CN103977060B - 一种抗肿瘤药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明是一种抗肿瘤药物组合物制备方法，其特点是，包括挑选人参制得人参浸膏、将人参浸膏制成人参清膏步骤、将黄芪制得黄芪浸膏、将黄芪浸膏制成黄芪清膏、将人参清膏、黄芪清膏和苦参素制得浸膏、将人参清膏、黄芪清膏和苦参素制得和浸膏制成注射剂，于温度100℃条件下灭菌30min，灯检、包装，即得抗肿瘤药物组合物成品。其流程合理，得到的成品纯度高，质量稳定性好；具有组方科学，疗效确定，能够明显改善晚期恶性肿瘤患者的KPS评分、临床症候积分、QOL评分，减少体重下降，有利于改善患者的生活质量，减轻临床症状，过敏性等不良反应发生率较低等优点。

Description

一种抗肿瘤药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种中药领域，是一种抗肿瘤药物组合物及其制备方法。

背景技术

中医中药是中国的四大国粹之一，继在丸、散、膏、丹等传统剂型的基础上推出了新的剂型片剂、胶囊、注射剂等。中药注射剂被看作是中药现代化的延伸，但由于其制备技术历史较近，制备后的产品中成分复杂，大分子杂质较多，其安全性、稳定性相对于西药逊色较多。

中药注射剂按成分划分以分成三类，一是由中药提取的单体(单一化合物)为单一的化学结构，如葛根素注射液，它为葛根黄酮，化学名称为8-β-D-葡萄吡喃糖-4',7-二羟基异黄酮，提取工艺较复杂，但制剂工艺较简单，产品质量比较稳定；二是由中药有效部位制备而成的，是由一类或是两类以上成分组成的，组成成分基本清楚，而且可控成分达到60％以上，如血塞通注射液，它是由有效部位三七总皂苷制备而成的抗血栓药；再如痛必定注射液是由四种中药提取的有效部位制备而成的镇痛药；三是由两种或两种以上中药材的混合物制备而成的注射剂，如参麦注射液，它是由人参、麦冬为主要原料制备而成的成分最为复杂，制备难度最大；还如康艾注射液，是由人参、黄芪、苦参素组成的，成分较为复杂，制备难度很大。在康艾注射液长期的生产、使用中逐渐发现了一些影响产品质量的因素，絮状物、浑浊、过敏、输液反应等质量问题，导致产品质量不稳定，保质期缩短等问题，严重影响了该产品的生产及使用，究其原因还是制备工艺不过关，所得成分复杂，含有相对较多的油脂、鞣质、蛋白质等大分子杂质，导致了这些问题的发生。

发明内容

本发明的目的之一在于，提供一种流程合理，得到的成品纯度高，质量稳定性好的抗肿瘤药物组合物的制备方法。

本发明的另一目的是，提供一种组方科学，疗效确定，能够明显改善晚期恶性肿瘤患者的KPS评分、临床症候积分、QOL评分，减少体重下降，有利于改善患者的生活质量，减轻临床症状，过敏性等不良反应发生率较低的抗肿瘤药物组合物。

实现本发明目的之一采用的技术方案是：一种抗肿瘤药物组合物制备方法，其特征是，它包括以下步骤：

1)挑选人参，去掉其芦头，切制成2～3cm的段，称取480份投入热回流提取浓缩机组中，加6～8倍重量份80～95％的乙醇，加热至40～60℃保温浸泡2～4h；开启提取罐加热系统，控制夹套蒸汽压力在0.02～0.09MPa之间，同时微开启夹套下排冷凝水出口阀门，排放废气和冷凝水来维持蒸汽压力恒定，继续加热使提取液至沸腾时，开启由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，同时关闭由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，开启冷凝器和冷却器冷水进口阀门进行常压循环提取20～40min后，打开提取器药液出口阀，开启真空泵，药液通过管道过滤器将药液吸入浓缩蒸发器，开启加热器进汽阀，调节进汽压力，开启由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，浓缩产生的二次蒸汽经浓缩蒸发器的除沫器后与提取器内产生的经除沫、冷凝和汽液分离后的蒸汽一起进入冷凝器、冷却器冷凝、冷却，最后回流入提取器或溶剂罐；在提取过程中通过调节提取罐底部出液阀，使提取罐上部冷凝液回流量与提取罐底部出液量保持平衡，此时，热溶剂不断循环使用，待溶质完全溶出后，关闭主罐夹套进汽阀，关闭由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，蒸发器浓缩产生的二次蒸汽经冷凝器直接冷凝冷却，继续浓缩，直至浓缩成所在60℃下相对密度为1.05～1.15的浸膏，得人参浸膏170～250份，弃去人参渣子1000～1500份，回收乙醇2500～3500份；

2)将步骤1)所得的170～250份人参浸膏打入醇沉罐中，加入3倍重量份水，静止，于－5～0℃冷藏12～36h吸取上清液，浓缩成在60℃测得相对密度为1.10～1.15的人参清膏140～200份，回收水520～760份，弃去沉淀20～40份；

