CN103626839A - 一种n(2)-l-丙氨酰-l-谷氨酰胺的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法。本发明的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法，包括如下步骤：（1）L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯的制备；（2）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸的制备；（3）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐的制备；（4）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备；（5）N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品的制备；（6）N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的精制品的制备。该制备方法作为中试或者生产规模工艺路线，最后脱保护工艺所得产品纯度较高，经过一次提纯产品液相纯度大于99.9%，杂质含量低。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法。
背景技术
N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺分子式为C8H15N3O4，分子量为217.22，结构式如下：
N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺肠外营养的一个组成部分，适用于需要补充谷氨酰胺的病人，包括处于分解代谢和高代谢状况的病人。如：创伤、烧伤、大中型手术后、骨髓及其他脏器移植、胃肠道症候群、肿瘤、严重感染及其它处于应激状态的ICU患者。目前国内已有N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺注射液上市，主要有海南长安国际制药有限公司（国药准字H20060549），西安万隆制药有限责任公司（国药准字H20045975）等。
20世纪80年代德国Peter Furst教授提出了双肽的概念，即通过合成的双肽作为谷氨酰胺的供体是人体谷氨酰胺理想的替代品，并于1995年将其开发为肠外营养用药。因其可在水中自然溶解，并能耐受121℃热消毒而不分解；从而有效地克服了谷氨酰胺在肠外营养中的使用缺点。静脉输入的谷氨酰胺双肽在谷氨酰双肽酶的作用下迅速水解为丙氨酸和谷氨酰胺，并被充分吸收利用。所以该药物具有促进肌肉蛋白合成，改善危重病人的临床与生化指标；维持肠道功能，促进组织的组成，保持机体氮平衡；增强免疫系统等作用，目前在世界各个国家广泛使用。
现有N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺生产工艺大多以L-谷氨酰胺为主要氨基酸原料，尽管该生产工艺相对L-谷氨酸工艺简单，反应制备过程较短；但由于其为氨基酸类药品原料的同时兼具食品和药物生化作用；故使得L-谷氨酰胺市场销售较为紧俏，市场价格不断攀升，生产成本比较高。在此条件下，我们以L-谷氨酸为原料开发新的合成路线。
专利CN103387600A一种L-丙氨酰-L-谷氨酰胺制备的新方法，包括以下步骤：将邻苯二甲酸酐与L-丙氨酸反应制得邻苯二甲酰-L-丙氨酸，通过卤代试剂酰卤化邻苯二甲酰-L-丙氨酸合成邻苯二甲酰-L-丙氨酰卤；将L-谷氨酸和醇在酸催化下进行酯化反应，得到L-谷氨酸单酯；L-谷氨酸单酯与邻苯二甲酰-L-丙氨酰卤在碱的作用下进行缩合得到合成L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的重要中间体邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸单酯；将邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸单酯加入氨水中氨解、脱保护，最后在乙醇中结晶得到L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。由于专利中缩合步骤L-谷氨酸单酯与邻苯二甲酰-L-丙氨酰卤在碱性条件下反应，而L-谷氨酸单酯和产物邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酯及溶剂乙酸乙酯在碱性条件下均不稳定，存在一定的水解现象；所得产品纯度较低，杂质含量高。
发明内容
为了解决上述的技术问题，本发明提供了一种高纯度的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法。
本发明是通过下述的技术方案来实现的：
一种N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法，包括如下步骤：
（1）L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯的制备
L-邻苯二甲酰-丙氨酸用苯或者甲苯作为溶剂溶解，加入氯化亚砜或固体光气或五氯化磷或三氯化磷或三氯氧磷，于50-60℃反应3小时，得到L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯苯或甲苯溶液备用；
（2）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸的制备
将氢氧化钠溶解在水中，氢氧化钠与水的重量比为1：10，降温至5℃，加入L-谷氨酸，双滴加L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯苯或甲苯溶液和碱溶液，控制反应温度5～10℃，维持反应液pH值9.5～10.5，滴加完毕后保温反应2小时，反应完毕，溶液静置分层，下层水层用盐酸或醋酸调酸至pH值2～3，析出邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸沉淀，过滤得到湿品于55～60℃减压干燥至恒重，即得邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸干品；
（3）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐的制备：
邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸加入甲苯，打入醋酸酐或者丙酸酐，80℃保温反应2小时，降温至20℃离心，烘干得到邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐；
（4）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备：
去离子水中加入邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐搅拌均匀，溶液降温至10℃以下；控制温度10～15℃通入液氨或滴加25%氨水，于10～15℃保温反应2小时，真空抽走过量氨，控制温度10～15℃用盐酸或者醋酸调酸至溶液pH至2～3；搅拌1小时离心，得到的湿品于80～90℃烘干，得到邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺；
