CN105533749A - 一种含淫羊藿、五味子的保健食品及其制备方法和用途 - Google Patents
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Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Abstract
本发明涉及一种包含淫羊藿、五味子等原料的保健食品组合物及其制备方法和用途,具体是指在朝医学养生理论指导下,以淫羊藿、山茱萸、山药、五味子、茯苓、金樱子为主要原料制备的保健食品,该保健食品具有缓解体力疲劳功能,属于保健食品研制、生产、使用领域。该保健食品组合物原料由淫羊藿3~15份、山茱萸3~15份、山药3~15份、五味子2~12份、茯苓2~12份、金樱子2~12份组成,所制备的制剂是颗粒剂、胶囊剂和咀嚼片。制剂是通过如下工艺过程制备的:①原料的准备;②部分原料粉碎;③原料提取;④提取液精制;⑤精制液浓缩;⑥制软材;⑦湿法制粒;⑧干燥整粒;⑨制剂成型。功能评价实验表明,根据本发明生产的保健食品制剂具有缓解体力疲劳功能。
Description
技术领域
本发明涉及一种包含淫羊藿、五味子等原料的保健食品组合物及其制备方法和用途,具体是指在朝医学养生理论指导下,以淫羊藿、山茱萸、山药、五味子、茯苓、金樱子为主要原料制备的保健食品,该保健食品具有缓解体力疲劳功能,属于保健食品研制、生产、使用领域。
背景技术
本发明是以中国朝医学养生理论为基础,根据《保健食品注册管理办法》的规定,研制一种具有缓解体力疲劳功能的保健食品组合物及其制备方法。其组合物配方主要依据了朝医学中用于防治“虚劳”的理论和临床验方,具体成分来源于常用的药食两用植物。
疲劳是一个涉及许多生理因素与生化因素的复杂的综合性生理过程,是人体运用脑力或运用体力到一定程度时必然会出现的一种很正常的生理现象。疲劳的产生与能源物质消耗、代谢产物堆积、内环境稳定性失调、自由基影响等因素关系密切。疲劳主要分为生理性和病理性两大类,活动后出现疲劳是一种正常现象。生理性疲劳又包括体力疲劳、脑力疲劳、心理(精神)疲劳和混合性疲劳四种。其中,体力疲劳又叫运动性疲劳,是指由机体运动本身所引起的“机体生理过程不能持续其机能在一特定水平上和(或)不能维持预定的运动强度”的机体运动能力下降的现象。
随着现代人生活和工作压力越来越大,疲劳人群在不断增多,而且程度越发严重,疲劳虽不像心脑疾病、癌症等来势迅猛,直接而迅速的造成死亡,但是作为一种威胁我们健康的隐形杀手,我们的生活和工作已经受到严重影响,这不但是医学问题也是社会问题,人们的生活质量降低,工作效率降低,进而影响社会发展的进程。因此研制具有缓解体力疲劳功能的朝医方保健食品等健康产品具有重要意义。
中医认为疲劳属于中医学“虚”、“虚劳”、“虚损”等范畴,在黄帝内经中,疲劳多称为“倦”、“解堕”、“困薄”、“身重”、“体重”等。根据中医藏象学说,疲劳与五脏都有联系,主要责之于脾、肝、肾,也与心、肺有关。脾失健运,则气血生化无源,四肢肌肉得不到濡养,表现为四肢倦怠乏力,肌肉松软,甚或痿废不用。肝主藏血、主筋,为“罢极之本”,肝储藏血液,并调节血量,能保证运动过程中血液的正常输布。肾为先天之本,藏精,主骨生髓。恣情纵欲,过度疲劳,肾精亏损,髓海不足,则精神萎靡,眩晕耳鸣,记忆力减退,思维迟钝,腰膝酸软,肢体痿弱不用,疲乏无力。体力疲劳还与心、肺的脏腑功能有关。心主血脉,心气推动全身血液在脉中运行,流注全身发挥营养和滋润作用。肺主气司呼吸,朝汇百脉而助心行血。劳役过度,耗气伤肺,肺气虚弱,不能助心行血,则出现血行瘀滞,表现为心悸、胸闷等症状。总之,中医认为疲劳主要是各种原因导致脾、肝、肾三脏功能异常,心、肺受累及气血阴阳失调而造成的。
中国朝医学是在朝鲜民族特有的文化及传统医药的基础上,吸收中医药学的理论,结合本民族的治病经验,以“天、人、性、命”整体观为理论指导,以“四维之四象”为结构特征,以“辨象论治”为主要内容的一门独特的医学体系。
朝医学理论认为,疲劳即为虚劳,为气血不足,精神匮乏之称;由酒色伤之外因,四情伤之内因,先禀不足,饮食劳倦,嗜欲无节,大病之后失于调理,旧病不愈等因所致。
本品配方是在朝医学理论指导下,结合临床实践设计而成的,预期功能为具有缓解体力疲劳功能。配方主要原料为淫羊藿、山茱萸、山药、五味子、茯苓、金樱子,其中山药、茯苓属于既是食品又是药品的物品,其余原料均为可用于保健食品的物品,配方组成符合保健食品对原料来源的要求。
淫羊藿(EpimediiFolium)为小檗科植物淫羊藿EpimediumbrevicornuMaxim.、箭叶淫羊藿Epimediumsagittatum(Sieb.etZucc.)Maxim.、柔毛淫羊藿EpimediumpubescensMaxim.或朝鲜淫羊藿EpimediumkoreanumNakai的干燥叶。夏、秋季茎叶茂盛时采收,晒干或阴干。药性:辛、甘,温。归肾、肝经。具有补肾阳,强筋骨,祛风湿的功效。明代医学典籍《草本正义》记载,淫羊藿,味辛性温,专壮肾阳,暖肾脏却虚寒。淫羊藿为配方中的主药,朝医学理论认为淫羊藿具有补肾益气、温肾壮阳、强筋骨、祛风湿之效。淫羊藿的主要成分是黄酮类,亦含有多糖、生物碱、木脂素类、蒽醌类、花青素、植物甾醇、萜类化合物、绿原酸、微量元素等营养成分或生物活性成分,具有调节雄性发育、调节免疫、抑制肿瘤、改善心血管系统功能、缓解妇女更年期症状、调节内分泌、抗骨质疏松、抗肝毒素、抗氧化、抗衰老等多种生理活性。
