CN103936922B

CN103936922B - 具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物及其制备方法

Info

Publication number: CN103936922B
Application number: CN201410146929.5A
Authority: CN
Inventors: 袁建超; 慕燕琼; 赵杰; 许卫兵; 陈静静
Original assignee: Northwest Normal University
Current assignee: Northwest Normal University
Priority date: 2014-04-11
Filing date: 2014-04-11
Publication date: 2016-06-29
Anticipated expiration: 2034-04-11
Also published as: CN103936922A

Abstract

本发明提供了一种具有抗肿瘤活性的含有二硫键的6-巯基嘌呤共聚物，是将6-巯基嘌呤通过共价键连接到N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺（HPMA）上而形成的一种生物相容良好的高分子共聚物，属于高分子化学及应用领域。本发明的共聚物将6-巯基嘌呤与HPMA的活性进行叠加，进一步促进了聚合物对肿瘤的抑制作用；共聚物中的二硫键使得药物到达肿瘤部位之后再断裂，不仅减少了药物毒性，还能在肿瘤细胞内智能释放抗癌药物；高分子载体HPMA使共聚物体现出良好的生物相溶性，进一步降低了抗癌药物的毒性，从而减少了对正常组织的伤害，因此在制备抗肿瘤药物中具有很好的应用前景。

Description

具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物及其制备方法

技术领域

本发明属于高分子化学领域，涉及一种具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物——N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺-6-巯基嘌呤；本发明同时还涉及该6-巯基嘌呤共聚物共聚物的制备方法。

背景技术

癌症已经成为人类健康的主要威胁之一，且呈明显上升趋势。现今治疗癌症的主要方法包括放疗、化疗、手术疗法和基因疗法。其中放疗和化疗是极其重要的非手术疗法，但是放疗和化疗在杀死肿瘤细胞的同时也对机体正常细胞产生严重损伤。

6-巯基嘌呤为嘌呤类抗代谢药，可阻断次黄嘌呤转变为腺嘌呤核苷酸及鸟嘌呤核苷酸而抑制核酸的合成，对多种肿瘤均有抑制作用。主要作用于细胞周期的S期。临床用于急性白血病，尤其对急性淋巴细胞型的白血病效果较好，对急慢性粒细胞白血病、绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤也有效。6-巯基嘌呤的结构式如下：

由于6-巯基嘌呤的水溶性差，选用助溶剂（无水乙醇，DMSO等）会引起多种毒副反应。另外，给药时经水稀释后，需要一个0.22μm微孔膜滤过，使给药不便。

N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺（HPMA）是一种高分子药物载体，其结构式如下：

由于HPMA具有良好的生物相容性，作为药物载体不仅能够降低药物的毒副作用，减少抗药性，提高药物体内的稳定性，还能增加药物在肿瘤部位的累积，使药效得到更好的发挥等特点，被作为肿瘤靶向药物载体已应用于临床。

二硫键，又称S－S键，是2个—SH基被氧化而形成的—S—S—形式的硫原子间的键。在人体的正常体温、pH和氧化等环境下非常稳定，在一定量的谷胱甘肽（GSH）还原酶或二硫苏糖醇（DTT）等还原剂存在下被还原生成巯基。细胞内外恰好存在氧化还原电位，细胞内的谷胱甘肽浓度（0.5～10毫摩尔每升）是细胞外谷胱甘肽浓度（2～20微摩尔每升）的200倍以上，细胞外的谷胱甘肽浓度不足以还原二硫键。另外，肿瘤组织细胞比正常组织细胞缺氧，更具有还原性环境。含有二硫键的药物和载体通过细胞内吞作用进入靶细胞后被GSH还原，即二硫键断裂生成巯基，从而有效快速地释放药物，并扩散到细胞核等杀死癌细胞。因此，以水溶性好的N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺为药物载体，通过与含二硫键的6-巯基嘌呤共聚得到具有在肿瘤部位智能释放的抗肿瘤活性的高分子共聚物，可望为抗癌领域提供了更多的选择。

发明内容

本发明的目的是利用6-巯基嘌呤和HPMA的特点，提供一种具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物。

