CN103610718B - 一种含有人参总次苷的植物切片及其制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种植物切片,具体讲,涉及一种含有人参总次苷的植物切片及其制剂。所述的植物切片的制备方法为:将植物切片通过真空膨化处理;将植物切片浸泡于20~90%的醋酸5~60分钟;取出后控干,放入带孔的托盘中,摆放厚度为0.2~10cm;将托盘放入密闭蒸柜中,通入水蒸汽,维持水蒸气为饱和状态,加热至50~110℃蒸制0.5~5小时;再通入流通水蒸汽后同时打开抽气装置,维持0.5~5小时,连接冷凝器回收醋酸水溶液;移入热风干燥箱干燥0.5~5小时。本发明的植物切片具有抗血栓形成、降血脂血压血糖、增强免疫力、降低血液粘稠度、减少耳鸣眩晕的作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物切片,具体讲,涉及一种含有人参总次苷的植物切片及其制剂。
背景技术
人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey)的干燥根。人参是中医补气之要药。性味与归经:甘、微苦,平。功能与主治:大补元气,复脉固脱,补脾益肺,生津,安神。用于体虚欲脱,肢冷脉微,脾虚食少,肺虚喘咳,津伤口渴,内热消渴,久病虚赢,惊悸失眠,阳痿宫冷;心力衰竭,心原性休克。
三七为加科植物三七(Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen)的干燥根。其性温,味辛,具有散淤止血,消肿定痛的功效,可用于治疗衄血、便血、崩漏、咯血、吐血、外伤出血、胸腹刺痛等症。
中医和中西医结合临床已证实,人参及其制剂有增强心肌收缩力、扩张冠状动脉、增加冠脉血流量、减少心肌耗氧量、保护心肌再灌注损伤、抑制血小板聚集、抗凝血酶等药理活性,临床应用于胸痹心痛(冠心病)、动脉硬化等疾病的治疗。
现代科研结果表明:人参的主要生物活性成分是人参皂苷。红参和生晒人参虽然都含有皂昔,但其皂苷单体有所不同,红参中含有生晒参中没有的皂苷—人参皂苷Rg2、Rg3、Rhl、Rh2等。这些新的皂苷是在人参加工过程中,经过蒸制、干燥时,人参皂苷水解产生的次生皂苷。这些次生皂苷具有许多新的活性,例如:人参皂苷Rhl、Rh2、Rg3有明显的抗癌活性,对癌细胞有诱导再分化作用,可诱导癌细胞重新分化为健康细胞,其它皂苷单体却没有这种作用,或者作用强度较弱。人参皂苷Rg3对胶原或ADP诱导的血小板聚集有较强的抑制作用。人参皂苷Rhl对凝血酶诱导的纤维蛋白原转化为纤维蛋白有明显的抑制作用。
另外,近年运用血清药理学理念研究人参皂苷的体内代谢的结果表明,原人参皂苷在人体内吸收率很低(人参皂苷Rbl口服仅吸收1%),真正被人体吸收的活性成份是经肠菌代谢产生的次生皂昔。王本祥教授在研究人参皂苷体内代谢过程时发现,口服人参皂苷Rgl后,吸收入血的生物活性成份主要是经肠菌代谢产生的次生皂苷Rhl。
但是,这些皂苷天然含量极低,例如:Rg3在白参中的含量仅为0.0003%,在红参中的含量约为0.03%,而Rh2在天然人参中并不存在,仅在红参中含有Rh2约0.001%。因而,人参类药物直接口服药效差,人体吸收率低,人参类植物中的有效成分无法得到充分的吸收,造成药物的极大浪费。
为了提高人参类植物中有效成分的含量及吸收效率,并提供一种食用方便快捷的植物切片及制剂,特提出本发明。
发明内容
本发明的首要发明目的在于提出一种含有人参总次苷的植物切片。
本发明的第二发明目的在于提出一种用该植物切片制备的制剂。
为了实现本发明的目的,采用的技术方案为:
本发明涉及一种含有人参总次苷的植物切片,其植物切片的制备方法包括以下步骤:
(1)将植物切片通过真空膨化处理;
