CN103861125A - 一种新型青霉素皮试冻干粉剂及制备工艺 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种新型青霉素皮试冻干粉剂及制备工艺，这种皮试冻干粉剂每瓶或每支内主要含有青霉素钠盐1000-10000单位，其制备工艺是通过将原料药青霉素钠盐用注射用水稀释后，再加入特定比例的赋形剂，通过优化的工艺制成冻干粉剂，该药剂质量稳定可控，适合工业化大生产。临床使用时，只需注入一定量的生理盐水，混匀，即可配制成浓度为500单位的青霉素皮试液，与统配制皮试剂的方法相比，该制剂的溶解度高、操作简单、明显缩短配制时间，且配制后药液剂量准确度高，误差范围小，符合药典要求，能有效降低临床上青霉素类药物假阳性，具有明显的优势，可替代传统方法。本发明公开的工艺所制的皮试剂适合各类青霉素类药物过敏检测。

Description

一种新型青霉素皮试冻干粉剂及制备工艺

技术领域

本发明涉及一种青霉素皮试试剂，特别涉及一种新型青霉素皮试冻干粉剂及制备工艺。

背景技术

青霉素类（Penicilins）是β-内酰胺类抗生素的总称，分为天然青霉素和人工合成青霉素两类，前者从青霉菌（Penicillins notat单位m）的培养液获得次生代谢产物，主要含有F、G、X、V等，其中青霉素G产量高，性质稳定、作用效果好且广，在很低浓度下就能抑制或杀死各种病原菌，达到治疗疾病的目的，是目前临床上使用范围最广的抗生素，但其过敏反应发生率居各类药物之首，青霉素过敏的根源在于药物品质不纯，其中所含青霉烯酸、青霉噻唑等是主要的致敏原，青霉素过敏者在正常人群中占 0.7%~10%，青霉素严重过敏引起死亡的发生率为 0.02‰，故中国药典2010版中明确规定，注射或口服青霉素类药物之前，均需进行皮试，皮试药液的浓度为500单位/ml，阴性反应者方能使用该类药物。然而在实际工作中，青霉素皮试经常出现假阳性反应，特别是婴幼儿，其假阳性率高达10.9‰，从而给分析和判断皮试结果带来了一定的难度，更有资料表明青霉素过敏史的患者中80%-90%并非青霉素过敏。

传统皮试液的制备方法易导致假阳性反应，以160万单位青霉素钠盐为例，传统的制备方法如下：1.160万单位青霉素钠盐中加入8ml生理盐水至20万单位；2. 取上述药液0.1ml加入生理盐水至1ml至2万单位；3.取上述稀释液0.1ml加入生理盐水1ml至2000单位；4.取上述稀释液0.25ml加入生理盐水至1ml至500单位的水剂，平行注入前臂掌侧面下 1/3 处腕横纹上三横指（1 岁以下婴儿二横指）正中与腕横纹皮纹处。由此可见，传统方法存在以下缺陷：1.由于青霉素类药物的分子结构决定了青霉素类水剂不稳定，易降解、失效，一般新配置的皮试液要冷藏保存，使用期一般为一周以内，配制时间过长易分解为青霉噻唑和青霉烯酸等过敏物质，并且放置时间过长，多次抽取，空气气泡来回倒入也会造成污染，尤其是在夏季皮试后，易引起假阳性反应；2. 通过多次抽取混合逐步配制成每ml含500单位皮试液, 此配制法由于青霉素单位过大，造成溶解不充分，直接导致皮试液浓度不准确, 影响皮试结果的判定，对于婴幼儿来说，会明显增加其假阳性率，延误治疗的时间，3. 使用80万单位/支的青霉素类药物制备成500单位皮试剂，造成药物的极大浪费。前两种缺陷是造成假阳性反应发生的重要原因。

