CN104198471A - 一种用于人血清白蛋白测定的表面活性剂 - Google Patents
一种用于人血清白蛋白测定的表面活性剂 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104198471A CN104198471A CN201410398222.3A CN201410398222A CN104198471A CN 104198471 A CN104198471 A CN 104198471A CN 201410398222 A CN201410398222 A CN 201410398222A CN 104198471 A CN104198471 A CN 104198471A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- surface active
- reagent
- surfactant
- active agent
- determination
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明公开了一种用于人血清白蛋白测定的表面活性剂,其特征在于,所述表面活性剂为脂肪醇聚氧乙烯醚AEO-9,用于人血清白蛋白测定试剂中,所述测定试剂由琥珀酸、溴甲酚绿、氢氧化钠、AEO-9和叠氮钠组成。通过上述方式,本发明的用于人血清白蛋白测定的表面活性剂不需与其他表面活性剂配伍使用,性能能达到目前报道的主流表面活性剂的水平,甚至在某些指标上表现更优,且该表面活性剂安全无毒易降解,对环境友好。
Description
技术领域
本发明涉及体外诊断领域,特别是涉及一种测定人血清白蛋白含量的非离子表面活性剂。
背景技术
白蛋白是由肝脏合成的,含585个氨基酸残基的单链蛋白质,约占血浆总蛋白的40-60%,主要生理功能包括:维持血管胶体渗透压、作为内源性氨基酸营养源、作为一种载体起运输和贮存的重要作用。肾病综合症的病人白蛋白严重丢失,以致血管内胶体渗透压下降,水分从血管流入组织,可引起水肿。白蛋白分子量较小,它在血管外体液中的浓度可作为各种膜屏障完整性的良好指标,因此在临床上检测血清中白蛋白的含量具有重要意义。
血清白蛋白测定早期采用盐析法,现已被指示剂法特别是溴甲酚绿法所代替。溴甲酚绿试剂与白蛋白的反应是即刻反应,与其他血清蛋白是迟缓反应。该法已成为目前检测血清白蛋白含量的主流方法。具体测定过程如下:
。
样本中的白蛋白与溴甲酚绿在pH为4.2的条件下结合生成绿色复合物,其颜色深浅与白蛋白浓度成正比,溴甲酚绿复合物的生成,引起在波长624 nm处吸光度的上升,进而计算出白蛋白的含量。然而要确保在规定时间内白蛋白显色完成,防止其他血清蛋白与染料结合,并且保证反应试剂的灵敏度和稳定性,必须有至少一种表面活性剂的参与。US3873272是Baxter Laboratories公司关于测定白蛋白试剂的专利,其中提到使用的表面活性剂是Brij-35,这也是目前市场上被广泛应用于该试剂的表面活性剂;中国专利CN103278648中提到了一种白蛋白检测试剂,采用的表面活性剂为Triton X-100、Brij-35、PEG中的一种或几种。表面活性剂是影响白蛋白和染料发生即时反应的重要因素,是白蛋白检测试剂的重要组成部分。
发明内容
本发明主要解决的技术问题是提供一种用于人血清白蛋白测定的表面活性剂,该表面活性剂不需与其他表面活性剂配伍使用,性能能达到目前报道的主流表面活性剂的水平,甚至在某些指标上表现更优,且安全无毒易降解。
为解决上述技术问题,本发明采用的一个技术方案是:提供一种用于人血清白蛋白测定的表面活性剂,所述表面活性剂为脂肪醇聚氧乙烯醚AEO-9,用于人血清白蛋白测定试剂中,所述测定试剂的组成为:琥珀酸 5.90 g/L、溴甲酚绿 0.15 g/L、氢氧化钠 0.12 g/L、AEO-9 1.00~3.00 g/L、叠氮钠 0.30 g/L。
在本发明一个较佳实施例中,所述测定试剂的组成为:琥珀酸 5.90 g/L、溴甲酚绿 0.15 g/L、氢氧化钠 0.12 g/L、AEO-9 1.00 g/L、叠氮钠 0.30 g/L。
在本发明一个较佳实施例中,所述表面活性剂为脂肪醇聚氧乙烯醚AEO-9,不需与其他表面活性剂配伍使用,且安全无毒易降解,对环境友好。
本发明的有益效果是:本发明的用于人血清白蛋白测定的表面活性剂,不需与其他表面活性剂配伍使用,性能可达到目前报道的主流表面活性剂的水平,甚至在某些指标上表现更优,且该表面活性剂安全无毒易降解,对环境友好。AEO-9可以作为人血清白蛋白检测所需表面活性剂种类的重要补充,为人血清白蛋白检测试剂组成中的表面活性剂种类提供了一种新的选择,值得推广使用。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明以下实施例使用的仪器有:UV Blue Star紫外分光光度计1台(北京莱伯泰科仪器有限公司,亦或者其它品牌)、恒温数显水浴锅1台(上海梅香仪器有限公司,亦或者其它品牌)。