山茱萸(CorniFructus)为山茱萸科植物山茱萸CornusofficinalisSieb.etZucc的干燥成熟果肉。药性:微温,味酸、涩,归肝、肾经。具有补益肝肾,收涩固脱的功效,是古代我国人民常用的滋补强壮药。现代研究表明,山茱萸具有补血健胃、提高免疫、消除疲劳、延缓衰老之作用,对人体无毒副作用。卫生部在几年前就允许其作为保健食品资源,目前其加工产品有罐头、饮料以及多种形式的保健食品,作为新型食品添加剂当前也有许多研究。
山药(DioscoreaRhizoma)为薯蓣科多年生草本植物薯蓣DioscoreaoppositaThunb.的干燥根茎。秋季采挖,洗净,经刮去粗皮等加工后,晒干或风干,润透切片使用。药性平,甘。归脾、肺、肾经。山药的主要活性成分为山药多糖。有降血糖、肝保护、抗衰老、抗肿瘤、调节或增强免疫功能、抗氧化的药理作用。山药多糖能降低血糖和血脂含量,提高肝糖元和心肌糖元含量,说明山药具有降血糖作用,并能促进血糖利用。朝医认为山药为太阴人药。功能为壮肺而有内守之功,补脾益气。主要用于泄泻,虚劳梦泄,也用于太阴人吐血,失血眩晕等症。《东医四象新编》中清心山药汤,以补脾益气,清心安神,治虚劳梦泄,腹不痛泄泻,中风不语症。《东医寿世保元》中山肺元药汤,治吐血、衄血、失血眩晕等症。
五味子(SchisandraeChinensisFructus)为木兰科植物五味子SchisandraChinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果实。药性:酸、甘、温。归肺、心、肾经。具有收敛固涩,益气生津,补肾宁心的功效。用于治疗久咳虚喘、津少口干、遗精久泻、健忘失眠等症。现代医学认为,五味子能调节中枢神经系统的兴奋和抑制过程,促进肌体代谢,调节胃液和胆液分泌,对肝炎恢复期转氨酶升高者有降低作用。能调节胃液分泌,兴奋子宫,以及增进视力、听力,提高皮肤感受器的辨别能力。朝医认为,五味子是太阴人用药,有健肺补肺之功效。主要用于太阴人咳嗽、口渴多汗、心悸、失眠、多梦。本品具有健肺之功,常配麦门冬、桔梗等。现代研究表明,五味子含有丰富的有机酸、维生素、类黄酮、植物固醇及有强效复原作用的木脂素类(如五味子甲素、五味子乙素或五味子醇),它也是兼具精、气、神三大补益的少数药材之一,能益气强肝、增进细胞排除废物的效率、供应更多氧气、营造和运用能量、提高记忆力及持久力。
茯苓(Poria)为多孔菌科真菌茯苓Poriacocos(Schw.)Wolf的干燥菌核。药性甘、淡、平。归心、肺、脾、肾经。主治心悸、失眠、小儿惊悸、遗精。我国食用茯苓的历史已有两千多年,《神农本草经》将茯苓列为“上品”,称其“久服安魂养神,不饥延年”具有渗湿利尿、合胃健脾、宁心安神、抑菌、增强机体抗病能力及降低血糖的功效。茯苓治病范围相当广泛,适用于水肿尿少,脾虚食少,心神不安,失眠多梦等症。可用于心脾两虚、心肾不交之心肾不安诸证,并用于脾阳不足,气陷精泄之遗精。
金樱子(RosaelaevigataeFructus)为蔷薇科植物金樱子RosalaevigataMichx.的干燥成熟果实。味甘、酸、涩,性平。归肾、膀胱、大肠经。能固精缩尿,涩肠止泻。小便频数、脾虚泻痢、肺虚喘咳、自汗盗汗、崩漏带下等,《蜀本草》载“治脾泄下痢,止小便利,涩精气”。《滇南本草》载“治日久下痢,血崩带下,涩精遗泄”。有实火、邪热煮忌食。金樱子果实含柠檬酸、苹果酸、鞣质、树脂、维生素C,含皂甙17.12%;另含丰富的糖类,其中有还原糖60%(果糖33%),蔗糖1.9%以及少量淀粉。金樱子具有增强机体的免疫力、具有降血糖、降血脂、抗心律失常、抗氧化的作用。
本发明保健食品组合物是依据中国朝医学养生理论,以朝医临床用于防治“虚劳”的验方为基础,通过实验筛选出符合保健食品原料要求的配方,具体成分来源于常用的药食两用植物。针对疲劳,通过补肺、脾、肾,益气行水达到缓解体力疲劳的目的,为开发保健食品提供了一种新的选择。功能评价实验表明,根据本发明生产的保健食品制剂具有缓解体力疲劳功能,且功能显著。
目前未见以中国朝医学养生理论为配方依据的保健食品上市,检索中国专利及文献数据库未见与本发明组合物配方相似的保健食品专利和研究报导,本发明组合物设计理论和思路创新。以本发明为基础开发具有缓解体力疲劳功能的保健食品,市场需求前景广阔。
发明内容
本发明的技术方案提供了一种保健食品组合物,它是由符合《保健食品注册管理办法》规定的天然原料和辅料配伍制备而成。本发明还提供了该保健食品组合物的制备方法和用途。
本发明提供了一种保健食品组合物,它是由下述重量配比的原料组成:淫羊藿3-15份、山茱萸3-15份、山药3-15份、五味子2-12份、茯苓2-12份、金樱子2-12份。
进一步优选,它是由下述重量配比的原料组成:淫羊藿9份、山茱萸9份、山药9份、五味子6份、茯苓6份、金樱子6份。
