CN103491955A - 磷脂酰肌醇-3-激酶(pi3k)抑制剂及mtor抑制剂的组合 - Google Patents

磷脂酰肌醇-3-激酶(pi3k)抑制剂及mtor抑制剂的组合 Download PDF

Info

Publication number
CN103491955A
CN103491955A CN201280020528.4A CN201280020528A CN103491955A CN 103491955 A CN103491955 A CN 103491955A CN 201280020528 A CN201280020528 A CN 201280020528A CN 103491955 A CN103491955 A CN 103491955A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
group
alkyl
disease
carcinoma
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201280020528.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103491955B (zh
Inventor
C·弗里特什
C·加西亚-爱切维拉
X·黄
S-M·玛拉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Novartis AG
Original Assignee
Novartis AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=46018130&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CN103491955(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Novartis AG filed Critical Novartis AG
Publication of CN103491955A publication Critical patent/CN103491955A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103491955B publication Critical patent/CN103491955B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/427—Thiazoles not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/436—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having oxygen as a ring hetero atom, e.g. rapamycin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/02—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for disorders of the vagina
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/38—Drugs for disorders of the endocrine system of the suprarenal hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)

Abstract

本发明涉及一种药物组合，包括磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)抑制剂化合物，其为2-甲酰胺环氨基脲衍生物或其药学上可接受的盐，及至少一种哺乳动物雷帕霉素靶(mTOR)抑制剂或其药学上可接受的盐；涉及一种包括该组合的药物组合物；及该组合用于治疗增生性疾病(更特定为哺乳动物雷帕霉素靶(mTOR)激酶依赖性疾病)的用途。

Description

磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)抑制剂及MTOR抑制剂的组合
技术领域
本发明涉及一种药物组合，其包括磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)抑制剂化合物，即2-甲酰胺环氨基脲衍生物或其药学上可接受的盐及至少一种哺乳动物雷帕霉素靶(mTOR)抑制剂或其药学上可接受的盐；涉及一种包括该组合的药物组合物；及该组合用于治疗增生性疾病(更特定为哺乳动物雷帕霉素靶(mTOR)激酶依赖性疾病)的用途。
背景技术