（5）N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品的制备：
水或醇中加入邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺搅拌均匀，然后加入80%水合肼，升温至40-60℃反应0.5-2小时脱保护基，反应完毕用盐酸调酸至pH值6.5～7后离心，收集固体烘干后用去离子水溶解，离心，水溶液用的767活性炭脱色，用95%乙醇25℃析晶，离心得到N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品，烘干即可；
（6）N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的精制品的制备：
向1吨反应釜中打入纯化水，加入N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品，搅拌全部溶解后，加入767活性炭，在50～55℃搅拌脱色30分钟，过滤至析晶釜，搅拌下加入无水乙醇析晶，析晶完毕降温至20～25℃搅拌3小时离心，收集产品湿品后于60～70℃真空烘至恒重，即得N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的精制品。
上述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法中，所述步骤（1）中L-邻苯二甲酰-丙氨酸与溶剂的质量比为230：600-700。
上述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法中，所述步骤（1）中L-邻苯二甲酰-丙氨酸的与化亚砜的摩尔比为1：1.05～1.2，所述步骤（1）中L-邻苯二甲酰-丙氨酸的与氯化亚砜的摩尔比为1：1.05～1.2；L-邻苯二甲酰-丙氨酸的与固体光气的摩尔比为1：0.35～0.4；L-邻苯二甲酰-丙氨酸的与五氯化磷的摩尔比为1：1.1；L-邻苯二甲酰-丙氨酸的与三氯化磷的摩尔比为1：1.1；L-邻苯二甲酰-丙氨酸的与三氯化磷的摩尔比为1：1.1。
上述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法中，所述步骤（2）中9%氢氧化钠溶液与L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯苯或甲苯的用量比440：900。
上述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法中，所述步骤（2）中碱溶液为40%碳酸钾溶液（40%碳酸钾溶液550kg）或50%氢氧化钠溶液（50%氢氧化钠溶液200kg）或25%碳酸钠溶液（25%碳酸钾溶液760kg）；其中，反应质量和收率以碳酸钾溶液为最优。
上述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法中，所述步骤（3）中邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸、甲苯、丙酸酐的重量比为348：900：143。
上述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法中，所述步骤（4）中去离子水与邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐的重量比为600：330，所用液氨与邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐的重量比为85：330，所用25%氨水与邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐的重量比为340～500：330。
上述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法中，所述步骤（5）中所用甲醇、邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、水合肼、去离子水、活性炭、95%乙醇的重量比为500：347：76.3：400：1.5-4：1350。
上述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法中，所述步骤（6）中纯化水、N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品、活性炭：无水乙醇的用量比为400：200：1：1000-1200。
上述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法，详细步骤为：
（1）L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯甲苯溶液的制备：
2吨反应釜中，L-邻苯二甲酰-丙氨酸230kg用700kg甲苯溶解，加入氯化亚砜130kg，一小时内升温至50℃反应3小时，反应完毕蒸除过量的酰化试剂，得到900kgL-邻苯二甲酰-丙氨酰氯甲苯溶液备用；
（2）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸的制备：
2吨反应釜，400kg水中加入氢氧化钠40kg搅拌溶解，溶解后降温至5℃，加入L-谷氨酸147kg，控制反应液温度5～10℃，同时滴加L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯甲苯溶液900kg和25%碳酸钠溶液760kg，维持反应液pH值9.5～10.5；约半小时滴加完毕，然后保温反应2小时。反应完毕，溶液静置分层，下层水层用300kg质量分数30%盐酸调酸至pH值2～3析出邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸，过滤得到湿品于55～60℃减压干燥至恒重299kg；
（3）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐的制备：
2吨反应釜，邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸348kg加入900kg甲苯中，打入110kg醋酸酐，80℃保温反应2小时,降温至20℃离心，烘干得到313kg邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐，；
（4）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备：
2吨反应釜，加入600kg去离子水，加入330kg邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐搅拌均匀，溶液用冰盐水降温至10℃；控制反应液10～15℃通入85kg液氨，约30分钟通完；然后于15℃保温反应2小时，真空抽走过量氨，控制温度10～15℃用盐酸或者醋酸调酸至溶液pH至2；搅拌1小时离心，得到的湿品于80～90℃烘干，得到312kg邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺；
（5）N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品的制备：
