CN102846678A - 银杏酚酸在减肥中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及银杏酚酸在减肥中的用途。所述银杏酚酸包括银杏酸、银杏酚、银杏二酚等，可通过化学分离方法，从银杏的叶、果、外种皮、根茎等部位的提取物中得到。含有银杏酚酸的减肥用药物或化妆品，含银杏酚酸0.001-80％(以重量百分比计)，以及药学上常用的外用制剂基质或可接受的载体；所述制剂是任何一种药剂学上所说的外用剂型。药理学试验研究表明，本发明具有降低体重，减少体脂，降低脂肪细胞数量和体积的作用，并具有降血糖和降血脂的功效。肥胖人群试用结果表明本发明具有降低体重和消除脂肪功能，具有显著的减肥效果，使用安全无副作用。

Description

银杏酚酸在减肥中的用途

技术领域

本发明属于生物医药及药妆领域，具体涉及银杏酚酸在减肥中的用途。

背景技术

肥胖不仅给人带来外表上的不雅，还常有乏力、气短、心悸等症状，不仅影响人们的生活质量，还可引发多种疾病，严重威胁着人类的健康。因此，对肥胖的防治已日益引起人们的重视，减肥已成为世界性的热门话题之一。寻找更安全和有效的新型外用减肥产品是当今药妆品的研究热点之一。随着生化科技的发展，人们对肥胖的生物学机制的认识正不断深入，越来越多的科研工作者倾向于从天然植物中寻找安全高效的减肥活性物质。市场上部分减肥产品含有毒副作用较大的化学药品，对人体健康造成了严重的损害；因此市场需要研制开发来源于天然、效果显著、使用安全的减肥药妆品，以满足人们对美的追求和治疗需要；开发此类产品具有良好的市场前景，是十分有益和必要的。

银杏是我国珍贵的药用植物，银杏的叶、果和外种皮等皆具有药用开发价值。据《本草纲目》记载，银杏性甘、苦、平、涩；有定喘止咳、止带浊、止痛之功；主治寒嗽痰喘、哮喘、小便频数、赤白带下、手足皲裂等。特别是近几十年来人们发现银杏叶中含有多种有效成分，主要有效成分为黄酮类和萜类内酯化合物，具有防治心脑血管疾病的功能。我国民间早有将银杏外种皮浸泡液作为农药使用，对蚜虫、稻螟虫等害虫有杀灭作用。

银杏酚酸为无色或淡黄色的油状或粉末状物质，是存在于银杏叶、果和外种皮中一类具有重要生理活性的组分。本发明所涉及的银杏酚酸为烷基或烯基苯酚酸类物质，根据分子中苯环上是否连接有羧基，将其分为银杏酸和银杏酚两大类。银杏酸是水杨酸分子在苯环C6位上有饱和或不饱和长链烷基的系列化合物，按化学结构可分为5种，侧链R为C₁₃H₂₇、C₁₅H₂₉、C₁₅H₃₁、C₁₇H₃₁和和C₁₇H₃₃，对应的分子量分别为320、346、348、372、374。银杏酚酸包括白果酸、氢化白果酸、白果新酸、白果亚酸、氢化白果亚酸、漆树酸、银杏酚、银杏二酚、白果醇等。银杏酚酸(银杏酸、银杏酚、银杏二酚)结构见下。

银杏酚酸的结构

随着对银杏酚酸类物质研究的逐渐深入，发现银杏酚酸具有多种生物活性。已有研究表明，银杏酚酸对体外多种细菌有良好的抑制作用，能抑制部分农业病原菌的生长；银杏酚酸对肿瘤细胞株的生长有良好的抑制作用。有关银杏酚酸的提取、分析及体外抗菌活性、抗农业病原菌和病原虫、抗肿瘤活性已有文献报道。目前尚未见银杏酚酸在减肥中的用途的报道。因此，有关银杏酚酸减肥新型化妆品、药物的研究开发，以及对银杏资源的充分开发利用，将产生巨大的社会和经济效益。

