯的制备
向含有(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-(叔丁氧基羰基(2-(二甲基氨基)乙基)氨基)丙-1-烯-2-基)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(26mg,0.024mmol)的烧瓶中添加草酰氯(2M于DCM中)(1mL,2.000mmol)。在室温下搅拌该混合物2小时,然后在减压下浓缩。将残余物溶解于DCM中并再浓缩2次。将粗产物溶解于DCE(1mL)中并添加DIEA(0.021mL,0.122mmol)、β-丙氨酸乙基酯盐酸盐(7.48mg,0.049mmol)和DMAP(0.5mg,4.09μmol)。在室温下搅拌该混合物2.5h,然后用水(5mL)淬灭反应并用二氯甲烷(3×5mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层,过滤并在减压下浓缩,得到粗产物,其未经额外纯化即用于下一步骤。LCMS:m/e898.7(M-H),2.75min(方法1)。
步骤3:3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-(叔丁氧基羰基(2-(二甲基氨基)乙基)氨基)丙-1-烯-2-基)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酰氨基)丙酸的制备
向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-(叔丁氧基羰基(2-(二甲基氨基)乙基)氨基)丙-1-烯-2-基)-3a-(3-乙氧基-3-氧代丙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸叔丁基酯(0.022g,0.024mmol)的1,4-二噁烷(1mL)溶液中添加NaOH(1N)(0.120mL,0.120mmol)。将混合物加热至75℃,保持87h,然后冷却至室温并在减压下浓缩。粗产物未经额外纯化即用于下一步骤。LCMS:m/e870.6(M-H)-,2.46min(方法1)。
步骤4:BOC去保护:向3-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-(叔丁氧基羰基(2-(二甲基氨基)乙基)氨基)丙-1-烯-2-基)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酰氨基)丙酸(20.93mg,0.024mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中添加TFA(0.25mL,3.24mmol)。在室温下搅拌该混合物16.5h,然后在氮气流下浓缩。将残余物溶解于二噁烷和甲醇中并通过制备型HPLC(方法1)纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩。通过制备型HPLC(方法9)再纯化含有杂质的残余物。合并含有产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-羧基乙基氨基甲酰基)-1-(3-(2-(二甲基氨基)乙基氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(6.2mg,8.66μmol,4步的产率13.5%)。LCMS:m/e714.5(M-H)-,1.93min(方法1)。1HNMR(500MHz,乙酸d4)δppm8.03(d,J=8.24Hz,2H),7.30(d,J=8.24Hz,2H),5.37(d,J=4.88Hz,1H),5.21(s,1H),5.05(s,1H),3.69-3.90(m,6H),3.45-3.67(m,2H),3.19(t,J=12.51Hz,1H),2.99(s,6H),2.68(t,J=6.41Hz,2H),2.51-2.63(m,1H),1.08-2.25(m,21H),1.08(s,3H),1.07(s,3H),1.06(s,3H),1.01(s,3H),0.99(s,3H)。
实施例10
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-(3-羧基-N-甲基丙酰氨基)丙-1-烯-2-基)-3a-(2-羧基乙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(甲基氨基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-溴丙-1-烯-2-基)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(0.125g,0.155mmol)的DCE(1mL)溶液中添加甲胺(2M于THF中)(0.773mL,1.547mmol)。在室温下搅拌该混合物20h,然后添加额外0.8mL甲胺(2M于THF中)并在室温下搅拌该混合物1h,然后升温至40℃并再搅拌8h。在减压下浓缩混合物并使产物自甲醇、1,4-二噁烷和水的溶液结晶,得到灰白色固体形式的粗产物(85mg,0.132mmol,产率85%)。LC/MS:m/e644.4(M+H)+,2.44分钟(方法1)。
步骤2:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-(4-甲氧基-N-甲基-4-氧代丁酰氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(甲基氨基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(0.04g,0.062mmol)的DCE(2mL)溶液中添加DIEA(0.054mL,0.311mmol)、4-氯-4-氧代丁酸甲基酯(0.038mL,0.311mmol)和DMAP(1mg,8.19μmol)。在室温下搅拌该混合物3h,然后用2mL水和6mL1NHCl稀释,并用二氯甲烷(3×7mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层,过滤并在减压下浓缩。通过闪式色谱使用0-100%乙酸乙酯/己烷梯度洗脱(其中向该混合物中添加0.1%乙酸)来纯化残余物。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的预期产物(0.047g,0.062mmol,产率50%)。LC/MS:m/e758.4(M+H)+,2.57分钟(方法1)。
步骤3:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(3-乙氧基-3-氧代丙基氨基甲酰基)-1-(3-(4-甲氧基-N-甲基-4-氧代丁酰氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸叔丁基酯的制备
向含有(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-(4-甲氧基-N-甲基-4-氧代丁酰氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(0.047g,0.062mmol)的小瓶中添加草酰氯(2M于二氯甲烷中)(1mL,2.0mmol)。在室温下搅拌该溶液2h,然后在减压下浓缩。将残余物溶解于二氯甲烷中并再浓缩2次,然后在室内真空下干燥1h。将残余物溶解于DCE(1mL)中并添加Hunig碱(0.032mL,0.186mmol),随后添加β-丙氨酸乙基酯盐酸盐(0.014g,0.093mmol)。在室温下搅拌该混合物17h,然后在氮气流下浓缩并通过12g硅胶柱闪式色谱使用0-50%乙酸乙酯/己烷梯度洗脱纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩。分离出白色固体形式的预期产物(15mg,0.017mmol,产率28%)。LC/MS:m/e857.5(M+H)+,2.57分钟(方法1)。
步骤4:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(3-乙氧基-3-氧代丙基氨基甲酰基)-1-(3-(4-甲氧基-N-甲基-4-氧代丁酰氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(3-乙氧基-3-氧代丙基氨基甲酰基)-1-(3-(4-甲氧基-N-甲基-4-氧代丁酰氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸叔丁基酯(0.015g,0.017mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中添加TFA(0.05mL,0.649mmol)。在室温下搅拌该混合物23h,然后在减压下浓缩且未经额外纯化即用于下一步骤。LC/MS:m/e801.4(M+H)+,2.11分钟(方法1)。
步骤5:向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(3-乙氧基-3-氧代丙基氨基甲酰基)-1-(3-(4-甲氧基-N-甲基-4-氧代丁酰氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.017mmol)的1,4-二噁烷(1mL)溶液中添加氢氧化钠(1N)(0.1mL,0.100mmol)。将混合物加热至75℃,保持72h,然后通过制备型HPLC纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩。将残余物溶解于乙酸中并在减压下浓缩,得到透明无色膜形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-(3-羧基-N-甲基丙酰氨基)丙-1-烯-2-基)-3a-(2-羧基乙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(3.0mg,0.0037mmol,产率22%)。LC/MS:m/e759.4(M+H)+,1.74分钟(方法1)。
实施例11
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-羧基苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
步骤1:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-溴丙-1-烯-2-基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(3.25g,4.90mmol)的四氯化碳(25mL)溶液中添加N-溴琥珀酰亚胺(1.00g,5.62mmol)。在室温下搅拌该混合物1h,并添加额外0.25gN-溴琥珀酰亚胺。在室温下搅拌该混合物18h后,通过硅藻土垫将其过滤(用DCM洗涤)并在减压下浓缩滤液。通过闪式色谱使用160硅胶柱和0-10%乙酸乙酯/己烷梯度洗脱来纯化残余物。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到1.44g白色固体形式的预期产物。合并数份较不纯的级分,浓缩,并通过闪式色谱再纯化(0-5%乙酸乙酯/己烷,90g硅胶柱)。合并分离物,得到白色固体形式的产物(2.1g,2.83mmol,产率57.7%)。LC/MS:m/e741,743.2(M+H)+,4.13分钟(方法1)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.93(d,J=8.2Hz,2H),7.44-7.31(m,5H),7.20(d,J=8.2Hz,2H),5.29(dd,J=6.1,1.5Hz,1H),5.23-5.08(m,3H),5.05(s,1H),4.03-3.97(m,2H),3.92(s,3H),3.10(d,J=4.3Hz,1H),2.34(dt,J=12.6,3.0Hz,1H),2.27-2.19(m,1H),2.15-2.05(m,2H),1.92(dd,J=12.7,7.8Hz,1H),1.79(t,J=11.3Hz,1H),1.00(s,3H),0.96(s,3H),0.93(s,3H),0.92(s,3H),1.75-0.90(m,16H),0.82(s,3H)。
步骤2:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(苄氧基羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
向NaH(60%矿物油分散体)(0.135g,3.37mmol)于1,4-二噁烷(3mL)中的悬浮液中添加4-(2-羟基乙基)吗啉(0.204mL,1.685mmol)和(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-溴丙-1-烯-2-基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(0.25g,0.337mmol)。在室温下搅拌给混合物,然后加热至50℃,保持20h。将反应冷却至室温并用水(10mL)淬灭,然后用二氯甲烷(3×20mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层,过滤并在减压下浓缩。通过闪式色谱使用12g硅胶柱和0-10%MeOH/二氯甲烷梯度洗脱来纯化残余物。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的标题化合物(0.133g,0.171mmol,产率50.7%)。LC/MS:m/e778.4(M+H)+,2.44分钟(方法1)。
步骤3:向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(苄氧基羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.078g,0.00μmol)的DCE(2mL)溶液中添加三乙胺(0.022mL,0.160mmol)、叔丁基二甲基甲硅烷(0.033mL,0.200mmol)和乙酸钯(II)(0.011g,0.050mmol)。用氮气吹扫混合物并加热至60℃,保持5.5h,然后冷却至室温并搅拌过夜。通过硅藻土垫过滤混合物以去除固体(用二氯甲烷洗涤)并在减压下浓缩滤液。将残余物溶解于THF(2mL)中并用四丁基氟化铵水合物(0.042g,0.150mmol)处理。1.25h后,用水(5mL)稀释混合物并用二氯甲烷(3×7mL)萃取。用硫酸钠干燥合并的有机层,过滤并在减压下浓缩。通过从热二噁烷和水结晶来纯化残余物。通过过滤来收集冷却后形成的固体并用水洗涤。使所收集固体自热乙醇、二噁烷重结晶,并缓慢添加水。通过过滤来收集所形成固体并用乙醇洗涤,得到灰白色固体形式的产物(10mg,0.0145mmol,产率14.5%)。LC/MS:m/e688.4(M+H)+,2.18分钟(方法1)。1HNMR(500MHz,乙酸d4)δppm8.03(d,J=8.2Hz,2H),7.30(d,J=8.2Hz,2H),5.37(d,J=4.3Hz,1H),5.03(br.s.,1H),5.02(br.s.,1H),4.11-3.99(m,6H),3.95-3.90(m,2H),3.49-3.45(m,2H),3.00-2.92(m,1H),2.39-2.30(m,2H),1.10(s,3H),1.07(s,6H),2.23-1.05(m,24H),1.01(s,3H),1.00(s,3H)。
实施例12
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-羧基乙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(苄氧基羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.38g,0.488mmol)于甲苯(3mL)和甲醇(0.75mL)中的混浊溶液冷却至0℃并逐滴添加TMS-重氮甲烷(2M于己烷中)(0.317mL,0.635mmol)。该溶液剧烈地起泡5分钟,然后起泡停止。将混合物升温至室温并搅拌。搅拌4h后,添加额外0.1mL2NTMS-重氮甲烷溶液并在室温下搅拌该混合物1h。用20mL乙酸乙酯稀释混合物并用饱和碳酸氢钠、随后饱和氯化钠洗涤。用硫酸钠干燥有机层,过滤并在减压下浓缩。通过闪式色谱使用25g硅胶柱和0-5%MeOH/二氯甲烷梯度洗脱来纯化残余物。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的产物(0.295g,0.350mmol,产率71.7%)。LC/MS:m/e792.4(M+H)+,3.51分钟(方法1)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.92(d,J=8.24Hz,2H),7.29-7.39(m,5H),7.18(d,J=7.93Hz,2H),5.27(d,J=5.19Hz,1H),5.06-5.18(m,2H),4.93(s,1H),4.91(s,1H),3.94(s,2H),3.90(s,3H),3.72(t,J=4.58Hz,4H),3.57(t,J=5.80Hz,2H),2.87-2.95(m,1H),2.60(t,J=5.80Hz,2H),2.52(br.s.,4H),2.27-2.33(m,1H),2.20(td,J=12.28,3.20Hz,1H),2.08(dd,J=17.09,6.10Hz,1H),1.85-2.00(m,2H),1.73(t,J=11.29Hz,1H),1.64(d,J=16.79Hz,1H),0.98-1.53(m,15H),0.97(s,3H),0.94(s,3H),0.91(s,3H),0.90(s,3H),0.80(s,3H)。
步骤2:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(0.288g,0.364mmol)的DCE(3.5mL)溶液中添加TEA(0.081mL,0.582mmol)、叔丁基二甲基甲硅烷(0.121mL,0.727mmol)和乙酸钯(0.020g,0.091mmol)。用N2冲洗混合物,并加热至60℃。2.5h后,将混合物冷却至室温并通过硅藻土垫过滤以去除固体,然后在减压下浓缩。用5mLTHF稀释残余物并向混浊溶液中添加四丁基氟化铵水合物(0.152g,0.545mmol)。在室温下搅拌该混合物2h,用水(15mL)稀释,并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。经硫酸钠干燥合并的有机层,过滤并在减压下浓缩。通过闪式色谱使用25g硅胶柱和0-5%甲醇/二氯甲烷梯度洗脱来纯化残余物。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的产物(0.188g,0.268mmol,产率73.7%)。LC/MS:m/e702.4(M+H)+,2.66分钟(方法1)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.90(d,J=8.24Hz,2H)7.16(d,J=8.24Hz,2H),5.26(d,J=4.88Hz,1H),4.92(d,J=1.83Hz,2H),3.93(s,2H),3.88(s,3H),3.74(t,J=4.43Hz,4H),3.62(t,J=5.49Hz,2H),2.89(td,J=10.83,4.27Hz,1H),2.58-2.74(m,6H),2.21-2.32(m,2H),1.99-2.13(m,2H),1.91(dd,J=12.05,8.09Hz,1H),1.72(t,J=11.29Hz,1H),1.65(d,J=16.79Hz,1H),1.01-1.56(m,15H),0.99(s,3H),0.98(s,3H),0.95(s,3H),0.90(s,6H)。
步骤3:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(3-乙氧基-3-氧代丙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
向含有(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(0.188g,0.268mmol)的烧瓶中添加草酰氯(2M于DCM中)(3mL,6.00mmol)。在室温下搅拌该溶液(其在添加草酰氯后起泡数分钟)2h,然后在减压下浓缩。将残余物溶解于DCM中并再浓缩2次以去除任何剩余草酰氯。粗酰氯产物未经额外纯化即用于下一步骤。
向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(氯羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(32.2mg,0.0447mmol)于DCE(1mL)中的悬浮液中添加β-丙氨酸乙基酯盐酸盐(10.30mg,0.067mmol)和二异丙基乙胺(0.023mL,0.134mmol)。在室温下搅拌该混合物5h,然后直接通过闪式色谱使用0-5%MeOH/DCM(其中向该混合物中添加0.1%乙酸铵)梯度洗脱进行纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的产物(32mg,0.040mmol,产率89%)。LC/MS:m/e801.4(M+H)+,2.66分钟(方法1)。
步骤4:向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(3-乙氧基-3-氧代丙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.032g,0.040mmol)的1,4-二噁烷(1mL)溶液中添加NaOH(1N)(0.199mL,0.199mmol)。将混合物加热至75℃,保持15h,然后冷却至室温并通过制备型HPLC(方法1)纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的产物(18mg,0.024mmol,产率59.6%)。LC/MS:m/e759.4(M+H)+,1.99分钟(方法1)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.94(d,J=8.24Hz,2H),7.16(d,J=8.24Hz,2H),6.83(t,J=5.49Hz,1H),5.17(d,J=4.58Hz,1H),4.90(s,1H),4.93(s,1H),3.91-4.00(m,2H),3.90(t,J=4.58Hz,4H),3.78-3.85(m,1H),3.56-3.72(m,3H),3.00-3.13(m,6H),2.75-2.82(m,1H),2.49-2.63(m,2H),2.38-2.44(m,1H),2.10-2.20(m,2H),1.81-2.00(m,3H),1.03(s,3H),1.01-1.67(m,16H),0.99(s,3H),0.91(s,3H),0.89(s,6H)。
实施例13至17
利用C-30乙基吗啉代醚制备C-28酰胺的一般反应方案.
实施例13
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-(2-羟基乙基氨基)乙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-(2-羟基乙基氨基)乙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(氯羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(32.2mg,0.0447mmol)(其合成在上文4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(3-乙氧基-3-氧代丙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备中描述)的DCE(1mL)悬浮液中添加2-(2-氨基乙基氨基)乙醇(16μL,0.158mmol)。在室温下搅拌该混合物过夜。搅拌16h后,向混合物中添加二异丙基乙胺(0.023mL,0.134mmol)。在室温下搅拌该混合物1h,然后直接通过闪式色谱使用0-10%甲醇/二氯甲烷(其中向混合物中添加0.1%氢氧化铵)梯度洗脱进行纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的产物(19mg,0.024mmol,产率53.9%)。LC/MS:m/e788.4(M+H)+,2.52分钟(方法1)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.91(d,J=8.24Hz,2H),7.18(d,J=8.24Hz,2H),6.57(br.s.,1H),5.27(d,J=4.58Hz,1H),4.92(s,1H),4.91(s,1H),3.94(s,2H),3.89(s,3H),3.74-3.80(m,2H),3.70-3.74(m,4H),3.39-3.63(m,5H),2.88-3.06(m,6H),2.59(t,J=5.80Hz,2H),2.41-2.56(m,5H),1.93-2.13(m,3H),1.80(dd,J=12.21,7.63Hz,1H),0.98-1.74(m,17H),0.99(s,3H),0.97(s,3H),0.95(s,3H),0.87-0.93(m,6H)。
步骤2:向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-(2-羟基乙基氨基)乙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.019g,0.024mmol)的1,4-二噁烷(1mL)溶液中添加1NNaOH(0.121mL,0.121mmol)。将混合物加热至75℃,保持23h,然后冷却至室温并再搅拌63h。向反应物中添加额外0.1mL1NNaOH并将混合物加热至75℃,保持23h,然后冷却至室温并通过制备型HPLC(方法1)来纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的产物(15mg,0.019mmol,产率80%)。LC/MS:m/e774.6(M+H)+,2.07分钟(方法1)。1HNMR(500MHz,乙酸)δppm8.03(d,J=8.2Hz,2H),7.29(d,J=8.5Hz,2H),5.37(d,J=4.6Hz,1H),5.01(br.s.,1H),5.00(br.s.,1H),4.09-3.96(m,8H),3.91(br.s.,2H),3.78-3.71(m,1H),3.70-3.63(m,1H),3.54-3.44(m,3H),3.38-3.32(m,4H),3.04(td,J=10.6,3.5Hz,1H),2.56-2.49(m,1H),1.09(s,3H),1.06(s,3H),1.05(s,3H),1.01(s,3H),0.99(s,3H),2.24-0.97(m,24H)。
实施例14
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(氯羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(40mg,0.056mmol)(其合成在上文4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(3-乙氧基-3-氧代丙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备中描述)的DCE(1mL)悬浮液中添加N,N-二甲基氨基乙胺(7.34mg,0.083mmol)。在室温下搅拌该混合物16h,然后向混合物中添加二异丙基乙胺(0.023mL,0.134mmol)。在室温下将其再搅拌2h,然后直接通过闪式色谱使用12g硅胶柱和0-10%MeOH/DCM(其中向混合物中添加0.1%氢氧化铵)梯度洗脱进行纯化。合并含有产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的预期产物(38.4mg,0.050mmol,产率90%)。LC/MS:m/e772.5(M+H)+,2.68分钟(方法1)。
步骤2:向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(38.4mg,0.050mmol)的1,4-二噁烷(1mL)溶液中添加1NNaOH(0.249mL,0.249mmol)。将混合物加热至75℃,保持15h,然后通过制备型HPLC(方法1)纯化。合并含有产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的产物(14mg,0.018mmol,产率37%)。LC/MS:m/e758.6(M+H)+,2.14分钟(方法1)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.93(d,J=7.93Hz,2H),7.15(d,J=7.94Hz,2H),7.11(br.s.,1H),5.28(d,J=4.88Hz,1H),4.91(s,1H),4.89(s,1H),3.88-3.96(m,2H),3.74(t,J=4.58Hz,4H),3.59(t,J=5.49Hz,2H),3.47-3.53(m,2H),2.96-3.04(m,1H),2.74-2.82(m,2H),2.61-2.68(m,2H),2.58(br.s.,4H),2.51(s,6H),2.39-2.47(m,1H),1.93-2.11(m,3H),1.75-1.83(m,1H),1.58-1.69(m,2H),0.96-1.53(m,15H),0.96(s,3H),0.94(s,6H),0.91(s,6H)。
实施例15
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-3a-(3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙基氨基甲酰基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-3a-(3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙基氨基甲酰基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(氯羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(32.2mg,0.0447mmol)(其合成在上文4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(3-乙氧基-3-氧代丙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备中描述)于DCE(1mL)中的悬浮液中添加1-(3-氨基丙基)-2-吡咯烷酮(9.40μL,0.067mmol)。在室温下搅拌该混合物16h,然后将二异丙基乙胺(0.023mL,0.134mmol)添加至混合物中并在室温下将其再搅拌1h。通过闪式色谱使用12g硅胶柱和0-5%甲醇/二氯甲烷(其中向混合物中添加0.1%乙酸铵)梯度洗脱来纯化混合物。合并含有产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的产物(36.4mg,0.044mmol,产率99%)。LC/MS:m/e826.5(M+H)+,2.59分钟(方法1)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.92(d,J=8.24Hz,2H),7.18(d,J=7.93Hz,2H),6.91(t,J=6.10Hz,1H),5.28(d,J=4.88Hz,1H),4.92(br.s.,2H),3.95(br.s.,2H),3.90(s,3H),3.72(t,J=4.58Hz,4H),3.58(t,J=5.04Hz,2H),3.33-3.48(m,3H),3.20-3.33(m,2H),2.96-3.08(m,2H),2.60(t,J=5.80Hz,2H),2.52(br.s.,5H),2.43(t,J=8.09Hz,2H),1.95-2.18(m,5H),1.81(dd,J=11.90,7.93Hz,1H),0.99(s,3H),0.98-1.72(m,19H),0.97(s,3H),0.95(s,3H),0.91(s,6H)。
步骤2:向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-3a-(3-(2-氧代吡咯烷-1-基)丙基氨基甲酰基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.0364g,0.044mmol)的1,4-二噁烷(1mL)溶液中添加1NNaOH(0.220mL,0.220mmol)。将混合物加热至75℃,保持15h,然后通过制备型HPLC(方法1)纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的产物(31mg,0.035mmol,产率81%)。LC/MS:m/e812.5(M+H)+,2.11分钟(方法1)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm8.65(br.s.,1H),7.94(d,J=7.93Hz,2H),7.17(d,J=8.24Hz,2H),6.91(t,J=6.26Hz,1H),5.25(d,J=4.88Hz,1H),4.88-4.93(m,2H),3.88-3.98(m,2H),3.80(t,J=4.58Hz,4H),3.67(t,J=5.49Hz,2H),3.34-3.46(m,3H),3.21-3.33(m,2H),3.00-3.09(m,2H),2.40-2.51(m,3H),2.14(d,J=12.21Hz,1H),1.96-2.10(m,5H),1.80(dd,J=11.90,7.63Hz,1H),0.96-1.71(m,24H),0.95(s,3H),0.95(s,3H),0.92(s,3H),0.90(br.s.,6H)。
实施例16
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(氯羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(25mg,0.035mmol)(其合成在上文4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(3-乙氧基-3-氧代丙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备中描述)于DCE(1mL)中的悬浮液中添加1-(3-氨基丙基)咪唑(8μL,0.067mmol)。在室温下搅拌该混合物16h,然后添加二异丙基乙胺(0.023mL,0.132mmol)。在室温下搅拌该混合物30分钟,然后直接通过闪式色谱使用12g硅胶柱和0-5%甲醇/二氯甲烷(其中添加0.1%氢氧化铵)梯度洗脱进行纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的产物(10.8mg,0.013mmol,产率38.5%)。LC/MS:m/e809.4(M+H)+,2.55分钟(方法1)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.91(d,J=7.93Hz,2H),7.49(s,1H),7.18(d,J=7.93Hz,2H),7.07(s,1H),6.94(s,1H),5.69(t,J=5.95Hz,1H),5.27(d,J=4.88Hz,1H),4.93(s,1H),4.91(s,1H),3.99(td,J=6.94,2.90Hz,2H),3.94(s,2H),3.90(s,3H),3.72(t,J=4.73Hz,4H),3.53-3.61(m,2H),3.30-3.38(m,1H),3.13-3.22(m,1H),3.00(td,J=11.14,3.97Hz,1H),2.60(t,J=5.80Hz,2H),2.42-2.55(m,5H),2.09(dd,J=17.24,6.26Hz,1H),1.94-2.04(m,3H),1.88(d,J=13.73Hz,1H),0.99-1.75(m,18H),0.99(s,3H),0.98(s,3H),0.95(s,3H),0.91(s,6H)。
步骤2:向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.0108g,0.013mmol)的1,4-二噁烷(1mL)溶液中添加1NNaOH(0.067mL,0.067mmol)。将混合物加热至75℃,保持15h,然后将混合物冷却至室温。向混合物中添加额外0.067μL1NNaOH并将其加热至75℃。加热8h后,将混合物冷却至室温并在室温下再搅拌63h。通过制备型HPLC来纯化混合物。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的产物(9mg,10.19μmol,产率76%)。LC/MS:m/e795.5(M+H)+,2.09分钟(方法1)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.95(d,J=7.93Hz,2H),7.64(s,1H),7.16(d,J=8.24Hz,2H),7.12(s,1H),6.95(s,1H),5.71(br.s.,1H),5.25(d,J=4.88Hz,1H),4.93(s,1H),4.91(s,1H),3.96-4.06(m,2H),3.94(s,2H),3.73-3.81(m,4H),3.61-3.67(m,2H),3.34-3.46(m,1H),3.11-3.20(m,1H),2.97-3.05(m,1H),2.59-2.76(m,6H),2.45(br.s.,1H),1.95-2.10(m,4H),1.89(d,J=13.43Hz,1H),0.96-1.74(m,18H),0.97(s,6H),0.94(s,3H),0.89(s,3H),0.86(s,3H)。
实施例17
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-(羧基甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-(2-甲氧基-2-氧代乙基氨基)乙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(氯羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(32.2mg,0.0447mmol)(其合成在上文4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(3-乙氧基-3-氧代丙基氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备中描述)于DCE(1mL)中的悬浮液中添加2-(2-氨基乙基氨基)乙酸甲基酯(8.86mg,0.067mmol)。在室温下搅拌该混合物16h。向混合物中添加二异丙基乙胺(0.023mL,0.134mmol)并在室温下搅拌该混合物3.5h。添加额外10mg2-(2-氨基乙基氨基)乙酸甲基酯并在室温下将反应再搅拌19h。向混合物中添加额外10mg2-(2-氨基乙基氨基)乙酸甲基酯并在室温下将其进一步搅拌。在室温下将混合物再搅拌60h后,直接通过闪式色谱使用12g硅胶柱和0-10%甲醇/二氯甲烷(其中向混合物中添加0.1%氢氧化铵)梯度洗脱进行纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色泡沫状的产物(31mg,0.027mmol,产率59.5%)。LC/MS:m/e816.5(M+H)+,2.57分钟(方法1)。
步骤2:向2-(2-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-(2-吗啉代乙氧基)丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酰氨基)乙基氨基)乙酸(30mg,0.026mmol)的1,4-二噁烷(1mL)溶液中添加1NNaOH(0.2mL,0.200mmol)。将混合物加热至75℃,保持15h,然后冷却至室温并通过制备型HPLC(方法1)纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的产物(10mg,0.013mmol,产率48.5%)。LC/MS:m/e788.5(M+H)+,2.01分钟(方法1)。1HNMR(500MHz,乙酸d4)δppm8.03(d,J=8.24Hz,2H),7.29(d,J=8.24Hz,2H),5.37(d,J=4.88Hz,1H),5.01(br.s.,1H),5.00(br.s.,1H),3.29-4.12(m,20H),3.00-3.10(m,1H),2.51-2.60(m,1H),1.09(s,3H),1.08-2.26(m,21H),1.07(s,3H),1.05(s,3H),1.01(s,3H),0.99(s,3H)。
实施例18
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-1-(3-(4-甲氧基-N-甲基-4-氧代丁酰氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-1-(3-(4-甲氧基-N-甲基-4-氧代丁酰氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸叔丁基酯的制备