3)将原料药材黄芪1440份投入热回流提取浓缩机组中，加6～8倍重量份水，加热至40～60℃保温浸泡2～4h；开启提取罐加热系统，控制夹套蒸汽压力在0.02～0.09MPa之间，同时微开启夹套下排冷凝水出口阀门，排放废气和冷凝水来维持蒸汽压力恒定，继续加热使提取液至沸腾时，开启由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，同时关闭由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，开启冷凝器和冷却器冷水进口阀门进行常压循环提取20～40min后，打开提取器药液出口阀，开启真空泵，药液通过管道过滤器将药液吸入浓缩蒸发器，开启加热器进汽阀，调节进汽压力，开启由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，浓缩产生的二次蒸汽经浓缩蒸发器的除沫器后与提取器内产生的经除沫、冷凝和汽液分离后的蒸汽一起进入冷凝器、冷却器冷凝、冷却，最后回流入提取器或溶剂罐；在提取过程中通过调节提取罐底部出液阀，使提取罐上部冷凝液回流量与提取罐底部出液量保持平衡，此时，热溶剂不断循环使用，待溶质完全溶出后，关闭主罐夹套进汽阀，关闭由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀。蒸发器浓缩产生的二次蒸汽经冷凝器直接冷凝冷却，继续浓缩，直至浓缩成所在60℃下相对密度为1.05～1.15的浸膏，得黄芪浸膏920～1020份，弃去黄芪渣子2500～3000份；

4)将步骤3)所得920～1020份黄芪浸膏打入醇沉罐中，加入3倍重量份75～95％乙醇，充分搅拌至含醇量达75～85％，静止，于－5～0℃冷藏12～36h吸取上清液，浓缩成在60℃测得相对密度为1.10～1.15的黄芪清膏600～700份，回收乙醇2500～3000份，弃去醇沉物250～300份；

5)将步骤2)所得140～200份人参清膏和步骤4)所得600～700份黄芪清膏合并，加入48份的苦参素，加入注射用水相当于人参的10倍重量份，调PH值至6～7，加热至沸腾，加2％(w/v)的针用活性炭，保温30min，过滤，除去活性炭，冷藏24h，然后连续通过12000转/min离心机，弃去沉淀物20～50份，将离心后的药液5500～5700份通过大孔吸附树脂柱，控制流速0.6～1.0ml/min/cm²，加水500～700份洗至流出液无色，然后加入70～90％的乙醇4800～5500份进行洗脱，控制流速0.6～1.0ml/min/cm²至洗脱液无色，回收乙醇，收得浸膏700～900份；

6)将步骤5)所得浸膏700～900份先通过100KD超滤系统，打开纯化水阀门，将纯化水400份打入超滤前罐内，转速调至1200n/min，进口压力0.25～0.45Mpa，打开回流阀和排污阀，反复冲洗超滤系统至出料口流出水PH为中性；关闭排污阀，将转速逐步达到1000～1500n/min，循环冲洗5～10min，打开排污阀，排净超滤系统内的纯化水；关闭排污阀，再用48份注射用水，于30～50℃回流循环后打开排污阀，排净超滤系统内的注射用水，逆时针方向旋转变频器调速旋钮，使转数归零，使超滤系统内的注射用水自然排净，关闭排污阀，超滤系统清洗结束，等待过滤药液；将药液打入超滤前罐内1/2～2/3开始滤药，转速由慢到快调至1000～1500n/min，进口压力0.15～0.45Mpa，出口压力0.1～0.4Mpa，保持此条件滤药；过滤完药液后,旋转变频器调速旋钮转速调至1000～1500n/min，打开下端排污阀，将残液排掉；然后在经过10KD超滤系统，打开纯化水阀门，将纯化水48份打入超滤前罐内，转速调至1000～1500n/min，进口压力0.04～0.06Mpa，打开回流阀和排污阀，反复冲洗超滤系统至出料口流出水PH为中性；关闭排污阀，将转速逐步达到1000～1500n/min，循环冲洗5～10min，打开排污阀，排净超滤系统内的纯化水；关闭排污阀，再用48份注射用水，于30～50℃回流循环后打开排污阀，排净超滤系统内的注射用水，逆时针方向旋转变频器调速旋钮，使转数归零，使超滤系统内的注射用水自然排净，关闭排污阀，超滤系统清洗结束，等待过滤药液；将药液打入超滤前罐内1/2～2/3开始滤药，转速由慢到快调至1000～1500n/min，进口压力0.06～0.8Mpa，出口压力0.04～0.06Mpa，保持此条件滤药；过滤完药液后,旋转变频器调速旋钮转速调至1200n/min，打开下端排污阀，将残液排掉，调整至4800份，测半成品含量，然后分装成容量为10ml的注射剂，于温度100℃条件下灭菌30min，灯检、包装，即得抗肿瘤药物组合物成品。

实现本发明的另一目的采用的技术方案是：按一种抗肿瘤药物组合物制备方法所制备的抗肿瘤药物组合物。

本发明的一种抗肿瘤药物组合物制备方法的优点体现在：

1.由于采用了热回流提取、超滤及大孔吸附树脂技术，使提取物进一步进行精制，去除了抗肿瘤药物组合物中无效的、影响产品质量、导致过敏的大分子物质，解决了抗肿瘤药物组合物稳定性较差、易致敏等问题；

2.采用的热回流提取技术具有收膏率比多功能提取罐提高10～15％，药膏内含有效成分高1倍以上；由于溶质高速溶出，提取时间短，浓缩与提取同步进行，故药材到浓缩药膏只需5～6小时，设备利用率高；提取只加1次溶剂，在一套密封设备内循环使用，药渣里的溶剂基本上能回收出来，故溶剂用量比多能提取罐少30％以上；由于浓缩的二次蒸汽作提取的热源，抽入浓缩器的提取液与浓缩同温度，可节药50％以上的蒸汽；

3.采用的超滤(UF)是介于微滤和纳滤之间的一种膜过程，膜孔径在0.05μm至1nm之间，超滤是一种能够将溶液进行净化、分离、浓缩的膜分离技术，超滤过程通常可以理解成与膜孔径大小相关的筛分过程，通常截留分子量范围在1000～300000道尔顿，故超滤膜能对大分子有机物(如蛋白质、细菌)、胶体、悬浮固体等进行分离，使抗肿瘤药物组合物纯度高，所制得的产品杂质少、稳定性好；

