CN103833634A

CN103833634A - 外周阿片样受体拮抗剂和其用途

Info

Publication number: CN103833634A
Application number: CN201410019511.8A
Authority: CN
Inventors: N.巴兹纳; G.J.多纳托; S.R.费边; J.罗克瑙思; S.梅加蒂; C.梅卢奇; C.奥夫斯拉格; N.帕特尔; G.拉德鲍夫; S.M.沙; J.塞利加; H.张; T.朱
Original assignee: Wyeth LLC
Current assignee: Wyeth LLC
Priority date: 2008-09-30
Filing date: 2009-09-30
Publication date: 2014-06-04
Also published as: AU2009298500A1; US20150150866A1; AU2009298500B2; JP2019031536A; NZ619972A; US20170007597A1; HK1199442A1; US20120316191A1; JP2020196733A; US8247425B2; EP4071151A1; JP2017101053A; CA2676881A1; NZ710085A; US20100120813A1; US8420663B2; US9180125B2; PL3608322T3; WO2010039851A9; US9492445B2

Abstract

本发明涉及外周阿片样受体拮抗剂和其用途。本发明提供了式I的化合物∶其中X^-、R¹和R²如本文所定义，和其组合物。该化合物包括并且基于杂质甲基纳曲酮，一种外周阿片样物质拮抗剂。

Description

外周阿片样受体拮抗剂和其用途

本申请是申请号为200980147762.1，申请日为2009年9月30日，发明名称为“外周阿片样受体拮抗剂和其用途”的发明专利申请的分案申请。

相关申请的交叉引用

本申请要求美国临时专利申请序列号61/101,201（2008年9月30日申请）和61/226,581（2009年7月17日申请）的优先权，将其每一个的整体结合到本文中作为参考。

技术领域

本发明涉及甲基纳曲酮(“MNTX”)的杂质的鉴定、纯化和合成及用途。本发明还涉及包含液体组合物的预装填的注射器及其用途，其中组合物包含甲基纳曲酮。

背景技术

阿片样物质普遍地用于患有晚期癌症及其它绝症(terminal disease)的患者，以便减少痛苦。阿片样物质是活化阿片样受体的麻醉性药物，用于止(relieve)痛，阿片样受体位于中枢神经系统中。然而，阿片样物质还与中枢神经系统外的受体反应，导致副作用，包括便秘，恶心，呕吐，尿潴留和严重的发痒。最显著的是影响胃肠道(GI)，在胃肠道中，阿片样物质抑制胃排空和肠管的促进运动活性，由此降低肠内传输的速度，并引起便秘。阿片样物质对于疼痛的效果常常受到限制，这是由于所产生的副作用，这种副作用可以使患者虚弱，并且常常使患者停止使用阿片样镇痛药。

除了镇痛阿片样物质诱导的副作用之外，研究说明，内源性的阿片样化合物和受体也可以影响胃肠(GI)道的活动性，并且可以在动物和人中参与肠内活动性和液体的粘膜输送的正常调节。(Koch, T. R,等人Digestive Diseases and Sciences 1991, 36, 712-728; Schuller, A.G.P.,等人，Society of Neuroscience Abstracts 1998, 24, 524, Reisine, T., and Pasternak, G., Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics Ninth Edition 1996, 521-555和Bagnol, D.,等人，Regul. Pept. 1993, 47, 259-273)。由此，内源性的化合物的异常生理水平和/或受体活性可以导致肠功能障碍。

例如，进行手术的患者，特别是腹部手术，常常患有特殊的肠功能障碍，称为术后(或外科手术后)肠梗阻，其可以由固有的阿片样物质水平的变动所引起。类似地，新近生孩子的女性通常患有分娩后肠梗阻，人们认为其由类似的固有阿片样物质变动(由于生产应激反应)所引起。与术后或产后肠梗阻有关的胃肠功能失调可以典型地持续3至5天，一些严重的病例可以持续一周以上。手术之后给予患者阿片样镇痛药(这在现在几乎是普遍实践的方法)可以加重肠功能障碍，由此延迟正常肠功能的恢复、延长住院时间、增加医疗护理成本。

甲基纳曲酮(“MNTX”)是阿片样物质拮抗剂纳曲酮的衍生物(将胺季铵化)。MNTX通常以盐形式提供，例如，溴化物盐。MNTX的溴化物盐在文献中也称为，例如∶甲基纳曲酮溴化物；N-甲基纳曲酮溴化物；纳曲酮甲溴化物；纳曲酮甲基溴化物；和MRZ 2663BR。MNTX首先由Goldberg等人报道，如美国专利4,176,186所述。人们认为，将甲基添加到纳曲酮的环氮上，可以形成比纳曲酮极性更大和脂溶性更小的带电荷的化合物，防止MNTX穿过人的血脑屏障。因此，MNTX在外周而不是在中枢神经系统中产生其效果，优点是，不会抵消阿片样物质对中枢神经系统的镇痛效果。

通常，药物组合物需要高水平的纯度，以便满足药物质量和纯度的规定标准。例如，在合成和/或储存MNTX期间，可以形成杂质，如果存在足够高数量的杂质，其可以阻碍MNTX的治疗效果，和/或可以具有毒性。因此，具有测定MNTX纯度的能力是合乎需要的。为此，重要的是，鉴定、分离和化学表征杂质和降解物，可以作为标准用于确定MNTX纯度的色谱分析程序中。

发明内容

在某些实施方案中，本发明涉及MNTX的杂质的鉴定、纯化和合成。已经发现，该化合物可以在制备MNTX的过程中以杂质形式产生，或当MNTX的某些溶液在一定条件下保存时以降解物形式产生。相应地，在某些实施方案中，本发明提供了式I的化合物∶

其中X^-、R¹和R²如本文所定义和所描述。在一些实施方案中，提供的化合物是外周μ阿片样受体拮抗剂。下文列出了所提供化合物的其它用途。

本发明还提供了包含液体组合物的预装填的注射器，其中组合物包含甲基纳曲酮。在一些实施方案中，预装填的注射器基本上不含钨或其衍生物。本文详细描述了这种预装填注射器和其用途。

附图说明

图1描述了甲基纳曲酮预装填注射器的稳定性研究的LC/MS结果，在40℃和75%相对湿度下，经过6个月之后。

图2描述了对RRT 0.60峰所得到的全离子色谱(TIC)、UV色谱(λ=280 nm)、质谱和UV谱。

图3描述了pH值对化合物III-1与H₂O₂反应形成化合物II-1的影响。

图4显示了稳定样品的UV色谱和加标（spiked with）按照实施例2所制备化合物II-1的稳定样品的色谱。

图5描述了基于NMR数据对具有该化学结构的化合物II-1的片段分配（assignment）。

图6描述了化合物II-1的COSY谱。

图7描述了化合物II-1的HSQC谱。

图8描述了化合物II-1的¹H NMR谱。

图9描述了化合物II-1的HMBC谱。

图10描述了化合物II-1的ROESY谱。

图11描述了化合物II-1的¹³C NMR谱。

图12描述了晶体化合物II-1的X射线衍射图。

图13描述了化合物II-1晶体的M+H离子的质谱和质量测量。

图14描述了化合物II-1的¹H NMR谱。

图15描述了晶体化合物II-1的X射线衍射图。

具体实施方式

1. 化合物和定义∶

在某些实施方案中，本发明提供了式I的化合物∶

其中∶

R¹和R²各自独立地是C_1-6脂族基团；和

X^-是合适的阴离子。

本文使用的术语“脂族基团”或“脂族基”是指完全饱和或包含一个或多个不饱和单元的直链(即无支链)或支链烃链，或完全饱和或包含一个或多个不饱和单元的单环烃，但其不是芳香烃(本文还指的是“碳环”“环脂族”或“环烷基”)，其与分子的其余部分具有单一连结点。在某些实施方案中，脂族基包含1-4个脂肪族碳原子，在其它实施方案中，脂族基包含1-3个脂肪族碳原子。在一些实施方案中，“环脂族”(或“碳环”)是指完全饱和或包含一个或多个不饱和单元的单环C₃-C₆烃，但其不是芳香烃，其与分子的其余部分具有单一连结点。这种环脂族基团包括环烷基、环烯基和环炔基。合适的脂族基包括但不局限于：直链或支链烷基、烯基、炔基和其混合形式，例如(环烷基)烷基、(环烯基)烷基或(环烷基)烯基。示范性的脂族基包括烯丙基，乙烯基，环丙基甲基，甲基，乙基，异丙基，等等。

本文使用的术语“不饱和”是指一个部分具有一个或多个不饱和单元。

本文使用的术语“低级烷基”是指具有至多4个碳原子的烃链，优选1至3个碳原子，且更优选1至2个碳原子。术语“烷基”包括但不局限于：直链和支链烷基，例如甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基，异丁基，仲丁基或叔丁基。

本文使用的化合物或可药用组合物的“有效量”可以获得所需要的治疗和/或预防效果。在一些实施方案中，“有效量”至少是化合物或包含化合物的组合物的最小数量，该数量应该足以治疗与外周μ阿片样受体的调节有关的障碍或病症的一种或多种症状，例如，与阿片样物质镇痛治疗有关的副作用(例如，胃肠功能失调(例如，障碍性便秘，等等)，恶心，呕吐，(例如，恶心)，等等)。在某些实施方案中，化合物或包含化合物的组合物的“有效量”可以足以治疗与异常内源性外周阿片样物质或μ阿片样受体活性相关的疾病有关的一种或多种症状(例如，特发性便秘，肠梗阻，等等)。

术语“预装填注射器”是指包含药物产品(例如，甲基纳曲酮溶液)并且预先装填用于患者的注射器，例如，自我给药者，由其它人(例如医学专业人员)给药。在某些实施方案中，预装填注射器提供于无菌包装中。在一些实施方案中，这种包装包含多个预装填注射器。

本文使用的术语“患者”是指哺乳动物，并且包括人和动物患者，例如家畜(例如，马，狗，猫，等等)。

本文使用的术语“患有”或“遭受”是指已经确诊患者具有的或怀疑具有的一种或多种病症。

本文使用的术语“治疗(treat)”或“治疗(treating)”是指部分或完全地减轻、抑制障碍或病症或障碍或病症的一或多种症状、延迟它们的发作，预防、改善它们和/或使其减轻。

“治疗活性剂”或“活性剂”是指用于治疗(例如，人治疗，兽医治疗)(包括预防性和治疗性治疗)的物质，包括生物活性物质。治疗活性剂包括有机分子，其是药物化合物，肽，蛋白质，碳水化合物，单糖，寡糖，多糖，核蛋白，粘蛋白，脂蛋白，合成多肽或蛋白质，与蛋白质连接的小分子，糖蛋白，甾体，核酸，DNA，RNA，核苷酸，核苷，寡核苷酸，反义寡核苷酸，脂质，激素和维生素。治疗活性剂包括用作药物的任何物质，该药物用于治疗、预防、延迟、减轻或改善疾病、病症或障碍。在本发明制剂使用的治疗活性剂当中，活性剂是阿片样受体拮抗剂化合物、阿片样物质镇痛化合物等等。下面提供了用作治疗活性剂的化合物的进一步详细说明。治疗活性剂包括可提高第二化合物的效力或效果的化合物，例如，增加第二化合物的效能或减少其副作用。

“钨或其衍生物”是指钨、其盐、其氧化形式或包含钨的合金。术语“钨”可与短语“钨或其衍生物”互换使用。

本文使用的措词“单元剂型”是指适合于给予所治疗患者的本发明制剂的物理离散单元。然而，应该理解，在可靠的医学判断范围内，本发明组合物的总的日用量由主治医师决定。对于任何具体患者或有机体的具体有效剂量水平取决于各种因素，包括：所治疗的病症和病症的严重程度；所使用的具体活性剂的活性；所使用的具体组合物；患者的年龄、体重、总体健康情况、性别和饮食；所使用的具体活性剂的给药时间和排泄速度；治疗持续时间；与所使用的具体化合物组合或同时使用的药物和/或额外的治疗；和医学领域众所周知的类似因素。

2. 示范性化合物的说明∶

如上面所概括描述的，本发明提供了式I的化合物∶

其中∶

R¹和R²各自独立地是C_1-6脂族基团；和

X^-是合适的阴离子。

本领域普通技术人员可以认识到，式I中描述的氮原子是手性中心，并因此可以存在(R)或(S)构型。按照一个方面，本发明提供了式I的化合物，其中该化合物相对于氮是(R)构型。在本发明的某些实施方案中，相对于氮，式I化合物的至少大约99.6%、99.7%、99.8%、99.85%、99.9%或99.95%是(R)构型。