向含有(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(3-(4-甲氧基-N-甲基-4-氧代丁酰氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(0.1g,0.132mmol)的小瓶中添加草酰氯(2M于DCM中)(2mL,4.00mmol)。在室温下搅拌该溶液2.5h并在减压下浓缩。将残余物溶解于DCM中并再浓缩2次以去除剩余草酰氯。在真空下干燥残余物后,将其溶解于DCE(2mL)中并添加二异丙基乙胺(0.069mL,0.396mmol),随后添加N1,N1-二甲基乙烷-1,2-二胺(0.022mL,0.198mmol)。在室温下搅拌该混合物67h,然后用7mL水稀释并用二氯甲烷(3×7mL)萃取。经硫酸钠干燥合并的有机层,过滤并在减压下浓缩。通过闪式色谱使用12g硅胶柱和0-10%甲醇/二氯甲烷梯度洗脱纯化残余物。合并含有产物的级分并在减压下浓缩,得到灰白色泡沫状物形式的产物(73.4mg,0.089mmol,产率67%)。LC/MS:m/e828.6(M+H)+,2.54分钟(方法1)。
步骤2:向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-(2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-1-(3-(4-甲氧基-N-甲基-4-氧代丁酰氨基)丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸叔丁基酯(73mg,0.088mmol)的DCM(1mL)溶液中添加TFA(0.1mL,1.298mmol)。在室温下搅拌该混合物16h过夜,然后在氮气流下浓缩。用1,4-二噁烷(2mL)稀释残余物并加热至75℃。在加热22h后,将混合物冷却至室温。然后用1NHCl将其酸化并用热风机加热并使其在室温下静置过夜。当无晶体形成时,通过制备型HPLC(方法1)来纯化混合物。合并含有产物的级分并在减压下浓缩。再次使用相同HPLC方法将残余物再纯化。合并含有产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的产物(14mg,0.018mmol,产率21%)。LC/MS:m/e772.5(M+H)+,2.05分钟(方法1)。
实施例19至21
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aS,9S,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-(1-羧基丙-1-烯-2-基)-3a-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(实施例19)、4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aS,9S,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-(1-羧基丙-2-基)-3a-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体1(实施例20)和4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aS,9S,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-(1-羧基丙-2-基)-3a-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体2(实施例21)的制备
步骤1:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-溴丙-1-烯-2-基)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(3.02g,4.29mmol)的CCl4(50mL)溶液中添加NBS(0.954g,5.36mmol)。在室温下搅拌该混合物15.5h,然后通过硅藻土垫过滤以去除固体并在减压下浓缩滤液。通过闪式色谱使用160g硅胶柱和0-10%乙酸乙酯/己烷梯度洗脱纯化残余物。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到2.22g白色泡沫状的产物(纯度70%),其未经额外纯化即用于下一步骤。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δ=7.87(d,J=8.2Hz,2H),7.42-7.30(m,5H),7.16(d,J=7.9Hz,2H),5.26(d,J=4.9Hz,1H),5.22-5.07(m,3H),5.04(s,1H),4.01-3.96(m,2H),3.09(td,J=11.1,4.7Hz,1H),1.58(s,9H),0.98(s,3H),0.94(s,3H),0.90(s,6H),0.80(s,3H),2.36-0.78(m,22H)。
步骤2:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(4-乙氧基-4-氧代丁-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
向含有(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(3-溴丙-1-烯-2-基)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(1.5g,1.339mmol)的1,4-二噁烷(20mL)和乙醇(10mL)溶液的可加压容器中添加碳酸钾(0.370g,2.68mmol)。通过鼓泡氮气使混合物脱气10分钟,并添加四(三苯基膦)钯(0.077g,0.067mmol)。对混合物抽真空并用氮气回填3次,然后用一氧化碳填充并抽真空两次,最后填充至85psi一氧化碳,并在油浴中加热至85℃。在加热24h后,将混合物冷却至室温,用25mL水稀释,并用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机层,经硫酸钠干燥,过滤并在减压下浓缩。通过闪式色谱使用90g硅胶柱和0-10%EtOAc/己烷梯度洗脱纯化残余物。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到主要和次要产物,主要产物(0.591g,0.761mmol,产率57%)是标题化合物。LC/MS:m/e794.5(M+18),4.08分钟(方法1)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δ=7.87(d,J=7.9Hz,2H),7.45-7.29(m,5H),7.16(d,J=7.6Hz,2H),5.26(d,J=5.5Hz,1H),5.20-5.05(m,2H),4.97(s,1H),4.84(s,1H),4.14(q,J=7.1Hz,2H),3.11-2.95(m,3H),2.37-2.18(m,2H),2.08(dd,J=17.1,6.4Hz,1H),2.01-1.85(m,2H),1.58(s,9H),0.97(s,3H),0.94(s,3H),0.90(s,6H),1.72-0.88(m,20H),0.80(s,3H)。
步骤3:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(4-乙氧基-4-氧代丁-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(4-乙氧基-4-氧代丁-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(0.588g,0.757mmol)的DCE(7mL)溶液中添加三乙胺(0.169mL,1.211mmol)、叔丁基二甲基甲硅烷(0.251mL,1.513mmol)和乙酸钯(II)(0.042g,0.189mmol)。用氮气吹扫混合物并加热至60℃。加热5h后,将混合物冷却至室温,通过硅藻土垫过滤以去除固体并在减压下浓缩。粗产物未经额外纯化即用于下一步骤。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δ=7.86(d,J=7.9Hz,2H),7.15(d,J=8.2Hz,2H),5.26(d,J=5.5Hz,1H),4.97(s,1H),4.83(s,1H),4.13(q,J=7.2Hz,2H),3.11-2.95(m,3H),2.30-2.21(m,2H),2.08(dd,J=17.1,6.4Hz,1H),2.02-1.91(m,1H),1.88-1.79(m,1H),1.57(s,9H),0.94(s,9H),1.71-0.84(m,35H),0.27(s,6H)。
步骤4:(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(4-乙氧基-4-氧代丁-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(4-乙氧基-4-氧代丁-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(0.607g,0.757mmol)的THF(10mL)溶液中添加四丁基氟化铵水合物(0.317g,1.136mmol)。在室温下搅拌该黄色溶液3.5h,然后用20mL水和10mL1NHCl稀释并用二氯甲烷(3×30mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机层,经硫酸钠干燥,过滤并在减压下浓缩。通过闪式色谱使用40g硅胶柱和0-50%乙酸乙酯/己烷梯度洗脱纯化残余物。合并含有产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的产物(0.485g,0.706mmol,产率93%)。LC/MS:m/e685.5(M-H)-,2.90分钟(方法1)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δ=7.87(d,J=7.93Hz,2H),7.16(d,J=8.24Hz,2H),5.27(d,J=4.58Hz,1H),4.99(s,1H),4.86(s,1H),4.15(q,J=7.02Hz,2H),2.97-3.06(m,3H),2.30(d,J=12.82Hz,1H),2.24(td,J=12.13,3.20Hz,1H),2.01-2.14(m,2H),1.97(dd,J=12.51,7.93Hz,1H),1.58(s,9H),1.27(t,J=7.02Hz,3H),1.01(s,3H),1.00-1.72(m,17H),0.99(s,3H),0.97(s,3H),0.91(s,6H)。
步骤5:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-1-(4-乙氧基-4-氧代丁-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸叔丁基酯HCl的制备
向含有(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(叔丁氧基羰基)苯基)-1-(4-乙氧基-4-氧代丁-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(0.15g,0.218mmol)的烘箱干燥的圆底烧瓶中添加草酰氯(2M于DCM中)(5mL,10.00mmol)。在室温下搅拌该混合物2.5h并在减压下浓缩。将残余物溶解于DCM中并再浓缩2次以去除任何过量草酰氯。将粗产物溶解于DCE(2mL)中并添加二异丙基乙胺(0.114mL,0.655mmol),随后添加N,N-二甲基乙二胺(0.036mL,0.328mmol)和DMAP(1mg,8.19μmol)。在室温下搅拌该混合物20h,然后用水(10mL)稀释并用二氯甲烷(3×10mL)萃取。经硫酸钠干燥合并的有机层,过滤并在减压下浓缩。通过闪式色谱使用12g硅胶柱和0-10%甲醇/二氯甲烷梯度洗脱纯化残余物。合并含有产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的标题化合物(0.12g,0.151mmol,产率69.3%)。LC/MS:m/e757.6(M+H)+,2.29分钟(方法6)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δ=12.41(br.s.,1H),7.87(d,J=8.24Hz,2H),7.73(br.s.,1H),7.15(d,J=8.24Hz,2H),5.24-5.28(m,1H),4.98(s,1H),4.83(s,1H),4.14(q,J=7.32Hz,2H),3.62-3.80(m,2H),3.05-3.20(m,3H),2.95-3.03(m,2H),2.81-2.89(m,6H),2.42-2.51(m,1H),2.36(d,J=14.04Hz,1H),2.09(dd,J=17.40,6.41Hz,1H),1.86-1.99(m,2H),1.58(s,9H),1.26(t,J=7.17Hz,3H),0.99(s,3H),0.95-1.72(m,17H),0.96(s,3H),0.95(s,3H),0.90(s,6H)。
步骤6:向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-(二甲基氨基)乙基氨基甲酰基)-1-(4-乙氧基-4-氧代丁-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸叔丁基酯(0.115g,0.145mmol)的1,4-二噁烷(2mL)溶液中添加1NNaOH(0.725mL,0.725mmol)。将混合物加热至85℃,保持39h。将NaOH(10N,0.1mL)添加至混合物中并再次将其加热至85℃。加热22h后,将混合物冷却至室温并用1NHCl酸化至pH=1。通过过滤来收集所形成的固体,得到85mg产物混合物,其未经额外纯化即直接用于下一步骤。向含有产物混合物的小瓶中添加3mL存在于1,4二噁烷中的4NHCl。在室温下搅拌该混合物2.5h,然后在氮气流下浓缩。通过制备型HPLC(方法1)来纯化残余物。合并含有产物混合物的级分并在减压下浓缩。将产物混合物溶解于乙酸(2mL)和甲醇(4mL)中,用氮气脱气并将20mg10%Pd/C添加至混合物中。在1ATMH2下搅拌该混合物3h,然后添加额外100mgPd/C并在1ATMH2下搅拌混合物。在搅拌21h后,通过硅藻土塞过滤混合物并在减压下浓缩。通过制备型HPLC(方法1)来纯化残余物。在第一制备型HPLC纯化中分离出三个主峰。合并含有单氢化产物的级分,浓缩并通过制备型HPLC(方法10)再纯化。浓缩另两种产物中的每一中,得到双-羟基化产物的两种非对映异构体。
实施例19:(分离物1)4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aS,9S,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-(1-羧基丙-1-烯-2-基)-3a-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(4.0mg,0.006mmol,产率4%)
LC/MS:m/e675.5(M+H)+,2.05分钟(方法1)。1HNMR(400MHz,氯仿-d,含有三滴甲醇-d4以增溶(参考7.27ppm处氯仿峰))δ=7.81(d,J=8.3Hz,2H),7.12(d,J=8.3Hz,2H),5.66(s,1H),3.35-3.29(m,2H),3.12(td,J=10.7,3.9Hz,1H),2.62(t,J=5.9Hz,2H),2.40(s,6H),2.00(s,3H),0.89(s,3H),0.86(s,3H),0.84(br.s.,3H),2.49-0.71(m,25H),0.65(s,3H),0.59(s,3H)。
实施例20:(分离物2)4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aS,9S,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-(1-羧基丙-2-基)-3a-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体1(6.5mg,0.010mmol,产率7%)
LC/MS:m/e677.6(M+H)+,2.19分钟(方法1)。
1HNMR(500MHz,氯仿-d,含有三滴甲醇-d4以增溶(参考7.27ppm处氯仿峰))δ=7.82(d,J=7.9Hz,2H),7.11(d,J=8.2Hz,2H),3.37(t,J=5.2Hz,2H),2.78-2.70(m,2H),2.50(s,6H),2.39-2.24(m,3H),2.16-2.08(m,2H),2.07-1.94(m,3H),1.76-1.60(m,4H),0.88(s,3H),0.84(br.s.,6H),0.74(d,J=6.1Hz,3H),1.51-0.70(m,17H),0.63(s,3H),0.59(s,3H)。
实施例21:(分离物3)4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aS,9S,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-(1-羧基丙-2-基)-3a-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体2(5.5mg,0.008mmol,产率5.5%)
LC/MS:m/e677.5(M+H)+,2.04分钟(方法1)。1HNMR(500MHz,氯仿-d,含有三滴甲醇-d4以增溶(参考7.27ppm处氯仿峰))δ=7.89(d,J=8.2Hz,2H),7.19(d,J=8.5Hz,2H),3.53-3.46(m,2H),2.96-2.88(m,2H),2.66(br.s.,6H),2.48-2.31(m,4H),2.20-0.74(m,37H),0.71(s,3H),0.65(s,3H)。
实施例22
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲基酯的制备
将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸(如WO13123019中所述制备)(0.1g,0.144mmol)的甲苯(2mL)和甲醇(0.5mL)溶液冷却至0℃。向该溶液中逐滴添加TMS-重氮甲烷(2M于乙醚中)(0.086mL,0.173mmol)。在气体逸出停止后,将混合物升温至室温并在室温下搅拌黄色溶液2h。通过小心地添加1mL乙酸使混合物呈酸性,然后在减压下浓缩。用饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)稀释残余物并用二氯甲烷(3×10mL)萃取。经硫酸钠干燥合并有机层,过滤并在减压下浓缩,得到灰白色泡沫状物形式的标题产物(0.086g,0.121mmol,产率84%)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ=5.35(br.s.,1H),5.19(d,J=5.0Hz,1H),4.71(br.s.,1H),4.59(br.s.,1H),3.69(s,3H),3.14-2.97(m,8H),2.74-2.41(m,6H),2.34-2.27(m,2H),2.22-2.13(m,2H),1.69(s,3H),2.06-0.78(m,40H)。
步骤2:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲基酯的制备
向含有4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲基酯(0.086g,0.121mmol)的烧瓶中添加乙酰基丙酮钴(II)盐(0.062g,0.243mmol)。用THF(2mL)稀释混合物并添加苯基甲硅烷(0.060mL,0.485mmol)。用氮气吹扫混合物,然后放置于氧气囊下。1.5h后,用二氯甲烷稀释混合物并通过4g硅胶柱(用10%MeOH/DCM洗涤)过滤。在减压下浓缩滤液。使用12g硅胶柱和0-8%MeOH/二氯甲烷梯度洗脱再纯化残余物。
合并含有主要分离物的级分并在减压下浓缩,得到56mg浅绿色固体,其未经额外纯化即用于下一步骤。
步骤3:向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸甲基酯(0.056g,0.077mmol)的1,4-二噁烷(2mL)溶液中添加NaOH(1N)(0.385mL,0.385mmol)并将混合物加热至70℃。加热混合物18h后,将其冷却至室温,并通过制备型HPLC(方法21)纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到白色固体形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸,TFA(9.2mg,11.1μmol,产率14%)。LC/MS:m/e713.6(M+H)+,1.44分钟(方法6)。1HNMR(400MHz,乙酸)δ=5.39(br.s.,1H),5.24(d,J=5.8Hz,1H),3.38-3.01(m,12H),2.65-2.55(m,1H),1.28(s,3H),1.26(s,3H),1.22(s,3H),1.12(s,3H),2.40-0.84(m,38H)。
实施例23
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚-5-基)乙基)氨基)-1-(2-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚-5-基)乙基)氨基)-1-(2-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙基酯的制备
向含有4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚-5-基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙基酯(46.5mg,0.068mmol)(如WO13169578中所述制备)的烧瓶中添加乙酰基丙酮钴(II)盐(34.8mg,0.135mmol)。用THF(2mL)稀释混合物并添加苯基甲硅烷(0.033mL,0.271mmol)。用氮气吹扫混合物,然后放置于氧气囊下。搅拌该混合物4.5h后,用二氯甲烷稀释并直接使用12g硅胶柱和0-10%MeOH/二氯甲烷梯度洗脱纯化。在减压下浓缩含有该两种主要分离物的级分,得到浅绿色固体形式的标题化合物(7.5mg,0.011mmol,产率16%)。LC/MS:m/e705.7(M+H)+,1.76分钟(方法6)。
步骤2:向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚-5-基)乙基)氨基)-1-(2-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙基酯(7.5mg,11μmol)的1,4-二噁烷(0.5mL)溶液中添加NaOH(1N)(0.074mL,0.074mmol)。将混合物升温至75℃,保持3小时,然后冷却至室温并通过制备型HPLC(方法22)纯化。合并含有预期产物的级分并在减压下浓缩,得到透明无色膜形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(2-氧杂-5-氮杂二环[2.2.1]庚-5-基)乙基)氨基)-1-(2-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸,TFA(1.8mg,2.3μmol,产率22%)。LC/MS:m/e677.7(M+H)+,1.40分钟(方法6)。1HNMR(500MHz,乙酸)δ=5.39(br.s.,1H),5.23(d,J=6.3Hz,1H),4.74(s,1H),4.57(s,1H),4.23-4.16(m,1H),3.98-3.44(m,11H),2.64-2.56(m,1H),2.41-0.74(m,48H)。
实施例A1
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-(3-羟基丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯的制备
向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(如WO201206190中所述制备)(1.5g,2.67mmol)和三乙胺(0.744mL,5.34mmol)的THF(30mL)溶液中添加二碳酸二-叔丁基酯(0.930mL,4.00mmol)。在室温下搅拌反应混合物15小时。然后用蒸馏水(15mL)淬灭反应混合物,用二氯甲烷(2×15mL)萃取。合并有机相,经硫酸钠干燥,过滤并在减压下浓缩,得到无色油状物形式的期望产物(1.8g,100%)。LCMS:m/e662.42(M+H)+,3.39min(方法4)。
步骤2.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2-甲基氧杂环丙烷-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯的制备
在0℃下,向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(1800mg,2.72mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中添加3-氯过苯甲酸(670mg,2.99mmol)。在0℃下搅拌反应混合物2小时,然后升温至室温保持2小时。然后用饱和Na2S2O3水溶液(25mL)淬灭反应混合物,用二氯甲烷(2×30mL)萃取,合并有机相,经硫酸钠干燥,过滤并在减压下浓缩,得到无色油状物形式的期望产物。在硅胶上利用0-30%乙酸乙酯/己烷纯化残余物,得到白色固体形式的期望产物(1.0g,54%)。LCMS:m/e678.39(M+H)+,3.69min(方法4)。
步骤3.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-(3-羟基丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯的制备
将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2-甲基氧杂环丙烷-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(200mg,0.295mmol)和HCl(0.516mL,2.065mmol)于THF(2mL)中的混合物搅拌2小时直至LCMS指示原料耗尽。在减压下浓缩反应混合物,将残余物溶解于乙腈(1mL)中并通过HPLC来纯化,得到白色固体形式的期望产物(30mg,15%)。LCMS:m/e578.5(M+H)+,1.93min(方法6)。
步骤4:在78℃下将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-(3-羟基丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(30mg,0.044mmol)和1NNaOH(0.443mL,0.443mmol)于二噁烷(1mL)中的混合物加热3小时。在冷却至室温后反应混合物沉淀。过滤出白色固体并用水(2mL)和乙腈(2mL)洗涤,得到期望产物(19mg,61%)。LCMS:m/e664.5(M+H)+,2.55min(方法6)。1HNMR(400MHz,丙酮)δ7.90(t,J=7.9Hz,1H),7.10(dd,J=8.0,1.5Hz,1H),7.02(dd,J=11.9,1.4Hz,1H),5.38(dd,J=6.1,1.9Hz,1H),5.01(d,J=1.8Hz,1H),4.88(s,1H),4.10(s,2H),2.72-1.08(m,23H),1.42(s,9H),1.15(s,3H),1.07(s,3H),1.04(s,3H),1.01(s,3H),0.99(s,3H)。
实施例A2
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-氨基-1-(3-羟基丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸的制备
在78℃下将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-氨基-1-(3-羟基丙-1-烯-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(6mg,10.38μmol)和1NNaOH(0.104mL,0.104mmol)的混合物加热3小时。将反应混合物冷却至室温,然后用1NHCl中和至pH约4至6,过滤出白色沉淀物并用蒸馏水洗涤,得到白色固体形式的期望产物(4mg,65%)。LCMS:m/e564.18(M+H)+,2.44min(方法4)。1HNMR(400MHz,乙酸)δ7.92(t,J=7.9Hz,1H),7.04(d,J=8.3Hz,1H),6.98(d,J=12.0Hz,1H),5.38(d,J=4.8Hz,1H),5.08(s,1H),5.00(s,1H),4.21(s,2H),2.78-2.60(m,1H),2.33-1.13(m,22H),1.16(s,3H),1.08(s,3H),1.03(s,3H),0.99(s,3H),0.97(s,3H)。
实施例A3
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2-甲基氧杂环丙烷-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2-甲基氧杂环丙烷-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯的制备
将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2-甲基氧杂环丙烷-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(150mg,0.221mmol)和氯化氢(1.106mL,4.43mmol)于THF(3mL)中的混合物搅拌30小时。停止反应并用蒸馏水(4mL)淬灭,用二氯甲烷(3×2mL)萃取,经硫酸钠干燥合并的有机相,过滤并在减压下浓缩,得到无色油状物形式的标题化合物(100mg,78%)。LCMS:m/e578.2(M+H)+,1.98min(方法4)。
步骤2.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2-甲基氧杂环丙烷-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯的制备
在120℃下,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2-甲基氧杂环丙烷-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(68.4mg,0.346mmol)、磷酸钾(110mg,0.519mmol)和碘化钾(28.7mg,0.173mmol)于乙腈(1mL)中的混合物加热2小时。用蒸馏水(3mL)淬灭反应混合物,用二氯甲烷(3×2mL)萃取,经Na2SO4干燥合并的有机相,过滤并在减压下浓缩,得到黄色油状物形式的粗产物。通过制备型HPLC来纯化粗产物,得到无色油状物形式的标题化合物(20mg,16%)。LCMS:m/e739.55(M+H)+,2.09min(方法6)。
步骤3.在78℃下,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2-甲基氧杂环丙烷-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(20mg,0.027mmol)和1NNaOH(0.271mL,0.271mmol)于二噁烷(1mL)中的混合物加热3小时。过滤反应混合物并通过制备型HPLC纯化,得到无色油状的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2-甲基氧杂环丙烷-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸(10mg,50%)。LCMS:m/e725.55(M+H)+,2.67min(方法6)。1HNMR(400MHz,乙腈-d3)δ7.81(t,J=8.0Hz,1H),7.04(dd,J=8.0,1.3Hz,1H),6.99(dd,J=12.2,1.4Hz,1H),5.33(dd,J=6.1,1.9Hz,1H),3.28-2.54(m,15H),2.21-0.98(m,22H),1.18(s,3H),1.07-0.99(m,9H),0.95(s,3H),0.93(s,3H)。
实施例A4和实施例A5
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸(非对映异构体1和非对映异构体2)的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯的制备
在室温下向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(2000mg,3.56mmol)和碳酸钠(1509mg,14.24mmol)于THF(50mL)和水(50mL)中的混合物中添加存在于THF(5mL)中的氯甲酸(9H-芴-9-基)甲基酯(1105mg,4.27mmol)。搅拌反应混合物2小时,用蒸馏水(10mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×6mL)萃取,经硫酸钠干燥合并的有机相,过滤并在减压下浓缩。使用硅胶利用0-30%乙酸乙酯/己烷作为流动相来纯化粗产物,得到白色固体形式的期望产物(2.3g,81%)。LCMS:m/e784.3(M+H)+,4.7min(方法4)。
步骤2.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2-甲基氧杂环丙烷-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯的制备
在0℃下,向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(950mg,1.212mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液中添加3-氯过氧苯甲酸(326mg,1.454mmol)。搅拌反应混合物18小时,用饱和Na2S2O3(25mL)淬灭并用二氯甲烷(2×30mL)萃取。用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤合并的有机相,经硫酸钠干燥,过滤并在减压下浓缩。使用硅胶利用0-30%乙酸乙酯/己烷作为流动相来纯化所得黄色油状物,得到白色固体形式的期望产物(780mg,80%)。LCMS:m/e800.29(M+H)+,3.21min(方法4)。
步骤3.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-氧代丙-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯的制备
在室温下,向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2-甲基氧杂环丙烷-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(780mg,0.975mmol)的THF(30mL)溶液中添加BF3.OEt2(0.247mL,1.950mmol)。在室温下搅拌反应混合物2小时,用蒸馏水(40mL)淬灭并用二氯甲烷(2×30mL)萃取。经硫酸钠干燥合并的有机相,过滤并在减压下浓缩。使用硅胶利用0-35%乙酸乙酯/己烷作为流动相来纯化粗产物,得到非对映异构体混合物形式的标题化合物(白色固体,480mg,62%)。LCMS:m/e800.6(M+H)+,3.40/3.61min(方法6)。
步骤4.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯的制备
在室温下,向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-氧代丙-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(60mg,0.075mmol)的THF(2mL)溶液中添加硼氢化钠(5.67mg,0.150mmol)。在室温下搅拌反应混合物2小时,然后用蒸馏水(2mL)淬灭并用二氯甲烷(2×2mL)萃取。经硫酸钠干燥合并的有机相,过滤并在减压下浓缩,得到非对映异构体混合物形式的标题化合物(白色固体,50mg,83%)。LCMS:m/e802.6/802.6(M+H)+,2.98/3.41min(方法6)。
步骤5.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯的制备
在20℃下,向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(50mg,0.062mmol)的THF(1mL)溶液中添加哌啶(106mg,1.247mmol)。在20℃下搅拌反应混合物2小时,然后在减压下浓缩。将残余物溶解于乙腈(2mL)中并通过制备型HPLC纯化,得到标题化合物的两种非对映异构体:白色固体形式的非对映异构体1(12mg,33%)和非对映异构体2(20mg,55%)。LCMS:m/e580.5/580.6(M+H)+,1.56/1.60min(方法6)。
步骤6.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯的制备
在120℃下,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构体1)、4-(2-氯乙基)硫代吗啉1,1-二氧化物(20.46mg,0.103mmol)、磷酸钾(21.97mg,0.103mmol)和碘化钾(5.73mg,0.034mmol)于乙腈(1mL)中的混合物加热15小时。用水(2mL)淬灭反应混合物并用二氯甲烷(2×2mL)萃取。经硫酸钠干燥合并的有机相,过滤并在减压下浓缩,得到白色固体形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构体1)(9mg,35%)。LCMS:m/e741.44(M+H)+,2.00min(方法4)。
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构体2)是按照上文针对非对映异构体1所述相同的方法使用4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构体2)作为原料来制备。分离出白色固体形式的产物(22mg,86%)。LCMS:m/e741.4(M+H)+,2.24min(方法4)。
步骤7.在80℃下,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构体1)(9mg,0.012mmol)和氢氧化钠(0.297mL,0.297mmol)于乙腈(1mL)中的混合物加热2小时。过滤反应混合物并通过制备型HPLC纯化,得到白色固体形式的实施例A4:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸(非对映异构体1)(5mg,22%)。LCMS:m/e727.6(M+H)十,1.34min(方法6)。1HNMR(500MHz,乙酸)δ7.97(t,J=8.0Hz,1H),7.10(dd,J=8.0,1.4Hz,1H),7.04(dd,J=11.8,1.3Hz,1H),5.44(d,J=4.7Hz,1H),3.86(dd,J=11.2,5.7Hz,1H),3.67-3.54(m,1H),3.47-3.24(m,8H),3.22-3.00(m,4H),2.63-2.43(m,1H),2.35-2.22(m,2H),2.17-1.30(m,21H),1.31(s,3H),1.13(s,3H),1.12(s,3H),1.05(s,3H),1.02(s,3H),1.00(d,J=6.9Hz,3H)。
实施例A5:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸(非对映异构体2)是按照上文针对非对映异构体1所述方法使用4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构体2)作为原料来制备。分离得到白色固体形式的产物(13mg,57%)。LCMS:m/e727.6(M+H)+,1.93min(方法6)。1HNMR(400MHz,乙腈-d3)δ7.81(t,J=7.9Hz,1H),7.03(dd,J=8.0,1.5Hz,1H),7.00-6.93(m,1H),5.31(dd,J=6.0,1.8Hz,1H),3.34-2.89(m,14H),2.65-2.47(m,1H),2.18-1.05(m,23H),1.16(s,3H),1.04(s,3H),0.98(s,3H),0.95(s,3H),0.93(s,3H),0.76(d,J=6.8Hz,3H)。
实施例A6和实施例A7
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-(1-羧基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸(非对映异构体1和非对映异构体2)的制备