向2吨反应釜中加入500kg甲醇，加入邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺347kg搅拌均匀，然后加入80%水合肼76.3kg。升温至60℃反应2小时脱保护基，反应完毕用盐酸调酸至pH值6.5～7后离心。收集固体用400kg去离子水溶解，离心，水溶液用767活性炭脱色，用1200kg甲醇25℃析晶，离心得到N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品。烘干后重量180kg；
（6）N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的精制品的制备：
向1吨反应釜中打入纯化水400kg，加入N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品200kg，搅拌全部溶解后，加入767活性炭1kg，在50～55℃搅拌脱色30分钟，过滤至析晶釜。搅拌下加入1000kg无水乙醇析晶，析晶完毕降温至20～25℃搅拌3小时离心，收集产品湿品后于60～70℃真空烘至恒重，即得N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的精制品191kg。
本发明N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法工艺路线图如下：
（1）L-邻苯二甲酰-丙氨酸与酰化剂反应得到L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯溶液：
（2）L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯与L-谷氨酸在低温下反应，生成邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸；
（3）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸在脱水剂存在下脱水成环，得到邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐：
（4）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐氨解得到邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺：
（5）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺脱去保护基邻苯二甲酰肼，得到高纯度的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。
本发明的有益效果为
（1）本发明以市售较广用苯酐保护的L-丙氨酸和价格低廉的L-谷氨酸为主要原料；而且，L-谷氨酸市场销售走势不会跌宕起伏，价格相对较稳定；也使得该目标产物N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺原料成本相对稳定。该路线同样具有反应原料和溶剂易购。
（2）用传统、简单的氨基保护基邻苯二甲酸酐代替复杂的氨基酸保护基Boc、Cbz和Fmoc，得到保护的L-丙氨酸。将保护的L-丙氨酸制得化学活性较高的酰氯，同时L-谷氨酸代替价格昂贵的L-谷氨酰胺，二者经过一系列反应脱保护得到N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺；易于实现工业化生产。
（3）该制备方法作为中试或者生产规模工艺路线，、最后脱保护工艺所得产品纯度较高，经过一次提纯产品液相纯度大于99.9%，杂质含量低。
（4）反应过程中中间产物L-谷氨酸单酯和产物邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐碱性条件下稳定，反应杂质少，而且，酰化反应步骤中的溶剂在本缩合步骤中仍然可以当做溶剂；两步反应为同一溶剂，在工业化生产方面更方便回收套用。
附图说明
图1为本发明实施例1制备的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的红外鉴别图谱。
图2为本发明实施例1制备的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的液相纯度检测图谱。其中，峰编号10的峰为N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺主峰，其面积百分比即为N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的液相纯度。
图3为本发明实施例1制备的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的红外鉴别图谱。
图4为本发明实施例3制备的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的液相纯度检测图谱。其中，峰编号11的峰为N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺主峰，其面积百分比即为N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的液相纯度。
图5为本发明实施例2制备的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的液相纯度检测图谱。其中，峰编号10的峰为N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺主峰，其面积百分比即为N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的液相纯度。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解本发明，但并不因此限制本发明。
实施例1：
（1）L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯苯溶液的制备：
2吨反应釜中，L-邻苯二甲酰-丙氨酸230kg用700kg苯溶解，加入氯化亚砜130kg，于50℃反应3小时，反应完毕蒸除过量的酰化试剂，得到900kgL-邻苯二甲酰-丙氨酰氯苯溶液备用；
（2）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸的制备：
2吨反应釜，400kg水中加入氢氧化钠40kg搅拌溶解，溶解后降温至5℃，加入L-谷氨酸147kg，控制反应液温度5～10℃，同时滴加L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯苯溶液900kg和50%氢氧化钠溶液200kg，维持反应液pH值9.5～10.5；半小时滴加完毕，然后保温反应2小时，反应完毕，溶液静置分层，下层水层用180kg醋酸调酸至pH值2～3析出邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸，过滤得到湿品于55～60℃减压干燥至恒重299kg，收率86%，液相纯度98.2%；
（3）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐的制备：