已经表明哺乳动物雷帕霉素靶(mTOR)抑制可诱导上游胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)信号转导，导致癌细胞中AKT激活。该现象已经暗示在弱化对mTOR抑制的细胞反应中起作用及可弱化mTOR抑制剂的临床活性。例如，在患有晚期实体肿瘤的患者的I期研究中，所有患者的约50%的肿瘤中已经发现pAKT的增加(Taberno等人，Journal ofClinical Oncology,26(2008),pp1603-1610)。
尽管存在对增生性疾病患者的众多治疗选择，仍需要有效及安全的治疗剂及需要其有利地用于组合疗法中。如文中所阐述及包括(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-(4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基)-酰胺的式(A)的化合物为磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)的α同种型的高选择性抑制剂。已经惊人地发现，有效量的式(A)的α特异性PI3K抑制剂化合物与有效量的至少一种mTOR抑制剂的组合在治疗哺乳动物雷帕霉素靶(mTOR)依赖性疾病(尤其癌症)中产生出人意料的协同改良。当同时、按序或分开施用时，该α特异性PI3K抑制剂化合物及本发明的mTOR抑制剂相互作用以强效抑制细胞增殖。该有利的相互作用可减少对各化合物所需的剂量，导致减少副作用及提高化合物在治疗中的长期临床效果。
发明内容
根据本发明现已发现，式(A)的α同种型特异性磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)抑制剂化合物或其药学上可接受的盐藉由mTOR抑制剂减少或阻断AKT的磷酸化及活化。因此，本发明涉及一种包括式(A)的化合物或其药学上可接受的盐及至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐的药物组合。
在一个优选实施方案中，本发明中的式(A)的化合物为(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(“化合物I”)。
在一个优选实施方案中，本发明中的mTOR抑制剂选自RAD雷帕霉素(西罗莫司(sirolimus))及其衍生物/类似物诸如依维莫司(everolimus)(RAD001)、替西罗莫司(temsirolimus)(CCI-779)、佐他莫司(zotarolimus)(ABT578)、SAR543、子囊霉素(ascomycin)(FK506的乙基类似物)、地磷莫司(deferolimus)(AP23573/MK-8669)、AP23841、KU-0063794、INK-128、EX2044、EX3855、EX7518、AZD08055、OSI-027、WYE-125132、XL765、NV-128、WYE-125132及EM101/LY303511。
在一方面，本发明提供一种包括式(A)的化合物或其药学上可接受的盐及至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐的药物组合，以用于治疗或预防mTOR激酶依赖性疾病。
在另一方面，本发明提供式(A)的化合物或其药学上可接受的盐及至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐制造用于治疗或预防mTOR激酶依赖性疾病的药物的用途。
在另一方面，本发明提供藉由施用式(A)的化合物或其药学上可接受的盐及至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐来治疗或预防mTOR激酶依赖性疾病的方法。
在另一方面，本发明提供一种组合，其包括式(A)的化合物及选自由如下组成的群的至少一种mTOR抑制剂：RAD雷帕霉素(西罗莫司)及其衍生物/类似物诸如依维莫司(RAD001)、替西罗莫司(CCI-779)、佐他莫司(ABT578)、SAR543、子囊霉素(FK506的乙基类似物)、地磷莫司(AP23573/MK-8669)、AP23841、KU-0063794、INK-128、EX2044、EX3855、EX7518、AZD08055、OSI-027、WYE-125132、XL765、NV-128、WYE-125132及EM101/LY303511，其中活性成分在各情形中以游离形式或药学上可接受的盐的形式存在，及视需要的至少一种药物上可接受的载体，以同时、分开或按序使用以治疗哺乳动物雷帕霉素靶(mTOR)激酶依赖性疾病。