(2)将植物切片浸泡于20~90%的醋酸5~60分钟;取出后控干,放入带孔的托盘中,摆放厚度为0.2~10cm;
(3)将托盘放入密闭蒸柜中,通入水蒸汽,维持水蒸气为饱和状态,加热至50~110℃蒸制0.5~5小时;
(4)蒸柜连接抽气装置,通入流通水蒸汽后打开抽气装置,维持0.5~5小时,抽气装置连接冷凝器,将冷凝器收集的醋酸水溶液进行回收;
(5)取出植物切片,移入50~100℃的热风干燥箱,干燥0.5~5小时。
本发明的第一优选技术方案为:所述植物切片的厚度为1~8毫米,优选2~6毫米,更优选2~4毫米。
本发明的第二优选技术方案为:在步骤(1)中,所述的真空膨化切片的步骤为:将所述的植物切片进行预处理后放于膨化罐中,加热,使膨化罐内的温度为30~100℃,压力升高至0.1~0.9MPa,时间维持5~40分钟,随后,迅速打开连接膨化罐和真空罐的减压阀,瞬间降压至-0.04~-0.08MPa,冷却,并维持5~40分钟,所述真空罐预先抽真空。
本发明的第三优选技术方案为:在步骤(2)中,醋酸的浓度为40~85%,更优选50~80%。
本发明的第四优选技术方案为:在步骤(2)中,浸泡时间为5~30分钟,优选10~25分钟。
本发明的第五优选技术方案为:在步骤(2)中,植物切片和醋酸的重量体积比为1:0.2~1.5,优选1:0.4~1.2。
本发明的第六优选技术方案为:在步骤(3)中,加热的温度为80~100℃,优选80~95℃;蒸制的时间为1~4小时,优选2~3小时。
本发明的第七优选技术方案为:在步骤(4)中,对醋酸水溶液进行回收的方法为:将冷凝器收集的醋酸水溶液经管道流至储存罐中,将储存罐连接精馏塔,将醋酸水精馏后回收醋酸至另一储存罐,循环使用。
本发明的第八优选技术方案为:在步骤(4)中,通入流通水蒸气的时间为1~4小时,优选2~3小时。
本发明的第九优选技术方案为:在步骤(5)中,干燥的温度为50~98℃,优选50~75℃。
本发明的第十优选技术方案为:所述的植物为人参属植物,并优选人参、三七、竹节参、西洋参、高丽参中的至少一种。
本发明还涉及含有人参总次苷的植物切片的制剂,所述的制剂选自粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、口服液、口腔咀嚼片、口腔含片。
下面对本发明的技术方案做进一步的解释和说明。
应用本发明的技术生产人参切片,人参中的原皂苷水解转化为次皂苷,其中:人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd转化成为人参皂苷Rg3和少量的Rh2;人参皂苷Rg1转化成为Rh1。与市售人参切片相比,多出Rg2、Rg3、Rh1、Rh2四种次皂苷,这些次皂苷的含量增加60~90倍。人参次皂苷容易被人体吸收,具有抑制血小板聚集、抗凝血酶、抗心肌缺血、抗癌等活性。
本发明克服原人参皂苷在人体内吸收利用率很低、生物活性较弱的缺点,提出了一种人参的食用新方法。经检测,处理后的植物切片中含有Rg30.70wt%、Rg20.10wt%、Rh10.11wt%、Rh20.02wt%、Rb10.32wt%、Re0.13wt%、Rc0.25wt%、Rb20.08wt%、Rd0.08wt%。
本发明的植物切片可将细菌病毒等微生物彻底杀灭,安全卫生,现在市场上的一般的人参属植物切片,一般是清洗后直接进行切片、包装,没有消毒程序,在泡水服用时,仅凭热水的冲泡无法完全灭菌,所以服用具有一定的卫生隐患。而本发明则是在将人参属的植物切片经过膨化和高温的处理,从而达到灭菌的效果,使冲泡服用更加卫生安全,可采用温水或者冷水进行浸泡服用。
本发明植物切片中的有效成分具有很高的溶出度,因此可用少量水冲泡,并且一次冲泡30分钟左右就可以释放所有有效成分,不需要长时间多次反复冲泡,使用更加便捷,减少使用者的负担,不需要大量饮水,剩余胃肠容量,更加适用于不易大量饮水的胃病患者或肾病患者。