发明内容

本发明的目的是提供银杏酚酸的新用途，即银杏酚酸在减肥中的用途。它具有降低体重和体脂的功能，具有减肥效果显著、使用安全的特点。

本发明的目的是这样实现的：

提供银杏酚酸在减肥中的用途。

所述银杏酚酸包括银杏酸、银杏酚、银杏二酚等，可通过化学分离方法，从银杏的叶、果、外种皮、根茎等部位的提取物中得到；或对银杏叶、果、外种皮、根茎提取加工产物在提取加工过程中剩余的废料中重新回收；或从其它植物含有本类化合物的各部分提取物中获得；或通过化学合成的方法获得。本发明要求保护该类化合物及其药学上可接受的盐、酯、溶剂化物、结晶形态等物质。

还提供含有银杏酚酸的减肥的药物或化妆品，含有银杏酚酸0.001-80％，以重量百分比计，以及药学上常用的外用制剂基质或外用制剂可接受的载体。

更进一步的，含有银杏酚酸0.001-30％，以重量百分比计。

更进一步的，含有银杏酚酸0.1-20％，以重量百分比计。

按上述重量比范围取银杏酚酸、药学上常用的外用制剂基质或可接受的载体制备得到银杏酚酸外用制剂；以及包含银杏酚酸和任何物质组合用于减肥的药物或化妆品。所述制剂是任何一种药剂学上所说的外用剂型，可以是液体制剂、膏霜剂、凝胶剂、粉剂、膜剂、洗剂、气雾喷雾剂、透皮吸收制剂、皮下注射剂等。

本发明的有益效果是，药理药效学试验研究表明，本发明银杏酚酸外用制剂具有降低体重，减少体脂，降低脂肪细胞数量和体积的作用；具有显著的减肥效果，并具有降血糖和降血脂的功效。局部刺激性实验研究表明本发明安全，无皮肤刺激、过敏等不良反应。肥胖人群试用结果表明本发明具有降低体重和消除脂肪功能，使用安全无副作用。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明作进一步地描述。

实施例1：

银杏果外种皮中银杏酚酸提取工艺如下：将银杏果外种皮剥离下来，晒干，用粉碎机将其粉碎。准确称取一定量经粉碎的银杏外种皮，加入料液比为1∶6(W/V)的80％乙醇，在水浴温度60℃下，搅拌浸提2次，每次提取时间4小时，(注：加液后，烧杯口用保鲜膜封住，以防止乙醇的挥发)。浸提结束后，用抽滤器抽滤，收集滤液。用真空旋转蒸发仪浓缩滤液，条件为温度55℃，压强0.008-0.009MPa，减压浓缩。于60℃真空干燥，得银杏酚酸浸膏，性状为：浅褐色浸膏，微臭，溶于醇，不溶于水；称重，并测定银杏酚酸含量(mg/g)。

银杏酚酸含量测定：采用HPLC法进行测定。银杏酚酸的标准品溶液在100-1200μg/ml之间，相应峰面积与银杏酚酸质量浓度有显著的线性关系，制订了标准曲线。用无水乙醇(色谱纯)将银杏酚酸浸膏溶解，过滤。在柱温：室温；流动相：甲醇-水(9∶1，v/v)；流速1ml/min；进样量：20μl；检测波长310nm；分析时间：25min条件下测定浸膏中银杏酚酸含量。根据标样的保留时间进行定性，用外标法计算银杏酚酸的含量。浸膏中银杏酚酸含量为643.11mg/g。

银杏酚酸提取工艺和含量测定方法为公知公用的方法。

凝胶剂的制备：将卡波普10g洒在500ml蒸馏水表面，溶胀过夜。称取甘油60g，丙二醇120ml，分别加入至溶胀好的卡波普中，迅速研磨均匀，得到透明的凝胶基质。取上述银杏酚酸浸膏40g，溶解于100ml 95％乙醇溶液中，缓慢加入至凝胶基质中，搅拌均匀。再缓慢加入三乙醇胺15ml，补蒸馏水至足量1000g，即得淡黄色银杏酚酸凝胶1000g，银杏酚酸含量为2.57％(W/W)。分装于50支小管中，每支20g。

