CN102552374A - 淡豆豉总黄酮滴丸及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种淡豆豉总黄酮滴丸,是以乙醇溶液超声提取淡豆豉,大孔吸附树脂洗脱、纯化,得到淡豆豉总黄酮;再以固体石蜡为基质,将淡豆豉总黄酮与基质按一定比例混合,以一定浓度的乙醇为冷凝剂,在一定的滴制温度范围内、一定的滴制口径、滴速、滴距下制得的淡豆豉总黄酮滴丸。本发明还公开了它的制备方法。本发明的淡豆豉总黄酮滴丸的制备方法简单易行,无污染;制得的滴丸剂型服用方便,安全性好、生物利用度高,且成本低廉,适于大规模生产。本发明的滴丸具有调节血脂、防治骨质疏松、抗氧化等多种作用,对防治老年退行性病变有积极意义。
Description
技术领域
本发明属于中药制药或保健品领域,具体来说,涉及一种药食两用中药淡豆豉总黄酮的制剂及其制备方法。
背景技术
淡豆豉为豆科植物大豆Glycine max(L.)Merr.的黑色的成熟种子经蒸罨后,与桑叶、鲜青蒿或苏叶、麻黄等辅料发酵而成。流行病学调查和实验研究均证明黑大豆本身对多种疾病具有明显的预防和保健作用,主要原因与存在于黑大豆中的固有成分大豆异黄酮有关。
大豆异黄酮属多酚类混合物,主要以九种异黄酮糖甙和三种相应的配糖体混合存在,目前研究的最多的是7,4’-二羟基异黄酮-7-葡糖甙(黄豆甙,daidzin)和5,7,4’-三异黄酮-7-葡糖甙(染料木甙,genistin)。大豆经加工、微生物发酵或体外酸水解作用,部分糖甙脱离释放出游离式的二羟基异黄酮(黄豆甙元,daidzein)和三羟基异黄酮(染料木黄酮,genistein),后者(即甙元)可在体内有效吸收并发挥作用。
目前市场上开发的大豆异黄酮保健品,不仅为保健品市场提供新资源,也为人类健康提供一份保障。主要剂型为口服液、胶囊、片剂等。然而大豆异黄酮中甙元含量较低,且存在着黄豆甙和三羟基异黄酮等甙元的水溶性较差的问题,并不容易被人体吸收。
发明内容
本发明的目的在于提供一种方法简单易行、成本低廉、适于大规模生产、质量可控的淡豆豉总黄酮滴丸及其制备方法。
为实现上述目的,本发明采取以下技术方案:
淡豆豉总黄酮滴丸,它是将中药材淡豆豉粉碎,过30~40目筛,经提取纯化后得到淡豆豉总黄酮,再将淡豆豉总黄酮与辅料固体石蜡按照1∶1.1~2的重量比混合制成的滴丸。
如上所述的淡豆豉总黄酮滴丸,其中,所述淡豆豉总黄酮与固体石蜡的混合比例优选为重量比1∶1.1~1.4。
一种淡豆豉总黄酮滴丸的制备方法,其是按以下步骤完成:
a.将淡豆豉以石油醚脱脂,烘干,在乙醇中温浸,超声提取后过滤提取液;
b.弃滤饼,合并滤液,挥发溶剂,采用乙醇反复冷浸法除去杂蛋白,得到粗提液;
c.粗提液用大孔吸附树脂纯化,得淡豆豉总黄酮,浓缩;
d.将基质固体石蜡置水浴中加热熔化;
e.将淡豆豉总黄酮和固体石蜡按照重量比1∶1.1~1.4混合,不断搅拌加热,控制温度,混合均匀;
f.保持滴制温度,将混合物倾入滴丸机料斗中,开动搅拌;
g.调节滴制口径、滴速和滴距;
h.冷凝剂为乙醇,调整冷凝剂的温度,滴入冷凝剂中冷却;
i.取出已冷却的滴丸,除去表面的冷却液,风干即得。
如上所述的制备方法,其中,步骤a中,淡豆豉与乙醇的料液比优选为1∶6~12(体积比),乙醇浓度优选为60~85vt%,温浸时间优选为24h~72h,超声提取时间优选为20~50min/次,共提取3次,提取温度优选为40~70℃。