由于人参种植难度大、生长期长,价格昂贵,资源较为稀缺,本发明较原有切片可大大提高人参有效成分的生物利用度,缓解人参资源紧张、生物利用度低。普通人参切片的人参有效成分的生物利用度以1%左右,本发明可达到60%以上。
专利ZL200510083855.6中制备得到了一种含有人参总次苷的组合物,本发明的植物切片和该专利中的提取物相比,有效成分的种类更多。因而本发明的植物切片具有更加全面的效果和更加广泛的应用。该专利中将人参属植物先经有机萃取后再采用醋酸进行水解处理,不仅步骤繁琐,其提取物价格极为昂贵,并且该提取中仅提取了人参皂苷成分,而废弃了人参中其他的对人体非常有益的成分,造成了人参属植物有效成分极大的浪费。
本发明的植物切片,创新的采用了将水解得到的有效成分固结于植物切片上,可以当茶叶一样冲泡服用,不仅符合中国人的生活习惯,并且也容易被西方人所接受。因为本发明的植物切片中仅采用了醋酸一种原料进行处理,不需要通过各种有机溶剂萃取和处理,因此是非常安全的一种人参属植物的服用方式。人参中的有效成分不仅包括了人参皂苷,还包括有人参多糖、多种氨基酸和多肽、人参炔醇、人参挥发油、多种对人体有益的有机酸及其酯、甾醇及其甙、生物碱、磷脂、维生素和微量元素。这些物质均具有一定的保健效果,综合应用,对人体具有更加全面、整体的保健效果。因此,本发明的植物切片更加适用于日常保健。
将人参中的人参皂苷进行提取,不仅步骤繁琐,大大提高了成本,使得将一种日常消费的人参属植物变成了价格昂贵的药品;并且需要用到多种有机溶剂,从而也带来了一些安全上的隐患,如果有机溶剂残留对人体也会造成一定危害。而本发明的植物切片,不仅含有经过水解得到的人参皂苷,并且经过蒸制后,醋酸被完全除去,并且无其他添加的成分,是非常天然、安全的保健食品。
本发明的植物切片的制备方法包括以下步骤:
1.将植物切片通过真空膨化处理;
2.将植物切片浸泡于20~90%的醋酸5~60分钟;取出后控干,放入带孔的托盘中,摆放厚度为0.2~10cm;醋酸的浓度为40~85%,更优选50~80%;浸泡时间为5~30分钟,优选10~25分钟;植物切片和醋酸的重量体积比为1:0.2~1.5,优选1:0.4~1.2;本发明采用较少量的醋酸溶液,采用将醋酸均匀的喷撒在植物切片上的方法,从而避免了醋酸水溶液过少而使浸泡不匀的现象;从而最大限度的减少了有效成分的渗出;
3.将托盘放入密闭蒸柜中,通入水蒸汽,维持水蒸气为饱和状态,加热至50~110℃蒸制0.5~5小时;加热的温度为80~100℃,优选80~95℃;蒸制的时间为1~4小时,优选2~3小时;本发明中采用通过维持水蒸气的饱和状态,并及时收集蒸柜顶低落的冷凝水,避免有冷凝水滴落到植物切片上,引起植物切片中有效成分的流失;同时当水蒸气过饱和时,采用抽气装置及时抽气,减少过饱和水蒸气凝集与植物切片引起有效成分的流失;
4.蒸柜连接抽气装置,通入流动水蒸汽后打开抽气装置,维持0.5~5小时,优选1~4小时,更优选2~3小时;抽气装置连接冷凝器,将冷凝器收集的醋酸水溶液进行回收;对醋酸水溶液进行回收的方法为:将冷凝器收集的醋酸水溶液经管道流至储存罐中,将储存罐连接精馏塔,将醋酸水精馏后回收醋酸至另一储存罐,循环使用;在该步骤中,及时将混有醋酸的水蒸气抽走,从而将植物切片中的醋酸除去,并且也防止冷凝水引起植物切片中有效成分的流失;
5.取出植物切片,移入50~100℃的热风干燥箱,干燥0.5~5小时;干燥的温度为50~98℃,优选50~75℃。