本发明保健食品组合物,是由淫羊藿、山茱萸、五味子、茯苓、山药、金樱子的提取物为活性成分,加上保健食品可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
其中,所述的制剂是:颗粒剂、胶囊剂和咀嚼片。
本发明还提供了该保健食品组合物的制备方法,它包括如下步骤:
(1)原料的准备:按保健食品组合物配方称取淫羊藿、五味子、山茱萸、山药、茯苓、金樱子,各原料质量均应符合《中华人民共和国药典》2015版(一部)的规定。
(2)粉碎:取0.5倍配方量的茯苓,粉碎后过100目筛,得茯苓细粉备用。
(3)提取:取0.5倍配方量的茯苓和配方量的其余药材,加入8~10倍量的水浸泡1~2h,水煎煮提取1~2h,滤过,再加入6~8倍量水煎煮1~2h,合并2次滤液,得提取液备用。
(4)精制:采用吸附澄清法进行精制,提取液浓缩至料液比1:1,在65℃~75℃下缓缓加入ZTC1+1天然澄清剂B组分,同时搅拌,用量为3%~6%,吸附澄清后冷藏静置12h以上,取上清液离心,滤过,得精制液。
(5)浓缩:合并精制液,减压浓缩至浸膏(60℃相对密度1.2~1.31)。
(6)制软材:取茯苓粉加入浸膏中,捏合,即得软材。
(7)制粒:取软材,置制粒机中制粒,得湿颗粒。
(8)干燥整粒:取湿颗粒沸腾干燥,干燥后整粒,得干颗粒。
(9)成型:取干颗粒填充于铝塑包装袋中,即得颗粒剂;填充于空胶囊中,即得胶囊剂;填加矫味剂、填充剂制颗粒后置于压片机中压片,即得咀嚼片。
(10)包装,贴标签,即得成品。
本发明主要用于生产具有缓解体力疲劳功能的保健食品。
具体实施方式
以下结合实验例和实施例对本发明进行更为详细的说明。
实验例1本发明保健食品组合物的提取工艺研究
用水提、醇提二种提取方法对配方量药材进行提取,以总多糖和总黄酮提取量为评价指标,对比考察并优化工艺参数,确定其最佳提取工艺。
1配方原料的活性成分分析
本配方中原料中,淫羊藿的主要有效成分为淫羊藿苷;五味子含有多糖、五味子素等木脂素、挥发油和有机酸等多种成分,其中多糖具有抗疲劳、免疫促进、保肝及抗衰老等作用;茯苓中的茯苓素可改善老年人的免疫功能,增强体质、保肝、抗衰老、降血糖等作用;其他原料中富含多糖、黄酮成分,具有调节免疫、降血糖、降血脂、抗氧化、保肝、提高耐缺氧等作用。综上所述,可以选用总多糖和总黄酮为含量测定指标。
2总黄酮含量测定方法学考察
采用紫外分光光度法,测定提取液中总黄酮的含量。
2.1溶液配制
2.1.1对照品溶液
精密称取干燥至恒重的芦丁对照品10.0mg,以甲醇为溶剂定容至50ml,用保鲜膜密封,超声5min后放至30min,加甲醇补足至50ml,摇匀,即得。
2.1.2供试品溶液
精密吸取待测样品2mL至25mL量瓶中,加60%乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,得供试品溶液。
2.2线性关系考察
分别精密吸取芦丁对照品溶液0,1,2,3,4,5mL,分别置25mL容器中,用蒸馏水补足至6mL,再分别加入1mL5%NaNO2溶液,摇匀,放置6min,加1ml10%Al(NO3)3溶液,摇匀放置6min,加NaOH溶液10mL,摇匀,再加蒸馏水至刻度(加入7ml水),摇匀,放置15分钟,以0mL对照品溶液制得的溶剂为空白,于510nm波长处分别测定吸收值。以对照品溶液浓度(X)与吸光度值(Y)进行线性回归,得回归方程为Y=13.821X-0.0003,r=0.9991(n=5),结果表明,在0.008mg/ml~0.040mg/ml范围内对照品浓度与吸光度值具有良好的线性关系。
2.3精密度考察
精密量取对照品溶液,重复测定5次,精密度结果RSD值为0.15,说明测定仪器的精密度良好。
2.4稳定性考察
精密量取最新的提取液制备的供试品溶液,于0,30,60,90,120min测定。结果RSD值为1.23,说明溶液在一定时间内很稳定。
2.5重现性考察
精密称取同一批提取液5份,按2.1.2的方法制备供试品,测定样品吸光度。结果RSD值为1.81,表明该实验方法重现性良好。
2.6加样回收率考察
精密量取已知含量的样品溶液9份,分别精密加入对照品适量,制备不同含量的供试品溶液,计算回收率,结果总黄酮平均回收率为101.73,RSD=1.35%,表明本实验法准确度较好,方法可行,见表1。
表1回收率考察结果
3总多糖的含量测定
采用蒽酮-硫酸比色法,虽然蒽酮试剂不稳定,但优于苯酚-硫酸比色法,苯酚更易氧化,本实验显色剂现用现配,可以避免显色剂被氧化。
3.1溶液配制
3.1.1对照品溶液
精密称取干燥后的无水葡萄糖对照品10mg,加水后超声10min,放冷至室温后定容至100mL容量瓶中,摇匀,即得。
3.1.2供试品溶液
提取液减压浓缩至100ml,放至室温后,取10ml浓缩液加入乙醇至醇含量在80%以上,不断搅拌有大量沉淀生成,静置24h,减压抽滤,收集沉淀,取沉淀溶于蒸馏水中定容至100mL容量瓶中,摇匀,即得。
3.1.3显色剂的配制
取0.2g蒽酮,加100mL浓硫酸溶解。
3.2线性关系考察