在另一方面，本发明提供一种藉由mTOR抑制剂减少或阻断AKT的磷酸化及活化的方法，其包括对有此需要的温血动物施用式(A)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一实施方案中，本发明提供一种在利用至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐的治疗期间治疗对获得的AKT的磷酸化及活化依赖的增生性疾病的方法，其包括对有此需要的温血动物施用治疗有效量的式(A)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一实施方案中，本发明涉及一种治疗对利用至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐的治疗产生抗性或降低敏感性的增生性疾病的方法，其包括对有此需要的温血动物施用治疗有效量的式(A)的化合物或其药学上可接受的盐。所述抗性例如归因于AKT的磷酸化及活化。
在另一方面，本发明提供一种提高利用至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐治疗增生性疾病的疗效的方法，其包括对有此需要的温血动物施用包括式(A)的化合物或其药学上可接受的盐及至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐的组合。
在一个方面，本发明提供一种包括式(A)的PI3K抑制剂化合物或其药学上可接受的盐及至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐的药物组合物。
附图说明
图1显示藉由蛋白质印迹分析法所确定的依维莫司(RAD001)单药剂、(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(“化合物I”)单药剂及依维莫司(RAD001)与化合物I组合存在下于BT474乳肿瘤细胞中的AKT(S473)、MAPK(T202/Y204)、MEK1/2(S217/S221)的磷酸化水平及肌动蛋白水平。
图2显示如藉由反相蛋白质阵列法所定量的与媒剂对照组比较的依维莫司(RAD001)单药剂、化合物I单药剂及依维莫司(RAD001)与化合物I组合存在下于BT474乳肿瘤细胞下的AKT(S473)的磷酸化水平。
图3显示如藉由反相蛋白质阵列法所定量的与媒剂对照组比较的依维莫司(RAD001)单药剂、化合物I单药剂及依维莫司(RAD001)与化合物I组合存在下于BT474乳肿瘤细胞下的AKT(T308)的磷酸化水平。
图4显示如藉由反相蛋白质阵列法所定量的与媒剂对照组比较的依维莫司(RAD001)单药剂、化合物I单药剂及依维莫司(RAD001)与化合物I组合存在下于BT474乳肿瘤细胞下的总AKT表达水平。
图5显示藉由蛋白质印迹分析法所测定的依维莫司(RAD001)单药剂、化合物I单药剂及依维莫司(RAD001)与化合物I组合存在下于MDA-MB231乳肿瘤细胞中的AKT(S473)、MAPK(T202/Y204)的磷酸化水平及肌动蛋白水平。
图6显示如藉由反相蛋白质阵列法所定量的与媒剂对照组比较的依维莫司(RAD001)单药剂、化合物I单药剂及依维莫司(RAD001)与化合物I组合存在下于MDA-MB231乳肿瘤细胞下的AKT(S473)的磷酸化水平。
图7显示如藉由反相蛋白质阵列所定量的与媒剂对照组比较的依维莫司(RAD001)单药剂、化合物I单药剂及依维莫司(RAD001)与化合物I组合存在下于MDA-MB231乳肿瘤细胞下的AKT(T308)的磷酸化水平。
图8显示如藉由反相蛋白质阵列所定量的与媒剂对照组比较的依维莫司(RAD001)单药剂、化合物I单药剂及依维莫司(RAD001)与化合物I组合存在下于MDA-MB231乳肿瘤细胞下的总AKT表达水平。
图9显示在第二组实验中，藉由蛋白质印迹分析法测定及进一步利用Quantity One软件定量的依维莫司(RAD001)及依维莫司(RAD001)与化合物I组合存在下于MDA-MB231乳肿瘤细胞中的AKT(S473)的磷酸化水平(图A)及总AKT水平(图B)。
图10显示在第二组实验中，藉由反相蛋白质阵列法定量的与媒剂对照组比较的依维莫司(RAD001)单药剂、化合物I单药剂及依维莫司(RAD001)与化合物I组合存在下于MDA-MB231乳肿瘤细胞中的AKT(S473)的磷酸化水平。
图11显示在第二组实验中，藉由反相蛋白质阵列定量的与媒剂对照组比较的依维莫司(RAD001)单药剂、化合物I单药剂及依维莫司(RAD001)与化合物I组合存在下于MDA-MB231乳肿瘤细胞中的AKT(T308)的磷酸化水平。
图12显示在第二组实验中，藉由反相蛋白质阵列定量的与媒剂对照组比较的依维莫司(RAD001)单药剂、化合物I单药剂及依维莫司(RAD001)与化合物I组合存在下于MDA-MB231乳肿瘤细胞中的总AKT表达水平。
图13显示获自单药剂及组合依维莫司(RAD001)及/或化合物I的治疗于SKBR-3人乳癌细胞模型的全剂量矩阵细胞增殖数据。
图14显示获自单药剂及组合依维莫司(RAD001)及/或化合物I的治疗于BT-474人乳癌细胞模型的全剂量矩阵细胞增殖数据。
图15显示获自单药剂及组合依维莫司(RAD001)及/或化合物I的治疗于T47-D人乳癌细胞模型的全剂量矩阵细胞增殖数据。
