CN102641278A - 银杏酚酸在治疗关节炎中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及银杏酚酸在治疗关节炎中的用途。所述银杏酚酸包括银杏酸、银杏酚、银杏二酚等，可通过化学分离方法，从银杏的叶、果、外种皮、根茎等部位的提取物中得到。所述关节炎为风湿性关节炎、类风湿性关节炎、痛风性关节炎、骨关节炎等。含有银杏酚酸的治疗关节炎的药物、医疗器械或消毒剂制剂，含银杏酚酸0.001-80％(以重量百分比计)，以及药学上常用的外用制剂基质或可接受的载体；所述制剂是任何一种药剂学上所说的外用剂型。药理学试验研究表明，本发明对关节炎动物模型具有改善关节肿胀、减轻关节损伤、抑制局部炎症的良好作用。临床试用表明，本发明对各型关节炎具有显著的治疗作用，有效率达90％以上，使用安全无副作用。

Description

银杏酚酸在治疗关节炎中的用途

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及银杏酚酸在制备治疗关节炎的制剂中的用途。 

背景技术

关节炎种类较多，如风湿性关节炎、类风湿性关节炎、痛风性关节炎、骨关节炎、强直性关节炎、强直性脊柱炎、反应性关节炎、肌腱炎、滑囊炎、肩周炎等，临床上以前四种最为常见。 

类风湿性关节炎是一种以对称性多关节炎病变为主的慢性、进行性、全身性自身免疫疾病，其病理特征主要表现为滑膜组织炎症细胞浸润、滑膜细胞增生、血管翳形成、软骨和软骨下骨质破坏。临床表现主要为对称性、多关节、小关节的疼痛、僵硬、肿胀、变形和功能下降，早期出现关节红、肿、热、痛和功能障碍，病变呈持续性反复发作，继而引起关节软骨和关节囊的破坏，晚期可出现不同程度侵蚀性改变及进行性强直和畸形，并伴有骨和骨骼肌萎缩。类风湿关节炎发病率和致残率较高，严重影响患者的生活质量。其发生机制涉及细胞因子、遗传和感染等多种因素，由于类风湿性关节炎的发病机制十分复杂，因此目前治疗主要在于缓解症状、控制病情并尽可能地保护关节肌肉的功能；药物治疗主要为非甾体抗炎药物、抗风湿药物、糖皮质激素和生物制剂等，但至今尚无理想的药物，而且此类药物长期服用副作用较大。 

骨关节炎也称作退行性关节病，是老年、风湿、骨科病房最常见的病种。骨关节炎是国内老年人致残的主要病种，并随着我国进入老龄化社会的进程加速，患者越来越多。骨关节炎进展缓慢，病程长，致残率高，无有效治疗和预防方法，长期发展给患者的精神和肉体带来极大的伤害，也给家庭带来很大的经济负担。因此针对骨关节炎的预防和治疗的研究具有极为重要的意义。骨性关节炎多发生在50岁以后，老年性组织变性和积累性劳损是本病发生的主要病因。目前，临床上用于治疗骨性关节炎的药物依其作用方式大体可分为改善症状与改善软骨代谢两大类。改善症状类药物具有明显的胃肠道副作用，也不能从根本上逆转骨性关节炎的病理发展，因而目前仅在急性期应用。改善软骨代谢的药物可在一定程度上有效缓解软骨退变，延缓骨性关节炎的进展，但价格较昂贵，普通患者难以支付庞大的医疗开销。 

随着人们生活水平的提高、饮食结构的改变，高尿酸血症和痛风的发病率呈逐年上升趋势，且发病年龄呈低龄化。尿酸水平升高是痛风的生化基础，尿酸钠微晶沉积于关节组织，是痛风性关节炎发生的主要原因。在痛风的治疗上，目前以抗炎镇痛(秋水仙碱、非甾体抗炎药、糖皮质激素或肾上腺皮质激素等)、降血尿酸(磺酰类化合物丙磺舒、苯磺唑酮、别嘌呤醇等)为主，但此类药物长期服用有明显的胃肠道反应和肝肾毒副作用，撤药后易复发。 