如上所述的制备方法,其中,步骤b中,乙醇浓度优选为50~90vt%,更优选地,使用70-90vt%的乙醇洗脱。
如上所述的制备方法,其中,步骤c中,所述大孔吸附树脂为AB-8、DM130、LX-38、X-5和D101中的一种,纯化过程是吸附后用水冲洗,之后用浓度为40~90vt%乙醇洗脱,更优选地,使用70-90vt%的乙醇洗脱。
如上所述的制备方法,其中,步骤e中,淡豆豉总黄酮和固体石蜡的混合比例优选为1∶1.3~1.4。
如上所述的制备方法,其中,步骤f中,所述滴制温度优选为88~97℃。
如上所述的制备方法,其中,步骤g中,所述滴制口径优选为2~4mm,滴速优选为35~50滴/min,滴距优选为1~3cm。
如上所述的制备方法,其中,步骤h中,所述冷凝剂优选为65~95vt%乙醇,冷凝剂的温度优选为0~10℃。
一种淡豆豉总黄酮滴丸的制备方法,其是按以下步骤完成:
a.将中药材淡豆豉以石油醚脱脂,烘干,按照淡豆豉与乙醇的体积比为1∶10的料液比将淡豆豉在80vt%乙醇中温浸24h后超声提取,其中,超声提取时间为30min/次,共提取3次,提取温度60℃,过滤提取液;
b.弃滤饼,合并滤液,挥发溶剂,采用80vt%乙醇反复冷浸法除杂蛋白,得到粗提液;
c.粗提液以大孔吸附树脂D101吸附,以水冲洗后以70vt%乙醇洗脱,纯化,得总黄酮浓缩液;
d.将基质固体石蜡置水浴中加热熔化;
e.将淡豆豉总黄酮和固体石蜡按1∶1.3~1.4的重量比混合,不断搅拌加热,控制温度在90~95℃,混合均匀;
f.将混合物倾入滴丸机料斗中,开动搅拌;
g.调节滴制口径为2~3mm,滴速40~45滴/min,滴距2~2.5cm;
h.冷凝剂为90vt%乙醇,冷凝剂的温度为2~10℃,滴入冷凝剂中冷却;
i.取出已冷却的滴丸,除去表面的冷却液,风干即得。
按照上述方法制备得到的淡豆豉总黄酮滴丸。
本发明的有益效果为:
1.淡豆豉异黄酮中甙元含量远远高于大豆异黄酮,发明人通过大量研究发现淡豆豉中甙元含量是普通大豆的100倍,且人体易吸收。本发明给出了其滴丸制剂及其制备的方法,制成的滴丸生物利用度高。滴丸具有调节血脂、防治骨质疏松、抗氧化等多种作用,对防治老年退行性病变有积极意义,还可作为改善妇女更年期综合症的保健品(药物)。
2.本专利所用辅料成本低,滴丸中的主要有效成分染料木素溶出度明显增高。
3.滴丸的具有优势:能提高难溶性药物的生物利用度,有利于药物的溶出,故生物利用度较高。滴丸剂起效快、易进行质量控制,因而疗效比传统剂型好,售价较高。其次是制备滴丸剂的设备简单,操作方便;滴丸的工序少、生产周期短,生产自动化程序高,劳动强度低,劳动生产效率高,为中药的发展开辟新的研究空间。
4.与统中药的“丸散膏丹”剂型相比,它具有其他剂型不具备的突出特点,符合人们对现代药物制剂“三小”(用量小、副作用小、毒性小)“三效”(高效、长效、速效)“三方”(方便携带、方便用药、方便储存)等基本要求。
附图说明
图1为混合标准品的HPLC色谱图。
图2为淡豆豉总黄酮的HPLC色谱图。
具体实施方式
实施例1
(1)淡豆豉总黄酮的提取:
将淡豆豉粉碎,过40目筛,石油醚脱脂,烘干。80vt%乙醇温浸24h,其中淡豆豉与乙醇的体积比为1∶10,超声提取30min/次,共提取3次,提取温度60℃,过滤。弃去滤饼,合并滤液,挥发溶剂,采用80vt%乙醇反复冷浸法除去少量杂蛋白。
(2)淡豆豉总黄酮的纯化:
经大孔吸附树脂D101吸附,水洗,去杂质。80vt%乙醇洗脱,浓缩回收乙醇,得淡豆豉总黄酮提取液。
(3)淡豆豉总黄酮滴丸的制备:
将基质固体石蜡置水浴上加热熔化,熔化后将淡豆豉总黄酮以1∶1.1的重量比加入固体石蜡中,不断搅拌加热,混合均匀,保持滴制温度95℃±2℃,倾入滴丸机料斗中,开动搅拌,调节滴入速度40滴/min、滴制口径3mm、滴距1cm,滴入冷凝剂中冷却,冷凝剂为0℃的65vt%乙醇。最后取出已冷却的滴丸,除去表面的冷却液,风干即得,制得滴丸1000粒。
实施例2
(1)淡豆豉总黄酮的提取:
将淡豆豉粉碎,过50目筛,石油醚脱脂,烘干。85vt%乙醇温浸48h,其中淡豆豉与乙醇的体积比为1∶8,超声提取35min/次,3次,提取温度55℃,过滤。弃去滤饼,合并滤液,挥发溶剂,采用75vt%乙醇反复冷浸法除去少量杂蛋白。
(2)淡豆豉总黄酮的纯化:
经大孔吸附树脂X-5吸附,水洗,去杂质。90vt%乙醇洗脱,浓缩回收乙醇,得淡豆豉总黄酮提取液。
(3)淡豆豉总黄酮滴丸的制备:
将基质固体石蜡置水浴上加热熔化,熔化后将淡豆豉总黄酮以1∶1.3的重量比加入固体石蜡中,不断搅拌加热,混合均匀,保持滴制温度90℃±2℃,倾入滴丸机料斗中,开动搅拌,调节滴入速度45滴/min、滴制口径4mm、滴距1.5cm,滴入冷凝剂中冷却,冷凝剂为2℃的80vt%乙醇。最后取出已冷却的滴丸,除去表面的冷却液,风干即得,制得滴丸1000粒。
实施例3
(1)淡豆豉总黄酮提取:
将淡豆豉粉碎,过35目筛,石油醚脱脂,烘干。65vt%乙醇温浸36h,其中淡豆豉与乙醇的体积比为1∶11,超声提取40min/次,3次,提取温度60℃,过滤。弃去滤饼,合并滤液,挥发溶剂,采用82vt%乙醇反复冷浸法除去少量杂蛋白。
(2)淡豆豉总黄酮纯化:
经大孔吸附树脂LX-38吸附,水洗,去杂质。70vt%乙醇洗脱,浓缩回收乙醇,得淡豆豉总黄酮提取液。
(3)淡豆豉总黄酮滴丸总体制备方法:
将基质固体石蜡置水浴上加热熔化,熔化后将淡豆豉总黄酮以1∶1.4的重量比加入固体石蜡中,不断搅拌加热,混合均匀,保持滴制温度93℃±2℃,倾入滴丸机料斗中,开动搅拌,调节滴入速度47滴/min、滴制口径3mm、滴距2.5cm,滴入冷凝剂中冷却,冷凝剂为4℃的90vt%乙醇。最后取出已冷却的滴丸,除去表面的冷却液,风干即得,制得滴丸1000粒。
实施例4
(1)淡豆豉总黄酮提取:
将淡豆豉粉碎,过50目筛,石油醚脱脂,烘干。60vt%乙醇温浸50h,其中淡豆豉与乙醇的体积比为1∶12,超声提取50min/次,3次,提取温度65℃,过滤。弃去滤饼,合并滤液,挥发溶剂,采用78vt%乙醇反复冷浸法除去少量杂蛋白。
(2)淡豆豉总黄酮纯化:
经大孔吸附树脂DM130吸附,水洗,去杂质。82vt%乙醇洗脱,浓缩回收乙醇,得淡豆豉总黄酮提取液。
(3)淡豆豉总黄酮滴丸总体制备方法:
将基质固体石蜡置水浴上加热熔化,熔化后将淡豆豉总黄酮以1∶1.3的重量比加入固体石蜡中,不断搅拌加热,混合均匀,保持滴制温度95℃±2℃,倾入滴丸机料斗中,开动搅拌,调节滴入速度42滴/min、滴制口径2mm、滴距3cm,滴入冷凝剂中冷却,冷凝剂为2℃的95vt%乙醇。最后取出已冷却的滴丸,除去表面的冷却液,风干即得,制得滴丸1000粒。