依次准确量取0.1,0.3,0.5,0.7,0.9mL葡萄糖对照品溶液,分别置10mL具塞试管中,分别加水至体积为1.0ml,空白组加1ml蒸馏水,各试管在冰水浴中加入5ml蒽酮试剂后摇匀,加塞密封,以防蒸发,置沸水浴中加热,自水浴煮沸开始计时,准确煮沸8min,取出用流水冷却,于580nm处测定波长。以对照品溶液浓度(X)与吸光度值(Y)进行线性回归,得回归方程为Y=0.0412X+0.0317,r=0.9997(n=5),结果表明,在1μg·ml-1~15μg·ml-1范围内葡萄糖对照品浓度与吸光度值具有良好的线性关系。
3.3精密度考察
精密量取对照品溶液,重复测5次,精密度结果RSD值为0.10,说明测定仪器的精密度良好。
3.4稳定性考察
精密量取最新的提取液制备的供试品溶液,于0,30,60,90,120min测定。结果RSD值为0.22,说明溶液在一定时间内很稳定。
3.5重现性考察
精密称取同一批提取液5份,按3.1.2的方法制备供试品,测定样品吸光度。结果RSD值为1.04,表明该实验方法重现性良好。
3.6加样回收率考察
精密量取已知含量的样品溶液9份,分别精密加入对照品适量,制备不同含量的供试品溶液,计算回收率,结果总黄酮平均回收率为100.78,RSD=1.99%,表明本实验法准确度较好,方法可行,见表2。
表2回收率考察结果
4影响提取工艺的因素考察
4.1提取溶剂的选择
黄酮采用60%~75%的乙醇为溶媒,提取效率高、提取周期短,而且提取物不易发霉变质,后期处理相对容易。而多糖的极性较大,根据“相似相溶”原理,提取多糖的溶剂应该选择极性较大的溶剂,又考虑保健食品的安全性和经济性,选用蒸馏水作提取溶剂较适宜。综上所述,本实验提取工艺中提取溶剂选用乙醇(不同浓度)和蒸馏水。
以总多糖和总黄酮作为考察指标,采用水、60%、80%乙醇为提取溶剂进行比较,取9和7倍配方量药材浸泡1h后加热煎煮1.5h和1h,提取2次,合并提取液,减压浓缩至200ml,分别取1ml提取液测定总多糖和总黄酮的吸光度,结果见表3。结果表明,采用高浓度乙醇时多糖的提取率很低,以水为溶剂可以兼顾总黄酮和总多糖的提取率,故初步确定以水或低浓度的乙醇为提取溶剂。
表3溶剂选择结果
4.2提取次数的选择
在很多提取工艺研究中常将提取次数也作为考察的因素,由于提取次数越多,消耗资源、时间和人力就越多,而提取液中的有效成分含量急剧减少。通过研究表明,在植物药材中经过两次充分的提取后,植物药材的转移率可以达到80%左右。一般只有贵重药材,才提取三次,由于本配方无贵重药材,所以本实验采用两次提取,并不把提取次数作为考察指标。
4.3浸泡时间与溶剂吸收率的考察
精密称取配方量药材,洗净,加水浸泡,每隔15min称量药渣重,至重量增加幅度不大为止,结果表明药材在经过90min的浸泡后,水分吸收几乎达到饱和,吸水率为87.89%。
5正交试验优化提取工艺参数
5.1正交实验设计
采用正交设计实验,以供试品中总黄酮(H)和总多糖(D)提取量(以吸光度值表示)的综合评分为评价指标,优选提取的最佳工艺。在提取工艺中,影响提取的主要因素为提取时间、溶剂用量及溶剂的浓度。由于以水为提取溶剂时黄酮的提取量少于醇提取,因此,选用水、20%、40%乙醇为考察因素。选用L9(33)正交设计安排实验。正交实验因素水平设计见表4,正交实验顺序及结果见表5。
总黄酮与总多糖均具有缓解体力疲劳功能,在提取时应同等考虑,故设计权重值均为50%,综合评分公式为:
+
表4正交试验设计
表5正交试验结果表
5.2正交实验结果分析
以各实验组中综合评分值进行结果分析,正交实验方差分析结果见表6。分析结果表明,因素A与B对实验结果无显著性影响,因素C对有效成分的提取量有显著性影响。
进一步分析多水平均值检验,结果见表7。表7结果表明,对有效成分提取量的影响A3>A2>A1,A2与A3间无显著性差异,综合考虑选择A3,即提取时间为2h,1.5h;B因素对有效成分提取量的影响B3>B2>B1,但B2与B3间没有显著性差异,考虑到B因素为溶剂用量,为节省资源,故选择B3,即溶剂用量为8,6倍量水;C因素对有效成分提取量的影响C1>C2>C3,选择C1,即溶剂为水。最佳工艺为A3B3C1,提取时间为2h,1.5h,用量为8,6倍的水。
表6总多糖方差分析结果
表7总多糖各因素进一步统计分析结果
6验证性实验
称取配方量药材,按正交实验确定的最佳提取工艺进行提取。做3次平行试验,测得样品中总黄酮总量为(21.64±0.12)mg.mL-1;总多糖的含量(22.46±0.15)mg.mL-1与正交实验最大值21.68mg.mL-1、22.32mg.mL-1接近,表明工艺优化成功,该工艺合理、稳定、可行。
实验例2本发明保健食品组合物提取液的精制工艺研究
为了去除无效成分,提高有效成分在制剂中的相对含量,应对提取液进行精制,根据有效成分性质和实际生产的可行性,采用吸附澄清法进行精制。
1提取
称取3倍量配方加入8倍量的蒸馏水,浸泡1.5h,水煎煮提取2h,滤过,药渣继续加入6倍量的水煎煮提取1.5h,滤过,合并滤液,得提取液。
2精制工艺研究
由于ZTC1+1天然吸附澄清剂主要可以用于去除中药提取液中鞣质、蛋白质、等胶体不稳定成分,对黄酮、生物碱、多糖、皂苷类、萜类、维生素等中药有效成分无影响。可显著降低出膏率,为后续工艺提供了方便,且具有安全无毒、无异味、不残留、经济实用等优点,故本实验选用ZTC1+1天然吸附澄清剂对药材提取液进行精制处理。