图16显示获自单药剂及组合依维莫司(RAD001)及/或化合物I的治疗于ZR-75-1人乳癌细胞模型的全剂量矩阵细胞增殖数据。
具体实施方式本
发明涉及一种包括(a)如文中所定义的式(A)的化合物或其药学上可接受的盐及(b)至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐的药物组合。
除非另有说明，否则下列通用定义适用于本说明书。
除非另有说明，否则术语“包含”及“包括”以开放性而非限制性意义使用于文中。
除非另有说明或在与上下文明显矛盾，否则在叙述本发明的范围内(尤其在下列权利要求范围内)的术语“一”及“该”及相似引用视为涵盖单数及复数。在复数形式用于化合物、盐类等的情形下，此亦表示单个化合物、盐等。
“组合”表示呈一种剂量单元形式的固定组合或用于组合施用的部分的套组，其中式(A)的化合物及组合伴侣(例如，如下阐明的另一药物，亦称为“组合伴侣”或“治疗剂”)可同时独立施用或在时间间隔内分开施用，尤其在这些时间间隔容许组合伴侣展现配合(例如协同)效果的情形下。
文中所用的“药物组合”表示一种由混合或组合多于一种活性成分获得并包含所述活性成分的固定及非固定组合的产品。术语“固定组合”或“固定剂量”表示活性成分(例如式(A)的化合物及组合伴侣)均同时以单一实体或剂量形式施用给患者。术语“非固定组合”表示活性成分(例如式(I)的化合物及组合伴侣)均以分开实体，在无具体时间限制下同时、并行或按序施用给患者，其中该施用在有此需要的温血动物体内提供治疗有效水平的两种化合物。后者亦适用于混合物疗法，例如三种或更多种活性成分的施用。
术语“磷脂酰肌醇-3-激酶抑制剂”在文中定义为表示一种靶向、降低或抑制PI3-激酶的化合物。已经表明，PI3-激酶的活性增加对许多荷尔蒙及生长因子刺激(包括胰岛素、血小板衍生生长因子、胰岛素样生长因子、表皮生长因子、集落生成刺激因子及肝细胞生长因子)的反应，及已经参与与细胞生长及转化有关的过程。
术语“药物组合物”在文中定义为表示包含待施用给温血动物(例如哺乳动物或人)的至少一种活性成分或治疗剂的混合物或溶液，从而预防或治疗影响温血动物的特定疾病或病症。
术语“药学上可接受的”在文中定义为表示那些化合物、物质、组合物及/或剂型，其在合理医学判断范围内，适合接触温血动物(例如哺乳动物或人)的组织而无过量毒性、刺激变态反应及其他问题并发症，并且与合理的益处/风险比相称。
习语“治疗有效量”在文中用于表示足以减少至少约15%，优选至少50%，更优选至少90%及最优选预防在有此需要的温血动物的活动、功能及反应中的临床上严重缺陷的用量。或者，治疗有效量足以在有此需要的温血动物中引起的临床上严重病症/症状的改良。
文中所用的术语“治疗”包括缓和、减少或减轻个体的至少一种症状或引起疾病进展延迟的治疗。例如，治疗可为减少疾病的一种或若干种症状或完全消除疾病(如癌症)。在本发明的含义范围内，术语“治疗”亦表示抑制、延迟发作(即在疾病的临床表现前的时期)及/或减少发展或恶化疾病的风险。术语“保护”在文中用于表示预防、延迟或治疗(或兼而有的，若适宜)个体疾病的发展或进展或加重。
文中所用的术语“预防”包括预防与由待预防的状态、疾病或病症相关或由其所引起的至少一种症状。
文中所用的术语“联合治疗活性”或“联合治疗效果”表示治疗剂可以在其优选的时间间隔内，在待治疗的温血动物(尤其人)中分开施用(以时间先后错开的方式，尤其以特定顺序的方式)，仍显示(优选协同)相互作用(联合治疗效果)。其是否如此为可通过遵循血液水平来确定，其表明至少在某些时间间隔期间，待治疗的人血液中存在该两种化合物。
WO2010/029082叙述特异性2-甲酰胺环氨基脲衍生物，已经发现其具有针对PI3-激酶(磷脂酰肌醇-3-激酶)的抑制活性。此类特异性磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)抑制剂具有有利的药理性质及与β及/或σ及/或γ亚型相比显示针对PI3-激酶α的提高选择性。适合用于本发明的特异性2-甲酰胺环氨基脲衍生物、其制备及包含其的适当制剂叙述于WO2010/029082中并包括式(A)的化合物，
Figure BDA0000402416040000091
或其药学上可接受的盐，其中
A表示选自由如下组成的群的杂芳基：
Figure BDA0000402416040000092