凝胶剂制备工艺为公知公用的方法。

实施例2：

银杏果实白果中银杏酚酸提取工艺如下：将白果去皮，放入组织捣碎机中粉碎。准确称取一定量经粉碎的白果，加入料液比为1∶10(W/V)的80％乙醇，在水浴温度60℃下，搅拌浸提2次，每次提取时间4小时，(注：加液后，烧杯口用保鲜膜封住，以防止乙醇的挥发)。浸提结束后，离心(5000转/分，15分钟)，取上清液。用真空旋转蒸发仪浓缩上清液，条件为温度55℃，压强0.008-0.009MPa，减压浓缩，并于60℃真空干燥，得银杏酚酸浸膏，性状为：浅褐色浸膏，微臭，溶于醇，不溶于水。称重，并测定银杏酚酸含量(mg/g)。

银杏酚酸含量测定：同实施例1。浸膏中银杏酚酸含量为422.10mg/g。

霜剂的制备：取上述银杏酚酸浸膏40g，溶解于100ml 95％乙醇溶液中，再向其中加入三乙醇胺50ml，加温至70℃。将石蜡100g、硬脂酸100g、丙二醇100ml分别加入搅拌融化，补蒸馏水至足量1000g，搅拌均匀至膏霜状，即得淡黄色银杏酚酸霜剂1000g，银杏酚酸含量为1.69％(W/W)。分装于50支小管中，每支20g。

霜剂制备工艺为公知公用的方法。

实施例3：

银杏叶中银杏酚酸提取工艺如下：将银杏叶剪碎，放入粉碎机中将其粉碎。准确称取一定量经粉碎的银杏叶，加入料液比为1∶6(W/V)的80％乙醇，在水浴温度60℃下，搅拌浸提2次，每次提取时间4小时，(注：加液后，烧杯口用保鲜膜封住，以防止乙醇的挥发)。浸提结束后，离心(5000转/分，15分钟)，取上清液。用真空旋转蒸发仪浓缩上清液，条件为温度55℃，压强0.008-0.009MPa，减压浓缩，并于60℃真空干燥，得银杏酚酸浸膏，性状为：浅褐色浸膏，微臭，溶于醇，不溶于水。称重，并测定银杏酚酸含量(mg/g)。

银杏酚酸含量测定：同实施例1。浸膏中银杏酚酸含量为504.79mg/g。

酊剂的制备：取上述银杏酚酸浸膏80g，溶解于600ml95％乙醇溶液中，再向其中分别加入三乙醇胺50ml，丙二醇200ml搅拌，补95％乙醇溶液至足量1000ml，即得淡黄色银杏酚酸酊剂1000ml，银杏酚酸含量为4.04％(W/V)。分装于50支小管中，每支20ml。

酊剂制备工艺为公知公用的方法。

实施例4：

银杏果外种皮中银杏酚酸提取工艺和含量测定方法同实施例1，得银杏酚酸浸膏，银杏酚酸含量为665.52mg/g。取银杏酚酸浸膏80g，按实施例1凝胶剂制备工艺制备银杏酚酸凝胶1000g，银杏酚酸含量为5.32％(W/W)。分装于50支小管中，每支20g。

实施例5：

银杏果实白果中银杏酚酸提取工艺同实施例2，含量测定方法同实施例1，得银杏酚酸浸膏，银杏酚酸含量为512.33mg/g。取银杏酚酸浸膏10g，按实施例2霜剂制备工艺制备银杏酚酸霜剂1000g，银杏酚酸含量为0.51％(W/W)。分装于50支小管中，每支20g。

实施例6：

银杏叶中银杏酚酸提取工艺同实施例3，含量测定方法同实施例1，得银杏酚酸浸膏，银杏酚酸含量为537.92mg/g。取银杏酚酸浸膏200g，按实施例3酊剂制备工艺制备银杏酚酸酊剂1000ml，银杏酚酸含量为10.76％(W/V)。分装于50支小管中，每支20ml。

实施例7：

银杏果外种皮中银杏酚酸提取工艺和含量测定方法同实施例1，得银杏酚酸浸膏，银杏酚酸含量为650.05mg/g。取银杏酚酸浸膏300g，按实施例3酊剂制备工艺制备银杏酚酸酊剂1000ml，银杏酚酸含量为19.50％(W/V)。分装于50支小管中，每支20ml。