本发明的另一目的是提供一种上述具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物的制备方法。

（一）具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物

本发明具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物，是将6-巯基嘌呤（6-MP）通过聚合的方式连接到N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺（HPMA）上而形成的一种生物相容良好的高分子共聚物——N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺-6-巯基嘌呤，其结构如下：

式中，m=5～15mol%，n=85～95mol%；数均分子量Mn=2.4～3.2×10⁴，Mw/Mn=1.16～1.21。

本发明的共聚物将6-巯基嘌呤与N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺的抗肿瘤活性进行叠加，进一步促进了对肿瘤的抑制作用；共聚物中二硫键的存在，使得药物到达肿瘤部位之后再断裂，不仅减少了药物毒性，还能在肿瘤细胞内智能释放抗癌药物；共聚物中种的高分子载体HPMA的存在，使共聚物体现出良好的生物相溶性，进一步降低了抗癌药物的毒性，从而减少了对正常组织的伤害，因此在制备抗肿瘤药物中具有很好的应用前景。

本发明具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物的制备方法，包括以下工艺步骤：

（1）甲基丙烯基半胱氨酸化合物的制备：将半胱氨酸溶于碳酸钾水溶液中，加入氧化剂，冷却到0～5℃；在氮气保护下，加入甲基丙烯酰氯，搅拌反应4～5h；反应完全后，调pH至中性，用乙酸乙酯萃取未反应的甲基丙烯酰氯，蒸除溶剂后用乙酸乙酯和乙醇重结晶，得到甲基丙烯基半胱氨酸化合物；其结构式为：

所述半胱氨酸与甲基丙烯酰氯的摩尔比为1:1～1:1.2；碳酸钾水溶液的质量百分数为4～5%；所述氧化剂为亚硝酸钠，且亚硝酸钠与半胱氨酸的摩尔比为0.07:1～0.08；所述乙酸乙酯与乙醇的体积比为1:40～1:50。

（2）中间体高分子化合物的制备：将N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺与甲基丙烯基半胱氨酸化合物用DMSO和丙酮溶解，加入引发剂偶氮二异丁腈，氮气保护下于50～60℃反应20～24h，用丙酮或丙酮和乙醚的混合液沉淀，过滤；用无水甲醇溶解沉淀物，最后用分子量为3000的超滤浓缩离心管离心，除去小分子即得中间体高分子化合物；其结构式为：

所述甲基丙烯基半胱氨酸化合物与N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺的摩尔比为1:4～1:20；引发剂偶氮二异丁腈的用量为甲基丙烯基半胱氨酸化合物与N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺总质量的5%～10%；所述DMSO和丙酮的体积比为1:1～1:0.5。丙酮和乙醚的混合液中，丙酮和乙醚的体积比为7:3～7:1。

（3）6-巯基嘌呤二硫辅助体的制备：将6-巯基嘌呤溶解到饱和碳酸氢钠溶液中，缓慢滴加碘的DMF溶液，将产生的固体过滤，水洗固体，真空干燥，得到6-巯基嘌呤二硫辅助体，其结构式为：

所述六巯基嘌呤与碘的摩尔比为1:1.1～1:1.2。

（4）目标化合物的制备：将中间体高分子化合物和6-巯基嘌呤二硫辅助体（6-巯基嘌呤二硫辅助体和中间体高分子化合物的摩尔比为1:1.2～1:1.3）溶解到干燥的DMSO和冰乙酸中（DMSO和冰乙酸的体积比为1:1～1:2），室温下搅拌3.5～4小时，用丙酮沉淀，洗涤得到目标产物。其结构式为：

图1为上述方法制备的具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物的核磁共振氢谱。通过核磁共振氢谱分析可以得出，化学位移在7.6～8.4ppm之间有化合物6-巯基嘌呤芳环上氢的出峰，化学位移在3.70ppm和2.81ppm左右会出现HPMA上的特征峰-CH-（和-OH相连）和-CH₂（和-NH-相连），同时化学位移在5～6ppm之间没有出峰，说明用上述方法制备的共聚产物与设计的共聚物结构一致，表明共聚物合成成功。