2.1澄清剂的配制
A组分:称取A组份10g,加入少量蒸馏水,不断搅拌成糊状,然后加蒸馏水至1000ml,静止24h,搅拌,配制成1%粘胶液。
B组分:称取B组份10g备用,再配制1%醋酸1000ml,向B组份中加少量的浓度为1%醋酸,不断搅拌成糊状,加入剩余的1%醋酸,静止24h,搅拌,配制成1%粘胶液。
2.2吸附澄清法试验方案设计
影响吸附澄清工艺的因素有很多,其中药液浓缩程度、药液温度、吸附澄清剂的用量、澄清时药液的搅拌速度对吸附澄清的影响较大。在企业实际生产中药液的温度一般都控制在50℃~80℃;吸附澄清剂的用量一般不超过药液总体积的8%,具体用量需要通过药液在澄清过程中出现絮状沉淀和药液的澄明度而确定。本实验主要对吸附澄清效果影响较大且易于控制的因素进行考察:药液不同浓缩比例、澄清剂的用法用量、药液温度,通过对精制后药液的澄明度来确定最佳方案。
取3倍配方量药材,分别按最优工艺提取,滤过,滤液平均分成9份(平行试验:每组3份),加入吸附澄清剂,静置24h,过滤,观察精制前后药液澄明度的变化。
2.3药液浓度程度对澄清工艺的影响
表8药液浓缩程度对澄清效果的影响
注:+++严重浑浊++浑浊+轻微浑浊—澄明
结果:其他因素不变的情况下,药液浓缩至料液比为1:1时候澄清效果最佳;A组分对澄清效果无明显效果,故澄清工艺中无需加ZTC1+1天然吸附澄清剂A组分。
2.4温度对澄清工艺的影响
表9温度对澄清效果的影响
结果:其他因素不变的情况下,药液温度在70℃对澄清效果最佳。
2.5初步考察澄清剂用量对澄清工艺的影响
表10澄清剂B组分量对澄清效果的影响
结果:ZTC1+1天然吸附澄清剂B组分用量为4%时澄清效果最佳,故选定ZTC1+1天然吸附澄清剂B组分用量为4%。
2.6澄清剂的用量趋势考察:
为放大实际生产规模化,对澄清剂的用量趋势做了初步考察。取配方量药材,分别按最佳提取工艺进行提取,滤过,分别取滤液50ml、100ml、200ml、300ml、400ml、500ml、1000ml,温度控制在70℃,加入吸附澄清剂B至药液澄清,考察澄清剂用量。
表11澄清剂用量
结果表明,澄清剂的用量百分比随着药液量的增加而减少,吸附澄清剂B组分用量为6.4%~3%。从实际生产角度考虑,吸附澄清剂的用量为3%~6%。
3精制前后有效成分的考察
以上述最佳优化工艺来澄清药液,得澄清前后药液的出膏率、黄酮含量、多糖含量见表12。结果表明,精制前后药液的出膏率显著下降,有效成分黄酮和多糖含量无显著变化。
表12澄清前后药液的出膏率、黄酮含量、多糖含量(,n=6)
实验例3本发明保健食品组合物制备咀嚼片的成型工艺研究
咀嚼片是先经口腔咀嚼后咽下的片剂,经咀嚼后可促进药物的有效成分在体内溶解和吸收,提高生物利用度。制备咀嚼片可选择增加粘合性和矫正片剂的口味,糖粉的量会比较大,水果粉可以增加片剂的香味,甘露醇的目的是口味较清凉、细腻,用量可以随机控制。咀嚼片的辅料没有特别的限制,在满足口感要求前提下,选择适宜、安全的辅料即可。
1工艺流程
药材→水煎煮→精制→浓缩→浸膏→混合→制粒→干燥→整粒→压片→灭菌→包装
2制备方法
2.1浸膏的制备
称取配方量的药材,蒸馏水润洗,加入8倍量的水,浸泡1.5h,水煎煮提取2h,滤过,药渣继续加入6倍量的水煎煮提取1.5h,滤过,合并滤液,得提取液。提取液在70℃下,边搅拌边加入ZTC1+1天然吸附澄清剂组分B,静置24h滤过,将滤液减压浓缩,浓缩液在水浴锅上蒸干(80℃)。
2.2出膏率的计算
取配方量药材,提取,精制,减压浓缩后水浴蒸干至浸膏,烘箱中80℃下干燥至恒重,计算出膏率,结果如表20,该配方的平均出膏率为26.26%。
2.3制粒、压片
本实验采用传统的湿法制粒,工艺流程如下:将浸膏研成粉末,与辅料均匀混合,过100目筛,以60%乙醇为润湿剂制软材,挤压法过14、16目筛制粒,置干燥箱内干燥2h,每隔半小时翻动1次,将干燥过的颗粒过16目筛进行整粒,得干颗粒。用压片机(¢20mm圆形冲模)压片,即得咀嚼片。
3咀嚼片制剂处方的筛选
根据咀嚼片的外观、色泽、口感、硬度等感官指标为主要依据对咀嚼片的配方进行筛选。
3.1填充剂和矫味剂的筛选
本品压片用原料可压性较好,故以片剂常用辅料糊精为主要填充剂即可。因本品压片用原料的苦涩味极重且略带酸味,故矫味剂拟选用蛋白糖为主,乳糖和甘露醇为辅助填充剂和矫味剂。以咀嚼片口感和外观形态的综合评分为指标,对配方中原辅料用量配比进行筛选,评分标准见表13,不同原辅料配比及评分结果见表14。根据评分结果,最终确定咀嚼片最佳制剂处方为:浸膏:茯苓细粉:乳糖:甘露醇:蛋白糖:糊精=110:30:16:16:1:20
用上述配方压成的咀嚼片口感较好,硬度适中,色泽均匀,表面光滑,无花斑和异物。
表13咀嚼片感官质量评分标准及结果
表14咀嚼片口感和外观形态综合评分结果
4工艺参数确定
4.1干颗粒各项指标测定
流动性、粒度分布、含水量的测定
按《中国药典》相关要求进行测定。漏斗法测定休止角评价流动性,采用筛分法测定粒度分布比例,烘干法测定含水量,结果见表15。