另外，国内市场上流通着不同品种、不同厂家、不同工艺流程、不同批号的青霉素类药物，导致所含的致敏物的种类和含量不同。为了用药的安全性，儿童停用青霉素超过3天，成人超过7天，增加或更换品种批号时，就需要重新做皮试，以防不测，这样不仅造成医疗人员的工作量，更严重的是增加了病人的痛苦。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种新型青霉素皮试冻干粉剂，临床配制步骤简单、药物分散度快、剂量准确，对传统方法进行了极大地改善，降低青霉素类药物皮试假阳性率。

本发明还提供一种可工业化大生产的上述青霉素皮试冻干粉剂的制备工艺，该工艺具有制备简单、质量稳定性高、安全有效的优点。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是： 

一种新型青霉素皮试冻干粉剂，主要包括原料固体青霉素或其盐、氯化钠和赋形剂，原料、氯化钠和赋形剂三者之间的质量比为1:1-30:8-90。进一步的，比较优选的质量比为1:2.3-6:8.9-37.5。所述的新型青霉素皮试冻干粉剂适合各类青霉素类药物过敏检测。使用时在贮存容器内加入一定量的生理盐水，充分溶解后，使用1ml注射器抽取一定量溶解后的药液进行皮试即可。由于皮试剂中青霉素或其盐含量过少，冻干后在贮存容器易附着瓶壁，且造成分散度不均匀。该发明通过多次小试试验，摸索出最优化的冻干工艺，并且为保证临床上剂量准确、溶解快速、稳定可控，在制备过程中加入中国药典规定的特定比例的赋形剂（甘露醇、葡聚糖、乳糖等），将无菌分装后的青霉素盐水溶液干燥成固体，密封包装成成品。

作为优选，所述的赋形剂为甘露醇、乳糖或葡聚糖之一或其中两种以上的混合物。进一步的，所述的赋形剂由重量比1:3:1~1:7:6的甘露醇：葡聚糖：乳糖组成。

作为优选，该新型青霉素皮试冻干粉剂还包括以瓶或支计的贮存容器，每瓶或每支贮存容器中含有1000~10000单位青霉素或其盐。

一种所述新型青霉素皮试冻干粉剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：将原料药大于等于160万单位的青霉素或其盐用注射用水稀释后，再加入赋形剂混合成药液，药液经微孔滤膜过滤除菌分装后冷冻干燥密封包装成粉针剂；

所述的冻干（冷冻干燥）工艺包括以下步骤：

（1）预冷：将分装后的样品放置于冷冻干燥机制品室板层，以每小时25℃的速度将冷凝器温度预降至-45℃以下，当样品温度降至-45℃时，保持2~4h；当温度回升至-15℃~-30℃，保持1~2h；再将温度降至-55℃~-35℃，保持1~2h；

（2）分步升华：样品完全冻结后，开始抽真空，当真空度达到10~30Pa以下，开始升高温度至-30℃~-20℃，保持1~2h，当制品室板层温度升至-10℃~-25℃，保持4~10h；再当温度升至0℃时，保持1~2h；

（3）解析干燥：保持真空状态，温度升至15℃~35℃，保持2~4h，冻干结束，密封出品。

本发明专门为青霉素类药物皮试提供一种新型青霉素皮试专用小剂量粉针剂，该制剂稳定性好、配制方法简便、剂量准确，便于医疗人员操作，节约医疗人力和物力， 减轻病人的痛苦，保证用药的安全性。本发明所述的青霉素指的是青霉素类抗生素，主要包括：青霉素钠、青霉素钾、苯唑青霉素钠、哌拉青霉素钠、磺苄西林钠、氨苄西林钠、阿莫西林、哌拉西林、青霉素维钾片等青霉素类药物或其盐。

本发明将160万单位（单位）青霉素钠盐用一定量的注射用水充分稀释后，逐步分次加入符合药典规定的特定比例的赋形剂，无菌过滤分装，通过优化的冻干工艺，干燥密封包装成粉针剂，每瓶或每支含有1000~10000单位青霉素钠盐。传统方法和新型工艺比较见表1。表1说明本发明的工艺简化了皮试剂的配制步骤，缩短配制时间，减少误差，降低医护人员工作强度，节省医患双方时间。