为了提高关节炎患者的治疗效果，避免上述药物不良反应的发生，市场需要研制开发一 种来源于天然、效果显著、无明显不良反应的治疗关节炎的制剂，以减轻患者痛苦。中药是我国医学的宝贵资源，具有疗效好、毒副作用小的优点，开发安全有效的治疗关节炎的天然制剂具有重要科学价值。关节炎患者众多，开发此类治疗关节炎的制剂产品具有良好的临床应用前景，对患者是十分有益和必要的。 

银杏是我国珍贵的药用植物，银杏的叶、果和外种皮等皆具有药用开发价值。据《本草纲目》记载，银杏性甘、苦、平、涩；有定喘止咳、止带浊、止痛之功；主治寒嗽痰喘、哮喘、小便频数、赤白带下、手足皲裂等。特别是近几十年来人们发现银杏叶中含有多种有效成分，主要有效成分为黄酮类和萜类内酯化合物，具有防治心脑血管疾病的功能。我国民间早有将银杏外种皮浸泡液作为农药使用，对蚜虫、稻螟虫等害虫有杀灭作用。 

银杏酚酸为无色或淡黄色的油状或粉末状物质，是存在于银杏叶、果和外种皮中一类具有重要生理活性的组分。本发明所涉及的银杏酚酸为烷基或烯基苯酚酸类物质，根据分子中苯环上是否连接有羧基，将其分为银杏酸和银杏酚两大类。银杏酸是水杨酸分子在苯环C6位上有饱和或不饱和长链烷基的系列化合物，按化学结构可分为5种，侧链R为C₁₃H₂₇、C₁₅H₂₉、C₁₅H₃₁、C₁₇H₃₁和C₁₇H₃₃，对应的分子量分别为320、346、348、372、374。银杏酚酸包括白果酸、氢化白果酸、白果新酸、白果亚酸、氢化白果亚酸、漆树酸、银杏酚、银杏二酚、白果醇等。银杏酚酸(银杏酸、银杏酚、银杏二酚)结构见下。 

银杏酚酸的结构 

随着对银杏酚酸类物质研究的逐渐深入，发现银杏酚酸具有多种生物活性。已有研究表明，银杏酚酸对体外多种细菌有良好的抑制作用，能抑制部分农业病原菌的生长；银杏酚酸对肿瘤细胞株的生长有良好的抑制作用。有关银杏酚酸的提取、分析及体外抗菌活性、抗农业病原菌和病原虫、抗肿瘤活性已有文献报道。目前尚未见银杏酚酸治疗关节炎的用途的报道。因此，有关银杏酚酸制剂防治关节炎新型药物、医疗器械、消毒剂的研究开发，以及对银杏资源的充分开发利用，将产生巨大的社会和经济效益。 

发明内容

本发明的目的是提供银杏酚酸的新用途，即银杏酚酸在制备治疗关节炎的制剂中的用途。它具有疗效显著和使用安全的特点。 

本发明的目的是这样实现的： 

提供银杏酚酸在治疗关节炎中的用途。 

提供银杏酚酸在制备防治关节炎的制剂中的用途。 

所述关节炎为风湿性关节炎、类风湿性关节炎、痛风关节炎、骨关节炎、强直性关节炎、强直性脊柱炎、肌腱炎、滑囊炎、反应性关节炎、肩周炎等。 

所述银杏酚酸包括银杏酸、银杏酚、银杏二酚等，可通过化学分离方法，从银杏的叶、果、外种皮、根茎等部位的提取物中得到；或对银杏叶、果、外种皮、根茎提取加工产物在提取加工过程中剩余的废料中重新回收；或从其它植物含有本类化合物的各部分提取物中获得；或通过化学合成的方法获得；包括银杏酚酸药学上可接受的盐、酯、溶剂化物，结晶形态的物质。 