实施例5
(1)淡豆豉总黄酮的提取:
将淡豆豉粉碎,过20目筛,石油醚脱脂,烘干。68vt%乙醇温浸36h,其中淡豆豉与乙醇的体积比为1∶9,超声提取40min/次,3次,提取温度68℃,过滤。弃去滤饼,合并滤液,挥发溶剂,采用81vt%乙醇反复冷浸法除去少量杂蛋白。
(2)淡豆豉总黄酮的纯化:
经大孔吸附树脂AB-8吸附,水洗,去杂质。80vt%乙醇洗脱,浓缩回收乙醇,得淡豆豉总黄酮提取液。
(3)淡豆豉总黄酮滴丸的制备:
将基质固体石蜡置水浴上加热熔化,熔化后将淡豆豉总黄酮以1∶1.4的重量比加入固体石蜡中,不断搅拌加热,混合均匀,保持滴制温度94℃±2℃,倾入滴丸机料斗中,开动搅拌,调节滴入速度43滴/min、滴制口径2mm、滴距2cm,滴入冷凝剂中冷却,冷凝剂为8℃的82vt%乙醇。最后取出已冷却的滴丸,除去表面的冷却液,风干即得,制得滴丸1000粒。
实施例6
(1)淡豆豉总黄酮提取:
将淡豆豉粉碎,过40目筛,石油醚脱脂,烘干。73vt%乙醇温浸36h,其中淡豆豉与乙醇的体积比为1∶13,超声提取60min/次,3次,提取温度78℃,过滤。弃去滤饼,合并滤液,挥发溶剂,采用75vt%乙醇反复冷浸法除去少量杂蛋白。
(2)淡豆豉总黄酮纯化:
经大孔吸附树脂D101吸附,水洗,去杂质。75vt%乙醇洗脱,浓缩回收乙醇,得淡豆豉总黄酮提取液。
(3)淡豆豉总黄酮滴丸总体制备方法:
将基质固体石蜡置水浴上加热熔化,熔化后将淡豆豉总黄酮以1∶1.2的重量比加入固体石蜡中,不断搅拌加热,混合均匀,保持滴制温度91℃±2℃,倾入滴丸机料斗中,开动搅拌,调节滴入速度44滴/min、滴制口径3mm、滴距2cm,滴入冷凝剂中冷却,冷凝剂为0℃的95vt%乙醇。最后取出已冷却的滴丸,除去表面的冷却液,风干即得,制得滴丸1000粒。
实施例7
滴丸的质量标准:
(1)外形:
滴丸表面光滑,丸形圆整,色泽均一,硬度较好。
(2)丸重:
当滴管口径在一定范围内,管径大则滴制的滴丸也大,反之则小。基质形成溶液后的表面张力受温度影响,故温度也与丸重有关。温度上升,表面张力减小,丸重减小;温度下降,表面张力增大,丸重也增大。
随机从同一批淡豆豉总黄酮滴丸中抽取100粒称其总重量,重复试验6次,得出平均值,算出每粒滴丸的大约重量,每粒滴丸的大约重16.89-33.42mg。
(3)圆整度:
液滴在冷凝剂中的移动速度越快,受重力和浮力的影响越大,越容易呈扁形。经试验得出液滴与冷凝剂密度相差大或冷凝剂的粘度小时都能增加移动速度,最终影响其圆整度。
随机从同一批淡豆豉总黄酮滴丸中抽取1000粒检测次品数(次品标准如:有拖尾,呈扁形,有空洞等),计算次品在总数中所占的比例值。重复试验6次,取平均值,得出每1000粒中的次品数,结果如表1所示。
表1圆整度测试结果
由表1可见:生产1000粒滴丸中含有不合格品26.2粒,合格率达97.3%。
根据本试验确定的成型工艺,连续制备6批淡豆豉总黄酮滴丸,经过对外观圆整度、丸重差异、溶散时限及稳定性等多种指标测定和考察,均符合《中国药典》2005年版“滴丸”项下的有关规定,由此表明,该成型工艺可行。