表1 传统方法和新型工艺比较

为说明本皮试剂如何配制的，现举实例：

用规格为160万单位的青霉素钠（可由其他青霉素代替），加入一定量的氯化钠和赋形剂，用注射用水充分稀释，稀释好的溶液分装成每瓶含1000~10000单位青霉素盐， 经0.22μm 微孔滤膜精滤除菌，得青霉素钠盐澄清溶液，药液滤至无菌储液瓶内，检查药液澄清度和可见异物合格后，在5ml玻璃注射剂瓶中每支分装1ml上述该药液，半加塞置冷冻干燥机制品室板层，待冷冻干燥：（1）预冷：以每小时20~25℃的速度将将冷凝器温度预降至-45℃以下，当样品温度降至-45℃时，保持2~4h；当温度回升至-15℃~-30℃，保持1~2h；再将温度降至-55℃~-35℃，保持1~2h；（2）分步升华：样品完全冻结后，开始抽真空，当真空度达到10~30Pa以下，开始升高温度至-30℃~-20℃，保持1~2h，当搁板温度升至-10℃~-25℃，保持4~10h；再当温度升至0℃时，保持1~2h；（3）解析干燥：保持真空状态，温度升至15℃~35℃，保持2~4h。冻干结束，逐瓶目检，合格品包装（冻干工艺见表2），批号120512、120513、120514青霉素皮试剂稳定性检测结果见表3。临床使用时，医护人员只需通过注射器一次注入一定量的生理盐水，充分溶解后，用1ml注射器抽取该药液一定量（0.1ml）即可。

表2 不同冻干工艺参数比较

表3 青霉素皮试剂稳定性试验结果

本发明一种新型青霉素皮试冻干粉剂及制备工艺具有以下优点：

1.    经过多次试验，该皮试剂在生产过程中加入特定比例的赋形剂，包括甘露醇、葡聚糖和乳糖的组合物，三者的重量比例为1:4.5:2，制备得到的冻干粉针剂稳定性强、分散均匀度高，快速溶解，经多次实验验证，稳定性高低与是否添加赋形剂及其比例有关；

2.    通过多次试验摸索冷冻干燥工艺，最终获得最优化条件，得到外观和水溶性良好的保持、外观更加完整均一、含水量低的产品，并且工艺上能缩短冻干时间、节约成本、更加环保；

3.    该皮试剂制备工艺简单，利于操作，适合工业化大生产；

4.    该皮试剂为粉针剂，稳定性高，常温下可保存二年；

5.    该皮试剂在配制过程步骤少，流程简单，便于医护人员操作，提高工作效率，降低患者痛苦；

6.    该皮试剂对比传统方法就将稀释次数降至1次，减少污染且皮试溶液的准确度高，符合药典的要求，降低青霉素类药物假阳性率；

7.    该皮试剂适用于各类青霉素类药物，可供多个患者使用，节约医疗成本。 

具体实施方式

下面通过具体实施例，对本发明的技术方案作进一步的具体说明。应当理解，本发明的实施并不局限于下面的实施例，对本发明所做的任何形式上的变通和/或改变都将落入本发明保护范围。

在本发明中，若非特指，所有的份、百分比均为重量单位，所采用的设备和原料等均可从市场购得或是本领域常用的。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。