4.采用大孔树脂吸附技术，能够将中药复方煎煮液通过大孔树脂，吸附其中的有效成分，再经洗脱回收，易除掉杂质，得到的成品纯度高，质量更稳定；

5.适合产业化生产。

本发明所制备的药物组合物，其组方科学，疗效确定，能够明显改善晚期恶性肿瘤患者的KPS评分、临床症候积分、QOL评分，减少体重下降，有利于改善患者的生活质量，减轻临床症状，过敏性等不良反应发生率较低。

实施例1

1)挑选人参，去掉其芦头，切制成2～3cm的段，称取480份投入热回流提取浓缩机组中，加6倍重量份80％的乙醇，加热至40℃保温浸泡2h。开启提取罐加热系统，控制夹套蒸汽压力在0.02～0.09MPa之间，同时微开启夹套下排冷凝水出口阀门，排放废气和冷凝水来维持蒸汽压力恒定，继续加热使提取液至沸腾时，开启由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，同时关闭由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，开启冷凝器和冷却器冷水进口阀门进行常压循环提取20min后，打开提取器药液出口阀，开启真空泵，药液通过管道过滤器将药液吸入浓缩蒸发器，开启加热器进汽阀，调节进汽压力，开启由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，浓缩产生的二次蒸汽经浓缩蒸发器的除沫器后与提取器内产生的经除沫、冷凝和汽液分离后的蒸汽一起进入冷凝器、冷却器冷凝、冷却，最后回流入提取器或溶剂罐。在提取过程中通过调节提取罐底部出液阀，使提取罐上部冷凝液回流量与提取罐底部出液量保持平衡。此时，热溶剂不断循环使用，待溶质完全溶出后，关闭主罐夹套进汽阀，关闭由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀。蒸发器浓缩产生的二次蒸汽经冷凝器直接冷凝冷却，继续浓缩，直至浓缩成所在60℃下相对密度为1.05～1.15的浸膏，得人参浸膏170～250份，弃去人参渣子1000份，回收乙醇2500份。

2)将步骤1)所得人参浸膏170份打入醇沉罐中，加入3倍重量份水，静止，于－5～0℃冷藏12h吸取上清液，浓缩成在60℃测得相对密度为1.10～1.15的人参清膏140份，回收水520份，弃去沉淀20份；

3)将原料药材黄芪1440份投入热回流提取浓缩机组中，加6倍重量份水，加热至40℃保温浸泡2h。开启提取罐加热系统，控制夹套蒸汽压力在0.02～0.09MPa之间，同时微开启夹套下排冷凝水出口阀门，排放废气和冷凝水来维持蒸汽压力恒定，继续加热使提取液至沸腾时，开启由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，同时关闭由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，开启冷凝器和冷却器冷水进口阀门进行常压循环提取20min后，打开提取器药液出口阀，开启真空泵，药液通过管道过滤器将药液吸入浓缩蒸发器，开启加热器进汽阀，调节进汽压力，开启由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，浓缩产生的二次蒸汽经浓缩蒸发器的除沫器后与提取器内产生的经除沫、冷凝和汽液分离后的蒸汽一起进入冷凝器、冷却器冷凝、冷却，最后回流入提取器或溶剂罐。在提取过程中通过调节提取罐底部出液阀，使提取罐上部冷凝液回流量与提取罐底部出液量保持平衡。此时，热溶剂不断循环使用，待溶质完全溶出后，关闭主罐夹套进汽阀，关闭由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀。蒸发器浓缩产生的二次蒸汽经冷凝器直接冷凝冷却，继续浓缩，直至浓缩成所在60℃下相对密度为1.05～1.15的浸膏，得黄芪浸膏920份，弃去黄芪渣子2500份。

4)将步骤3)所得黄芪浸膏920份打入醇沉罐中，加入3倍重量份80％乙醇，充分搅拌至含醇量达75％，静止，于－5～0℃冷藏12h吸取上清液，浓缩成在60℃测得相对密度为1.10～1.15的黄芪清膏600份，回收乙醇2500份，弃去醇沉物250份；

5)将步骤2)所得140份人参清膏和步骤4)600份黄芪清膏合并，加入48份的苦参素，加入注射用水相当于人参的10倍重量份，调PH值至6～7，加热至沸腾，加2％(w/v)的针用活性炭，保温30min，过滤，除去活性炭，冷藏24h，然后连续通过12000转/min离心机，弃去沉淀物20份，将离心后的药液5500份通过大孔吸附树脂柱，控制流速0.6ml/min/cm²，加水500份洗至流出液无色，然后加入70％的乙醇4800份进行洗脱，控制流速0.6ml/min/cm²至洗脱液无色，回收乙醇，收得浸膏700份；