2吨反应釜，邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸348kg加入900kg甲苯中，打入110kg醋酸酐，80℃保温反应2小时,降温至20℃离心，烘干得到313kg邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐，收率95%，液相纯度98.1%；
（4）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备：
2吨反应釜，加入600kg去离子水，加入330kg邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐搅拌均匀，溶液用冰盐水降温至10℃以下；控制反应液10～15℃搅拌通入85kg液氨，约30分钟通完；升温至15℃保温反应2小时，真空抽走过量氨，控制温度10～15℃用者醋酸调酸至溶液pH至2；搅拌1小时离心，得到的湿品于80～90℃烘干，得到312kg邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，收率90%，液相纯度98.0%；
（5）N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品的制备：
向2吨反应釜中加入500kg水，加入邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺347kg搅拌均匀，然后加入80%水合肼76.3kg，升温至40℃反应30分钟脱保护基，反应完毕用质量百分比15%盐酸调酸至pH值6.5～7后离心，水溶液用767活性炭3.7kg脱色，过滤后澄清液用1350kg95%乙醇25℃析晶，离心得到N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品湿品。烘干后重量183kg，收率84%，液相纯度99.3%；
（6）N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的精制品的制备：
向1吨反应釜中打入纯化水400kg，加入N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品200kg，搅拌全部溶解后，加入767活性炭1kg，在50～55℃搅拌脱色30分钟，过滤至析晶釜，搅拌下加入1200kg95%乙醇析晶，析晶完毕降温至20～25℃搅拌3小时离心，收集产品湿品于60～70℃真空烘至恒重，即得N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的精制品188kg；收率94%，液相纯度99.9%以上，熔点214～215℃。
实施例2
（1）L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯甲苯溶液的制备：
2吨反应釜中L-邻苯二甲酰-丙氨酸230kg用700kg甲苯溶解，降温至10℃以下，加入固体光气106kg，然后加入10.6kg催化量的三乙胺，一小时内缓慢升温至60℃；保温反应3小时，反应完毕减压蒸馏过量酰化试剂，得到900kgL-邻苯二甲酰-丙氨酰氯甲苯溶液备用；
（2）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸的制备：
2吨反应釜，400kg水中加入氢氧化钠40kg搅拌溶解，溶解后降温至5℃，加入L-谷氨酸147kg，控制反应液温度5～10℃，同时滴加L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯苯溶液900kg和40%碳酸钾溶液550kg，控制反应温度5～10℃，维持反应液pH值9.5～10.5；约半小时滴加完毕，滴加完毕后保温反应2小时，反应完毕，溶液静置分层，下层水层用质量分数30%盐酸300kg调酸至pH值2～3析出邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸，过滤得到湿品于55～60℃减压干燥至恒重302kg，收率87%，液相纯度98.5%；
（3）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐的制备：
2吨反应釜，邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸348kg加入900kg甲苯中，打入143kg丙酸酐，80℃保温反应2小时，降温至20℃离心，烘干得到305kg邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐，收率92%，液相纯度97.5%；
（4）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备：
2吨反应釜，加入300kg去离子水和300kg25%氨水，加入330kg邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐搅拌均匀，溶液降温至5℃以下；控制温度10～15℃滴加200kg氨水，约50分钟滴加完；于10～15℃保温反应2小时，真空抽走过量氨，控制温度10～15℃用醋酸调酸至溶液pH至2；搅拌1小时离心，得到的湿品于80～90℃烘干，得到320kg邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，收率92.2%，液相纯度98.3%；
（5）N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品的制备：
向2吨反应釜中加入500kg甲醇，加入邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺347kg搅拌均匀，然后加入80%水合肼76.3kg。升温至60℃反应2小时脱保护基，反应完毕用盐酸调酸至pH值6.5～7后离心，收集固体烘干后用400kg去离子水溶解，离心，水溶液用767活性炭4kg脱色，用1350kg95%乙醇25℃析晶，离心得到N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品，烘干后重量184kg，收率85%，液相纯度99.5%。
（6）N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的精制品的制备：
向1吨反应釜中打入纯化水400kg，加入N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品200kg，搅拌全部溶解后，加入767活性炭1kg，在50～55℃搅拌脱色30分钟，过滤至析晶釜。搅拌下加入1000kg无水乙醇析晶，析晶完毕降温至20～25℃搅拌3小时离心，收集产品湿品后于60～70℃真空烘至恒重，即得N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的精制品189kg；收率94.1%，液相纯度99.9%以上，熔点214～215℃。
实施例3
（1）L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯甲苯溶液的制备：
2吨反应釜中，L-邻苯二甲酰-丙氨酸230kg用700kg甲苯溶解，加入氯化亚砜130kg，一小时内升温至50℃反应3小时，反应完毕蒸除过量的酰化试剂，得到900kgL-邻苯二甲酰-丙氨酰氯甲苯溶液备用；
（2）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸的制备：