实施例一:
提供一种用于人血清白蛋白测定的试剂,采用AEO-9作为表面活性剂,所述试剂的组成为:
。
实施例二:
提供一种用于人血清白蛋白测定的试剂,采用Brij-35作为表面活性剂,所述试剂的组成为:
。
实施例三:
提供一种用于人血清白蛋白测定的试剂,采用吐温20作为表面活性剂,所述试剂的组成为:
。
实施例四:
提供一种用于人血清白蛋白测定的试剂,采用Triton X-100作为表面活性剂,所述试剂的组成为:
。
将以上实施例一至四配制的试剂作为供试试剂,以50g/L牛血清白蛋白作为标准品,以英国朗道实验室有限公司生产的质控血清2(质控2)、质控血清3(质控3)作为待测样本,采用紫外可见分光光度计进行检测,设一个空白测试、一个标准测试、两个样本测试,其中空白测试以蒸馏水代替样本,详细测定过程如下所示。样品与试剂的比例为10μL:2000μL,设定的主波长为624nm、副波长为700nm,样本与试剂混匀后反应1min读数,读取各管吸光度,扣除试剂空白后计算出样本、标准品的吸光度变化值△A样本、△A标准,根据公式白蛋白(g/L)=△A样本/△A标准×C标准,计算出样本中白蛋白含量,其中C标准为标准品浓度。质控血清2 白蛋白的靶值为41.7g/L,质控血清3白蛋白的靶值为29.7g/L,允许偏差范围±10%。
根据以上测定方法,每5天测试一次,每次做3个平行并取其平均值,连续监测一个月,共测试6次,得到每个实施例及空白测试数据,详见下表。计算得到6次测定结果的平均值、相对偏差、标准偏差(SD)。相对偏差这项可反映测定结果的准确性,标准偏差这项可反映测定结果的稳定性。
下表为样本测试数据:
。
由上表数据可知,实施例三测定值相对偏差分别为17.27%和20.20%,已超过允许偏差范围,说明以吐温20作为表面活性剂的试剂准确度达不到基本要求。相对偏差在允许偏差范围±10% 以内的有实施例一、实施例二和实施例四,说明三种表面活性剂都可以使其配伍试剂满足准确度要求,其中实施例一即AEO-9作为表面活性剂的试剂,其相对偏差仅为1.7%和0.67%,是所有实施例中最接近靶值的,说明以AEO-9作为表面活性剂的试剂准确度优于其它两种表面活性剂配伍的试剂。此外,从标准偏差(SD)数据来看,实施例一的数值最小,仅为1.23和1.44,说明与AEO-9配伍的试剂测定重复性最佳,该试剂更稳定,在试剂开瓶后一个月还能保持良好的测试性能。因此从准确度和稳定性角度来看,AEO-9可优选为白蛋白检测试剂的理想表面活性剂。
下表为空白测试数据:
。
值得进一步指出的是,从上表数据可知,在试剂各组分加入量相同的前提下,实施例一即AEO-9作为表面活性剂的试剂,试剂空白值是最小的,表明该试剂检测灵敏度优于其他三种表面活性剂配伍的试剂。
基于以上数据和分析结果可知,与AEO-9配伍的人血清白蛋白检测试剂在准确度、稳定性、检测灵敏度方面均表现优异,AEO-9可以作为人血清白蛋白检测所需表面活性剂种类的重要补充。因此,本发明为人血清白蛋白检测试剂组成中的表面活性剂种类提供了一种新的选择,值得推广使用。
以上所述仅为本发明的实施例,并非因此限制本发明的专利范围,凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换,或直接或间接运用在其它相关的技术领域,均同理包括在本发明的专利保护范围内。
Claims (3)
1.一种用于人血清白蛋白测定的表面活性剂,其特征在于,所述表面活性剂为脂肪醇聚氧乙烯醚AEO-9,用于人血清白蛋白测定试剂中,所述测定试剂的组成为:琥珀酸 5.90 g/L、溴甲酚绿 0.15 g/L、氢氧化钠 0.12 g/L、AEO-9 1.00~3.00 g/L、叠氮钠 0.30 g/L。
2.根据权利要求1所述的用于人血清白蛋白测定的表面活性剂,其特征在于,所述测定试剂的组成为:琥珀酸 5.90 g/L、溴甲酚绿 0.15 g/L、氢氧化钠 0.12 g/L、AEO-9 1.00 g/L、叠氮钠 0.30 g/L。