实施例1：

本实例描述的是生产每只含1000单位青霉素钠盐青霉素皮试剂。

原料：青霉素钠盐  160万单位，

辅料：氯化钠     28.2 g

      甘露醇、 葡聚糖和乳糖的组合物（三者的重量比例为1:4.5:2）   85 g  

      注射用水    3200 ml。

青霉素钠与氯化钠和赋形剂混合，用注射用水充分稀释，稀释好的溶液分装成每瓶含1000单位青霉素盐，经0.22μm 微孔滤膜精滤除菌，得青霉素钠盐澄清溶液，药液滤至无菌储液瓶内，检查药液澄清度和可见异物合格后（下同），在5ml玻璃注射剂瓶中每支无菌分装1ml上述该药液，将分装后的样品放置于冷冻干燥机制品室板层，以每小时20℃的速度将将冷凝器温度预降至-45℃以下，当样品温度降至-45℃时，保持2h；当温度回升至- 20℃，保持1h；再将温度降至-45℃，保持2h；样品完全冻结后，开始抽真空，当真空度达到20Pa以下，开始升高温度至-20℃，保持1h，当搁板温度升至-10℃，保持7h；再当温度升至0℃时，保持1h；保持真空状态，温度升至35℃，保持3h（总冻干时间为17h）。冻干结束，逐瓶目检，合格品包装。临床使用时，医护人员只需通过注射器只需加入2ml 生理盐水至该皮试剂中，混匀后取0.1ml进行皮试。

实施例2：

本实例描述的是生产每只含2500 单位青霉素钠盐青霉素皮试剂。

原料：青霉素钠盐  160万单位，

辅料：氯化钠      5.8g

      甘露醇、 葡聚糖和乳糖的组合物（三者的重量比例为1:4.5:2）    36 g 

      注射用水    640 ml。

以上材料充分混匀后，在5ml玻璃注射剂瓶中每支分装1ml上述该药液，将分装后的样品放置于冷冻干燥机制品室板层，以每小时20℃的速度将将冷凝器温度预降至-45℃以下，当样品温度降至-45℃时，保持3h；当温度回升至-15℃，保持2h；再将温度降至-35℃，保持1h；样品完全冻结后，开始抽真空，当真空度达到15Pa以下，开始升高温度至 -20℃，保持 2h，当搁板温度升至-10℃，保持6h；再当温度升至0℃时，保持2h；保持真空状态，温度升至35℃，保持2h（总冻干时间为18h）。冻干结束，逐瓶目检，合格品包装。临床上使用时，只需加入5ml 生理盐水至该皮试剂中，混匀后取0.1ml进行皮试。

实施例3：

本实例描述的是生产每只含5000 单位青霉素钠盐青霉素皮试剂。

原料：青霉素钠盐  160万单位，

辅料：氯化钠      2.9 g 

      甘露醇、 葡聚糖和乳糖的组合物（三者的重量比例为1:4.5:2）  17 g  

      注射用水    320 ml。

以上材料充分混匀后，在5ml玻璃注射剂瓶中每支分装1ml上述该药液，将分装后的样品放置于冷冻干燥机制品室板层，以每小时25℃的速度将将冷凝器温度预降至-45℃以下，当样品温度降至-45℃时，保持4h；当温度回升至-25℃，保持1h；再将温度降至-50℃，保持2h；样品完全冻结后，开始抽真空，当真空度达到15Pa以下，开始升高温度至-20℃，保持1h，当搁板温度升至-10℃，保持6h；再当温度升至0℃时，保持2h; 保持真空状态，温度升至30℃，保持2 h（总冻干时间为17h）。冻干结束，逐瓶目检，合格品包装。临床上使用时，只需加入10 ml 生理盐水至该皮试剂中，混匀后取0.1ml进行皮试。

实施例4：

本实例描述的是生产每只含10000单位青霉素钠盐青霉素皮试剂。

原料：青霉素钠盐  160万单位，

辅料：氯化钠      2.2 g 

      甘露醇、 葡聚糖和乳糖的组合物（三者的重量比例为1:4.5:2）  8.5 g 

      注射用水    240 ml。

以上材料充分混匀后，在5ml玻璃注射剂瓶中每支分装1ml上述该药液，以每小时20℃的速度将将冷凝器温度预降至-45℃以下，当样品温度降至-45℃时，保持2h；当温度回升至- 20℃，保持1h；再将温度降至-45℃，保持2h；样品完全冻结后，开始抽真空，当真空度达到20Pa以下，开始升高温度至-20℃，保持1h，当搁板温度升至-10℃，保持7h；再当温度升至0℃时，保持1h；保持真空状态，温度升至35℃，保持3h（总冻干时间为17h）。冻干结束，逐瓶目检，合格品包装。临床上使用时，只需加入20ml 生理盐水至该皮试剂中，混匀后取0.1ml进行皮试。