实施例8：

银杏叶中银杏酚酸提取工艺同实施例3，含量测定方法同实施例1，得银杏酚酸浸膏，银杏酚酸含量为559.03mg/g。取银杏酚酸浸膏200g，按实施例1凝胶剂制备工艺制备银杏酚酸凝胶1000g，银杏酚酸含量为11.18％(W/W)。分装于50支小管中，每支20g。

实施例9：

银杏果外种皮中银杏酚酸提取工艺和含量测定方法同实施例1，得银杏酚酸浸膏，银杏酚酸含量为677.15mg/g。取银杏酚酸浸膏500g，按实施例3酊剂制备工艺制备银杏酚酸酊剂1000ml，银杏酚酸含量为33.86％(W/V)。分装于50支小管中，每支20ml。

实施例10：

银杏果实白果中银杏酚酸提取工艺同实施例2，含量测定方法同实施例1，得银杏酚酸浸膏，银杏酚酸含量为449.32mg/g。取银杏酚酸浸膏1g，按实施例2霜剂制备工艺制备银杏酚酸霜剂1000g，银杏酚酸含量为0.045％(W/W)。分装于50支小管中，每支20g。

用以上方法制成的银杏酚酸外用制剂，进行相关的药理药效学试验、局部刺激性安全性评价实验和临床试用试验。下面是本发明的实验数据：

小鼠营养性肥胖模型的建立参照卫生部《保健食品检验与评价技术规范》的有关实验方法，以高脂饮食诱导肥胖小鼠。小鼠按体重随机分成正常对照组和肥胖模型组，分别给予普通饲料和高脂饲料，不限饮食，持续8周。高脂饲料由50％基础饲料、15％面粉、12％猪油、3％蛋黄粉、4％黄豆粉、2％食盐、12％蔗糖、2％全脂奶粉混合加工而成。造模后，以超出正常对照组平均体重20％作为肥胖标准，筛选符合标准的肥胖小鼠。

高脂饮食诱导8周肥胖小鼠造模成功后，将肥胖小鼠40只按体重随机分为2组：模型对照组和本发明组，每组20只；实验期间模型对照和本发明组给予高脂饮食。另取20只正常小鼠作为正常对照组，给予普通饮食。本发明组小鼠腹部外涂本发明银杏酚酸外用制剂，肥胖模型和正常对照组小鼠腹部外涂基质，每天1次，连续4周。各组小鼠腹部每3天脱毛一次。每周称各组小鼠体重。实验结束前禁食12h，称最终体重，然后分离血清检测血脂：甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和游离脂肪酸(FFA)含量和血糖水平。取腹部脂肪垫，滤纸吸干后称重。取腹部脂肪，用10％福尔马林溶液固定，常规石蜡包埋，切片，HE染色，在高倍光学显微镜下观察脂肪细胞，用测微尺测量脂肪细胞的大小，以细胞(长径+宽径)/2表示。

实验结果表明，与正常对照组相比，肥胖小鼠体重显著升高，腹部脂肪重量明显升高，显微镜下观察脂肪细胞明显增大。本发明银杏酚酸外用制剂可降低肥胖小鼠体重和腹部脂肪重量，并可使腹部脂肪细胞体积缩小(见表1，表2)。说明本发明具有明显的减肥和降低体脂的作用。本发明还可降低肥胖小鼠的血糖和血脂水平(见表2，表3)，说明本发明银杏酚酸外用制剂可吸收进入体内，发挥降血糖和降血脂作用。

表1.对摄入高脂饮食的肥胖小鼠体重的影响

x±s.n＝20.与模型组相比，**P＜0.01.

表2.对摄入高脂饮食的肥胖小鼠体脂、脂肪细胞大小和血糖的影响(实验方案1)

x±s.n＝20.与模型组相比，**P＜0.01.

表3.对摄入高脂饮食的肥胖小鼠血脂水平的影响(实验方案1)

x±s.n＝20.与模型组相比，**P＜0.01.