如上面所概括定义的，式I的X^-基团是合适的阴离子。在某些实施方案中，X^-是合适布朗斯台德酸的阴离子。示范性的布朗斯台德酸包括卤化氢，羧酸，磺酸，硫酸和磷酸。在某些实施方案中，X^-是氯化物，溴化物，碘化物，氟化物，硫酸盐，硫酸氢盐，酒石酸盐，硝酸盐，柠檬酸盐，酒石酸氢盐，碳酸盐，磷酸盐，苹果酸盐，马来酸盐，富马酸盐，磺酸盐，甲磺酸盐，甲酸盐，羧酸盐，硫酸盐，甲基硫酸盐或琥珀酸盐。在某些实施方案中，X^-是三氟乙酸盐。按照一个方面，X^-是溴化物。

很明显，式I的化合物包含季铵化的氮基团和酚羟基。本领域普通技术人员可以认识到，式I化合物的酚羟基可以与式I化合物的季铵化的氮形成盐。这种盐可以通过分子间相互作用而在两个式I-a化合物的分子之间形成，或可以通过分子内部的相互作用而在相同化合物的那些基团之间形成。本发明包括这种盐的两种形式。由此，在某些实施方案中，本发明提供了式I-a的化合物∶

其中R¹和R²各自独立地是C_1-6脂族基团。

在一些实施方案中，本发明提供了式I-b的化合物∶

其中R¹和R²各自独立地是C_1-6脂族基团；和

X^-是合适的阴离子。

在某些实施方案中，本发明提供了式I的化合物，其中R¹是C_1-4脂族基团，R²是低级烷基。在其它实施方案中，R¹基团是(环烷基)烷基或烯基。按照某些实施方案，R¹是环丙基甲基或烯丙基。在其它实施方案中，R¹是环丙基甲基或烯丙基，R²是甲基。在一些实施方案中，R¹是甲基，R²是环丙基甲基或烯丙基。

按照一个实施方案，本发明提供了式II或II'的化合物∶

其中每个X^-是本文所描述的合适的阴离子。

在某些实施方案中，本发明提供了化合物II-a∶

。

式II的示范性的化合物包括化合物II-1、II-2和II-3∶

。

按照另一个方面，本发明提供了包含下列的组合物∶

(a) 式III或III'的化合物∶

其中A^-是合适的阴离子，

(b) 至少一种式I的化合物∶

其中∶

R¹和R²各自独立地是C_1-6脂族基团；和

X^-是合适的阴离子；和

(c) 任选地，式IV化合物∶

其中∶

R¹和R²各自独立地是C_1-6脂族基团；和

X^-是合适的阴离子。

在一些实施方案中，将提供的组合物配制为口服组合物。在某些实施方案中，提供的组合物是固体组合物，其包含式III的化合物、式I的化合物和任选式IV的化合物，其中∶

(a) 相对于氮，式III化合物的至少大约99.6%、99.7%、99.8%、99.85%、99.9%或99.95%是(R)构型；和

(b) 式I化合物的存在数量为60、10、5、3.3、2.5、1 ppm或更小。

在其它实施方案中，本发明提供了组合物，其包含式III的化合物、式I的化合物和式IV的化合物，其中式I和IV化合物的总的存在数量小于大约60、大约10、大约5、大约3.3、大约2.5或大约1 ppm。在一些实施方案中，基于固体制剂的总重量，提供的固体制剂包含大约7%至大约75%、或大约25%至大约65%、或大约25%至大约55%、或大约40%至大约50%、或大约20%至大约40%的式III化合物。在某些实施方案中，基于固体制剂的总重量，提供的固体制剂包含大约7%、大约8%、大约10%、大约20%、大约30%、大约40%、大约50%、大约60%、大约70%或大约75%的式III化合物。

在一些实施方案中，口服固体制剂包含50 mg、75 mg、100 mg、125 mg、150 mg、175 mg、200 mg、225 mg、250 mg、275 mg、300 mg、325 mg、350 mg、375 mg、400 mg、425 mg、450 mg、475 mg或500 mg、525 mg、550 mg、575 mg、600 mg、625 mg、650 mg、675 mg、700 mg、725 mg、750 mg、775 mg、800 mg、825 mg、850 mg、875 mg、900 mg、925 mg、950 mg、975 mg、1000 mg、1025 mg、1050 mg、1075 mg、1100 mg、1125 mg、1150 mg、1175 mg、1200 mg、1225 mg、1250 mg、1275 mg、1300 mg、1325 mg、1350 mg、1375 mg、1400 mg、1425 mg、1450 mg、1475 mg、1500 mg的式III化合物。在一些实施方案中，口服固体制剂包含50 mg和900 mg之间(包括端值)或150 mg和450 mg之间(包括端值)的式III化合物。在一些实施方案中，口服固体制剂包含75 mg、150 mg、225 mg、300 mg、450 mg、600 mg或900 mg的式III化合物。在某些实施方案中，在任何这种口服固体制剂中，式I和IV化合物的总的存在数量小于大约60、大约10、大约5、大约3.3、大约2.5或大约1 ppm。

在一些实施方案中，本发明提供了口服固体制剂，其中所述制剂包含式III的化合物、式II的化合物和任选式IV的化合物，其中该制剂每个剂量提供至多1.5微克的式II化合物。在某些实施方案中，本发明提供了口服固体制剂，其中所述制剂包含式III的化合物、式II的化合物和式IV的化合物，其中该制剂每个剂量提供总量至多为1.5微克的式II化合物和式IV化合物。

在某些实施方案中，以液体制剂形式配制这种组合物。这种液体制剂详细描述在WO2008/019115(2008年2月14日公开)中，本文结合其整体作为参考。在一些实施方案中，本发明提供了组合物，其包含式III的化合物和式I的化合物，其中组合物中式I化合物的数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。在一些实施方案中，本发明提供了组合物，其包含式III的化合物、式I的化合物和式IV的化合物，其中式I和IV化合物的总的存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。

如上面所概括定义的，式III的A^-基团是合适的阴离子。在某些实施方案中，A^-是合适的布朗斯台德酸的阴离子。示范性的布朗斯台德酸包括卤化氢，羧酸，磺酸，硫酸和磷酸。在某些实施方案中，A^-是氯化物，溴化物，碘化物，氟化物，硫酸盐，硫酸氢盐，酒石酸盐，硝酸盐，柠檬酸盐，酒石酸氢盐，碳酸盐，磷酸盐，苹果酸盐，马来酸盐，富马酸盐，磺酸盐，甲磺酸盐，甲酸盐，羧酸盐，硫酸盐，甲基硫酸盐或琥珀酸盐。在某些实施方案中，X^-是三氟乙酸盐。按照一个方面，X^-是溴化物。

很明显，式III的化合物包含季铵化的氮基团和酚羟基。本领域普通技术人员可以认识到，式III化合物的酚羟基可以与式III化合物的季铵化的氮形成盐。这种盐可以通过分子间相互作用而在两个式III化合物的分子之间形成，或可以通过分子内部的相互作用而在相同化合物的那些基团之间形成。本发明包括这种盐的两种形式。

国际专利申请公开WO2006/127899描述了化合物III-1，(R)-N-甲基纳曲酮溴化物，其具有下列结构∶

其中该化合物相对于氮是(R)构型。在本发明的某些实施方案中，相对于氮，式III-1化合物的至少大约99.6%、99.7%、99.8%、99.85%、99.9%或99.95%是(R)构型。与存在于相同样品中的(S)-N-甲基纳曲酮溴化物的数量相比较，测定存在于样品中的(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的数量的方法详细描述在WO2006/127899中，本文结合其整体作为参考。在其它实施方案中，化合物III-1包含0.15%或更少的(S)-N-甲基纳曲酮溴化物。

在某些实施方案中，本发明提供了分离形式的本发明化合物。本文使用的术语“分离”是指：以与其它组分分离形式提供化合物，所述其它组分可以存在于该化合物的通常环境(例如，反应混合物，色谱洗脱液，药物组合物，等等)中。在某些实施方案中，分离的化合物是固体形式。在一些实施方案中，分离的化合物的纯度至少为大约50%(利用合适的HPLC方法测定)。在某些实施方案中，利用合适的HPLC方法测定，分离的化合物至少为大约60%、70%、80%、90%、95%、98%或99%。

在某些实施方案中，本发明提供了组合物，其包含∶(a) 式III和/或III'的化合物∶

其中A^-是合适的阴离子，

(b) 至少一种式II和/或II'的化合物∶

其中X^-是本文所描述的合适的阴离子；和

(c) 任选地，式IV-a和/或IV-a'的化合物∶

其中X^-是本文所描述的合适的阴离子。

在某些实施方案中，本发明提供了固体组合物，其包含式III的化合物、式II的化合物和任选地，式IV-a的化合物，其中∶

(b) 式II化合物的存在数量为60、10、5、3.3、2.5、1 ppm或更少。

在其它实施方案中，本发明提供了组合物，其包含式III的化合物、式II的化合物和任选式IV-a的化合物，其中式II和IV-a化合物的总的存在数量小于大约60、大约10、大约5、大约3.3、大约2.5或大约1 ppm。

在某些实施方案中，以液体制剂形式配制这种组合物。在一些实施方案中，本发明提供了液体组合物，其包含式III的化合物和式II的化合物，其中组合物中式II化合物的数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。在一些实施方案中，本发明提供了组合物，其包含式III的化合物、式II的化合物和任选式IV-a的化合物，其中式II和IV-a（当其存在时）化合物的总的存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。

在其它实施方案中，本发明提供了组合物，其包含∶(a)化合物III-1∶

(b)化合物II-1∶

和(c)任选地，化合物IV-1∶

。

在其它实施方案中，本发明提供了固体组合物，其包含化合物III-1、II-1和任选地，化合物IV-1，其中相对于氮，化合物III-1的至少大约99.6%、99.7%、99.8%、99.85%、99.9%或99.95%是(R)构型，且化合物II-1的存在数量是60、10、5、3.3、2.5、1 ppm或更少。在其它实施方案中，本发明提供了组合物，其包含化合物III-1、化合物II-1和任选地，化合物IV-1，其中化合物II-1和IV-1的总的存在数量小于大约60、大约10、大约5、大约3.3、大约2.5或大约1 ppm。

在一些实施方案中，本发明提供了液体组合物，其包含化合物III-1和化合物II-1，其中化合物II-1是的存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。在一些实施方案中，本发明提供了液体组合物，其包含化合物III-1、化合物II-1和任选地，化合物IV-1，其中化合物II-1和IV-1的总的存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。

在某些实施方案中，本发明提供了预装填注射器，其包含液体组合物，其中该液体组合物包含甲基纳曲酮。这种液体组合物的非限制性例子详细描述在美国公开的专利申请US 2008-0070975中，本文结合其整体作为参考。在一些实施方案中，本发明提供了预装填注射器，其包含单位剂量的液体组合物，其中该液体组合物包含甲基纳曲酮或其可药用盐、钙盐，和螯合剂。在某些实施方案中，本发明提供了预装填注射器，其基本上不含钨，包含单位剂量的液体组合物，其中该液体组合物包含甲基纳曲酮、钙螯合剂和缓冲剂。在某些实施方案中，本发明提供了预装填注射器，其基本上不含钨，包含单位剂量的液体组合物，其中该液体组合物包含甲基纳曲酮、钙螯合剂、缓冲剂和等渗剂。在一些实施方案中，本发明提供了预装填注射器，其基本上不含钨，包含单位剂量的液体组合物，其中该液体组合物包含甲基纳曲酮溴化物、乙二胺四乙酸钙二钠和甘氨酸盐酸盐。在一些实施方案中，本发明提供了预装填注射器，其基本上不含钨，包含单位剂量的液体组合物，其中该液体组合物包含甲基纳曲酮溴化物、乙二胺四乙酸钙二钠、甘氨酸盐酸盐和氯化钠。

在某些实施方案中，该液体组合物具有在大约pH2.0和大约pH6.0之间的pH值。在一些实施方案中，制剂的pH值在大约pH2.6和大约pH5.0之间。在一些实施方案中，制剂的pH值在大约pH3.0和大约pH4.0之间。在一些实施方案中，制剂的pH值在大约pH3.4和大约pH3.6之间。在一些实施方案中，制剂的pH值大约为pH3.5。在某些实施方案中，液体组合物具有大约2.5至大约6的pH值。

在一些实施方案中，本发明提供了预装填注射器，其包含液体组合物，其中该液体组合物包含甲基纳曲酮，其数量为大约0.5 mg至大约200 mg、大约1 mg至大约80 mg、大约5 mg至大约40 mg，或包含甲基纳曲酮溴化物，其数量为大约8 mg、大约12 mg、大约16 mg、大约18 mg或大约24 mg。