实施例5：

本实例描述的是生产每只含2500 单位青霉素钠盐青霉素皮试剂。

原料：青霉素钠盐  160万单位，

辅料：氯化钠      5.8g

      注射用水    640 ml。

以上材料充分混匀后，在5ml玻璃注射剂瓶中每支分装1ml上述该药液，将分装后的样品放置于冷冻干燥机制品室板层，以每小时20℃的速度将将冷凝器温度预降至-45℃以下，当样品温度降至-45℃时，保持3h；当温度回升至-15℃，保持2h；再将温度降至-35℃，保持1h；样品完全冻结后，开始抽真空，当真空度达到15Pa以下，开始升高温度至 -20℃，保持 2h，当搁板温度升至-10℃，保持6h；再当温度升至0℃时，保持2h；保持真空状态，温度升至35℃，保持3h（总冻干时间为19h）。冻干结束，逐瓶目检，合格品包装。临床上使用时，只需加入5ml 生理盐水至该皮试剂中，混匀后取0.1ml进行皮试。

实施例6：

本实例描述的是生产每只含2500单位青霉素钠盐青霉素皮试剂。

原料：青霉素钠盐  160万单位，

辅料：氯化钠      1.1 g 

      甘露醇、 葡聚糖和乳糖的组合物（三者的重量比例为1:1:1） 36 g 

      注射用水    120 ml。

以上材料充分混匀后，在5ml玻璃注射剂瓶中每支分装1ml上述该药液，将分装后的样品放置于冷冻干燥机制品室板层，以每小时20℃的速度将将冷凝器温度预降至-45℃以下，当样品温度降至-45℃时，保持3h；当温度回升至-15℃，保持2h；再将温度降至-40℃，保持1h；样品完全冻结后，开始抽真空，当真空度达到10 Pa以下，开始升高温度至-30℃，保持2h，当搁板温度升至-10℃，保持9 h；再当温度升至0℃时，保持1h；保持真空状态，温度升至 35℃，保持2h（总冻干时间为20 h）。冻干结束，逐瓶目检，合格品包装。临床上使用时，只需加入40ml 生理盐水至该皮试剂中，混匀后取0.1ml进行皮试。

实施例7：

本实例描述的是生产每只含2500单位青霉素钠盐青霉素皮试剂。

原料：青霉素钠盐  160万单位，

辅料：氯化钠      1.1 g 

      甘露醇、 葡聚糖和乳糖的组合物（三者的重量比例为2:3:1） 36 g 

      注射用水    120 ml。

以上材料充分混匀后，在5ml玻璃注射剂瓶中每支分装1ml上述该药液，将分装后的样品放置于冷冻干燥机制品室板层，以每小时25℃的速度将将冷凝器温度预降至-45℃以下，当样品温度降至-45℃时，保持4h；当温度回升至-25℃，保持1h；再将温度降至-50℃，保持2h；样品完全冻结后，开始抽真空，当真空度达到15Pa以下，开始升高温度至-20℃，保持1h，当搁板温度升至-10℃，保持6h；再当温度升至0℃时，保持2h；保持真空状态，温度升至30℃，保持2 h（总冻干时间为18h）。冻干结束，逐瓶目检，合格品包装。临床上使用时，只需加入40ml 生理盐水至该皮试剂中，混匀后取0.1ml进行皮试。

依据上述实例1至4，对比传统配制方法，试验结果见表4和表5。

表4 传统方法和新型工艺的参数比较

表5 不同皮试液参数比较

注：该实验稳定性数据通过不同方法制备的青霉素皮试剂，冷藏保存后，微量注射器抽取10μl进样测量青霉素含量，每次取样测量3次，按理论值0.3mg/ml计算标示量。

   上述实验结果显示不同实验方法制备的皮试剂浓度范围误差较大，其中按照实施例中的配制方法得到的最终浓度均较传统方法准确，其中加入赋形剂的实施例中，制剂的最终浓度误差小，溶解的速度快，而且其制剂的稳定性高于其他组，而且不同比例的赋形剂导致制剂最终的稳定性均有差异。