3.根据权利要求1所述的用于人血清白蛋白测定的表面活性剂,其特征在于,所述表面活性剂为脂肪醇聚氧乙烯醚AEO-9,不需与其他表面活性剂配伍使用,且安全无毒易降解,对环境友好。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410398222.3A CN104198471A (zh) | 2014-08-14 | 2014-08-14 | 一种用于人血清白蛋白测定的表面活性剂 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410398222.3A CN104198471A (zh) | 2014-08-14 | 2014-08-14 | 一种用于人血清白蛋白测定的表面活性剂 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN104198471A true CN104198471A (zh) | 2014-12-10 |
Family
ID=52083796
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201410398222.3A Pending CN104198471A (zh) | 2014-08-14 | 2014-08-14 | 一种用于人血清白蛋白测定的表面活性剂 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN104198471A (zh) |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104792779A (zh) * | 2015-04-10 | 2015-07-22 | 山东博科生物产业有限公司 | 一种重复性好的血管紧张素转化酶检测试剂盒 |
CN106908612A (zh) * | 2015-12-22 | 2017-06-30 | 山东博科生物产业有限公司 | 一种抗肝素稳定的白蛋白检测试剂盒 |
CN106967302A (zh) * | 2017-03-29 | 2017-07-21 | 苏州康铭诚业医用科技有限公司 | 一种血细胞分析用染料的合成方法 |
CN107064527A (zh) * | 2017-04-12 | 2017-08-18 | 济南协谦医疗器械有限公司 | 一种血清白蛋白检测试剂盒 |
CN107941794A (zh) * | 2017-10-16 | 2018-04-20 | 太原理工大学 | 一种人体白蛋白浓度多通量快速检测系统和方法 |
CN111157712A (zh) * | 2018-11-07 | 2020-05-15 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 可抗脂血干扰的血液样本检测试剂盒及方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103630535A (zh) * | 2013-12-03 | 2014-03-12 | 上海科华生物工程股份有限公司 | 定量测定人体血液白蛋白含量的干化学试纸 |
CN103760357A (zh) * | 2013-11-04 | 2014-04-30 | 山东博科生物产业有限公司 | 一种缺血修饰白蛋白检测试剂盒 |
-
2014
- 2014-08-14 CN CN201410398222.3A patent/CN104198471A/zh active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103760357A (zh) * | 2013-11-04 | 2014-04-30 | 山东博科生物产业有限公司 | 一种缺血修饰白蛋白检测试剂盒 |
CN103630535A (zh) * | 2013-12-03 | 2014-03-12 | 上海科华生物工程股份有限公司 | 定量测定人体血液白蛋白含量的干化学试纸 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
JIALIN QIN ET AL: "Selective and sensitive homogenous assay of serum albumin with 1-anilinonaphthalene-8-sulphonate as a biosensor", 《ANALYTICA CHIMICA ACTA》, vol. 829, 26 April 2014 (2014-04-26) * |
李树华等: "溴甲酚绿法测定血清白蛋白配方的正交实验及方法学评价", 《现代预防医学》, vol. 35, no. 7, 31 December 2008 (2008-12-31) * |
罗舜菁等: "表面活性剂对中性粒细胞的影响", 《中国生物工程杂志》 * |
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104792779A (zh) * | 2015-04-10 | 2015-07-22 | 山东博科生物产业有限公司 | 一种重复性好的血管紧张素转化酶检测试剂盒 |