2吨反应釜，400kg水中加入氢氧化钠40kg搅拌溶解，溶解后降温至5℃，加入L-谷氨酸147kg，控制反应液温度5～10℃，同时滴加L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯甲苯溶液900kg和25%碳酸钠溶液760kg，维持反应液pH值9.5～10.5；约半小时滴加完毕，然后保温反应2小时。反应完毕，溶液静置分层，下层水层用300kg质量分数30%盐酸调酸至pH值2～3析出邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸，过滤得到湿品于55～60℃减压干燥至恒重299kg，收率86%，液相纯度98.2%；
（3）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐的制备：
2吨反应釜，邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸348kg加入900kg甲苯中，打入110kg醋酸酐，80℃保温反应2小时,降温至20℃离心，烘干得到313kg邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐，收率95%，液相纯度97.9%；
（4）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备：
2吨反应釜，加入600kg去离子水，加入330kg邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐搅拌均匀，溶液用冰盐水降温至10℃；控制反应液10～15℃通入85kg液氨，约30分钟通完；然后于15℃保温反应2小时，真空抽走过量氨，控制温度10～15℃用盐酸或者醋酸调酸至溶液pH至2；搅拌1小时离心，得到的湿品于80～90℃烘干，得到312kg邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，收率90%，液相纯度98.1%；
（5）N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品的制备：
向2吨反应釜中加入500kg甲醇，加入邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺347kg搅拌均匀，然后加入80%水合肼76.3kg。升温至60℃反应2小时脱保护基，反应完毕用盐酸调酸至pH值6.5～7后离心。收集固体用400kg去离子水溶解，离心，水溶液用767活性炭脱色，用1200kg甲醇25℃析晶，离心得到N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品。烘干后重量180kg，收率83%，液相纯度99.6%。
（6）N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的精制品的制备：
向1吨反应釜中打入纯化水400kg，加入N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品200kg，搅拌全部溶解后，加入767活性炭1kg，在50～55℃搅拌脱色30分钟，过滤至析晶釜。搅拌下加入1000kg无水乙醇析晶，析晶完毕降温至20～25℃搅拌3小时离心，收集产品湿品后于60～70℃真空烘至恒重，即得N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的精制品191kg；收率95.5%，液相纯度99.9%以上，熔点214～215℃。
对本发明实施例1、2、3产品进行了质量检验，结果见下表：
表1本发明实施例1、2、3制备的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺检验结果
Claims (10)
1.一种N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法，包括如下步骤：
（1）L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯的制备
L-邻苯二甲酰-丙氨酸用苯或者甲苯作为溶剂溶解，加入氯化亚砜或固体光气或五氯化磷或三氯化磷或三氯氧磷，于50-60℃反应3小时，得到L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯苯或甲苯溶液备用；
（2）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸的制备
将氢氧化钠溶解在水中，氢氧化钠与水的重量比为1：10，降温至5℃，加入L-谷氨酸，双滴加L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯苯或甲苯溶液和碱溶液，控制反应温度5～10℃，维持反应液pH值9.5～10.5，滴加完毕后保温反应2小时，反应完毕，溶液静置分层，下层水层用盐酸或醋酸调酸至pH值2～3析出邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸沉淀，过滤得到湿品于55～60℃减压干燥至恒重，即得邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸干品；
（3）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐的制备：
邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸加入甲苯，打入醋酸酐或者丙酸酐，80℃保温反应2小时，降温至20℃离心，烘干得到邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐；
（4）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备：
去离子水中加入邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐搅拌均匀，溶液降温至10℃以下；控制温度10～15℃通入液氨或滴加25%氨水，于10～15℃保温反应2小时，真空抽走过量氨，控制温度10～15℃用盐酸或者醋酸调酸至溶液pH至2～3；搅拌1小时离心，得到的湿品于80～90℃烘干，得到邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺；
（5）N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品的制备：
水或醇中加入邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺搅拌均匀，然后加入80%水合肼，升温至40-60℃反应0.5-2小时脱保护基，反应完毕用盐酸调酸至pH值6.5～7后离心，收集固体烘干后用去离子水溶解，离心，水溶液用的767活性炭脱色，用95%乙醇25℃析晶，离心得到N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品，烘干即可；
（6）N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的精制品的制备：
向1吨反应釜中打入纯化水，加入N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品，搅拌全部溶解后，加入767活性炭，在50～55℃搅拌脱色30分钟，过滤至析晶釜，搅拌下加入无水乙醇析晶，析晶完毕降温至20～25℃搅拌3小时离心，收集产品湿品后于60～70℃真空烘至恒重，即得N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的精制品。