步骤1.2-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-9-(3-氟-4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-1-基)丙酸的制备
在20℃下,经0.5h至1h向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-氧代丙-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构混合物)(150mg,0.187mmol)的tBuOH(4mL)和THF(8mL)溶液中添加磷酸二氢钠(202mg,1.687mmol)和亚氯酸钠(115mg,1.275mmol)的水(5mL)溶液。在20℃下将反应混合物再搅拌1小时,用水(10mL)淬灭并用二氯甲烷(2×10mL)萃取。经硫酸钠干燥合并的有机相,过滤并在减压下浓缩,得到非对映异构体混合物形式的标题化合物(白色固体,100mg,65%)。LCMS:m/e816.3(M+H)+,2.68min(方法4)。
步骤2.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-1-(1-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯的制备
在20℃下,向2-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-9-(3-氟-4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-1-基)丙酸(100mg,0.123mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中添加亚硫酰氯(0.045mL,0.613mmol)。在20℃下搅拌反应混合物2小时,然后在减压下浓缩,得到褐色残余物。将甲醇(4mL)缓慢添加至残余物中并将混合物再搅拌10分钟。然后在减压下浓缩反应混合物,得到非对映异构体混合物形式的标题化合物(褐色固体,96mg,94%)。LCMS:m/e830.35/830.34(M+H)+,3.59/3.83min(方法4)。
步骤3.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-1-(1-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构体1和非对映异构体2)的制备
在20℃下,向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-1-(1-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(96mg,0.116mmol)的THF(1mL)溶液中添加哌啶(197mg,2.313mmol)。搅拌反应混合物1小时,然后在减压下浓缩。将残余物溶解于乙腈(1mL)中并通过制备型HPLC来纯化该透明溶液,得到标题化合物的两种非对映异构体:白色固体形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-1-(1-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构体1)(12mg,17%)。LCMS:m/e607.24(M)+/591.25(M-NH2)+,1.88min(方法4)。和白色固体形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-1-(1-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构体2)(23mg,33%)。LCMS:m/e607.24(M)+/591.25(M-NH2)+,2.00min(方法4)。
步骤4.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构体1和非对映异构体2)的制备
在120℃下,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-1-(1-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构体1)(12mg,0.020mmo1)、磷酸钾(24.10mg,0.114mmol)、4-(2-氯乙基)硫代吗啉1,1-二氧化物(22.44mg,0.114mmol)和碘化钾(6.28mg,0.038mmol)于乙腈(1mL)中的混合物加热15小时。用水(2mL)淬灭反应混合物,用二氯甲烷(2×2mL)萃取,经硫酸钠干燥,过滤并在减压下浓缩,得到白色固体形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构体1)(10mg,34%)。LCMS:m/e769.33(M+H)+,2.24min(方法4)。
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构体2)是按照上文针对非对映异构体1的合成所述方法使用4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-1-(1-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构体2)作为原料来制备。分离出白色固体形式的产物(16mg,55%)。LCMS:m/e769.33(M+H)+,2.26min(方法4)。
步骤5.在80℃下,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构体1)(10mg,0.013mmol)和氢氧化钠(0.130mL,0.130mmol)的混合物加热2小时。过滤反应混合物并通过制备型HPLC纯化,得到白色固体形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-(1-羧基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸(非对映异构体1)(4mg,39%)。LCMS:m/e741.25(M+H)十,1.55min(方法4)。1HNMR(500MHz,乙腈-d3)δ7.85(t,J=7.9Hz,1H),7.08(dd,J=8.0,1.6Hz,1H),7.03(dd,J=12.1,1.3Hz,1H),5.37(dd,J=6.2,1.8Hz,1H),3.34-3.07(m,7H),3.06-2.88(m,5H),2.81-2.66(m,1H),2.36-2.14(m,2H),2.07-1.26(m,21H),1.22(s,3H),1.15(d,J=7.1Hz,3H),1.06(s,3H),1.05(s,3H),1.00(s,3H),0.98(s,3H)。
实施例A7:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-(1-羧基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸(非对映异构体2)是按照上文针对4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-(1-羧基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸(非对映异构体1)的合成所述方法使用4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-甲氧基-1-氧代丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)-2-氟苯甲酸甲基酯(非对映异构体2)作为原料来制备。分离出白色固体形式的标题化合物(7mg,69%)。LCMS:m/e741.5(M+H)+,2.21min(方法4)。1HNMR(500MHz,乙腈-d3)δ7.85(t,J=8.0Hz,1H),7.08(dd,J=8.0,1.5Hz,1H),7.03(dd,J=12.1,1.3Hz,1H),5.37(dd,J=6.1,1.7Hz,1H),3.31-3.08(m,7H),3.07-2.97(m,4H),2.95-2.85(m,1H),2.84-2.70(m,2H),2.18(dd,J=17.3,6.4Hz,1H),2.09-1.27(m,21H),1.21(s,3H),1.09(s,3H),1.08(d,J=5.4Hz,3H),1.15(s,3H),1.00(s,3H),0.98(s,3H)。
实施例A8
(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)-9-(4-羧基环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
步骤1.(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰基-9-羟基-5a,5b,8,8,11a-五甲基二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
在60℃下,将(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰基-9-羟基-5a,5b,8,8,11a-五甲基二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(1.6g,3.49mmol)、碳酸钾(0.964g,6.98mmol)和(溴甲基)苯(0.435mL,3.66mmol)于DMF(10mL)中的混合物加热18小时。将反应混合物冷却至室温并添加100mL水。收集白色沉淀物并在真空下干燥,得到白色固体形式的期望产物(1.7g,89%)。LCMS:m/e549.3(M+H)+,2.54min(方法4)。
步骤2.(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bS)-3a-((苄氧基)羰基)-9-羟基-5a,5b,8,8,11a-五甲基二十氢-1H-环戊二烯并[a]-1-甲酸的制备
在0℃下,向氢氧化钠(1.749g,43.7mmol)的水(30mL)溶液中缓慢添加二溴(0.789mL,15.31mmol),在0℃下搅拌反应混合物20min,将此刚制备的橙色溶液缓慢添加至(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰基-9-羟基-5a,5b,8,8,11a-五甲基二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(1.2g,2.187mmol)的二噁烷(40mL)溶液中。在0℃下搅拌反应混合物4小时,然后升温至室温并搅拌15小时。然后通过浓HCl将反应混合物中和至pH=3至4并用二氯甲烷(2×40mL)萃取。经硫酸钠干燥合并的有机相,过滤并在减压下浓缩。使用硅胶利用0-60%乙酸乙酯/己烷作为流动相来纯化粗产物,得到白色固体形式的期望产物(1.1g,91%)。LCMS:m/e549.18(M-H)-,2.26min(方法4)。
步骤3.(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-1-((叠氮基羰基)氨基)-9-羟基-5a,5b,8,8,11a-五甲基二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
在75℃下,将(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bS)-3a-((苄氧基)羰基)-9-羟基-5a,5b,8,8,11a-五甲基二十氢-1H-环戊二烯并[a]-1-甲酸(1100mg,1.997mmol)、叠氮磷酸二苯酯(1.076mL,4.99mmol)和三乙胺(0.835mL,5.99mmol)于二噁烷(30mL)中的混合物加热2小时直至TLC指示原料耗尽。在减压下浓缩反应混合物并使用硅胶利用0-42%乙酸乙酯/己烷作为流动相来纯化残余物,得到白色固体形式的标题化合物(1.2g,100%)。LCMS:m/e589.29(M-H)-,2.40min(方法4)。
步骤4.(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-1-((叠氮基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
在20℃下,将(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,9S,11aR,11bR,13aR,13bR)-1-((叠氮基羰基)氨基)-9-羟基-5a,5b,8,8,11a-五甲基二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(1.2g,2.031mmol)和PCC(1.095g,5.08mmol)于THF(20mL)中的混合物搅拌17小时。在减压下浓缩反应混合物并在硅胶上利用0-35%乙酸乙酯/己烷作为流动相来纯化残余物,得到无色油状物形式的产物(1.15g,96%)。LCMS:m/e589.29(M+H)十,2.48min(方法4)。
步骤5.(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-1-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
向(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-1-((叠氮基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(1.15g,1.953mmol)的THF(20mL)溶液中添加1N氢氧化钠(9.77mL,9.77mmol)。搅拌反应混合物1小时直至原料耗尽。向反应混合物中添加HCl(0.593mL,19.53mmol),将反应混合物再搅拌2小时并用二氯甲烷(3×15mL)萃取,经硫酸钠干燥合并的有机相,过滤并在减压下浓缩,得到浅黄色固体形式的标题化合物(1.0g,96%)。LCMS:m/e520.28(M+H)+,2.30min(方法4)。
步骤6.(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
在20℃下,将(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-1-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(97055-013,011)(1.05g,2.020mmol)、二碳酸二-叔丁基酯(0.704mL,3.03mmol)和三乙胺(0.845mL,6.06mmol)于THF(10mL)中的混合物搅拌48小时。用蒸馏水(15mL)淬灭反应混合物并用二氯甲烷(2×15mL)萃取,合并有机层,经硫酸钠干燥,过滤并在减压下浓缩,得到粗产物,使用硅胶利用0-40%乙酸乙酯/己烷作为流动相来纯化粗产物,得到白色固体形式的产物(0.83g,66%)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δ7.47-7.31(m,5H),5.14(d,J=6.5Hz,2H),2.63-2.47(m,1H),2.46-2.36(m,1H),2.29(d,J=12.0Hz,1H),2.23-2.12(m,2H),2.01-1.90(m,1H),1.86(dd,J=12.5,7.9Hz,1H),1.75-1.64(m,1H),1.62-1.09(m,17H),1.46(s,9H),1.09(s,3H),1.04(s,3H),0.94(s,3H),0.93(s,3H),0.75(s,3H)。
步骤7.(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
在-78℃下,向(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-氧代二十氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(0.83g,1.339mmol)的THF(10mL)溶液中添加双(三甲基甲硅烷基)氨化钾(2.94mL,2.68mmol)。在-78℃下搅拌反应混合物15分钟,添加存于4mLTHF中的1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(0.526g,1.473mmol)。在-78℃下搅拌反应混合物2小时。用蒸馏水(20mL)淬灭反应混合物并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。合并有机相,经硫酸钠干燥,并在减压下浓缩。使用硅胶利用0-33%乙酸乙酯/己烷作为流动相来纯化粗产物,得到无色油状物形式的标题化合物,在真空下将其干燥,得到白色泡沫状物固体(0.5g,50%)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δ7.49-7.30(m,5H),5.58(dd,J=6.7,1.8Hz,1H),5.14(d,J=8.4Hz,2H),2.29(d,J=12.0Hz,1H),2.24-2.12(m,3H),1.99-1.07(m,19H),1.46(s,9H),1.13(s,3H),1.03(s,3H),0.93(s,3H),0.91(s,3H),0.73(s,3H)。
步骤8.(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)-9-(4-(乙氧基羰基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
在76℃下,将4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊-2-基)环己-3-烯甲酸乙基酯(149mg,0.532mmol)、(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aR,11bR,13aR,13bR)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-9-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(200mg,0.266mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(15.37mg,0.013mmol)和碳酸氢钠(112mg,1.330mmol)于二噁烷(5mL)和水(5mL)中的混合物加热3小时。用蒸馏水(10mL)淬灭反应混合物,并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。合并萃取物,经硫酸钠干燥,过滤并在减压下浓缩。使用硅胶利用0-25%乙酸乙酯/己烷作为流动相来纯化粗产物,得到无色油状的标题化合物(0.15g,75%)。LCMS:m/e778.65(M+Na)+,3.77min(方法6)。
步骤9.(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)-9-(4-(乙氧基羰基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
在60℃下,将(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)-9-(4-(乙氧基羰基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(80mg,0.106mmol)、叔丁基二甲基甲硅烷(24.61mg,0.212mmol)、乙酸钯(II)(11.88mg,0.053mmol)和三乙胺(0.044mL,0.317mmol)于二氯乙烷(2mL)中的混合物加热3小时。然后通过硅胶垫过滤混合物以去除Pd催化剂,在减压下浓缩滤液,得到黄色油状的粗产物。将此黄色油状物溶解于2mLTHF中并用TBAF(111mg,0.317mmol)处理。搅拌该混合物2小时直至原料耗尽。用1NHCl处理反应混合物直至达到pH4。添加水(2mL)并形成白色沉淀物。收集沉淀物并干燥,得到白色固体形式的标题化合物(45mg,64%)。LCMS:m/e688.6(M+Na)+,2.71min(方法6)。
步骤10.在80℃下,将(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)-9-(4-(乙氧基羰基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(6mg,9.01μmol)和氢氧化钠(0.090mL,0.090mmol)的乙腈(1mL)溶液加热3小时。过滤反应混合物并通过HPLC纯化,得到白色固体形式的(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)-9-(4-羧基环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(1.5mg,25%)。LCMS:m/e636.23(M-H)-,2.28min(方法4)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ5.39(br.s.,1H),5.21(t,J=5.6Hz,1H),2.80-1.04(m,30H),1.46(s,9H),1.01-0.77(m,15H)。
实施例A9
4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)-3a-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)-3a-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙基酯的制备
在室温下,向(1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)-9-(4-(乙氧基羰基)环己-1-烯-1-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(10mg,0.015mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中添加草酰氯(0.015mL,0.030mmol),搅拌反应混合物1小时直至原料耗尽。在减压下浓缩反应混合物并在真空下干燥2小时,得到黄色油状的中间体酰氯。向N1,N1-二甲基乙烷-1,2-二胺(1.986mg,0.023mmol)和Hunig碱(5.25μL,0.030mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中添加存在于二氯甲烷(1mL)中的先前制备的酰氯,搅拌反应混合物16小时,用蒸馏水(2mL)淬灭并用二氯甲烷(2×2mL)萃取,用盐水(3mL)洗涤合并的有机相,经硫酸钠干燥,过滤并在减压下浓缩,得到褐色油状物形式的标题化合物(6mg,54%)。LCMS:m/e736.6(M+H)+,3.02min(方法3)。
步骤2.4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)-3a-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸的制备
在80℃下,将4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-1-((叔丁氧基羰基)氨基)-3a-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基甲酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)环己-3-烯甲酸乙基酯(6mg,8.15μmol)和NaOH(0.082mL,0.082mmol)于二噁烷(1mL)中的混合物加热2小时。过滤反应混合物并通过HPLC纯化,得到无色油状的期望产物(1.1mg,18%)。LCMS:m/e708.5(M+H)+,1.76min(方法6)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ7.51(s,1H),5.48-5.31(m,1H),5.20(d,J=6.3Hz,1H),3.84-3.46(m,2H),3.19(d,J=5.5Hz,2H),2.86(br.s.,6H),2.60(br.s.,1H),2.42-1.04(m,29H),1.44(s,9H),1.01-0.76(m,15H)。
实施例B1
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-羟基-1-甲氧基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1,2-二羟基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1和4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1,2-二羟基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2的制备
向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代-4-硫代吗啉基)乙基)氨基)-1-异丙烯基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(1.11g,1.57mmol)、柠檬酸单水合物(0.662g,3.15mmol)和4-甲基吗啉N-氧化物(0.203g,1.73mmol)的混合物中添加叔丁醇(30mL),随后添加水(30mL)。然后添加四氧化锇(2.5%于叔丁醇中)(0.800g,0.988mL,0.079mmol)并在室温下将所得混合物搅拌27小时。在真空中将该橄榄绿色溶液浓缩成残余物,然后重新溶解于THF(150mL)中。用盐水(75mL)洗涤该溶液,然后用盐水(50mL)与1NNaOH水溶液(10mL)的混合物将有机相洗涤两次,然后再用盐水(50mL)洗涤一次。用THF(75mL)反萃取合并的水性萃取物并合并有机相。向有机相中添加硅胶(11g)并在真空中将混合物浓缩成松散粉末,将其在真空烘箱中在50℃下放置16h。将该松散粉末装载于80g硅胶柱顶部,用100%DCM至9∶1DCM∶MeOH梯度洗脱得到标题化合物的两种非对映异构体的分离。从柱洗脱出来的标题化合物的该两种异构体中的第一种标记为异构体1(0.232g,产率20%)且从柱洗脱出来的标题化合物的该两种异构体中的第二种标记为异构体2(0.476g,产率41%)。
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1,2-二羟基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1的分析数据:LCMS:m/e739.7(M+H)+,2.12min(方法5)。1HNMR(500MHz,1∶1CDCl3∶MeOD,MeOD锁场)δppm7.96-7.87(m,J=8.1Hz,2H),7.27-7.17(m,J=8.1Hz,2H),5.30(d,J=4.6Hz,1H),4.23(s,1H),3.91(s,3H),3.51(d,J=11.2Hz,1H),3.19-3.08(m,6H),3.08-2.96(m,2H),2.80-2.63(m,2H),2.63-2.50(m,1H),2.50-2.35(m,1H),2.23-2.05(m,2H),1.98-1.86(m,2H),1.86-1.61(m,6H),1.60-1.40(m,7H),1.39-1.24(m,4H),1.17(s,3H),1.15-1.08(m,1H),1.05(s,3H),1.04(s,3H),1.01(s,3H),0.95(s,3H),0.94(s,3H)。
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1,2-二羟基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2的分析数据:LCMS:m/e739.7(M+H)十,2.13min(方法5)。1HNMR(500MHz,1∶1CDCl3∶MeOD,MeOD锁场)δppm7.94-7.87(m,J=8.3Hz,2H),7.25-7.18(m,J=8.3Hz,2H),5.30(d,J=4.9Hz,1H),4.23(s,1H),3.91(s,3H),3.49(d,J=10.8Hz,1H),3.40(d,J=11.0Hz,1H),3.18-2.97(m,8H),2.78-2.64(m,2H),2.61-2.49(m,1H),2.49-2.38(m,1H),2.16(dd,J=17.2,6.2Hz,1H),2.06-1.98(m,1H),1.98-1.91(m,1H),1.91-1.83(m,1H),1.83-1.62(m,7H),1.60-1.32(m,8H),1.31-1.24(m,2H),1.18(s,3H),1.16(br.s.,3H),1.15-1.06(m,2H),1.04(s,3H),1.01(s,3H),0.95(s,3H),0.94(br.s.,3H)。
步骤2:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-羟基-1-甲氧基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在搅拌下,向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1,2-二羟基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2(0.020g,0.027mmol)和2,6-二-叔丁基-4-甲基吡啶(0.028g,0.135mmol)于氯仿(0.5mL)中的混合物中添加三氟甲磺酸甲酯(0.022g,0.135mmol)。将含有该溶液的小瓶密封并加热至70℃,保持18h。添加额外三氟甲磺酸甲酯(0.022g,0.135mmol)并再次将混合物加热至70℃,保持30min。用氯仿(2mL)稀释混合物并用饱和氯化铵水溶液(3×1mL)洗涤。通过氮气流浓缩有机相并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)纯化,得到双-TFA盐形式的标题化合物(0.0094g,产率35.4%)。LCMS:m/e753.8(M+H)+,2.31min(方法5)。1HNMR(400MHz,丙酮d6)δppm8.00-7.90(m,2H),7.35-7.25(m,J=8.6Hz,2H),5.34(dd,J=6.1,1.7Hz,1H),3.89(s,3H),3.43-3.35(m,3H),3.35(s,3H),3.32(dd,J=7.5,2.3Hz,2H),3.29-3.24(m,2H),3.24-3.11(m,6H),3.11-3.01(m,2H),2.45-2.36(m,1H),2.35-2.27(m,1H),2.27-2.18(m,2H),2.18-2.11(m,1H),2.00-1.92(m,3H),1.88-1.79(m,2H),1.79-1.70(m,2H),1.69-1.53(m,6H),1.53-1.41(m,4H),1.36(s,3H),1.32(d,J=11.0Hz,2H),1.19(s,3H),1.17(s,3H),1.09(s,3H),1.00(s,3H),0.98(s,3H)。
步骤3:将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-羟基-1-甲氧基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.094g,0.0096mmol)、氢氧化锂单水合物(0.0040g,0.096mmol)、甲醇(0.3mL)、THF(0.3mL)和水(0.3mL)的混合物搅拌加热至75℃,保持80min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法3)来纯化粗制混合物,得到双-TFA盐形式的标题化合物(0.0104g,产率>100%)。
LCMS:m/e739.6(M+H)+,2.08min(方法5)。1HNMR(400MHz,丙酮d6)δppm8.03-7.92(m,J=8.3Hz,2H),7.34-7.25(m,J=8.3Hz,2H),5.39-5.29(m,1H),4.05(s,1H),3.42-3.36(m,2H),3.35(s,3H),3.33-3.29(m,2H),3.29-3.24(m,2H),3.24-3.12(m,6H),3.11-3.02(m,2H),2.44-2.36(m,1H),2.36-2.27(m,1H),2.27-2.10(m,3H),2.01-1.89(m,3H),1.88-1.79(m,2H),1.79-1.70(m,2H),1.69-1.53(m,6H),1.53-1.42(m,4H),1.36(s,3H),1.32(d,J=12.7Hz,2H),1.19(s,3H),1.17(s,3H),1.10(s,3H),1.00(s,3H),0.98(s,3H)。
实施例B2
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1,2-二甲氧基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1,2-二甲氧基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在搅拌下,向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1,2-二羟基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2(0.020g,0.027mmol)和2,6-二-叔丁基-4-甲基吡啶(0.056g,0.271mmol)于氯仿(0.5mL)中的混合物中添加三氟甲磺酸甲酯(0.058g,0.352mmol)。将含有该溶液的小瓶密封并加热至70℃保持4h。用氯仿(1.5mL)稀释混合物并用饱和氯化铵水溶液(1mL)洗涤。用氯仿(2×1mL)反萃取水性洗液并合并有机相。通过氮气流浓缩合并的有机相并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)纯化,得到标题化合物(0.010g,产率48.2%)。LCMS:m/e767.7(M+H)+,2.34min(方法5)。1HNMR(400MHz,丙酮d6)δppm8.00-7.90(m,J=8.3Hz,2H),7.35-7.25(m,J=8.3Hz,2H),5.35(dd,J=6.0,1.3Hz,1H),3.90(s,3H),3.40(s,2H),3.39-3.34(m,2H),3.33(s,3H),3.32-3.26(m,1H),3.22(br.s.,3H),3.19(s,4H),3.17-3.12(m,2H),3.12-3.01(m,2H),2.65-2.55(m,1H),2.36(dd,J=12.0,8.8Hz,1H),2.28-2.17(m,2H),2.15-2.09(m,1H),2.03-1.92(m,2H),1.91-1.79(m,3H),1.78(s,1H),1.76-1.68(m,1H),1.66-1.54(m,6H),1.54-1.38(m,4H),1.34(s,4H),1.31(br.s.,1H),1.15(s,3H),1.15(s,3H),1.09(s,3H),1.00(s,3H),0.98(s,3H)。
步骤2:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1,2-二甲氧基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
在搅拌下,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1,2-二甲氧基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.0155g,0.016mmol)、氢氧化锂单水合物(0.0065g,0.156mmol)、甲醇(0.3mL)、THF(0.3mL)和水(0.3mL)的混合物加热至75℃保持80min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法3)来纯化粗制混合物,得到标题化合物(0.0118g,产率76%)。LCMS:m/e753.6(M+H)+,2.19min(方法5)。1HNMR(400MHz,丙酮d6)δppm7.98(d,J=8.3Hz,2H),7.30(d,J=8.1Hz,2H),5.35(d,J=4.9Hz,1H),3.43-3.25(m,9H),3.25-3.11(m,9H),3.11-2.98(m,2H),2.58(t,J=8.4Hz,1H),2.35(dd,J=11.9,8.7Hz,1H),2.29-2.16(m,2H),2.16-2.09(m,1H),2.03-1.90(m,2H),1.90-1.84(m,1H),1.80(d,J=18.1Hz,3H),1.75-1.67(m,1H),1.60(dd,J=15.9,7.8Hz,6H),1.54-1.38(m,4H),1.35(s,4H),1.31(br.s.,1H),1.17-1.12(m,6H),1.10(s,3H),1.00(s,3H),0.99(s,3H)。
实施例B3
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在搅拌下,向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代-4-硫代吗啉基)乙基)氨基)-1-异丙烯基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.050g,0.071mmol)和乙酰丙酮酸钴(II)(3.7mg,0.014mmol)于无水THF(1mL)中的混合物中添加苯基甲硅烷(0.015g,0.142mmol)。用氧气覆盖混合物并将小瓶密封,将混合物加热至70℃保持69h。将混合物移离热源。添加额外乙酰丙酮酸钴(II)(24mg,0.11mmol)和苯基甲硅烷(0.015g,0.142mmol),用氧气囊填充小瓶,并在室温下搅拌该混合物3h。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法4)纯化,得到双-TFA盐形式的标题化合物(0.0196g,产率29%)。LCMS:m/e723.6(M+H)+,2.20min(方法5)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δppm8.00-7.92(m,J=8.3Hz,2H),7.26-7.17(m,J=8.3Hz,2H),5.32(d,J=4.6Hz,1H),3.93(s,3H),3.35-3.10(m,8H),3.10-2.99(m,2H),2.93(d,J=13.2Hz,1H),2.89-2.77(m,1H),2.28-2.12(m,2H),2.12-1.91(m,4H),1.87(dd,J=13.8,5.3Hz,1H),1.83-1.76(m,1H),1.76-1.63(m,4H),1.63-1.34(m,11H),1.29(s,4H),1.25(s,4H),1.18(s,3H),1.12(s,3H),1.04(s,3H),0.97(s,3H),0.95(s,3H)。
步骤2:在搅拌下,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.0195g,0.021mmol)、氢氧化锂单水合物(0.0103g,0.246mmol)、甲醇(0.3mL)、THF(0.3mL)和水(0.3mL)的混合物加热至75℃保持80min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法3)来纯化粗制混合物,得到双-TFA盐形式的标题化合物(0.0186g,产率96%)。LCMS:m/e709.6(M+H)+,2.01min(方法5)。1HNMR(400MHz,1∶1CDCl3∶MeOD,MeOD锁场)δppm7.96-7.89(m,J=8.3Hz,2H),7.24-7.16(m,J=8.3Hz,2H),5.30(d,J=4.6Hz,1H),3.98(s,1H),3.37(s,1H),3.32-3.14(m,6H),3.14-2.99(m,6H),2.23-2.11(m,2H),2.11-1.99(m,2H),1.95-1.81(m,4H),1.81-1.68(m,3H),1.67-1.53(m,5H),1.53-1.36(m,6H),1.31-1.25(m,2H),1.24(s,3H),1.22(s,3H),1.17(s,3H),1.14(s,3H),1.04(s,3H),0.96(s,3H),0.95(br.s.,3H)。
实施例B4