二、抗肿瘤活性实验

1、体外抑制肿瘤细胞生长实验

采用四氮唑盐还原法（MTT）对H22细胞株进行试验：取处于生长对数期的肝癌H22细胞，将细胞浓度调为2×10⁴个／ml，在96孔培养板中加入90μl/孔，边缘孔用无菌PBS填充。在5%CO₂，37℃孵育，培养箱中放置待贴壁后再加药。对于本发明高分子共聚物和6-巯基嘌呤，均分别设定浓度为0.2、1、5、25、125μg/ml5个梯度。实验组与对照组均设4个复孔，加药后细胞在温度37℃二氧化碳培养箱内继续分别培养24，48，72h后，取出先离心，后弃去96孔板内的上清培养液，小心用PBS冲洗2～3遍后，每孔加人20μlMTT（四氮唑，5mg/ml，即0.5%MTT）溶液，置于37℃二氧化碳培养箱内继续培养4h。终止培养，小心吸去孔内培养液。每孔加入150μl的DMSO，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶标仪570nm测定各孔的吸光OD值。其中共聚物的IC₅₀=16.5μg/ml,6-巯基嘌呤的IC₅₀=26.4μg/ml。细胞生长抑制率按以下公式计算：

抑制率=[(1－实验组平均OD值)/对照组平均OD值]×100％

测试结果见表1。

2、体内抑制肿瘤细胞生长实验

采用静脉注射和瘤体直接注射对昆明小鼠接种的H22实体瘤进行试验：对接种好的昆明小鼠进行随机分组，每组6只。荷瘤小鼠用可他命（100mg/kg）和甲苯噻嗪（7mg/kg）的混合液进行麻醉，在尾部静脉注射0.1mL100μCi（3.7MBq）的生理盐水，6-巯基嘌呤，高分子共聚物，每日给药1次，连续18天，共计18次。给药期间每2日用游标卡尺测量移植瘤最长径(L)和最短径(W)，计算移植瘤体积V=(L×W²)/2，瘤重抑制率(%)IR=(对照组肿瘤平均体积﹣给药组肿瘤平均体积)／对照组肿瘤体积×100。试验结果见表2。

上述动物实验和细胞试验结果表明：本发明制备的6-巯基嘌呤类高分子聚合物对肿瘤细胞的抑制率大于6-巯基嘌呤对肿瘤细胞的抑制率。分析其原因，其一，本发明的共聚物将6-巯基嘌呤与HPMA的活性进行叠加，进一步促进了聚合物对肿瘤的抑制作用；其二，共聚物中的二硫键使得药物到达肿瘤部位之后再断裂，不仅减少了药物毒性，还能在肿瘤细胞内智能释放抗癌药物；其三，高分子载体HPMA使共聚物体现出良好的生物相溶性，进一步降低了抗癌药物的毒性，减少了抗药性，提高了药物体内的稳定性，同时增加了药物在肿瘤部位的累积，使药效得到了更好的发挥。从而减少了对正常组织的伤害，因此在制备抗肿瘤药物中具有很好的应用前景。

三、体外模拟的释放实验

1、取目标聚合物4×50mg，分别置于100mL容量瓶中，用pH=6.8的磷酸盐缓冲（0.1mol/L)溶液稀释到刻度，摇匀。取其中之一作为对照组；加入10mMDTT为实验组a；加入10mMDTT+NaCl为实验组b。分别模拟37℃下搅拌30h，分时间段在紫外分光光度计320nm处测定吸收光度。根据对照组所测数据和朗伯比尔定律计算其浓度和累积释放率。体外释放率数据见表3、图2。表3和图2的结果显示，本发明6-巯基嘌呤共聚物在pH=6.8时具有良好的释放效果。

2、取目标聚合物4×50mg，分别置于100mL容量瓶中，用pH=5.4的磷酸盐缓冲（0.1mol/L)溶液稀释到刻度，摇匀。取其中之一作为对照组；加入10mMDTT为实验组c；加入10mMDTT+NaCl为实验组d。分别模拟37℃下搅拌30h，分时间段在紫外分光光度计320nm处测定吸收光度。根据对照组所测数据和朗伯比尔定律计算其浓度和累积释放率。体外释放率数据见表4、图3。表2和图3的结果显示，本发明6-巯基嘌呤共聚物在pH=5.4时具有良好的释放效果，但其释放效果明显低于pH=6。

综上所述，本发明制备的6-巯基嘌呤共聚物具有良好的抗肿瘤活性和良好的释放效果，体现出了良好的生物水溶性，毒性低，对正常组织的伤害少，是一种具有应用前景的抗肿瘤活性物质。