还提供含有银杏酚酸的治疗关节炎的药物、医疗器械或消毒剂制剂，含有银杏酚酸0.001-80％，以重量百分比计，以及药学上常用的外用制剂基质或外用制剂可接受的载体。 

更进一步的，含有银杏酚酸0.001-30％，以重量百分比计。 

更进一步的，含有银杏酚酸0.5-20％，以重量百分比计。 

按上述重量比范围取主药银杏酚酸、药学上常用的外用制剂基质或可接受的载体制备得到银杏酚酸制剂；以及包含银杏酚酸和任何物质组合用于治疗关节炎的药物、医疗器械或消毒剂制剂。所述制剂是任何一种药剂学上所说的外用剂型，可以是贴剂、液体制剂、膏霜剂、凝胶剂、粉剂、膜剂、洗剂、气雾喷雾剂、透皮吸收制剂、皮下注射剂等。 

本发明的有益效果是，药理药效学试验研究表明，本发明银杏酚酸制剂对佐剂性关节炎、胶原性关节炎、痛风性关节炎动物模型具有改善关节肿胀、减轻关节损伤、抑制局部炎症的良好作用。局部刺激性实验研究表明本发明安全，无皮肤刺激、过敏等不良反应。临床试用结果表明，本发明对各型关节炎具有显著的治疗作用，有效率达90％以上，使用安全无副作用。 

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明作进一步地描述。 

实施例1： 

银杏果外种皮中银杏酚酸提取工艺如下：将银杏果外种皮剥离下来，晒干，用粉碎机将其粉碎。准确称取一定量经粉碎的银杏外种皮，加入料液比为1∶6(W/V)的80％乙醇，在水浴温度60℃下，搅拌浸提2次，每次提取时间4小时，(注：加液后，烧杯口用保鲜膜封住，以防止乙醇的挥发)。浸提结束后，用抽滤器抽滤，收集滤液。用真空旋转蒸发仪浓缩滤液，条件为温度55℃，压强0.008-0.009MPa，减压浓缩。于60℃真空干燥，得银杏酚酸浸膏，性状为：浅褐色浸膏，微臭，溶于醇，不溶于水；称重，并测定银杏酚酸含量(mg/g)。 

银杏酚酸含量测定：采用HPLC法进行测定。银杏酚酸的标准品溶液在100-1200μg/ml之间，相应峰面积与银杏酚酸质量浓度有显著的线性关系，制订了标准曲线。用无水乙醇(色谱纯)将银杏酚酸浸膏溶解，过滤。在柱温：室温；流动相：甲醇-水(9∶1，v/v)；流速1ml/min；进样量：20μl；检测波长310nm；分析时间：25min条件下测定浸膏中银杏酚酸含量。根据标样的保留时间进行定性，用外标法计算银杏酚酸的含量。浸膏中银杏酚酸含量为658.25mg/g。 

银杏酚酸提取工艺和含量测定方法为公知公用的方法。 

凝胶剂的制备：将卡波普10g洒在500ml蒸馏水表面，溶胀过夜。称取甘油60g，丙二醇120ml，分别加入至溶胀好的卡波普中，迅速研磨均匀，得到透明的凝胶基质。取上述银杏酚酸浸膏40g，溶解于100ml 95％乙醇溶液中，缓慢加入至凝胶基质中，搅拌均匀。再缓慢加入三乙醇胺15ml，补蒸馏水至足量1000g，即得淡黄色银杏酚酸凝胶1000g，银杏酚酸含量为2.63％(W/W)。分装于50支小管中，每支20g。 

