CN103977041A - 一种树舌的干燥方法 - Google Patents

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王丽
刘金磊
石红艳
张为胜
李诗标
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Abstract

本发明涉及一种树舌的干燥方法，取新采收的树舌，除去杂质，蒸透，冻干。按本发明的干燥方法制备的树舌，主要有效成分多糖含量高,抗癌活性强。

Description

一种树舌的干燥方法
发明领域
本发明涉及药品制法，特别涉及一种树舌的干燥方法，属医药技术领域。
背景技术
树舌〔Ganodermaapplanatum(Pers.)Pat.〕为担子菌多孔菌纲目树舌科树舌属真菌。其别名为赤色老母菌、扁树舌、扁木树舌、扁菌、扁芝、平盖树舌、白斑腐菌及皂角菌,民间俗称为“老牛肝”。树舌性平,气微,味微苦,具清热、解毒、止痛、抗癌之功效。
现有技术的采收与加工方法为，全年采收，阴干或在40～50℃烘干。
发明内容
本发明的目的是提供一种树舌干燥的新方法，该方法干燥的树舌，主要有效成分多糖含量高抗，癌活性强。
本发明是这样实现的：
一种树舌的干燥方法，其特征在于：取新采收的树舌，除去杂质，蒸透，冻干。
本发明的一种树舌的干燥方法，其特征在于：冻干是冷冻至-20℃以下，抽真空至干燥室压力30Pa以下，加热升华，升华的温度控制在40℃以下，解析阶段的温度应控制在45℃以下，至干。
至此完成了本发明，按本发明的干燥方法制备的树舌，主要有效成分多糖含量高抗，癌活性强。
下面通过试验例进一步说明本发明的有益之处，试验例旨在进一步说明本发明的有益之处，而非对本发明的限制。
将同一批新采收的树舌，除去杂质，按以下方法进行加工。
1）晾干：阴凉通风处，摊开晾干；
2）烘干：60℃以下烘干；
3）蒸后冻干：取新采收的树舌，除去杂质，蒸15分钟,经察看已蒸透,取出，置冷冻机内，冷冻至-20℃，抽真空至干燥室压力30Pa，加热升华，升华的温度控制在40℃，解析阶段的温度应控制在45℃，至干。
一、不同方法干燥的树舌多糖含量比较
对照品溶液的制备：取葡萄糖对照品适量，精密称定，加水制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
标准曲线的制备：分别精密量取对照品溶液0.2ml、0.4m1、0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml，置10ml具塞试管中，加水至2.0ml，精密加入硫酸蒽酮溶液(精密称取蒽酮0.1g，加80％的硫酸溶液100ml使溶解，摇匀)6ml，摇匀，置水浴中加热15分钟，取出，放人冰浴中冷却15分钟，以相应的试剂为空白，照《中国药典》紫外-可见分光光度法，在625nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
供试品溶液的制备：取各样品粉末约2g，精密称定，置索氏提取器中，加水90ml，电加热器加热回流提取至提取液无色，提取液转移至100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀.精密量取10ml，加入乙醇150ml，摇匀，4℃放置12小时，取出，离心，倾去上清液，沉淀加水溶解，转移至50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
测定法：精密量取供试品溶液2ml，置10ml具塞试管中，照标准曲线的制备项下的方法，自“精密加入硫酸蒽酮溶液6ml”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含葡萄糖的重量(mg)，计算，即得。
按干燥品计算，含树舌多糖以无水葡萄糖(C6H12O6)计，结果见表1。
表1 不同方法干燥树舌多糖含量（%）
干燥方法 晾干 烘干 蒸后冻干
含量（%） 4.26 4.25 7.08
由表1看出，树舌“蒸后冻干”，多糖含量明显高于“晾干”和“烘干”。
二、不同方法干燥的树舌抗人肺源腺癌细胞SPCA-1、人肝癌细胞系HepG2和人慢性髓系白血病细胞K562试验。
1、制备树舌提取物  分别取不同方法干燥的树舌粉碎，各加水煎煮两次，第一次加水8倍量，煎煮2小时，第二次加水8倍量，煎煮1小时，合并药液，药液滤过，取滤液，浓缩至相对密度为1.10（60℃）时，加入乙醇使含醇量达到75％，沉淀，静置36小时，吸取上清液，回收乙醇，浓缩，干燥，粉碎，得不同方法干燥的树舌提取物。