以上实验中，各小鼠一般状态良好，摄食、饮水正常，精神状态良好，无腹泻现象。腹部皮肤均正常，无过敏、红肿、褪皮等不适反应。说明本发明产品安全，几乎无毒副反应。

局部刺激性实验：取成年家兔8只，雌雄各半，每只动物分笼饲养，先在实验室条件饲养3-4天。然后将家兔脊柱两侧背毛用电动剃毛器剃去，每侧面积5×10cm²。仔细检查脱毛区是否有红肿和损伤，如有应弃之，不能进行试验。采用多次给药的试验方法，在脱毛区涂抹本发明银杏酚酸外用制剂，每日2次，连续涂抹7天。末次涂抹24小时后用温水洗去涂抹物，分别于1、24、48、72小时后观察局部皮肤反应，如红斑、水肿、脱屑、结痂等，是否有出血点、皮肽粗糙或菲薄等，记录发生时间及消退时间。实验结果表明，在连续涂抹本发明银杏酚酸外用制剂7天后，各家兔皮肤均未表现出明显的皮肤刺激和过敏反应。表明本发明产品安全，无不良反应。

临床试用试验：用以上方法制成的银杏酚酸外用制剂，经100例肥胖人群试用，其中男50例，女50例，平均年龄35岁。将本发明减肥产品均匀地涂于腹部的多脂肪部位，每晚一次，并顺时针方向按摩，每次约3-5分钟。1个月为一疗程。在治疗期间均不使用任何其它减肥产品，且正常饮食。观察指标为腹围与体重。疗效评价指标：体重减少3公斤，腹围减少3公分以上为显效；体重减少3公斤以下，1公斤以上或腹围减少3公分以下，1公分以上为有效；体重与腹围波动于0.5公斤或0.5公分者为无效。临床观察结果见表4。结果表明，应用本发明银杏酚酸外用制剂对肥胖人群具有明显的减少腹围和降低体重的作用。所有试用者在应用本发明期间均未出现皮肤刺激、过敏等不良反应。因此本发明是一种较理想的减肥外用制剂，使用安全可靠。

表4本发明银杏酚酸外用制剂的临床应用效果

本发明与现有技术相比：本发明来源于天然珍贵药用植物银杏，从银杏叶、果、外种皮等部位提取分离银杏酚酸，以银杏酚酸为有效成分制成皮肤外用制剂，具有降低体重，减少体脂，降低脂肪细胞数量和体积的作用，以及降血糖和降血脂的功效。对肥胖人群具有降低体重和消除脂肪功能，具有显著的减肥效果，疗效突出、使用安全无副作用，具有良好的临床应用前景。

Claims (7)

1.银杏酚酸在减肥中的用途。

2.银杏酚酸在制备减肥的外用制剂中的用途。

3.如权利要求2所述的银杏酚酸外用制剂，为含有银杏酚酸的具有减肥作用的药物或化妆品；以及包含银杏酚酸和任何物质组合用于减肥的药物或化妆品；其特征是，所述制剂是任何一种药剂学上所说的外用剂型，可以是液体制剂、膏霜剂、凝胶剂、粉剂、膜剂、洗剂、气雾喷雾剂、透皮吸收制剂、皮下注射剂等。

4.如权利要求3所述的药物或化妆品，其特征是，含有银杏酚酸0.001-80％，以重量百分比计。

5.如权利要求3所述的药物或化妆品，其特征是，含有银杏酚酸0.001-30％，以重量百分比计。

6.如权利要求3所述的药物或化妆品，其特征是，含有银杏酚酸0.1-20％，以重量百分比计。

7.所述银杏酚酸包括银杏酸、银杏酚、银杏二酚等，可通过化学分离方法，从银杏的叶、果、外种皮、根茎等部位的提取物中得到；或对银杏叶、果、外种皮、根茎提取加工产物在提取加工过程中剩余的废料中重新回收；或从其它植物含有本类化合物的各部分提取物中获得；或通过化学合成的方法获得；包括银杏酚酸药学上可接受的盐、酯、溶剂化物，结晶形态的物质。