CN105596407A - 治疗胰腺癌的药物组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种治疗胰腺癌的药物组合物及其制备方法，本发明药物组合物是以腊肠果、离根香、槐角苷、白矢车菊素、穿心莲黄酮苷C为原料药，配比而成，可按常规制剂工艺制成各种剂型，治疗胰腺癌疗效显著。

Description

治疗胰腺癌的药物组合物
技术领域
本发明属于中药技术领域，尤其涉及一种治疗胰腺癌的药物组合物及其制备方法。
背景技术
胰腺癌是消化系统常见恶性肿瘤之一，近20年来发病率逐渐增高趋势明显。胰腺癌早期诊断困难，恶性程度高、发展较快、预后较差。早期手术切除是目前治疗胰腺癌最有效的措施，放化疗、激素治疗、免疫治疗、分子靶向治疗及中医中药治疗等亦受到广泛关注。中医药治疗在延长患者生存期、缓解症状、改善生存质量方面起到一定的作用。
胰腺癌在中医学上属于“症瘾”、“腹痛”等症的范畴。在中医古典文献中很早就有类似胰腺癌的病因病机论述，认为气机不畅、脾湿困郁是本病首要病因。《张氏医通》认为“此得之湿热伤脾，胃虽受谷，脾不运输，故成痞胀。”当代中医大家对此做了深入的研究，其中王庆才认为胰腺癌属于中医“伏梁”范畴，其病因病机多由于七情郁结，或饮食失调，久而肝脾受损，脏腑失和，脾运受阻，湿热内蕴，癖毒内结所致。近几年对治疗胰腺癌的中药研究已有很大进展，无论从天然药物的开发还是到提取中药有效成分以及复方研究。中药以其毒副作用小、疗效确切占据独特优势。近半个世纪以来，在许多中医学者和研究人员的不断探索和努力下，确定了中药治疗在肿瘤治疗中的地位。中药与传统的手术、放疗、化疗有良好的优势互补作用，与放、化疗联合应用时可增强疗效、减轻毒副反应、提高生活质量和机体免疫力、延长生存期，在手术后应用中药治疗能对肿瘤的复发转移起到防治作用，因此中药治疗肿瘤有很大的研究和应用价值。我们相信，在不远的将来，中药及其有效成分的研究必将对加强胰腺癌的预防和治疗、提高胰腺癌患者的生存质量做出更大的贡献。
腊肠果：本品为豆科植物腊肠树CassiafistulaL.的干燥成熟果实。冬季果熟时采收，晒干。【性味】甘、微辛，凉。【功能与主治】清肝热，解毒，消肿，攻下。用于肝炎，肝中毒，便秘，四肢肿胀。【性状】本品呈圆柱形。完整者长30～50cm，直径1.5～2.5cm，顶端尖，基部有短果柄。表面暗褐色至黑褐色，平滑而带光泽，具不甚明显的环形浅槽，腹背两缝线明显。质坚,可折断，断面具黄棕色横隔。每两隔间各具种子1粒。种子周围的果肉红白色或黄绿色至黄褐色。种子由短线状珠柄附着于腹缝线上,常脱落。种子呈卵圆形而稍扁,黄棕色至暗红棕色，光滑，两侧具略隆起的皱纹，上下有浅纵沟。质坚硬，遇热水产生透明易剥离的胶质薄膜，胚乳发达角质样。果肉气特异，味甘、苦、涩、酸。收载于卫生部颁藏药标准（第一册），标准编号：WS3-BC-0109-95。
离根香：本品为草海桐科离根香属植物离根香CalogynepilosaR.Br.[C.chinensisBenth.]的全草。【性味】味辛；性温温。【功能主治】祛风散寒；行气活血；解蛇毒。主风寒痹痛；胃痛；腹痛；跌打损伤；毒蛇咬伤。【性状】全草皱缩成团，疏被柔毛。茎数条丛生，黄绿色或稍带紫色。叶互生，多皱缩，完整叶展平后呈条状披针表或倒卵形，长1-3.5cm，宽0.3-1cm，先端渐尖，基部渐狭而下延成短柄，边缘具疏浅齿，主脉明显。花单生叶腋淡黄色。蒴果2瓣裂，气香，味微辛。收载于中药大辞典。
白矢车菊素（Leucocyanidin）：CAS号69256-15-1，分子式C15H14O7，分子量306.27。【药理作用】降糖，抑制眼醛糖还原酶。【成分来源】蓼科植物膜萼模根，戟叶酸膜；豆科阿拉伯相思树花，盾柱豆；番荔枝科；桃金娘科等植物。
穿心莲黄酮苷C(AndrographidineC):CAS号113963-39-6，分子式C23H24O10，分子量460.44。【成分来源】穿心莲Andrographispaniculata[Syn.paniculata]。
槐角苷（Sophoricoside）：CAS号152-95-4，分子式C21H20O10，分子量432.38。【药理作用】保肝，抗炎。【成分来源】豆科植物槐树果实(槐角)尼泊尔黄花木茎；漆树科植物宽叶尚乳香叶。
3个原料药化学结构：
穿心莲黄酮苷C(AndrographidineC)
白矢车菊素（Leucocyanidin）槐角苷（Sophoricoside）。
发明内容
本发明的目的是克服背景技术的不足，提供一种有效治疗胰腺癌的药物组合物及其制备方法。
本发明是采用如下技术方案实现的：
制成该治疗胰腺癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：
腊肠果4330-4360重量份离根香3220-3260重量份槐角苷360-390重量份白矢车菊素250-280重量份穿心莲黄酮苷C170-190重量份。
优选的用于治疗胰腺癌的药物组合物，是由如下重量份的原料药组成：
腊肠果4350重量份离根香3240重量份槐角苷380重量份白矢车菊素265重量份穿心莲黄酮苷C180重量份。
一种治疗胰腺癌的药物组合物，其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
一种治疗胰腺癌的药物组合物，其特征在于药物组合物与化学药或中药组成的治疗胰腺癌药物。
一种治疗胰腺癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备：
原料药的组成和重量份为：腊肠果4330-4360重量份离根香3220-3260重量份槐角苷360-390重量份白矢车菊素250-280重量份穿心莲黄酮苷C170-190重量份；
制备方法：