表15干颗粒各项指标测定结果(n=3)
4.2咀嚼片的片重计算
压片前计算片重,本品按服用剂量结合出膏率计算片重。本品原配方临床治疗用1日剂量为81g,保健食品的用量一般为治疗剂量的1/2-1/3倍,故片重计算方法如下:
理论片重=(药材配方量×1/3×出膏率×制剂配方中浸膏所占比例)/2次
=(81×1/3×26.26%×58)/2=2.07g
由计算可得,实际服用量为2g/片左右,日服2次,每次2片。符合保健食品中关于服用量的规定。
实验例4本发明保健食品组合物制备的咀嚼片中原料鉴别
(1)五味子薄层鉴别取咀嚼片粉末1g,加20ml三氯甲烷溶解,加热回流30min,过滤,滤液蒸干,残渣加1ml三氯甲烷溶解,作为供试品溶液。取药材五味子1g。方法同上制成对照药材溶液。取缺五味子咀嚼片粉末1g,方法同上制成阴性对照溶液,同法制成阴性对照溶液。取五味子甲素对照品,加三氯甲烷溶解为1mg/ml的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典10版附录ⅥB)试验,吸取上述四种溶液,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以石油醚(30-60℃)-乙酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。结果在与对照药材色谱相应位置上,供试品色谱均显相同颜色的斑点,阴性对照品则无相应斑点。
(2)淫羊藿薄层鉴别取本品粉末0.5g,加10ml乙醇溶解,温浸30min后,过滤,将滤液蒸干,残渣加1ml乙醇溶解,作为供试品溶液。取缺淫羊藿的咀嚼片粉末0.5g,方法同上制成阴性对照溶液,作为阴性对照溶液。取淫羊藿苷标准品,加甲醇溶解(浓度为0.1mg/ml),同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯一丁酮一甲酸一水(10:1:1:1)为展开剂展开,取出,晾干置紫外光灯(254nm)下检视。结果在与对照药材色谱相应位置上,供试品色谱均显相同颜色的斑点,阴性对照品则无相应斑点。
(2)山茱萸层鉴别取咀嚼片粉末0.5g,加10ml无水乙醇溶解,超声处理15min,过滤,滤液蒸干,残渣加2ml无水乙醇溶解,作为供试品溶液。取缺山茱萸咀嚼片粉末0.5g,方法同上制成阴性对照溶液。取马钱苷对照品,无水乙醇溶解(浓度为1mg/ml),同法制成对照药材溶液。按照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-乙醇-冰醋酸(50:10:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。结果在与对照药材色谱相应位置上,供试品色谱均显相同颜色的斑点,阴性对照品则无相应斑点。
(4)山药的薄层鉴别取本品粉末5g,加二氯甲烷30mL,加热回流2h,滤过,滤液蒸干,残渣加二氯甲烷1mL使溶解,作为供试品溶液。取山药对照药材5g,同法制成对照药材溶液。取缺山药的制剂5g,同法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典10版附录ⅥB)试验,吸取上述三种溶液,分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液(9:1:0.5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%磷钼酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色。结果在与对照药材色谱相应位置上,供试品色谱显相同颜色的斑点,阴性对照品则无相应斑点。
(5)茯苓取咀嚼片粉末lg,加50ml乙醚,超声溶解10min,过滤,滤液蒸干,残渣加1ml甲醇溶解,作为供试品溶液。取对照药材茯苓1g。方法同上制成对照药材溶液。取缺茯苓咀嚼片粉末1g,方法同上制成阴性对照溶液。照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯一乙酸乙酯一甲酸(20:5:0.5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以2%香草醛硫酸溶液-乙醇(4:1)混合溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。结果在与对照药材色谱相应位置上,供试品色谱均显相同颜色的斑点,阴性对照品则无相应斑点。
实验例5本发明保健食品组合物制备的咀嚼片中淫羊藿苷、芥子碱硫氰酸盐含量测定
采用高效液相色谱法,测定咀嚼片中淫羊藿苷的含量测定。
1色谱条件色谱柱为依特利Kromasil100-5PHENYL(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈—水(30—70),流速1ml/min;检测波长270nm,柱温30℃,保留时间15min。
2溶液的配制
对照品溶液:精密称取淫羊藿苷0.5mg,加甲醇5ml,配制成0.1mg/ml的溶液,即得。