6)将步骤5)所得浸膏700份先通过100KD超滤系统，打开纯化水阀门，将纯化水400份打入超滤前罐内，转速调至1200n/min，进口压力0.25Mpa，打开回流阀和排污阀，反复冲洗超滤系统至出料口流出水PH为中性；关闭排污阀，将转速逐步达到1000n/min，循环冲洗5min，打开排污阀，排净超滤系统内的纯化水；关闭排污阀，再用48份注射用水，于30℃回流循环后打开排污阀，排净超滤系统内的注射用水，逆时针方向旋转变频器调速旋钮，使转数归零，使超滤系统内的注射用水自然排净，关闭排污阀，超滤系统清洗结束，等待过滤药液；将药液打入超滤前罐内1/2开始滤药，转速由慢到快调至1000n/min，进口压力0.15Mpa，出口压力0.1Mpa，保持此条件滤药；过滤完药液后,旋转变频器调速旋钮转速调至1000n/min，打开下端排污阀，将残液排掉；然后在经过10KD超滤系统，打开纯化水阀门，将纯化水48份打入超滤前罐内，转速调至1000n/min，进口压力0.04Mpa，打开回流阀和排污阀，反复冲洗超滤系统至出料口流出水PH为中性；关闭排污阀，将转速逐步达到1000n/min，循环冲洗5min，打开排污阀，排净超滤系统内的纯化水；关闭排污阀，再用48份注射用水，于30℃回流循环后打开排污阀，排净超滤系统内的注射用水，逆时针方向旋转变频器调速旋钮，使转数归零，使超滤系统内的注射用水自然排净，关闭排污阀，超滤系统清洗结束，等待过滤药液；将药液打入超滤前罐内1/2开始滤药，转速由慢到快调至1000n/min，进口压力0.06Mpa，出口压力0.04Mpa，保持此条件滤药；过滤完药液后,旋转变频器调速旋钮转速调至1200n/min，打开下端排污阀，将残液排掉，调整至4800份，测半成品含量，然后分装成容量为10ml的注射剂，于温度100℃条件下灭菌30min，灯检、包装，即得抗肿瘤药物组合物成品。

实施例2

1)挑选人参去掉芦头，切制成2～3cm的段，称取480份投入热回流提取浓缩机组中，加7倍重量份90％的乙醇加热至50℃保温浸泡3h。开启提取罐加热系统，控制夹套蒸汽压力在0.02～0.09MPa之间，同时微开启夹套下排冷凝水出口阀门，排放废气和冷凝水来维持蒸汽压力恒定，继续加热使提取液至沸腾时，开启由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，同时关闭由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，开启冷凝器和冷却器冷水进口阀门进行常压循环提取30min后，打开提取器药液出口阀，开启真空泵，药液通过管道过滤器将药液吸入浓缩蒸发器，开启加热器进汽阀，调节进汽压力，开启由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，浓缩产生的二次蒸汽经浓缩蒸发器的除沫器后与提取器内产生的经除沫、冷凝和汽液分离后的蒸汽一起进入冷凝器、冷却器冷凝、冷却，最后回流入提取器或溶剂罐。在提取过程中通过调节提取罐底部出液阀，使提取罐上部冷凝液回流量与提取罐底部出液量保持平衡。此时，热溶剂不断循环使用，待溶质完全溶出后，关闭主罐夹套进汽阀，关闭由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀。蒸发器浓缩产生的二次蒸汽经冷凝器直接冷凝冷却，继续浓缩，直至浓缩成所在60℃下相对密度为1.05～1.15的浸膏，得人参浸膏200份，弃去人参渣子1250份，回收乙醇3000份。

2)将步骤1)所得200份人参浸膏打入醇沉罐中，加入3倍重量份水，静止，于－5～0℃冷藏24h吸取上清液，浓缩成在60℃测得相对密度为1.10～1.15的人参清膏170份，回收水640份，弃去沉淀30份；

3)将原料药材黄芪1440份投入热回流提取浓缩机组中，加7倍重量份水，加热至50℃保温浸泡3h。开启提取罐加热系统，控制夹套蒸汽压力在0.02～0.09MPa之间，同时微开启夹套下排冷凝水出口阀门，排放废气和冷凝水来维持蒸汽压力恒定，继续加热使提取液至沸腾时，开启由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，同时关闭由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，开启冷凝器和冷却器冷水进口阀门进行常压循环提取30min后，打开提取器药液出口阀，开启真空泵，药液通过管道过滤器将药液吸入浓缩蒸发器，开启加热器进汽阀，调节进汽压力，开启由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，浓缩产生的二次蒸汽经浓缩蒸发器的除沫器后与提取器内产生的经除沫、冷凝和汽液分离后的蒸汽一起进入冷凝器、冷却器冷凝、冷却，最后回流入提取器或溶剂罐。在提取过程中通过调节提取罐底部出液阀，使提取罐上部冷凝液回流量与提取罐底部出液量保持平衡。此时，热溶剂不断循环使用，待溶质完全溶出后，关闭主罐夹套进汽阀，关闭由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀。蒸发器浓缩产生的二次蒸汽经冷凝器直接冷凝冷却，继续浓缩，直至浓缩成所在60℃下相对密度为1.05～1.15的浸膏，得黄芪浸膏970份，弃去黄芪渣子2750份。

4)将步骤3)所得970份黄芪浸膏打入醇沉罐中，加入3倍重量份90％乙醇，充分搅拌至含醇量达80％，静止，于－5～0℃冷藏18h吸取上清液，浓缩成在60℃测得相对密度为1.10～1.15的黄芪清膏650份，回收乙醇2750份，弃去醇沉物275份；

5)将步骤2)所得170份人参清膏和步骤4)650份黄芪清膏合并，加入48份的苦参素，加入注射用水相当于人参的10倍重量份，调PH值至6～7，加热至沸腾，加2％(w/v)的针用活性炭，保温30min，过滤，除去活性炭，冷藏24h，然后连续通过12000转/min离心机，弃去沉淀物35份，将离心后的药液5600份通过大孔吸附树脂柱，控制流速0.8ml/min/cm²，加水600份洗至流出液无色，然后加入80％的乙醇5200份进行洗脱，控制流速0.8ml/min/cm²至洗脱液无色，回收乙醇，收得浸膏800份；