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-甲氧基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-甲氧基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在搅拌下,向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.020g,0.021mmol)和2,6-二-叔丁基-4-甲基吡啶(0.043g,0.210mmol)于氯仿(0.5mL)中的混合物中添加三氟甲磺酸甲酯(0.035g,0.210mmol)。将含有该溶液的小瓶密封并加热至70℃保持80min。通过氮气流浓缩粗制混合物并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法4)纯化,得到双-TFA盐形式的标题化合物(0.0164g,产率81%)。LCMS:m/e737.7(M+H)+,2.34min(方法5)。1HNMR(400MHz,丙酮-d6)δppm7.99-7.91(m,J=8.3Hz,2H),7.34-7.27(m,J=8.3Hz,2H),5.34(dd,J=6.1,1.7Hz,1H),3.90(s,3H),3.43-3.27(m,4H),3.27-3.15(m,6H),3.13(s,3H),3.11-3.01(m,2H),2.44(t,J=8.1Hz,1H),2.27-2.18(m,2H),2.18-2.09(m,2H),2.04-1.95(m,2H),1.89-1.80(m,3H),1.80-1.71(m,2H),1.67-1.53(m,6H),1.53-1.44(m,3H),1.41(d,J=11.2Hz,1H),1.38-1.28(m,5H),1.17-1.14(m,6H),1.13(s,3H),1.09(s,3H),1.00(s,3H),0.98(s,3H)。
步骤2:在搅拌下,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-甲氧基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.0162g,0.017mmol)、氢氧化锂单水合物(0.0084g,0.201mmol)、甲醇(0.35mL)、THF(0.35mL)和水(0.2mL)的混合物加热至70℃保持20min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法5)来纯化粗制混合物,得到双-TFA盐形式的标题化合物(0.0151g,产率91%)。LCMS:m/e723.7(M+H)+,2.18min(方法5)。1HNMR(400MHz,丙酮-d6)δppm8.04-7.90(m,J=8.3Hz,2H),7.35-7.24(m,J=8.3Hz,2H),5.35(d,J=4.6Hz,1H),3.43-3.26(m,4H),3.26-3.21(m,3H),3.18(d,J=9.0Hz,3H),3.13(s,3H),3.11-3.00(m,2H),2.46(t,J=7.9Hz,1H),2.29-2.19(m,2H),2.19-2.11(m,2H),2.03-1.88(m,3H),1.88-1.70(m,6H),1.67-1.44(m,9H),1.41(d,J=11.0Hz,1H),1.35(s,3H),1.34-1.28(m,2H),1.15(s,6H),1.13(s,3H),1.10(s,3H),1.00(s,3H),0.99(s,3H)。
实施例B5
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体1的制备
在冰浴中冷却4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代-4-硫代吗啉基)乙基)氨基)-1-异丙烯基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.100g,0.142mmol)的THF(1mL)溶液并用硼烷-四氢呋喃复合物(1.0M于THF中)(0.340mL,0.340mmol)缓慢处理。在室温下搅拌该混合物16h,然后在70℃下搅拌30min。再次在冰浴中冷却该混合物并向其中添加乙醇(0.180mL,3.1mmol)和饱和乙酸钠水溶液(0.066mL),随后缓慢添加30%过氧化氢(0.092mL,0.90mmol)。在室温下将所得混合物搅拌3h。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法4)来纯化混合物,得到含有该反应的主要异构体产物的白色固体(56.7mg)。不对次要异构体进行分离。将一部分此固体(20.0mg,所回收总量的35.3%)溶解于MeOH(0.25mL)与THF(0.25mL)的混合物中并在70℃下用1.0MLiOH水溶液(0.252mL,0.252mmol)处理45min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法4)来纯化此混合物,随后用1MHCl水溶液处理产物级分且随后在真空中浓缩,得到白色固体形式的异构体1标题化合物的双HCl盐(0.0138g,总产率33.9%)。LCMS:m/e709.7(M+H)+,1.95min(方法5)。1HNMR(400MHz,1∶1CDCl3∶MeOD,MeOD锁场)δppm7.96-7.88(m,J=8.3Hz,2H),7.24-7.17(m,J=8.1Hz,2H),5.31(d,J=4.6Hz,1H),4.28(br.s.,3H),3.65(dd,J=10.9,6.2Hz,1H),3.46(dd,J=11.1,6.2Hz,1H),3.31-3.24(m,3H),3.23-3.13(m,2H),3.13-2.99(m,5H),2.42-2.25(m,2H),2.17(dd,J=17.2,6.2Hz,1H),2.09-2.01(m,1H),2.00-1.91(m,2H),1.90-1.78(m,3H),1.78-1.67(m,3H),1.66-1.38(m,11H),1.33-1.23(m,2H),1.20(s,3H),1.09(s,3H),1.04(s,3H),0.99-0.90(m,9H)。
实施例B6
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体2的制备
在冰浴中冷却4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代-4-硫代吗啉基)乙基)氨基)-1-异丙烯基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(1.00g,1.42mmol)的THF(10mL)溶液并用硼酸-四氢呋喃复合物(1.0M于THF中)(3.40mL,3.40mmol)缓慢处理。在室温下搅拌该混合物16h,然后在70℃下搅拌30min。再次在冰浴中冷却该混合物并向其中添加乙醇(0.90mL,15.4mmol)和饱和乙酸钠水溶液(0.33mL),随后缓慢添加30%过氧化氢(0.46mL,4.5mmol)。在室温下将所得混合物搅拌2.5h。向有机相中添加硅胶(11g)并在真空中将混合物浓缩成松散粉末,将其在真空烘箱中在50℃下放置16h。将该松散粉末装载于160g硅胶柱顶部,用100%DCM至9∶1DCM∶MeOH梯度洗脱分离出两种非对映异构体。该反应的主要异构体4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1首先自柱中洗脱出来(0.458g,产率44.6%)。LCMS:m/e723.6(M+H)+,2.14min(方法5)。1HNMR(400MHz,1∶1CDCl3∶MeOD,MeOD锁场)δppm7.94-7.88(m,J=8.3Hz,2H),7.25-7.18(m,J=8.3Hz,2H),5.33-5.26(m,1H),4.25(br.s.,1H),3.91(s,3H),3.74(dd,J=10.5,4.2Hz,1H),3.17-2.95(m,9H),2.78-2.62(m,2H),2.62-2.52(m,1H),2.47-2.38(m,1H),2.14(dd,J=17.1,6.4Hz,1H),2.00-1.80(m,4H),1.80-1.71(m,2H),1.71-1.48(m,10H),1.48-1.32(m,5H),1.30-1.18(m,3H),1.15(s,3H),1.09(d,J=14.9Hz,2H),1.01(s,6H),0.98(d,J=6.8Hz,3H),0.95(s,3H),0.94(s,3H)。
在反应中形成的两种异构体的次要产物在主要异构体后从柱中洗脱出来并混合有杂质。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法6)来再纯化含有次要异构体的这些不纯级分,得到固体(53.8mg)。将一部分此固体(25mg,总量的46.5%)溶解于MeOH(0.3mL)与THF(0.3mL)的混合物中并在70℃下用1.0MLiOH水溶液(0.263mL,0.263mmol)处理45min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法7)来纯化此混合物,得到白色固体游离碱形式的异构体2标题化合物(0.0115g,总产率5.2%)。LCMS:m/e710.5(M+H)+,2.18min(方法5)。1HNMR(400MHz,1∶1CDCl3∶MeOD,MeOD锁场)δppm7.86(d,J=8.1Hz,2H),7.13(d,J=8.3Hz,2H),5.27(d,J=4.6Hz,1H),3.43-3.35(m,2H),3.18-2.97(m,8H),2.80-2.65(m,2H),2.65-2.54(m,1H),2.54-2.43(m,1H),2.12(dd,J=16.9,5.9Hz,2H),1.94(s,4H),1.92-1.84(m,2H),1.79(dd,J=12.7,7.1Hz,1H),1.75-1.66(m,2H),1.65-1.36(m,11H),1.35-1.20(m,4H),1.15(s,3H),1.11(d,J=13.9Hz,1H),1.02(s,6H),0.94(s,6H),0.81(d,J=6.8Hz,3H)。
实施例B7
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-甲氧基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
在冰浴中冷却4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代-4-硫代吗啉基)乙基)氨基)-1-异丙烯基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸酯(0.100g,0.142mmol)的THF(1mL)溶液并用硼烷-四氢呋喃复合物(1.0M于THF中)(0.340mL,0.340mmol)缓慢处理。在室温下搅拌该混合物16h,然后在70℃下搅拌30min。再次在冰浴中冷却该混合物并向其中添加乙醇(0.180mL,3.1mmol)和饱和乙酸钠水溶液(0.066mL),随后缓慢添加30%过氧化氢(0.092mL,0.90mmol)。在室温下搅拌所得混合物3h。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法6)来纯化混合物,得到含有该反应的主要异构体产物的白色固体(56.7mg)。不对次要异构体进行分离。将一部分此固体(30.0mg,所回收总量的52.9%)溶解于氯仿(0.5mL)中并用2,6-二-叔丁基-4-甲基吡啶(0.065g,0.315mmol)和三氟甲磺酸甲酯(0.052g,0.315mmol)处理。在室温下搅拌该混合物16h,然后在70℃下搅拌30min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法3)来纯化此混合物,得到无色玻璃状固体形式的标题化合物的双TFA盐(0.0177g,总产率24.0%)。LCMS:m/e737.7(M+H)+,2.34min(方法5)。1HNMR(400MHz,丙酮d6)δppm8.03-7.93(m,J=8.3Hz,2H),7.35-7.26(m,J=8.1Hz,2H),5.40-5.30(m,1H),3.50(dd,J=9.5,6.8Hz,1H),3.36-3.06(m,17H),2.45-2.28(m,2H),2.28-2.19(m,2H),2.19-2.12(m,2H),1.96-1.69(m,6H),1.69-1.39(m,12H),1.39-1.34(m,1H),1.33(s,4H),1.13(s,3H),1.10(s,3H),1.01(s,3H),0.99(s,3H),0.90(d,J=6.8Hz,3H)。
实施例B8
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-氟丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1的制备
在冰浴中冷却4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代-4-硫代吗啉基)乙基)氨基)-1-异丙烯基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲酯(1.00g,1.42mmol)的THF(10mL)溶液并用硼烷-四氢呋喃复合物(1.0M于THF中)(3.40mL,3.40mmol)缓慢处理。在室温下搅拌该混合物16h,然后在70℃下搅拌30min。再次在冰浴中冷却该混合物并向其中添加乙醇(0.90mL,15.4mmol)和饱和乙酸钠水溶液(0.33mL),随后缓慢添加30%过氧化氢(0.46mL,4.5mmol)。在室温下将所得混合物搅拌2.5h。向有机层中添加硅胶(11g)并在真空中将混合物浓缩成松散粉末,将其在真空烘箱中在50℃下放置16h。将该松散粉末装载于160g硅胶柱顶部。用100%DCM至9∶1DCM∶MeOH梯度洗脱得到两种非对映异构体。该反应的主要异构体4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1首先从柱中洗脱出来(0.458g,产率44.6%)。LCMS:m/e723.6(M+H)+,2.14min(方法5)。1HNMR(400MHz,1∶1CDCl3∶MeOD,MeOD锁场)δppm7.94-7.88(m,J=8.3Hz,2H),7.25-7.18(m,J=8.3Hz,2H),5.33-5.26(m,1H),4.25(br.s.,1H),3.91(s,3H),3.74(dd,J=10.5,4.2Hz,1H),3.17-2.95(m,9H),2.78-2.62(m,2H),2.62-2.52(m,1H),2.47-2.38(m,1H),2.14(dd,J=17.1,6.4Hz,1H),2.00-1.80(m,4H),1.80-1.71(m,2H),1.71-1.48(m,10H),1.48-1.32(m,5H),1.30-1.18(m,3H),1.15(s,3H),1.09(d,J=14.9Hz,2H),1.01(s,6H),0.98(d,J=6.8Hz,3H),0.95(s,3H),0.94(s,3H)。
步骤2:4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-氟丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1(0.025g,0.035mmol)的DCM(1mL)溶液冷却至-78℃并用DAST(0.0078g,0.048mmol)处理。使混合物升温至室温并搅拌21h。浓缩反应混合物并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法8)纯化,得到双-TFA盐形式的标题化合物(0.0097g,产率29%)。LCMS:m/e725.6(M+H)+,2.35min(方法5)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δppm8.05-7.87(m,J=8.1Hz,2H),7.26-7.12(m,J=8.1Hz,2H),5.32(d,J=4.9Hz,1H),4.58-4.28(m,2H),3.93(s,3H),3.39-3.11(m,8H),3.11-2.98(m,2H),2.91(d,J=12.0Hz,2H),2.38-2.22(m,2H),2.22-2.11(m,2H),1.95(d,J=10.5Hz,4H),1.84-1.61(m,5H),1.55(s,2H),1.57(s,3H),1.51-1.31(m,6H),1.31-1.15(m,5H),1.06(s,3H),1.04(s,3H),0.97(br.s.,3H),0.95(br.s.,3H),0.91(d,J=6.6Hz,3H)。
步骤3:在搅拌下,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-氟丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.0095g,0.010mmol)、1.0M氢氧化锂单水合物水溶液(0.100mL,0.100mmol)、甲醇(0.3mL)和THF(0.3mL)的混合物加热至70℃保持45min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗制混合物,得到双-TFA盐形式的标题化合物(0.0152g,产率>100%)。LCMS:m/e711.4(M+H)+,2.19min(方法5)。1HNMR(400MHz,1∶1CDCl3∶MeOD,MeOD锁场)δppm7.96-7.88(m,J=8.3Hz,2H),7.25-7.17(m,J=8.1Hz,2H),5.31(d,J=4.6Hz,1H),4.49-4.38(m,1H),3.30-3.00(m,13H),2.33-2.21(m,2H),2.21-2.11(m,2H),2.11-2.03(m,2H),2.02-1.95(m,1H),1.94-1.78(m,3H),1.76(br.s.,1H),1.74-1.65(m,2H),1.65-1.55(m,4H),1.52(dd,J=14.1,3.1Hz,3H),1.47(br.s.,3H),1.45-1.37(m,2H),1.32-1.24(m,2H),1.21(s,3H),1.07(s,3H),1.05(s,3H),0.96(s,3H),0.95(s,3H),0.93(d,J=6.8Hz,3H)。
实施例B9
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1,2-二羟基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体1的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
向含有中间体3(4.00g,6.89mmol)的烧瓶中添加碳酸氢钠(2.90g,34.5mmol)。用THF(80mL)和水(25mL)稀释该混合物,然后添加9-芴基甲氧基羰基氯(2.140g,8.27mmol),并在室温下搅拌混合物。搅拌2h后,TLC显示反应完成。用350mLEtOAc稀释混合物并用水(3×100mL)洗涤。经MgSO4干燥有机相,过滤并在真空中浓缩。残余物(约5.5g灰白色玻璃状固体)通过硅胶色谱(96∶4己烷∶EtOAc至65∶35己烷∶EtOAc梯度洗脱超过10倍柱体积)来纯化,得到白色固体形式的产物。总回收量=4.25g(产率80%)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ7.96(d,J=8.3Hz,2H),7.80(d,J=7.6Hz,2H),7.64(t,J=6.8Hz,2H),7.44(td,J=7.2,4.0Hz,2H),7.35(tdd,J=7.5,2.9,1.0Hz,2H),7.23(d,J=8.3Hz,2H),5.32(d,J=4.6Hz,1H),4.76(br.s.,1H),4.65(br.s.,1H),4.63-4.54(m,2H),4.36-4.22(m,2H),3.94(s,3H),2.61-2.34(m,3H),2.13(dd,J=17.1,6.4Hz,1H),2.04-1.85(m,1H),1.81-1.60(m,7H),1.61-1.40(m,8H),1.39-1.20(m,6H),1.18-1.06(m,4H),1.03(s,3H),1.01(br.s.,3H),0.98(s,3H),0.96(s,3H)。
步骤2.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-1-(1,2-二羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1和4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-1-(1,2-二羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2的制备
在具有PTFE螺旋盖和搅拌棒的20mL闪烁小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(2.50g,3.26mmol)与NMO(0.765g,6.53mmol)在THF(60mL)和水(10mL)中混合。然后引入固体四氧化锇(0.415g,1.632mmol)。用氮气吹扫混合物,密封并在室温下搅拌7天。用乙酸乙酯(700mL)和水(300mL)稀释黄色混合物并震荡,分离各相。再次用水(2×250mL),然后用盐水(50mL)洗涤有机相。经硫酸钠干燥有机相,过滤并在真空中浓缩成褐色固体。通过二氧化硅色谱(用100%己烷至40%EtOAc/己烷梯度洗脱,用40%EtOAc/己烷洗脱4倍柱体积,然后梯度至50%EtOAc/己烷)来纯化粗制固体,分离出两种产物。次要产物(异构体2)是该两种异构体中第一个从柱中洗脱出来的,得到灰色固体形式的异构体2(0.183g,产率7.0%)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ7.96(d,J=8.3Hz,2H),7.80(d,J=7.6Hz,2H),7.64(t,J=6.8Hz,2H),7.47-7.39(m,2H),7.38-7.31(m,2H),7.23(d,J=8.3Hz,2H),5.33(d,J=4.6Hz,1H),4.67(br.s.,1H),4.55(dd,J=10.3,6.8Hz,1H),4.37-4.28(m,1H),4.28-4.21(m,1H),3.94(s,3H),3.58-3.41(m,2H),2.60(d,J=13.7Hz,1H),2.40-2.28(m,1H),2.21-2.11(m,1H),2.10-2.06(m,1H),2.02-1.89(m,3H),1.88-1.68(m,4H),1.69-1.31(m,12H),1.26-1.16(m,2H),1.11(br.s.,6H),1.04(s,6H),0.98(s,3H),0.96(s,3H)。主要产物(异构体1)是该两种异构体中第二个从二氧化硅柱中洗脱出来,得到灰色固体形式的异构体1(1.165g,产率44.6%)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ8.00-7.93(m,2H),7.80(d,J=7.6Hz,2H),7.64(t,J=6.7Hz,2H),7.48-7.39(m,2H),7.38-7.31(m,2H),7.23(d,J=8.3Hz,2H),5.39-5.29(m,1H),4.65(br.s.,1H),4.55(dd,J=10.5,6.8Hz,1H),4.43-4.29(m,1H),4.28-4.22(m,1H),3.94(s,3H),3.66(d,J=10.8Hz,1H),3.46(d,J=9.3Hz,1H),2.59(d,J=10.5Hz,1H),2.37-2.26(m,1H),2.16(dd,J=17.1,6.4Hz,1H),2.03-1.77(m,6H),1.76-1.31(m,13H),1.24(s,3H),1.10(br.s.,4H),1.04(s,3H),1.01(br.s.,3H),0.98(s,3H),0.96(s,3H)。
步骤3.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-1-(1-乙酰氧基-2-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1的制备
在具有PTFE螺旋盖的20mL闪烁小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-1-(1,2-二羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1(0.30g,0.375mmol)溶解于氯仿(5mL)中。向混合物中添加吡啶(0.243mL,3.00mmol),随后添加乙酰氯(0.133mL,1.875mmol)。注意到放热。TLC证实反应在5min内完成。将粗制混合物溶解于最小量的CHCl3中并通过硅胶色谱(用100%己烷至50%EtOAc/己烷梯度洗脱超过6倍柱体积,用50%EtOAc/己烷洗脱6倍柱体积)纯化,得到白色固体形式的主要产物。总回收量=0.260g(产率82%)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ7.96(d,J=8.3Hz,2H),7.80(d,J=7.6Hz,2H),7.64(t,J=6.8Hz,2H),7.47-7.39(m,2H),7.37-7.30(m,2H),7.23(d,J=8.3Hz,2H),5.33(d,J=4.6Hz,1H),4.63(br.s.,1H),4.57(dd,J=10.3,6.8Hz,1H),4.35(br.s.,1H),4.28-4.21(m,1H),4.11-4.02(m,2H),3.94(s,3H),2.58(d,J=11.2Hz,1H),2.38-2.27(m,1H),2.20-2.09(m,4H),1.98(d,J=6.4Hz,1H),1.93-1.82(m,3H),1.82-1.32(m,14H),1.26(d,J=5.4Hz,4H),1.09(br.s.,4H),1.03(d,J=4.2Hz,6H),0.98(s,3H),0.96(s,3H)。
步骤4.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-乙酰氧基-2-羟基丙-2-基)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1的制备
将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-1-(1-乙酰氧基-2-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1(0.260g,0.309mmol)溶解于氯仿(5mL)中并添加哌啶(0.5mL,5.05mmol)。在室温下搅拌该混合物18h。在真空中浓缩反应物并通过硅胶色谱(用100%DCM至9∶1DCM∶MeOH梯度洗脱超过6倍柱体积,用9∶1DCM∶MeOH洗脱6倍柱体积)来纯化粗制残余物。合并相同产物级分并在真空中浓缩,得到0.1809g(产率95%)浅黄色泡沫状固体。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ7.95(d,J=8.3Hz,2H),7.23(d,J=8.3Hz,2H),5.32(dd,J=6.2,1.8Hz,1H),4.14-4.01(m,2H),3.93(s,3H),2.14(s,6H),1.99-1.76(m,4H),1.76-1.44(m,11H),1.43-1.17(m,11H),1.15(s,3H),1.02(s,6H),0.96(s,6H)。
步骤5.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-乙酰氧基-2-羟基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1的制备
在含有4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-乙酰氧基-2-羟基丙-2-基)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1(0.180g,0.290mmo1)的75mL中压容器中添加4-(2-氯乙基)硫代吗啉1,1-二氧化物(0.150g,0.759mmol)、磷酸钾盐(0.229g,1.079mmol)和KI(0.110g,0.663mmol)。用乙腈(12mL)稀释混合物。然后用N2冲洗容器并密封,并在油浴中加热至110℃保持16h。用EtOAc(100mL)和水(50mL)稀释混合物,震荡并分离各相。经MgSO4干燥有机相,过滤并在真空中浓缩成残余物。通过硅胶色谱(用100%DCM至9∶1DCM∶MeOH梯度洗脱超过6倍柱体积,用9∶1DCM∶MeOH洗脱6倍柱体积)来纯化粗制残余物,得到黄色油状物(0.297g),其未经进一步纯化即直接进行下一步骤。LCMS:m/z=781.7(M+H)+,2.21min(方法5)。
步骤6:在20mL闪烁小瓶中,将粗制4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-乙酰氧基-2-羟基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1(0.227g,0.290mmol)和氢氧化锂单水合物(0.085g,2.030mmol)与四氢呋喃(4mL)、MeOH(3mL)和水(2mL)混合。用PTFE螺旋盖盖住小瓶并在搅拌下将该混合物加热至75℃保持2h。添加额外氢氧化锂单水合物(36mg,0.857mmol)并将混合物重新加热至75℃,再保持45min。通过反相制备型HPLC来纯化该混合物,得到白色粉末TFA盐形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1,2-二羟基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体1(0.173g,产率61.2%)。LCMS:m/z=725.6(M+H)+,1.94min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.31(d,J=4.6Hz,1H),3.68-3.57(m,2H),3.48-3.39(m,2H),3.31-3.14(m,6H),3.08(br.s.,6H),2.26(d,J=8.8Hz,2H),2.18(dd,J=17.1,6.4Hz,1H),2.09-1.96(m,2H),1.91-1.67(m,6H),1.66-1.36(m,11H),1.28(d,J=10.5Hz,1H),1.22(s,3H),1.21-1.16(m,6H),1.14(s,3H),1.04(s,3H),0.96(br.s.,3H),0.95(br.s.,3H)。
实施例B10
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1,2-二羟基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体2的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-1-(1-乙酰氧基-2-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2的制备
在20mL闪烁小瓶中将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-1-(1,2-二羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2(0.169,0.211mmol)溶解于氯仿(5mL)中。向混合物中添加吡啶(0.137mL,1.690mmol)。在冰浴中冷却混合物并缓慢添加乙酰氯(0.075mL,1.056mmol)。将PTFE螺旋盖固定至小瓶并在室温下搅拌该混合物10min,然后在真空中浓缩混合物。通过硅胶色谱(用100%己烷至40%EtOAc/己烷梯度洗脱超过10倍柱体积,用40%EtOAc/己烷洗脱10倍柱体积)来纯化粗制混合物,得到浅黄色固体0.1386g(产率78%)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ7.96(d,J=8.3Hz,2H),7.80(d,J=7.3Hz,2H),7.64(t,J=6.7Hz,2H),7.47-7.40(m,2H),7.38-7.32(m,2H),7.23(d,J=8.3Hz,2H),5.33(d,J=4.9Hz,1H),4.66-4.56(m,2H),4.39-4.29(m,1H),4.28-4.22(m,1H),4.10-3.99(m,2H),3.94(s,3H),2.58(d,J=11.5Hz,1H),2.38-2.28(m,1H),2.21-2.11(m,4H),2.08-1.94(m,1H),1.90(s,1H),1.86-1.64(m,5H),1.63-1.17(m,14H),1.13(s,3H),1.09(br.s.,3H),1.04(s,6H),0.98(s,3H),0.96(s,3H)。
步骤2.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-乙酰氧基-2-羟基丙-2-基)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2的制备
将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-1-(1-乙酰氧基-2-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2(0.135g,0.160mmol)溶解于氯仿(5mL)中并添加哌啶(0.5mL,5.05mmol)。在室温下搅拌该混合物18h。通过氮气流浓缩混合物,然后通过硅胶色谱(用100%DCM至9∶1DCM∶MeOH梯度洗脱超过8倍柱体积,用9∶1DCM∶MeOH洗脱6倍柱体积)来纯化,得到浅黄色固体(0.0848g,产率85%)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ7.95(d,J=8.3Hz,2H),7.22(d,J=8.3Hz,2H),5.32(dd,J=6.1,1.5Hz,1H),4.15-3.96(m,2H),3.93(s,3H),2.21-2.10(m,5H),2.09-1.75(m,5H),1.71(d,J=16.9Hz,1H),1.67-1.44(m,10H),1.44-1.30(m,5H),1.30-1.18(m,3H),1.16(s,3H),1.14(s,4H),1.04(s,3H),1.02(s,3H),0.96(s,3H),0.95(s,3H)。
步骤3.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-乙酰氧基-2-羟基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2的制备
在15mL中压容器中将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-乙酰氧基-2-羟基丙-2-基)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2(0.082g,0.132mmol)、4-(2-氯乙基)硫代吗啉1,1-二氧化物(0.065g,0.331mmol)、磷酸钾盐(0.098g,0.463mmol)和KI(0.055g,0.331mmol)混合,用乙腈(6mL)稀释混合物,然后用N2冲洗容器并密封,在油浴中加热至110℃过夜。用氯仿(50mL)稀释混合物并过滤以去除固体。通过硅胶色谱(用100%DCM至9∶1DCM∶MeOH梯度洗脱超过6倍柱体积,用9∶1DCM∶MeOH洗脱6倍柱体积)来纯化粗制混合物,得到极淡黄色的油状物(0.099g,产率96%)。LCMS:m/z=781.6(M+H)+,2.16min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ7.95(d,J=8.3Hz,2H),7.22(d,J=8.3Hz,2H),5.32(dd,J=6.0,1.6Hz,1H),4.13-3.96(m,2H),3.93(s,3H),3.16-2.97(m,12H),2.77-2.61(m,2H),2.60-2.49(m,1H),2.49-2.39(m,1H),2.25-2.07(m,5H),2.05-1.95(m,1H),1.95-1.83(m,2H),1.82(s,1H),1.79-1.63(m,4H),1.62-1.36(m,9H),1.35-1.20(m,4H),1.16(s,3H),1.14(s,4H),1.04(s,3H),1.01(s,3H),0.96(s,3H),0.95(br.s.,3H)。
步骤4:在1打兰小瓶中将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-乙酰氧基-2-羟基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2(0.025g,0.032mmol)和氢氧化锂单水合物(0.016g,0.384mmol)与四氢呋喃(0.4mL)、MeOH(0.4mL)和水(0.4mL)混合。用PTFE螺旋盖盖住小瓶并在搅拌下将该混合物加热至75℃保持2h。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗制混合物,得到白色玻璃状固体TFA盐形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1,2-二羟基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体2(0.026g,产率84%)。LCMS:m/z=725.6(M+H)+,1.95min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.31(d,J=4.4Hz,1H),3.53(d,J=11.2Hz,1H),3.32-3.23(m,5H),3.23-3.14(m,2H),3.13-3.00(m,6H),2.40(t,J=8.6Hz,1H),2.23-2.03(m,3H),1.98-1.90(m,1H),1.89-1.77(m,3H),1.73(d,J=16.9Hz,1H),1.69-1.36(m,12H),1.32-1.24(m,2H),1.21(s,3H),1.13(s,3H),1.09-1.05(m,3H),1.05-1.01(m,3H),0.98-0.96(m,3H),0.95(br.s.,3H)。
实施例B11和B12
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-((R)-1-羟基乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体1和4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-((R)-1-羟基乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体2的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1,2-二羟基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯两种异构体的混合物(0.280g,0.379mmol)和高碘酸钠(0.324g,1.515mmol)溶解于THF(10mL)与水(2mL)的混合物中。搅拌该混合物1h,然后用THF(75mL)和盐水(30mL)稀释并震荡所得混合物并分离各相。用THF(2×50mL),然后用氯仿(2x50mL)萃取水相。合并有机相并将浑浊产物浓缩至约30mL。添加甲醇直至有机相是完全溶解,然后添加硅胶(3g)并将混合物浓缩成松散粉末,将其放置于真空烘箱中过夜。将粉末装载于经DCM预平衡的25g硅胶柱顶部。洗脱(用100%DCM至40%DCM∶MeOH的9∶1混合物梯度)得到浅灰白色玻璃状固体形式的产物(0.2462g,产率92%)。LCMS:m/z=707.6(M+H)+,2.25min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.91(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.29(d,J=4.9Hz,1H),3.90(s,3H),3.33(s,5H),3.07-2.97(m,2H),2.92(td,J=11.0,5.1Hz,1H),2.76-2.66(m,2H),2.66-2.57(m,1H),2.48-2.39(m,1H),2.20(s,3H),2.17-2.01(m,3H),1.94(d,J=13.9Hz,1H),1.87(dd,J=12.7,7.8Hz,1H),1.75-1.63(m,2H),1.62-1.41(m,8H),1.39-1.18(m,5H),1.15(d,J=2.0Hz,1H),1.12(s,4H),1.08(d,J=4.9Hz,1H),1.04(s,3H),1.00(s,3H),0.94(s,3H),0.93(s,3H)。
步骤2.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在具有PTFE螺旋盖的1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.020g,0.028mmol)与硼氢化钠(0.00535g,0.141mmol)于绝对乙醇(1mL)中混合。在室温下搅拌该混合物30min,但混合物并未完全溶解。添加THF(1mL)并在室温下将此刻完全溶解的混合物搅拌16h。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法4)来部分地纯化粗制混合物,得到0.026g异构体混合物形式的TFA盐物质,其未经进一步处理即继续进行下一步骤。LCMS:m/z=709.5(M+H)+,2.14min(方法5)。