凝胶剂制备工艺为公知公用的方法。 

实施例2： 

银杏果实白果中银杏酚酸提取工艺如下：将白果去皮，放入组织捣碎机中粉碎。准确称取一定量经粉碎的白果，加入料液比为1∶10(W/V)的80％乙醇，在水浴温度60℃下，搅拌浸提2次，每次提取时间4小时，(注：加液后，烧杯口用保鲜膜封住，以防止乙醇的挥发)。浸提结束后，离心(5000转/分，15分钟)，取上清液。用真空旋转蒸发仪浓缩上清液，条件为温度55℃，压强0.008-0.009MPa，减压浓缩，并于60℃真空干燥，得银杏酚酸浸膏，性状为：浅褐色浸膏，微臭，溶于醇，不溶于水。称重，并测定银杏酚酸含量(mg/g)。 

银杏酚酸含量测定：同实施例1。浸膏中银杏酚酸含量为479.57mg/g。 

软膏剂的制备：取上述银杏酚酸浸膏40g，溶解于100ml 95％乙醇溶液中，再向其中加入三乙醇胺50ml，加温至70℃。将石蜡300g、硬脂酸300g、丙二醇100ml分别加入搅拌融化，补蒸馏水至足量1000g，搅拌均匀至膏状，即得淡黄色银杏酚酸软膏1000g，银杏酚酸含量为1.92％(W/W)。分装于50支小管中，每支20g。 

软膏剂制备工艺为公知公用的方法。 

实施例3： 

银杏叶中银杏酚酸提取工艺如下：将银杏叶剪碎，放入粉碎机中将其粉碎。准确称取一定量经粉碎的银杏叶，加入料液比为1∶6(W/V)的80％乙醇，在水浴温度60℃下，搅拌浸提2次，每次提取时间4小时，(注：加液后，烧杯口用保鲜膜封住，以防止乙醇的挥发)。浸提结束后，离心(5000转/分，15分钟)，取上清液。用真空旋转蒸发仪浓缩上清液，条件为温度55℃，压强0.008-0.009MPa，减压浓缩，并于60℃真空干燥，得银杏酚酸浸膏，性 状为：浅褐色浸膏，微臭，溶于醇，不溶于水。称重，并测定银杏酚酸含量(mg/g)。 

银杏酚酸含量测定：同实施例1。浸膏中银杏酚酸含量为533.94mg/g。 

酊剂的制备：取上述银杏酚酸浸膏80g，溶解于600ml 95％乙醇溶液中，再向其中分别加入三乙醇胺50ml，丙二醇200ml搅拌，补95％乙醇溶液至足量1000ml，即得淡黄色银杏酚酸酊剂1000ml，银杏酚酸含量为4.27％(W/V)。分装于50支小管中，每支20ml。 

酊剂制备工艺为公知公用的方法。 

实施例4： 

银杏果外种皮中银杏酚酸提取工艺和含量测定方法同实施例1，得银杏酚酸浸膏，银杏酚酸含量为655.36mg/g。 

贴剂的制备：称取压敏胶800g、高岭土64g、甘油8g，搅拌均匀，再加入上述银杏酚酸浸膏80g，研磨使之成为均匀乳膏，涂布在玻璃纸上。程序性升温烘干(40℃-60℃-80℃)：从40℃开始烘干，60min后，提高温度至60℃，再过60min提高至80℃，最后烘90min。在玻璃纸表面铺上无纺布，均匀按压，使膏体转移至无纺布上，剪裁至一定规格10cm×7cm。 

贴剂制备工艺为公知公用的方法。 

实施例5： 

银杏果外种皮中银杏酚酸提取工艺和含量测定方法同实施例1，得银杏酚酸浸膏，银杏酚酸含量为639.28mg/g。取银杏酚酸浸膏80g，按实施例1凝胶剂制备工艺制备银杏酚酸凝胶1000g，银杏酚酸含量为5.11％(W/W)。分装于50支小管中，每支20g。 