（1）按原料药配比取腊肠果、离根香、槐角苷、白矢车菊素、穿心莲黄酮苷C，混匀，用重量百分比浓度13%乙醇作为溶剂，36℃温浸提取，提取次数为16次，每次提取时间为25小时，每次溶剂用量为原料药总重量的17倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.11，滤过，药液通过LD605大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度37%乙醇溶液洗脱LD605大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度37%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度51%乙醇作为溶剂，加热回流提取7次，每次提取时间为1.1小时，每次溶剂用量为药渣A重量的29倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.14，滤过，药液通过DA201大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度78%乙醇溶液洗脱DA201大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度78%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
优选的一种治疗胰腺癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备：
原料药的组成和重量份为：腊肠果4350重量份离根香3240重量份槐角苷380重量份白矢车菊素265重量份穿心莲黄酮苷C180重量份；
制备方法：
（1）按原料药配比取腊肠果、离根香、槐角苷、白矢车菊素、穿心莲黄酮苷C，混匀，用重量百分比浓度13%乙醇作为溶剂，36℃温浸提取，提取次数为16次，每次提取时间为25小时，每次溶剂用量为原料药总重量的17倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.11，滤过，药液通过LD605大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度37%乙醇溶液洗脱LD605大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度37%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度51%乙醇作为溶剂，加热回流提取7次，每次提取时间为1.1小时，每次溶剂用量为药渣A重量的29倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.14，滤过，药液通过DA201大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度78%乙醇溶液洗脱DA201大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度78%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
一种治疗胰腺癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
一种治疗胰腺癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物与化学药或中药组成治疗胰腺癌药物。
药物组合物治疗胰腺癌疗效显著。
具体实施方式
实施例1：治疗胰腺癌的药物组合物及其制备方法
治疗胰腺癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：腊肠果4350g离根香3240g槐角苷380g白矢车菊素265g穿心莲黄酮苷C180g；
制备方法：
（1）按原料药配比取腊肠果、离根香、槐角苷、白矢车菊素、穿心莲黄酮苷C，混匀，用重量百分比浓度13%乙醇作为溶剂，36℃温浸提取，提取次数为16次，每次提取时间为25小时，每次溶剂用量为原料药总重量的17倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.11，滤过，药液通过LD605大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度37%乙醇溶液洗脱LD605大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度37%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度51%乙醇作为溶剂，加热回流提取7次，每次提取时间为1.1小时，每次溶剂用量为药渣A重量的29倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.14，滤过，药液通过DA201大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度78%乙醇溶液洗脱DA201大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度78%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
实施例2：治疗胰腺癌的药物组合物及其制备方法
治疗胰腺癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：腊肠果4330g离根香3260g槐角苷360g白矢车菊素280g穿心莲黄酮苷C170g；
制备方法：
（1）按原料药配比取腊肠果、离根香、槐角苷、白矢车菊素、穿心莲黄酮苷C，混匀，用重量百分比浓度13%乙醇作为溶剂，36℃温浸提取，提取次数为16次，每次提取时间为25小时，每次溶剂用量为原料药总重量的17倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.11，滤过，药液通过LD605大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度37%乙醇溶液洗脱LD605大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度37%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度51%乙醇作为溶剂，加热回流提取7次，每次提取时间为1.1小时，每次溶剂用量为药渣A重量的29倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.14，滤过，药液通过DA201大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度78%乙醇溶液洗脱DA201大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度78%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