发明人对制备方法做了大量的研究,现将市售的普通人参属植物进行真空膨化处理,然后进行醋酸处理,为了避免人参属植物中有效成分醋酸溶出,本发明采用了短时浸泡法,通过段时间的浸泡,一般小于30分钟,并进一步优选10~25分钟,并优选醋酸浓度为20%以上。由于本发明采用了真空膨化处理,醋酸溶液可以很快的通过细胞壁进入植物细胞,对植物细胞内的原皂苷进行水解;而如果将植物切片直接进行醋酸处理,则需要浸泡至少6小时以上,才能使原皂苷水解完全。并且在长时间的浸泡过程中,非常容易造成水解后的人参皂苷成分的溶出,从而减少植物切片中的有效成分含量。本发明经过研究发现,经过真空膨化处理的人参属植物切片在醋酸溶液中,浸泡30分钟后,溶液中含有的人参皂苷是原植物所含皂苷总量的0.1~2%,而浸泡时间延长至2小时后,溶液中含有的人参皂苷是原植物所含皂苷总量的4~10%。未经真空膨化处理的人参属植物切片在醋酸溶液中,浸泡时间超过6小时后,溶液中含有的人参皂苷是原植物所含皂苷总量的8~15%。因此,采用本发明的制备工艺,不仅可以减少制备时间,并且可以最小限度的减少有效成分在制备过程中的溶出。
在步骤2和3中,本发明通过控制蒸汽的饱和状态,避免了水蒸气在植物切片表面凝集,从而将有效成分溶出;而如果不采用控制水蒸气饱和状态的技术手段,就会造成植物切片中有效成分的流失。
本发明的人参属植物切片,其外观就是植物切片,消费者购买和使用时,会带给消费者有一种眼见为实的信任感,并且其具有价格昂贵的提取物制剂的效果,因此,本发明的植物切片具有非常好的市场前景,从而在商业上获得成功。
本发明的人参属植物切片可以抗血栓形成、降血脂血压血糖,增强免疫力,降低血液粘稠度,减少耳鸣眩晕。
本发明的含有人参总次苷的植物切片的制备方法并不限于人参属植物,其他通过醋酸水解获得人参总次苷的植物均可以采用本发明的制备方法进行制备,从而获得含有人参总次苷的植物切片。
本发明的植物切片可以直接当茶冲泡饮用,也可以进一步制备成各种制剂,以方便不同人群的需要。本发明的制剂包括粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、口腔含片。其制备方法可采用一般制剂的制备方法进行制备。
本发明采用专利ZL200710147540.2中公开的技术,该工艺根据真空膨化技术的基本原理,采用真空膨化技术,同时选择控制中药材形状、大小及含水量,使中药材细胞壁产生许多微孔,有利于细胞内容物浸提及蒸馏出,提高有效成分或有效组分等的提取量,特别是对于一些药用价值很高而有效成分或有效组分含量较低,以及现有工艺较难以提取的中药材或中药材挥发油成分,尤为适用,为充分利用中药材的药用价值开辟了新的途径。本发明采用该真空膨化技术,从而可使醋酸能够更充分的溶解到植物切片的细胞中,从而更加充分的提高了人参属植物中有效成分的转化,从而提高了植物切片在热水冲泡或沏茶时溶出到水中的人参皂苷含量。经试验检测,经过真空膨化处理较未经真空膨化处理的人参属植物切片在沏茶时溶出到茶水液中人参皂苷的含量高10~40%。
本发明的具体实施方式仅限于进一步解释和说明本发明,并不对本发明的内容构成限制。
具体实施方式
实施例1人参切片的制备
1.将人参切片通过真空膨化处理;将人参切片为2~4毫米厚,预处理后放于膨化罐中,加热,使膨化罐内的温度为100℃,压力升高至0.9MPa,时间维持30分钟,随后,迅速打开连接膨化罐和真空罐的减压阀,瞬间降压至-0.04MPa,冷却,并维持30分钟,所述真空罐预先抽真空;
2.将植物切片浸泡于50%的醋酸40分钟;取出后控干,放入带孔的托盘中,摆放厚度为0.2~10cm;人参切片和醋酸的重量体积比为1:1;
3.将托盘放入密闭蒸柜中,通入水蒸汽,通过抽气装置维持水蒸气为饱和状态,并及时收集蒸柜顶低落的冷凝水,加热至90℃蒸制3小时;蒸柜底部放置一定量蒸馏水,并水蒸气通入蒸柜夹层,形成饱和水蒸气;