供试品溶液:取咀嚼片研细成粉末,精密称取3g,置于20ml容量瓶中,加入75%乙醇20ml,要保鲜膜封瓶口,以防超声时间过长,乙醇的重量损失,超声处理1h,摇匀,滤过,即得。
阴性对照溶液:精密称取缺失淫羊藿的补精咀嚼片3g,同供试品制备方法制备,即得。
3系统适用性试验分别取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照各10μl,注入色谱仪。
4线性关系的考察精密量取对照品溶液5,10,15,20,25μl注入色谱柱,测定峰面积,以峰面积(Y)对进样量(X)进行回归,得回归方程为Y=2.3E+6X-25753,r=1.0000(n=5),结果表明,在0.5-2.5μg范围内,淫羊藿苷进样量与峰面积呈良好的线性关系。
5精密度考察精密吸取上述淫羊藿苷对照品,每次进样10μl,进样5次,测定RSD为1.45%,结果表明测量仪器精密度良好。
6稳定性考察精密量取咀嚼片制备的供试品溶液,分别于0,2,4,8,12h,每次进样10μl,测定,RSD为1.98%,结果表明供试品在12h小时内稳定性很好。
7重现性考察精密称取同一批咀嚼片5份,按上述的方法制备供试品,每次进样10μl,测定,RSD为1.91%,表明该实验方法重现性良好。
8加样回收率考察精密称取已知含量的样品溶液9份,分别精密加入对照品适量,制备不同含量的供试品溶液,每次进样量10μl,测定,结果见表16。结果加样回收率为98.72%,RSD为0.27%,表明本实验方法可行。
表16加样回收率考察结果
9样品的含量测定按上述测定方法对3批咀嚼片进行测定结果见表17,表明咀嚼片中淫羊藿苷含量为2.00mg/g。
表17批样品中芥子碱硫氰酸盐含量测定结果
实施例1本发明保健食品组合物制备咀嚼片
配方:
制法:
(1)取茯苓300g,粉碎后过100目筛,得茯苓细粉备用。
(2)取配方量的淫羊藿、山茱萸、五味子、山药、金樱子及300g茯苓加水煎煮加入8倍量的水浸泡1.5h,水煎煮提取2h,滤过,再加入6倍量水煎煮1.5h,合并,即得提取液。
(3)提取液在70℃下,边搅拌边加入ZTC1+1天然吸附澄清剂组分B,静置24h,取上清液离心,滤过,滤液减压浓缩至浸膏(60℃相对密度1.21),备用。
(4)取茯苓细粉与配方量乳糖、甘露醇、蛋白糖、糊精混匀后加入浸膏中,捏合,得软材,置制粒机中制粒,得湿颗粒,湿颗粒沸腾干燥,干燥后整粒,得干颗粒。
(5)干颗粒置于压片机中压片,即得咀嚼片。
(6)包装,贴标签,即得成品。
实施例2本发明保健食品组合物制备胶囊剂
配方:
制法:
(1)取茯苓100g,粉碎后过100目筛,得茯苓细粉备用。
(2)取配方量的淫羊藿、山茱萸、五味子、山药、金樱子及100g茯苓加水煎煮加入8倍量的水浸泡1.5h,水煎煮提取2h,滤过,再加入6倍量水煎煮1.5h,合并,即得提取液。
(3)提取液在70℃下,边搅拌边加入ZTC1+1天然吸附澄清剂组分B,静置24h,取上清液离心,滤过,滤液减压浓缩至浸膏(60℃相对密度1.30),备用。
(4)取茯苓细粉加入浸膏中,捏合,得软材,置制粒机中制粒,得湿颗粒,湿颗粒沸腾干燥,干燥后整粒,得干颗粒。
(5)干颗粒置于胶囊填充机中,填充于0号胶囊,即得胶囊剂。
(6)包装,贴标签,即得成品。
实施例3本发明制备的咀嚼片缓解体力疲劳功能评价
1材料与方法
1.1样品样品为本发明制备的咀嚼片(20140303),采用5、10、30倍服用剂量作为受试物。
1.2实验动物选用清洁级昆明种雄性小鼠160只,体重为20±2g,由延边大学实验动物中心提供,实验动物生产许可证号为SCXK(吉)2011-0007。
1.3剂量分组及受试样品给予时间将160只小鼠随机分为四个大组,每大组40只小鼠。四个大组分别进行以下四种指标的测定。每组又随机分为空白对照组,低、中、高剂量组,每组10只小鼠。分别相当于人体推荐剂量的5、10、30倍量。分别取咀嚼片10、20、60g先加入少量蒸馏水充分溶解(可适当加热)后,加蒸馏水定容至200ml,对照组给予与各剂量组相同体积的蒸馏水,小鼠灌胃每天1次,连续灌胃30d,灌胃体积为0.2ml/10gbw。
1.4负重游泳实验正式实验前二天在给药后训练小鼠游泳2次,实验当天于末次给药半小时后置于游泳箱中负重游泳。水深度30cm,水温(25±1)℃,铅皮系于鼠尾根部,重为其体重的5%。游泳直至力竭,即小鼠沉入水底30s不起,记录游泳时间(s)。
1.5血清尿素测定小鼠末次灌胃半小时后,在30±1℃的水中不负重游泳一个半小时,休息一小时后,拔眼球采血约1ml,置于1.5ml离心管中,以4000r·min-1离心10min,取血清按试剂盒说明测定血清尿素。
1.6肝糖原测定小鼠末次灌胃半小时后,颈椎脱臼处死小鼠,解剖小鼠,取出肝脏置于装有生理盐水的离心管中,然后用滤纸吸干肝脏表面液体,称取100mg肝脏,按试剂盒说明书进行肝糖原测定。
1.7血乳酸测定小鼠末次灌胃半小时后,用肝素浸润过的毛细管(防止血凝)从内眦静脉丛采血,置于离心管中,然后小鼠不负重游泳10min,水温30±1℃。游泳后立即采血,休息20min后再次采血,采血方法同上。测定小鼠运动前后的血乳酸值,计算血乳酸曲线下面积。