实施例6： 

银杏果实白果中银杏酚酸提取工艺同实施例2，含量测定方法同实施例1，得银杏酚酸浸膏，银杏酚酸含量为525.53mg/g。取银杏酚酸浸膏10g，按实施例2软膏剂制备工艺制备银杏酚酸软膏1000g，银杏酚酸含量为0.53％(W/W)。分装于50支小管中，每支20g。 

实施例7： 

银杏叶中银杏酚酸提取工艺同实施例3，含量测定方法同实施例1，得银杏酚酸浸膏，银杏酚酸含量为531.42mg/g。取银杏酚酸浸膏200g，按实施例3酊剂制备工艺制备银杏酚酸酊剂1000ml，银杏酚酸含量为10.63％(W/V)。分装于50支小管中，每支20ml。 

实施例8： 

银杏果外种皮中银杏酚酸提取工艺和含量测定方法同实施例1，得银杏酚酸浸膏，银杏酚酸含量为629.15mg/g。取银杏酚酸浸膏300g，按实施例3酊剂制备工艺制备银杏酚酸酊剂1000ml，银杏酚酸含量为18.87％(W/V)。分装于50支小管中，每支20ml。 

实施例9： 

银杏叶中银杏酚酸提取工艺同实施例3，含量测定方法同实施例1，得银杏酚酸浸膏，银 杏酚酸含量为559.15mg/g。取银杏酚酸浸膏200g，按实施例1凝胶剂制备工艺制备银杏酚酸凝胶1000g，银杏酚酸含量为11.18％(W/W)。分装于50支小管中，每支20g。 

实施例10： 

银杏果外种皮中银杏酚酸提取工艺和含量测定方法同实施例1，得银杏酚酸浸膏，银杏酚酸含量为670.83mg/g。取银杏酚酸浸膏500g，按实施例3酊剂制备工艺制备银杏酚酸酊剂1000ml，银杏酚酸含量为33.54％(W/V)。分装于50支小管中，每支20ml。 

实施例11： 

银杏果实白果中银杏酚酸提取工艺同实施例2，含量测定方法同实施例1，得银杏酚酸浸膏，银杏酚酸含量为446.98mg/g。取银杏酚酸浸膏1g，按实施例2软膏剂制备工艺制备银杏酚酸软膏1000g，银杏酚酸含量为0.044％(W/W)。分装于50支小管中，每支20g。 

用以上方法制成的银杏酚酸制剂，进行相关的药理药效学试验、局部刺激性安全性评价实验和临床试用试验。下面是本发明的实验数据： 

对实验性佐剂性关节炎大鼠模型的治疗作用： 

动物模型的制备：用75％乙醇对大鼠右足跖进行消毒，将弗氏完全佐剂注射于大鼠足跖皮下，0.1ml/只；空白组大鼠注射生理盐水0.1ml/只。关节肿胀度采用玻璃容器排水法测量：在每只大鼠的踝关节下做一标记；再向内径2cm的20mL量筒内注入纯净水，液面与量筒最高刻度平齐。用最小刻度为0.1mL的5mL注射用针管吸取量筒内纯净水3mL。再把大鼠足跖缓缓伸入量筒内，使踝关节处标记与量筒液面平齐。再用已吸入3mL水的针管向量筒内慢慢注入水液，使液面再次与量筒最高刻度平齐。从注射器上的刻度读出其内部剩余液体体积，即为大鼠的足跖体积。实验开始后第1、7、14、21、28天用上述方法对各组大鼠足跖体积测量一次，并做记录。 