4.蒸柜连接抽气装置,通入流通水蒸汽后打开抽气装置,维持2小时;抽气装置连接冷凝器,将冷凝器收集的醋酸水溶液进行回收;对醋酸水溶液进行回收的方法为:将冷凝器收集的醋酸水溶液经管道流至储存罐中,将储存罐连接精馏塔,将醋酸水精馏后回收醋酸至另一储存罐,循环使用;
5.取出人参切片,移入98℃的热风干燥箱,干燥0.5~5小时。
实施例2三七切片的制备
1.将三七切片通过真空膨化处理;将三七切片为2~4毫米厚,预处理后放于膨化罐中,加热,使膨化罐内的温度为100℃,压力升高至0.9MPa,时间维持30分钟,随后,迅速打开连接膨化罐和真空罐的减压阀,瞬间降压至-0.04MPa,冷却,并维持30分钟,所述真空罐预先抽真空;
2.将三七切片浸泡于60%的醋酸25分钟;取出后控干,放入带孔的托盘中,摆放厚度为0.2cm;三七切片和醋酸的重量体积比为1:0.8;
3.将托盘放入密闭蒸柜中,通入水蒸汽,通过抽气装置维持水蒸气为饱和状态,并及时收集蒸柜顶低落的冷凝水,加热至100℃蒸制2小时;
4.蒸柜连接抽气装置,通入流通水蒸汽后打开抽气装置,维持0.5~5小时,优选1~4小时,更优选2~3小时;抽气装置连接冷凝器,将冷凝器收集的醋酸水溶液进行回收;对醋酸水溶液进行回收的方法为:将冷凝器收集的醋酸水溶液经管道流至储存罐中,将储存罐连接精馏塔,将醋酸水精馏后回收醋酸至另一储存罐,循环使用;
5.取出三七切片,移入75℃的热风干燥箱,干燥5小时。
实施例3竹节参切片的制备
1.将竹节参切片通过真空膨化处理;将竹节参切片为2~4毫米厚,预处理后放于膨化罐中,加热,使膨化罐内的温度为100℃,压力升高至0.9MPa,时间维持30分钟,随后,迅速打开连接膨化罐和真空罐的减压阀,瞬间降压至-0.04MPa,冷却,并维持30分钟,所述真空罐预先抽真空;
2.将竹节参切片浸泡于80%的醋酸20分钟;取出后控干,放入带孔的托盘中,摆放厚度为0.2cm;竹节参切片和醋酸的重量体积比为1:0.6;
3.将托盘放入密闭蒸柜中,通入水蒸汽,通过抽气装置维持水蒸气为饱和状态,并及时收集蒸柜顶低落的冷凝水,加热至100℃蒸制3小时;
4.蒸柜连接抽气装置,通入流通水蒸汽后打开抽气装置,维持4小时;抽气装置连接冷凝器,将冷凝器收集的醋酸水溶液进行回收;对醋酸水溶液进行回收的方法为:将冷凝器收集的醋酸水溶液经管道流至储存罐中,将储存罐连接精馏塔,将醋酸水精馏后回收醋酸至另一储存罐,循环使用;
5.取出竹节参切片,移入98℃的热风干燥箱,干燥3小时。
实施例4西洋参切片的制备
1.将西洋参切片通过真空膨化处理;将竹节参切片为2~4毫米厚,预处理后放于膨化罐中,加热,使膨化罐内的温度为100℃,压力升高至0.9MPa,时间维持30分钟,随后,迅速打开连接膨化罐和真空罐的减压阀,瞬间降压至-0.04MPa,冷却,并维持30分钟,所述真空罐预先抽真空;
2.将西洋参切片浸泡于70%的醋酸30分钟;取出后控干,放入带孔的托盘中,摆放厚度为0.6cm;西洋参切片和醋酸的重量体积比为1:0.5;
3.将托盘放入密闭蒸柜中,通入水蒸汽,通过抽气装置维持水蒸气为饱和状态,并及时收集蒸柜顶低落的冷凝水,加热至100℃蒸制4小时;
4.蒸柜连接抽气装置,通入流通水蒸汽后打开抽气装置,维持3小时;抽气装置连接冷凝器,将冷凝器收集的醋酸水溶液进行回收;对醋酸水溶液进行回收的方法为:将冷凝器收集的醋酸水溶液经管道流至储存罐中,将储存罐连接精馏塔,将醋酸水精馏后回收醋酸至另一储存罐,循环使用;
5.取出西洋参切片,移入90℃的热风干燥箱,干燥2小时。
实验例1:人参皂苷含量的测定
1、仪器与试药
1.1Agilent1200型液相色谱仪:在线脱气机、输液泵、柱温箱、紫外检测器(VWD)、自动进样器等装置。Milli-Q纯水机。甲醇、乙腈均为色谱纯,水为高纯水。