2.根据权利要求1所述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中L-邻苯二甲酰-丙氨酸与溶剂的质量比为230：600-700。
3.根据权利要求1所述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中L-邻苯二甲酰-丙氨酸的与化亚砜的摩尔比为1：1.05～1.2，所述步骤（1）中L-邻苯二甲酰-丙氨酸的与氯化亚砜的摩尔比为1：1.05～1.2；L-邻苯二甲酰-丙氨酸的与固体光气的摩尔比为1：0.35～0.4；L-邻苯二甲酰-丙氨酸的与五氯化磷的摩尔比为1：1.1；L-邻苯二甲酰-丙氨酸的与三氯化磷的摩尔比为1：1.1；L-邻苯二甲酰-丙氨酸的与三氯化磷的摩尔比为1：1.1。
4.根据权利要求1所述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中9%氢氧化钠溶液与L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯苯或甲苯的用量比440：900。
5.根据权利要求1所述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中碱溶液为40%碳酸钾溶液或50%氢氧化钠溶液或25%碳酸钠溶液。
6.根据权利要求1所述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸、甲苯、丙酸酐的重量比为348：900：143。
7.根据权利要求1所述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法，其特征在于，所述步骤（4）中去离子水与邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐的重量比为600：330，所用液氨与邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐的重量比为85：330，所用25%氨水与邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐的重量比为340～500：330。
8.根据权利要求1所述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法，其特征在于，所述步骤（5）中所用甲醇、邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、水合肼、去离子水、活性炭、95%乙醇的重量比为500：347：76.3：400：1.5-4：1350。
9.根据权利要求1所述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法，其特征在于，所述步骤（6）中纯化水、N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品、活性炭：无水乙醇的用量比为400：200：1：1000-1200。
10.根据权利要求1所述的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备方法，详细步骤为：
（1）L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯甲苯溶液的制备：
2吨反应釜中，L-邻苯二甲酰-丙氨酸230kg用700kg甲苯溶解，加入氯化亚砜130kg，一小时内升温至50℃反应3小时，反应完毕蒸除过量的酰化试剂，得到900kgL-邻苯二甲酰-丙氨酰氯甲苯溶液备用；
（2）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸的制备：
2吨反应釜，400kg水中加入氢氧化钠40kg搅拌溶解，溶解后降温至5℃，加入L-谷氨酸147kg，控制反应液温度5～10℃，同时滴加L-邻苯二甲酰-丙氨酰氯甲苯溶液900kg和25%碳酸钠溶液760kg，维持反应液pH值9.5～10.5；约半小时滴加完毕，然后保温反应2小时。反应完毕，溶液静置分层，下层水层用300kg质量分数30%盐酸调酸至pH值2～3析出邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸，过滤得到湿品于55～60℃减压干燥至恒重299kg；
（3）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐的制备：
2吨反应釜，邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸348kg加入900kg甲苯中，打入110kg醋酸酐，80℃保温反应2小时,降温至20℃离心，烘干得到313kg邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐，；
（4）邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制备：
2吨反应釜，加入600kg去离子水，加入330kg邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酸酸酐搅拌均匀，溶液用冰盐水降温至10℃；控制反应液10～15℃通入85kg液氨，约30分钟通完；然后于15℃保温反应2小时，真空抽走过量氨，控制温度10～15℃用盐酸或者醋酸调酸至溶液pH至2；搅拌1小时离心，得到的湿品于80～90℃烘干，得到312kg邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺；
（5）N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品的制备：
向2吨反应釜中加入500kg甲醇，加入邻苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺347kg搅拌均匀，然后加入80%水合肼76.3kg。升温至60℃反应2小时脱保护基，反应完毕用盐酸调酸至pH值6.5～7后离心。收集固体用400kg去离子水溶解，离心，水溶液用767活性炭脱色，用1200kg甲醇25℃析晶，离心得到N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品。烘干后重量180kg；
（6）N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的精制品的制备：
向1吨反应釜中打入纯化水400kg，加入N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺粗品200kg，搅拌全部溶解后，加入767活性炭1kg，在50～55℃搅拌脱色30分钟，过滤至析晶釜。搅拌下加入1000kg无水乙醇析晶，析晶完毕降温至20～25℃搅拌3小时离心，收集产品湿品后于60～70℃真空烘至恒重，即得N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的精制品191kg。
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