实施例3：治疗胰腺癌的药物组合物及其制备方法
治疗胰腺癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：腊肠果4360g离根香3220g槐角苷390g白矢车菊素250g穿心莲黄酮苷C190g；
制备方法：
（1）按原料药配比取腊肠果、离根香、槐角苷、白矢车菊素、穿心莲黄酮苷C，混匀，用重量百分比浓度13%乙醇作为溶剂，36℃温浸提取，提取次数为16次，每次提取时间为25小时，每次溶剂用量为原料药总重量的17倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.11，滤过，药液通过LD605大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度37%乙醇溶液洗脱LD605大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度37%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度51%乙醇作为溶剂，加热回流提取7次，每次提取时间为1.1小时，每次溶剂用量为药渣A重量的29倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.14，滤过，药液通过DA201大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度78%乙醇溶液洗脱DA201大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度78%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
实施例4：片剂的制备
取实施例1药物组合物243g，加入淀粉255g，混匀，制粒，干燥，加微晶纤维素54g，硬脂酸镁3g，混匀，压制成1400片，即得药物组合物片剂。
实施例5：胶囊的制备
取实施例2药物组合物250g，加入淀粉260g，混匀，制粒，干燥，整粒，加入适量硬脂酸镁，混匀，装胶囊1300粒，即得药物组合物胶囊。
实施例6：滴丸的制备
称取聚乙二醇6000326g水浴(80℃)加热煮熔，加入实施例3药物组合物13g，充分搅拌均匀，以液体石蜡为冷却剂，置玻璃管（4*80cm）中，冷却温度为1℃，滴口内外径为7.0/2.0(mm/mm)，滴口距液面为2.2cm，滴速以每分62滴为最佳条件，用棉布吸干滴丸表面的冷凝剂，即得药物组合物滴丸。
实施例7：治疗胰腺癌的药物组合物
治疗胰腺癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：
槐角苷300重量份白矢车菊素120重量份穿心莲黄酮苷C85重量份。
实施例8：治疗胰腺癌的药物组合物
治疗胰腺癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：
槐角苷280重量份白矢车菊素270重量份穿心莲黄酮苷C200重量份。
实施例9：治疗胰腺癌的药物组合物
治疗胰腺癌的药物组合物的原料药的组成和重量份为：
槐角苷140重量份白矢车菊素200重量份穿心莲黄酮苷C75重量份。
实验例1：治疗胰腺癌的试验研究
1材料与方法
1.1实验材料
RPMI1640细胞培养基购自Gibco公司；药物组合物为实施例1药物组合物，批号20110329；胎牛血清购自Gibco公司；四甲基偶氮唑蓝(MTT)购自Sigma公司；AnnexinV－FITC/PI双染法细胞凋亡检测试剂盒购自南京凯基生物技术有限公司。
1.2细胞系及细胞培养
人转移胰腺癌细胞株AsPC－1来源于人胰腺癌裸鼠异种移植产生的癌性腹水，可以表达CEA、人胰腺相关抗原、人胰腺特异性抗原和黏蛋白，呈上皮样贴壁生长，由我司传代培养，接种于含10%胎牛血清、100U/ml青链霉素的RPMI1640培养基，于37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养，每2－3天传代一次。
1.3MTT法检测药物组合物对AsPC－1细胞增殖的影响
收集对数生长期AsPC－1细胞，调整细胞悬液浓度为2×104/ml，接种于96孔板，每孔200μl。同时空白组加入200μl培养液作为本底，对照调零。培养12h后，空白组和对照组加入新鲜培养液200μl，实验组分别加入药物组合物浓度为0.5、1.0、2.0、4.0、8.0mg/L的培养液200μl，每个剂量5个复孔。于24、48、72h，每孔加入MTT20μl，继续培养4h，小心吸弃培养基，每孔加入二甲基亚砜(DMSO)150μl，避光振荡5－10min，酶标仪测492nm处的吸光度(A)值，计算细胞生长抑制率，细胞生长抑制率(R)=(A对照组－A实验组)/(A对照组－A空白组)×100%。
1.4流式细胞术检测药物组合物对AsPC－1细胞凋亡的影响
采用AnnexinV－FITC/PI双染法检测细胞凋亡率，分别收集对照组和经1.0、2.0、4.0、8.0mg/L药物组合物作用24h的AsPC－1细胞，调整细胞浓度，按凋亡检测试剂盒说明处理细胞，简要步骤如下:PBS洗细胞二次；收集5×105个细胞，加入500μlBingdingBuffer重悬细胞；加入5μlAnnexinV－FITC和5μlPI室温避光染色15min，流式细胞仪检测，分析凋亡率。
1.5统计学处理
采用SPSS17.0统计软件进行单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1药物组合物抑制AsPC－1细胞的增殖