在一些实施方案中，本发明提供了预装填注射器，其包含液体组合物，其中该液体组合物包含甲基纳曲酮和螯合剂，其中制剂中螯合剂的数量为该制剂的大约0.01 mg/mL至大约2 mg/mL、或大约0.1 mg/mL至大约1 mg/mL，或大约0.2 mg/mL至大约0.8 mg/mL制剂。在一些实施方案中，制剂中螯合剂的存在数量可以是大约0.2 mg/mL、大约0.3 mg/mL、大约0.4 mg/mL、大约0.5 mg/mL或大约0.6 mg/mL。

示范性的螯合剂包括：乙二胺四乙酸(还与EDTA、乙底酸（edetic acid）、依地酸(versene acid)和依地酸(sequestrene)同义)和EDTA衍生物，例如EDTA钠和EDTA钾，EDTA二铵，EDTA二钾，EDTA二钠，TEA-EDTA，EDTA四钠，EDTA三钾，EDTA三钠，HEDTA和HEDTA三钠和其相关的盐。其它螯合剂包括：烟酰胺和它们的衍生物，和去氧胆酸钠和它们的衍生物，乙二醇-二-(2-氨乙基)-N,N,N',N'-四乙酸(EGTA)和它们的衍生物，二亚乙基三胺五醋酸(DTPA)和它们的衍生物，N,N-二(羧甲基)甘氨酸(NTA)和它们的衍生物，氮川三乙酸和它们的衍生物。其它螯合剂还包括柠檬酸和它们的衍生物。柠檬酸还被称为柠檬酸一水合物。柠檬酸的衍生物包括无水柠檬酸和柠檬酸三钠-二水合物。在一些实施方案中，螯合剂选自EDTA或EDTA衍生物，或EGTA或EGTA衍生物。在一些实施方案中，螯合剂是EDTA二钠，例如，EDTA二钠水合物。

在一些实施方案中，本发明提供了预装填注射器，其包含液体组合物，其中该液体组合物包含甲基纳曲酮和钙盐，其中钙盐数量为大约0.01 mg/mL至大约2 mg/mL或大约0.1 mg/mL至大约1 mg/mL，或大约0.2 mg/mL至大约0.8 mg/mL，大约0.2 mg/mL，大约0.3 mg/mL，大约0.4 mg/mL，大约0.5 mg/mL，或大约0.6 mg/mL。

钙盐的例子包括但不局限于：氯化钙，乙酸钙，柠檬酸钙，硫酸钙，等等。

在一些实施方案中，本发明提供了预装填注射器，其包含液体组合物，其中该液体组合物包含甲基纳曲酮和钙盐螯合剂，其中钙盐螯合剂的数量为大约0.01 mg/mL至大约2 mg/mL、或大约0.1 mg/mL至大约1 mg/mL、或大约0.2 mg/mL至大约0.8 mg/mL。在一些实施方案中，钙盐螯合剂的存在数量可以是大约0.2 mg/mL、大约0.3 mg/mL、大约0.4 mg/mL、大约0.5 mg/mL或大约0.6 mg/mL。

常见的钙盐螯合剂包括但不局限于：乙二胺四乙酸(EDTA)钙和EDTA钙盐衍生物，乙二醇-二-(2-氨乙基)-N,N,N',N'-四乙酸(EGTA)钙和EGTA钙盐衍生物，二亚乙基三胺五醋酸(DTPA)钙和DTPA钙盐衍生物，N,N-二(羧甲基)甘氨酸(NTA)钙和NTA钙盐衍生物，以及柠檬酸钙和它们的衍生物。在一些实施方案中，螯合剂选自EDTA钙或EDTA钙盐衍生物，或EGTA钙或EGTA钙盐衍生物。在一些实施方案中，螯合剂是EDTA二钠钙，例如，EDTA二钠钙水合物。

在一些实施方案中，本发明提供了预装填注射器，其包含液体组合物，其中该液体组合物包含甲基纳曲酮和等渗剂。常见的等渗剂包括选自下列的试剂：氯化钠，甘露糖醇，乳糖，右旋糖(水合或无水)，蔗糖，甘油和山梨糖醇，和其溶液。

在一些实施方案中，本发明提供了预装填注射器，其包含液体组合物，其中该液体组合物包含甲基纳曲酮和稳定剂，其中稳定剂的数量为大约0.01 mg/mL至大约2 mg/mL、或大约0.05 mg/mL至大约1 mg/mL、或大约0.1 mg/mL至大约0.8 mg/mL。在一些实施方案中，稳定剂的存在数量可以是大约0.15 mg/mL、大约0.2 mg/mL、大约0.25 mg/mL、大约0.3 mg/mL、大约0.35 mg/mL或大约0.4 mg/mL。

示范性的稳定剂包括甘氨酸，苯甲酸，柠檬酸，乙二醇酸，乳酸，苹果酸和马来酸。在一些实施方案中，制剂包含甘氨酸。在一些实施方案中，甘氨酸包括甘氨酸-HCl。

在某些实施方案中，本发明提供了包含液体组合物的预装填注射器，该液体组合物包含式III的化合物和式II的化合物，其中式II化合物的存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。在一些实施方案中，本发明提供了液体组合物，其包含式III的化合物、式II的化合物和任选式IV的化合物，其中式II和IV化合物的总的存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。

在一些实施方案中，用于制作按照本发明的预装填注射器的注射器是“不含钨”或“基本上不含钨”的注射器。在一些实施方案中，“不含钨”或基本上不含钨的注射器可从Becton Dickinson、Schott等等商购。这种注射器可以称为“超低”钨注射器或“不含钨”注射器。

在某些实施方案中，“基本上不含”钨是指钨的水平小于可促使式III化合物降解的数量。在某些实施方案中，基本上不含钨的注射器包含的钨的数量小于大约十亿分之60，或小于大约十亿分之50，或小于大约十亿分之40。在一些实施方案中，基本上不含钨的注射器包含的钨的数量小于大约十亿分之12。应理解，表示为“基本上不含”钨的注射器包括不含钨的那些注射器。钨在注射器中的水平可以利用本领域技术人员已知的多种技术来测定，例如，描述在US 20080103438中的那些技术，并且在下文实施例8中更详细地描述。

在一些实施方案中，用于制作按照本发明的预装填注射器的注射器是可预充的玻璃和/或聚合物注射器。这种注射器可以商购，例如，从Schott购买。在一些实施方案中，聚合物注射器用环烯烃聚合物制成。

不希望被任何具体理论束缚，人们相信，注射器中存在钨可以促使保存在这种注射器中的甲基纳曲酮溶液的降解。这种降解包括形成式I的化合物。由此，在本发明的一些方面，以能够使溶液与钨分离(即，甲基纳曲酮不与钨接触)的方式保存甲基纳曲酮溶液。在某些实施方案中，本发明提供了不含钨或其衍生物的甲基纳曲酮预装填注射器，或包含的钨的数量小于大约十亿分之60，或小于大约十亿分之50，或小于大约十亿分之40，或小于大约十亿分之12。钨的水平可以例如利用ICP-MS测定。

在某些实施方案中，本发明提供了基本上不含钨的预装填注射器，其包含液体组合物，该液体组合物包含化合物III-1和化合物II-1，其中化合物II-1的存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。在一些实施方案中，本发明提供了基本上不含钨的预装填注射器，包含化合物III-1、化合物II-1和任选地，化合物IV-1的液体组合物，其中化合物II-1和IV-1的总存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。

在一些实施方案中，本发明提供了基本上不含钨的预装填注射器，其包含液体组合物，该液体组合物包含大约8 mg化合物III-1(在大约0.4 mL水中)，以及化合物II-1，其中化合物II-1的存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。在某些实施方案中，本发明提供了基本上不含钨的预装填注射器，其包含∶(a) 8 mg化合物III-1；(b)0.16 mg依地酸（edetate）钙二钠；和(c)0.12 mg甘氨酸盐酸盐，其中所述预装填注射器包含的化合物II-1的数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。在某些实施方案中，本发明提供了基本上不含钨的预装填注射器，其包含∶(a) 8 mg化合物III-1；(b)0.4 mL水；和(c)2.6 mg氯化钠；(d)0.16 mg依地酸钙二钠；和(e)0.12 mg甘氨酸盐酸盐，其中所述预装填注射器包含的化合物II-1的数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。

在一些实施方案中，本发明提供了基本上不含钨的预装填注射器，其包含液体组合物，该液体组合物包含大约12 mg化合物III-1(在大约0.6 mL水中)，以及化合物II-1，其中化合物II-1的存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。在某些实施方案中，本发明提供了基本上不含钨的预装填注射器，其包含∶(a)12 mg化合物III-1；(b)0.24 mg依地酸钙二钠；和(c)0.18 mg甘氨酸盐酸盐，其中所述预装填注射器包含的化合物II-1的数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。在某些实施方案中，本发明提供了基本上不含钨的预装填注射器，其包含∶(a)12 mg化合物III-1；(b)0.6 mL水；(c)3.9 mg氯化钠；(d)0.24 mg依地酸钙二钠；和(e)0.18 mg甘氨酸盐酸盐，其中所述预装填注射器包含的化合物II-1的数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。

在一些实施方案中，将一个或多个所提供的基本上不含钨并且包含甲基纳曲酮的预装填注射器(本文所描述)保存在容器中，该容器可以使注射器避开光。在某些实施方案中，将一个或多个预装填注射器保存在能够使注射器避开光的泡罩包装中。在一些实施方案中，将一个或多个预装填注射器保存在能够使注射器避开光的盒子中。

在一些实施方案中，基本上不含钨并且包含甲基纳曲酮的预装填注射器(如本文所描述)提供甲基纳曲酮的单位剂量，其可以在典型环境储藏条件下对于降解保持稳定至少9个月或至少12个月，或至少18个月或至少24个月。本文使用的术语“典型的环境储藏条件”是指25℃/60%RH。在某些实施方案中，本发明提供了本文所描述的预装填注射器，其中所述预装填注射器在至少9个月、至少12个月、至少14个月、至少16个月、至少18个月或至少24个月时包含数量小于大约25 ppm的化合物II-1。在某些实施方案中，本发明提供了本文所描述的预装填注射器，其中所述预装填注射器在至少9个月、至少12个月、至少14个月、至少16个月、至少18个月或至少大约24个月时包含总数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm的化合物II-1和/或IV-1。

在某些实施方案中，本发明提供了结晶固体形式的化合物II-1。在一些实施方案中，以非晶固体形式提供化合物II-1。

本文使用的术语“基本上不含非晶体的化合物II-1”是指结晶固体不包含显著数量的非晶形化合物II-1。在本发明的某些实施方案中，术语“基本上不含非晶体的化合物II-1”是指至少大约95%重量的固体化合物II-1是结晶形式。在本发明的某些实施方案中，术语“基本上不含非晶体的化合物II-1”是指至少大约99%重量的固体化合物1是结晶形式。

本文使用的术语“基本上不含其它形式的化合物II-1”是指该固体不包含显著数量的另一种固体形式的化合物II-1。在本发明的某些实施方案中，术语“基本上不含其它形式的化合物II-1”是指至少大约95%重量的化合物II-1是特定的固体形式。在本发明的某些实施方案中，术语“基本上不含另一种形式的化合物II-1”是指至少大约99%重量的化合物II-1是特定的固体形式。

化合物II-1多晶型物的粉末XRD在9.8、10.8、12.7、14.7、15.0、15.9、16.7、17.5、18.7、19.4、20.5、21.0、21.7、22.6、23.0、24.3、24.8、25.5、25.9、26.8、27.2、28.2、28.8、29.5、30.1、31.2、32.1、32.9、33.5、34.9、36.0和38.5度2θ处包含峰。在某些实施方案中，本发明提供了化合物II-1的结晶形式，其特征在于：所述形式在其选自下列的粉末X射线衍射图中具有一个或多个峰：9.8、10.8、12.7、14.7、15.0、15.9、16.7、17.5、18.7、19.4、20.5、21.0、21.7、22.6、23.0、24.3、24.8、25.5、25.9、26.8、27.2、28.2、28.8、29.5、30.1、31.2、32.1、32.9、33.5、34.9、36.0和38.5度2θ。在某些实施方案中，本发明提供了化合物II-1的结晶形式，其特征在于：所述形式在其选自下列的粉末X射线衍射图中具有两个或多个峰：9.8、10.8、12.7、14.7、15.0、15.9、16.7、17.5、18.7、19.4、20.5、21.0、21.7、22.6、23.0、24.3、24.8、25.5、25.9、26.8、27.2、28.2、28.8、29.5、30.1、31.2、32.1、32.9、33.5、34.9、36.0和38.5度2θ。在某些实施方案中，本发明提供了化合物II-1的结晶形式，其特征在于：所述形式在其选自下列的粉末X射线衍射图中基本上具有所有的峰：9.8、10.8、12.7、14.7、15.0、15.9、16.7、17.5、18.7、19.4、20.5、21.0、21.7、22.6、23.0、24.3、24.8、25.5、25.9、26.8、27.2、28.2、28.8、29.5、30.1、31.2、32.1、32.9、33.5、34.9、36.0和38.5度2θ。