1.8数据处理和结果判定
1.8.1统计学处理采用SPSS11.5软件进行统计学处理,数据以均数±标准偏差(x±SD)表示,组间均数比较为单因素方差分析,其中组内比较以Turkey's检验。
1.8.2结果判定负重游泳实验结果为阳性,且肝糖原值、血乳酸值、血清尿素值3项指标中任2项指标为阳性,即可判定咀嚼片具有缓解体力疲劳的作用。
2结果
2.1样品对小鼠体重及负重游泳时间的影响
由表18可知,与空白对照组相比,样品的低、中、高剂量组的小鼠负重游泳时间均有所延长,均呈显著或极显著差异,且低、中、高剂量组和空白对照组小鼠增重无显著性差异。这说明该保健食品能显著延长小鼠的负重游泳时间而对小鼠增重无影响。
表18对小鼠负重游泳时间的影响(x±s,n=10)
注:*.与空白组比较有显著性差异,P<0.05;**.与空白组比较有极显著性差异,P<0.01。
2.2样品对小鼠血清尿素浓度的影响
表19对小鼠血清尿素氮的影响(x±s,n=10)
由表19可知,与空白对照组相比,保健食品各剂量组小鼠运动后血清尿素氮的含量均有降低,并且随着剂量的增大,血清尿素氮降低的幅度越大。与空白对照组比较低剂量和中剂量组小鼠血清尿素氮均有显著性意义(P<0.05),高剂量组小鼠的血清尿素氮值有极显著性意义(P<0.01)。
2.3样品对小鼠肝糖原储备量的影响
表20对小鼠肝糖原储备量的影响(x±s,n=10)
组别 | 空白对照组 | 低剂量组 | 中剂量组 | 高剂量组 |
肝糖原(mg/g) | 5.47±0.78 | 12.59±0.82* | 12.67±1.03** | 13.67±1.37** |
由表20可知,肝糖原储备量均有明显的增高趋势,随着保健食品剂量的加大,肝糖原的储备量升高。与空白对照组比较中、高剂量组小鼠的肝糖原储备量差异均有极显著性意义(P<0.01)。
2.4样品对小鼠血乳酸浓度的影响
由表21可知,与空白对照组比较,各剂量组小鼠运动后血乳酸浓度均有明显降低趋势。与空白对照组比较样品低、中剂量组小鼠的血乳酸浓度差异均有显著性意义(P<0.05),与空白对照组比较高剂量组小鼠的血乳酸浓度有极显著性意义(P<0.01)。
表21对小鼠血乳酸浓度的影响(±SD,n=10)
3讨论与结论
评价实验结果表明,本发明制备的咀嚼片能使小鼠负重游泳时间延长,减少血乳酸曲线下面积,增加肝糖原储备量的作用,血尿素氮的增加量明显低于对照组,尤其是高剂量组作用极显著。随着剂量的增加,该保健食品缓解体力疲劳作用依次增强,量效关系显著。
评价结论:本发明制备的咀嚼片受试样品具有缓解体力疲劳功能,且作用显著。
本发明的保护范围不能认为只局限于上述具体实施方式及具体实例。对所属技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的基本前提下,还可以做出若干简单推演或等同替换,这些等同替换方案仍然将被视为在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种含淫羊藿、五味子的保健食品,其特征在于,它是由下述重量配比的原料制成的制剂:淫羊藿3~15份、山茱萸3~15份、山药3~15份、五味子2~12份、茯苓2~12份、金樱子2~12份。
2.根据权利要求1所述的朝医保健食品组合物,其特征在于,它是由下述优选重量配比的原料制成的制剂:淫羊藿9份、山茱萸9份、山药9份、五味子6份、茯苓6份、金樱子6份。
3.根据权利要求1-2任意一项所述的朝医方保健食品组合物,其特征在于,它是由淫羊藿、山茱萸、山药、五味子、茯苓、金樱子的提取物为活性成分,加上保健食品可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
4.根据权利要求3所述的朝医保健食品组合物制剂,其特征在于,所述的制剂是:颗粒剂、胶囊剂和咀嚼片。
5.根据权利要求1-4所述的制剂是通过如下工艺过程制备的:①原料的准备;②部分原料粉碎;③原料提取;④提取液精制;⑤精制液浓缩;⑥制软材;⑦湿法制粒;⑧干燥整粒;⑨制剂成型。
6.根据权利要求5所述制剂的制备方法,其特征在于:
(1)按上述保健食品组合物配比称取原料,取其中0.5倍量的茯苓,粉碎后过100目筛,得茯苓细粉备用,其余原料加入8~10倍量的水浸泡1~2h,水煎煮提取1~2h,滤过,再加入6~8倍量水煎煮1~2h,滤过,合并2次滤液,得提取液备用;
(2)提取液浓缩至料液比1:1,在65℃~75℃下,在搅拌的同时缓缓加入ZTC1+1天然澄清剂B组分,澄清剂溶液用量为提取液的3%~6%,吸附澄清后冷藏静置12h以上,取上清液离心,滤过,得精制液;
(3)精制液减压浓缩至浸膏(60℃相对密度1.2~1.31),取茯苓细粉加入浸膏中,捏合,即得软材,置制粒机中制粒,湿颗粒干燥整粒,即得干颗粒;
(4)取干颗粒填充于铝塑包装袋中,即得颗粒剂;填充于空胶囊中,即得胶囊剂;填加矫味剂、填充剂制颗粒后置于压片机中压片,即得咀嚼片。
7.权利要求1-3任意一项所述的组合物在具有缓解体力疲劳功能的保健食品中的用途。
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