不同浓度药物组合物作用相同时间，随着药物浓度的增加对AsPC－1细胞生长的抑制率呈增加趋势。0.5mg/L药物组合物作用24小时，对细胞生长无显著影响，而2.0mg/L药物组合物作用24小时后，对细胞生长的抑制率为(19.22±3.56)%，差异有统计学意义。相同浓度的药物组合物作用不同时间，随时间的延长抑制率亦增加。8.0mg/L药物组合物作用24小时，对细胞的抑制率为(35.42±3.66)%，作用72小时，对细胞的抑制率为(65.67±1.89)%，差异有统计学意义。由此可见，药物组合物以时间及剂量依赖的方式抑制胰腺癌AsPC－1细胞的生长。
2.2药物组合物诱导AsPC－1细胞的凋亡
不同浓度药物组合物作用AsPC－1细胞24小时，其凋亡率随着药物浓度的增加呈增加趋势。1.0mg/L药物组合物作用于AsPC－1细胞后，细胞凋亡率改变并不明显；但8.0mg/L药物组合物作用24小时后，细胞凋亡率由对照组的(8.12±0.68)%升高至(43.26±0.78)%，差异有统计学意义(P＜0.001)。由此可见，药物组合物可诱导胰腺癌AsPC－1细胞凋亡，呈剂量依赖性。

Claims (8)

1.一种治疗胰腺癌的药物组合物，其特征在于制成该药物组合物的原料药的组成和重量份为：
腊肠果4330-4360重量份离根香3220-3260重量份槐角苷360-390重量份白矢车菊素250-280重量份穿心莲黄酮苷C170-190重量份。
2.根据权利要求1所述一种治疗胰腺癌的药物组合物，其特征在于制成该药物组合物的原料药的组成和重量份为：
腊肠果4350重量份离根香3240重量份槐角苷380重量份白矢车菊素265重量份穿心莲黄酮苷C180重量份。
3.根据权利要求1所述一种治疗胰腺癌的药物组合物，其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
4.根据权利要求1所述一种治疗胰腺癌的药物组合物，其特征在于药物组合物与化学药或中药组成的治疗胰腺癌药物。
5.一种治疗胰腺癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备：
原料药的组成和重量份为：腊肠果4330-4360重量份离根香3220-3260重量份槐角苷360-390重量份白矢车菊素250-280重量份穿心莲黄酮苷C170-190重量份；
制备方法：
（1）按原料药配比取腊肠果、离根香、槐角苷、白矢车菊素、穿心莲黄酮苷C，混匀，用重量百分比浓度13%乙醇作为溶剂，36℃温浸提取，提取次数为16次，每次提取时间为25小时，每次溶剂用量为原料药总重量的17倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.11，滤过，药液通过LD605大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度37%乙醇溶液洗脱LD605大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度37%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度51%乙醇作为溶剂，加热回流提取7次，每次提取时间为1.1小时，每次溶剂用量为药渣A重量的29倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.14，滤过，药液通过DA201大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度78%乙醇溶液洗脱DA201大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度78%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
6.根据权利要求5所述一种治疗胰腺癌的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备：
原料药的组成和重量份为：腊肠果4350重量份离根香3240重量份槐角苷380重量份白矢车菊素265重量份穿心莲黄酮苷C180重量份；
制备方法：
（1）按原料药配比取腊肠果、离根香、槐角苷、白矢车菊素、穿心莲黄酮苷C，混匀，用重量百分比浓度13%乙醇作为溶剂，36℃温浸提取，提取次数为16次，每次提取时间为25小时，每次溶剂用量为原料药总重量的17倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.11，滤过，药液通过LD605大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度37%乙醇溶液洗脱LD605大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度37%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度51%乙醇作为溶剂，加热回流提取7次，每次提取时间为1.1小时，每次溶剂用量为药渣A重量的29倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.14，滤过，药液通过DA201大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度78%乙醇溶液洗脱DA201大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度78%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
7.根据权利要求5所述一种治疗胰腺癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
8.根据权利要求5所述一种治疗胰腺癌的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物与化学药或中药组成治疗胰腺癌药物。
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