按照一个方面，化合物II-1多晶型物具有基本上包括图15所描绘的所有峰的XRD图。本文使用的短语“基本上所有的峰”是指化合物在它的XRD中显示至少大约80%的所列出的峰。在其它实施方案中，短语“基本上所有的峰”是指化合物在它的XRD中显示至少大约85、90、95、97、98或99%的所列出的峰。

按照另一个实施方案，本发明提供了非晶固体形式的化合物II-1。非晶固体为本领域普通技术人员所熟知，并且典型地利用例如冷冻干燥、熔融和从超临界流体中沉淀的方法来制备，还有其它的方法。在下文的实施例部分中，描述了制备非晶形化合物II-1的方法。

在某些实施方案中，本发明提供了基本上不含晶体化合物II-1的非晶形化合物II-1。本文使用的术语“基本上不含晶体化合物II-1”是指该化合物不包含显著数量的晶体化合物II-1。在本发明的某些实施方案中，至少大约95%重量的所存在的化合物II-1是非晶形的化合物II-1。在本发明的其它实施方案中，至少大约99%重量的所存在的化合物II-1是非晶形的化合物II-1。

在其它实施方案中，本发明提供了组合物，其包含非晶形的化合物II-1和至少一种结晶形式的化合物II-1。化合物II-1的这种结晶形式包括：本文所描述的化合物II-1多晶型物，或可以由非晶形化合物II-1的制备和/或分离所产生的化合物II-1的其它结晶形式。在某些实施方案中，本发明提供了组合物，其包含非晶形的化合物II-1和至少一种本文所描述的结晶形式的化合物II-1。

在一些实施方案中，本发明提供了包括下列步骤的方法∶

(a) 提供式III的化合物∶

其中A^-是合适的阴离子；和

(b) 用氧化剂处理式III的化合物，形成式II的化合物∶

其中X^-是合适的阴离子。

适合于与式III化合物反应形成式II化合物的氧化剂为本领域普通技术人员所熟知。在一些实施方案中，氧化剂是过氧化物、苯醌或过酸。在某些实施方案中，氧化剂是过氧化氢，叔丁基过氧化氢，MCPBA(间氯过苯甲酸)，过乙酸，oxone(过一硫酸氢钾)，或DDQ(2,3-二氯-5,6-二氰基苯醌)。

在某些实施方案中，本发明提供了包括下列步骤的方法∶

(a) 提供化合物III-1∶

和

(b) 用氧化剂处理化合物III-1，形成化合物II-1∶

。

在一些实施方案中，通过氧化反应由III-1制备化合物II-1的方法进一步包括进行盐交换得到化合物II-3的步骤∶

本领域普通技术人员可以理解，利用例如HPLC纯化(使用包含三氟乙酸的洗脱液)，可以容易地由化合物II-1来制备化合物II-3。

4. 使用、制剂和给药

化合物II-1被鉴定为(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的新的降解产物。具体地说，对(R)-N-甲基纳曲酮溴化物预装填注射器的稳定性研究产生了新的、未知的杂质。利用LC/MS鉴定这种杂质，在RRT 0.60处洗脱出新的峰。如实施例1所详述，利用制备HPLC分离该峰。本领域普通技术人员可以认识到，用制备HPLC(使用范例中所述的溶剂洗脱液)分离的式II化合物是三氟乙酸盐，化合物II-3。另外，合成化合物II-1，以便确定它的结构特性. 由此，本发明化合物用作分析中的标准样品，用于测定作为活性药物组份的(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的纯度。

在某些实施方案中，本发明提供了包括下列步骤的方法∶

(a) 提供(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的样品；

(b) 对(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的样品进行分析；和

(c) 测定化合物II-1在(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的数量。

在某些实施方案中，本发明提供了包括下列步骤的方法∶

(a) 提供(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的样品；

(b) 对(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的样品进行分析；和

(c) 测定化合物II-1和化合物IV在(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的数量。

在某些实施方案中，本发明提供了包括下列步骤的方法∶

(a) 提供(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的样品；

(b) 提供化合物II-1的样品；和

(c) 对(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的样品和化合物II-1的样品进行HPLC分析；和

(d) 测定化合物II-1在(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的数量。

在某些实施方案中，步骤(d)包括：测定(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的化合物II-1(或化合物II-3，视情况而定)的数量小于大约60 ppm、大约10 ppm、大约5 ppm、大约3.3 ppm、大约2.5 ppm或大约1.0 ppm。在一些实施方案中，步骤(d)包括：测定(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的化合物II-1(或化合物II-3，视情况而定)的数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约大约185、大约187或大约190 ppm。

在一些实施方案中，本发明提供了包括下列步骤的方法∶

(a) 提供(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的样品的HPLC色谱；

(b) 提供化合物II-1的样品的HPLC色谱；

(c) 比较HPLC色谱，并测定化合物II-1在(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的数量。

在某些实施方案中，步骤(c)包括：测定(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的化合物II-1(或化合物II-3，视情况而定)的数量小于大约60 ppm、大约10 ppm、大约5 ppm、大约3.3 ppm、大约2.5 ppm或大约1.0 ppm。在一些实施方案中，步骤(c)包括：测定(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的化合物II-1(或化合物II-3，视情况而定)的数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约大约185、大约187或大约190 ppm。

在某些实施方案中，步骤(b)进一步包括：提供化合物IV-1的样品，和步骤(c)进一步包括：测定化合物IV-1在(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的数量。在某些实施方案中，步骤(c)包括：测定(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的化合物II-1和化合物IV-1的总数量小于大约60 ppm、大约10 ppm、大约5 ppm、大约3.3 ppm、大约2.5 ppm或大约1.0 ppm。在某些实施方案中，步骤(c)包括：测定(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的化合物II-1和化合物IV-1的数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。

在一些实施方案中，步骤(c)包括：测定(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品每个剂量(即每天)提供至多1.5微克的化合物II-1和化合物IV-1。

在某些实施方案中，本发明的化合物在生物和病理现象中可有效用于研究外周μ阿片样物质拮抗剂，并且可用于对比评价外周μ阿片样物质拮抗剂。

在某些实施方案中，式I的化合物用作外周μ阿片样受体拮抗剂。按照本发明的另一个方面，提供了可药用组合物，其包含本文所描述的式I化合物，并且任选包含可药用载体、助剂或赋形剂。在本发明的某些实施方案中，这种可药用组合物任选进一步包含一种或多种额外的治疗剂。

如上所述，本发明的可药用组合物另外包含可药用载体、助剂或赋形剂，本文使用的所述物质包括适合于所需要的具体剂型的任何和所有的溶剂、稀释剂或其它液体赋形剂、分散体或悬浮助剂、表面活性试剂、等渗剂、增稠或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂等等。Remingtons　Pharmaceutical　Sciences, 17th edition, ed. Alfonoso R. Gennaro, Mack Publishing Company, Easton, PA(1985)公开了用于配制可药用组合物的各种载体和制备其的已知技术。除非到目前为止任何常规载体介质与本发明的盐不相容，例如，产生任何不合需要的生物效应或以有害方式与可药用组合物的任何其它组分进行相互作用，否则，它的使用包括在本发明范围之内。可以充当可药用载体的物质的一些例子包括但不局限于：离子交换剂，氧化铝，硬脂酸铝，卵磷脂，血清蛋白，例如人血清白蛋白，缓冲物质例如磷酸盐，甘氨酸，山梨酸或山梨酸钾，饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物，水，盐或电解质，例如硫酸精蛋白，磷酸氢二钠，磷酸氢钾，氯化钠，锌盐，胶态硅石，三硅酸镁，聚乙烯吡咯烷酮，聚丙烯酸酯，石蜡，聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段共聚物，羊毛脂，糖例如乳糖，葡萄糖和蔗糖；淀粉例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素和它的衍生物例如羧甲基纤维素钠，乙基纤维素和醋酸纤维素；粉末黄芪胶；麦芽；凝胶；滑石粉；赋形剂例如可可脂和栓剂石蜡；油例如花生油，棉子油；红花油；芝麻油；橄榄油；玉米油和大豆油；二醇类；例如丙二醇或聚乙二醇；酯例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂例如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原的水；等渗盐水；林格溶液；乙醇和磷酸盐缓冲液，以及其它无毒的相容的润滑剂，例如月桂基硫酸钠和硬脂酸镁，以及着色剂，防粘剂，包覆剂，甜味剂，调味剂和芳香剂，防腐剂和抗氧化剂还可以存在于组合物中(按照配方者的判断)。

在某些实施方案中，本发明涉及组合物，其包含至少一种式I的化合物和一或多种可药用载体、赋形剂或稀释剂。这种组合物可以按照可接受的制药方法来制备，例如，描述在Remingtons中的那些方法，本文结合其全部作为参考。可药用载体是与制剂中其它组分相容并且是生物学可接受的那些载体。

本发明的组合物(纯净的)可以口服或胃肠外给予，或可以与常规药物载体组合给予。合适固体载体包括还可以充当调味剂、润滑剂、增溶剂、悬浮剂、填料、助流剂、压缩助剂、粘合剂、片剂-崩解剂或包封物质的一种或多种物质。在粉剂中，载体是与细分散的活性组分混合的细分散的固体。在片剂中，活性组分与具有必要压缩性能的载体以合适比例混合，并压缩成所需要的形状和大小。合适固体载体包括，例如，磷酸钙，硬脂酸镁，滑石粉，糖，乳糖，糊精，淀粉，凝胶，纤维素，甲基纤维素，羧甲基纤维素钠，聚维酮，低熔点石蜡和离子交换树脂。

液体载体可以用于制备溶液剂，混悬剂，乳剂，糖浆剂和酏剂。活性组分可以溶解或悬浮在可药用液体载体中，例如水，有机溶剂，两者的混合物，或可药用油或油脂。液体载体可以包含其它合适药物添加剂，例如，增溶剂，乳化剂，缓冲剂，防腐剂，甜味剂，调味剂，悬浮剂，增稠剂，着色剂，粘度调节剂，稳定剂或osmo-调节剂。用于口服和肠胃外给药的液体载体的合适例子包括水(尤其包含上述添加剂，例如纤维素衍生物，优选羧甲基纤维素钠溶液)，醇(包括一元醇和多元醇，例如二醇类)和它们的衍生物，和油(例如分馏椰子油和花生油)。对于肠胃外给药，载体还可以是油酯，例如油酸乙酯和十四烷酸异丙酯。无菌液体载体用于无菌液态组合物，用于肠胃外给药。用于加压组合物的液体载体可以是卤代烃或其它可药用发射剂。

作为无菌溶液剂或混悬剂的液体药物组合物可以通过例如肌内、腹腔内或皮下注射给药。无菌溶液剂还可以静脉内给药。口服给药组合物可以是液体或固体形式。

在某些实施方案中，以常规栓剂形式直肠或阴道给予本发明的组合物。对于鼻内或支气管内吸入或吹入给药，可以将本发明的组合物配制为水溶液或部分水溶液，然后可以其气雾剂形式使用。通过使用包含活性化合物和载体的透皮膜片，还可以透皮给予本发明的组合物，所述载体对活性化合物惰性、对皮肤无毒并使递送的药剂通过皮肤系统地吸收到血液中。载体可以采用许多形式，例如乳膏剂和软膏剂，糊剂，凝胶剂和闭塞性装置。乳膏剂和软膏剂可以是水包油型或油包水型的粘性液体或半固体乳剂。包含吸附粉末(分散在石油产品中或亲水性石油产品中)包含活性组分的糊剂也可以是合适的。各种闭塞性装置可用于将活性组分释放到血液中，例如，覆盖储存器(包含活性组分，有或者没有载体)的半透性膜或包含活性组分的基质。其它闭塞性装置在文献中是已知的。

在一些实施方案中，药物组合物是单元剂型，例如片剂，胶囊剂，粉剂，溶液剂，混悬剂，乳剂，颗粒剂，或栓剂。用这种形式，可以将组合物再分成包含合适数量活性组分的单元剂量；单元剂型可以是包装的组合物，例如，包装的粉剂、包含液体的瓶、安瓿、预装填注射器或小袋。单元剂型可以是例如胶囊剂或片剂本身，或它可以是包装形式的合适数量的任何这种组合物。