R1表示一种下列取代基：(1)未经取代或经取代(优选经取代)的C1-C7-烷基，其中该等取代基独立地选自一或多个(优选1至9个)下列基团：氘、氟，或1至2个如下基团C3-C5-环烷基；(2)视需要经取代的C3-C5-环烷基，其中该等取代基独立地选自一或多个(优选1至4个)下列基团：氘、C1-C4-烷基(优选甲基)、氟、氰基、氨基羰基；(3)视需要经取代的苯基，其中该等取代基独立地选自一或多个(优选1至2个)下列基团：氘、卤素、氰基、C1-C7-烷基、C1-C7-烷基氨基、二(C1-C7-烷基)氨基、C1-C7-烷基氨基羰基、二(C1-C7-烷基)氨基羰基、C1-C7-烷氧基；(4)视需要经单或二取代的胺；其中该等取代基独立地选自下列基团：氘、C1-C7-烷基(其未经取代或经一或多个选自氘、氟、氯、羟基的群的取代基取代)、苯基磺酰基(其未经取代或经一或多个，优选一个C1-C7-烷基、C1-C7-烷氧基、二(C1-C7-烷基)氨基-C1-C7-烷氧基取代)；(5)经取代的磺酰基；其中该等取代基选自如下基团：C1-C7-烷基(其未经取代或经一或多个选自氘、氟的群的取代基取代)、吡咯烷基(其未经取代或经一或多个选自氘、羟基、氧基(oxo)的群的取代基，尤其一个氧基取代)；(6)氟、氯；
R2表示氢；
R3表示(1)氢，(2)氟、氯，(3)视需要经取代的甲基，其中该等取代基独立地选自一或多个(优选1至3个)下列基团：氘、氟、氯、二甲基氨基；
排除(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({5-[2-叔丁基-嘧啶-4-基]-4-甲基-噻唑-2-基}-酰胺)。
在式(A)的化合物的定义中所用的基团及符号具有如在WO2010/029082中所揭示的含义，该公开案以引用的方式全文并入本文。
本发明的一种优选化合物为在WO2010/029082中具体叙述的化合物。本发明的一种极佳化合物为(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(化合物I)或其药学上可接受的盐。(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)的合成法作为实施例15叙述于WO2010/029082中。
本发明的药物组合包括至少一种靶向、降低或抑制丝氨酸/苏氨酸mTOR激酶的活性/功能的化合物。此类化合物称为“mTOR抑制剂”并包括但不限于靶向/抑制mTOR激酶家族的成员的活性/功能的化合物、蛋白质或抗体，例如，RAD雷帕霉素(西罗莫司，其亦以名称RAPAMUNE为人所知)及其衍生物/类似物诸如依维莫司(RAD001,Novartis)或藉由直接结合至酶的ATP-结合间隙而抑制mTOR的激酶活性的化合物。依维莫司(RAD001)亦以名称CERTICAN或AFINITOR为人所知。
适当的mTOR抑制剂包括例如：
I.雷帕霉素，其是由吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）产生的免疫抑制性内酰胺大环内酯。
II.雷帕霉素衍生物，诸如：
a.经取代的雷帕霉素，例如经40-O-取代的雷帕霉素，例如如US5,258,389、WO94/09010、WO92/05179、US5,118,677、US5,118,678、US5,100,883、US5,151,413、US5,120,842、WO93/11130、WO94/02136、WO94/02485及WO95/14023中所述者，所有均以引用的方式并入本文；
b.经16-O-取代的雷帕霉素，例如如WO94/02136、WO95/16691及WO96/41807中所述者，其内容以引用的方式并入本文；
c.32-氢化的雷帕霉素，例如如WO96/41807及US5256790中所述者，其以引用的方式并入本文。
d.优选的雷帕霉素衍生物为式(B)的化合物
Figure BDA0000402416040000111
其中
R1为CH3或C3-6炔基，
R2为H或-CH2-CH2-OH、3-羟基-2-(羟甲基)-2-甲基-丙酰基或四唑基，
及X为=O、(H,H)或(H,OH)，
限制条件为当X为=O及R1为CH3时，R2不为H，
或当R2为-CH2-CH2-OH时，为其前药，例如其生理上可水解的醚。
式(B)的化合物揭示于例如国际PCT申请案WO94/09010、WO95/16691或WO96/41807中，其以引用的方式并入本文。
它们可按照此等参考文献中所揭示或藉由与其中所叙述的步骤相似的方式制备。
优选化合物为如国际PCT申请案WO94/09010中作为实施例8所揭示的32-脱氧雷帕霉素、16-戊-2-炔基氧基-32-脱氧雷帕霉素、16-戊-2-炔基氧基-32(S)-二氢-雷帕霉素、16-戊-2-炔基氧基-32(S)-二氢-40-O-(2-羟基乙基)-雷帕霉素及更优选的40-0-(2-羟基乙基)-雷帕霉素。
特别优选的式(B)的雷帕霉素衍生物为40-O-(2-羟基乙基)-雷帕霉素、40-[3-羟基-2-(羟甲基)-2-甲基丙酸酯]-雷帕霉素(亦称为CCI779)、40-表-(四唑基)-雷帕霉素(亦称为ABT578)、32-脱氧雷帕霉素、16-戊-2-炔基氧基-32(S)-二氢雷帕霉素或TAFA-93。
e.雷帕霉素衍生物亦包括所称的雷帕霉素类似物，例如如在国际PCT申请案WO98/02441及WO01/14387中所揭示者，例如AP23573、AP23464或AP23841。