大鼠30只，随机分3组，正常对照组、模型对照组和本发明银杏酚酸凝胶组，每组10只。本发明银杏酚酸凝胶组各只大鼠于造模后足部分别外涂本发明银杏酚酸凝胶，正常和模型对照组各只大鼠足部分别外涂凝胶基质；每天2次，连续28天。实验结果表明(见表1)，模型组大鼠右足跖出现明显肿胀，其体积与空白组对照相比有显著性差异(P＜0.01)，其它症状表现为对侧和前足肿胀，且进行性加重，行动不便，耳和尾部出现关节炎小结，体重增长明显缓慢，这些表现接近人类风湿性关节炎。本发明银杏酚酸凝胶组在涂抹后足跖体积开始逐渐、持续下降，一周后有显著性差异(P＜0.01)。说明本发明具有治疗佐剂诱导的实验性关节炎的作用。本发明应用过程中未见明显副作用。 

表1.对佐剂诱导的实验性关节炎大鼠右后足跖肿胀度的影响 

x±s.n＝10.与模型组相比，^**P＜0.01. 

对实验性胶原性关节炎大鼠模型的治疗作用： 

采用鸡胶原II型制备实验性关节炎大鼠模型：将鸡胶原II型15mg溶于7.5ml预先配制好的醋酸0.1mol/L中，4℃过夜，充分溶解。次日，与弗氏完全佐剂等体积于冰浴中混合，使之充分乳化，制成稳定的乳化剂15ml，每ml含1.0mg胶原II型，置4℃冰箱保存备用。除正常对照组外，在大鼠的左后肢足跖皮内注射给予胶原乳剂0.1ml致炎，第7天在大鼠尾、背多点皮下注射给予0.1ml该胶原乳剂作为激发注射。正常对照组大鼠注射等剂量生理盐水。操作时，先将注射部位以75％乙醇棉球消毒，然后再进行注射。 

大鼠30只，随机分3组，正常对照组、模型对照组和本发明银杏酚酸软膏组，每组10只。本发明银杏酚酸软膏组各只大鼠于造模后足部分别外涂本发明银杏酚酸软膏，正常和模型对照组各只大鼠足部分别外涂软膏基质；每天2次，连续28天。致炎前(第0天)及致炎后第7，14，21，28天分别测量大鼠体重。同时在致炎后第7天，第14天，第18天，第22天，第26天，采用关节评分法，得出关节炎指数，具体评分标准如下：0分，无红肿；1分，趾关节红肿；2分，趾关节和足趾肿胀；3分，踝关节以下的足爪肿胀；4分，包括踝关节在内的全部足爪肿胀；每肢关节炎指数最高分数为4分，四肢关节炎指数之和代表每只大鼠的关节炎指数，最高值为16分。末次涂抹后24小时处死大鼠，迅速采集左足肿胀足爪，纵向切开足爪组织，放入5ml冷生理盐水中，于4℃浸泡过夜，3200×g离心10分钟，取上清液过滤除菌，-20℃冻存待测。硝酸还原法测定关节浸液一氧化氮(NO)含量，放免法测定地诺前列酮(PGE₂)含量。 

实验结果表明，与正常对照组相比，实验性关节炎大鼠表现四肢关节红肿、活动量减少、食欲下降、毛发灰暗无光泽和明显消瘦体重减轻。本发明银杏酚酸软膏可有效缓解实验性关节炎大鼠体重的减轻(表2)。模型组大鼠致炎后第14天开始大鼠关节炎指数升高，与正常对照组相比有显著性差异(P＜001)；本发明银杏酚酸软膏组大鼠关节炎指数明显下降，与模型对照组相比有显著性差异(P＜001)(表3)。 

研究表明，NO和PGE₂参与了类风湿性关节炎的炎症过程。NO是一种重要的炎症介质，动物实验性关节炎时关节浸液中有大量NO。类风湿性关节炎的局部炎性关节腔内和血液循环中PGE2明显增加，可引起局部关节炎症反应性水肿、渗出、红肿和疼痛；PGE₂含量的高低与软骨和骨侵蚀相关联，在导致关节软骨破坏中起着调节作用。表4结果表明，与正常对照组比较，模型组大鼠关节浸液中NO和PGE₂含量明显增高(P＜001)；与模型组比较，本发明银杏酚酸软膏组治疗后关节浸液内NO和PGE₂含量明显下降(P＜001)。 