6)将步骤5)所得浸膏800份先通过100KD超滤系统，打开纯化水阀门，将纯化水400份打入超滤前罐内，转速调至1200n/min，进口压力0.30Mpa，打开回流阀和排污阀，反复冲洗超滤系统至出料口流出水PH为中性；关闭排污阀，将转速逐步达到1250n/min，循环冲洗7.5min，打开排污阀，排净超滤系统内的纯化水；关闭排污阀，再用48份注射用水，于40℃回流循环后打开排污阀，排净超滤系统内的注射用水，逆时针方向旋转变频器调速旋钮，使转数归零，使超滤系统内的注射用水自然排净，关闭排污阀，超滤系统清洗结束，等待过滤药液；将药液打入超滤前罐内2/3开始滤药，转速由慢到快调至1250n/min，进口压力0.30Mpa，出口压力0.25Mpa，保持此条件滤药；过滤完药液后,旋转变频器调速旋钮转速调至1250n/min，打开下端排污阀，将残液排掉；然后在经过10KD超滤系统，打开纯化水阀门，将纯化水48份打入超滤前罐内，转速调至1250n/min，进口压力0.05Mpa，打开回流阀和排污阀，反复冲洗超滤系统至出料口流出水PH为中性；关闭排污阀，将转速逐步达到1250n/min，循环冲洗7.5min，打开排污阀，排净超滤系统内的纯化水；关闭排污阀，再用48份注射用水，于40℃回流循环后打开排污阀，排净超滤系统内的注射用水，逆时针方向旋转变频器调速旋钮，使转数归零，使超滤系统内的注射用水自然排净，关闭排污阀，超滤系统清洗结束，等待过滤药液；将药液打入超滤前罐内2/3开始滤药，转速由慢到快调至1250n/min，进口压力0.07Mpa，出口压力0.05Mpa，保持此条件滤药；过滤完药液后,旋转变频器调速旋钮转速调至1200n/min，打开下端排污阀，将残液排掉，调整至4800份，测半成品含量，然后分装成容量为10ml的注射剂，于温度100℃条件下灭菌30min，灯检、包装，即得抗肿瘤药物组合物成品。

实施例3：

1)挑选人参，去掉其芦头，切制成2～3cm的段，称取480份投入热回流提取浓缩机组中，加8倍重量份95％的乙醇，加热至60℃保温浸泡4h。开启提取罐加热系统，控制夹套蒸汽压力在0.02～0.09MPa之间，同时微开启夹套下排冷凝水出口阀门，排放废气和冷凝水来维持蒸汽压力恒定，继续加热使提取液至沸腾时，开启由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，同时关闭由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，开启冷凝器和冷却器冷水进口阀门进行常压循环提取40min后，打开提取器药液出口阀，开启真空泵，药液通过管道过滤器将药液吸入浓缩蒸发器，开启加热器进汽阀，调节进汽压力，开启由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，浓缩产生的二次蒸汽经浓缩蒸发器的除沫器后与提取器内产生的经除沫、冷凝和汽液分离后的蒸汽一起进入冷凝器、冷却器冷凝、冷却，最后回流入提取器或溶剂罐。在提取过程中通过调节提取罐底部出液阀，使提取罐上部冷凝液回流量与提取罐底部出液量保持平衡。此时，热溶剂不断循环使用，待溶质完全溶出后，关闭主罐夹套进汽阀，关闭由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀。蒸发器浓缩产生的二次蒸汽经冷凝器直接冷凝冷却，继续浓缩，直至浓缩成所在60℃下相对密度为1.05～1.15的浸膏，得人参浸膏250份，弃去人参渣子1500份，回收乙醇3500份。

2)将步骤1)所得250份人参浸膏打入醇沉罐中，加入3倍重量份水，静止，于－5～0℃冷藏36h吸取上清液，浓缩成在60℃测得相对密度为1.10～1.15的人参清膏200份，回收水760份，弃去沉淀40份；

3)将原料药材黄芪1440份投入热回流提取浓缩机组中，加8倍重量份水，加热至60℃保温浸泡4h。开启提取罐加热系统，控制夹套蒸汽压力在0.02～0.09MPa之间，同时微开启夹套下排冷凝水出口阀门，排放废气和冷凝水来维持蒸汽压力恒定，继续加热使提取液至沸腾时，开启由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，同时关闭由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，开启冷凝器和冷却器冷水进口阀门进行常压循环提取40min后，打开提取器药液出口阀，开启真空泵，药液通过管道过滤器将药液吸入浓缩蒸发器，开启加热器进汽阀，调节进汽压力，开启由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，浓缩产生的二次蒸汽经浓缩蒸发器的除沫器后与提取器内产生的经除沫、冷凝和汽液分离后的蒸汽一起进入冷凝器、冷却器冷凝、冷却，最后回流入提取器或溶剂罐。在提取过程中通过调节提取罐底部出液阀，使提取罐上部冷凝液回流量与提取罐底部出液量保持平衡。此时，热溶剂不断循环使用，待溶质完全溶出后，关闭主罐夹套进汽阀，关闭由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀。蒸发器浓缩产生的二次蒸汽经冷凝器直接冷凝冷却，继续浓缩，直至浓缩成所在60℃下相对密度为1.05～1.15的浸膏，得浸膏1020份，弃去黄芪渣子3000份。

4)将步骤3)所得黄芪浸膏1020份打入醇沉罐中，加入3倍重量份95％乙醇，充分搅拌至含醇量达85％，静止，于－5～0℃冷藏36h吸取上清液，浓缩成在60℃测得相对密度为1.10～1.15的黄芪清膏700份，回收乙醇3000份，弃去醇沉物300份；

5)将步骤2)所得200份人参清膏和步骤4)700份黄芪清膏合并，加入48份的苦参素，加入注射用水相当于人参的10倍重量份，调PH值至6～7，加热至沸腾，加2％(w/v)的针用活性炭，保温30min，过滤，除去活性炭，冷藏24h，然后连续通过12000转/min离心机，弃去沉淀物50份，将离心后的药液5700份通过大孔吸附树脂柱，控制流速1.0ml/min/cm²，加水700份洗至流出液无色，然后加入90％的乙醇5500份进行洗脱，控制流速1.0ml/min/cm²至洗脱液无色，回收乙醇，收得浸膏900份；