步骤3:在具有PTFE螺旋盖的1打兰小瓶中,将来自步骤2的含有4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-((R)-1-羟基乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的TFA盐的物质(0.026g,0.014mmol)与氢氧化锂单水合物(1.0M水溶液)(0.280mL,0.28mmol)和四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用PTFE螺旋盖盖住小瓶并在搅拌下将该混合物加热至70℃保持45min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗制混合物,分离出两种单独的产物。洗脱出来的第一种物质是主要产物且标记为4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体1(0.0169g,产率61.5%,白色粉末TFA盐)。次要产物第二个洗脱出来且标记为4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体2(0.0051g,产率18.6%,白色粉末TFA盐)。
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体1的分析数据:LCMS:m/z=695.4(M+H)+,1.95min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.1Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.31(d,J=5.1Hz,1H),3.88(d,J=6.4Hz,2H),3.27(d,J=1.2Hz,2H),3.22-2.97(m,8H),2.24-1.84(m,9H),1.82-1.69(m,3H),1.68-1.32(m,12H),1.32-1.24(m,2H),1.21(s,3H),1.16(d,J=6.4Hz,3H),1.11(s,3H),1.05(s,3H),1.00-0.96(m,3H),0.95(br.s.,3H)。
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体2的分析数据:LCMS:m/z=695.4(M+H)+,2.01min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.34-5.27(m,1H),4.07(dd,J=6.2,4.5Hz,1H),3.31-2.99(m,11H),2.60-2.48(m,1H),2.17(dd,J=16.8,6.2Hz,1H),2.12-1.95(m,3H),1.94-1.84(m,1H),1.79-1.68(m,3H),1.67-1.38(m,11H),1.32-1.24(m,3H),1.20(s,3H),1.10(s,3H),1.07-1.06(m,3H),1.05(s,3H),0.96(br.s.,3H),0.95(br.s.,3H)。
实施例B13
4-((3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-乙叉基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1和4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2的制备
在具有橡胶隔片的7mL闪烁小瓶中,在氮气气氛下将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.100g,0.141mmol)与硼氢化钠(0.021g,0.566mmol)在乙醇(2mL)与无水THF(2mL)的混合物混合。在室温下搅拌该混合物2h。向混合物中逐滴添加饱和氯化铵直至起泡停止。用少量THF稀释混合物并过滤。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法10)来纯化粗制混合物。洗脱出来的第一种物质是主要产物;此主要产物标记为异构体1,为白色粉末TFA盐形式(0.0547g,产率41.3%)。洗脱出来的第二种物质是次要产物;此次要产物标记为异构体2,为白色粉末TFA盐形式(0.0219g,产率16.5%)。一部分未反应原料(0.0328g,24.8%)是洗脱出来的第三种物质。
将异构体1溶解于DCM与甲醇的1∶1混合物中并装载至1克WatersOasisMCX阳离子交换柱上。用1∶1DCM∶MeOH(20mL),然后用MeOH(10mL)冲洗该柱。然后用2.0M氨/甲醇(20mL)从该柱洗脱出异构体1。由此定量地回收得到浅灰白色固体状的游离碱形式的异构体1。
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1的分析数据:LCMS:m/z=709.4(M+H)+,2.18min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.91(d,J=8.1Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.30(d,J=4.6Hz,1H),3.95-3.83(m,4H),3.20-2.98(m,8H),2.88-2.46(m,4H),2.15(dd,J=17.1,6.4Hz,1H),1.95-1.83(m,3H),1.83-1.63(m,5H),1.63-1.41(m,9H),1.41-1.22(m,4H),1.20-1.10(m,7H),1.04(s,3H),1.02(s,3H),0.95(s,3H),0.94(s,3H)。
步骤2.4-((3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-乙叉基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在具有橡皮塞的1打兰小瓶中,将所述游离碱4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-((R)-1-羟基乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1(0.025g,0.035mmol)加到DCM(1mL)中。在干冰/丙酮浴中将混合物冷却至-78℃并在搅拌下向该混合物中添加DAST(6.99μl,0.053mmol)。去除冷却浴并在室温下搅拌该混合物2h。在氮气流下将混合物浓缩成残余物,将其重新溶解于最小量的THF∶MeOH混合物(约4比1)中并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法11)纯化,由此得到白色固体形式的产物,为TFA盐(0.0139g,产率43%)。LCMS:m/z=691.3(M+H)+,2.31min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ7.96(d,J=8.3Hz,2H),7.23(d,J=8.6Hz,2H),5.72-5.58(m,1H),5.36-5.29(m,1H),3.94(s,3H),3.42-3.29(m,1H),3.25-2.95(m,10H),2.94-2.83(m,1H),2.60-2.47(m,1H),2.38-2.25(m,2H),2.23-1.97(m,6H),1.80(br.s.,1H),1.78-1.70(m,2H),1.69-1.37(m,12H),1.31-1.24(m,2H),1.23-1.18(m,3H),1.10(s,3H),1.05(s,3H),0.98(s,3H),0.96(s,3H)。
步骤3:在1打兰小瓶中,将4-((3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-乙叉基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.0139g,0.015mmol)与氢氧化锂单水合物(1.0M水溶液)(0.151mL,0.151mmol)和四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖盖住小瓶并将混合物加热至70℃保持35min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法4)来纯化粗制混合物,得到白色固体形式的4-((3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-乙叉基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.0092g,产率61.8%),为TFA盐。LCMS:m/z=677.4(M+H)+,2.17min(方法5)。1HNMR(400MHz,丙酮)δ7.98(d,J=8.1Hz,2H),7.30(d,J=8.3Hz,2H),5.68(d,J=5.1Hz,1H),5.35(dd,J=6.4,1.5Hz,1H),3.26(d,J=5.1Hz,9H),2.63-2.44(m,3H),2.43-2.29(m,2H),2.25-2.14(m,4H),1.88-1.72(m,4H),1.70-1.51(m,10H),1.24(br.s.,8H),1.14(s,3H),1.09(s,3H),1.01(s,3H),0.99(s,3H)。
实施例B14和实施例B15
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-(羟基亚氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体1和4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-(羟基亚氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体2的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-(羟基亚氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在具有PTFE螺旋盖的1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.028g,0.040mmol)与羟基胺盐酸盐(0.028g,0.396mmol)和乙酸钠(0.049g,0.594mmol)在无水甲醇(2.3mL)与四氢呋喃(1.5mL)的混合物中混合。将悬浮液快速搅拌5天,然后在氮气流下浓缩。将混合物重新溶解于最小量的THF与甲醇的混合物中并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法12)来纯化。由此获得白色固体形式的产物(0.0248g,产率87%)。LCMS:m/z=722.4(M+H)+,2.15min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ7.95(d,J=8.3Hz,2H),7.22(d,J=8.3Hz,2H),5.31(dd,J=6.0,1.6Hz,1H),3.93(s,3H),3.18-2.97(m,8H),2.86(br.s.,1H),2.76-2.55(m,3H),2.49(br.s.,1H),2.13(dd,J=17.2,6.5Hz,1H),1.96-1.80(m,7H),1.69(d,J=17.1Hz,3H),1.64-1.40(m,10H),1.36(td,J=12.7,2.6Hz,2H),1.29-1.20(m,3H),1.12(br.s.,4H),1.01(s,6H),0.96(s,3H),0.95(br.s.,3H)。
步骤2:在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-((E)-1-(羟基亚氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.020g,0.028mmol)与氢氧化锂单水合物(1.0M水溶液)(0.277mL,0.277mmol)、四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖盖住小瓶并在搅拌下将该混合物加热至70℃保持30min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法12)来纯化粗制混合物,收集到两个峰。从制备型HPLC洗脱出来的第一种物质标记为4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-(羟基亚氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体1(0.0041g,产率20.7%)且被主要异构体2产物污染。从制备型HPLC洗脱出来的第二种物质是主要产物,标记为4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-(羟基亚氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体2,得到白色粉末形式的纯品(0.0119g,产率60.1%)。
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-(羟基亚氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体1的分析数据:HPLC显示此材料是异构体1肟与异构体2肟的73∶27混合物。LCMS:m/z=708.4(M+H)+,1.95min(方法5)。1HNMR(400MHz,丙酮)δ7.98(d,J=8.1Hz,2H),7.29(d,J=8.1Hz,2H),5.33(dd,J=5.6,1.2Hz,1H),3.94-3.78(m,1H),3.19-3.01(m,11H),2.25-2.13(m,1H),2.12-2.09(m,2H),2.02(d,J=2.2Hz,3H),1.95-1.87(m,2H),1.80(s,6H),1.65-1.45(m,8H),1.40-1.26(m,6H),1.22(s,3H),1.19-1.10(m,2H),1.07(d,J=1.5Hz,6H),1.00(s,3H),0.98(s,3H)。
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-(羟基亚氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体2的分析数据:HPLC显示此材料是纯净单一的化合物。LCMS:m/z=708.4(M+H)+,1.99min(方法5)。1HNMR(400MHz,丙酮)δ7.98(d,J=8.3Hz,2H),7.29(d,J=8.1Hz,2H),5.33(dd,J=6.0,1.6Hz,1H),3.16-2.98(m,10H),2.85(dt,J=10.8,5.2Hz,3H),2.77-2.70(m,3H),2.69-2.61(m,2H),2.57-2.47(m,1H),2.18(dd,J=17.0,6.5Hz,1H),1.98(br.s.,1H),1.96(br.s.,1H),1.93-1.84(m,1H),1.79(s,4H),1.77-1.71(m,2H),1.67(d,J=14.4Hz,1H),1.63-1.57(m,2H),1.47(d,J=5.4Hz,4H),1.45-1.27(m,5H),1.27-1.22(m,1H),1.21(s,3H),1.10(d,J=13.9Hz,1H),1.06(s,3H),1.05(s,3H),0.99(s,3H),0.98(s,3H)。
实施例B16
4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-吗啉代丙-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-吗啉代丙-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在具有橡胶隔片和搅拌棒的1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1(0.025g,0.035mmol)和2,6-二-叔丁基-4-甲基吡啶(0.021g,0.104mmol)在无水氯仿(1mL)中混合。在室温、搅拌下向该溶液中逐滴添加三氟甲烷磺酸酐(0.013g,0.045mmol)。在室温下搅拌该混合物1h,然后向混合物中添加吗啉(0.030mL,0.346mmol)并在室温下搅拌所得溶液30min,然后加热至60℃保持90min。在氮气流下浓缩反应混合物并重新溶解于最小量的THF与MeOH的混合物中。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法3)纯化得到白色粉末形式的期望产物(0.0199g,产率50.7%),为TFA盐。LCMS:m/z=792.7(M+H)+,1.97min(方法5)。
步骤2:在1打兰小瓶中,将4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-吗啉代丙-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.0192g,0.019mmol)与氢氧化锂单水合物(1.0M水溶液)(0.188mL,0.188mmol)于四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)中混合。用衬有PTFE的螺旋盖盖住小瓶并在搅拌下将该混合物加热至70℃保持40min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法3)来纯化粗制混合物,得到白色粉末TFA盐形式的4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-吗啉代丙-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.0139g,产率73%)。LCMS:m/z=778.7(M+H)+,1.75min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.22(s,2H),5.31(d,J=4.6Hz,1H),3.96(br.s.,4H),3.31-2.95(m,16H),2.38(br.s.,1H),2.17(dd,J=17.1,6.1Hz,2H),2.07(d,J=13.9Hz,1H),2.03-1.89(m,3H),1.89-1.82(m,1H),1.81-1.72(m,2H),1.72-1.40(m,12H),1.39-1.25(m,3H),1.22(s,3H),1.15(d,J=6.4Hz,3H),1.12(s,3H),1.05(s,3H),0.97(br.s.,3H),0.96(br.s.,3H)。
实施例B17
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-羧基苯基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-1-甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-氧代丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在75mLChemglass压力容器中,将中间体4,即4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(1.50g,2.13mmol)与二氧化硒(0.295g,2.66mmol)和乙酸(30mL)混合。将容器密封并将混合物加热至100℃保持45min。使混合物冷却至室温并添加额外0.25当量二氧化硒(0.059g,0.67mmol)。将容器重新加热至100℃保持15min。通过微细玻璃料漏斗过滤混合物以去除微细黑色固体,并在真空中将滤液浓缩成橙色泡沫状残余物。通过硅胶色谱(用100%己烷至3∶1己烷∶丙酮梯度洗脱超过6倍柱体积,用3∶1己烷∶丙酮洗脱6倍柱体积)来纯化粗制混合物。合并产物级分并浓缩,得到灰白色固体形式的产物:0.747g(产率48.8%)。LCMS:m/z=719.6(M+H)+,2.56min(方法3)。
步骤2.(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-1-甲酸的制备
在用橡皮塞密封的100mL圆底烧瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-氧代丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.590g,0.821mmol)与柠檬酸单水合物(0.345g,1.64mmol)混合。然后,添加叔丁醇(18mL),随后添加水(15mL)。在搅拌下向该混合物中添加NMO(50重量%水溶液)(0.374mL,1.81mmol),随后添加四氧化锇(2.5%于叔丁醇中)(0.515mL,0.041mmol)。在室温下搅拌该混合物30.5小时。向混合物中添加固体高碘酸钠(1.229g,5.74mmol)。5min内开始自溶液沉淀出固体。搅拌90min后,用125mL水稀释反应混合物,由此形成重质微细沉淀。过滤悬浮液以分离微细淡灰色固体,通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法13)将其纯化,得到灰白色粉末:0.2386g(产率41.0%)。LCMS:m/z=709.5(M+H)+,1.68min(方法3)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.91(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.33-5.26(m,1H),3.91(s,3H),3.19-2.99(m,8H),2.79-2.58(m,4H),2.55-2.46(m,1H),2.13(dd,J=17.1,6.4Hz,2H),2.07-1.98(m,1H),1.94(d,J=12.7Hz,1H),1.87(dd,J=12.7,7.8Hz,1H),1.82-1.76(m,1H),1.76-1.66(m,2H),1.65-1.41(m,9H),1.41-1.32(m,2H),1.31-1.21(m,2H),1.17(br.s.,1H),1.14(s,3H),1.11-1.08(m,1H),1.04(s,3H),1.01(s,3H),0.95(s,3H),0.93(s,3H)。
步骤3:在1打兰小瓶中,将(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-1-甲酸(0.020g,0.028mmol)与氢氧化锂单水合物(1.0M水溶液)(0.282mL,0.282mmol)、四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖盖住小瓶并将混合物加热至70℃保持30min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗制混合物。合并产物级分并在真空中浓缩,得到白色粉末TFA盐形式的(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-9-(4-羧基苯基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-1-甲酸(0.0212mg,产率80%)。LCMS:m/z=695.4(M+H)+,1.93min(方法5)。
实施例B18
4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-(1,1-二氧代硫代吗啉代)丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-(1,1-二氧代硫代吗啉代)丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在具有橡胶隔片和搅拌棒的1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-羟基丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1(0.150g,0.207mmol)和无水氯仿(2mL)混合。在冰/盐浴中冷却该混合物,并-10℃、搅拌下向浆液中添加三氟甲烷磺酸酐(0.046mL,0.270mmol)。在-10℃下将所得混合物搅拌1h,然后向混合物中添加硫代吗啉1,1-二氧化物(0.280g,2.075mmol)并在搅拌下加热该混合物至70℃。浓缩粗制混合物并重新溶解于最小量的THF和MeOH中并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化。由此得到白色玻璃状固体TFA盐形式的产物(0.0105g,产率4.3%)。LCMS:m/z=840.6(M+H)+,2.16min(方法5)。
步骤2:在1打兰小瓶中,将4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-(1,1-二氧代硫代吗啉代)丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.0106g,9.92μmol)与氢氧化锂单水合物(1.0M水溶液)(0.099mL,0.099mmol)于四氢呋喃(0.5mL)和MeOH(0.5mL)中混合。在搅拌下加热该混合物至70℃保持60min。通过氮气流浓缩粗制反应混合物,然后重新溶解于乙腈/甲醇中,过滤并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化,得到白色粉末TFA盐形式的4-((1S,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-(1,1-二氧代硫代吗啉代)丙-2-基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.0080g,产率65.6%)。LCMS:m/z=826.6(M+H)+,1.94min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.35-5.27(m,1H),3.28(d,J=1.5Hz,4H),3.23-3.02(m,13H),3.01-2.93(m,2H),2.55(dd,J=13.3,4.0Hz,1H),2.36-2.24(m,2H),2.17(dd,J=17.2,6.5Hz,1H),2.13-1.97(m,3H),1.96-1.85(m,3H),1.81-1.67(m,4H),1.66-1.54(m,5H),1.53-1.40(m,5H),1.34-1.24(m,4H),1.22(s,3H),1.10(s,3H),1.06(s,3H),0.99(d,J=6.8Hz,3H),0.98-0.97(m,3H),0.96(br.s.,3H)。
实施例B19
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体1的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1的制备
在20mL闪烁小瓶中,将20重量%氯化钛(III)于3%HCl中的溶液(0.766mL,1.21mmol)和乙酸钠(0.099g,1.212mmol)于乙醇(1mL)中混合。在冰浴中冷却所得淡紫色溶液并添加THF(2mL),随后添加4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-(羟基亚氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.175g,0.242mmol)。用衬有PTFE的螺旋盖盖住小瓶并在室温下将所得悬浮液搅拌30min,然后在氮气流下浓缩成固体并在室温和高真空下放置过夜。添加THF(2mL)和乙醇(1mL),然后缓慢添加固体硼氢化钠(0.092g,2.424mmol),从反应混合物中释放出大量气体。在t=130min,添加过量硼氢化钠(经由刮勺,约另10当量或更多),立即产生大量气体并在室温下搅拌该混合物总计16小时。向反应混合物中缓慢添加氯化铵水溶液以淬灭反应。在氮气流下将混合物浓缩成残余物,然后重新溶解于最小量的乙腈/甲醇/水中,过滤并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化,得到单一异构体灰棕色固体TFA盐形式的期望产物(0.079g,产率31%)。LCMS:m/z=708.5(M+H)+,2.06min(方法5)。
步骤2:在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-((R)-1-氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1TFA盐(0.040g,0.038mmol)与氢氧化锂单水合物(1.0M水溶液)(0.381mL,0.381mmol)于四氢呋喃(0.5mL)和MeOH(0.5mL)中混合。在搅拌下加热该混合物至70℃保持30min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗制反应混合物,得到白色粉末TFA盐形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体1(0.040g,产率99%)。LCMS:m/z=694.5(M+H)+,1.83min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.31(d,J=4.9Hz,1H),3.43(q,J=6.6Hz,1H),3.31-3.23(m,4H),3.23-3.13(m,3H),3.13-3.00(m,5H),2.51(t,J=9.7Hz,1H),2.17(dd,J=17.0,6.2Hz,1H),2.11-2.02(m,2H),2.02-1.91(m,3H),1.89-1.77(m,2H),1.74(d,J=17.4Hz,1H),1.68-1.53(m,7H),1.52-1.44(m,4H),1.43-1.35(m,J=16.3,7.5Hz,1H),1.30(d,J=6.8Hz,4H),1.22(s,3H),1.12(s,3H),1.05(s,3H),0.97(s,3H),0.96(br.s.,3H)。
实施例B20
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-吗啉代乙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-吗啉代乙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在20mL闪烁小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.020g,0.019mmol)与1-溴-2-(2-溴乙氧基)乙烷(0.00883g,0.038mmol)和三乙胺(0.016mL,0.114mmol)在1,4-二噁烷(0.5mL)中混合。将混合物加热至85℃保持30min,此并未引起反应。将混合物转移至5mL微波容器中并用无水乙腈(2mL)稀释。向混合物中添加额外1-溴-2-(2-溴乙氧基)乙烷(另10当量;0.0445g,0.190mmol)以及2,6-二-叔丁基-4-甲基吡啶(0.023g,0.114mmol)。将所得混合物在微波中加热至120℃保持90min。在氮气流下浓缩该容器的内含物,用少量THF、乙腈和甲醇的混合物重新溶解,过滤并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化。由此获得白色固体形式的期望产物并使其直接进行下一步骤。LCMS:m/z=778.6(M+H)+,2.13min(方法5)。
步骤2:在1打兰小瓶中将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-吗啉代乙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.021g,0.019mmol)与氢氧化锂单水合物(1.0M水溶液)(0.190mL,0.190mmol)于四氢呋喃(0.5mL)和MeOH(0.5mL)中混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在搅拌下加热该混合物至70℃保持30min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法14)来纯化粗制混合物,得到白色粉末TFA盐形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-吗啉代乙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.0182g,两步产率86%)。LCMS:m/z=764.6(M+H)+,1.85min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.1Hz,2H),5.31(d,J=5.1Hz,1H),3.88(br.s.,4H),3.30-2.96(m,16H),2.41(br.s.,2H),2.17(dd,J=17.0,6.5Hz,1H),2.09(d,J=15.7Hz,1H),2.04-1.86(m,4H),1.86-1.69(m,3H),1.67-1.55(m,6H),1.54-1.42(m,5H),1.33-1.24(m,5H),1.22(s,3H),1.13(s,3H),1.05(s,3H),0.96(br.s.,3H),0.96(br.s.,3H)。
实施例B21
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-乙酰氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-乙酰氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在具有衬有PTFE的螺旋盖和搅拌棒的1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.019g,0.018mmol)与TEA(0.025mL,0.181mmol)于无水氯仿(1mL)中混合。然后一次性添加乙酰氯(1.930μl,0.027mmol)并在室温下搅拌该溶液30min。在氮气流下浓缩反应混合物且未经纯化直接进行下一步骤。LCMS:m/z=750.5(M+H)+,2.17min(方法5)。
步骤2:在具有衬有PTFE的螺旋盖的1打兰小瓶中,将含有4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-乙酰氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.014g,0.018mmol)的粗品混合物与氢氧化锂单水合物(1.0M水溶液)(0.180mL,0.180mmol)于四氢呋喃(0.5mL)和MeOH(0.5mL)中混合。在搅拌下加热该混合物至70℃保持30min。通过反相制备型HPLC以一次性注射(制备型HPLC方法2)来纯化粗制混合物。由此获得白色粉末TFA盐形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-乙酰氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.0108g,产率61.6%)。LCMS:m/z=736.5(M+H)+,1.94min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.22(d,J=8.3Hz,2H),5.35-5.28(m,1H),4.25(quin,J=7.2Hz,1H),3.30-2.99(m,12H),2.27-2.11(m,2H),2.09-2.01(m,1H),1.98(s,3H),1.90-1.76(m,5H),1.76-1.54(m,7H),1.53-1.32(m,6H),1.31-1.23(m,2H),1.20(s,3H),1.12(d,J=6.8Hz,3H),1.05(s,3H),1.03(s,3H),0.96(s,3H),0.95(s,3H)。
实施例B22和实施例B23
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-((甲氧基羰基)氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸和4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-(2,2,2-三氟乙酰氨基)乙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-((甲氧基羰基)氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯和4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-(2,2,2-三氟乙酰氨基)乙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在具有搅拌棒的20mL闪烁小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.019g,0.018mmol)与TEA(0.025mL,0.181mmol)加到无水氯仿(1mL)中。向该混合物中添加氯甲酸甲酯(2.102μl,0.027mmol)并在室温下搅拌该溶液15min。在氮气流下将粗制反应混合物浓缩成残余物,使其直接进行下一步骤。LCMS:m/z=766.5(M+H)+,2.24min和804.5(M+H)+,2.32min(方法5)。
步骤2:在具有PTFE螺旋盖的1打兰小瓶中,将含有4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-((甲氧基羰基)氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯和4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-(2,2,2-三氟乙酰氨基)乙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的粗制混合物(总计0.018mmol)与氢氧化锂单水合物(1.0M水溶液)(0.180mL,0.180mmol)于四氢呋喃(0.5mL)和MeOH(0.5mL)中混合。在搅拌下加热该混合物至70℃保持25min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗制混合物,由此分离出该两种标题化合物:
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(1-((甲氧基羰基)氨基)乙基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸:以白色粉末TFA盐形式(0.0039g,产率21.9%)分离得到。LCMS:m/z=752.5(M+H)+,2.03min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.97-7.89(m,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),6.42(d,J=9.3Hz,1H),5.32(dd,J=6.0,1.3Hz,1H),4.01-3.89(m,1H),3.65(s,2H),3.29-2.98(m,12H),2.27(d,J=8.1Hz,1H),2.21-2.10(m,1H),2.09-2.01(m,1H),2.00-1.92(m,1H),1.91-1.62(m,9H),1.62-1.38(m,8H),1.33-1.24(m,3H),1.20(s,3H),1.15(d,J=6.8Hz,3H),1.05(s,6H),0.96(br.s.,3H),0.95(br.s.,3H)。
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-(2,2,2-三氟乙酰氨基)乙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸:以白色粉末TFA盐形式(0.0066g,产率35.7%)形式分离得到。LCMS:m/z=790.5(M+H)+,2.12min(方法5)。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.93(d,J=8.1Hz,2H),7.22(d,J=8.3Hz,2H),5.35-5.27(m,1H),4.33(t,J=8.3Hz,1H),3.30(br.s.,7H),3.13-3.00(m,5H),2.50-2.40(m,1H),2.17(dd,J=16.9,6.4Hz,1H),2.09-1.90(m,4H),1.73(d,J=2.2Hz,3H),1.71-1.55(m,6H),1.55-1.42(m,5H),1.37-1.26(m,3H),1.24(d,J=6.8Hz,3H),1.19(s,3H),1.05(s,3H),1.02(s,3H),0.96(s,3H),0.96(br.s.,3H)。
实施例B24和实施例B25
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2-(亚磺酸基氧基)乙酰基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸和4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-羟基乙酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
