CN104162133A - 一种祛痘用组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种具有祛痘作用的组合物。该组合物由从银杏叶中提取的银杏黄酮粉末、从芝麻中提取的芝麻素粉末、从生姜中提取的生姜油，按质量比1-2：1-2：1-2混合均匀组成；所述银杏黄酮粉末中的银杏黄酮含量大于50%；所述芝麻素粉末中的芝麻素含量大于50%；所述生姜油中的姜酚含量大于20%。该组合物与药物的赋形剂混合制成皮肤外用制剂，如膏霜乳液、凝胶等。药理学研究表明本发明外用制剂具有治疗金黄色葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌诱发的痤疮动物模型的作用，并可抑制痘印的产生。临床试用表明，本发明具有显著的祛痘作用，有效率达100%，使用安全无副作用。

Description

一种祛痘用组合物

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及用于祛痘的外用制剂，即一种天然来源的银杏黄酮、芝麻素与生姜油组合物。

背景技术

痤疮俗称痘、青春痘，是感染性皮肤病的一种，多由痤疮丙酸杆菌或金黄色葡萄球菌感染引起。痤疮易反复发作,由于多发生于面部，面部皮损或痘印影响容貌，给患者带来痛苦，影响患者的身心健康。 目前治疗痤疮多为抗细菌药物，这些药物虽有一时效果, 但长期应用会引起诸多副作用；而且应用抗生素治疗不能抑制痘印和疤痕的产生。为了避免此类不良现象的发生，市场需要研制开发来源于天然、效果显著、无明显不良反应的治疗痤疮的新型外用制剂，以减轻患者的生理与心理痛苦。痤疮患者众多，因此开发此类治疗痤疮的外用制剂产品具有良好的应用前景，对患者是十分有益和必要的。 

银杏是我国珍贵的药用植物，银杏的叶、果和外种皮等皆具有药用开发价值。据《本草纲目》记载，银杏性甘、苦、平、涩；有定喘止咳、止带浊、止痛之功；主治寒嗽痰喘、哮喘、小便频数、赤白带下、手足皲裂等。银杏中含有天然活性黄酮及萜内酯等与人体健康有益的多种成份，具有改善肌肤微循环、扩张血管、降低血清胆固醇、改善心脑血管循环、保护中枢神经系统、抗病毒、抑菌消炎、抗癌等多种作用；其中银杏黄酮是主要的活性成分。芝麻中含有油脂、蛋白质、多糖、微量元素、维生素、芝麻素等，其中芝麻素是芝麻中的主要功能成分，分子式为C₂₀H₁₈O₆，属于木脂素类；芝麻素具有消除体内自由基、降低血清胆固醇，保护肝功能，促进醇代谢，抗菌活性等多种生理活性功能，可应用于保健食品和医药领域。生姜是一种重要调味料，也是亚洲传统的药食同源的保健植物资源，具有祛寒、祛湿、暖胃健胃、舒筋活血、抗炎等多种作用。生姜油含有多种具有营养保健作用的物质，如姜辣素、姜醇、姜酮、姜烯、姜酚类化合物，生姜油在食品、化妆品、保健品、药品等领域具有十分广泛的市场前景。银杏黄酮、芝麻素与生姜油组合，具有协同增强药理活性的优势，可更好地提高各自的功能，产生了预料不到的技术效果；三者组合，不仅疗效显著，作用优于市场上常用的抗痤疮药物，但无抗生素带来的副作用和易产生耐药性的缺点。未见银杏黄酮、芝麻素与生姜油配伍用于祛痘的用途的报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有祛痘作用的组合物，其特征在于，其与药物的赋形剂混合制成皮肤外用制剂，它具有祛痘的功能，具有疗效显著、使用安全的特点。

本发明对银杏叶进行提取得到银杏黄酮粉末、芝麻进行提取得到芝麻素粉末、生姜进行提取得到生姜油，按质量比1-2：1-2：1-2混合均匀得到具有祛痘作用的组合物。最佳的质量比为1：1：1。银杏黄酮粉末中的银杏黄酮含量大于50%，芝麻素粉末中的芝麻素含量大于50%；生姜油中的姜酚含量大于20%。该组合物可以按公知的工艺加工成皮肤外用制剂，如膏霜乳液、凝胶、贴膜、皮下注射剂等。

