CN103181992A - 一种龙葵的炮制方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种龙葵的炮制方法，其特征是采用冻干的炮制方法。本发明提供了冻干龙葵在制备药物中的应用，特别是在制备慢性气管炎，白带过多，前列腺炎，痢疾，乳腺炎，皮肤湿疹，红斑性狼疮，肿瘤等疾病的药物中的应用。冻干龙葵疗效好于晒干龙葵。

Description

一种龙葵的炮制方法

技术领域

本发明涉及药品，特别涉及一种龙葵的炮制方法，属医药技术领域。

背景技术

龙葵Solanum nigrumL.系茄科(Solanaceace)茄属一年生草本植物。别名野葡萄、老鸦眼睛草、苦菜、苦葵。龙葵全草入药，味苦、性寒、微甘，有小毒，归肺、胃、膀胱经，有清热解毒、活血散瘀、利水消肿、止咳祛痰的功效。用于疮痈肿毒，跌打扭伤，慢性气管炎，急性肾炎，皮肤湿疹，小便不利，慢性气管炎，白带过多，前列腺炎，痢疾等疾病。龙葵及其复方制剂在临床上被广泛用于治疗各类肿瘤，被中医学列为十大抗肿瘤中草药之一，其抗肿瘤作用引起了研究人员的重视，并成为了国内外学者的研究热点。

通过研究我们发现冻干龙葵用于治疗疮痈肿毒、慢性气管炎，急性肾炎，皮肤湿疹，小便不利，慢性气管炎，白带过多，前列腺炎，痢疾，红斑性狼疮，肿瘤等疾病，疗效明显好于晒干龙葵。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种龙葵的炮制方法，其特征是采用冻干的炮制方法。本发明的另一个目的是提供冻干龙葵在制备药物中的应用，特别是在制备老年性慢性气管炎，白带过多，前列腺炎，痢疾，红斑性狼疮，肿瘤等疾病的药物中的应用。

一种龙葵的炮制方法，包括以下步骤：

1）鲜龙葵原料，去除杂质，切成2-5cm的龙葵段；

2）将龙葵段装盘，装盘重量为3-6㎏/㎡，逐渐降温至-20℃-–40℃进行预冻，冻结速度约为0.5-1.0℃/min，保温4小时。

3）升华干燥抽真空至系统绝对压力为40-80Pa，开始加热升温至30℃-50℃,升华干燥15-24小时；

4)解析干燥保持物料温度在35℃-55℃，使含水量达到2-3%，得冻干龙葵。

本发明所述的一种龙葵的炮制方法，所述的升华干燥时抽真空至系统绝对压力为50Pa，加热升温至35℃-55℃，升华干燥15-20小时。

冻干龙葵在制备药物中的应用，用于制备具有增强免疫、抗衰老、抗病毒、抗氧化活性、抗肿瘤功能，用于治疗慢性气管炎，白带过多，前列腺炎，痢疾，红斑性狼疮，肿瘤等疾病的药物。