实施例8
淡豆豉总黄酮中染料木甙、大豆甙元和染料木素测定
(1)HPLC色谱条件
色谱柱:Diamonsil C18(250×4.6mm,5μm);流动相:甲醇∶乙酸∶水(12∶1∶10);流速:1.0mL/min;柱温:25℃;进样量:20μL;检测波长:260nm。经过一系列摸索,确定以上最适色谱条件,染料木甙、大豆甙元和染料木素三种主要有效成分均在20min内分离良好。
(2)标准曲线的制备
配制标准储备液:将染料木甙、大豆甙元和染料木素三种标准品减压干燥12h。准确称量染料木甙2.5mg、大豆甙元2.5mg、染料木素1mg,分别用色谱甲醇定容,得三种不同浓度标准储备液:染料木甙0.1mg/mL,大豆甙元0.05mg/mL、染料木素0.01mg/mL。
制备标准曲线:按照表2配制混合标准浓度梯度溶液,分别用色谱甲醇定容至10mL。0.45μm微孔滤膜过滤,HPLC检测,三者保留时间分别为:染料木甙约4.6min、大豆甙元约10.5min、染料木素约16min,如图1所示,由左至右的三个峰分别为染料木甙、大豆甙元和染料木素,可见此色谱条件下三种有效成分分离较好。得到如下三条标准曲线方程(横坐标x:浓度μg/mL,纵坐标y:峰面积×10-5):
染料木甙:y=2.8856x+4.3912 R2=0.9993(线性范围10μg/mL~35μg/mL);
大豆甙元:y=2.6713x+0.0955 R2=0.9997(线性范围0.5μg/mL~10μg/mL);
染料木素:y=5.3054x+0.28 R2=0.9994(线性范围0.1μg/mL~6.0μg/mL)。
表2不同浓度梯度混合标准溶液的配制方法
(3)淡豆豉总黄酮中的甙元检测
将按前述方法从中药淡豆豉中提取出的淡豆豉总黄酮用色谱甲醇溶解并定容至一定体积,经0.45μm微孔滤膜过滤后进行HPLC检测,进样量20μm,其色谱图如图2所示,其中1为大豆甙元,2为染料木素。
实施例9
体外释放度测定
取三批淡豆豉总黄酮滴丸及淡豆豉总黄酮分别置于转篮中进行体外释放度考察。以0.9vt%的盐酸溶液900mL为释放介质,转篮转速为100r·min-1,温度(37±0.5)℃,经2h,立即将转篮升出液面,取液5mL检测其中芍药甙的含量;弃去酸液,随即将转篮浸入预热至(37±0.5)℃的900mL磷酸二氢钾-硼砂缓冲液(pH6.8)为溶出介质,转速100r·min-1,分别于15,30,45,60,75,90,105,120min取样5mL,经0.8m滤膜滤过,取续滤液0.2μL适当稀释后,20μL进样,计算出释放量百分比。
三批淡豆豉总黄酮滴丸及淡豆豉总黄酮在酸中2h的释放量均小于10%,符合《中国药典》的有关规定。而在pH6.8的PBS中,淡豆豉总黄酮滴丸15min内释放即超过50%,60min即超过80%,已基本上全部释放。
Claims (10)
1.淡豆豉总黄酮滴丸,其特征在于,它是将淡豆豉粉碎,过30~40目筛,经提取纯化后得到淡豆豉总黄酮,再将淡豆豉总黄酮与辅料固体石蜡按照1∶1.1~2的重量比混合制成的滴丸。
2.根据权利要求1所述的淡豆豉总黄酮滴丸,其特征在于,所述淡豆豉总黄酮与固体石蜡的混合比例为重量比1∶1.1~1.4。
3.一种淡豆豉总黄酮滴丸的制备方法,其特征在于,按以下步骤完成:
a.将淡豆豉以石油醚脱脂,烘干,在乙醇中温浸,超声提取后过滤提取液;
b.弃滤饼,合并滤液,挥发溶剂,采用乙醇反复冷浸法除去杂蛋白,得到粗提液;
c.粗提液用大孔吸附树脂纯化,得淡豆豉总黄酮,浓缩;
d.将基质固体石蜡置水浴中加热熔化;
e.将淡豆豉总黄酮和固体石蜡按照重量比1∶1.1~1.4混合,不断搅拌加热,控制温度,混合均匀;
f.保持滴制温度在88~97℃,将混合物倾入滴丸机料斗中,开动搅拌;
g.调节滴制口径、滴速和滴距;
h.冷凝剂为乙醇,调整冷凝剂的温度,滴入冷凝剂中冷却;
i.取出已冷却的滴丸,除去表面的冷却液,风干即得。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤a中,淡豆豉与乙醇的体积比为1∶6~12,乙醇浓度为60~85vt%,温浸时间为24h~72h,超声提取时间为20~50min/次,共提取3次,提取温度为40~70℃。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤b中,乙醇浓度为50~90vt%。
6.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤c中,所述大孔吸附树脂为AB-8、DM130、LX-38、X-5和D101中的一种,所述纯化过程是在吸附后用水冲洗,之后用浓度为40~90vt%乙醇洗脱。
7.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤g中,所述滴制口径为2~4mm,滴速为35~50滴/min,滴距为1~3cm。
8.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤h中,所述冷凝剂为65~95vt%乙醇,冷凝剂的温度为0~10℃。
9.一种淡豆豉总黄酮滴丸的制备方法,其特征在于,按以下步骤完成:
a.将淡豆豉以石油醚脱脂,烘干,按照淡豆豉与乙醇的体积比为1∶10的比例将淡豆豉在80vt%乙醇中温浸24h后超声提取,其中,超声提取时间为30min/次,共提取3次,提取温度为60℃,过滤提取液;
b.弃滤饼,合并滤液,挥发溶剂,采用80vt%乙醇反复冷浸法除杂蛋白,得到粗提液;
c.粗提液以D101大孔吸附树脂吸附,以水冲洗后以70vt%乙醇洗脱,纯化,得总黄酮浓缩液;
d.将基质固体石蜡置水浴中加热熔化;
e.将淡豆豉总黄酮和固体石蜡按1∶1.3~1.4的重量比混合,不断搅拌加热,控制温度在90~95℃,混合均匀;
f.将混合物倾入滴丸机料斗中,开动搅拌;
g.调节滴制口径为2~3mm,滴速40~45滴/min,滴距2~2.5cm;
h.冷凝剂为90vt%乙醇,冷凝剂的温度为2~10℃,滴入冷凝剂中冷却;
i.取出已冷却的滴丸,除去表面的冷却液,风干即得。
10.按照权利要求9所述方法制备得到的淡豆豉总黄酮滴丸。
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- 2010-12-07 CN CN2010105882490A patent/CN102552374A/zh active Pending
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