提供给患者的本发明组合物的量将根据所给予的患者、给药目的（例如预防或治疗）、患者的状态、给药方式等等来变化。在治疗应用中，将本发明的组合物提供给患有病症的患者，其数量是足以治疗或至少部分地治疗病症的症状和它的并发症。足够实现该目标的数量为本文先前所描述的“治疗有效量”。用于治疗具体病例的剂量必须由主治医师主观地确定。所涉及的变量包括：患者具体状况和体量、年龄和响应模式。在主治医师的指引下，物质滥用的治疗遵循主观药物给予的相同方法。通常，起始剂量大约为每天5 mg，逐渐增加日剂量至每天大约150 mg，以便给患者提供所需要的剂量水平。

在一些实施方案中，本发明提供了一种方法，该方法包括：通过皮下注射给予患者8 mg或12 mg剂量的式III化合物。在某些实施方案中，本发明提供了包括下列步骤的方法∶

(i) 提供基本上不含钨的预装填注射器，其包含液体组合物的单元剂量，该单元剂量液体组合物包含8 mg化合物III-1和化合物II-1，其中化合物II-1的存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm，和/或，其中化合物II-1和化合物IV-1的总存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm；

(ii) 通过皮下注射给予患者该单元剂量。

在某些实施方案中，本发明提供了包括下列步骤的方法∶

(i) 提供基本上不含钨的预装填注射器，其包含液体组合物的单元剂量，该单元剂量液体组合物包含在0.4 mL水中的8 mg化合物III-1，以及化合物II-1，其中化合物II-1的存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm，和/或，其中化合物II-1和化合物IV-1的总存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm；

(ii) 通过皮下注射给予患者该单元剂量。

在某些实施方案中，本发明提供了包括下列步骤的方法∶

(i) 提供基本上不含钨的预装填注射器，其包含液体组合物的单元剂量，该单元剂量液体组合物包含∶(a)8 mg化合物III-1；(b)0.16 mg依地酸钙二钠；和(c)0.12 mg甘氨酸盐酸盐，其中所述预装填注射器包含的化合物II-1的数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm，和/或，其中化合物II-1和化合物IV-1的总存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm；

(ii) 通过皮下注射给予患者该单元剂量。

在某些实施方案中，本发明提供了包括下列步骤的方法∶

(i) 提供基本上不含钨的预装填注射器，其包含组合物的单元剂量，该单元剂量组合物包含∶(a)8 mg化合物III-1；(b)0.4 mL水；和(c)2.6 mg氯化钠；(d)0.16 mg依地酸钙二钠；和(e)0.12 mg甘氨酸盐酸盐，其中所述预装填注射器包含的化合物II-1的数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm，和/或，其中化合物II-1和化合物IV-1的总存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm；

(ii) 通过皮下注射给予患者该单元剂量。

在某些实施方案中，本发明提供了包括下列步骤的方法∶

(i) 提供基本上不含钨的预装填注射器，其包含液体组合物的单元剂量，该单元剂量液体组合物包含∶12 mg化合物III-1和化合物II-1，其中化合物II-1的存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm，和/或，其中化合物II-1和化合物IV-1的总存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm；

(ii) 通过皮下注射给予患者该单元剂量。

在某些实施方案中，本发明提供了包括下列步骤的方法∶

(i) 提供基本上不含钨的预装填注射器，其包含液体组合物的单元剂量，该单元剂量液体组合物包含在0.6 mL水中的12 mg化合物III-1，以及化合物II-1，其中化合物II-1的存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm，和/或，其中化合物II-1和化合物IV-1的总存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm；

(ii) 通过皮下注射给予患者该单元剂量。

在某些实施方案中，本发明提供了包括下列步骤的方法∶

(i) 提供基本上不含钨的预装填注射器，其包含液体组合物的单元剂量，该单元剂量液体组合物包含∶(a)12 mg化合物III-1；(b)0.24 mg依地酸钙二钠；和(c)0.18 mg甘氨酸盐酸盐，其中所述预装填注射器包含的化合物II-1的数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm，和/或，其中化合物II-1和化合物IV-1的总存在数量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm；

(ii) 通过皮下注射给予患者该单元剂量。

在某些实施方案中，患者重量在大约62和大约114 kg之间。在一些实施方案中，患者患有阿片样物质诱导的便秘，包括但不局限于：例如，疾病晚期或患有慢性疼痛的患者。

在本发明的其它实施方案中，组合物包含式I或II的化合物，其数量至少为大约97、97.5、98、98.5、99、99.5、99.8重量百分数，其中该百分数基于所述化合物的游离碱和基于组合物的总重量。在其它实施方案中，相对于HPLC色谱的总面积，包含式I或II化合物的组合物包含至多大约2.0面积百分比(HPLC)的总有机杂质，且更优选至多大约1.5面积百分比(HPLC)的总有机杂质。

在本发明的其它实施方案中，提供的组合物包含式III的化合物、至少一种式I或II的化合物和至少一种可药用载体。在一些实施方案中，这种组合物包含式I或II的化合物，其数量为大约1重量百分数至大约99重量百分数，其中该百分数基于所述化合物的游离碱和基于该组合物的总重量。在其它实施方案中，相对于HPLC色谱的总面积，包含式I或II化合物的组合物包含至多大约2.0面积百分比(HPLC)的总有机杂质，且更优选至多大约1.5面积百分比(HPLC)的总有机杂质。

在某些实施方案中，本发明涉及本文所描述的组合物，其包含式I化合物的前体药物。本文使用的术语“前体药物”是指可在体内通过代谢方法(例如水解)而转变为式I化合物的化合物。前体药物的各种形式在本领域是已知的，例如，在下列中所讨论的那些：Bundgaard,(ed.), Design of Prodrugs, Elsevier(1985); Widder等人(ed.), Methods in Enzymology, vol. 4, Academic Press(1985); Krogsgaard-Larsen等人(ed).” Design and Application of Prodrugs, Textbook of Drug Design and Development, Chapter 5, 113-191(1991), Bundgaard等人Journal of Drug Delivery Reviews, 8:1-38(1992), Bundgaard, J. of Pharmaceutical Sciences, 77:285 et seq.(1988); and Higuchi and Stella(eds.)Prodrugs as Novel Drug Delivery Systems, American Chemical Society(1975)，本文结合每一个的所有内容作为参考。

组合产品和组合给药

在某些实施方案中，本发明组合物和其制剂可以单独给予，以便治疗本文所描述的一种或多种病症，或者，可以与用于治疗一种或多种本文所描述的病症的一种或多种其它活性剂组合给予(不论同时或顺序给予)。由此，本发明组合物或其制剂可以与一种或多种活性剂同时给予、在其之前给予或在其之后给予。

在某些实施方案中，除了式I的化合物之外，本发明组合物还包含一种或多种非式I化合物的其它活性剂。在某些实施方案中，本发明提供了制剂，其递送式I的化合物和至少一种其它活性剂。

在一些实施方案中，本发明制剂包含阿片样物质和式I的化合物两者。包含阿片样物质和式I化合物两者的这种组合产品可以使疼痛减轻和阿片样物质相关副作用(例如，胃肠影响(例如，延迟胃排空，改变胃肠道活动性)，等等)的最小化同时发生。

在镇痛治疗中使用的阿片样物质在本领域是已知的。例如，阿片样化合物包含但不局限于：阿芬太尼，阿尼利定，阿西马朵林，布马佐辛，丁丙诺啡(burprenorphine)，布托啡诺，可待因，地佐辛，二乙酰吗啡(海洛英)，双氢可待因，地芬诺酯，乙基吗啡，非多托秦，芬太尼，funaltrexamine，氢可酮，氢化吗啡酮，莱瓦洛芬，左旋乙酰美沙酮，利富吩，洛哌丁胺，派替啶(哌替啶)，美沙酮，吗啡，吗啡-6-葡萄糖醛酸苷，纳布啡(nalbuphine)，烯丙吗啡，尼可吗啡(nicomorphine)，阿片样物质(opium)，氧可酮，氧吗啡酮，阿片样物质全碱，镇痛新，丙吡胺，达尔丰，瑞芬太尼(remifentanyl)，舒芬太尼，痛立停，三甲丁酯和反胺苯环醇。在一些实施方案中，阿片样物质是选自下列中的至少一种：阿芬太尼，丁丙诺啡，布托啡诺，可待因，地佐辛，双氢可待因，芬太尼，氢可酮，氢化吗啡酮，利富吩，麦啶(哌替啶)，美沙酮，吗啡，纳布啡(nalbuphine)，尼可吗啡(nicomorphine)，氧可酮，氧吗啡酮，阿片样物质全碱，镇痛新，丙吡胺，达尔丰，舒芬太尼和/或反胺苯环醇。在本发明的某些实施方案中，阿片样物质选自吗啡，可待因，氧可酮，氢可酮，双氢可待因，达尔丰，芬太尼，反胺苯环醇和其混合物。在一个具体实施方案中，阿片样物质是洛哌丁胺。在其它实施方案中，阿片样物质是混合的激动剂，例如布托啡诺。在一些实施方案中，给予患者一种以上阿片样物质，例如，吗啡和海洛英或美沙酮和海洛英。

存在于本发明组合物中的其它活性剂的数量典型地不超过正常给予包含该活性剂作为唯一治疗剂的组合物的数量。在本发明的某些实施方案中，其它活性剂的数量在正常存在于包含该化合物作为唯一治疗剂的组合物中数量的大约50%至100%范围内。

在某些实施方案中，本发明制剂也可以与以便帮助改善便秘和肠功能障碍的、胃肠功能失调的常规疗法结合和/或组合使用。例如，常规治疗包括但不限于：肠道的功能性刺激，粪便软化剂，通便剂(例如，二苯甲烷（diphelymethane）通便剂，导泻通便剂，渗透性通便剂，盐水性通便剂，等等)，团块形成药剂和通便剂，润滑剂，静脉内水化作用，和鼻胃减压。

本发明制剂的使用和试剂盒

正如以上的讨论，本发明提供了化合物和组合物，用于拮抗阿片样物质镇痛治疗的不合需要的副作用(例如，胃肠影响(例如，延迟胃排空，改变胃肠道活动性)，等等)。此外，提供的化合物或组合物可以用于治疗患有疾病状态的患者，这种疾病状态可以通过结合μ阿片样受体而得到改善，或用于需要暂时抑制μ阿片样受体系统的任何治疗(例如，肠梗阻，等等)。在本发明的某些实施方案中，制剂的使用方法是在人患者中使用。

相应地，给予所提供的化合物或组合物可以对治疗、预防、改善、延迟或降低阿片样物质使用的下述副作用是有利的，例如，胃肠功能失调(例如，抑制肠内活动性，便秘，GI括约肌收缩，恶心，呕吐(呕)，胆痉挛，阿片样物质肠功能障碍，绞痛，烦躁，瘙痒，尿潴留，呼吸抑制，乳头收缩，心血管影响，胸腔壁僵直和咳嗽抑制，应激反应的抑制和与使用麻醉性镇痛等等相关的免疫抑制，或其组合。由此，从接受阿片样物质患者的生活质量以及减少慢性便秘所引起的并发症(例如，痔，食欲抑制，粘膜破裂，败血症，结肠癌危险和心肌梗塞)的观点来看，使用所提供的化合物或组合物可以是有利的。

在一些实施方案中，提供的化合物或组合物可用于给予接受急性阿片样物质给予的患者。在一些实施方案中，提供的化合物或组合物可用于给予患有手术后胃肠功能失调的患者。

在其它实施方案中，所提供的化合物或组合物也可用于给予接受慢性阿片样物质给予的患者(例如，接受阿片样物质治疗的晚期疾病患者，例如AIDS患者，癌症患者，心血管患者；为了控制疼痛而接受长期阿片样物质治疗的患者；为了保持阿片样物质戒除而接受阿片样物质治疗的患者)。在一些实施方案中，患者是为了控制慢性疼痛而使用阿片样物质的患者。在一些实施方案中，患者是晚期疾病患者。在其它实施方案中，患者是接受阿片样物质戒除维持治疗的人。

替代性或额外使用所提供的化合物或组合物可以是为了治疗、降低、抑制或预防阿片样物质使用的影响，包括，例如，内皮细胞(例如，血管内皮细胞)的异常迁移或增生，增加血管生成和增加机会传染物(例如，绿脓杆菌)的致死因子生成。所提供的化合物或组合物的额外有利的用途包括：治疗阿片样物质诱导的免疫抑制、血管生成的抑制、血管增生的抑制、治疗疼痛、治疗炎症性病症(例如炎症性肠综合症)、治疗传染病和肌肉骨骼系统的疾病(例如骨质疏松症，关节炎，骨炎，骨膜炎，肌病)和治疗自身免疫疾病。