以上结果表明，本发明可明显抑制实验性关节炎大鼠的足爪肿胀和多发性关节炎程度， 改善关节肿胀、延缓关节损伤；对实验性关节炎大鼠具有明显的治疗作用，作用机理与抑制NO和PGE₂的产生，减轻局部炎症有关。本发明应用过程中未见明显副作用。 

表2.对胶原II型诱导的实验性关节炎大鼠体重的影响 

x±s.n＝10.与模型组相比，^*P＜0.05，^**P＜0.01. 

表3.对胶原II型诱导的实验性关节炎大鼠足爪关节炎指数的影响 

x±s.n＝10.与模型组相比，^**P＜0.01. 

表4.对实验性关节炎大鼠关节浸液中一氧化氮(NO)和地诺前列酮(PEG₂)含量的影响 

x±s.n＝10.与模型组相比，^**P＜0.01. 

对实验性痛风关节炎家兔的治疗作用： 

实验性痛风关节炎家兔模型的制备：称取尿酸4g，加入有800mL沸水(双蒸水)的三角烧瓶中，用碳酸氢钠调pH至7.4，再加热至95℃，室温冷却并轻轻搅拌，过滤，高温灭菌，干燥器存放。实验操作时用无菌生理盐水配成100mg/mL的溶液，备用。兔左侧后腿膝关节周围备皮后，轻弯曲膝关节，经关节正中或侧面进针，用注射器6号针头将尿酸钠微晶溶液0.3mL通过髌上韧带注入兔膝关节腔内。致炎过程严格无菌操作。 

家兔30只，随机分3组，正常对照组、模型对照组和本发明银杏酚酸组，每组10只。本发明银杏酚酸组各只家兔于造模后关节腔内注射本发明银杏酚酸酊剂，正常和模型对照组各只家兔于造模后关节腔内注射酒精。致炎后6h处死家兔，解剖膝关节，收集关节积液，用常规 细胞计数法进行白细胞计数。取家兔左后腿膝关节滑液膜组织，固定、包埋、切片、HE染色，镜下观察。主要观察滑膜组织、滑膜细胞肿胀、坏死、白细胞和淋巴细胞浸润等炎症反应情况。病理组织学光镜下观察，进行滑膜组织学改变的组织学评分。 

实验结果表明(表5)，实验性痛风关节炎模型家兔膝关节积液中白细胞数量明显升高，本发明银杏酚酸可使白细胞数量明显降低。病理组织学观察正常对照组滑膜结构正常，未见炎症发生。模型组滑膜组织肿胀、坏死，结缔组织水肿，有明显的炎症细胞弥漫浸润。本发明银杏酚酸组病理切片可见滑膜细胞覆盖较完整，层次较正常对照组少，有少量炎症细胞浸润，无明显水肿。模型组家兔关节滑膜组织学评分明显升高，本发明银杏酚酸可使组织学评分明显降低(表5)。说明本发明银杏酚酸对尿酸钠微晶所致兔关节腔表面滑膜组织的肿胀、坏死、结缔组织水肿与炎症细胞弥漫性浸润等急性炎症反应均具有明显的抑制作用，对关节积液中白细胞增高有明显降低作用，对痛风性关节炎治疗效果明显。本发明应用过程中未见明显副作用。 

表5.对实验性痛风关节炎家兔膝关节积液中白细胞和滑膜组织改变的组织学分级评分的影响 

x±s.n＝10.与模型组相比，^**P＜0.01. 