在具有搅拌棒的1打兰小瓶中加入氢氧化钠(3.0M水溶液)(0.471mL,1.414mmol)。在冰/丙酮浴中将该小瓶冷却至-10℃。经2min在搅拌下向该溶液中逐滴添加溴(0.026mL,0.495mmol)。在冷却浴中搅拌所得黄色/绿色溶液10min,然后极缓慢逐滴添加1,4-二噁烷(0.30mL)并将所得黄色溶液在冷却下再搅拌5min。将该冷的黄色次溴酸盐溶液逐滴添加至0℃的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.050g,0.071mmol)的1,4-二噁烷(1.15mL)和水(0.20mL)的冷却的悬浮液中。立即使所得黄色悬浮液升温至室温并在室温下搅拌80min。向混合物中添加0.2mL饱和亚硫酸钠水溶液,并将混合物加热至80℃保持25min。在氮气流下将混合物浓缩成固体残余物。向残余物中添加THF(2mL)、甲醇(0.5mL)、水(0.3mL)和乙腈(0.3mL)。震荡小瓶并过滤内含物以去除固体。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗品混合物。合并含有期望化合物的级分并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法12)进行再纯化,由此分离得到该两种标题化合物:
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2-(亚磺酸基氧基)乙酰基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸:以白色粉末形式(0.0091g,产率12.6%)分离得到。LCMS:m/z=773.4(M+H)+,2.03min(方法5)。1HNMR(400MHz,乙酸)δ7.93(d,J=8.1Hz,2H),7.18(d,J=8.1Hz,2H),5.32(d,J=5.4Hz,1H),3.85(td,J=10.8,5.6Hz,1H),3.47-3.08(m,13H),2.67(t,J=11.7Hz,1H),2.57-2.40(m,1H),2.18(d,J=3.9Hz,3H),1.99-1.93(m,2H),1.84-1.71(m,3H),1.70-1.38(m,12H),1.33(br.s.,3H),1.28-1.19(m,4H),1.16(s,3H),1.09(s,3H),0.98(s,3H),0.96(s,3H)。
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-羟基乙酰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸:以白色粉末形式(0.0042g,产率6.2%)分离得到。LCMS:m/z=709.4(M+H)+,1.96min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.92(d,J=8.1Hz,2H),7.19(d,J=8.3Hz,2H),5.29(d,J=4.6Hz,1H),4.28(d,J=4.4Hz,2H),3.19-3.07(m,5H),3.07-2.98(m,2H),2.94(td,J=10.9,4.8Hz,2H),2.78-2.58(m,3H),2.45(dt,J=11.6,3.9Hz,1H),2.20(t,J=11.4Hz,1H),2.15-2.04(m,2H),2.01(s,1H),1.98-1.82(m,2H),1.75-1.63(m,2H),1.62-1.20(m,12H),1.20-1.06(m,5H),1.04(s,3H),1.00(s,3H),0.95(br.s.,3H),0.94(br.s.,3H)。
实施例B26
4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-((甲氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-((甲氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在1打兰小瓶中,将(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-1-甲酸(0.025g,0.035mmol)与三乙胺(8.85μl,0.063mmol)和叠氮磷酸二苯酯(0.011mL,0.053mmol)于无水1,4-二噁烷(0.5mL)中混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并将该混合物加热至100℃保持75min。在室温下向混合物中添加0.5M甲醇钠/甲醇溶液(0.705mL,0.353mmol)。1h后,通过氮气流浓缩反应混合物并使粗制残余物继续进行下一步骤中的酯水解。LCMS:m/z=738.7(M+H)+,2.25min(方法3)。
步骤2:在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-((甲氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.026g,0.035mmol)与氢氧化锂单水合物(1.0M水溶液)(0.352mL,0.352mmol)和四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用PTFE螺旋盖盖住小瓶并在搅拌下加热该混合物至70℃保持20min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗制混合物,得到白色粉末TFA盐形式的4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-((甲氧基羰基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.0113g,产率32.7%)。LCMS:m/z=724.4(M+H)+,1.96min(方法3)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),6.87(d,J=8.3Hz,1H),5.30(d,J=4.6Hz,1H),4.11-3.96(m,1H),3.64(s,3H),3.27-2.87(m,12H),2.38-2.23(m,1H),2.22-2.04(m,3H),2.03-1.82(m,3H),1.76(t,J=16.5Hz,3H),1.69-1.37(m,10H),1.36-1.23(m,3H),1.19(s,3H),1.08(s,3H),1.04(s,3H),0.96(br.s.,3H),0.95(br.s.,3H)。
实施例B27
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(吗啉-4-羰基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(吗啉-4-羰基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在1打兰小瓶中,将(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-1-甲酸(0.025g,0.035mmol)与吗啉(3.99μl,0.046mmol)、HATU(0.017g,0.046mmol)和DIPEA(0.020mL,0.113mmol)于氯仿(1mL)中混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在室温下搅拌该混合物过夜。在氮气流下浓缩混合物,然后重新溶解于最小量的乙腈与甲醇的混合物中。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法5)来纯化粗制混合物,得到白色固体TFA盐形式的产物(0.0276g)。LCMS:m/z=778.5(M+H)+,2.26min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.91(d,J=8.1Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.30(d,J=4.6Hz,1H),3.91(s,3H),3.73-3.50(m,8H),3.29-3.14(m,8H),3.14-2.96(m,5H),2.71(t,J=11.7Hz,1H),2.35-2.22(m,1H),2.19-2.04(m,3H),1.90-1.64(m,5H),1.64-1.52(m,5H),1.47(d,J=12.0Hz,4H),1.28(d,J=10.3Hz,2H),1.20(s,3H),1.14(s,4H),1.04(s,3H),0.96(s,3H),0.94(s,3H)。
步骤2:在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(吗啉-4-羰基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.027g,0.027mmol)与氢氧化锂单水合物(1.0M水溶液)(0.134mL,0.134mmol)和四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在搅拌下加热该混合物至60℃保持30min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗制混合物,得到白色粉末TFA盐形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(吗啉-4-羰基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.0323g,两步产率92%)。LCMS:m/z=764.5(M+H)+,2.06min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.30(d,J=4.6Hz,1H),3.73-3.52(m,8H),3.28-3.13(m,8H),3.12-2.95(m,5H),2.71(t,J=11.6Hz,1H),2.34-2.22(m,1H),2.20-2.04(m,3H),1.79(d,J=4.2Hz,2H),1.65(br.s.,3H),1.64-1.35(m,9H),1.33-1.23(m,2H),1.21(s,3H),1.14(s,4H),1.04(s,3H),0.96(s,3H),0.95(s,3H)。
实施例B28
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(甲基氨基甲酰基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(甲基氨基甲酰基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
通过与针对4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(吗啉-4-羰基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备所述程序类似的程序来制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(甲基氨基甲酰基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯,只是使用甲胺(2.0M于THF中)(0.176mL,0.353mmol)代替吗啉。此外,在制备型HPLC纯化后,必须使用不同条件(制备型HPLC方法12)对材料实施再纯化,得到白色粉末形式的期望产物(0.0142g,产率55.8%)。LCMS:m/z=722.6(M+H)+,2.02min(方法3)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.91(d,J=8.1Hz,2H),7.44-7.36(m,1H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.29(d,J=4.6Hz,1H),3.90(s,3H),3.19-2.95(m,8H),2.75-2.68(m,5H),2.67-2.58(m,1H),2.57-2.40(m,2H),2.16-1.88(m,4H),1.83(dd,J=12.8,7.9Hz,1H),1.78-1.66(m,2H),1.65-1.42(m,8H),1.42-1.29(m,4H),1.29-1.21(m,2H),1.21-1.14(m,1H),1.12(s,3H),1.03(s,3H),1.00(s,3H),0.94(s,3H),0.93(s,3H)。
步骤2:在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(甲基氨基甲酰基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.0142g,0.020mmol)与氢氧化锂单水合物(1.0M水溶液)(0.197mL,0.197mmol)和四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在搅拌加热该混合物至60℃保持30min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗制混合物,得到白色粉末TFA盐形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(甲基氨基甲酰基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.0171mg,产率92%)。LCMS:m/z=708.4(M+H)+,1.98min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.92(d,J=8.3Hz,2H),7.20(d,J=8.3Hz,2H),5.30(d,J=4.6Hz,1H),3.37(s,3H),3.26-3.04(m,10H),3.00(d,J=4.2Hz,2H),2.85(br.s.,1H),2.75(s,3H),2.51(t,J=11.6Hz,1H),2.21-2.07(m,3H),2.06-1.97(m,1H),1.90-1.67(m,5H),1.65-1.34(m,10H),1.21(br.s.,2H),1.18(s,3H),1.10(s,3H),1.03(s,3H),0.96(s,3H),0.94(s,3H)。
实施例B29
4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-甲基脲基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-((叠氮基羰基)氨基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在1打兰小瓶中,将(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-1-甲酸(0.085g,0.120mmol)与三乙胺(0.030mL,0.216mmol)和叠氮磷酸二苯酯(0.028mL,0.132mmol)于无水1,4-二噁烷(2mL)中混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在室温下搅拌该混合物100min,然后加热至100℃并搅拌2h。向混合物中添加更多的叠氮磷酸二苯酯(0.028mL,0.132mmol)并将混合物重新加热至100℃并搅拌1h。粗制混合物未经纯化直接进行下一步骤。LCMS:m/z=749.6(M+H)+,2.30min(方法3)。
步骤2.4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-甲基脲基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-((叠氮基羰基)氨基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.030g,0.040mmol)与甲胺(1.0M于THF中)(0.400mL,0.400mmol)混合。在室温下搅拌该混合物1h。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗制混合物,得到白色粉末TFA盐形式的期望产物(0.0193g,两步产率50%)。LCMS:m/z=737.4(M+H)+,2.14min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.91(d,J=8.1Hz,2H),7.21(d,J=8.1Hz,2H),5.30(d,J=4.9Hz,1H),4.12-4.01(m,1H),3.91(s,3H),3.31-3.01(m,11H),2.97(d,J=11.2Hz,1H),2.71(s,3H),2.36-2.21(m,1H),2.15(dd,J=17.1,6.4Hz,1H),2.11-2.02(m,2H),2.01-1.92(m,1H),1.91-1.79(m,2H),1.79-1.37(m,13H),1.33-1.22(m,2H),1.18(s,3H),1.09(s,3H),1.04(s,3H),0.96(s,3H),0.94(s,3H)。
步骤3:在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-甲基脲基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.019g,0.020mmol)与氢氧化锂单水合物(1.0M水溶液)(0.197mL,0.197mmol)和四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在搅拌下将该混合物加热至60℃保持30min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗制混合物,得到白色粉末TFA盐形式的4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(3-甲基脲基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.0203g,产率106%)。LCMS:m/z=723.4(M+H)+,1.93min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.20(d,J=8.3Hz,2H),5.30(d,J=4.6Hz,1H),4.16-3.99(m,1H),3.28-3.00(m,11H),3.00-2.86(m,1H),2.72(s,3H),2.38-2.21(m,1H),2.16(dd,J=17.2,6.5Hz,1H),2.12-2.01(m,2H),2.01-1.93(m,1H),1.90-1.55(m,10H),1.35(d,J=11.7Hz,6H),1.29(d,J=10.8Hz,2H),1.18(s,3H),1.09(s,3H),1.04(s,3H),0.96(br.s.,3H),0.95(br.s.,3H)。
实施例B30
4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(吡咯烷-1-甲酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(吡咯烷-1-甲酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-((叠氮基羰基)氨基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.030g,0.040mmol)与吡咯烷(0.033mL,0.400mmol)混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在室温下搅拌该混合物1h。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗制混合物。由此获得白色粉末TFA盐形式的期望产物(0.0178g,产率44.3%)。LCMS:m/z=777.5(M+H)+,2.16min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.91(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.30(d,J=4.9Hz,1H),4.16(br.s.,1H),3.91(s,3H),3.31-3.00(m,12H),2.94(br.s.,1H),2.38-2.21(m,2H),2.16(dd,J=17.0,6.2Hz,1H),2.09(d,J=14.7Hz,1H),2.01-1.66(m,12H),1.65-1.34(m,10H),1.33-1.22(m,2H),1.18(s,3H),1.10(s,3H),1.04(s,3H),0.96(br.s.,3H),0.95(br.s.,3H)。
步骤2:在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(吡咯烷-1-甲酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.019g,0.019mmol)与氢氧化锂单水合物(1.0M水溶液)(0.189mL,0.189mmol)和四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在搅拌下将该混合物加热至60℃保持30min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗制混合物,得到白色粉末TFA盐形式的4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(吡咯烷-1-甲酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.0163g,产率85%)。LCMS:m/z=763.4(M+H)+,2.04min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.20(d,J=8.3Hz,2H),5.30(d,J=4.9Hz,1H),4.21-4.08(m,1H),3.27-3.00(m,12H),2.93(d,J=9.3Hz,1H),2.28(t,J=11.4Hz,2H),2.16(dd,J=17.1,6.4Hz,1H),2.09(d,J=15.4Hz,1H),1.99-1.90(m,5H),1.90-1.80(m,2H),1.79-1.66(m,4H),1.66-1.54(m,4H),1.54-1.34(m,6H),1.33-1.22(m,3H),1.18(s,3H),1.10(s,3H),1.04(s,3H),0.96(br.s.,3H),0.95(br.s.,3H)。
实施例B31
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1,3,4-噁二唑-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-甲酰基肼羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在1打兰小瓶中,将(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-1-甲酸(0.050g,0.071mmol)与甲酰肼(8.47mg,0.141mmol)、HATU(0.035g,0.092mmol)和DIPEA(0.039mL,0.226mmol)于氯仿(1mL)中混合。在室温下搅拌该混合物26h。通过氮气流浓缩混合物,然后重新溶解于最小量的乙腈/MeOH混合物中,过滤并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化。由此分离出白色固体TFA盐形式的期望产物(0.0396g,产率57.4%)。LCMS:m/z=751.4(M+H)+,2.11min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ8.04(s,1H),7.91(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.29(d,J=4.6Hz,1H),3.91(s,3H),3.27-3.04(m,10H),3.03-2.88(m,3H),2.57(t,J=11.9Hz,1H),2.32-2.18(m,1H),2.18-2.02(m,3H),1.95-1.65(m,5H),1.64-1.32(m,10H),1.31-1.21(m,2H),1.18(s,3H),1.10(s,3H),1.03(s,3H),0.95(s,3H),0.94(s,3H)。
步骤2.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1,3,4-噁二唑-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(2-甲酰基肼羰基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.020g,0.020mmol)和DIPEA(0.036mL,0.204mmol)与乙腈(0.5mL)混合。向混合物中添加对甲苯磺酰氯(0.031g,0.163mmol)。在室温下搅拌该混合物1h。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法12)来纯化粗制混合物。由此获得期望产物(0.0084g,产率56.1%)。LCMS:m/z=733.7(M+H)+,2.32min(方法3)。
步骤3:在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1,3,4-噁二唑-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.0084g,0.011mmol)与氢氧化锂单水合物(1.0M水溶液)(0.115mL,0.115mmol)和四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在搅拌下将该混合物加热至70℃保持30min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法3)来纯化粗制混合物,得到白色粉末TFA盐形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1,3,4-噁二唑-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.0106g,产率97%)。LCMS:m/z=719.4(M+H)+,1.92min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ8.70(s,1H),7.92(d,J=8.3Hz,2H),7.19(d,J=8.3Hz,2H),5.32-5.21(m,1H),3.75(td,J=11.1,3.7Hz,1H),3.27-2.92(m,11H),2.65(t,J=12.0Hz,1H),2.57-2.42(m,1H),2.26-1.76(m,7H),1.72-1.33(m,10H),1.26(br.s.,3H),1.20(s,3H),1.16-1.05(m,4H),1.02(s,3H),0.95(s,3H),0.94(s,3H),0.91-0.84(m,1H)。
实施例B32
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在5mL微波小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.025g,0.035mmol)与4-氯丁酰氯(5.94μl,0.053mmol)和2,6-二-叔丁基-4-甲基吡啶(0.029g,0.141mmol)于乙腈(0.5mL)与1,4-二噁烷(0.5mL)的混合物中混合。在室温下搅拌该混合物5min,然后在微波反应器中加热至120℃保持1h。将混合物冷却至室温,然后将氢化钠(60%NaH的矿物油分散体)(过量,约20mg)添加至混合物中,产生明显的排气。在室温下搅拌该混合物24h。粗制混合物未经进一步处理即继续进行下一步骤。LCMS:m/z=776.5(M+H)+,2.18min(方法5)。
步骤2:通过缓慢添加水(1mL)来淬灭存于THF中的含有4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.027g,0.035mmol)和过量氢化钠的粗制反应混合物,产生剧烈排气。然后添加甲醇(1mL),并将所得混合物加热至60℃保持30min。通过氮气流将混合物浓缩至约0.5mL,用乙腈(1mL)和甲醇(1mL)稀释,然后过滤并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法3)来纯化,得到白色粉末TFA盐形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.0270g,两步产率76%)。LCMS:m/z=762.5(M+H)+,1.98min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.31(d,J=4.9Hz,1H),4.38-4.28(m,1H),3.62-3.53(m,1H),3.49-3.40(m,1H),3.27-2.93(m,11H),2.49-2.29(m,2H),2.29-2.12(m,2H),1.98(br.s.,4H),1.95-1.79(m,5H),1.78-1.68(m,2H),1.52(d,J=6.1Hz,6H),1.50-1.32(m,5H),1.31-1.25(m,2H),1.22(br.s.,3H),1.21(s,3H),1.05(s,6H),0.96(br.s.,3H),0.95(br.s.,3H)。
实施例B33
4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-氨基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
在20mL闪烁小瓶中,将(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-1-甲酸三乙铵盐(0.100g,0.123mmol)与叠氮磷酸二苯酯(0.080mL,0.370mmol)和三乙胺(0.034mL,0.247mmol)于无水1,4-二噁烷(5mL)中混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并将混合物加热至80℃保持2h。使混合物冷却至室温并在室温下搁置1.5h。在快速搅拌下向混合物中一次性添加氢氧化钠(1.0M水溶液)(4.93mL,4.93mmol)。在室温下将所得混浊混合物快速搅拌30min。通过氮气流浓缩混合物并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法15)来纯化。由此分离出白色固体TFA盐形式的期望产物(0.0739g,产率59.5%)。LCMS:m/z=666.3(M+H)+,1.79min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.31(d,J=4.9Hz,1H),3.85(t,J=8.6Hz,1H),3.27-3.12(m,6H),3.11-2.83(m,6H),2.48(br.s.,1H),2.23-1.97(m,5H),1.93-1.80(m,2H),1.75(d,J=16.1Hz,2H),1.69-1.34(m,11H),1.33-1.24(m,2H),1.21(s,3H),1.09(s,3H),1.06(s,3H),0.97(s,3H),0.96(s,3H)。
实施例B34
4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(二甲基氨基)-3a-((2-((2-((2-甲氧基乙基)磺酰基)乙基)(甲基)氨基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-氨基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在1打兰小瓶中,将(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-1-甲酸(0.150g,0.212mmol)与叠氮磷酸二苯酯(0.114mL,0.529mmol)和三乙胺(0.118mL,0.846mmol)于无水1,4-二噁烷(2mL)中混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并将混合物加热至80℃保持45min。添加额外叠氮磷酸二苯酯(0.057mL,0.265mmol)并将混合物加热至85℃再保持20分钟。将混合物移离热源,使其冷却至室温,并向其中添加氢氧化钠(3.0M水溶液)(1.41mL,4.23mmol)。搅拌45min后,在冰浴中冷却该混合物并向其中缓慢添加12M盐酸(0.353mL,4.23mmol)。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法3)来纯化粗制混合物。分离出白色粉末TFA盐形式的期望产物(0.0558g,产率25.8%)。LCMS:m/z=680.4(M+H)+,1.93min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.92(d,J=8.3Hz,2H),7.22(d,J=8.3Hz,2H),5.30(d,J=4.6Hz,1H),3.95-3.81(m,4H),3.30-2.84(m,12H),2.59-2.37(m,1H),2.32-2.21(m,1H),2.21-2.01(m,4H),2.00-1.70(m,4H),1.69-1.33(m,12H),1.33-1.24(m,2H),1.21(s,3H),1.09(s,3H),1.05(s,3H),0.96(s,3H),0.95(s,3H)。
步骤2.4-(2-(((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(二甲基氨基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-基)氨基)乙基)-4-甲基硫代吗啉-4-鎓1,1-二氧化物的制备
在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-氨基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.021g,0.021mmol)与2,6-二-叔丁基-4-甲基吡啶(0.042g,0.205mmol)于氯仿(0.5mL)中混合。在搅拌下向混合物中添加三氟甲磺酸甲酯(0.011mL,0.103mmol)。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在70℃下搅拌该混合物30min。添加额外5当量三氟甲磺酸甲酯(0.011mL,0.103mmol)并将混合物重新加热至70℃再保持105min。通过氮气流浓缩混合物并重新溶解于最小量的甲醇(其中添加少量THF)中。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗制混合物。由此分离出的产物直接进行下一步骤。LCMS:m/z=722.4(M+H)+,2.04min(方法5)。
步骤3:在1打兰小瓶中,将4-(2-(((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(二甲基氨基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-基)氨基)乙基)-4-甲基硫代吗啉-4-鎓1,1-二氧化物(0.010g,9.12μmol)与1.0M氢氧化锂水合物水溶液(0.091mL,0.091mmol)和四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在搅拌下将该混合物加热至70℃保持30min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法3)来纯化粗制混合物,得到白色粉末TFA盐形式的4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(二甲基氨基)-3a-((2-((2-((2-甲氧基乙基)磺酰基)乙基)(甲基)氨基)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.0048g,两步产率20%)。LCMS:m/z=740.4(M+H)+,1.88min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.1Hz,2H),7.20(d,J=8.3Hz,2H),5.30(dd,J=6.0,1.3Hz,1H),4.24-4.10(m,1H),3.84(t,J=4.6Hz,2H),3.67-3.56(m,2H),3.49-3.43(m,J=6.2,6.2Hz,2H),3.25-3.12(m,3H),3.01-2.74(m,8H),2.72(s,3H),2.35-2.21(m,1H),2.21-2.06(m,2H),2.06-1.97(m,2H),1.95-1.85(m,2H),1.73(d,J=17.1Hz,1H),1.68-1.42(m,12H),1.35-1.20(m,8H),1.17(s,3H),1.07(s,3H),1.05(s,3H),0.96(br.s.,3H),0.95(br.s.,3H)。
实施例B35
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-(甲基氨基)乙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-(甲基氨基)乙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.020g,0.028mmol)与2,6-二-叔丁基-4-甲基吡啶(0.029g,0.141mmol)于氯仿(0.5mL)中混合。在搅拌下向该混合物中添加三氟甲磺酸甲酯(4.98μl,0.045mmol)并安装衬有PTFE的螺旋盖并在室温下搅拌该混合物45min。向混合物中添加更多的三氟甲磺酸甲酯(7μl,约0.063mmol,2.25当量)并在室温下搅拌1.5h。向混合物中添加1.0M的氨/THF,然后在氮气流下将混合物浓缩成残余物,重新溶解于最小量的1∶1THF/MeOH混合物中并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法12)纯化。合并含有期望产物的级分并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法3)再纯化,得到白色粉末TFA盐形式的期望产物(0.0123g,产率40.9%)。LCMS:m/z=722.3(M+H)+,2.01min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.92(d,J=8.3Hz,2H),7.22(d,J=8.3Hz,2H),5.31(d,J=4.4Hz,1H),3.91(s,3H),3.28-2.96(m,12H),2.74(s,3H),2.50(td,J=10.9,2.6Hz,1H),2.21-1.91(m,6H),1.90-1.68(m,4H),1.68-1.37(m,11H),1.34(s,3H),1.31-1.24(m,2H),1.21(s,3H),1.12(s,3H),1.05(s,3H),0.96(br.s.,3H),0.95(br.s.,3H)。
步骤2:在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-(甲基氨基)乙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.0093g,8.74μmol)与1.0M氢氧化锂水合物水溶液(0.087mL,0.087mmol)、四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并将混合物加搅拌热至70℃保持30min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法16)来纯化粗制混合物,得到白色玻璃状固体TFA盐形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-(甲基氨基)乙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.0078g,产率80%)。LCMS:m/z=708.4(M+H)+,1.79min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.31(d,J=4.6Hz,1H),3.27-2.95(m,12H),2.74(s,3H),2.57-2.44(m,1H),2.23-1.92(m,6H),1.90-1.68(m,4H),1.68-1.40(m,11H),1.34(d,J=6.6Hz,3H),1.31-1.24(m,3H),1.21(s,3H),1.12(s,3H),1.05(s,3H),0.97(br.s.,3H),0.96(br.s.,3H)。
实施例B36