在某些实施方案中，所提供的化合物或组合物可以用于预防、抑制、降低、延迟、减弱或治疗胃肠功能失调的方法，包括但不限于：过敏性肠综合症，阿片样物质诱导的肠功能障碍，大肠炎，手术后或产后肠梗阻，恶心和/或呕吐，胃的活动性和排空降低，抑制胃和小肠和/或大肠动力，非促进性分节收缩的幅度增加，总胆管括约肌收缩，肛管括约肌弹性增加，对直肠膨胀的反射弛豫削弱，胃、胆、胰腺或小肠分泌减弱，从肠内含物中吸收的水增加，胃-食管回流，胃轻瘫，腹部绞痛，腹胀，腹或心痛和不适，便秘，突发性的便秘，腹手术(例如，结肠切除术(例如，右半结肠切除术，左半侧结肠切除术，横向半结肠切除术，尾结肠切除术（colectomy takedown），低前位切除术))后的手术后胃肠功能失调，和口服给予药物或营养物质的延迟吸收。

所提供化合物或组合物的提供形式也用于治疗病症，包括涉及血管生成的癌症，免疫抑制，镰形细胞贫血，血管伤口和视网膜病，治疗炎症相关的病症(例如，过敏性肠综合症)，免疫抑制，慢性炎症。

在更进一步实施方案中，提供了使用所提供化合物或组合物的兽医应用(例如，治疗家畜，例如马，狗，猫，等等)。由此，还包括与上述针对人患者所讨论的那些应用相似的兽医应用中使用所提供的制剂。例如，抑制马胃肠活动性，例如疝气和便秘，对马是可以致命的。患有疝气的马所遭受的所致疼痛可以导致诱导死亡的休克，而长期便秘病例也可以使马死亡。用外周阿片样受体拮抗剂治疗马已经在例如美国专利公开20050124657(2005年1月20日公开)中进行了描述。

还应该理解，所提供的化合物或组合物可以在组合治疗中使用，也就是说，所提供的化合物或组合物可以与一种或多种其它所需要的疗法或医学方法同时给予、在其之前给予或在其之后给予。在组合方案中使用的具体组合治疗(疗法或方法)应该考虑所需要疗法和/或方法与需要获得的治疗效果的相容性。还应该理解，使用的治疗对于相同病症可以获得预期效果(例如，可以同时与治疗相同病症所使用的另一种化合物给予制剂)，或它们可以获得不同的效果(例如，任何副作用的控制)。本文使用的其它治疗化合物（将其正常给药，以治疗或预防具体疾病或病症）称为“适合于所治疗的疾病或病症”。

在其它实施方案中，所提供的化合物或组合物和单元剂量形式可有效用于制备药物，包括但不限于：用于治疗阿片样物质使用的副作用(例如，胃肠副作用(例如，抑制肠活动性，GI括约肌收缩，便秘)恶心，呕吐，呕，焦虑，瘙痒，等等)的药物或其组合。本发明的化合物和其可药用组合物和制剂可有效用于制备药物，用于治疗接受急性阿片样物质治疗的患者(例如，接受急性阿片样物质给予的患有手术后胃肠功能失调的患者)，或治疗长期使用阿片样物质的患者(例如，接受阿片样物质治疗的晚期疾病患者，例如AIDS患者，癌症患者，心血管患者；为了控制疼痛而接受长期阿片样物质治疗的患者；或为了维持阿片样物质戒除而接受阿片样物质治疗的患者)。更进一步的，制备用于治疗下列的药物：疼痛治疗，炎症性病症(例如炎症性肠综合症)的治疗，传染病的治疗，肌肉骨骼系统的疾病的治疗(例如骨质疏松症，关节炎，骨炎，骨膜炎，肌病)，自身免疫疾病和免疫抑制的治疗，腹手术(例如，结肠切除术(例如，右半结肠切除术，左半侧结肠切除术，横向半结肠切除术，尾结肠切除术（colectomy takedown），低前位切除术)后的手术后胃肠功能失调、突发性便秘和肠梗阻(例如，手术后肠梗阻，分娩后肠梗阻)的治疗，和病症例如涉及血管生成的癌症、慢性炎和/或长期疼痛、镰形细胞贫血、血管伤口和视网膜病的治疗。

本发明更进一步包括药物包装和/或试剂盒，其包含所提供的化合物或组合物和容器(例如，箔或塑料封装，或其它合适容器)。任选，使用说明书另外提供于这种试剂盒中。

如本文所描述，本发明提供了测定(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的样品纯度的方法。在某些实施方案中，这种方法可以使用参考标准。本文使用的术语“参考标准”是指药物物质、赋形剂、杂质、降解产物、营养增补剂、药典试剂（compendial reagents）和性能校正品的高度表征的样品。需要将它们用于进行美国药典所定义的正式的USP-NF测试和试验。正如本领域普通技术人员所理解的那样，USP参考标准还用作校正品(例如，颗粒统计、熔点、和滴定标准和作为空白和对照物)。参考标准主要用于色谱和分光光度法。在某些实施方案中，本发明提供了化合物II-1作为参考标准。在一些实施方案中，本发明提供了试剂盒，其包含：化合物II-1参考标准和任选下列的一个或多个参考标准：(R)-N-甲基纳曲酮溴化物、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H和杂质I，如下面实施例1所详述。

为了可以更充分地理解本文描述的发明，列出下列实施例。应该理解，这些实施例仅仅用于说明性目的，不应该将其理解为以任何方式限制本发明。

经过必要的变更，本发明每个方面的所有特征适用于所有其它方面。

实施例

一般方法

化合物III-1可以例如按照国际专利申请公开WO2006/127899所详细描述的方法来制备，本文结合其全部内容作为参考。

使用Agilent 1100 HPLC系统(与Applied Biosystems-PE SCIEX QSTAR PULSAR i四极飞行时间型串联质谱仪连接，配备电喷射离子化离子源，在阳离子化模式下操作)进行质谱分析。使HPLC洗脱液分裂（split）以大约50μL/min的流速进入到质谱仪的离子源中。

在DMSO-d₆中进行化合物II-1的NMR谱分析，在配备三共振反向检测(TXI)探头的Bruker DRX^-500 NMR谱仪上获得谱。TMS用作质子共振(δ¹H，在0.00处)的内标，溶剂DMSO-d₆用作碳共振(δ¹³C，在39.5处)的内标。

本文使用下列缩写，并且具有下列含义∶

缩写索引

。

实施例1

RRT 0.60的分离和特征鉴定

在20 mg/mL等渗盐水溶液中，用HPLC分析预先鉴定甲基纳曲酮(化合物III-1)的至少三个降解产物(当通过HPLC分析产物时，确定为在大约0.72、0.89和1.48处的RRT峰)。参见，例如，美国专利申请公开20040266806(2004年12月30日公开)和WO2008/019115(2008年2月14日公开)。近来，检验了包含甲基纳曲酮的预装填注射器的降解物的生成。观察到一种新的降解产物，具有大约0.60的RRT。图1描述了这种预装填注射器的稳定性研究的LC/MS结果，在40℃和75%相对湿度下，经过6个月之后。

对于HPLC分析，使用Prodigy ODS-3 15cm X 2.0mm，3μm颗粒(Phenomenex)HPLC柱，流速0.25 mL/min，使用下列洗脱液∶

流动相∶强度(等度（isocratic）∶75:25(v/v)0.1% TFA在水/甲醇中

纯度∶(梯度)∶

流动相A=95:5(v/v)0.1% TFA在水/甲醇中

流动相B=35:65(v/v)0.1% TFB在水/甲醇中

梯度方案∶

柱温∶50℃

流速∶0.25 mL/分钟

检测∶UV，280 nm或310 nm

注射体积∶20μL

样品溶剂∶0.05M磷酸二钠，pH6.8。

用相关计算的相对保留时间(“RRT”)和相对响应因子(“RRF”)鉴定化合物和已知杂质的下列标准∶

。

确定杂质B(RRT 0.79，称为“环缩合”的降解物)为(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的环缩合形式，并且具有下列结构∶

。

确定杂质C(本文也指为化合物IV-1，RRT 0.89降解物，称为“醌降解物”)为(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的光降解产物，并且具有下列结构∶

。

在某些实施方案中，本发明提供了组合物，其包含下列中的一种或多种：杂质A，杂质B，杂质C，杂质D，杂质E，杂质F，杂质G，杂质H和杂质I。在一些实施方案中，本发明提供了试剂盒，其包括管瓶，管瓶包含下列中的每一种：(R)-N-甲基纳曲酮溴化物、杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H和杂质I。在某些方面中，本发明提供了试剂盒，其包含下列中的每一种：(R)-N-甲基纳曲酮溴化物、杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H和杂质I，其中每种杂质化合物包含在单独的管瓶内。

将杂质A(RRT 0.60化合物，指的是上面“二醇降解物”)分离、表征，其相当于化合物II-1。具体地说，在(R)-N-甲基纳曲酮预装填的注射器稳定性样品中，对在RRT 0.60处洗脱出的未知蜂进行LC/MS。图2描绘了总离子色谱(TIC)、UV色谱(λ=280 nm)、RRT 0.60峰所得到的质谱和UV光谱。UV光谱在大约310 nm处具有独特的吸收，这与预先鉴定的醌化合物相似，其具有大约0.89的RRT。

测定的精确质量372.1809 amu相当于C21H26NO5+的元素组成(误差∶0.4 mDa)。它的分子式表示该未知蜂包含的氧原子比上述醌化合物多一个。

实施例2

化合物II-1和II-3的合成制备∶

。

方法A

将化合物III-1的溶液溶解在1M TRIS(pH8)缓冲液中，并以1:1.2的摩尔比加入H₂O₂(30%)。在HPLC注射之前，通过加入TFA来终止反应，溶液从褐色/红色变为黄色。将该溶液注射到制备HPLC(带有Sunfire柱(50x250 mm，C18，5μm)，流速100 mL/min，流动相起始于6% MeOH/0.25%TFA，1 min，而后转变为12% MeOH/0.25%TFA的梯度，用30 min)中。将收集的馏份用两份水稀释，并将化合物吸附到反相聚合吸附剂(Strata-X，获自Phenomenex)上。将该柱置于真空条件下，除去所有残余的液体，并使用乙腈来洗脱化合物。

将大约20%水加入到洗脱液中，然后使其通过强阴离子交换柱(装有溴化物)(Strata-SAX，获自Phenomenex)。通过用二氯甲烷提取，从洗脱液中除去乙腈。将水层的pH值调节至4.2(避免水解的最佳酸度)，而后冷冻干燥，获得红色粉末。通过将红色粉末溶解在水中，并将溶液放入到水浴(70℃)中，使晶体立即形成而将化合物结晶。过滤晶体，真空干燥，提供化合物II-1红色晶体。所得到的晶体化合物II-1的X射线衍射图描绘于图12中。所得到的晶体化合物II-1的质谱描绘于图13中。所得到的晶体化合物II-1的¹H NMR描绘于图14中。

方法B

将化合物III-1的溶液溶解在1M TRIS(pH8)缓冲液中，并以1:2的摩尔比加入H₂O₂(30%)。在室温下保持大约30分钟之后，通过加入TFA来终止反应，溶液从褐色/红色变为黄色。将该溶液注射到制备HPLC(带有Sunfire柱(50x250 mm，C18，5μm)，流速100 mL/min，流动相起始于6% MeOH/0.25%TFA，1 min，而后转变为12% MeOH/0.25%TFA的梯度，用30 min)中。将收集的馏份立即冷冻，并冻干，得到化合物II-3黄色固体。

化合物III-1与H₂O₂反应形成化合物II-3是在不同的pH值条件下进行的，以便测定pH值对反应的影响。据发现，在酸性pH值下，化合物III-1与H₂O₂的反应很慢，而在碱性pH值下，随着pH值的升高，反应更快(参见图3)。