CN106908612A (zh) * | 2015-12-22 | 2017-06-30 | 山东博科生物产业有限公司 | 一种抗肝素稳定的白蛋白检测试剂盒 |
CN106908612B (zh) * | 2015-12-22 | 2019-04-30 | 山东博科生物产业有限公司 | 一种抗肝素稳定的白蛋白检测试剂盒 |
CN106967302A (zh) * | 2017-03-29 | 2017-07-21 | 苏州康铭诚业医用科技有限公司 | 一种血细胞分析用染料的合成方法 |
CN106967302B (zh) * | 2017-03-29 | 2019-04-12 | 苏州康铭诚业医用科技有限公司 | 一种血细胞分析用染料的合成方法 |
CN107064527A (zh) * | 2017-04-12 | 2017-08-18 | 济南协谦医疗器械有限公司 | 一种血清白蛋白检测试剂盒 |
CN107941794A (zh) * | 2017-10-16 | 2018-04-20 | 太原理工大学 | 一种人体白蛋白浓度多通量快速检测系统和方法 |
CN111157712A (zh) * | 2018-11-07 | 2020-05-15 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 可抗脂血干扰的血液样本检测试剂盒及方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN104198471A (zh) | 一种用于人血清白蛋白测定的表面活性剂 | |
CN101503732B (zh) | 一种葡萄糖氧化酶单一液体测定试剂 | |
CA2471863A1 (en) | Binding proteins as biosensors | |
CN104359906B (zh) | 一种稳定、抗干扰能力强的血清总胆汁酸检测试剂 | |
CN107870170B (zh) | 一种酶化学发光法测定糖化血清白蛋白的试剂盒 | |
CN109239059A (zh) | 一种糖化血清蛋白测定试剂盒及其制备方法和应用 | |
JP6218894B2 (ja) | L−グルタミン酸測定キット | |
CN104111338B (zh) | 一种抗干扰性强的同型半胱氨酸检测试剂盒 | |
CN105238848B (zh) | 一种α-L-岩藻糖苷酶检测试剂盒及制备方法 | |
CN104195222A (zh) | 一种用于总胆固醇测定试剂盒的复合稳定剂 | |
ES2597956T3 (es) | Método para determinar el poder antioxidante de fluidos biológicos y vegetales | |
CN102253041B (zh) | 一种检测肌酐的试剂盒 | |
CN104198422A (zh) | 一种用于α-羟丁酸脱氢酶测定试剂盒的复合稳定剂 | |
CN109212207A (zh) | 用于检测口腔中流感病毒血凝素蛋白的荧光试剂及其制备方法和检测方法 | |
CN104792779A (zh) | 一种重复性好的血管紧张素转化酶检测试剂盒 | |
CN104673878B (zh) | 一种单体系测定糖化白蛋白与白蛋白浓度比值的试剂盒 | |
CN103397076B (zh) | 氯化盐在制备消除测定结果出现负值或零值的生化试剂中的应用 | |
CN105510572A (zh) | 一种甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶检测试剂盒 | |
CN105628636B (zh) | 一种糜蛋白酶活力检测方法 | |
CN101169366A (zh) | 岩藻糖苷酶诊断试剂盒及岩藻糖苷酶活性测定方法 | |
CN105277542B (zh) | 一种可消除试剂空白影响的水中亚硝酸盐现场快速检测方法 | |
CN104198686B (zh) | 一种尿酸测定试剂盒 | |
CN106556595B (zh) | 一种抗干扰能力强的肌酐苦味酸法检测试剂盒 | |
US20150056634A1 (en) | Methods for Preparing Dry Formulations of Glucose Binding Protein | |
CN104195220A (zh) | 一种用于人血清丙氨酸氨基转移酶测定的缓冲液 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20141210 |