CN103977036A - 一种桦褐孔菌的干燥方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种桦褐孔菌的干燥方法，取新采收的桦褐孔菌，堆置2-5天，干燥，制备的桦褐孔菌，主要有效成分多糖含量高，抗癌活性高。

Description

一种桦褐孔菌的干燥方法

发明领域

本发明涉及药品制法，特别涉及一种桦褐孔菌的干燥方法，属医药技术领域。 

背景技术

中药干燥在我国有很长的历史，经干燥的中草药可保持一定的药用成分以及不易腐败变质，干燥作为保证中草药品质的重要措施，是中草药加工中一个必不可少的工艺过程，干燥与中药生产的关系密切，干燥的好坏将直接影响产品的质量。 

桦褐孔菌属于真菌门、担子菌亚门、层菌纲、非褐菌目、多孔菌科、褐卧孔菌属，学名：Fuscoporia obliqua(Pers.Fr.)Aosh或Inonotus obliquus(Fr.)Pilat。自16世纪至今，东欧一些国家的民间一直应用这种菌的菌来防治癌症、心脏病、肝病、胃病等。近年来,对该菌的研究引起了很多国家相关学者的重视，已经分离出栓菌酸、三萜类化合物、类固醇、多糖等成分,并用于恶性肿瘤、糖尿病、心血管疾病、肝病及艾滋病的预防和治疗。 

《山东省中药材标准》记载的采收与加工方法，为全年采收，阴干或40-50℃烘干。 

发明内容

本发明的目的是提供一种桦褐孔菌干燥的新方法，该方法干燥的桦褐孔菌，主要有效成分多糖含量高抗，癌活性强。 

本发明是这样实现的： 

一种桦褐孔菌的干燥方法，其特征在于： 取新采收的桦褐孔菌，堆置2-5天，干燥。

本发明的一种桦褐孔菌的干燥方法，其特征在于：干燥是堆置后晾干或晒干或烘干或冻干。 

至此完成了本发明，按本发明的干燥方法制备的桦褐孔菌，主要有效成分多糖含量高抗，癌活性强。 

下面通过试验例进一步说明本发明的有益之处，试验例旨在进一步说明本发明的有益之处，而非对本发明的限制。 

将同一批新采收的桦褐孔菌，按以下方法进行加工。 

1）晾干：阴凉通风处，摊开晾干； 

2）烘干：50℃以下烘干；

3）堆置烘干：在阴湿处堆置3天，50℃以下烘干。

一、不同方法干燥的桦褐孔菌多糖含量比较 

分别称取各样品粉末（60目）5g ，加150mL蒸馏水混合均匀，回流提取3h，冷却，6000r/min离心15min，取上清液，沉淀部分再重复提取两次，合并上清液，旋转真空浓缩至原体积的 1/10，加乙醇至乙醇浓度80%，静置过夜，收集沉淀；无水乙醇洗涤，真空干燥，得粗多糖。

取一定量干燥后的粗多糖，用蒸馏水定容至一定体积，采用苯酚—硫酸法测定多糖含量，以葡萄糖为标准品绘制标准曲线，以干品计，结果见表1。 

表1 不同方法干燥桦褐孔菌多糖含量（%） 

干燥方法	晾干	烘干	堆置烘干
				含量（%）	5.31	5.26	7.62

由表1看出，桦褐孔菌“堆置后干燥”，多糖含量明显高于“晾干”和“烘干”。

二、不同方法干燥的桦褐孔菌抗人肺源腺癌细胞SPCA-1、人肝癌细胞系HepG2和人慢性髓系白血病细胞K562试验。 

1、制备桦褐孔菌提取物  分别取不同方法干燥的桦褐孔菌粉碎，各加水煎煮两次，第一次加水8倍量，煎煮2小时，第二次加水8倍量，煎煮1小时，合并药液，药液滤过，取滤液，浓缩至相对密度为1.10（60℃）时，加入乙醇使含醇量达到75％，沉淀，静置36小时，吸取上清液，回收乙醇，浓缩，干燥，粉碎，得不同方法干燥的桦褐孔菌提取物。 