本发明配方中的银杏黄酮、芝麻素、生姜油，均具有显著的抗菌和抗炎作用。本发明的有益效果是，银杏黄酮、芝麻素、生姜油三者组合可协同增强生理活性，更好地提高各自抗炎抗感染的功能，产生了预料不到的技术效果。药理试验表明，本发明外用制剂具有治疗金黄色葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌诱发的痤疮动物模型的作用，且显效快，作用优于市场上常用的抗痤疮药物，但不会带来使用抗生素所产生的副作用和易产生耐药性的缺点。更为重要的是，银杏黄酮、芝麻素、生姜油三者组合，可抑制痘印和疤痕的产生，这对于痤疮患者是非常重要的。局部刺激性实验安全性评价研究表明本发明安全，无皮肤刺激、过敏等不良反应，应用安全。临床试用结果表明，本发明具有显著的祛痘作用，有效率达100%，使用安全无副作用。 

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步地描述。

实施例1：

一种具有祛痘作用的组合物由从银杏叶中提取的银杏黄酮粉末、从芝麻中提取的芝麻素粉末、从生姜中提取的生姜油混合均匀组成，按质量比1：1：1混合均匀组成。

银杏黄酮粉末提取工艺如下：将银杏叶粉碎，用70%乙醇加热回流提取，合并提取液，过膜分离，回收乙醇并浓缩至适量，加在已处理好的AB-8大孔吸附树脂上，依次用水及不同浓度的乙醇洗脱，收集相应的洗脱液，浓缩成浸膏，真空干燥，称重，得银杏黄酮粉末，并测定银杏黄酮的含量（mg/g）。本品性状为：浅棕黄色粉末，无臭，味微苦，有吸湿性，溶于醇，不溶于水。

银杏黄酮含量测定：采用HPLC法进行测定。用无水乙醇（色谱纯）将银杏黄酮粉末溶解，过滤。在柱温：室温；流动相：甲醇-0.4%磷酸溶液（50：50）；流速0.8ml/min；进样量：20μl；检测波长360nm。根据标样的保留时间进行定性，用外标法计算银杏黄酮的含量。本品银杏黄酮含量为510.03mg/g。

银杏黄酮粉末的制备工艺和含量测定方法为公知公用的方法。

芝麻素粉末的制备工艺如下：将芝麻粕研磨成粉末，加入约2倍体积的正己烷进行搅拌脱脂，维时3h，过滤后再加入约2倍体积的正己烷进行第二次脱脂，维时3h，风干。准确称取一定量粉末，加入料液比1：8.5（g/ml）93%的乙醇，在水浴温度55℃下搅拌，提取时间2.5h，重复提取一次。提取液过滤，将滤液在旋转蒸发仪上蒸出部分乙醇，减压浓缩，并于60℃真空干燥，称重，得芝麻素粉末，并测定芝麻素的含量（mg/g）。本品性状为：浅褐色粉末，无臭，无味，有吸湿性，溶于醇，不溶于水。

芝麻素含量测定：采用HPLC法进行测定。芝麻素的标准品溶液在20-100μg/ml之间，相应峰面积与芝麻素质量浓度有显著的线性关系，制订了标准曲线。用无水乙醇将芝麻素粉末溶解，过滤。在柱温：室温；流动相：甲醇-水（8：2，v/v）；流速0.8ml/min；进样量：20μl；检测波长290nm；分析时间：15min条件下测定本品中芝麻素含量。根据标样的保留时间进行定性，用外标法计算芝麻素的含量。本品芝麻素含量为536.19mg/g。 

芝麻素提取工艺和含量测定方法为公知公用的方法。

生姜油的制备工艺如下：取生姜，去皮洗净切片，干燥后粉碎。加70%乙醇回流提取2次，第一次加10倍量，提取90min；第2次加8倍量，提取60min，合并乙醇提取液，过滤，滤液减压浓缩蒸尽乙醇，得生姜油，并测定姜酚的含量（mg/g）。本品性状为：浅黄色油状物，有辛辣味，溶于醇，不溶于水。