4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰氨基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
在1打兰小瓶中,将(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-1-甲酸(0.020g,0.028mmol)与叠氮磷酸二苯酯(0.015mL,0.071mmol)和三乙胺(0.016mL,0.113mmol)于无水1,4-二噁烷(1mL)中混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并将混合物加热至80℃保持20min。然后经由移液管将反应混合物直接添加至含有氢氧化钠(3.0M水溶液)(0.235mL,0.705mmol)的80℃小瓶中。1分钟后将混合物移离热源。用乙酸酐(0.135g,1.33mmol)处理混合物并将所得混合物加热至70℃保持10min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法16)来纯化粗制混合物,得到无色固体TFA盐形式的期望产物(0.0149g,产率54%)。LCMS:m/z=708.3(M+H)+,1.92min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ8.08(d,J=8.3Hz,1H),7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.20(d,J=8.3Hz,2H),5.30(dd,J=6.0,1.3Hz,1H),4.25(q,J=11.2Hz,1H),3.27-3.00(m,11H),2.91(dt,J=14.6,7.2Hz,1H),2.38-2.23(m,1H),2.22-2.05(m,3H),2.05-1.96(m,1H),1.92(s,3H),1.90-1.66(m,5H),1.65-1.35(m,11H),1.34-1.22(m,3H),1.18(s,3H),1.09(s,3H),1.04(s,3H),0.96(br.s.,3H),0.95(br.s.,3H)。
实施例B37和实施例B38
4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(甲基氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸和4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(二甲基氨基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(甲基氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯和4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(二甲基氨基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
实施两个单独的步骤1和步骤2实验。合并来自该两个实验的在步骤2之后所得的最终粗制产物并纯化以得到标题化合物:
实验1:在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-氨基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.021g,0.021mmol)与2,6-二-叔丁基-4-甲基吡啶(0.042g,0.205mmol)于氯仿(0.5mL)中混合。在搅拌下向该混合物中添加三氟甲磺酸甲酯(0.011mL,0.103mmol)。安装衬有PTFE的螺旋盖并在室温下搅拌该混合物过夜。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法16)来纯化粗制混合物。由此通过制备型HPLC获得TFA盐形式的该两种期望产物的混合物(0.0123g)。该物质直接进行下一步骤(步骤2实验1)。LCMS:m/z=694.6(M+H)+,1.92min和708.6(M+H)+,2.07min(方法3)。
实验2:在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-氨基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.021g,0.021mmol)与2,6-二-叔丁基-4-甲基吡啶(0.042g,0.205mmol)于氯仿(0.5mL)中混合。在搅拌下向该混合物中添加三氟甲磺酸甲酯(0.011mL,0.103mmol)。安装衬有PTFE的螺旋盖并将混合物加热至70℃保持30min。添加额外三氟甲磺酸甲酯(0.011mL,0.103mmol)并将混合物加热至70℃保持105min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗制混合物。由此通过制备型HPLC获得TFA盐形式的该两种期望产物的混合物(0.010g)。该物质直接进行下一步骤(步骤2实验2)。
步骤2:
实验1:在1打兰小瓶中,将来自步骤1实验1的含有4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(甲基氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐和4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(二甲基氨基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.0123g,0.012mmol)的混合物与1M氢氧化锂水合物水溶液(0.117mL,0.117mmol)、四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在搅拌下将该混合物加热至70℃保持30min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法16)来纯化粗制混合物。
实验2:在1打兰小瓶中,将来自步骤1实验2的含有4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(甲基氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐和4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(二甲基氨基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.010g,9.52μmol)的混合物与氢氧化锂水合物(0.095mL,0.095mmol)、四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在搅拌下将该混合物加热至70℃保持30min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法3)来纯化粗制混合物。
步骤2实验1和步骤2实验2的合并的残余物的再纯化:将来自步骤2实验1和步骤2实验2的得自制备型HPLC纯化的含有产物的级分合并,通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法17)再纯化。通过用88%乙腈、10%水、2%TFA处理混合物、随后在真空中再浓缩将浓缩的相同产物级分转化成TFA盐,由此获得TFA盐形式的分离的期望产物。
4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(甲基氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(实施例B37):得到无色固体TFA盐形式的所述材料(0.0086g,两步产率18%)。LCMS:m/z=680.4(M+H)+,1.73min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.1Hz,2H),5.31(dd,J=5.6,1.2Hz,1H),3.77-3.66(m,1H),3.25-3.01(m,8H),3.00-2.82(m,4H),2.71(s,3H),2.42-2.26(m,1H),2.23-2.12(m,1H),2.11-1.92(m,4H),1.80-1.70(m,2H),1.70-1.43(m,10H),1.43-1.34(m,1H),1.33-1.23(m,4H),1.20(s,3H),1.08(s,3H),1.06(s,3H),0.97(s,3H),0.96(br.s.,3H)。
4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(二甲基氨基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(实施例B38):得到无色固体TFA盐形式的所述材料(0.0097g,两步产率21%)。LCMS:m/z=694.4(M+H)+,1.76min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.93(d,J=8.1Hz,2H),7.21(d,J=8.1Hz,2H),5.37-5.24(m,1H),4.22-4.07(m,1H),3.28-3.03(m,8H),3.03-2.89(m,4H),2.85(s,6H),2.35-2.22(m,1H),2.21-1.99(m,6H),1.81-1.34(m,14H),1.33-1.24(m,2H),1.20(s,3H),1.12(s,3H),1.05(s,3H),0.97(br.s.,3H),0.96(br.s.,3H)。
实施例B39
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-(二甲基氨基)乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体1的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-(二甲基氨基)乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1和4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-(二甲基氨基)乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2的制备
在15mL压力容器中,用二甲胺(2.0M于THF中)(1.061mL,2.122mmol)、乙酸(0.121mL,2.122mmol)和氰基硼氢化钠(0.019g,0.283mmol)处理4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.100g,0.141mmol)的MeOH(1mL)溶液。将该容器密封并在油浴中将混合物加热至110℃保持6d。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法16)来纯化粗制混合物,由此分离得到期望产物:
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-(二甲基氨基)乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1是主要产物且是以白色固体TFA盐形式得到(0.0246g,产率16.1%)。LCMS:m/z=736.4(M+H)+,2.05min(方法5)。
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-(二甲基氨基)乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2是次要产物且是以白色粘性固体TFA盐形式得到(0.0116g,产率7.6%)。
步骤2:在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-((R)-1-(二甲基氨基)乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1TFA盐(0.0246g,0.023mmol)与1M氢氧化锂水合物水溶液(0.228mL,0.228mmol)、四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在搅拌下将该混合物加热至80℃保持20min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法16)来纯化粗制混合物。需要合并产物级分并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法15)再纯化,得到白色玻璃状固体TFA盐形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-(二甲基氨基)乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体1(0.0151g,产率62.2%)。LCMS:m/z=722.4(M+H)+,1.80min(方法5)。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.95(d,J=8.3Hz,2H),7.25(d,J=8.3Hz,2H),5.34(d,J=4.6Hz,1H),3.56-3.45(m,1H),3.30-3.05(m,10H),3.04-2.78(m,7H),2.63-2.50(m,1H),2.29-1.97(m,6H),1.93-1.75(m,4H),1.73-1.48(m,11H),1.40(d,J=6.8Hz,3H),1.38-1.30(m,2H),1.29(s,3H),1.20(s,3H),1.11(s,3H),1.01(s,3H),0.99(s,3H)。
实施例B40
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-(二甲基氨基)乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体2的制备
在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-((R)-1-(二甲基氨基)乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2TFA盐(0.0116g,10.76μmol)与1M氢氧化锂水合物水溶液(0.108mL,0.108mmol)、四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在搅拌下将该混合物加热至80℃保持20min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法3)来纯化粗制混合物,得到粘性胶状TFA盐形式的期望产物(0.0053g,产率46.3%)。LCMS:m/z=722.4(M+H)+,1.82min(方法5)。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.95(d,J=8.1Hz,2H),7.25(d,J=8.1Hz,2H),5.34(d,J=4.4Hz,1H),3.55(d,J=7.1Hz,1H),3.29-3.18(m,8H),3.14(br.s.,4H),2.91(br.s.,6H),2.26-1.98(m,6H),1.95-1.73(m,5H),1.72-1.47(m,13H),1.41(d,J=6.6Hz,4H),1.35-1.23(m,13H),1.14(s,3H),1.11(s,3H),1.02(s,3H),0.99(s,3H),0.96-0.86(m,3H)。
实施例B41
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体2的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1和4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2的制备
向4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.050g,0.071mmol)的MeOH(0.5mL)和THF(0.5mL)溶液中添加乙酸铵(0.055g,0.707mmol)和氰基硼氢化钠(7.02mg,0.106mmol)。在室温下搅拌反应混合物24h,然后加热至70℃保持6d。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法16)来纯化粗制混合物,得到期望产物:
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体1:分离得到无色固体TFA盐形式(0.0233g,产率31.4%)。LCMS:m/z=708.4(M+H)+,2.01min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.92(d,J=8.3Hz,2H),7.22(d,J=8.3Hz,2H),5.30(d,J=4.6Hz,1H),3.91(s,3H),3.49-3.39(m,1H),3.30-2.92(m,12H),2.44(dd,J=8.9,6.2Hz,1H),2.16(dd,J=17.1,6.4Hz,1H),2.11-1.92(m,5H),1.90-1.77(m,2H),1.73(d,J=17.1Hz,1H),1.69-1.35(m,13H),1.33-1.24(m,5H),1.21(s,3H),1.11(s,3H),1.05(s,3H),0.96(s,3H),0.95(s,3H)。
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2:分离得到无色固体TFA盐形式(0.0090g,产率12.1%)。LCMS:m/z=708.4(M+H)+,2.06min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.92(d,J=8.3Hz,2H),7.22(d,J=8.3Hz,2H),5.30(d,J=4.6Hz,1H),3.91(s,3H),3.58-3.47(m,1H),3.28-3.12(m,8H),3.12-2.95(m,4H),2.75-2.62(m,1H),2.23-2.05(m,3H),2.05-1.84(m,3H),1.83-1.39(m,15H),1.35-1.23(m,7H),1.21(s,3H),1.09(s,3H),1.05(s,3H),0.96(s,3H),0.95(br.s.,3H)。
步骤2.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1-氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸异构体2的制备
在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-((R)-1-氨基乙基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯异构体2TFA盐(0.0081g,7.71μmol)与1M氢氧化锂水合物水溶液(0.077mL,0.077mmol)、四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在搅拌下将该混合物加热至80℃保持20min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法16)来纯化粗制混合物,得到白色玻璃状固体TFA盐形式的期望化合物(0.0076g,产率93%)。LCMS:m/z=694.4(M+H)+,1.83min(方法5)。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.95(d,J=8.1Hz,2H),7.25(d,J=8.1Hz,2H),5.34(d,J=4.6Hz,1H),3.58(q,J=6.3Hz,1H),3.30-3.17(m,8H),3.17-3.04(m,3H),2.98(d,J=5.1Hz,1H),2.66(br.s.,1H),2.28-2.10(m,3H),2.09-1.99(m,1H),1.77(br.s.,5H),1.75-1.45(m,11H),1.44-1.29(m,7H),1.27(s,3H),1.14(s,3H),1.11(s,3H),1.01(s,3H),0.99(s,3H)。
实施例B42
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(羟基甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.(乙基碳酸)(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-1-甲酸酐的制备
在1打兰小瓶中,将(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-1-甲酸三乙铵盐(0.020g,0.025mmol)与氯甲酸乙酯(0.014ml,0.148mmol)和三乙胺(6.87μl,0.049mmol)于无水氯仿中混合。在室温下搅拌该混合物10min。粗制反应混合物直接用于下一步骤中。LCMS:m/z=781.4(M+H)+,2.30min(方法5)。
步骤2.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(羟基甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
用THF(0.75mL)稀释含有(乙基碳酸)(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-1-甲酸酐(0.020g,0.025mmol)于氯仿(1mL)中的粗品混合物并用硼氢化钠(9.46mg,0.250mmol)处理。5min后,显现无气体逸出且固体硼氢化钠漂浮于混合物中。向混合物中添加无水甲醇(0.75mL)且立即发生冒泡。15min后,添加额外硼氢化钠(9.46mg,0.250mmol)并在氮气下搅拌该混合物过夜。在氮气流下浓缩粗制混合物,然后重新溶解于最小量的MeOH与THF的混合物中并通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法12)来纯化,得到白色玻璃状固体形式的期望产物(0.0080g,产率93%)。LCMS:m/z=695.4(M+H)+,2.20min(方法5)。
步骤3:在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(羟基甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.008g,0.012mmol)与1M氢氧化锂水合物水溶液(0.115mL,0.115mmol)、四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在搅拌下将该混合物加热至80℃保持30min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法18)来纯化粗制混合物,得到4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-1-(羟基甲基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.0055g,产率52.6%)。LCMS:m/z=681.6(M+H)+,1.99min(方法5)。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.97(s,1H),7.88(d,J=8.2Hz,2H),7.24(d,J=7.9Hz,2H),5.28(d,J=5.2Hz,1H),4.63(br.s.,1H),3.56-3.48(m,1H),3.21-3.03(m,12H),2.13(dd,J=17.2,6.6Hz,1H),2.03(br.s.,2H),1.84(d,J=7.0Hz,3H),1.78-1.64(m,3H),1.61-1.39(m,10H),1.34(d,J=16.2Hz,1H),1.30-1.20(m,4H),1.11(s,3H),1.00(br.s.,3H),0.98(br.s.,3H),0.92(br.s.,6H)。
实施例B43和实施例B44
4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2,2,2-三氟乙酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸和4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-氨基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯和4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(甲基氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在100mL圆底烧瓶中,将4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-氨基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸TFA盐(0.410g,0.407mmol)与无水DCM(15mL)和甲醇(15mL)混合。向该溶液中添加TMS-重氮甲烷(1.424mL,2.85mmol)。在已添加约一半重氮甲烷溶液后继而发生轻微放热和明显有气体生成。在室温下搅拌该混合物3h,然后在真空中浓缩成固体残余物。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法4)来纯化粗制混合物。由此获得浅黄色固体TFA盐形式的所述两种期望产物的混合物(0.259g,产率70.2%)。该混合物继续进行下一步骤。LCMS:m/z=680.5(M+H)+和694.6(M+H)+,2.04min(方法5)。
步骤2.4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2,2,2-三氟乙酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯和4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
制备草酰氯(14.0mg;0.110mmol)在无水THF(1mL)中的标准溶液。在1打兰小瓶中,将来自步骤1的含有4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-氨基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐和4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(甲基氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(0.020g,0.022mmol)的混合物与DIPEA(0.019mL,0.110mmol)于无水THF(0.5mL)中混合。向此混合物中添加含有草酰氯(1.396mg,0.011mmol)的0.1mL标准草酰氯/THF溶液,并在室温下将所得混合物搅拌3h。向混合物中添加另一当量草酰氯(1.396mg,0.011mmol)(0.1mL标准溶液)。在室温下搅拌该混合物1h,然后添加另一当量草酰氯(1.396mg,0.011mmol)(0.1mL标准溶液)并在室温下搅拌30min。在氮气流下浓缩混合物且将粗品残余物直接用于下一步骤。LCMS:m/z=776.5(M+H)+,2.28min和m/z=790.6(M+H)+,2.47min(方法5)。
步骤3:在1打兰小瓶中,用1M氢氧化锂水合物水溶液(0.176mL,0.176mmol)处理来自步骤2的含有4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2,2,2-三氟乙酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯和4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.017g,0.022mmol)的粗品反应混合物并添加MeOH(0.3mL)。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在搅拌下将该混合物加热至70℃保持30min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法6)来纯化粗制混合物,由此获得所述两种期望产物。
4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2,2,2-三氟乙酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸是从制备型HPLC洗脱出来的第一种化合物。该产物以白色粉末TFA盐形式分离得到(0.0110g,产率50%)。LCMS:m/z=762.4(M+H)+,2.11min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场))δ7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.20(d,J=8.1Hz,2H),5.31(s,1H),4.39(td,J=11.2,2.8Hz,1H),3.27-2.82(m,12H),2.45-2.28(m,2H),2.21-1.99(m,3H),1.98-1.85(m,2H),1.84-1.70(m,3H),1.67-1.36(m,10H),1.33-1.24(m,3H),1.19(s,3H),1.08(s,3H),1.04(s,3H),0.96(s,3H),0.95(br.s.,3H)。
4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(2,2,2-三氟-N-甲基乙酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸是从制备型HPLC洗脱出来的第二种化合物。该产物以白色粉末TFA盐形式分离得到(0.0042g,产率18%)。LCMS:m/z=776.5(M+H)+,2.13min(方法5)。
实施例B45
4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(4-(3-(三氟甲基)-3H-双吖丙啶-3-基)苯甲酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(4-(3-(三氟甲基)-3H-双吖丙啶-3-基)苯甲酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-氨基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.025g,0.037mmol)和4-(3-(三氟甲基)-3H-双吖丙啶-3-基)苯甲酸(11.00mg,0.048mmol)与HATU(0.022g,0.059mmol)和DIPEA(0.019mL,0.110mmol)于氯仿(1mL)中混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶,用铝箔包裹,并在室温下将内含物搅拌过夜。在氮气流下将粗制混合物浓缩成残余物,然后将混合物重新溶解于最小量的甲醇中。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法16)来纯化粗制混合物,分离出白色固体TFA盐形式的期望产物(0.0290g,产率80%)。LCMS:m/z=892.6(M+H)+,2.41min(方法5)。
步骤2:在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aR,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(4-(3-(三氟甲基)-3H-双吖丙啶-3-基)苯甲酰氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.0295g,0.033mmol)溶解于四氢呋喃(0.3mL)与MeOH(0.3mL)的混合物中,然后用1M氢氧化锂水合物水溶液(0.132mL,0.132mmol)处理该混合物。用铝箔包裹该小瓶以阻止光进入,用衬有PTFE的螺旋盖密封并在搅拌下将该混合物加热至70℃保持45min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法19)来纯化粗制混合物,得到白色固体TFA盐形式的期望产物(0.0190g,产率53.9%)。LCMS:m/z=878.6(M+H)+,2.25min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ8.63(d,J=7.8Hz,1H),7.92(d,J=8.3Hz,2H),7.85(d,J=8.6Hz,2H),7.28(d,J=8.1Hz,2H),7.19(d,J=8.3Hz,2H),5.27(d,J=4.6Hz,1H),4.50(br.s.,1H),3.30-2.87(m,12H),2.53-2.33(m,2H),2.20-1.75(m,8H),1.75-1.64(m,2H),1.64-1.35(m,9H),1.26(br.s.,3H),1.19(s,3H),1.10(s,3H),1.02(s,3H),0.95(br.s.,3H),0.94(br.s.,3H)。
实施例B46
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰基-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰基-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-(1,2-二羟基丙-2-基)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的二醇非对映异构体混合物(12.26g,16.59mmol)溶解于THF(450mL)与水(150mL)的混合物中并在冰浴中冷却所得溶液。添加高碘酸钠(7.10g,33.2mmol)。澄清溶液迅速变浑浊并沉淀出白色絮凝固体。在室温下搅拌该混合物30min,然后用氯仿(1200mL)和水(500mL)稀释,震荡所得混合物并分离各相。再次用氯仿(2×400mL)萃取水相。合并有机相,经硫酸钠干燥,过滤并在真空中浓缩。通过硅胶柱色谱(300g二氧化硅,用100%DCM至20∶1DCM∶MeOH梯度洗脱超过6倍柱体积,用20∶1DCM∶MeOH洗脱8倍柱体积)来纯化残余物,得到白色固体形式的期望产物(1.70g,产率18.8%)。LCMS:m/z=546.4(M+H)+,2.36min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.91(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.6Hz,2H),5.29(dd,J=6.2,1.6Hz,1H),3.91(s,3H),2.90(td,J=11.3,5.7Hz,1H),2.43-2.19(m,5H),2.18-2.06(m,1H),2.00-1.91(m,2H),1.85-1.44(m,12H),1.44-1.34(m,4H),1.27(d,J=10.0Hz,1H),1.14(s,3H),1.13-1.08(m,1H),1.07(s,3H),1.02(s,3H),0.95(s,3H),0.94(s,3H)。
步骤2:在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰基-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.035g,0.064mmol)与四氢呋喃(0.3mL)与MeOH(0.3mL)的混合物混合,然后用1M氢氧化锂水合物水溶液(0.257mL,0.257mmol)处理该混合物。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶并在搅拌下将该混合物加热至70℃保持45min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法16)来纯化粗制混合物,得到白色粉末TFA盐形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰基-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.0253g,产率60%)。LCMS:m/z=532(M+H)+,2.11min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.92(d,J=8.6Hz,2H),7.20(d,J=8.6Hz,2H),5.29(dd,J=6.1,1.5Hz,1H),2.88(td,J=11.2,6.1Hz,1H),2.36(t,J=11.7Hz,1H),2.31-2.20(m,4H),2.13(dd,J=17.1,6.4Hz,1H),2.00-1.89(m,2H),1.87-1.47(m,11H),1.47-1.33(m,3H),1.31-1.23(m,1H),1.14(s,3H),1.10(br.s.,1H),1.07(s,3H),1.03(s,3H),0.95(s,3H),0.94(s,3H)。
实施例B47
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
在1打兰小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-乙酰基-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(0.0262g,0.028mmol)与氢氧化锂单水合物1.0M水溶液(0.249mL,0.249mmol)、四氢呋喃(0.3mL)和MeOH(0.3mL)混合。用衬有PTFE的螺旋盖密封小瓶,并在搅拌下将该混合物加热至70℃保持35min。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法2)来纯化粗制混合物,得到白色粉末TFA盐形式的标题化合物(0.0208g,产率80%)。LCMS:m/z=693.6(M+H)+,2.16min(方法5)。1HNMR(400MHz,氯仿-d与甲醇-d4的1∶1混合物,甲醇-d4锁场)δ7.92(d,J=8.3Hz,2H),7.20(d,J=8.3Hz,2H),5.33-5.26(m,1H),3.31-2.98(m,12H),2.57(t,J=11.6Hz,1H),2.44-2.33(m,1H),2.26(s,3H),2.19-2.01(m,3H),1.88-1.75(m,2H),1.75-1.64(m,3H),1.64-1.50(m,5H),1.50-1.38(m,4H),1.32-1.23(m,2H),1.19(s,3H),1.16-1.06(m,5H),1.03(s,3H),0.96(s,3H),0.95(s,3H)。
实施例B48
(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-羧基苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
步骤1.(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-((S)-2,2-二溴-1-甲基环丙基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
快速搅拌(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(丙-1-烯-2-基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(11.0g,16.6mmol)和溴化N-苄基-N,N-二乙基乙铵(0.903g,3.32mmol)的溴仿(29.0mL,332mmol)溶液并用氢氧化钠(13.3g,332mmol)水溶液(50mL)缓慢处理。在快速搅拌下将所得二相混合物加热至63℃。添加额外溴仿(29.0mL,332mmol)和NaOH(13.3g,332mmol)水溶液(50mL),并在63℃下将混合物快速搅拌60h。用水(700mL)缓慢稀释混合物并用DCM(3×200mL)洗涤。合并有机萃取物并在真空中浓缩成浅褐色油状物,通过硅胶柱色谱(用100%己烷至30∶1己烷∶EtOAc梯度洗脱)纯化,得到6.85g(产率49.5%)白色固体。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm7.95-7.89(m,J=8.2Hz,2H),7.40-7.28(m,5H),7.22-7.16(m,J=8.2Hz,2H),5.29(dd,J=6.1,1.5Hz,1H),5.17(d,J=12.2Hz,1H),5.03(d,J=12.2Hz,1H),3.90(s,3H),2.35-2.23(m,3H),2.20-2.06(m,2H),1.98(dd,J=12.5,7.6Hz,1H),1.71-1.55(m,5H),1.55(s,3H),1.51-1.27(m,12H),1.26(s,5H),1.20(dd,J=10.8,2.9Hz,1H),1.18-1.07(m,2H),0.98(s,3H),0.95(s,3H),0.91(d,J=2.4Hz,6H),0.88(t,J=6.9Hz,2H),0.81(s,3H)。