2、肿瘤细胞株　人肺源腺癌细胞SPCA-1、人肝癌细胞系HepG2和人慢性髓系白血病细胞K562，用RPMI-1649培养液, 37℃,5%CO2，相对湿度100%培养，贴壁细胞0.25%胰蛋白酶消化传代。 

3、方法  MTT比色法测定提取物对肿瘤细胞生长的抑制作用。取对数生长期细胞，用新鲜的RPMI-1640培养液配制成细胞悬液，悬浮细胞1×105个/ml贴壁细胞0.8×105个/ml。悬浮细胞分别加入不同浓度实验药物后接种于96孔培养板中；贴壁细胞先接种于96孔培养板中，每孔90μl24h后分别加入不同浓度实验药物。终体积为每孔100μl且每组设3个平行孔，共设4组:受试药组T(培养液+细胞悬液+不同浓度受试药)、阴性对照组N(培养液+细胞悬液)、药物颜色对照组TC(培养液+不同浓度受试药)、空白对照组B(培养液+生理盐水)。受试药浓度依次为10μg/ml、30μg/ml、50μg/ml。置37℃,5%CO2培养箱中培养72h后，向每孔加入MTT溶液10μl震荡混匀后，继续培养4h，加入SDS90μl终止培养,37℃过夜，然后室温下在微量振荡器上震荡10min，酶标仪测定570nm波长处的吸光度(OD值),实验重复3次。 

按以下公式计算生长抑制率： 

生长抑制率(%)=(N组OD均值-B组OD均值)—(T组OD均值-TC组OD均值)/N组OD均值-B组OD均值×100%。

4、不同提取物对人肺源腺癌细胞SPCA-1、人肝癌细胞系HepG2和人慢性髓系白血病细胞K562的抑制率结果见表1、表2、表3。 

表2 对SPCA-1的抑制率结果 

抑制率（%）	10（μg/ml）	30（μg/ml）	50（μg/ml）
				晾干	53.21	61.15	75.33
烘干	53.21	61.17	75.34
				堆置后烘干	62.45	72.41	81.57

表3  对HepG2的抑制率结果

抑制率（%）	10（μg/ml）	30（μg/ml）	50（μg/ml）
				晾干	43.85	54.20	60.27
烘干	43.84	54.21	60.25
				堆置后烘干	54.82	61.57	81.47

表4  对K562的抑制率结果

抑制率（%）	10（μg/ml）	30（μg/ml）	50（μg/ml）
				晾干	55.52	70.44	75.78
烘干	55.53	70.43	75.85
				堆置后烘干	63.58	75.32	81.35

结果表明，不同方法干燥的桦褐孔菌对SPCA-1、HepG2、K562细胞的增殖均有抑制作用，其中，堆置烘干疗效最好。

具体实施方式

一种桦褐孔菌的干燥方法，其特征在于： 取新采收的桦褐孔菌，在阴湿处堆置2-5天，晾干或晒干或烘干或冻干。 

实施例1

取新采收的桦褐孔菌，在阴湿处堆置2天，晾干。

实施例2

取新采收的桦褐孔菌，在阴湿处堆置3天，晒干。

实施例3

取新采收的桦褐孔菌，在室内堆置4天，烘干。

实施例4

取新采收的桦褐孔菌，在阴湿处堆置5天，置冻干机内，冻结温度控制在-30℃；达到控制温度后，立即开启真空泵抽真空至干燥室压力 50Pa 以下，然后启动加热开关，促进升华，升华的温度应控制在40℃以下；解析阶段的温度应控制在45℃以下，至干。

实施例5

取新采收的桦褐孔菌，在室外堆置3天，烘干。

实施例6

取新采收的桦褐孔菌，在阴凉处堆置5天，晒干。

Claims (2)

1. 一种桦褐孔菌的干燥方法，其特征在于：取新采收的桦褐孔菌，堆置2-5天，干燥。

2.根据权利要求1的一种桦褐孔菌的干燥方法，其特征在于：干燥是堆置后晾干或晒干或烘干或冻干。