姜酚含量测定：采用HPLC法进行测定。用无水乙醇（色谱纯）将生姜油溶解，过滤。在柱温：室温；流动相：乙腈-甲醇-水（40：5：55）；流速0.8ml/min；进样量：20μl；检测波长280nm。根据标样的保留时间进行定性，用外标法计算姜酚的含量。本品姜酚含量为233.97mg/g。

生姜油的制备工艺和含量测定方法为公知公用的方法。

凝胶剂的制备：将卡波普10g洒在500ml蒸馏水表面，溶胀过夜。称取甘油60g，丙二醇120ml，分别加入至溶胀好的卡波普中，迅速研磨均匀，得到透明的凝胶基质。取上述银杏黄酮粉末、芝麻素粉末和生姜油，溶解于 100ml 95%乙醇溶液中，缓慢加入至凝胶基质中，搅拌均匀。再缓慢加入三乙醇胺15ml，补蒸馏水至足量1000 g，即得淡黄色凝胶1000 g。分装于50支小管中，每支20 g。每克凝胶含银杏黄酮+芝麻素+生姜油为40mg+40mg+40mg。

凝胶剂制备工艺为公知公用的方法。

实施例2：

一种具有祛痘作用的组合物由从银杏叶中提取的银杏黄酮粉末、从芝麻中提取的芝麻素粉末、从生姜中提取的生姜油混合均匀组成，按质量比1：2：1混合均匀组成。

软膏剂的制备：取上述银杏黄酮粉末、芝麻素粉末和生姜油，溶解于 100ml 95%乙醇溶液中，再向其中加入三乙醇胺50ml，加温至70℃。将石蜡300g、硬脂酸300g、丙二醇100ml分别加入搅拌融化，补蒸馏水至足量1000 g，搅拌均匀至膏状，即得淡黄色软膏1000 g。分装于50支小管中，每支20 g。每克软膏含银杏黄酮+芝麻素+生姜油为40mg+80mg+40mg。

软膏剂制备工艺为公知公用的方法。

其它同实施例1。

实施例3：

一种具有祛痘作用的组合物由从银杏叶中提取的银杏黄酮粉末、从芝麻中提取的芝麻素粉末、从生姜中提取的生姜油混合均匀组成，按质量比1：1：2混合均匀组成。

酊剂的制备：取上述银杏黄酮粉末、芝麻素粉末和生姜油，溶解于 600ml 95%乙醇溶液中，再向其中分别加入三乙醇胺50ml，丙二醇200ml搅拌，补95%乙醇溶液至足量1000 ml，即得淡黄色酊剂1000 ml。分装于50支小管中，每支20 ml。每毫升酊剂含银杏黄酮+芝麻素+生姜油为20mg+20mg+40mg。

酊剂制备工艺为公知公用的方法。

其它同实施例1。

用以上方法制成的外用制剂，进行相关的药理药效学试验、局部刺激性安全性评价实验和临床试用试验。下面是本发明的实验数据：

动物实验一： 

金黄色葡萄球菌菌悬液制备：将金黄色葡萄球菌接种于肉汤培养基，在37℃空气中振荡培养24 h，离心液体培养基，用灭菌的生理盐水冲洗菌落2次，离心后，再用灭菌生理盐水将金黄色葡萄球菌制成菌悬液，根据平板计数结果分别配制浓度为1.0×10⁵、1.0×10⁶、1.0×10⁷ 和1.0×10⁸CFU/mL的细菌悬液，4℃保存备用。

金黄色葡萄球菌感染动物模型的建立：将90只昆明种小鼠随机分成9组，分别为模型对照组、银杏黄酮组、芝麻素组、生姜油组、银杏黄酮+芝麻素组、银杏黄酮+生姜油组、芝麻素+生姜油组、本发明组、阳性对照组。将每组小鼠背部右侧用剃须刀剃去毛发，裸露出皮肤。皮下注射金黄色葡萄球菌菌悬液1.0×10⁶CFU/mL，0.1mL。注射金黄色葡萄球菌菌悬液2天后，各组小鼠感染部位分别外涂相应的外用制剂，阳性对照组小鼠皮肤感染部位涂抹抗生素软膏百多邦，模型对照组小鼠皮肤感染部位涂抹酒精；每天1次，连续6天。