附图说明

图1为本发明制备的具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物的核磁共振氢谱。

图2为本发明6-巯基嘌呤共聚物体外模拟在pH=6.8还原释放叠加曲线。

图3为本发明6-巯基嘌呤共聚物体外模拟在pH=5.4还原释放叠加曲线。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明高分子共聚物的合成及结构表征作进一步的说明。

实施例1

（1）甲基丙烯基半胱氨酸化合物的制备：称取0.48g(4mmol)的半胱氨酸和0.0196g(0.284mmol)的NaNO₃溶解在装有3mL的K₂CO₃水溶液（5%v/v）的Shleck中，冷却到0℃，在氮气保护下，缓慢滴入0.464ml(4.8mmol)的甲基丙烯酰氯，在室温下磁力搅拌反应4h。待反应结束后用乙酸乙酯萃取未反应的甲基丙烯酰氯，用旋转蒸发仪蒸干溶剂，然后用乙酸乙酯和乙醇重结晶（乙酸乙酯:乙醇=1:40v/v），得到白色固体0.5432g，产率56.6%。

¹HNMR(400MHz,D₂O):δ6.01(s,1H,CHH=C(CH₃)CO-),5.63(s,1H,CHH=C(CH₃)CO-),3.23(m,1H,-NHCH(COOH)CH₂SH),2.94(t,2H,-NHCH(COOH)CH₂SH)。

（2）中间体高分子化合物的制备：称取0.2720g(95%，1.90mmol)HPMA加入到Shleck瓶中，用0.5mL的DMSO加热溶解，再加入0.5mL的丙酮；称取0.0189g(5%，0.10mmol)甲基丙烯基半胱氨酸化合物加入到Shleck瓶中，搅拌直至溶解，待冷却至室温时加入0.0149g(5%，wt)偶氮二异丁腈(AIBN)，抽真空充氮气循环3～5次，密封后保持温度大约在55℃左右，反应24小时。用丙酮沉淀，过滤后用1mL的无水甲醇溶解沉淀，用分子量为3000的超滤浓缩离心管进行离心，除去小分子得到中间体高分子化合物90mg，产率约31%。

M_n=3.2×10⁴，M_w/M_n=1.21.¹HNMR(400MHz,D₂O,ppm):δ3.68(CH₃CH(OH)CH₂NH-ofHPMA),3.08-2.72(CH₃CH(OH)CH₂NH-ofHPMA),2.66(-NH-CH(COOH)CH₂SH),2.43(-NH-CH(COOH)CH₂SH),1.25-1.57(-CH₂-ofpolymerbackbone),0.66-1.23(-CH₃)。

（3）6-MP二硫辅助体的制备：将42.5mg(0.25mmol)6-MP加热溶解到15mL饱和碳酸氢钠溶液中，冷却到室温；将69mg(0.27mmol)I₂溶解到0.2mL的DMF中，然后缓慢滴加到上述碳酸氢钠溶液，将产生的固体过滤，用2×10mL水洗固体，真空干燥得到6-MP二硫辅助体31mg，产率77%。¹HNMR(400MHz,D₂O),7.91(s,1H,-CH-of6-MP),7.71(s,1H,-CH-of6-MP)。

（4）目标化合物的制备：将0.25mmol（0.076g）的6-MP二硫化合物溶解到0.5mL干燥过的DMF和0.01mL冰乙酸中，搅拌混合后加入含有0.30mol的中间体高分子化合物，室温下搅拌4h，反应完之后用丙酮沉淀，并用丙酮洗涤，真空干燥得到目标产物。

¹HNMR(400MHz,D₂O)：δ7.98(-CH-of6-MP),7.78(-CH-of6-MP),δ3.67(CH₃CH(OH)CH₂NH-ofHPMA),3.07-2.71(CH₃CH(OH)CH₂NH-ofHPMA),2.65(-NH-CH(COOH)CH₂S-),2.42(-NH-CH(COOH)CH₂S-),1.26-1.58(-CH₂-ofpolymerbackbone),0.68-1.25(-CH₃)。