1.2化学试剂与对照品,人参皂苷Rg1、Rb1、Re、Rg2、Rg3、R1对照品购自中国食品药品检定研究院,供含量测定用;Rb2、Rc、Rd、Rh1、Rh2购自成都思科华生物技术有限公司,供含量测定用;乙睛为色谱纯,其它试剂均为市售分析纯。
2方法与结果
2.1色谱条件色谱柱为Discovery C18(4.6mm×25cm,5μm),以流动相为A:水,B:乙腈,进行梯度洗脱:0→25min,A与B比例由84:16线性变化至76:24;25→85min,A与B比例由76:24线性变化至62:38。流速1ml·min-1。柱温25℃。检测波长为203nm。进样量为10μl。
2.2对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Re、Rg1、Rg2、Rg3、Rh1、Rh2适量,用甲醇配制成浓度分别为200μg·ml-1的混和对照品溶液,即得。
2.3供试品溶液制备
分别取实施例1制备的人参切片、实施例2制备的三七切片、实施例3制备的西洋参切片;另取市售生晒人参、三七、西洋参应用常规方法制备的切片作为对照切片。各种切片分别称取50克,经60%乙醇提取,浓缩,过大孔吸附树脂柱,分别用水和20%乙醇洗脱,弃去,之后再用70%乙醇进行洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加甲醇溶解并转移至2ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
2.4线性关系考察精密吸取对照品溶液2、4、6、8、10μl,按上述色谱条件分别进样,以主峰面积与相应的人参皂苷对照品溶液浓度作线性回归。
2.5样品中各皂苷含量的测定:精密吸取样品溶液10μl,每个样品取3份,注入液相色谱仪,按上述色谱条件进行测定,记录峰面积,以3次测定结果的平均值作为测定值。
测定结果如表1所示:
表1:各种切片人参皂苷单体含量分析结果表:单位(wt%)
实验例2:本发明实施例1人参切片与人参总次苷对体内血栓形成的影响
1.实验方法:
取大鼠50只,雌雄各半,体重250~300g,随机分成5组,每组10只,预养一周。
地尔硫卓组:地尔硫卓50mg/kg·d,
地奥心血康组:地奥心血康200mg/kg·d;
人参总次苷组:按照专利ZL200510083855.6制备人参总次皂苷200mg/kg·d;
本发明实验组:实施例1制备的人参切片20g/kg·d加2倍重量100℃水浸泡2小时,取液体;
空白对照组:纯水100mg/kg·d;
将上述药物灌胃7d。
2.血栓形成抑制率的测定:给药第七天,每只大鼠于给药后30min用戊巴比妥钠麻醉,分离左颈外静脉和右颈总动脉,取三段聚乙烯管组成的套管,其中间段置一根5cm的称重四号手术线,以肝素生理盐水(50U/ml)充满聚乙烯管,当管的一端插入颈外静脉后,夹住管的一端将丝线固定的一端管插入右颈总动脉,手术完成后立即开放血流,15min后中断血流,迅速取处丝线称重。总重量减去丝线重量即为血栓湿重。按以下公式计算血栓形成抑制率。
对各组血栓重量的平均值进行统计学处理,t检验判断药物的显著性作用,通过抑制率判定药物的作用强度。
3.实验结果如表2所示:
表2:
与空白对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
结论:人参总次苷对试验大鼠颈动静脉旁路血栓形成的抑制作用,可见阳性药和受试物各组血栓重量都低于对照组,阳性药地尔硫卓和对照组比较有显著差异(P<0.05),本发明制备的人参切片与人参总次苷组效果相当。
实验例3:本发明人参切片与市售人参片水提取物对四氧嘧啶高血糖小鼠的降血糖作用
1.材料方法
1.1材料
1.1.1实验动物雄性ICR小鼠,体重为(20±2)g,各组动物均在同样环境下饮水、摄食,保持自然光照。