2、肿瘤细胞株　人肺源腺癌细胞SPCA-1、人肝癌细胞系HepG2和人慢性髓系白血病细胞K562，用RPMI-1649培养液, 37℃,5%CO2，相对湿度100%培养，贴壁细胞0.25%胰蛋白酶消化传代。
3、方法  MTT比色法测定提取物对肿瘤细胞生长的抑制作用。取对数生长期细胞，用新鲜的RPMI-1640培养液配制成细胞悬液，悬浮细胞1×105个/ml贴壁细胞0.8×105个/ml。悬浮细胞分别加入不同浓度实验药物后接种于96孔培养板中；贴壁细胞先接种于96孔培养板中，每孔90μl24h后分别加入不同浓度实验药物。终体积为每孔100μl且每组设3个平行孔，共设4组:受试药组T(培养液+细胞悬液+不同浓度受试药)、阴性对照组N(培养液+细胞悬液)、药物颜色对照组TC(培养液+不同浓度受试药)、空白对照组B(培养液+生理盐水)。受试药浓度依次为10μg/ml、30μg/ml、50μg/ml。置37℃,5%CO2培养箱中培养72h后，向每孔加入MTT溶液10μl震荡混匀后，继续培养4h，加入SDS90μl终止培养,37℃过夜，然后室温下在微量振荡器上震荡10min，酶标仪测定570nm波长处的吸光度(OD值),实验重复3次。
按以下公式计算生长抑制率：
生长抑制率(%)=(N组OD均值-B组OD均值)—(T组OD均值-TC组OD均值)/N组OD均值-B组OD均值×100%。
4、不同提取物对人肺源腺癌细胞SPCA-1、人肝癌细胞系HepG2和人慢性髓系白血病细胞K562的抑制率结果见表2、表3、表4。
表2  对SPCA-1的抑制率结果
抑制率（%） 10（μg/ml） 30（μg/ml） 50（μg/ml）
晾干  47.43 58.36 67.11
烘干  47.42 58.35 67.12
蒸后冻干 57.41 76.82 86.45
表3  对HepG2的抑制率结果
抑制率（%） 10（μg/ml） 30（μg/ml） 50（μg/ml）
晾干  46.72 56.54 65.57
烘干  46.34 56.53 65.54
蒸后冻干 60.47 76.53 79.68
表4  对K562的抑制率结果
抑制率（%） 10（μg/ml） 30（μg/ml） 50（μg/ml）
晾干  53.28 66.51 71.62
烘干  53.26 66.50 71.56
蒸后冻干 65.02 77.31 85.52
结果表明，不同方法干燥的树舌对SPCA-1、HepG2、K562细胞的增殖均有抑制作用，其中，蒸后冻干疗效最好。
具体实施方式
一种树舌的干燥方法，其特征在于：取新采收的树舌，除去杂质，蒸透，冷冻至-20℃以下，抽真空至干燥室压力30Pa以下，加热升华，升华的温度控制在40℃以下，解析阶段的温度应控制在45℃以下，至干。
实施例1
取新采收的树舌，除去杂质，蒸10分钟, 经查看已蒸透，取出，置冷冻机内，冷冻至-25℃，抽真空至干燥室压力35Pa，加热升华，升华的温度控制在35℃以下，解析阶段的温度应控制在40℃，至干。
实施例2
取新采收的树舌，除去杂质，蒸15分钟, 经查看已蒸透，取出，置冷冻机内，冷冻至-32℃，抽真空至干燥室压力40Pa，加热升华，升华的温度控制在30℃以下，解析阶段的温度应控制在40℃，至干。
实施例3
取新采收的树舌，除去杂质，蒸20分钟, 经查看已蒸透，取出，置冷冻机内，冷冻至-28℃，抽真空至干燥室压力50Pa，加热升华，升华的温度控制在40℃以下，解析阶段的温度应控制在45℃，至干。
实施例4
取新采收的树舌，除去杂质，蒸20分钟, 经查看已蒸透，取出，置冷冻机内，置冻干机内，冻结温度控制在-30℃；达到控制温度后，立即开启真空泵抽真空至干燥室压力 50Pa 以下，然后启动加热开关，促进升华，升华的温度应控制在40℃以下；解析阶段的温度应控制在45℃以下，至干。

Claims (2)

1. 一种树舌的干燥方法，其特征在于：取新采收的树舌，除去杂质，蒸透，冻干。
2.根据权利要求1的一种树舌的干燥方法，其特征在于：冻干是冷冻至-20℃以下，抽真空至干燥室压力30Pa以下，加热升华，升华的温度控制在40℃以下，解析阶段的温度应控制在45℃以下，至干。
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