检测指标：感染小鼠皮损面积检测：皮下注射金黄色葡萄球菌第2、4、6天，用透明膜覆盖实验动物皮肤感染部位，沿感染部位边缘描记、剪膜，分析天平称取质量并换算面积。皮肤评分:处死动物前，对皮肤感染小鼠的皮肤进行感官评分，金黄色葡萄球菌感染模型的评分细则见表1。 

实验结果见表2，表3。结果表明，与正常对照组相比，本发明外用制剂能明显降低金黄色葡萄球菌感染小鼠皮损面积和皮肤感官评分，有效治疗皮肤感染症状。银杏黄酮、芝麻素、生姜油三者组合明显优于单用以及其中两者组合，具有协同作用。三者组合效果大大增强，而且产生了预料不到的技术效果，如作用出现时间早，显效快；在皮肤感官评分指标方面，优于阳性对照药抗生素软膏百多邦；且在实验中发现本发明能促进皮肤痂皮的形成并脱落，可减少后期痘印的形成。

              表1  金黄色葡萄球菌感染小鼠模型皮肤评分

反应强度	分值
		无红斑	0
轻微痂皮	1
		中度红斑无痂皮	2
重度红斑伴轻微痂皮	3
		重度红斑伴重度痂皮	4

              表2 金黄色葡萄球菌感染小鼠皮损面积的变化

n=10，x±s,与模型对照组相比，^*p＜0.05，^**p＜0.01.与本发明组相比，^# P<0.05, ^## P<0.01.

        表3 金黄色葡萄球菌感染模型小鼠皮肤感官评分实验结果

n=10. 表格中数字代表动物只数。

动物实验二：

菌悬液制备：痤疮丙酸杆菌：将痤疮丙酸杆菌接种于1053号培养基中，在37℃空气中振荡培养18h，离心液体培养基，用灭菌的生理盐水冲洗菌落2次，离心后，再用灭菌生理盐水将痤疮丙酸杆菌制成菌悬液，根据平板计数结果分别配制浓度为1.0×10⁵、1.0×10⁶、1.0×10⁷ 和1.0×10⁸CFU/mL的细菌悬液，4℃保存备用。 

痤疮丙酸杆菌感染动物模型的建立：将90只金黄地鼠随机分成9组，分别为模型对照组、银杏黄酮组、芝麻素组、生姜油组、银杏黄酮+芝麻素组、银杏黄酮+生姜油组、芝麻素+生姜油组、本发明组、阳性对照组。将每组地鼠背部右侧用剃须刀剃去毛发，裸露出皮肤。皮下注射痤疮丙酸杆菌菌悬液1.0×10⁶CFU/mL，0.1mL。注射痤疮丙酸杆菌菌悬液2天后，各组地鼠感染部位分别外涂相应的外用制剂，阳性对照组地鼠皮肤感染部位涂抹常用治疗痤疮的药物维胺酯维E乳膏，模型对照组地鼠皮肤感染部位涂抹酒精；每天1次，连续6天。

检测指标：感染地鼠皮损面积检测：皮下注射痤疮丙酸杆菌第2、4、6天，用透明膜覆盖实验动物皮肤感染部位，沿感染部位边缘描记、剪膜，分析天平称取质量并换算面积。皮肤评分:处死动物前，对皮肤感染地鼠的皮肤进行感官评分，痤疮丙酸杆菌感染模型的评分细则见表4。 

实验结果见表5，表6。结果表明，与正常对照组相比，本发明外用制剂能明显降低痤疮丙酸杆菌感染金黄地鼠皮损面积和皮肤感官评分，有效治疗痤疮皮肤感染症状。银杏黄酮、芝麻素、生姜油三者组合明显优于单用以及其中两者组合，具有协同作用。三者组合效果大大增强，而且产生了预料不到的技术效果，如抗菌作用和在皮肤感官评分指标方面，优于阳性对照药；且在实验中发现本发明能减少角化物质形成，促进皮肤老化角质层脱落，可减少后期痘印的形成。   