局部刺激性实验：取成年家兔8只，雌雄各半，每只动物分笼饲养，先在实验室条件饲养3-4天。然后将家兔脊柱两侧背毛用电动剃毛器剃去，每侧面积5×10cm²。仔细检查脱毛区是否有红肿和损伤，如有应弃之，不能进行试验。采用多次给药的试验方法，在脱毛区涂抹本发明银杏酚酸制剂，每日2次，连续涂抹7天。末次涂抹24小时后用温水洗去涂抹物，分别于1、24、48、72小时后观察局部皮肤反应，如红斑、水肿、脱屑、结痂等，是否有出血点、皮肤粗糙或菲薄等，记录发生时间及消退时间。实验结果表明，在连续涂抹本发明银杏酚酸制剂7天后，各家兔皮肤均未表现出明显的皮肤刺激和过敏反应。表明本发明产品安全，无不良反应。 

临床试用试验：用以上方法制成的银杏酚酸制剂，经多种关节炎患者试用，具体病例和疗程见表6。所有患者用本发明外涂病患关节处，每天2次。患者在治疗期间均不使用任何其它抗关节炎药物。另嘱平时适当锻炼身体，生活有节，严格戒酒，少吃动物内脏及海味等高嘌呤食物。疗效标准：显效：临床症状缓解，1年以上无复发；有效：临床症状缓解，1年内偶有复发；无效：临床症状体征无改善。有效率＝(显效人数+有效人数)/总病例X100％。结 果见表6。临床试用结果表明，多种关节炎患者使用本发明银杏酚酸制剂均有效，有效率达90％以上。所有患者在应用本发明期间均未出现皮肤刺激、过敏等不良反应。因此本发明是一种理想的治疗多种关节炎疾病的制剂，疗效显著，使用安全可靠。 

表6本发明银杏酚酸制剂治疗关节炎的临床效果 

本发明与现有技术相比：本发明来源于天然珍贵药用植物银杏，从银杏叶、果、外种皮等部位提取分离银杏酚酸，以银杏酚酸为有效成分制成制剂，具有改善关节肿胀、减轻关节损伤、抑制局部炎症的良好作用；对各型关节炎具有显著的治疗作用，疗效突出、使用安全无副作用，具有良好的临床应用前景。 

Claims (8)

1.银杏酚酸在治疗关节炎中的用途。

2.银杏酚酸在制备防治关节炎的制剂中的用途。

3.如权利要求2所述的银杏酚酸用途，所述关节炎为风湿性关节炎、类风湿性关节炎、痛风性关节炎、骨关节炎、强直性关节炎、强直性脊柱炎、反应性关节炎、肌腱炎、滑囊炎、肩周炎等。

4.如权利要求2所述的银杏酚酸制剂，为含有银杏酚酸的治疗关节炎的药物、医疗器械、消毒剂制剂；以及包含银杏酚酸和任何物质组合用于治疗关节炎的药物、医疗器械、消毒剂制剂；其特征是，所述制剂是任何一种药剂学上所说的外用剂型，可以是贴剂、液体制剂、膏霜剂、凝胶剂、粉剂、膜剂、洗剂、气雾喷雾剂、透皮吸收制剂、皮下注射剂等。

5.如权利要求4所述的药物、医疗器械或消毒剂制剂，其特征是，含有银杏酚酸0.001-80％，以重量百分比计。

6.如权利要求4所述的药物、医疗器械或消毒剂制剂，其特征是，含有银杏酚酸0.001-30％，以重量百分比计。

7.如权利要求4所述的药物、医疗器械或消毒剂制剂，其特征是，含有银杏酚酸0.5-20％，以重量百分比计。

8.所述银杏酚酸包括银杏酸、银杏酚、银杏二酚等，可通过化学分离方法，从银杏的叶、果、外种皮、根茎等部位的提取物中得到；或对银杏叶、果、外种皮、根茎提取加工产物在提取加工过程中剩余的废料中重新回收；或从其它植物含有本类化合物的各部分提取物中获得；或通过化学合成的方法获得；包括银杏酚酸药学上可接受的盐、酯、溶剂化物，结晶形态的物质。