1.1.2药品:四氧嘧啶、降糖灵片(盐酸苯乙双胍片,南通制药厂产品);血清葡萄糖。
1.1.3仪器:721分光光度计、WH85型旋涡混合机、高速台式离心机、RE52型旋转蒸发仪、恒温水浴锅、医用全自动生化分析仪、血糖仪、台式低温离心机。
1.2供试品
人参水提物的提取:称取人参的干燥根500g,加10L蒸馏水浸泡过夜,90℃提取6h;纱布过滤,滤渣重复煎煮2次,每次6h,合并滤液,浓缩至1L,真空冰冻干燥,得人参水提物220g。取一定量水提物,用水稀释成所需的供试液,备用。
实施例1制备得到的人参切片100g,加200g100℃水浸泡2小时,得到液体待用。
1.3实验方法
正常雄性ICR小鼠禁食10h后,按200mg/kg的剂量腹腔注射ALX溶液。72h后,尾静脉采血,测定空腹12h后的血糖值,血糖值大于15mmol/L的小鼠为造模成型的糖尿病小鼠。将糖尿病小鼠随机分为5组,每组10只,设为糖尿病对照组,降糖灵组,人参水提物组,人参切片组;组间血糖差异小于1.5mmol/L,同时设一组正常小鼠对照组。
人参水提物组:以44.0g/kg·d的剂量连续灌胃10d;
本发明人参切片水溶液组:以2.0g/kg·d的剂量连续灌胃10d;(2g人参切片的水提物)降糖灵组:以4mg/kg·d的剂量连续灌胃10d;
第11天,空腹12h后自小鼠眼眶静脉丛取血,分离血清,用葡萄糖氧化酶法测血清的血糖值。
1.4数据分析:所有数据经统计学处理后用x±s表示,组间差异采用t检验。
2实验结果
小鼠腹腔注射ALX72h后,血糖值明显升高,与对照组比较上升近5倍。使用人参水提物和实施例1人参切片水提取物灌10d后,测定对ALX糖尿病小鼠血糖值的影响,结果见表4。与阴性对照组相比,人参水提物和实施例1组人参切片水提取物可以极显著地降低小鼠的血糖值。在市售人参切片的用量为本发明实施例的人参切片50倍的条件下,两组对降低ALX糖尿病小鼠血糖的效果相当。
表3:本实施例1的人参切片与人参水提物对ALX糖尿病小鼠血糖的影响
注:与正常对照组相比,*P<0.05,**P<0.01;
与阴性对照组相比,ΔP<0.05,ΔΔP<0.01,n=10。
实验例4:本发明实施例1人参切片与市售人参片水提取物对高脂血症大鼠脂代谢的影响
1材料和方法
1.1动物:Wistar大鼠(200±20)g。
1.2供试品:
本发明实施例1制备人参切片、市售人参片、人参总次苷采用专利ZL200510083855.6制备、实验时以生理盐水配制成所需浓度。对照药洛伐他汀系江苏大洋制药有限公司生产。
1.3高脂模型制备:高脂饮食组在给药前,每晚给予高脂饲料,每只鼠平均20g,白天补充普通饲料,共12d。
1.4实验方法:大鼠72只,随机分为6组,每组12只。
正常对照组:喂普通饲料,给生理盐水20mL/kg·d;
模型对照组:喂高脂饲料,给生理盐水20mL/kg·d;
阳性对照组:喂高脂饲料,给洛伐他汀20mg/kg·d;
人参总次苷组:喂高脂饲料,给人参总次苷200mg/kg·d;
实施例1人参切片组:喂高脂饲料,给实施例1制备的人参切片20g/kg·d,加2倍重量100℃水浸泡2小时,取液体;
市售人参片组:喂高脂饲料,给提取物88g/kg·d,(提取物的制备方法同实验例3);
各组均每日灌胃1次,连续12d。于给药最后1d晚间禁食,不禁水。次日上午,将动物用3%戊巴比妥钠30mg/kg麻醉,自腹主动脉采血3mL,分离血清,按试剂盒说明书方法测定甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL2c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL2c)。
1.5统计方法:数值用x表示,以两组间均数比较t检验进行统计分析。
2结果