实施例2

（1）甲基丙烯基半胱氨酸化合物的制备：同实施例1；

（2）中间体高分子化合物的制备：：称取0.1589g(92%，1.11mmol)HPMA加入到Shleck瓶中，用0.5mL的DMSO加热溶解，再加入0.5mL的丙酮；称取0.0189g(8%，0.10mol)中间体化合物加入到Shleck瓶中，搅拌直至溶解，待冷却至室温时加入0.0145g(8%,wt)偶氮二异丁腈(AIBN)，抽真空充氮气循环3～5次，密封后保持温度大约在55℃左右，反应24小时。用丙酮和乙醚的混合液(体积比为7:3)沉淀，过滤后用1mL的无水甲醇溶解沉淀，用分子量为3000的超滤浓缩离心管进行离心，除去小分子，得到中间体高分子化合物56mg，产率约31%。M_n=2.4×10⁴，M_w/M_n=1.16.¹HNMR(400MHz,D₂O,ppm):δ3.68(CH₃CH(OH)CH₂NH-ofHPMA),3.06-2.70(CH₃CH(OH)CH₂NH-ofHPMA),2.64(-NH-CH(COOH)CH₂SH),2.41(-NH-CH(COOH)CH₂SH),1.24-1.58(-CH₂-ofpolymerbackbone),0.65-1.22(-CH₃)；

（3）6-MP二硫辅助体的制备：同实施例1；

（4）目标化合物的制备：同实施例1。

实施例3

（1）甲基丙烯基半胱氨酸化合物的制备：同实施例1；

（2）中间体高分子化合物的制备：称取0.2488g(90%，1.74mmol)HPMA加入到Shleck瓶中，用0.2mL的DMSO加热溶解，再加入0.2mL的丙酮；称取0.0378g(10%，0.20mol)中间体化合物加入到Shleck瓶中，搅拌直至溶解，待冷却至室温后加入0.0238g(8%,wt)偶氮二异丁腈(AIBN)，抽真空充氮气循环3～5次，密封后保持温度大约在55℃左右，反应24小时。用丙酮和乙醚的混合液(体积比为7:3)沉淀，过滤后用1mL的无水甲醇溶解沉淀，用分子量为3000的超滤浓缩离心管进行离心，除去小分子，得到中间体高分子化合物85mg，产率约30%。M_n=2.4×10⁴，M_w/M_n=1.16.¹HNMR(400MHz,D₂O,ppm):δ3.68(CH₃CH(OH)CH₂NH-ofHPMA),3.09-2.72(CH₃CH(OH)CH₂NH-ofHPMA),2.69(-NH-CH(COOH)CH₂SH),2.45(-NH-CH(COOH)CH₂SH),1.26-1.58(-CH₂-ofpolymerbackbone),0.70-1.25(-CH₃；

（3）6-MP二硫辅助体的制备：同实施例1；

（4）目标化合物的制备：同实施例1。

实施例4

（1）甲基丙烯基半胱氨酸化合物的制备：同实施例1；

（2）中间体高分子化合物的制备：：称取0.2032g(88%，1.42mmol)HPMA加入到Shleck瓶中，用0.5mL的DMSO加热溶解，再加入0.5mL的丙酮；称取0.0378g(12%，0.2mol)中间体化合物加入到Shleck瓶中，搅拌直至溶解，待冷却至室温时加入0.0252g(10%,wt)偶氮二异丁腈(AIBN)，抽真空充氮气循环3～5次，密封后保持温度大约在55℃左右，反应24小时。用丙酮和乙醚的混合液(体积比为7:3)沉淀，过滤后用1ml的无水甲醇溶解沉淀，用分子量为3000的超滤浓缩离心管进行离心，除去小分子，得到中间体高分子化合物79mg，产率约33%。M_n=2.4×10⁴，M_w/M_n=1.16.¹HNMR(400MHz,D₂O,ppm):δ3.68(CH₃CH(OH)CH₂NH-ofHPMA),3.03-2.71(CH₃CH(OH)CH₂NH-ofHPMA),2.62(-NH-CH(COOH)CH₂SH),2.41(-NH-CH(COOH)CH₂SH),1.21-1.54(-CH₂-ofpolymerbackbone),0.64-1.20(-CH₃)；