6)将步骤5)所得浸膏900份先通过100KD超滤系统，打开纯化水阀门，将纯化水400份打入超滤前罐内，转速调至1200n/min，进口压力0.45Mpa，打开回流阀和排污阀，反复冲洗超滤系统至出料口流出水PH为中性；关闭排污阀，将转速逐步达到1500n/min，循环冲洗10min，打开排污阀，排净超滤系统内的纯化水；关闭排污阀，再用48份注射用水，于50℃回流循环后打开排污阀，排净超滤系统内的注射用水，逆时针方向旋转变频器调速旋钮，使转数归零，使超滤系统内的注射用水自然排净，关闭排污阀，超滤系统清洗结束，等待过滤药液；将药液打入超滤前罐内2/3开始滤药，转速由慢到快调至1500n/min，进口压力0.45Mpa，出口压力0.4Mpa，保持此条件滤药；过滤完药液后,旋转变频器调速旋钮转速调至1500n/min，打开下端排污阀，将残液排掉；然后在经过10KD超滤系统，打开纯化水阀门，将纯化水48份打入超滤前罐内，转速调至1500n/min，进口压力0.06Mpa，打开回流阀和排污阀，反复冲洗超滤系统至出料口流出水PH为中性；关闭排污阀，将转速逐步达到1500n/min，循环冲洗10min，打开排污阀，排净超滤系统内的纯化水；关闭排污阀，再用48份注射用水，于50℃回流循环后打开排污阀，排净超滤系统内的注射用水，逆时针方向旋转变频器调速旋钮，使转数归零，使超滤系统内的注射用水自然排净，关闭排污阀，超滤系统清洗结束，等待过滤药液；将药液打入超滤前罐内2/3开始滤药，转速由慢到快调至1500n/min，进口压力0.08Mpa，出口压力0.06Mpa，保持此条件滤药；过滤完药液后,旋转变频器调速旋钮转速调至1200n/min，打开下端排污阀，将残液排掉，调整至4800份，测半成品含量，然后分装成容量为10ml的注射剂，于温度100℃条件下灭菌30min，灯检、包装，即得抗肿瘤药物组合物成品。

试验1：过敏性试验

采用已知致敏物质(牛血清白蛋白溶液)为阳性致敏液和攻击液观察豚鼠发生过敏反应的症状。挑选健康合格豚鼠，体重250～350g，雌鼠无孕，在实验前和试验过程中，均应按正常条件下饲养。

取上述豚鼠6只，隔日每只每次腹腔注射注射供试品溶液0.5ml，共3次，进行致敏。每日观察每只动物行为体征，首次致敏和激发前称量并记录每只动物体重。然后将其分成两组，每组3只，分别在首次注射后14日、21日，由静脉注射供试品溶液1ml进行激发。观察激发后30分钟内动物有无动物过敏反应症状。试验结果见下表：

豚鼠过敏反应级数表

发明组合物注射液过敏反应级数表2

试验2：稳定性试验

1 仪器与试剂

Waters公司高效液相色谱:712自动进样器,486紫外检测器,Baseline810处理系统；Millipore微孔滤膜，电热恒温水浴锅：北京长安科学仪器厂；Backm an pH计。人参皂苷Re、黄芪甲苷标准品由中国药品生物制品检定所提供。

2 标准曲线的绘制

2.1 人参皂苷Re标准曲线的制备精称人参皂苷Re标准品0.0103g,移至5ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,即得浓度为2.06mg/ml的标准溶液。取标准溶液一定量,自动进样10μl,5μl,1μl,0.5μl,0.1μl,以峰面积为横坐标,对照品进样量(μg)为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程为:Y＝－0.1695+2.3777×10^-6X，r＝0.9994

2.2 黄芪甲苷标准曲线的制备精称黄芪甲苷标准品0.0460g,移至5ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,即得浓度为9.20mg/ml的标准溶液。取标准溶液一定量,自动进样,进样量为10μl、8μl、5μl、1μl、0.5μl、0.1μl以峰面积为横坐标,对照品进样量(μg)为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程为:Y＝－0.1767+1.7898×10^-5X，r＝0.9995。

3 含量测定方法及稳定性实验方法

3.1 色谱条件色谱柱：YWG-C柱(10μm，4.6×250mm)；流动相：甲醇-水(1:9)含1％冰醋酸；流速：1.5ml/min；检测波长：UV280nm。

3.2 样品处理取本发明抗肿瘤药物组合物制备方法制备的注射液用微孔滤膜过滤，进样量10μl。

3.3 稳定性实验取本发明抗肿瘤药物组合物制备方法制备的注射液置65℃、75℃、85℃、95℃的恒温水浴中,按实验设计定时取样,观察其颜色、澄明度,测定其pH值,测定人参皂苷及黄芪甲苷的含量(外标法计算)。

4 测定结果见表1、表2、表3。

表1：本发明制备方法制备的注射液恒温加速实验颜色、澄明度、pH值结果

表2：不同温度下人参皂苷Re相对含量测定结果

表3不同温度下黄芪甲苷的相对含量测定结果

5 确定反应级数

根据表2各恒温条件下加热时间与含量变化,以lg C-t作图,其相关系数r的绝对值均大于0.9900,说明lgc与t相关显著。故认为人参皂苷随温度、时间变化符合一级降解反应。见表4。同样,黄芪甲苷随温度时间变化也符合一级降解反应。见表5。

