CN103705521A - 一类治疗脑梗塞的化合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一类化合物及其药物组合物和新用途，所述新用途为在制备治疗脑梗塞的药物中的用途。上述化合物治疗脑梗塞能够达到作用非常显著的效果。

Description

一类治疗脑梗塞的化合物及其用途

技术领域

本发明涉及一类治疗脑梗塞的化合物及其可药用盐和其类似物，由上述化合物及其可药用盐和其类似物制备的药物组合物，以及所述化合物或其可药用盐及其类似物在制备治疗脑梗塞的药物中的用途。 

背景技术

脑梗塞是临床上的常见病，该病的特点是产生原因较多，临床应用的药物也很多，但是大多数药物发挥的治疗效果比较微弱，所以亟需一种非常有效地治疗脑梗塞的药物。 

脑梗塞大致可分为脑栓塞，脑血栓，脑腔梗等脑梗塞性疾病。这些疾病在我国的发病率、致残率和死亡率都很高。脑梗塞是指由于各种原因导致的脑血管堵塞，致使脑血管功能障碍，引起相关症状。脑梗塞通常表现为局限性脑组织的坏死或软化，是严重危害人类健康的主要疾病之一。脑梗塞是一个及其复杂的病理生理过程。目前，临床常用的治疗脑梗塞的药物，例如抗血小板药物、抗凝药物、溶栓药物、降纤药物以及一些中药疗法等效果欠佳，往往不能及时起效，即使起效，效果也不好，造成病患不可逆的残疾，行成终身遗憾。 

本发明人意外地发现一组化合物及其类似化合物或其可药用盐在制备治疗脑梗塞的药物上有意想不到的效果，目前对于这一类化合物治疗脑梗塞尚无报道。 

发明内容

本发明提供了一组化合物及其类似化合物或其可药用盐在制备治疗脑梗塞的药物中的新用途。 

本发明的技术方案如下： 

本发明提供了一组可以治疗脑梗塞疾病的化合物或其可药用盐，及其类似物，所述化合物的结构如下： 

式(I)化合物及其类似物或其可药用盐可以制备成经局部给药，胃肠道给药或是非胃肠道给药的各种制剂。所述制剂包括普通制剂、控释制剂、靶向制剂等。所述的局部给药制剂为经过头部给药的粉针剂、水针剂、微球制剂、纳米制剂、脂质体制剂、树枝状高分子制剂、聚乙二醇修饰制剂、水凝胶制剂等。所述的非胃肠道给药制剂为适宜静脉注射、肌肉注射、皮下注射、骨髓注射、透皮给药、粘膜给药以及吸入 给药的剂型。 

本发明人研究发现：此类化合物可极大地缓解脑梗塞症状，从药效学实验的结果看，此类化合物的治疗效果超出目前临床应用的药物。此新适应症的开发将为对未来脑梗塞患者的恢复起到很大的作用。对于解除病患痛苦，缓解这一类疾病的症状，提高患者和其家人的生命质量，促进社会和谐意义深远。 

具体实施方式

本发明所用的式(I)化合物可以商购CCT129202，R406，EXEL2880，AST487，也可以根据公开的制备方法进行制备，其并不限制本发明的保护范围。 

药物制备实施例 

所述化合物A结构为： 

所述化合物B结构为： 

所述化合物C结构为： 

所述化合物D结构为： 

含化合物A冻干粉针剂的制备： 

①取甘露醇、磷脂、甘油、环糊精衍生物、二甲基亚砜和泊洛沙姆共100mg和200-900mg式(A)化合物在注射用水中混合并使之溶解； 

②混匀溶解后待稳定后先用0.45um微孔滤膜粗滤，再用0.2um微孔滤膜过滤； 

③分装入小西林瓶，加入其他冻干保护剂和辅料； 

④进行程序性冻干； 

⑤进行热原、无菌、可见异物、不溶性微粒等相应检查，均符合要求后待用。含化合物B冻干粉针剂的制备： 

①取甘露醇、磷脂、甘油、环糊精衍生物、二甲基亚砜和泊洛沙姆共100mg和200-900mg式(B)化合物在注射用水中混合并使之溶解； 

②混匀溶解后待稳定后先用0.45um微孔滤膜粗滤，再用0.2um微孔滤膜过滤； 

③分装入小西林瓶，加入其他冻干保护剂和辅料； 

④进行程序性冻干； 

⑤进行热原、无菌、可见异物、不溶性微粒等相应检查，均符合要求后待用。 

含化合物C冻干粉针剂的制备： 

①取甘露醇、磷脂、甘油、环糊精衍生物、二甲基亚砜和泊洛沙姆共100mg和200-900mg式(C)化合物在注射用水中混合并使之溶解； 

②混匀溶解后待稳定后先用0.45um微孔滤膜粗滤，再用0.2um微孔滤膜过滤； 

③分装入小西林瓶，加入其他冻干保护剂和辅料； 

④进行程序性冻干； 

⑤进行热原、无菌、可见异物、不溶性微粒等相应检查，均符合要求后待用。 

含化合物D冻干粉针剂的制备： 

①取甘露醇、磷脂、甘油、环糊精衍生物、二甲基亚砜和泊洛沙姆共100mg和200-900mg式(D)化合物在注射用水中混合并使之溶解； 

②混匀溶解后待稳定后先用0.45um微孔滤膜粗滤，再用0.2um微孔滤膜过滤； 

③分装入小西林瓶，加入其他冻干保护剂和辅料； 

④进行程序性冻干； 

⑤进行热原、无菌、可见异物、不溶性微粒等相应检查，均符合要求后待用。 

效果实施例： 

1药物A-D对大鼠局灶性脑梗塞的保护作用 

1.1实验动物及分组 

Wistar雄性大鼠，体重250-300g，动物饲养于环境温度控制在22℃、湿度为55％的动物房里，大鼠自由进食和饮水。在动物房适应3天后，大鼠随机分组，分为假手术组、模型组、药物A-D注射剂组和阳性药尼莫地平组。实验给药周期为一周，其中药物A-D给药方式均为静脉注射方式给药，对照组给予等量的生理盐水，在实验的第1、4、7天进行给药。 

1.2动物模型的建立 

动物于末次给药后各组动物禁食12小时，自由饮水，使用栓线法造模。插线选用日本产的高碳素钓鱼线，直径为0.20mm，长50mm，并在距前端20mm处作标记，前端在解剖镜下灼成球体后置肝素中浸泡备用。大鼠用2％的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，将动物固定后，用制备好的栓线插入颈总动脉送入颈内动脉直至大脑中动脉的起始处，停止插线，固定插线在血管外的部分，缝合动物后手术完成，待动物苏醒后可 见动物身体倾斜并且爬行似旋转状。 

1.3测定指标 

动物术后6小时腹主动脉取血2毫升血注入含10％EDTA-Na230微升、抑肽酶40微升的试管中，测定内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)，在4℃条件下以3000转每分钟的速度离心10分钟，分离血浆置于-20℃冰箱保存待测。ET、CGRP用放免法测定。将以上实验的大鼠于取血后迅速断头取右侧大脑，置冰冷生理盐水中浸10分钟后冠状切成数片，迅速将片状标本置于0.03mol.L^-1氯代三苯基四氮唑(TTC)溶液中，37℃遮光放置30分钟，并每隔6分钟翻动一次。染色后可较为清晰地分辨出正常脑组织为红色，梗塞组织为白色。将片状标本置10％福尔马林液体中避光保存。1周后称重并计算白色梗塞组织占半球重量的百分比。 

1.4统计学分析 

各组大鼠观察所得数据以均数±标准差(x±s)来表示。组间进行t检验。 

1.5实验结果 

1.5.1药物对脑梗塞大鼠血浆中ET、CGRP含量的影响 

与假手术组比较，模型组由于脑梗塞，所以CGRP水平显著降低，ET水平含量升高(P＜0.01)；与模型组比较，药物A-D均能显著升高CGRP水平，降低ET水平含量(P＜0.001或P＜0.01)，而且作用效果远强于尼莫地平用药组(P＜0.01或P＜0.05)，详见表1。 

表1不同给药组对脑梗塞大鼠血浆中ET、CGRP含量的影响 

与对照组比较^##P＜0.01，与模型组比较^*P＜0.05^**P＜0.01 

1.5.2药物对大鼠脑梗塞组织重量百分比的影响 

与假手术组比较，模型组大鼠脑梗塞组织重量百分比明显升高(p＜0.001)，显示造模成功；与模型组比较，药物A-D组明显降低脑梗塞组织重量百分比(p＜0.01)，作用显著。详见表2。 

表2不同给药组对大鼠脑梗塞组织重量百分比的影响 

与对照组比较^###P＜0.001，与模型组比较^*P＜0.05^**P＜0.01 

2药物A-D对实验性脑栓塞的保护作用 

2.1实验动物及分组 

本组两种动物进行试验，SPF雄性小鼠，体重20g左右，用于凝血试验。Wistar雄性大鼠，体重250g左右，用于血栓实验。动物均饲养于环境温度控制在20度左右、湿度55％的动物房中，自由进食和饮水。在动物房适应3天后，小鼠随机分组，即正常对照组、药物A-D组和阳性药低分子肝素钙组；大鼠随机分组，即假手术组、模型组、药物A-D组和阳性药低分子肝素钙组。对照组给予等量的生理盐水，所有组在实验的第1、4、7天同时给药。 

2.2动物模型的建立 

动物于末次给药后各组动物禁食12小时，自由饮水。大鼠用2％的戊巴比妥钠麻醉后，将整个动物固定，剪毛消毒后颈部切开，分离左颈总动脉、颈内、颈外动脉分别用血管夹夹闭颈外动脉、颈总动脉近心端、远心端。将栓塞剂摇匀后用0.25ml注射器向头部刺进颈总动脉，打开远心端血管夹，按0.1ml/只大鼠剂量将栓塞剂注射入左侧颈动脉。然后夹闭颈总动脉远心端，拔出针头，用医用胶粘合针孔。1分钟后依次放开颈总动脉远心端、近心端，颈外动脉血管夹，恢复血流并消毒清理创口，缝合 皮肤。假手术组给以同体积生理盐水代替栓塞剂。 

2.3测定指标 

2.3.1CD62P、CD63表达率的测定 

各组大鼠造模后6h，取血测定P选择素(CD62P)、溶酶体蛋白(CD63)表达，方法如下：取血2ml，用1％EDTA-K2抗凝并离心，取血小板血浆，洗后用多聚甲醛固定，置冰箱待测；血小板膜受体的标记采用单克隆抗体间接荧光标记法。将固定后的血小板悬液离心收集并去固定液，用TES洗2次去上清，取血小板悬液测定表达率，加入1∶100稀释的CD62P、CD63单克隆抗体(一抗)100μL，25℃避光孵育30min，用TES洗1次，分别加入CD61(直标)及CD62P、CD63二抗各10微升，同型对照加IgG10微升，25℃避光放置后洗2次，而后待检测，采用488纳米氩离子激光，调整在荧光直方图中将平行对照的CD62P、CD63阳性表达率以确定阴性和阳性血小板的界限，检测标本采集足够样本的血小板，用采集分析软件进行处理，结果以阳性血小板百分率表示。 

2.3.2体内血栓形成试验 

各组大鼠造模后6小时，用10％水合氯醛腹腔注射麻醉，造左下腔静脉血栓模型。2小时后，若有血栓形成则取出，高温干燥一天后称重，并记录血栓重量。 

2.3.3凝血试验 

各组小鼠与末次给药30分钟后，用毛细管法测定凝血时间。 

2.4统计学分析 

各组大鼠观察所得数据以均数±标准差(x±s)来表示。组间进行t检验。 

2.5实验结果 

2.5.1药物对实验性脑栓塞大鼠血小板活性的影响 

与假手术组比较，模型组CD62P、CD63的表达显著升高；与模型组比较，药物A-D的各个组均可以显著降低CD62P和CD63的表达(p＜0.01)，提示药物A-D对血小板活化有一定抑制作用。 

表3不同给药组对实验性脑栓塞大鼠血小板活性的影响 

与对照组比较^##P＜0.01，与模型组比较^*P＜0.05^**P＜0.01 

2.5.2药物对实验性脑栓塞大鼠血栓形成的影响 

与假手术组比较，模型组大鼠血栓形成明显增加(p＜0.01)；药物A-D的各个治疗组均能降低大鼠静脉血栓的重量，与模型组比较差异具有显著性(p＜0.01)，见表4。提示该类药物在对抗血栓形成量有较好的积极作用，各组均能够明显减少血栓的形成，从而改善脑部血液循环。A-D治疗组远强于与阳性药组低分子肝素(p＜0.05)，作用显著。 

表4不同给药组对实验性脑栓塞大鼠血栓形成的影响 

与对照组比较^##P＜0.01，与模型组比较^*P＜0.05^**P＜0.01 

2.5.3药物对小鼠凝血时间的影响 

与正常对照组比较，药物A-D组均能使凝血时间明显延长(p＜0.01或p＜0.05)，详 

见表5。说明药物A-D能够改善脑部血液循环，避免栓塞的形成，药物A-D各个用药组效果均较阳性药组更为明显(P＜0.05)。 

表5不同给药组对小鼠凝血时间的影响 

与对照组比较^*P＜0.05^**P＜0.01 。

Claims (6)

1.一类可以治疗脑梗塞的化合物或其可药用盐，及其类似物，所述化合物的结构如下：

2.一种药物组合物，其包括权利要求1所述的化合物及其可药用盐和其类似物。

3.权利要求2的药物组合物，其可以是普通制剂、控释制剂、靶向制剂等。

4.权利要求2的药物组合物，所述化合物及其可药用盐和其类似物制备成经局部给药，胃肠道给药或是非胃肠道给药的各种制剂。

5.权利要求2所述化合物及其可药用盐和其类似物在制备治疗脑梗塞的药物中的用途。

6.权利要求5的用途，其所述的脑梗塞包括脑梗塞，脑栓塞，脑血栓，脑腔梗等疾病。