   另外，对做青霉素皮肤过敏试验的1000例患者进行了分组对比观察，其中男性723人，女性277人，年龄范围为2个月~74岁，平均年龄23岁，随机分为实验组和对照组各500例，分别使用传统方法（对照组）和本发明（实验组）涉及的生产方法所得的皮试剂（以规格2500单位/瓶为实验皮试剂），结果见表5。实验组阳性率低于对照组，说明实验组假阳性率低啊，检测灵敏性高。

表5 两种皮试液结果比较

其中﹡：p＜0.05，两组间存在明显差异。

由以上数据可以看出，本发明涉及的一种新型青霉素皮试冻干粉剂及制备工艺有以下优势：1.通过临床医护人员的配制过程，该工艺能有效降低配制时间，操作简便，一次即可配制成功；2.通过检测配制完成后的剂量浓度，可以看出该工艺能显著提高准确度，符合中国药典的规定剂量范围，有效将误差范围控制低于5%；3.通过该工艺配制而成的皮试剂节约医疗物力，节能环保，安全可靠，较传统方法中多人使用一瓶皮试液降低交叉感染的隐患；4.通过临床试验发现，该皮试剂能有效降低青霉素类药物在皮试过程中出现的假阳性率。

本发明一方面对青霉素类药物诊断试剂做出规范化和标准化生产工艺，为医护人员减少繁琐的配制方法，更为广大患者减轻痛苦，特别是婴幼儿；另一方面由于青霉素类药物市场运用范围大，适应症范围广，本发明预测年利润可达2亿元左右，经济效益可观。综上所述，该发明较传统方法具有明显优势，可取代传统方法进入临床应用。

Claims (6)

1.一种新型青霉素皮试冻干粉剂，其特征在于主要包括原料固体青霉素或其盐、氯化钠和赋形剂，原料、氯化钠和赋形剂三者之间的质量比为1:1-30:8-90。

2.根据权利要求1所述的新型青霉素皮试冻干粉剂，其特征在于：所述的赋形剂为甘露醇、乳糖或葡聚糖之一或其中两种以上的混合物。

3.根据权利要求1所述的新型青霉素皮试冻干粉剂，其特征在于：所述的赋形剂由重量比1:3:1~1:7:6的甘露醇：葡聚糖：乳糖组成。

4.根据权利要求1或2或3所述的新型青霉素皮试冻干粉剂，其特征在于：还包括以瓶或支计的贮存容器，每瓶或每支贮存容器中含有1000~10000单位青霉素或其盐。

5.根据权利要求1或2或3所述的新型青霉素皮试冻干粉剂，其特征在于：所述的青霉素指的是青霉素类抗生素，主要包括：青霉素钠、青霉素钾、苯唑青霉素钠、哌拉青霉素钠、磺苄西林钠、氨苄西林钠、阿莫西林、哌拉西林、青霉素维钾片等青霉素类药物或其盐。

6.一种所述新型青霉素皮试冻干粉剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：将原料药大于等于160万单位的青霉素或其盐用注射用水稀释后，再加入赋形剂混合成药液，药液经微孔滤膜过滤除菌分装后冷冻干燥密封包装成粉针剂；

所述的冻干（冷冻干燥）工艺包括以下步骤：

（1）预冷：将分装后的样品放置于冷冻干燥机制品室板层，以每小时25℃的速度将冷凝器温度预降至-45℃以下，当样品温度降至-45℃时，保持2~4h；当温度回升至-15℃~-30℃，保持1~2h；再将温度降至-55℃~-35℃，保持1~2h；

（2）分步升华：样品完全冻结后，开始抽真空，当真空度达到10~30Pa以下，开始升高温度至-30℃~-20℃，保持1~2h，当制品室板层温度升至-10℃~-25℃，保持4~10h；再当温度升至0℃时，保持1~2h；

（3）解析干燥：保持真空状态，温度升至15℃~35℃，保持2~4h，冻干结束，密封出品。