本发明上述的冻干龙葵在制备药物中的应用，是直接以冻干龙葵粉碎，制备成粉剂、丸剂。

本发明上述冻干龙葵在制备药物中的应用，是以冻干龙葵为原料，经过提取，用提取物制备成粉剂、颗粒剂、丸剂、片剂、胶囊剂。

本发明上述的冻干龙葵在制备药物中的应用，是以冻干龙葵为原料，配伍其它中药饮片，经过提取，用提取物制备成粉剂、颗粒剂、丸剂、片剂、胶囊剂。

下面通过试验例说明本发明的有益之处。

一、晒干龙葵和冻干龙葵水溶性浸出物和生物碱含量比较

1、制备晒干龙葵和冻干龙葵

制备晒干龙葵：取龙葵除去杂质，喷淋清水，少润，切段，晒干。

制备冻干龙葵：

1）鲜龙葵原料，去除杂质，切成2-5cm的龙葵段；

2）将龙葵段装盘，装盘重量为3㎏/㎡，逐渐降温至–40℃进行预冻，冻结速度约为0.5-1.0℃/min。

3）升华干燥抽真空至系统绝对压力为50Pa，开始加热升温至50℃,升华干燥24小时；

4)解析干燥保持物料温度在45℃，使含水量达到2～3%，得冻干龙葵。

2、晒干龙葵和冻干龙葵水溶性浸出物、生物碱含量测定

1）采用《中国药典》2010年版一部，附录XA方法进行水溶性浸出物含量测定，结果：晒干龙葵水浸出物含量为13.21%，冻干龙葵水溶性浸出物含量为21.54%。

2）用以下方法测定晒干龙葵和冻干龙葵的生物碱含量。

取龙葵晒干药材和冻干龙葵药材样品细粉各约2.0g,精密称定,分别加入无水乙醇50ml,浸泡过夜(12时),超声提取40min,滤过,滤液置50℃恒温水浴上蒸干，残渣加20ml10%醋酸溶液使溶解，用等体积石油醚多次萃取,至石油醚层无色，水层转入蒸发皿中,用浓氨水调PH至9-10,置50℃恒温水浴上蒸干,残渣加20ml1mol盐酸乙醇溶液使溶解,回流水解1h,取出,放冷,用浓氨水调PH至9-10,再用氯仿萃取3次(30ml,20ml,10ml),合并氯仿萃取液,置50℃恒温水浴上蒸干,残渣用氯仿转移至10ml容量瓶中,氯仿定容,取5ml转移至分液漏斗中,加入7ml0.1%的溴甲酚绿乙醇溶液显色,收集氯仿层,多次萃取至氯仿层无色,合并氯仿层,置50℃恒温水浴上蒸干,残渣加氯仿少量多次溶解并定容至10ml，各在414nm处测吸光度值，计算生物碱含量。

结果：晒干龙葵和冻干龙葵的生物碱含量分别为0.6%和1.3%，冻干龙葵生物碱含量是晒干龙葵的2倍。

龙葵中含有多种生物活性，水溶性浸出物具有抗肿瘤、抗炎、抗休克、抗过敏、增强机体的免疫作用，水溶性浸出物常被作为评价药材质量的重要指标。龙葵中的生物碱是抗肿瘤的主要有效成分，也是抗过敏、抗菌、抗炎、护肝的有效成分，其含量越高生物活性越高。以上实验结果可以看出冻干龙葵水溶性浸出物含量明显高于晒干龙葵，冻干龙葵生物碱含量明显高于晒干龙葵，进而可知增强免疫，抗衰老，抗病毒，抗氧化活性，抗肿瘤的药理活性高于晒干龙葵，用于治疗慢性气管炎，白带过多，前列腺炎，痢疾，红斑性狼疮，肿瘤等疾病疗效好于晒干龙葵。

二、晒干龙葵和冻干龙葵对人肝癌细胞株SMMC-7721，HepG2和胃癌细胞株MGC-803 增殖的抑制作用试验。

1、制备晒干龙葵和冻干龙葵提取物  分别取晒干龙葵和冻干龙葵粉碎，各加水煎煮两次，第一次加水8倍量，煎煮2小时，第二次加水8倍量，煎煮1小时，合并药液，药液滤过，取滤液，浓缩至相对密度为1.10（60℃）时，加入乙醇使含醇量达到75％，沉淀，静置36小时，吸取上清液，回收乙醇，浓缩，干燥，粉碎；得晒干龙葵和冻干龙葵提取物。

2、方法 MTT法 SMMC-7721、HepG2和MGC-803三种细胞株用含有10%灭活新生小牛血清，100U/ml 的青霉素和100μg/ml链霉素的DMEM培养基在37℃，5%CO2条件下培养，取对数生长期细胞用于实验。分别取浓度为2×106/ml的SMMC-7721、HepG2和MGC-803细胞株90μl于96孔板中培养，空白对照组加入10μlPBS，给药组分别加入10μl不同剂量的受试药液，药物终浓度(按生药计算)。设阴性对照组，阴性对照组是在不含细胞的培养液中加入不同剂量的药液。设6个平行孔，细胞给药后培养24h，每孔加入5.0mg/mlMTT溶液20μl，振荡混匀后，置于培养箱中继续孵育4h，弃去各孔中的上清液，再加入100μlDMSO中止反应，振荡混匀10min，待其各孔中的紫色结晶完全溶解后，用酶标仪在490nm处测定其吸光值(A490)。按下面公式计算细胞抑制率:

生长抑制率(%)=(N组OD均值-B组OD均值)—(T组OD均值-TC组OD均值)/N组OD均值-B组OD均值×100%。

3、结果见表1、表2、表3。

表1  对SMMC-7721的抑制率结果

抑制率（%）	10（μg/ml）	30（μg/ml）	50（μg/ml）
				冻干龙葵	66.35	83.27	95.18
晒干龙葵	55.23	63.84	79.67

表2  对HepG2的抑制率结果

抑制率（%）	10（μg/ml）	30（μg/ml）	50（μg/ml）
				冻干龙葵	63.42	72.41	79.56
晒干龙葵	51.20	66.91	70.87

表3  对MGC-803的抑制率结果

抑制率（%）	10（μg/ml）	30（μg/ml）	50（μg/ml）
				冻干龙葵	73.25	89.10	90.70
晒干龙葵	54.39	71.52	83.75

结果表明，晒干龙葵和冻干龙葵对人肝癌细胞株SMMC-7721，HepG2和胃癌细胞株MGC-803增殖均有抑制作，冻干龙葵疗效好于晒干龙葵。

具体实施方式

一种龙葵的炮制方法，包括以下步骤：

1）鲜龙葵原料，去除杂质，切成2-5cm的龙葵段；

2）将龙葵段装盘，装盘重量为3-6㎏/㎡，逐渐降温至-20℃-–40℃进行预冻，冻结速度约为0.5-1.0℃/min，保温4小时。

3）升华干燥抽真空至系统绝对压力为40-80Pa，开始加热升温至30℃-50℃,升华干燥15-24小时；

4)解析干燥保持物料温度在35℃-50℃，使含水量达到2-3%，得冻干龙葵。

一种龙葵的炮制方法，升华干燥时抽真空至系统绝对压力为50Pa，加热升温至35℃-55℃，升华干燥15-20小时。

用冻干龙葵制备具有增强免疫、抗衰老、抗病毒、抗氧化活性、抗肿瘤功能，用于治疗老年性慢性气管炎，白带过多，前列腺炎，痢疾，红斑性狼疮，肿瘤等疾病的药物。

以冻干龙葵粉碎，制备成粉剂、丸剂。

冻以冻干龙葵为原料，经过提取，用提取物制备成粉剂、颗粒剂、丸剂、片剂、胶囊剂。

以冻干龙葵为原料，配伍其它中药饮片，经过提取，用提取物制备成粉剂、颗粒剂、丸剂、片剂、胶囊剂。

实施例1

取新鲜龙葵，洗净晾干，切成长度3cm的段，装盘，装量为3Kg/㎡；冻结温度控制在-20℃；达到控制温度后(保温4小时），开启真空泵抽真空至干燥室压力50Pa以下，然后启动加热开关，促进升华；升华的温度应控制在30℃；解析阶段的温度应控制在35℃。制得冻干龙葵。

取冻干龙葵，粉碎，过80目筛，用于治疗乳腺炎，每次服3g，1天服3次，3天治愈。

实施例2

取新鲜龙葵，洗净去杂，切成长度5cm的段；将洗净去杂的龙葵段装盘，装量为6Kg/㎡；冻结温度控制在-40℃；达到控制温度后，立即开启真空泵抽真空至干燥室压力50Pa以下，然后启动加热开关，促进升华；升华的温度应控制在50℃以下；解析阶段的温度应控制在50℃以下。制得冻干龙葵。

取冻干龙葵，粉碎，过80目筛，水泛为丸，用于皮肤湿疹，每服10g，水送下，每天3次，5天治愈。

实施例3

采用ZG-100㎡型真空冷冻干燥机。选取新鲜龙葵，洗净去杂，切成长度3cm的龙葵段，装盘，装盘重量为7kg/㎡左右,逐渐降温2小时后至-28℃进行预冻；然后抽真空至系统绝对压力40Pa，开始加热升温至35℃，升华干燥15个小时；再保持物料温度35℃，当物料温度与加热温度接近时干燥结束，得冻干龙葵。

取冻干龙葵粉碎至粗粉，加入4倍量水，在40℃搅拌提取4小时，共2次，合并提取液，过滤，离心，离心液装入冻干。得冻干龙葵提取物。

取党参1kg，鸡血藤0.6kg，用水提取2次，第一次加8倍量水，提取2小时，第二次加6倍量水提取1小时，合并提取液，过滤，浓缩，干燥，得党参鸡血藤提取物，加入冻干龙葵提取物300g，混匀，制粒，干燥，整粒，加入滑石粉适量，压片，每片0.4g。用于治疗宫颈癌，每天12片，分3次服。