高脂模型组与正常组比较,血清TC、TG、LDL2c、TC/HDL2c及LDL2c/HDL2c均显著升高,而HDL2c则显著下降,表明高脂模型复制成功。
与高脂模型组比较,在用量条件为人参总次苷200mg/kg、本发明制备人参切片20g/kg·d、市售人参切片88g/kg,即市售人参切片的用量为本发明实施例的人参切片50倍的条件下,均能明显降低血清TC、TG、LDL2c,并明显升高血清HDL2c,亦能明显降低血清TC/HDL2c及LDL2c/HDL2c比值,本发明制备人参切片与人参总次苷的效果相当。
表4:各供试品对高脂血症大鼠血脂代谢的影响(.x,n=10)
注:与模型组比较*P<0.05;**P<0.01;***P<0.001。
Claims (15)
1.一种含有人参总次苷的植物切片,其特征在于,所述的植物切片的制备方法包括以下步骤:
(1)将植物切片通过真空膨化处理,所述的植物为人参属植物;
(2)将植物切片浸泡于20~90%的醋酸5~60分钟,植物切片和醋酸的重量体积比为1:0.4~1.2;取出后控干,放入带孔的托盘中,摆放厚度为0.2~10cm;
(3)将托盘放入密闭蒸柜中,通入水蒸汽,维持水蒸气为饱和状态,加热至80~95℃蒸制1~4小时;
(4)蒸柜连接抽气装置,通入流通水蒸汽后打开抽气装置,维持0.5~5小时,抽气装置连接冷凝器,将冷凝器收集的醋酸水溶液进行回收;
(5)取出植物切片,移入50~100℃的热风干燥箱,干燥0.5~5小时;
其中,在步骤(1)中,所述的真空膨化的步骤为:将所述的植物切片进行预处理后放于膨化罐中,加热,使膨化罐内的温度为30~100℃,压力升高至0.1~0.9MPa,时间维持5~40分钟,随后,迅速打开连接膨化罐和真空罐的减压阀,瞬间降压至-0.04~-0.08MPa,冷却,并维持5~40分钟,所述真空罐预先抽真空。
2.根据权利要求1所述的含有人参总次苷的植物切片,其特征在于,所述植物切片的厚度为1~8毫米。
3.根据权利要求2所述的含有人参总次苷的植物切片,其特征在于,所述植物切片的厚度为2~6毫米。
4.根据权利要求3所述的含有人参总次苷的植物切片,其特征在于,所述植物切片的厚度为2~4毫米。
5.根据权利要求1所述的含有人参总次苷的植物切片,其特征在于,在步骤(2)中,醋酸的浓度为40~85%。
6.根据权利要求1所述的含有人参总次苷的植物切片,其特征在于,在步骤(2)中,醋酸的浓度为50~80%。
7.根据权利要求1所述的含有人参总次苷的植物切片,其特征在于,在步骤(2)中,浸泡时间为5~30分钟。
8.根据权利要求7所述的含有人参总次苷的植物切片,其特征在于,在步骤(2)中,浸泡时间为10~25分钟。
9.根据权利要求1所述的含有人参总次苷的植物切片,其特征在于,蒸制时间为2~3小时。
10.根据权利要求1所述的含有人参总次苷的植物切片,其特征在于,在步骤(4)中,对醋酸水溶液进行回收的方法为:将冷凝器收集的醋酸水溶液经管道流至储存罐中,将储存罐连接精馏塔,将醋酸水精馏后回收醋酸至另一储存罐,循环使用。
11.根据权利要求1所述的含有人参总次苷的植物切片,其特征在于,在步骤(4)中,通入流通水蒸气的时间为1~4小时。
12.根据权利要求11所述的含有人参总次苷的植物切片,其特征在于,时间为2~3小时。
13.根据权利要求1所述的含有人参总次苷的植物切片,其特征在于,在步骤(5)中,干燥的温度为50~98℃。
14.根据权利要求13所述的含有人参总次苷的植物切片,其特征在于,干燥温度为50~75℃。
15.根据权利要求1所述的含有人参总次苷的植物切片,其特征在于,所述植物为人参、三七、竹节参、西洋参或高丽参中的至少一种。
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