（3）6-MP二硫辅助体的制备：同实施例1；

（4）目标化合物的制备：同实时例1。

实施例5

（1）甲基丙烯基半胱氨酸化合物的制备：同实施例1；

（2）中间体高分子化合物的制备：称取0.3179g(85%，2.2mmol)HPMA加入到Shleck瓶中，用0.2mL的DMSO加热溶解，再加入0.2mL的丙酮；称取0.0756g(15%，0.40mol)中间体化合物加入到Shleck瓶中，搅拌直至溶解，待冷却至室温时加入0.0394g(10%,wt)偶氮二异丁腈(AIBN)，抽真空充氮气循环3～5次，密封后保持温度大约在55℃左右，反应24小时。用丙酮和乙醚的混合液(体积比为7:3)沉淀，过滤后用1ml的无水甲醇溶解沉淀，用分子量为3000的超滤浓缩离心管进行离心，除去小分子，得到中间体高分子化合物93mg，产率约22.4%。M_n=2.9×10⁴，M_w/M_n=1.19.¹HNMR(400MHz,D₂O,ppm):δ3.68(CH₃CH(OH)CH₂NH-ofHPMA),3.03-2.70(CH₃CH(OH)CH₂NH-ofHPMA),2.63(-NH-CH(COOH)CH₂SH),2.41(-NH-CH(COOH)CH₂SH),1.20-1.53(-CH₂-ofpolymerbackbone),0.62-1.18(-CH₃)；

（3）6-MP二硫辅助体的制备：同实施例1；

（4）目标化合物的制备：同实时例1。

Claims

1.一种具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物的制备方法，包括以下工艺步骤：

（1）甲基丙烯基半胱氨酸化合物的制备：将半胱氨酸溶于质量百分数4～5%的碳酸钾水溶液中，加入氧化剂，冷却到0～5℃；在氮气保护下，加入甲基丙烯酰氯，搅拌反应4～5h；反应完全后，调pH至中性，用乙酸乙酯萃取未反应的甲基丙烯酰氯，蒸除溶剂后用乙酸乙酯和乙醇重结晶，得到甲基丙烯基半胱氨酸化合物；

（2）中间体高分子化合物的制备：将N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺与甲基丙烯基半胱氨酸化合物用DMSO和丙酮溶解，加入引发剂偶氮二异丁腈，氮气保护下于50～60℃反应20～24h，用丙酮或丙酮和乙醚的混合液沉淀，过滤；用无水甲醇溶解沉淀物，最后用分子量为3000的超滤浓缩离心管离心，除去小分子即得中间体高分子化合物；甲基丙烯基半胱氨酸化合物与N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺的摩尔比为1:4～1:20；

（3）6-巯基嘌呤二硫辅助体的制备：将6-巯基嘌呤溶解到饱和碳酸氢钠溶液中，缓慢滴加碘的DMF溶液，将产生的固体过滤，水洗固体，真空干燥，得到6-巯基嘌呤二硫辅助体；

（4）目标化合物的制备：将中间体高分子化合物和6-巯基嘌呤二硫辅助体溶解到干燥的DMSO和冰乙酸中，室温下搅拌3.5～4小时，用丙酮沉淀，洗涤得到目标产物；所述6-巯基嘌呤二硫辅助体和中间体高分子化合物的摩尔比为1:1.2～1:1.3；

目标产物的结构如下：

式中，m=5～15mol%，n=85～95mol%。

2.如权利要求1所述具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，半胱氨酸与甲基丙烯酰氯的摩尔比为1:1～1:1.2。

3.如权利要求1所述具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，所述氧化剂为亚硝酸钠，且亚硝酸钠与半胱氨酸的摩尔比为0.07:1～0.08:1。

4.如权利要求1所述具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物的制备方法，其特征在于：步骤（2）中，所述引发剂偶氮二异丁腈的用量为甲基丙烯基半胱氨酸化合物与N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺总质量的5%～10%。

5.如权利要求1所述具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物的制备方法，其特征在于：步骤（2）中，所述DMSO和丙酮的体积比为1:1～1:0.5。

6.如权利要求1所述具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物的制备方法，其特征在于：步骤（3）中，六巯基嘌呤与碘的摩尔比为1:1.1～1:1.2。

7.如权利要求1所述具有抗肿瘤活性的6-巯基嘌呤共聚物的制备方法，其特征在于：步骤（4）中，DMSO和冰乙酸的体积比为1:1～1:2。