步骤2.(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯的制备
用三正丁基氢化锡(14.3g,13.1mL,49.0mmol)、随后用AIBN(0.067g,0.409mmol)处理(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bS)-1-((S)-2,2-二溴-1-甲基环丙基)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(6.82g,8.17mmol)的甲苯(100mL)溶液。在100℃、搅拌下加热该混合物18h。在真空中浓缩混合物并通过硅胶柱色谱(用100%己烷至25∶1己烷∶EtOAc梯度洗脱)纯化,合并产物级分并在真空中浓缩,然后将残余物重新溶解于DCM中并使用DCM作为洗脱液使其通过由90重量%二氧化硅和10重量%KF组成的柱。在真空中浓缩,得到5.48g(99%)白色泡沫状物固体。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm8.00-7.91(m,J=8.2Hz,2H),7.42-7.31(m,5H),7.26-7.18(m,J=8.2Hz,2H),5.36-5.29(m,1H),5.15(d,J=12.2Hz,1H),5.08(d,J=12.5Hz,1H),3.94(s,3H),2.32-2.24(m,1H),2.24-2.11(m,2H),2.07-1.97(m,1H),1.94-1.87(m,1H),1.87-1.78(m,1H),1.77-1.67(m,2H),1.67-1.59(m,1H),1.56-1.36(m,10H),1.36-1.26(m,2H),1.26-1.20(m,2H),1.19-1.13(m,1H),1.02(s,3H),1.00(s,3H),0.95(br.s.,3H),0.95(br.s.,3H),0.94(br.s.,3H),0.85(s,3H),0.46-0.40(m,1H),0.38(dt,J=9.2,4.7Hz,1H),0.31-0.20(m,2H)。
步骤3.(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸苄基酯(5.34g,7.89mmol)的1,2-二氯乙烷(100mL)溶液中添加三乙胺(1.76mL,12.6mmol)、叔丁基二甲基甲硅烷(2.62mL,1.84g,15.8mmol)和乙酸钯(II)(0.443g,1.97mmol)。将该混合物加热至60℃保持22h。用10∶1己烷∶EtOAc作为洗脱液使粗制反应混合物通过硅胶/硅藻土塞。在真空中浓缩得到6.34g(产率>100%)白色固体,其未经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤4.(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(5.53g,7.89mmol)的1,4-二噁烷(100mL)溶液中添加TBAF(1.0M于THF中)(11.8mL,11.8mmol)。搅拌该混合物2.5h,然后添加400mL1MHCl水溶液并在室温下将所得白色固体悬浮液搅拌10min。通过过滤分离出固体沉淀物并干燥,得到白色粉末形式的标题化合物(4.43g,产率96%)。LCMS:m/e587.4(M+H)+,4.58min(方法5)。1HNMR(500MHz,氯仿-d)δppm9.61(br.s.,1H),8.01-7.90(m,2H),7.26-7.18(m,2H),5.33(dd,J=6.3,1.7Hz,1H),3.94(s,3H),2.34-2.23(m,1H),2.23-2.13(m,2H),2.08-1.99(m,1H),1.99-1.90(m,2H),1.80-1.62(m,3H),1.60-1.36(m,12H),1.34-1.19(m,4H),1.05(s,3H),1.04-0.99(m,6H),0.98-0.93(m,9H),0.47-0.41(m,1H),0.41-0.36(m,1H),0.33-0.22(m,2H)。
步骤5:在20mL闪烁小瓶中,将(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(0.080g,0.136mmol)与氢氧化锂单水合物(0.023g,0.545mmol)于THF(1mL)、甲醇(1mL)和水(0.5mL)中混合。将该悬浮混合物升温至60℃保持1h。通过反相制备型HPLC(制备型HPLC方法26)来纯化粗制混合物,得到白色粉末形式的期望产物(0.042g,产率51.6%)。LCMS:m/e571.7(M-H)-,2.35min(方法3)。1HNMR(500MHz,CDCl3与MeOD的1∶1混合物,MeOD锁场)d7.88(d,J=8.2Hz,2H),7.16(d,J=8.2Hz,2H),5.29-5.21(m,1H),2.21-2.13(m,2H),2.10(dd,J=17.1,6.4Hz,1H),1.99-1.91(m,1H),1.88-1.78(m,2H),1.67(d,J=17.1Hz,1H),1.65-1.53(m,2H),1.51-1.38(m,8H),1.38-1.26(m,4H),1.25-1.12(m,4H),0.98(s,3H),0.95(s,3H),0.94(br.s.,3H),0.88(s,4H),0.88(br.s.,3H),0.38-0.27(m,2H),0.23-0.12(m,2H)。
实施例B49
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-异氰酸根合-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
向(1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-9-(4-(甲氧基羰基)苯基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-3a-甲酸(3.50g,5.96mmol)的1,4-二噁烷(60mL)浆液中添加三乙胺(1.50mL,10.7mmol)和叠氮磷酸二苯酯(1.93mL,2.46g,8.95mmol)。将所得浆液加热至100℃保持5h。将该混合物冷却至室温,用EtOAc稀释并用1NNaOH(2×70mL),然后用盐水(25mL)洗涤。固体从有机相中沉淀出来并通过过滤分离。浓缩滤液提供另一批沉淀物。该两批初始沉淀物均为相同物质并干燥成白色粉末(2.25g,产率64.6%)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δppm8.01-7.92(m,J=8.3Hz,2H),7.26-7.18(m,J=8.3Hz,2H),5.34(dd,J=6.1,1.7Hz,1H),3.93(s,3H),2.18(dd,J=17.1,6.4Hz,1H),2.13-1.99(m,2H),1.92-1.64(m,6H),1.63-1.36(m,11H),1.32-1.18(m,4H),1.13(s,3H),1.04(s,3H),1.01(s,3H),0.97(s,3H),0.96(s,3H),0.95(s,3H),0.46-0.38(m,2H),0.38-0.25(m,2H)。
步骤2.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯盐酸盐的制备
用浓HCl(7.93mL,96mmol)处理4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-异氰酸根合-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯(2.24g,3.84mmol)的THF(40mL)溶液。在室温下将所得溶液搅拌48h。过滤混合物以去除固体,然后在真空中将滤液浓缩成白色粉末(2.30g,产率100%)。LCMS:m/e559(M+H)+,2.12min(方法6)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δppm8.07(br.s.,2H),7.98-7.91(m,J=8.1Hz,2H),7.26-7.17(m,J=8.1Hz,2H),5.34(d,J=5.1Hz,1H),3.93(s,3H),2.43(dd,J=12.7,9.0Hz,1H),2.31-2.10(m,4H),2.06-1.83(m,4H),1.78-1.67(m,4H),1.65-1.44(m,11H),1.30(br.s.,6H),1.06(s,3H),1.04(s,3H),0.98(br.s.,3H),0.96(br.s.,3H),0.96(br.s.,3H),0.54(br.s.,1H),0.42(d,J=5.1Hz,2H),0.35-0.23(m,1H)。
步骤3:在密封小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯盐酸盐(0.050g,0.090mmol)和氢氧化锂单水合物1.0M水溶液(0.359mL,0.359mmol)于THF(0.8mL)和MeOH(0.8mL)中的混合物升温至75℃,得到均匀溶液。1h后将混合物移离热源。使用制备型HPLC方法24通过反相制备型HPLC来纯化粗制混合物,得到浅黄色粉末形式的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(48.5mg,产率79%)。LCMS:m/e544.7(M+H)+,1.94min(方法6)。1HNMR(400MHz,CDCl3与MeOD的1∶1混合物,MeOD锁场)δppm6.68(d,J=8.3Hz,2H),5.96(d,J=8.0Hz,2H),4.14-4.00(m,1H),2.09(dt,J=3.2,1.5Hz,1H),1.00-0.86(m,2H),0.86-0.64(m,2H),0.60-0.44(m,5H),0.43-0.22(m,10H),0.18-0.02(m,4H),-0.04--0.14(m,4H),-0.17(s,3H),-0.20(s,3H),-0.27(s,4H),-0.28(s,3H),-0.29(br.s.,3H),-0.73--0.87(m,2H),-0.87--0.97(m,2H)。
实施例B50
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-(甲基氨基)-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-(甲基氨基)-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
在密封小瓶中,用碘甲烷(0.016mL,0.036g,0.25mmol)处理4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯盐酸盐(50mg,0.084mmol)和碳酸钾(23.3mg,0.168mmol)于DMF(1mL)中的混合物并加热至75℃保持3h。用THF和盐水稀释该混合物。震荡该混合物并分离各相。在真空中将有机相浓缩成残余物。使用制备型HPLC方法25进行反相制备型HPLC纯化,分离得到玻璃状白色固体单TFA盐形式的产物(57.2mg,产率99%)。LCMS:m/e572.6(M+H)+,2.18min(方法6)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δppm8.02-7.88(m,J=8.1Hz,2H),7.26-7.17(m,J=8.1Hz,2H),5.33(d,J=4.6Hz,1H),3.93(s,3H),2.65(br.s.,3H),2.27-2.09(m,3H),2.09-1.99(m,1H),1.95(dd,J=13.8,8.4Hz,1H),1.89-1.74(m,3H),1.72-1.69(m,1H),1.66(d,J=2.9Hz,1H),1.61-1.39(m,10H),1.38-1.24(m,4H),1.14(s,3H),1.10(s,3H),1.04(s,3H),0.99-0.91(m,9H),0.49-0.40(m,2H),0.40-0.35(m,1H),0.35-0.27(m,1H)。
步骤2:在密封小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-(甲基氨基)-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯TFA盐(57mg,0.083mmol)、1.0MLiOH水溶液(0.417mL,0.417mmol)、THF(0.8mL)和甲醇(0.8mL)的混合物升温至75℃保持1h,然后在60℃下保持18h。使用制备型HPLC方法24进行反相制备型HPLC纯化,分离得到白色固体单TFA盐形式的标题化合物4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-(甲基氨基)-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(44.1mg,产率69%)。LCMS:m/e558.7(M+H)+,1.98min(方法6)。1HNMR(400MHz,CDCl3与MeOD的1∶1混合物,MeOD锁场)δppm6.69(d,J=8.0Hz,2H),5.97(d,J=8.0Hz,2H),4.07(d,J=4.8Hz,1H),2.09(dt,J=3.2,1.5Hz,1H),1.35(s,3H),1.01-0.86(m,2H),0.86-0.72(m,2H),0.72-0.56(m,3H),0.52(d,J=16.3Hz,2H),0.39-0.10(m,11H),0.05(dd,J=10.9,6.7Hz,1H),-0.01--0.07(m,1H),-0.08(s,3H),-0.15(s,3H),-0.19(s,3H),-0.26(s,3H),-0.28(br.s.,3H),-0.29(br.s.,3H),-0.72--0.81(m,1H),-0.83(dd,J=6.7,3.9Hz,1H),-0.86--0.96(m,2H)。
实施例B51
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙酰氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙酰氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
用HATU(0.044g,0.117mmol)和DIPEA(0.063mL,0.359mmol)处理4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯盐酸盐(50mg,0.084mmol)和2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙酸(0.023g,0.117mmol)于DCM(1mL)中的混合物。在室温下搅拌该混合物3h。在氮气流下将混合物浓缩成残余物,然后重新溶解于甲醇与THF的混合物中。使用制备型HPLC方法25进行反相制备型HPLC纯化,分离得到玻璃状灰白色固体单TFA盐形式的产物(44.9mg,产率59%)。LCMS:m/e733.6(M+H)+,2.66min(方法6)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δppm8.01-7.90(m,J=8.3Hz,2H),7.26-7.18(m,J=8.3Hz,2H),5.34(dd,J=6.1,1.7Hz,1H),3.94(s,3H),3.35-3.20(m,6H),3.12(d,J=5.1Hz,4H),2.71-2.56(m,1H),2.46(dd,J=12.5,8.3Hz,1H),2.19(dd,J=17.0,6.5Hz,1H),2.13-2.01(m,1H),1.87-1.69(m,3H),1.64-1.62(m,1H),1.61-1.34(m,12H),1.32-1.26(m,2H),1.23-1.13(m,1H),1.06(s,3H),1.04(s,3H),1.03(br.s.,3H),0.98(s,3H),0.96(s,6H),0.54-0.44(m,1H),0.41-0.32(m,2H),0.32-0.23(m,1H)。
步骤2:在密封小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙酰氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯三氟乙酸盐(0.0449g,0.053mmol)和1M氢氧化锂水溶液(0.265mL,0.265mmol)与THF(0.5mL)和MeOH(0.5mL)的混合物加热至75℃保持1h。使用制备型HPLC方法24进行反相制备型HPLC纯化,分离得到白色固体单TFA盐形式的标题化合物4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-(2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙酰氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(37.6mg,产率83%)。LCMS:m/e719.7(M+H)+,2.32min(方法6)。1HNMR(400MHz,CDCl3与MeOD的1∶1混合物,MeOD锁场)δppm6.65(d,J=8.3Hz,2H),5.94(d,J=8.3Hz,2H),4.04(d,J=4.6Hz,1H),1.94(br.s.,6H),1.86(d,J=5.6Hz,4H),1.31(d,J=13.0Hz,1H),1.13(dd,J=12.7,8.1Hz,1H),0.90(dd,J=17.1,6.4Hz,1H),0.84(d,J=10.8Hz,1H),0.58-0.45(m,2H),0.44-0.20(m,9H),0.20--0.08(m,7H),-0.13(d,J=12.7Hz,1H),-0.21(s,3H),-0.22(s,3H),-0.24(s,4H),-0.31(s,3H),-0.32--0.36(m,6H),-0.76--0.85(m,1H),-0.85--0.93(m,1H),-0.93--1.04(m,2H)。
实施例B52
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
步骤1.4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯的制备
将含有存于乙腈(3mL)中的4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯盐酸盐(100mg,0.168mmol)、4-(2-氯乙基)硫代吗啉1,1-二氧化物盐酸盐(0.122mg,0.522mmol)(如WO1002045652中所述制备)、磷酸三钾(0.157g,0.740mmol)和碘化钾(0.075g,0.454mmol)的压力容器密封并加热至120℃保持64h。用THF稀释粗制混合物并过滤以去除固体。浓缩滤液并使用制备型HPLC方法25进行反相制备型HPLC纯化,分离得到白色固体双TFA盐形式的产物(0.0982mg,产率61.6%)。LCMS:m/e719.7(M+H)+,2.10min(方法6)。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δppm8.02-7.88(m,J=8.3Hz,2H),7.26-7.17(m,J=8.3Hz,2H),5.41-5.26(m,1H),3.94(s,3H),3.33-3.10(m,8H),3.10-2.99(m,2H),2.98-2.83(m,2H),2.25-2.04(m,3H),2.02-1.80(m,5H),1.79-1.69(m,2H),1.66-1.36(m,11H),1.27(d,J=9.0Hz,2H),1.21(s,3H),1.11(s,3H),1.05(s,3H),0.97(br.s.,3H),0.96(s,6H),0.49-0.40(m,2H),0.40-0.27(m,2H)。
步骤2:在密封小瓶中,将4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸甲基酯三氟乙酸盐(0.098g,0.118mmol)和1M氢氧化锂水溶液(0.588mL,0.588mmol)与THF(1mL)和MeOH(1mL)的混合物加热至75℃保持1h。使用制备型HPLC方法24进行反相制备型HPLC纯化,分离得到白色固体双TFA盐形式的标题化合物4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(89.9mg,产率79%)。LCMS:m/e705.8(M+H)+,1.93min(方法6)。1HNMR(400MHz,CDCl3与MeOD的1∶1混合物,MeOD锁场)δppm7.91(d,J=8.3Hz,2H),7.19(d,J=8.1Hz,2H),5.29(d,J=4.4Hz,1H),3.28-3.09(m,7H),3.09-2.89(m,5H),2.16(dd,J=17.0,6.2Hz,1H),2.07(d,J=14.7Hz,3H),1.98-1.89(m,1H),1.89-1.78(m,3H),1.78-1.64(m,2H),1.63-1.36(m,12H),1.35-1.25(m,2H),1.17(s,3H),1.10(s,3H),1.03(s,3H),0.95(br.s.,3H),0.94(br.s.,3H),0.93(br.s.,3H),0.47-0.37(m,2H),0.37-0.24(m,2H)。
实施例B53
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-3a-(2-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)乙基氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
除了在步骤1中使用1-(2-氯乙基)-4-(甲基磺酰基)哌啶(0.152g,0.673mmol)代替4-(2-氯乙基)硫代吗啉1,1-二氧化物盐酸盐外,通过与用于制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的相同的两步法来制备标题化合物。使用制备型HPLC方法24对步骤2的反应混合物进行反相制备型HPLC纯化,分离得到白色固体双TFA盐形式的标题化合物(70.5mg,产率71.5%)。LCMS:m/e733.6(M+H)+,2.28min(方法5)。1HNMR(400MHz,CDCl3与MeOD的1∶1混合物,MeOD锁场)δppm7.97-7.87(m,J=8.3Hz,2H),7.25-7.15(m,J=8.6Hz,2H),5.31(dd,J=6.0,1.6Hz,1H),3.26(t,J=11.7Hz,2H),3.21-3.16(m,2H),3.16-3.02(m,2H),2.94(s,3H),2.92-2.83(m,1H),2.56(t,J=11.2Hz,1H),2.42(t,J=12.0Hz,1H),2.27-2.13(m,3H),2.13-1.94(m,5H),1.94-1.83(m,3H),1.82-1.66(m,3H),1.63-1.38(m,11H),1.35(d,J=12.2Hz,1H),1.31-1.23(m,1H),1.20(s,3H),1.11(s,3H),1.04(s,3H),0.98(s,3H),0.96(s,3H),0.94(s,3H),0.50-0.39(m,2H),0.39-0.26(m,2H)。
实施例B54
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aS,9S,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
用氮气覆盖4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.036g,0.055mmol)和乙酸乙酯(2mL)的混合物,然后添加10%碳载钯(0.023g,0.022mmol)。将烧瓶与氢气囊连接,并在氢气气氛下快速搅拌该混合物18h。过滤混合物以去除催化剂并在真空中浓缩。使用制备型HPLC方法24对反应混合物进行反相制备型HPLC纯化,分离得到白色固体单TFA盐形式的标题化合物(13.1mg,产率36.4%)。LCMS:m/e546.7(M+H)+,1.95min(方法6)。1HNMR(400MHz,CDCl3与MeOD的1∶1混合物,MeOD锁场)δppm7.89(d,J=8.3Hz,2H),7.23(d,J=8.3Hz,2H),2.42(dd,J=13.1,2.8Hz,1H),2.19-2.08(m,2H),2.04-1.97(m,1H),1.92-1.71(m,5H),1.66-1.40(m,11H),1.39-1.28(m,3H),1.24(br.s.,1H),1.10(s,5H),1.06(s,4H),0.99(s,3H),0.95(s,4H),0.76(s,3H),0.70(s,3H),0.49-0.41(m,1H),0.41-0.34(m,1H),0.34-0.26(m,2H)。
实施例B55
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aS,9S,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-(甲基氨基)-1-(1-甲基环丙基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
所述标题化合物是按照与针对4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aS,9S,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)二十氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的合成所述类似的方法制备,除外的是使用4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-3a-(甲基氨基)-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸(0.034g,0.051mmol)代替4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-氨基-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸。使用制备型HPLC方法23通过反相制备型HPLC来纯化粗制混合物,得到白色固体单TFA盐形式的标题化合物(25.5mg,产率63.6%)。LCMS:m/e560.8(M+H)+,2.14min(方法6)。1HNMR(400MHz,CDCl3与MeOD的1∶1混合物,MeOD锁场)δppm7.89(d,J=8.3Hz,2H),7.23(d,J=8.3Hz,2H),2.56(s,3H),2.42(dd,J=13.2,2.9Hz,1H),2.17-2.09(m,2H),2.05-1.77(m,6H),1.73-1.54(m,4H),1.54-1.28(m,10H),1.21-1.13(m,1H),1.11(s,3H),1.09(s,3H),1.06(br.s.,1H),0.99(s,3H),0.96(s,4H),0.76(s,3H),0.70(s,3H),0.50-0.42(m,1H),0.42-0.35(m,1H),0.35-0.25(m,2H)。
实施例B56
4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-3a-(2-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)乙基氨基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的制备
所述标题化合物是通过用与制备4-((1R,3aS,5aR,5bR,7aR,11aS,11bR,13aR,13bR)-3a-((2-(1,1-二氧代硫代吗啉代)乙基)氨基)-5a,5b,8,8,11a-五甲基-1-(1-甲基环丙基)-2,3,3a,4,5,5a,5b,6,7,7a,8,11,11a,11b,12,13,13a,13b-十八氢-1H-环戊二烯并[a]-9-基)苯甲酸的相同两步法来制备的,除外的是在步骤1中使用1-(2-氯乙基)-4-(甲基磺酰基)哌嗪(0.118g,0.522mmol)代替4-(2-氯乙基)硫代吗啉1,1-二氧化物盐酸盐。使用制备型HPLC方法4对步骤2的反应混合物进行反相制备型HPLC纯化,分离得到白色固体双TFA盐形式的标题化合物(58.7mg,产率59.2%)。LCMS:m/e734.4(M+H)+,2.30min(方法5)。1HNMR(400MHz,CDCl3与MeOD的1∶1混合物,MeOD锁场)δppm7.93(d,J=8.3Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),5.32(d,J=4.6Hz,1H),3.31-3.21(m,2H),3.21-3.10(m,2H),3.10-2.99(m,2H),2.88(s,3H),2.83-2.66(m,6H),2.18(dd,J=17.0,6.2Hz,1H),2.14-2.02(m,2H),2.02-1.82(m,3H),1.82-1.68(m,2H),1.68-1.39(m,12H),1.37(d,J=11.7Hz,1H),1.33-1.23(m,2H),1.21(s,3H),1.13(s,3H),1.05(s,3H),0.98(s,3H),0.96(s,6H),0.51-0.42(m,2H),0.42-0.27(m,2H)。
实施例的生物数据
·“μM”意指微摩尔;
·“mL”意指毫升;
·“μl”意指微升;
·“mg”意指毫克;
·“μg”意指微克;
下文描述用于获得表1中所报告结果的材料和实验程序。
HIV细胞培养分析-MT-2细胞和293T细胞得自NIHAIDSResearch和ReferenceReagentProgram。使MT-2细胞在补充有10%热灭活胎牛血清、100μg/ml青霉素G和至多100单位/ml链霉素的RPMI1640培养基中繁殖。使293T细胞在补充有10%热灭活胎牛血清(FBS)、100单位/ml青霉素G和100μg/ml链霉素的DMEM培养基中繁殖。NL4-3的前病毒DNA克隆得自NIHAIDSResearch和ReferenceReagentProgram。将重组NL4-3病毒用作对比病毒,在该重组病毒中来自NL4-3的nef基因的一部分被Renilla荧光素酶基因替代。另外,将残基GagP373转化成P373S。简言之,通过转染经改变的NL4-3的前病毒克隆制备重组病毒。根据制造商的说明书,使用购自Invitrogen(Carlsbad,CA)的LipofectAMINEPLUS在293T细胞中实施转染。在MT-2细胞中使用荧光素酶酶活性作为标记物滴定病毒。使用购自Promega(Madison,WI)的双重荧光素酶试剂盒并对制造商的方案进行改进来量化荧光素酶。将经稀释的被动裂解溶液与重悬浮荧光素酶分析试剂和重悬浮的Stop&Glo基质(2∶1∶1比率)预混合。将五十(50)μL混合物添加至分析板上的每一通气孔(aspiratedwell)且立即在WallacTriLux(Perkin-Elmer)上测定荧光素酶活性。在抑制剂的连续稀释液存在下通过测定经NLRluc重组体感染4-5天的细胞的荧光素酶活性来定量抑制剂对重组病毒的抗病毒活性。这些化合物的EC50数据显示于表1中。
表1
以上描述仅是说明性且不应理解为以任何方式限制本发明的范围或基本原理。实际上,除了本文所示和所描述的那些之外,本领域技术人员都显而易见会按照实施例和上述的描述对本发明进行各种改变。这些改变也应落在随附的权利要求的范围内。
Claims (12)
1.一种化合物,包括其可药用盐,其选自:
式I化合物
式II化合物
其中X选自:苯基、杂芳基环、C4-8环烷基、C4-8环烯基、C4-9螺环烷基、C4-9螺环烯基、C4-8氧杂环烷基、C4-8二氧杂环烷基、C6-8氧杂环烯基、C6-8二氧杂环烯基、C6环二烯基、C6氧杂环二烯基、C6-9氧杂螺环烷基和C6-9氧杂螺环烯基环;
且进一步其中X被A取代,其中A是至少一个选自如下的成员:-H、-卤素、-羟基、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、-C1-6烷基-Q1、-被烷基取代的C1-6烷基-Q1、-CN、-CF2Q1、-NR2R2、-COOR2和-CONR2R2;
其中Q1选自:芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-OR2、-COOR3、-NR2R2、-SO2R7、-CONHSO2R3和-CONHSO2NR2R2;
Y选自:-COOR2、-C(O)NR2SO2R3、-C(O)NHSO2NR2R2、-NR2SO2R2、-SO2NR2R2、-C3-6环烷基-COOR2、-C2-6烯基-COOR2、-C2-6炔基-COOR2、-C1-6烷基-COOR2、-被烷基取代的C1-6烷基、-COOR2、CF2-COOR2、-NHC(O)(CH2)n-COOR2、-SO2NR2C(O)R2、-四唑和-CONHOH,
其中n=1至6;
R1选自:
W不存在或是-CH2或-CO;
Z选自:-NR28R29、-OR30、-COOR2、-CONR18R19、F、Cl、Br和I;
U选自:-NR28R29、-OR30、-COOR2、-CONR18R19、F、Cl、Br、I、芳基和杂芳基;
R2选自:-H、苄基、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基和-被芳基取代的C1-6烷基;
R3是苄基、-C1-6烷基或-被烷基取代的C1-6烷基;
R4选自:-H、-C1-6烷基、-C1-6烷基-C(OR3)2-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-C3-6环烷基、-C1-6烷基-Q2、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q2、芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-COR6、-COCOR6、-SO2R7、-SO2NR2R2、
其中Q2选自:杂芳基、被取代的杂芳基、F、Cl、Br、I、-CF3、-OR2、-COOR2、-NR8R9、-CONR10R11和-SO2R7;
R5选自:-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-被C1-6烷基取代的烷基、-C1-6烷基-NR8R9、-COR6、-COCOR6、-SO2R7和-SO2NR2R2;
条件是当W是CO时,R4或R5不能是-COR6或-COCOR6;
另一条件是R4或R5中只有一个可选自:-COR6、-COCOR6、-SO2R7和-SO2NR2R2;
或当W不存在或是CH2时,则R4和R5可连同毗邻N一起形成
R6选自:-C1-6烷基、-被C1-6烷基-取代的烷基、-C3-6环烷基、-C3-6被取代的环烷基-Q3、-C1-6烷基-Q3、-被C1-6烷基-取代的烷基-Q3、-C3-6环烷基-Q3、芳基-Q3、-NR13R14和-OR15;
其中Q3选自:芳基、杂芳基、被取代的杂芳基、-OR2、-COOR2、-NR8R9、SO2R7、-CONHSO2R3和-CONHSO2NR2R2;
R7选自:-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C3-6环烷基、-CF3、芳基和杂芳基;
R8和R9独立地选自:-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、芳基、杂芳基、被取代的芳基、被取代的杂芳基、-C1-6烷基-Q2和-COOR3;
R8也可以是-COOR3;
R8和R9也可独立地选自:
或R8和R9连同毗邻N一起形成选自如下的环:
V选自:-CR24R25、-SO2、-O和-NR12;
M选自:-CHR24R25、-NR26R27、-SO2R7、-SO2NR3R3和-OH;
R10和R11独立地选自:-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基和-C3-6环烷基,
或R10和R11连同毗邻N一起形成环,例如
R12选自:-C1-6烷基、-C1-6烷基-OH;-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C3-6环烷基、-COR7、-COONR18R19、-SOR7和-SONR20R21;
R13和R14独立地选自:-H、-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q4、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q4、-C1-6被取代的烷基-Q4和
或R13和R14连同毗邻N一起形成选自如下的环:
R15选自:-C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q4、-C1-6烷基-C3-6环烷基-Q4和-C1-6被取代的烷基-Q4;
Q4选自:杂芳基、被取代的杂芳基、-NR2R2、-CONR2R2、-COOR2、-OR2和-SO2R3;
R16选自:-H、-C1-6烷基、-NR2R2和-COOR3;
R17选自:-H、-C1-6烷基、-COOR3和芳基;
R18和R19独立地选自:H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基和-C1-6环烷基;
R18也可以是-COOR3;
或R18和R19连同毗邻N一起形成选自如下的环:
R20和R21独立地选自:H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6烷基-Q5、-C1-6环烷基、芳基、被取代的芳基、杂芳基和被取代的杂芳基,
Q5选自卤素和SO2R3;
R24和R25独立地选自:-H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基、-SO2R3、-SO2NR2R2或-OH、-NR2R2、-NR2SO2R3、-NR2COR3和-NR2CONR2R2;
条件是R24和R25中只有一个可选自:-OH、-NR2R2、-NR2SO2R3、-NR2COR3和-NR2CONR2R2;
R26和R27独立地选自:-H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基、-C1-3烷基芳基、-C1-3烷基杂芳基、-CO2R2和-SO2R7;
条件是R26和R27中只有一个可选自-CO2R2或-SO2R7;
R28和R29独立地选自:-H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基、-C3-6环烷基、-C1-6烷基-Q6、-COC1-6烷基-Q6、-COOR3;-COCF3;
R28也可选自-COOR3和-CONR18R19;
或R28和R29连同毗邻N一起形成选自如下的环:
R30选自:H、-C1-6烷基、-被烷基取代的C1-6烷基、-C3-6环烷基和-C1-6烷基-Q6;
其中Q6选自:H、-OR2、-COOR2、-COCOOR2和-NR31R32;
R31和R32独立地选自:-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基、-C1-6被取代的烷基-OR2和-COR3,
或R31和R32连同毗邻N一起形成选自如下的环:
R33选自:-H、-C1-6烷基、-C1-6被取代的烷基和-C1-6被取代的烷基-Q7,
其中Q7选自-COOR2和-COONR2R2。
2.权利要求1的化合物,其中X是苯基。
3.权利要求2的化合物,其中A是-H。
4.权利要求1的化合物,其中Y是-COOR2。
5.权利要求4的化合物,其中Y是-COOH。
6.一种化合物,包括其可药用盐,其选自:
7.一种药物组合物,其包含抗病毒有效量的一种或多种权利要求1的化合物以及一种或多种可药用载体、赋形剂或稀释剂。
8.权利要求7的药物组合物,其可用于治疗HIV感染,其另外包含抗病毒有效量的选自如下的AIDS治疗剂:(a)AIDS抗病毒剂;(b)抗感染剂;(c)免疫调节剂;和(d)另外的HIV进入抑制剂。
9.治疗感染HIV病毒的哺乳动物的方法,包括给所述哺乳动物施用抗病毒有效量的权利要求1的化合物和一种或多种可药用载体、赋形剂或稀释剂。
10.一种药物组合物,其包含抗病毒有效量的一种或多种权利要求6的化合物以及一种或多种可药用载体、赋形剂或稀释剂。
11.权利要求10的药物组合物,其可用于治疗HIV感染,其另外包含抗病毒有效量的选自如下的AIDS治疗剂:(a)AIDS抗病毒剂;(b)抗感染剂;(c)免疫调节剂;和(d)另外的HIV进入抑制剂。
12.治疗感染HIV病毒的哺乳动物的方法,包括给所述哺乳动物施用抗病毒有效量的权利要求10的化合物和一种或多种可药用载体、赋形剂或稀释剂。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
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C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20151202 |
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |