CN107875215B - 一种用于贫血的中药组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明为克服现代医药对于治疗和预防贫血方面的缺陷，提供了一种中药组合物在治疗或预防贫血中的应用。该组合物的给药方式多样，毒副作用小，能够可显著逆转相关模型小鼠的体重下降，显著改善小鼠免疫脏器指数的下降，可显著改善外周血相关指标，显著增加骨髓细胞数和CD34+细胞比例。

Description

一种用于贫血的中药组合物
技术领域
本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种治疗或预防贫血的中药组合物。
背景技术
贫血症是由于身体无法制造足够的血红蛋白(一种将氧气输送到血红细胞和身体各个组织的蛋白质)造成的。当这种情况发生的时候，一个人会觉得乏力和感觉筋疲力尽、心情忧郁和易怒不安。其它症状还包括疲劳、头晕目眩、晕厥、冷漠、易怒不安、注意力集中能力不断下降和无法忍受的寒冷感觉。比如：再生障碍性贫血(aplastie anemia,AA)简称再障，是一组由化学、物理、生物因素、药物及不明原因引起的骨髓干细胞功能衰竭或异常，血液中全血细胞减少为主要表现的一组综合症，临床上通常表现为贫血、出血和感染。在现代医学研究中，其发病机制主要涉及骨髓，造血干细胞损伤，造血微环境破坏，同时也伴随免疫异常等。免疫系统失调在AA的发生、发展中起着重要的作用，多种免疫细胞和炎症因子参与调控AA的发病机制。目前，再生障碍性贫血主要以免疫抑制剂、造血干细胞移植和骨髓移植、雄性激素等治疗为主。再生障碍性贫血患者可以根据血细胞减少水平为基础选择不同的治疗策略。目前推荐的治疗方法，或多或少存在着各种不令人满意的地方，例如，免疫抑制疗法总有效率较低，复发率较高，并且存在较多并发症，费用高昂，毒副作用较多等。中药是我国医药文化的瑰宝，随着国家对中药开发的逐步重视，优选健康、安全且功效确切的中药，受到消费者的广泛青睐。近年来，中药治疗贫血的研究逐渐引起人们的关注，优选健康、安全且功效确切的中药，受到消费者的广泛青睐。研究新的用于贫血的药物有着重要的意义。
发明内容
本发明的目的在于弥补现有技术的不足，提供一种用于治疗或预防贫血的中药组合物。
具体地，本发明提出了一种组合物在制备贫血药物中的应用，其中，该组合物由下述原料药制成：
青蒿1000-1400重量份 金银花600-900重量份栀子500-700重量份。
其中，所述贫血优选为再生障碍性贫血。其可以是骨髓干细胞功能衰竭或异常，或者血液中全血细胞减少，或者出血及感染等。
进一步地，所述组合物由下述原料药制成：
青蒿1250重量份 金银花750重量份栀子600重量份。
更进一步地，所述组合物由下述原料药制成：
青蒿1100重量份 金银花800重量份栀子700重量份。
进一步地，所述贫血药物选自口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂。
具体地，所述贫血药物选自注射剂、片剂、栓剂、软膏剂、凝胶剂、丸剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂和合剂。
本发明的组合物可以直接研磨成粉，也可以是经过本领域常规手段制得的提取物等。本发明组合物中使用的中药也可以以直接研磨成粉、提取物、或者其它加工形态的方式使用。
本发明还提出了一种用于贫血的中药提取物的提取制备方法，该方法包括：取青蒿1000-1400重量份、金银花600-900重量份、栀子500-700重量份。金银花加入9-16倍量的90-100℃的热水，提取1-3次，每次1-2小时，金银花提取液待用。青蒿药材加3-6倍量水润透后切成小段，水蒸气蒸馏5-8小时，收集挥发油，获得青蒿挥发油和青蒿提取液；取青蒿及金银花提取液60℃减压浓缩到相对密度为1.10，加入乙醇，使含醇量达到70％-80％，静置20-36小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20，用盐酸调pH值为1.8-2.3，用等量乙酸乙酯萃取9-12次，取萃取液，减压浓缩至无乙酸乙酯味，倾出浓缩液，真空干燥，得金银花青蒿提取物。栀子粉碎成粗粉，用5-8倍量70-90％乙醇加热回流1-3次，每次1-2小时，合并药液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至原体积的50％，用盐酸调pH为2.5-3.5，100℃加热1-2小时，加入1％药材量的固体石蜡，搅匀，冷藏10-14小时，滤过，滤液用等量的正丁醇萃取5-7次，减压浓缩到无正丁醇味，真空干燥，得栀子提取物。将以上金银花青蒿提取物、栀子提取物以及青蒿挥发油，混合即得。其中，上述提取物或挥发油能都经过常规工序直接或加入药学上可接受的赋型剂或者增溶剂制成临床可接受的剂型，如胶囊、片剂、口服液体制剂、颗粒剂、注射剂等。
进一步地，本发明提出的包括青蒿、金银花、栀子组成的中药组合物的注射剂的制备方法如下：取注射用水800-1200体积份煮沸，投入青蒿金银花提取物及栀子提取物，搅拌使两种提取物溶解，保持沸腾3-7分钟，冷却至室温，冷藏20-36小时，滤过，滤液调pH值为2-3，取滤液加热至沸腾，加入1％活性炭，煮沸8-14分钟，冷藏20-36小时后过滤，取滤液，加热至沸腾，调pH为5.05，沸腾9-13分钟后冷却到室温，冷藏40-58小时，滤过,加入0.3-0.8重量份亚硫酸氢钠，定容1000体积份，搅拌取溶液50体积份，加热到65℃加入吐温-803-5体积份，搅匀，加入青蒿挥发油，搅匀，滤过，将滤液用分子量为30000的中空纤维膜进行超滤，得超滤液；取30000超滤药液，用分子量为10000的板式膜进行超滤，得超滤液，过0.22μm的微孔滤膜，分装，流通蒸汽灭菌35-50min，即得。
本发明采用6.0Gy60Coγ射线和尾静脉输注淋巴结细胞这种国内外学术界已有广泛应用、可靠的方法建立免疫介导的贫血小鼠模型。模型动物给予上述中药组合物进行治疗，测定小鼠体重、免疫脏器指数和外周血相关指标等。实验结果表明该组合物可显著逆转模型小鼠的体重下降，显著改善小鼠免疫脏器指数的下降，可显著改善外周血相关指标，显著增加骨髓细胞数和CD34+细胞比例，与模型组比较差异有显著性，表明该组合物具有治疗贫血的作用。
本发明所述药物中的青蒿(Artemisiae Annuae Herba)为菊科植物黄花蒿(Artemisia annua L.)的干燥地上部分，主产于江西、浙江、湖南等地，能解表清热、芳香化湿，具有解热、抗病毒、抑制内毒素、促进细胞免疫作用。金银花(Lonicerae JaponicaeFlos)为忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica Thunb.)的干燥花蕾或带初开的花，主产于山东、河南等地，既能清热解毒，又能宣散风热；栀子(Gardeniae Fructus)为茜草科栀子属植物栀子(Gardeniajasminoides Ellis)的干燥成熟果实，主产于浙江、江西、湖北和湖南等地，能清热利湿、泻火除烦、凉血解毒，两者具有抗感染、抗病原微生物作用。目前，国内外文献中尚未见用该组合物治疗贫血的报道。本发明提出的中药组合物能够显著逆转模型小鼠的体重下降，显著改善再障所致小鼠免疫脏器指数的下降，可显著改善外周血相关指标，显著增加骨髓细胞数和CD34+细胞比例等。总之，该组合物用于治疗或预防贫血，效果显著，给药方式多样，弥补了现有药物在治疗或预防贫血方面的不足，具有广泛的应用前景。
具体实施方式
如前所述，本发明旨在提供一种中药组合物在制备治疗或预防贫血药物中的应用。以下将结合实验例的内容进行具体描述。
特别需要指出的是，针对本发明所做出的类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
本发明如未注明具体条件者，均按照常规条件或制造商建议的条件进行，所用原料药或辅料，以及所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1组合物注射剂制备
制备例1：
采用由青蒿、金银花、栀子组成的中药组合物制备注射剂的方法如下：青蒿1300重量份、金银花600重量份、栀子700重量份。
取金银花药材，加入9倍量的90℃的热水，提取2次，每次1小时，金银花提取液待用。青蒿药材加6倍量水润透后切成小段，水蒸气蒸馏8小时，收集挥发油和提取液，获得青蒿挥发油和青蒿提取液；取青蒿及金银花提取液60℃减压合并浓缩到相对密度为1.10，加入乙醇，使含醇量达到75％，静置26小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20，用盐酸调pH值为2，用等量乙酸乙酯萃取10次，取萃取液，减压浓缩至无乙酸乙酯味，倾出浓缩液，真空干燥，得金银花青蒿提取物。栀子粉碎成粗粉，用8倍量90％乙醇加热回流3次，每次2小时，合并药液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至原体积的50％，用盐酸调pH为2.5，100℃加热2小时，加入1％药材量的固体石蜡，搅匀，冷藏12小时，滤过，滤液用等量的正丁醇萃取7次，减压浓缩到无正丁醇味，真空干燥，得栀子提取物。
取注射用水1000体积份煮沸，投入青蒿金银花提取物及栀子提取物，搅拌使两种提取物溶解，保持沸腾5分钟，冷却至室温，冷藏30小时，滤过，滤液调pH值为3，取滤液加热至沸腾，加入1％活性炭，煮沸12分钟，冷藏30小时后过滤，取滤液，加热至沸腾，调pH为5.05，沸腾12分钟后冷却到室温，冷藏50小时，滤过,加入0.6重量份亚硫酸氢钠，定容1000体积份，搅拌取溶液50体积份，加热到65℃加入吐温-804体积份，搅匀，加入青蒿挥发油，搅匀，滤过，将滤液用分子量为30000的中空纤维膜进行超滤，得超滤液；取30000超滤药液，用分子量为10000的板式膜进行超滤，得超滤液，过0.22μm的微孔滤膜，分装，流通蒸汽灭菌50min。
所述体积份/重量份与ml/g相对应。
制备例2：
采用由青蒿、金银花、栀子组成的中药组合物制备注射剂的方法如下：青蒿1250重量份、金银花750重量份、栀子600重量份。
取金银花药材，加入13倍量的100℃的热水，提取2次，每次2小时，金银花提取液待用。青蒿药材加5倍量水润透后切成小段，水蒸气蒸馏7小时，收集挥发油和提取液，获得青蒿挥发油和青蒿提取液；取青蒿及金银花提取液60℃减压合并浓缩到相对密度为1.10，加入乙醇，使含醇量达到80％，静置30小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20，用盐酸调pH值为2.2，用等量乙酸乙酯萃取12次，取萃取液，减压浓缩至无乙酸乙酯味，倾出浓缩液，真空干燥，得金银花青蒿提取物。栀子粉碎成粗粉，用7倍量80％乙醇加热回流3次，每次2小时，合并药液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至原体积的50％，用盐酸调pH为3.0，100℃加热2小时，加入1％药材量的固体石蜡，搅匀，冷藏12小时，滤过，滤液用等量的正丁醇萃取6次，减压浓缩到无正丁醇味，真空干燥，得栀子提取物。
取注射用水900体积份煮沸，投入青蒿金银花提取物及栀子提取物，搅拌使两种提取物溶解，保持沸腾6分钟，冷却至室温，冷藏28小时，滤过，滤液调pH值为2.5，取滤液加热至沸腾，加入1％活性炭，煮沸12分钟，冷藏28小时后过滤，取滤液，加热至沸腾，调pH为5.05，沸腾12分钟后冷却到室温，冷藏50小时，滤过,加入0.5重量份亚硫酸氢钠，定容1000体积份，搅拌取溶液50体积份，加热到65℃加入吐温-804体积份，搅匀，加入青蒿挥发油，搅匀，滤过，将滤液用分子量为30000的中空纤维膜进行超滤，得超滤液；取30000超滤药液，用分子量为10000的板式膜进行超滤，得超滤液，过0.22μm的微孔滤膜，分装，流通蒸汽灭菌50min。
所述体积份/重量份与ml/g相对应。
制备例3：
采用由青蒿、金银花、栀子组成的中药组合物制备注射剂的方法如下：青蒿1100重量份、金银花800重量份、栀子700重量份。
取金银花药材，加入14倍量的100℃的热水，提取3次，每次2小时，金银花提取液待用。青蒿药材加4倍量水润透后切成小段，水蒸气蒸馏6小时，收集挥发油和提取液，获得青蒿挥发油和青蒿提取液；取青蒿及金银花提取液60℃减压合并浓缩到相对密度为1.10，加入乙醇，使含醇量达到75％，静置26小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20，用盐酸调pH值为2，用等量乙酸乙酯萃取10次，取萃取液，减压浓缩至无乙酸乙酯味，倾出浓缩液，真空干燥，得金银花青蒿提取物。栀子粉碎成粗粉，用8倍量85％乙醇加热回流3次，每次2小时，合并药液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至原体积的50％，用盐酸调pH为3.5，100℃加热2小时，加入1％药材量的固体石蜡，搅匀，冷藏14小时，滤过，滤液用等量的正丁醇萃取7次，减压浓缩到无正丁醇味，真空干燥，得栀子提取物。
取注射用水1100体积份煮沸，投入青蒿金银花提取物及栀子提取物，搅拌使两种提取物溶解，保持沸腾7分钟，冷却至室温，冷藏32小时，滤过，滤液调pH值为2，取滤液加热至沸腾，加入1％活性炭，煮沸14分钟，冷藏32小时后过滤，取滤液，加热至沸腾，调pH为5.05，沸腾12分钟后冷却到室温，冷藏50小时，滤过,加入0.6重量份亚硫酸氢钠，定容1000体积份，搅拌取溶液50体积份，加热到65℃加入吐温-805体积份，搅匀，加入青蒿挥发油，搅匀，滤过，将滤液用分子量为30000的中空纤维膜进行超滤，得超滤液；取30000超滤药液，用分子量为10000的板式膜进行超滤，得超滤液，过0.22μm的微孔滤膜，分装，流通蒸汽灭菌50min。
所述体积份/重量份与ml/g相对应。
实施例2组合物注射剂对再障小鼠的体重、存活率和外周血相关指标的影响
1、实验材料
1.1动物和饲料
BALB/C小鼠130只，体重18-22g，雌雄各半，购自北京维通利华实验动物中心；DBA/2小鼠13只，体重18-22g，雌雄各半，购自北京维通利华实验动物中心；小鼠基础营养饲料由江宁青龙山动物繁殖场提供。
1.2药品及试剂
EDTA-K购自上海源叶生物科技有限公司；组合物注射剂按照制备例1、2和3所述的处方比例制备。
1.3仪器
电子天平(AL104)，梅特勒-托利多仪器有限公司；Horiba全自动血液分析仪(PentraMS CRP)，堀场(中国)贸易有限公司。
2、实验方法
2.1实验分组：实验设空白对照组(C)，再障模型对照组(AA)、组合物制备例1、2和3的低、中和高剂量治疗组(2、4和8ml·kg-1·d-1)。
2.2试验步骤
2.2.1胸腺淋巴结细胞悬液制备：将13只DBA/2小鼠断颈处死后，95％酒精浸泡消毒5min后，无菌取出胸腺及颈、腋下、腹股沟等处的淋巴结，加磷酸盐(PBS)缓冲液，除去表面血污及黏附的结缔组织。再次清洗后，用手术刀、剪刀反复剪切组织，研磨至成糊状，再经尼龙滤血网过滤，使之成为单细胞悬液。计数后配成5×106/ml浓度备用。
2.2.2再障模型建立和给药：取正常BALB/C小鼠130只，随机取其中10只作为正常(空白)对照组，其余120只经6.0Gy60Coγ射线亚致死量全身3min照射后，4h内由尾静脉输入DBA/2小鼠的胸腺淋巴结细胞悬液0.2ml，输注细胞数为1×106/0.2ml/只。造模后，AA模型对照组和治疗组(组合物组)均含有10只再障小鼠，治疗组采用腹腔注射方法分别按照2、4和8ml·kg-1·d-1给药治疗，AA模型对照组腹腔注射等量的生理盐水。治疗7、14d后观察小鼠体重和存活率的变化。
2.2.3外周血相关指标检测：治疗14d后，小鼠眼球取血200μl，采用EDTA-K3作为抗凝剂，用Horiba全自动血液分析仪测定外周血白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)、血红蛋白含量(HGB)和血小板计数(PLT)等指标。
2.2.4统计学方法：所有数据均用SPSS 19.0统计软件处理，实验数据以均值±标准差
Figure BDA0001508220860000081
表示，组间数据比较采用单因素方差分析。P<0.05为差异具有统计学意义。
3、实验结果
表1和表2分别为各实验组造模后体重、存活率和外周血相关指标的变化情况。由表1可以看出，小鼠在造模后体重会明显下降，造模后7天和14天，给药组小鼠的体重和存活率明显高于模型组，表明组合物对模型小鼠的体重下降、存活率下降具有显著的逆转作用。
表1各实验组造模后体重和存活率的变化
Figure BDA0001508220860000091
Figure BDA0001508220860000092
注：Z1、Z2和Z3分别代表制备例1、2和3；##P＜0.01，与空白对照组比较；*P＜0.05，**P＜0.01，与模型组比较
由表2可以看出，治疗14天后模型组和治疗组小鼠外周血WBC、RBC、HGB、PLT的数量较空白对照组均明显下降，差异有统计学意义(P<0.01)，尤以模型组下降更为明显；而治疗组的WBC、HGB、PLT较模型组有显著提高，差异有统计学意义(P<0.05)。上述结果表明组合物可显著改善外周血相关指标。
表2各组小鼠外周血4项指标比较
Figure BDA0001508220860000101
Figure BDA0001508220860000102
注：Z1、Z2和Z3分别代表制备例1、2和3；##P＜0.01，与空白对照组比较；*P＜0.05，**P＜0.01，与模型组比较
本研究探讨了组合物注射剂对再障小鼠的体重、存活率和外周血相关指标的影响，如表1和表2所示，使用制备例1、2和3中的组合物注射剂治疗后，再障小鼠小鼠的体重和存活率明显提高，同时外周血白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)、血红蛋白含量(HGB)和血小板计数(PLT)等指标也得到显著改善，表明组合物对模型小鼠的体重下降、存活率下降具有显著的逆转作用，同时具有显著改善外周血相关指标的作用。
实施例3：组合物注射剂对再障小鼠的脾脏指数和骨髓造血功能的影响
1、实验材料
1.1动物和饲料
BALB/C小鼠130只，体重18-22g，雌雄各半，购自北京维通利华实验动物中心；DBA/2小鼠13只，体重18-22g，雌雄各半，购自北京维通利华实验动物中心；小鼠基础营养饲料由江宁青龙山动物繁殖场提供。
1.2药品及试剂
红细胞裂解液(Tris-NH4Cl)购自碧云天生物科技有限公司；RAT ANTI MOUSECD34购自西宝生物科技(上海)股份有限公司；组合物注射剂按照制备例1、2和3所述的处方比例制备。
1.3仪器
电子天平(AL104)，梅特勒-托利多仪器有限公司；流式细胞仪(guava easyCyte6-2L)，美国MILLIPORE公司；蔡司Primo Vert倒置显微镜，德国CarlZeiss公司；离心机(Eppendorf5424)，德国Eppendorf。
2、实验方法
2.1实验分组：实验设空白对照组(C)，再障模型对照组(AA)、组合物制备例1、2和3的低、中和高剂量治疗组(2、4和8ml·kg-1·d-1)。
2.2试验步骤
2.2.1胸腺淋巴结细胞悬液制备：将13只DBA/2小鼠断颈处死后，95％酒精浸泡消毒5min后，无菌取出胸腺及颈、腋下、腹股沟等处的淋巴结，加磷酸盐(PBS)缓冲液，除去表面血污及黏附的结缔组织。再次清洗后，用手术刀、剪刀反复剪切组织，研磨至成糊状，再经尼龙滤血网过滤，使之成为单细胞悬液。计数后配成5×106/ml浓度备用。
2.2.2再障模型建立和给药：取正常BALB/C小鼠130只，随机取其中10只作为正常(空白)对照组，其余120只经6.0Gy60Coγ射线亚致死量全身3min照射后，4h内由尾静脉输入DBA/2小鼠的胸腺淋巴结细胞悬液0.2ml，输注细胞数为1×106/0.2ml/只。造模后，AA模型对照组和治疗组均含有10只再障小鼠，治疗组采用腹腔注射方法分别按照2、4和8ml·kg-1·d-1给药治疗，AA模型对照组腹腔注射等量的生理盐水。治疗14d后观察小鼠脾脏指数和骨髓造血功能的变化。
2.2.3股骨骨髓单核细胞(BMNC)计数检测：治疗14d后，将各组实验动物称重，经脱颈法处死后，置于体积分数为75％的乙醇中浸泡5min，在无菌环境下取出股骨，用5Ml注射器吸取PBS，从股骨一段进行冲洗，用4号针头对冲洗液进行过滤，再用400目(38μm)的无菌纱布进行过滤，离心去除上清后加入Tris-NH4Cl，室温静置5min，再次离心，弃上清，PBS重悬，过滤后调整浓度制成股骨骨髓单核细胞悬液，然后在显微镜下计数。
2.2.4小鼠骨髓细胞中CD34+细胞比例检测：
将制备的骨髓单核细胞悬液调整浓度至2×106～5×106个/ml，离心后弃置上清，加入CD34抗体10μL。4℃孵育30min后，用PBS清洗一遍，抗体保存液固定，采用流式细胞仪进行检测。
2.2.5脾指数测定：处死小鼠后解剖取出脾脏并称重，脾指数＝脾脏质量/体重。
2.2.6统计学方法:所有数据均用SPSS 19.0统计软件处理，实验数据以均值±标准差
Figure BDA0001508220860000122
表示，组间数据比较采用单因素方差分析。P<0.05为差异具有统计学意义。
3、实验结果
表3为各实验组造模后小鼠骨髓单核细胞数、骨髓单核细胞中CD34+细胞含量和脾指数的变化情况。由表3可以看出，造模14天后，小鼠骨髓单核细胞数和骨髓单核细胞中CD34+细胞含量均显著低于正常组(P<0.01)。但经过低、中和高剂量组合物治疗后上述指标较再障组已有所改善，表明组合物不仅能够促进再障小鼠骨髓单核细胞数的提升，而且能够提高再障小鼠骨髓有核细胞中CD34+细胞的含量。此外，与对照组比较，模型组和治疗组的脾指数均下降，差异均有统计学意义(P＜0.01)，表明小鼠脾脏出现损伤，处于萎缩状态。脾脏的萎缩会直接影响小鼠的造血功能，同时还会导致小鼠的免疫力变差，容易感染。同时，治疗组的脾指数明显高于模型组，差异有统计学意义(P＜0.05)，说明组合物在一定程度上提高了AA小鼠的脾指数，有促进脾脏功能恢复的功效。
表3各组小鼠骨髓单核细胞数、骨髓单核细胞中CD34+细胞含量和脾指数比较
Figure BDA0001508220860000121
Figure BDA0001508220860000131
注：Z1、Z2和Z3分别代表制备例1、2和3；##P＜0.01，与空白对照组比较；*P＜0.05，**P＜0.01，与模型组比较
应当指出，上述实验用的金银花青蒿提取物、栀子提取物以及青蒿挥发油等成分，可经过常规工序直接或加入药学上可接受的赋型剂或者增溶剂制成其它临床可接受的剂型，如胶囊、片剂、口服液体制剂、颗粒剂等，这些剂型对于本领域技术人员而言，很容易预测也能对贫血产生效果。当然，以上仅实施例也仅是本发明的优选实施方式，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种组合物在制备贫血药物中的应用，其中，该组合物由下述原料药制成：
青蒿1000-1400重量份金银花600-900重量份
栀子500-700重量份。
2.根据权利要求1所述的应用，所述组合物由下述原料药制成：
青蒿1250重量份金银花750重量份
栀子600重量份。
3.根据权利要求1所述的应用，所述组合物由下述原料药制成：
青蒿1100重量份金银花800重量份
栀子700重量份。
4.根据权利要求1-3任一所述的应用，所述贫血药物选自口服给药剂型、注射给药剂型或外用给药制剂。
5.根据权利要求4所述的应用，所述贫血药物选自注射剂、片剂、栓剂、软膏剂、凝胶剂、丸剂、颗粒剂、胶囊剂和合剂。
6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，该所述组合物的制备方法包括：
取金银花600-900重量份，加入9-16倍量的90-100℃的热水，提取1-3次，每次1-2小时，得金银花提取物；
取青蒿1000-1400重量份加3-6倍量水润透后切成小段，水蒸气蒸馏5-8小时，收集挥发油，获得青蒿挥发油和青蒿提取物；
取青蒿提取物及金银花提取物在60℃下减压合并浓缩到相对密度为1.10，加入乙醇，使含醇量达到70％-80％，静置20-36小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20，用盐酸调pH值为1.8-2.3，用等量乙酸乙酯萃取9-12次，取萃取液，减压浓缩至无乙酸乙酯味，倾出浓缩液，真空干燥，得金银花青蒿提取物；
取栀子500-700重量份粉碎成粗粉，用5-8倍量70-90％乙醇加热回流1-3次，每次1-2小时，合并药液，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至原体积的50％，用盐酸调pH为2.5-3.5，100℃加热1-2小时，加入1％药材量的固体石蜡，搅匀，冷藏10-14小时，滤过，滤液用等量的正丁醇萃取5-7次，减压浓缩到无正丁醇味，真空干燥，得栀子提取物；
将以上金银花青蒿提取物、栀子提取物以及青蒿挥发油，经过常规工序混合即得。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述贫血药物选自注射剂，所述注射剂的制备方法包括：
取注射用水800-1200体积份煮沸，投入权利要求6所得的金银花青蒿提取物以及栀子提取物，搅拌使两种提取物溶解，保持沸腾3-7分钟，冷却至室温，冷藏20-36小时，滤过，滤液调pH值为2-3，取滤液加热至沸腾，加入1％活性炭，煮沸8-14分钟，冷藏20-36小时后过滤，取滤液，加热至沸腾，调pH为5.05，沸腾9-13分钟后冷却到室温，冷藏40-58小时，滤过，加入0.3-0.8重量份亚硫酸氢钠，定容1000体积份，搅拌取溶液50体积份，加热到65℃加入吐温-803-5体积份，搅匀，加入青蒿挥发油，搅匀，滤过，将滤液用分子量为30000的中空纤维膜进行超滤，得超滤液；取30000超滤药液，用分子量为10000的板式膜进行超滤，得超滤液，过0.22μm的微孔滤膜，分装，流通蒸汽灭菌35-50min，即得。
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