实施例4

取实施例3制得的冻干龙葵提取物，加入适量糊精，制粒，减压真空干燥，整粒，分装为10g/袋（相当于冻干龙葵50g），得颗粒剂，用于治疗慢性气管炎，每天2袋，分2次服，1个月为一疗程。

实施例5

取实施例3制得的冻干龙葵提取物，加入适量甲基纤维素，制粒，减压真空干燥，整粒，装入胶囊，得冻干龙葵胶囊，前列腺炎患者口服，每天15粒（相当于冻干龙葵15g45g），分3次服，7天治愈。

实施例6

取实施例1制得的冻干龙葵粉，加入适量微分硅胶，制丸，减压真空干燥，分装为10g/袋（相当于冻干龙葵50g），红斑狼疮患者口服，每天2袋，分2次服，3个月为1疗程，30例患者临床缓解率90.6%。

实施例7 

采用ZG-100㎡型真空冷冻干燥机，选取新鲜山药，洗净去杂，切成长度3cm的段，装盘，逐渐降温2小时后至-30℃进行预冻；然后抽真空至系统绝对压力50Pa开始加热升温至40℃，升华干燥18个小时；再保持物料温度在45℃，使含水量达到2%以下后出料。得冻干龙葵。

取党参600g、苍术600g、茯苓600g、冻干龙葵1000g、用水提取2次，第一次加8倍量水，提取2小时，第二次加6倍量水提取1小时，合并提取液，过滤，浓缩，干燥，粉碎，加入糊精，制粒，干燥，整粒，得颗粒剂1500g，用于治疗妇女白带症，每天30g，分2次服。

实施例8 

取冻干龙葵，加水煎煮两次，第一次加水8倍量，煎煮2小时，第二次加水8倍量，煎煮1小时，合并药液，药液滤过，取滤液，浓缩至相对密度为1.10（60℃）时，加入乙醇使含醇量达到75％，沉淀，静置36小时，吸取上清液，回收乙醇，浓缩，干燥，粉碎；得龙葵提取物。

取龙葵提取物，加入羧甲基淀粉钠，淀粉糊制粒，干燥，整理，加入滑石粉适量,混匀，压片。每片相当于龙葵2g。用于治疗肝癌患者，每次3片，每日3次。1个月为1疗程，总有效率为70.88%。

Claims (6)

1.一种龙葵的炮制方法，其特征在于包括以下步骤：

1）鲜龙葵原料，去除杂质，切成2-5cm的龙葵段；

2）将龙葵段装盘，装盘重量为3-6㎏/㎡，逐渐降温至-20℃-–40℃进行预冻，冻结速度约为0.5-1.0℃/min，保温4小时;

3）升华干燥抽真空至系统绝对压力为40-80Pa，开始加热升温至30℃-50℃,升华干燥15-24小时；

4)解析干燥保持物料温度在35℃-50℃，使含水量达到2-3%，得冻干龙葵。

2.根据权利要求1的一种龙葵的炮制方法，其特征在于升华干燥时抽真空至系统绝对压力为50Pa，加热升温至35℃-55℃，升华干燥15-20小时。

3.冻干龙葵在制备药物中的应用，其特征在于制备具有增强免疫、抗衰老、抗病毒、抗氧化活性、抗肿瘤功能，用于治疗老年性慢性气管炎，白带过多，前列腺炎，痢疾，乳腺炎，皮肤湿疹，红斑性狼疮，肿瘤等疾病的药物。

4. 根据权利要求3的冻干龙葵在制备药物中的应用，其特征在于直接以冻干龙葵粉碎，制备成粉剂、丸剂。

5.根据权利要求3的冻干龙葵在制备药物中的应用，其特征在于以冻干龙葵为原料，经过提取，用提取物制备成粉剂、颗粒剂、丸剂、片剂、胶囊剂。

6.根据权利要求3的冻干龙葵在制备药物中的应用，其特征在于以冻干龙葵为原料，配伍其它中药饮片，经过提取，用提取物制备成粉剂、颗粒剂、丸剂、片剂、胶囊剂。