使用下列测定化合物II-3的结构说明∶UV光谱；ESI-MS；MS/MS；¹H NMR，¹³C NMR和二维NMR技术，如下面所详述。下面描绘了位置编号。

NMR结果

使用COSY、HSQC、HMBC和ROESY光谱，对¹H和¹³C NMR共振进行分配。所述分配列在下面表1中。

表1. 在DMSO-d₆中，化合物II-1的¹H和¹³C共振分配

位置	基团	碳位移^a	质子位移^b
				1	CH	141.0	7.33(双峰, J=9.6 Hz)
2	CH	127.1	6.38(双峰, J=9.6 Hz)
				3	C	182.2	---
4	C	151.1	---
				4-OH	OH	---	12.21
5	CH	74.8	5.08
				6	C	205.7	---
7	CH₂	35.1	2.70, 2.16
				8	CH₂	34.2	1.93
9	CH	66.7	4.44(双峰, J=7.0 Hz)
				10	CH	129.1	6.59(双峰, J=7.0 Hz)
11	C	139.3	---
				12	C	113.5	---
13	C	48.5	---
				14	C	72.4	---
14-OH	OH	---	6.82
				15	CH₂	24.8	2.50, 1.95
16	CH₂	53.8	3.35(dd, J=13.8, 3.3 Hz), 3.01(td, J=13.8, 3.1 Hz)
				17	CH₂	70.7	3.51(dd, J=13.4, 5.0 Hz), 2.87(dd, J=13.4, 9.2 Hz)
18	CH	4.0	1.34
				19	CH₂	5.4	0.77, 0.57
20	CH₂	3.2	0.72, 0.40
				21	CH₃	49.7	3.59

^a 位移相对于DMSO-d₆(δ¹³C=39.5)。　　　

^b 位移相对于TMS(δ¹H=0.0)。

COSY光谱(图6)表明，除了H-5之外，所有的¹H-¹H自旋（spin）系统与醌化合物(杂质D)所观察到的那些自旋系统相同。在醌化合物(杂质D)中，C-5是亚甲基碳，具有两个充分拆分的非对映异构的质子，在化合物II-1中，H-5是次甲基质子(在δ5.08处)。 HSQC光谱(图7)证实了C-5次甲基的存在，其表明H-5与δ74.8(与氧连接的碳的典型的化学位移)处的碳相连接。

在¹H NMR谱(图8)中，在δ12.21和8.58处观察到两个羟基质子，分别分配于C-4和C-5 OH基团。它们的低磁场化学位移和宽峰形状表明它们彼此很接近，表示C-5羟基在α方向上，如下面所描绘。

HMBC光谱(图9)提供了额外的证据：C-5的羟基面向下面。H-5显示了与C-12的强的三键相互关系，要求它们具有如下面所描绘的反式共面关系∶

。

ROESY光谱证实了H-5的轴向(图10)。H-5显示了NOEs的1,3-diaxal类型，C-14-OH在δ6.82处，H-8在δ2.70处，和H-14在δ2.50处。化合物II-3的¹³C NMR谱示于图11中。

实施例3

合成的化合物II-3和分离的RRT 0.60的比较

利用LC-MS分析按照实施例2方法B制备的化合物II-3。如图2所描绘，大约9分钟时洗脱的主尖锋与RRT 0.60峰具有相同的质谱和UV光谱。此外，测定的精确质量372.1785 amu提供了相同的离子式(误差∶-2.0 mDa)。另外，按照实施例2方法B制备的化合物II-3的尖峰进入到从实施例1描述的稳定性研究中所得到样品的尖峰中。图4显示了非尖峰和尖峰样品两者的UV色谱。RRT 0.60的峰明显地表示合成的化合物II-3是相同的化合物。对m/z 372的离子进行LC-MS/MS，获得结构信息。RRT 0.60峰和合成样品的MS/MS数据示于图4的下部两个方框中。两个光谱相当类似，不过，合成化合物提供了更好得多的碎片离子强度。具有基于NMR数据的化学结构的片段分配示于图5中。LC/MS数据与NMR实验所测定的结构一致。

实施例4

氧化方法的评价∶

如上面实施例2所述，通过用H₂O₂氧化化合物III-1来制备化合物II-1。进行额外氧化剂的筛选，以便使氧化反应的产率和纯度最佳化。进行该反应的概述列在下面表A至E中。本文使用的术语“SLI”是指单一最大杂质。

正如下面表A所概括的那样，反应在室温下进行，使用1当量的各种氧化剂。

对于每个反应，将0.5 g III-1与6 mL TRIS.HCl(1M，pH8.0，在水中)混合。加入氧化剂(1当量)，并将得到的混合物在室温下搅拌指定的时间。利用HPLC(280 nM)监控所有的反应。%数值按照色谱数值报道。

表A.

。

如下面表B所概述，用变化当量的氧化试剂(即，氧化剂)和变化的反应时间进行氧化反应。

对于每个反应，将0.5 g III-1与6 mL TRIS.HCl(1M，pH8.0，在水中)混合，并冷却至～10℃。加入氧化剂(规定量)，并在室温下将得到的混合物搅拌指定的时间。

表B.

。

如下面表C所概述，用变化当量的H2O2和tBHP进行氧化反应，并在室温下延长搅拌时间。

对于每个反应，将0.5 g III-1与6 mL TRIS.HCl(1M，pH8.0，在水中)混合。加入氧化剂，并将得到的混合物搅拌指定的时间。

表C.

。

如下面表D所概述，用变化当量的tBHP进行氧化反应，并在高温(35℃)下延长搅拌时间。

对于每个反应，将0.5 g III-1与6 mL TRIS.HCl(1M，pH8.0，在水中)混合。加入指定数量的氧化剂，并在35℃将反应搅拌指定的时间。

表D.

。

如下面表E所概述，在变化的溶剂中，用tBHP进行氧化反应。

对于每个反应，将0.5 g III-1与3 mL TRIS.HCl缓冲液(1M，pH8.0)和指定的溶剂(3 mL)混合。加入70% TBHP(5当量)，并将得到的混合物在室温下搅拌48小时。

表E.

。

实施例5

钨酸盐稳定性研究

进行短期评价，以便研究钨酸盐对甲基纳曲酮溴化物在高温和氧气接触的应力条件下形成RRT 0.60的影响。对于该应力样品，用1 mM钨酸钠掺入制剂，并在室温下吹入氧气一小时。然后将溶液在121℃进行热压处理一小时。还制备对照样品，在这些样品中，在不接触钨酸盐、氧气或加热的条件下制备每个溶液。

在经过上述应力条件之后，使样品接触钨、氧气和热量，产生28 ppm的RRT 0.60降解物。在对照样品中观察到更低水平的这种降解物。基于该研究，钨可以帮助催化形成RRT 0.60降解物。在对照样品中观察到的RRT 0.60降解物的水平表明，在这种氧化降解反应中，温度和氧含量也是影响因素。

进行18个月的长期评价，以便研究钨酸盐对甲基纳曲酮溴化物在标准条件下、在标准无菌、清洁、备用于装填的(SCF^TM)注射器(1 mL Becton Dickinson(BD)注射器，1型硼硅玻璃，带有27G x ?英寸的不锈钢针头，BD塞11510，West 4023/50灰色溴化丁基橡胶。涂层∶接触面用Daikyo Fluro Tec，其余部分用B2-40涂层，BD刚性针头屏蔽带有FM27/0橡胶针头屏蔽和聚丙烯刚性屏蔽罩)中形成RRT 0.60的影响。在该研究中，将包含8 mg甲基纳曲酮单元剂量(8 mg甲基纳曲酮在0.4 mL水中，水中含有2.6 mg氯化钠、0.16 mg依地酸钙二钠和0.12 mg甘氨酸盐酸盐)或12 mg甲基纳曲酮单元剂量(12 mg甲基纳曲酮在0.6mL水中，水中含有3.9 mg氯化钠、0.24 mg依地酸钙二钠和0.18 mg甘氨酸盐酸盐)的注射器保存在下列条件下∶25℃/60%RH、30℃/75%RH和40℃/75%RH。该研究的结果表明，在25℃和60% RH条件下，形成的RRT 0.60化合物的水平达到40 ppm，在30℃和75% RH条件下，高达204 ppm。在40℃和75% RH条件下经过6个月之后，观察到145 ppm。这些结果示于下面表2中。

表2. RRT 0.60在标准SCF注射器中的数量(ppm)^*。

进行另一个稳定性研究，以便研究甲基纳曲酮溴化物在“超低”钨注射器(Becton Dickenson)(1 mL BD注射器，1型硼硅玻璃，带有29G x ?英寸的不锈钢针头(超低钨)，BD塞11510，West 4023/50灰色溴化丁基橡胶。涂层∶接触面用Daikyo Fluro Tec，其余部分用B2-40涂层，BD刚性针头屏蔽带有热塑性弹性体(TPE)针头屏蔽和聚丙烯刚性屏蔽罩)中保存对形成RRT 0.60的影响。该研究的结果表明，在40℃和75%相对湿度条件下经过6个月之后，或在25℃和60%相对湿度条件下经过9个月之后，形成的RRT 0.60化合物不超过25 ppm或更高的水平。这些结果示于下面表3中。

表3. RRT 0.60在超低钨注射器中的数量(ppm)^*

条件

MNTX

T₀

1个月

3个月

6个月

9个月

12个月

25 C/60%RH

8 mg

<7

7

14

30 C/75%RH

8 mg

<7

9

<7

11

20

40 C/75%RH

8 mg

<7

14

NA

* 所有的数值以ppm报道，利用310 nm HPLC方法获得

LOQ=7 ppm

NA=不适用。

实施例6

化合物II-1多晶型物的X射线衍射研究

按照实施例2方法A制备的化合物II-1多晶型物的粉末XRD分析是在X'PERT-MPD粉末X射线衍射仪上进行的。

将样品研磨成细粉末，并装入带有零背景板的腔式样品座中。以角位置(2θ)的粉末X射线衍射为特征的峰位置描绘在图15中。在某些实施方案中，本发明提供了化合物II-1的结晶形式，其特征在于：所述形式具有基本上与图15所描绘的粉末X射线衍射图相似的粉末X射线衍射图。

实施例7

HPLC方法

如本文所描述，甲基纳曲酮溴化物的潜在杂质的检测和定量是药物质量和纯度的重要的、并且是法规控制的方面。本发明的另一个方面提供了在法规控制标准所要求的水平下用于检测杂质A(本文还指的是RRT 0.60降解物、杂质或化合物以及也指化合物II-1)的分析方法。在某些实施方案中，该分析方法能够检测N-甲基纳曲酮溴化物样品中大约2.5 ppm水平的杂质A。在一些实施方案中，该分析方法能够检测N-甲基纳曲酮溴化物样品中小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm水平的杂质A。在某些实施方案在，这种分析方法如下∶

柱∶Prodigy ODS(3)15 cm X 4.6 mm, 3 μm颗粒；

流速∶1.0 mL/min；

检测∶310 nm UV；

柱温∶37℃；

自动取样器温度∶5℃；

样品溶剂∶含有EDTA的pH5.0乙酸钠缓冲液(如下制备：将大约238 g NaOAc溶解在3升水中，加入45 mL冰醋酸，并用水稀释至50升)；

流动相A=950 mL/50 mL/1 mL水/甲醇/TFA；

流动相B=500 mL/ 500 mL/1 mL水/甲醇/TFA；

梯度方案∶

。

N-甲基纳曲酮溴化物的标准样品(浓度0.0004 mg/mL)的制备进行如下：将20 mg N-甲基纳曲酮溴化物称重到两个单独的100.0 mL容量瓶中。加入50 mL样品溶剂，以便将N-甲基纳曲酮溴化物溶解，并用样品溶剂将得到的溶液稀释至体积。将2.0 mL得到的溶液移液到第二个100 mL容量瓶中，然后用样品溶剂将其稀释至体积。

使用下列方程式，计算存在于(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的化合物II-1的数量∶

化合物II-1(ppm)=(Ai)(Cr)(V)(RF)(1000000)

(Ar)(Ws)

其中∶

Ai=得自于样品色谱的杂质峰的面积；

Cr=标准制剂中(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的浓度(mg/mL)；

V=样品溶液的体积(mL)；

RF=校正化合物II-1的响应因子；

1000000=转换系数(ppm)；

Ar=得自于标准色谱的(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的平均值面积；

Ws=(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的样品重量(mg)。

实施例8

钨或其衍生物的水平可以利用任何技术来测定，包括US 20080103438中所描述的方法。空注射器中的钨或其衍生物的水平可以如下测定：提取，而后进行ICP-MS分析。本领域普通技术人员已经了解了这种提取和分析方法，并且包括EPA方法6020A和200.8中所描述的方法，本文结合其全部内容作为参考。

不同技术可以提供不同结果，这取决于如何将钨或衍生物从测试的玻璃医学容器中腐蚀性地除去(即，技术的腐蚀性越强，例如用酸，钨残余物的除去水平更高)。例如，可以用含酸溶液洗涤玻璃医学容器(即提取)，并测定提取物中的钨，例如，在下列中所描述的方法：Wang等人Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 19(1999)937-943, "Determination of Tungsten in Bulk Drug Substance and Intermediates by ICP-AES and ICP-MS"，本文结合其所有内容作为参考。可以使用类似的方法来测定含钨残余物的水平。