             表4  痤疮丙酸杆菌感染模型金黄地鼠皮肤评分

反应强度	分值（级）
		无粉刺	0
毛囊漏斗部可见少量致密角化物质，并向皮脂腺延伸	+
		毛囊漏斗部可见中等量致密角化物质，并向皮脂腺延伸	++
扩张毛囊内有广泛的角化物质，与人类开放性粉刺相似	+++

    表5  痤疮丙酸杆菌感染模型金黄地鼠皮损面积的变化

n=10，x±s,与模型对照组相比，^*p＜0.05，^**p＜0.01.本发明组与其它各组相比，^# P<0.05, ^## P<0.01.

表6  痤疮丙酸杆菌感染模型金黄地鼠皮肤感官评分实验结果

n=10. 表格中数字代表动物只数。

动物实验三：局部刺激性实验

取成年家兔8只，雌雄各半，每只动物分笼饲养，先在实验室条件饲养3－4天。然后将家兔脊柱两侧背毛用电动剃毛器剃去，每侧面积5×10cm²。仔细检查脱毛区是否有红肿和损伤，如有应弃之，不能进行试验。采用多次给药的试验方法，在脱毛区涂抹本发明祛痘用组合物外用制剂，每日2次，连续给予7天。末次给予24小时后用温水洗去涂抹液，分别于l、24、48、72小时后观察局部皮肤反应，如红斑、水肿、脱屑、结痂等，是否有出血点、皮肽粗糙或菲薄等，记录发生时间及消退时间。结果表明，在连续涂抹本发明期间及停药3天，各家兔皮肤均未表现出明显的皮肤刺激和过敏反应。表明本发明产品安全，无不良反应。

临床试用试验：用以上方法制成的组合物外用制剂，经痤疮患者试用，所有患者用本发明外涂痤疮病患皮损处，每天1次，每次适量；5天为一疗程；患者在治疗期间均不使用任何其它皮肤外用药物。疗效标准：治愈：临床皮肤痤疮病损表现全部消失；显效：临床皮肤痤疮病损表现基本消失，皮损面积缩小>60%；有效：临床皮肤病损表现部分消失，皮损面积缩小>30%；无效：临床皮肤病损表现不变或加重，皮损面积缩小＜30%。治愈率＝治愈人数/总病例X100%；有效率＝（治愈人数+显效人数+有效人数）/总病例X100%。结果见表7。临床试用结果表明，痤疮患者使用本发明组合物外用制剂均有效，有效率达100%；治愈率为92%。所有患者在应用本发明期间均未出现皮肤刺激、过敏等不良反应。因此本发明是一种理想的祛痘用组合物外用制剂，疗效显著，使用安全可靠。

表7 本发明组合物外用制剂祛痘的临床效果

本发明与现有技术相比：银杏黄酮、芝麻素和生姜油三者组合，具有协同增强药理活性的优势，更好地提高各自抗炎抗感染的功能，产生了预料不到的技术效果；三者组合，不仅祛痘疗效显著、使用安全，作用优于市场上常用的抗痤疮药物，但无抗生素带来的副作用和易产生耐药性的缺点。更为重要的是，银杏黄酮、芝麻素、生姜油三者组合，在祛痘的同时可抑制痘印和疤痕的产生，这对于痤疮患者是非常重要的，也是目前市场上常用的祛痘产品所不具备的；因此本发明具有良好的临床应用前景。

Claims (3)

1. 一种祛痘用组合物，其特征在于：由银杏黄酮粉末、芝麻素粉末和生姜油按质量比1-2：1-2：1-2混合均匀组成；

所述银杏黄酮粉末由银杏叶中提取，其中银杏黄酮含量大于50%；

所述芝麻素粉末由芝麻中提取，其中芝麻素含量大于50%；

所述生姜油由生姜中提取，其中姜酚含量大于20%。

2.根据权利要求1所述的一种祛痘用组合物，其特征在于：所述银杏黄酮粉末、芝麻素粉末和生姜油按质量比1：1：1混合均匀组成。

3.根据权利要求1所述的一种祛痘用组合物，可与化妆制剂或药物的赋形剂混合制成皮肤外用制剂。