6 有效期的预测

将反应速度常数的对数log K对各绝对温度的倒数1/T回归得Arrhenius方程,将T＝273+25代入方程,求得25℃的反应速度。

表4：不同温度下人参皂苷logC-t的回归方程及分解速度常数

表5：不同温度下黄芪甲苷logC-t的回归方程及分解速度常数

常数K₂₅,根据t_0.9＝0.105/k计算有效期。

人参皂苷Re：logK＝10.6256-4688.03/T,r＝0.9914,K25＝7.8342×10^-6，t_0.9＝23402.8(h)＝2.67(年)。

黄芪甲苷：log K＝10.0460-4473.57/T,r＝0.9954,K₂₅＝1.0815×10^-5，t_0.9＝19708.76(h)＝2.25(年)。

有效期达到了两年以上，原标准为1.5年。

试验3 产品疗效评价：

1 资料与方法

1.1 纳入标准①经病理或细胞学证实的晚期恶性肿瘤患者(诊断及分期标准参照《新编常见恶性肿瘤诊治规范》)；②心、肝、肾和造血机能基本正常；③年龄18～70岁；④预计生存期≥3个月。

1.2 一般资料根据上述标准共纳入40例病人，根据患者的性别、病种及分期情况采用配对分组法，每组各20例。治疗组男性和女性患者各l0人，年龄范围30～70岁，中位年龄64岁；对照组男性和女性患者各l0人，年龄范围42～70岁，中位年龄66岁。两组患者的病种、分期及各项指标情况见表l～3。经统计学分析，两组患者各项指标无显著统计学差异，具有可比性。

表1两组患者病种分布(n＝20)

注：X²检验，P＞0.05，二组具有可比性。(表2-3同)

表2两组患者分期情况(n＝20)

表3治疗前各项指标(n＝20)

1.3 给药方法治疗组发明组合物组注射液50ml加入5％GS或生理盐水250mL中静滴，每日1次，1个月为1个疗程。康艾注射液组单纯对症支持治疗。

1.4 观察指标治疗前后K/X3评分：KPS评分升高l0分为改善，降低l0分为恶化，其它情况为稳定。治疗前后体重变化：体重增加l为改善，减少l为恶化，其它情况为稳定。治疗前后QOL评分的变化：采用FLIC量表。治疗前后中医症候积分：采用中国中西医结合学会老年病中医专业委员会制定的“中医虚证辨证参考标准”。观察治疗前后患者气短、懒言、神疲、乏力、自汗、舌淡、脉虚等中医症候的变化。毒副反应：参照WHO抗癌药物急性和亚急性毒性反应分度标准。

1.5 统计学处理所有数据用SPSS11.0统计软件进行处理，组间比较用q检验。

2 结果

2.1 KPS评分的变化见表4。

表4治疗前后KPS评分变化(n＝20)

注：与对照组比较U＝2.26，*P＜0.05(下同)

2.2 体重的变化见表5。

表5治疗前后体重的变化(n＝20)

2.3 QOL评分的变化见表6。

表6治疗前后QOL评分的变化(n＝20)

2.4 中医症候积分的变化见表7。

表7治疗前后中医证候积分变化(n＝20)

3 不良反应

全部患者均未见明显不良反应。

4 结论

康艾注射液中人参可大补元气，补肺健脾，生津安神，含多种人参皂甙，可提高机体免疫功能，并有抗肿瘤作用；黄芪可补气健脾，升阳固表，脱里生肌，利尿消肿，可提高肿瘤患者的免疫功能，并有抑瘤作用；苦参素是从中药苦豆子中提取的一种生物碱，其中氧化苦参碱占98％以上，对小鼠S₁₈₀、宫颈癌U₁₄均有明显的抑制作用。

本发明的一种抗肿瘤药物组合物与康艾注射液相比，除具有康艾注射液优点外，可明显改善晚期恶性肿瘤患者的KPS评分、临床症候积分、QOL评分，减少体重下降，有利于改善患者的生活质量，减轻临床症状，值得临床推广应用。

以上数据表明本发明药物组合物注射剂，经热回流提取、大孔树脂纯化、超滤处理后能够得到较高的人参皂苷和黄芪皂苷，成分单纯，避免了多组分之间的干扰作用，最大限度地降低了大分子杂质，减少了过敏反应的发生，提高了注射液的澄明度，增加了稳定性，提高了产品质量。

Claims (2)

1.一种抗肿瘤药物组合物制备方法，其特征是，它包括以下步骤：

1)挑选人参，去掉其芦头，切制成2～3cm的段，称取480份投入热回流提取浓缩机组中，加6～8倍重量份80～95％的乙醇，加热至40～60℃保温浸泡2～4h；开启提取罐加热系统，控制夹套蒸汽压力在0.02～0.09MPa之间，同时微开启夹套下排冷凝水出口阀门，排放废气和冷凝水来维持蒸汽压力恒定，继续加热使提取液至沸腾时，开启由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，同时关闭由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，开启冷凝器和冷却器冷水进口阀门进行常压循环提取20～40min后，打开提取器药液出口阀，开启真空泵，药液通过管道过滤器将药液吸入浓缩蒸发器，开启加热器进汽阀，调节进汽压力，开启由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，浓缩产生的二次蒸汽经浓缩蒸发器的除沫器后与提取器内产生的经除沫、冷凝和汽液分离后的蒸汽一起进入冷凝器、冷却器冷凝、冷却，最后回流入提取器或溶剂罐；在提取过程中通过调节提取罐底部出液阀，使提取罐上部冷凝液回流量与提取罐底部出液量保持平衡，此时，热溶剂不断循环使用，待溶质完全溶出后，关闭主罐夹套进汽阀，关闭由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，蒸发器浓缩产生的二次蒸汽经冷凝器直接冷凝冷却，继续浓缩，直至浓缩成所在60℃下相对密度为1.05～1.15的浸膏，得人参浸膏170～250份，弃去人参渣子1000～1500份，回收乙醇2500～3500份；