下列方法是可以用于测定存在于空注射器中的钨数量的一般方法∶

1. 用纯水(例如，利用实验室净化系统制备，Millipore Milli Ro 4)填充玻璃医学容器(例如，空注射器)，并密封该玻璃医学容器(例如，用尖帽密封)；

2. 在室温下，将填充的玻璃医学容器放到含水的超声波槽中60分钟；

3. 取出玻璃医学容器，并将所容纳的溶液分配到样品容器中；和

4. 利用电感偶合等离子体质谱(ICP/MS)，测定溶液中钨的浓度。

实施例9

。

按照上面的常规反应路线，将化合物III-1的溶液溶解在1M TRIS(pH8)缓冲液中，加入过氧化叔丁醇(5摩尔当量)，并将得到的混合物在室温下搅拌两天。通过加入TFA来终止反应，并用二氯甲烷（dichromomethane）提取该溶液。将水相分离，浓缩，用于HPLC注射。在Sunfire柱(50x250 mm，C18，5μm，获自Waters)上进行制备HPLC纯化(流速50 mL/min，流动相起始于5% ACN/0.1%TFA，并且转变为10% ACN/0.1%TFA的梯度，用30分钟)。将收集的馏份冷冻干燥，并在与第一次纯化相同的条件下进行第二次纯化。将收集的馏份施加到反相SPE(固相提取)管(Strata-X，获自Phenomenex)中，将其放在真空条件下，以除去所有残余的液体。然后使用20%乙腈/水，洗脱化合物，然后使其通过强阴离子交换SPE管(Strata-SAX，获自Phenomenex)(预先用溴化钠处理)。将收集的溶液冷冻干燥，得到化合物II-1红色粉末。

更具体地说，将100 g N-(环丙基甲基)-去甲羟吗啡酮甲溴（-noroxymorphone methobromide）(III-1)加入到带有热电偶的磁力搅拌的2升烧瓶中，而后加入600 mL三(羟甲基)氨基乙烷。然后，将180 mL 70%过氧化叔丁醇(5当量)加入到浆液中，此时，浆液变成溶液，并且颜色逐渐变深。在室温下将该溶液搅拌69小时，并在62-67%转化率时利用HPLC进行测定。然后将20 mL三氟乙酸加入到该溶液中，达到pH2，并用800 mL二氯甲烷洗涤。分离各层，并再次用200 mL二氯甲烷洗涤水层。将损耗的有机部分合并，并用2 x 200 mL水反萃取。然后将所有的含水部分合并，用2 x 400 mL新的二氯甲烷洗涤。然后分离各层，分离包含化合物II-3的含水部分(～1.1升)(产率未知)，并在-20℃保存，准备进行纯化步骤。评价%转化率所使用的分析方法如下∶

粗品水相产物的分析方法

Agilent 1100 HPLC

柱∶4.6 mm X 150mm Sunfire C18

λ 280 nm

流速∶1ml/min

梯度∶

时间 %A水w/0.1%TFA %B乙腈w/0.1%TFA

0 95 5

10 85 15

12 5 95

15 5 95

16 95 5

20 95 5。

使用下列方法，通过制备HPLC纯化粗品化合物II-3。

带有Varian Prostar 320检测器的Varian PrepStar泵

柱∶50 mm X 250 mm Sunfire C18 5 micron

λ 260 nm

流速∶50 ml/min

梯度

时间 %A水w/0.1%TFA %B乙腈w/0.1%TFA

0 95 5(流速=0)

1 95 5(流速=50 ml/min)

31 90 10

35 10 90

40 10 90

42 95 5

47 95 5

48 95 5(流速=0)。

通过注射100 mL(每次注射)进行第一次制备HPLC纯化，并借助于自动级份收集器收集50 mL级份。典型地，收集级份15-22，合并，冷冻干燥。

通过将所收集的粗品TFA盐物质(粗品II-3)(每次大约2 g，用20 mL水稀释)返回加载到制备柱上(用相同的梯度和缓冲系统)，进行第二次制备HPLC纯化。典型地收集级份23至29，合并。然后用水稀释这种合并的级份1:1，分成4个相等的体积，而后施加到已经用下列方法制备的4个Strata-X SPE Giga管(60ml，反相树脂收集器)上∶

● 反相柱(Strata X 33微米)的吹扫过程；

● 用3个床体积的乙腈洗脱，而后用3个床体积的水洗脱；和

● 将该管真空干燥5分钟，而后用20% ACN-水洗脱所需要的级份，并收集(～20ml X 4)。

将合并的溶液分成4个相等的体积，并施加到用下列方法制备的4个Strata SAX SPE Giga管(60ml，强阴离子交换树脂)上∶

● 离子交换柱Strata SAX 55微米的吹扫过程；和

● 用3个床体积的乙腈洗脱，而后用3个床体积的1M溴化钠洗脱，而后用5个床体积的水洗脱。

收集所需要的级份，并用20% ACN-水洗涤该管，直到不再洗脱出有色溶液为止。将总共～45ml X 4收集、合并、冷冻干燥。

将多个批次的冷冻干燥物质重新溶解在水中(～16g，在150ml水中)，冷冻干燥，得到15.9 g的II-1暗红色松散的固体。

尽管我们已经描述了本发明的许多实施方案，很明显，可以改变我们的基本实施例，以便提供使用本发明的化合物和方法的其它实施方案。因此，应理解，本发明的范围由附加的权利要求来定义，而不是由通过举例所表示的具体实施方案来定义。

Claims

1.式I的化合物∶

Figure 2014100195118100001DEST_PATH_IMAGE001

其中∶

R¹和R²各自独立地是C_1-6脂族基团；和

X^-是合适的阴离子。

2.按照权利要求1的化合物，其中X^-是合适的布朗斯台德酸的阴离子。

3.按照权利要求2的化合物，其中布朗斯台德酸是卤化氢、羧酸、磺酸、硫酸或磷酸。

4.按照权利要求2的化合物，其中X^-是氯根，溴根，碘根，氟根，硫酸根，硫酸氢根，酒石酸根，硝酸根，柠檬酸根，酒石酸氢根，碳酸根，磷酸根，苹果酸根，马来酸根，富马酸根，磺酸根，甲基磺酸根，甲酸根，羧酸根，硫酸根，甲基硫酸根，三氟乙酸根，或琥珀酸根。

5.按照权利要求4的化合物，其中X^-是溴根。

6.按照权利要求1的化合物，其中R¹是C_1-4脂族基团，R²是低级烷基。

7.按照权利要求6的化合物，其中R¹是(环烷基)烷基或烯基。

8.按照权利要求7的化合物，其中R¹是环丙基甲基或烯丙基，和R²是甲基。

9.按照权利要求1的化合物，其中所述化合物是式II或II'的化合物∶

Figure 2014100195118100001DEST_PATH_IMAGE002

其中，每个X^-是合适的阴离子。

10.按照权利要求9的化合物，其中所述化合物是化合物II-1或II-2∶

Figure 2014100195118100001DEST_PATH_IMAGE003

。

11.化合物II-1的结晶形式∶

Figure 2014100195118100001DEST_PATH_IMAGE004

。

12.一种方法，其包括下列步骤∶

(a) 提供(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的样品；

(b) 进行(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品的分析；和

(c) 测定化合物II-1在(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的量。

13.按照权利要求12的方法，其中步骤(c)进一步包括测定化合物IV-1在(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的量的步骤。

14.按照权利要求13的方法，其中步骤(c)包括：测定化合物II-1和化合物IV-1在(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的总量小于大约60 ppm、大约10 ppm、大约5 ppm、大约3.3 ppm、大约2.5 ppm或大约1 ppm。

15.按照权利要求13的方法，其中步骤(c)包括：测定化合物II-1和化合物IV-1在(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的总量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm。

16.一种方法，其包括下列步骤∶

(a) 提供(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的样品；

(b) 提供化合物II-1的样品∶

Figure 2014100195118100001DEST_PATH_IMAGE005

(d) 测定化合物II-1在(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的量。

17.一种方法，其包括下列步骤∶

(a) 提供(R)-N-甲基纳曲酮溴化物的样品的HPLC色谱；

(b) 提供化合物II-1的样品的HPLC色谱∶

Figure 2014100195118100001DEST_PATH_IMAGE006

(c) 比较HPLC色谱，并测定化合物II-1在(R)-N-甲基纳曲酮溴化物样品中的量。

18.一种试剂盒，其包含式I的化合物∶

其中∶

R¹和R²各自独立地是C_1-6脂族基团；和

X^-是合适的阴离子，

和包含式I化合物的容器。

19.按照权利要求18的试剂盒，其中化合物是化合物II-1∶

该试剂盒进一步包含下列的一个或多个参考标准：(R)-N-甲基纳曲酮溴化物、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H和杂质I。

20.按照权利要求19的试剂盒，其中每个参考标准提供于单独的管瓶中。

21.按照权利要求19的试剂盒，其中每个参考标准一起提供在相同的管瓶中。

22.包含液体组合物的预装填注射器，该液体组合物包含式III的化合物∶

其中A^-是合适的阴离子；和

其中该预装填注射器基本上不含钨。

23.按照权利要求22的预装填注射器，其中该液体组合物包含小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm的式II的化合物∶

Figure 2014100195118100001DEST_PATH_IMAGE010

其中X^-是合适的阴离子。

24.按照权利要求23的预装填注射器，其中液体组合物包含总量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm的式II化合物和式IV化合物∶

其中∶

R¹和R²各自独立地是C_1-6脂族基团；和

X^-是合适的阴离子。

25.包含液体组合物的预装填注射器，该液体组合物包含化合物III-1∶

其中该预装填注射器基本上不含钨。

26.按照权利要求25的预装填注射器，其中该液体组合物包含小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm的化合物II-1∶

。

27.按照权利要求26的预装填注射器，其包含总量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm的化合物II-1和化合物IV-1∶

。

28.包含液体组合物的预装填注射器，该液体组合物包含在0.4 mL水中的8 mg化合物III-1，以及化合物II-1∶

其中化合物II-1的存在量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm，且其中该预装填注射器基本上不含钨。

29.按照权利要求28的预装填注射器，其中该液体组合物进一步包含2.6 mg氯化钠、0.16 mg依地酸钙二钠和0.12 mg甘氨酸盐酸盐。

30.包含液体组合物的预装填注射器，该液体组合物包含在0.6 mL水中的12 mg化合物III-1，以及化合物II-1∶

31.按照权利要求30的预装填注射器，其中该液体组合物进一步包含3.9 mg氯化钠、0.24 mg依地酸钙二钠和0.18 mg甘氨酸盐酸盐。

32.一种方法，其包括下列步骤∶

(i)提供基本上不含钨的预装填注射器，其包含单元剂量的液体组合物，该液体组合物包含在0.4 mL水中的8 mg化合物III-1，以及化合物II-1∶

其中化合物II-1的存在量小于大约25、大约100、大约125、大约150、大约185、大约187或大约190 ppm；

(ii)通过皮下注射给予患者单元剂量。

33.按照权利要求32的方法，其中患者是患有阿片样物质引起的便秘的患者。

34.按照权利要求32的方法，其中钨的存在量小于十亿分之50。

35.按照权利要求34的方法，其中钨的存在量小于十亿分之12。

36.按照权利要求32的方法，其中液体组合物进一步包含依地酸钙二钠和甘氨酸盐酸盐。

37.一种方法，其包括下列步骤∶

(i)提供基本上不含钨的预装填注射器，其包含单元剂量的液体组合物，该液体组合物包含在0.6 mL水中的12 mg化合物III-1，以及化合物II-1∶

(ii)通过皮下注射给予患者单元剂量。

38.按照权利要求37的方法，其中患者是患有阿片样物质引起的便秘的患者。

39.按照权利要求37的方法，其中钨的存在量小于十亿分之50。

40.按照权利要求39的方法，其中钨的存在量小于十亿分之12。

41.按照权利要求37的方法，其中液体组合物进一步包含依地酸钙二钠和甘氨酸盐酸盐。

42.一种方法，其包括下列步骤∶

(a) 提供式III的化合物∶

其中A^-是合适的阴离子；和

(b) 用氧化剂处理式III的化合物，形成式II的化合物∶

其中X^-是合适的阴离子。

43.按照权利要求42的方法，其中式III的化合物是化合物III-1∶

。

44.按照权利要求42的方法，其中式II的化合物是化合物II-1∶

。

45.按照权利要求42的方法，其中氧化剂选自过氧化物、苯醌或过酸。

46.按照权利要求42的方法，其中氧化剂选自过氧化氢、过氧化叔丁基醇、MCPBA(间氯过苯甲酸)、过乙酸、oxone(过一硫酸氢钾)或DDQ(2,3-二氯-5,6-二氰基苯醌)。