2)将步骤1)所得的170～250份人参浸膏打入醇沉罐中，加入3倍重量份水，静止，于－5～0℃冷藏12～36h吸取上清液，浓缩成在60℃测得相对密度为1.10～1.15的人参清膏140～200份，回收水520～760份，弃去沉淀20～40份；

3)将原料药材黄芪1440份投入热回流提取浓缩机组中，加6～8倍重量份水，加热至40～60℃保温浸泡2～4h；开启提取罐加热系统，控制夹套蒸汽压力在0.02～0.09MPa之间，同时微开启夹套下排冷凝水出口阀门，排放废气和冷凝水来维持蒸汽压力恒定，继续加热使提取液至沸腾时，开启由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，同时关闭由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，开启冷凝器和冷却器冷水进口阀门进行常压循环提取20～40min后，打开提取器药液出口阀，开启真空泵，药液通过管道过滤器将药液吸入浓缩蒸发器，开启加热器进汽阀，调节进汽压力，开启由蒸发器进入冷凝器的二次蒸汽进口阀，浓缩产生的二次蒸汽经浓缩蒸发器的除沫器后与提取器内产生的经除沫、冷凝和汽液分离后的蒸汽一起进入冷凝器、冷却器冷凝、冷却，最后回流入提取器或溶剂罐；在提取过程中通过调节提取罐底部出液阀，使提取罐上部冷凝液回流量与提取罐底部出液量保持平衡，此时，热溶剂不断循环使用，待溶质完全溶出后，关闭主罐夹套进汽阀，关闭由主罐进入冷凝器的二次蒸汽进口阀。蒸发器浓缩产生的二次蒸汽经冷凝器直接冷凝冷却，继续浓缩，直至浓缩成所在60℃下相对密度为1.05～1.15的浸膏，得黄芪浸膏920～1020份，弃去黄芪渣子2500～3000份；

4)将步骤3)所得920～1020份黄芪浸膏打入醇沉罐中，加入3倍重量份75～95％乙醇，充分搅拌至含醇量达75～85％，静止，于－5～0℃冷藏12～36h吸取上清液，浓缩成在60℃测得相对密度为1.10～1.15的黄芪清膏600～700份，回收乙醇2500～3000份，弃去醇沉物250～300份；

5)将步骤2)所得140～200份人参清膏和步骤4)所得600～700份黄芪清膏合并，加入48份的苦参素，加入注射用水相当于人参的10倍重量份，调PH值至6～7，加热至沸腾，加2％(w/v)的针用活性炭，保温30min，过滤，除去活性炭，冷藏24h，然后连续通过12000转/min离心机，弃去沉淀物20～50份，将离心后的药液5500～5700份通过大孔吸附树脂柱，控制流速0.6～1.0ml/min/cm²，加水500～700份洗至流出液无色，然后加入70～90％的乙醇4800～5500份进行洗脱，控制流速0.6～1.0ml/min/cm²至洗脱液无色，回收乙醇，收得浸膏700～900份；

6)将步骤5)所得浸膏700～900份先通过100KD超滤系统，打开纯化水阀门，将纯化水400份打入超滤前罐内，转速调至1200n/min，进口压力0.25～0.45Mpa，打开回流阀和排污阀，反复冲洗超滤系统至出料口流出水PH为中性；关闭排污阀，将转速逐步达到1000～1500n/min，循环冲洗5～10min，打开排污阀，排净超滤系统内的纯化水；关闭排污阀，再用48份注射用水，于30～50℃回流循环后打开排污阀，排净超滤系统内的注射用水，逆时针方向旋转变频器调速旋钮，使转数归零，使超滤系统内的注射用水自然排净，关闭排污阀，超滤系统清洗结束，等待过滤药液；将药液打入超滤前罐内1/2～2/3开始滤药，转速由慢到快调至1000～1500n/min，进口压力0.15～0.45Mpa，出口压力0.1～0.4Mpa，保持此条件滤药；过滤完药液后,旋转变频器调速旋钮转速调至1000～1500n/min，打开下端排污阀，将残液排掉；然后在经过10KD超滤系统，打开纯化水阀门，将纯化水48份打入超滤前罐内，转速调至1000～1500n/min，进口压力0.04～0.06Mpa，打开回流阀和排污阀，反复冲洗超滤系统至出料口流出水PH为中性；关闭排污阀，将转速逐步达到1000～1500n/min，循环冲洗5～10min，打开排污阀，排净超滤系统内的纯化水；关闭排污阀，再用48份注射用水，于30～50℃回流循环后打开排污阀，排净超滤系统内的注射用水，逆时针方向旋转变频器调速旋钮，使转数归零，使超滤系统内的注射用水自然排净，关闭排污阀，超滤系统清洗结束，等待过滤药液；将药液打入超滤前罐内1/2～2/3开始滤药，转速由慢到快调至1000～1500n/min，进口压力0.06～0.8Mpa，出口压力0.04～0.06Mpa，保持此条件滤药；过滤完药液后,旋转变频器调速旋钮转速调至1200n/min，打开下端排污阀，将残液排掉，调整至4800份，测半成品含量，然后分装成容量为10ml的注射剂，于温度100℃条件下灭菌30min，灯检、包装，即得抗肿瘤药物组合物成品。

2.根据权利要求1所述的一种抗肿瘤药物组合物制备方法所制备的抗肿瘤药物组合物。