基于观察的活性，例如结合至巨菲蛋白-12(macrophilin-12)(亦称为FK-506结合蛋白或FKBP-12)，例如如在国际PCT申请案WO94/09010、WO95/16691或WO96/41807中所述，已发现雷帕霉素及其衍生物可用于例如作为免疫抑制剂以治疗例如急性同种异体移植排斥。
III.子囊霉素，其为FK506的乙基类似物。
IV.AZD08055(AstraZeneca)及OSI-027(OSI Pharmaceuticals)，其为藉由直接结合至酶的ATP-结合间隙而抑制mTOR的激酶活性的化合物。
V.SAR543、地磷莫司(AP23573/MK-8669、Ariad/Merck&Co.)、AP23841(Ariad)、KU-0063794(AstraZeneca/Kudos)、INK-128(Intellikine)、EX2044、EX3855、EX7518、WYE-125132(Wyeth)、XL765(Exelisis)、NV-128(Novogen)、WYE-125132(Wyeth)、EM101/LY303511(Emiliem)。
一种用于本发明的优选mTOR抑制剂为依维莫司(RAD001)。依维莫司(RAD001)具有化学名称((1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28E,30S,32S,35R)-1,18-二羟基-12-{(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-(2-羟基乙氧基)-3-甲氧基环己基]-1-甲基乙基}-19,30-二甲氧基-15,17,21,23,29,35-六甲基-11,36-二氧杂-4-氮杂-三环[30.3.1.04,9]三十六烷-16,24,26,28-四烯-2,3,10,14,20-戊酮)。依維莫司及类似物叙述于美国专利第5,665,772号第1栏第39行至第3栏第11行中。
藉由编码号、非商标或商标名所识别的活性剂的结构可取自标准概要默克索引(「The Merck Index」)的实际版本或取自数据库，例如国际专利(例如IMS世界公开案)。其相应内容以引用的方式并入。
同样地包括以上揭示化合物(即，式(A)化合物及mTOR抑制剂)的药学上可接受的盐、相应的消旋物、非对映异构物、对映体、互变体以及(存在的情形下)相应晶体改型，例如其中揭示的溶剂化物、水合物及多晶型。在本发明的组合中用作活性成分的化合物可分别按照援引文件中所叙述的方式制备及施用。本发明的范围还包括为超过两种分开的如上所阐明的活性成分的组合，即，本发明范围内的药物组合可包括三种活性成分或更多。
在一个实施方案中，本发明提供一种包括式(A)的化合物或具体言之(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(“化合物I”)，或其药学上可接受的盐及至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐的药物组合。
在一个实施方案中，本发明提供一种包括式(A)的化合物或具体言之(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(“化合物I”)或其药学上可接受的盐及mTOR抑制剂依维莫司(RAD001)或其药学上可接受的盐的药物组合。
本发明的药物组合可用于治疗或预防有此需要的温血动物的mTOR激酶依赖性疾病。因此，在一个方面，本发明提供一种包括式(A)的化合物或具体言之(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(“化合物I”)，或其药学上可接受的盐及至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐的药物组合，以用于治疗或预防mTOR激酶依赖性疾病。
术语“mTOR激酶依赖性疾病”包括但不限于下列症状：
·器官或组织移植排斥，例如，用于治疗例如心、肺、心肺结合、肝脏、肾脏、胰脏、皮肤或角膜移植的接受者；移植物抗宿主病，如骨髓移植后的移植物抗宿主病
·再狭窄
·错构瘤症候群，诸如结节性硬化症或考登氏(Cowden)疾病
·淋巴管平滑肌增生症
·色素性视网膜炎
·自体免疫疾病，包括脑脊髓炎、胰岛素依赖性糖尿病、狼疮、皮肤肌炎、关节炎及风湿病
·类固醇抗性的急性成淋巴细胞白血病
·纤维化疾病，包括硬皮病、肺纤维化、肾纤维化、囊性纤维化
·肺高血压
·免疫调节
·多发性硬化症
·VHL症候群
·卡尼症候群(Carney complex)
·家族性腺瘤息肉症
·幼年型息肉症候群
·伯特-霍格-杜克(Birt-Hogg-Duke)症候群
·家族性肥厚性心肌病
·沃尔夫-帕金森-怀特(Wolf-Parkinson-White)症候群
·神经变性异常，诸如帕金森氏症、亨汀顿氏舞蹈病、阿兹海默症及起因于tau突变的痴呆症、脊髓小脑型共济失调Ⅲ型、起因于SOD1突变的运动神经元病、神经元蜡状质脂褐素沉积病/贝敦氏(Batten)症(小儿科神经退化性疾病)
·湿及干黄斑变性
·肌肉损耗(muscle wasting)(萎缩、恶病质)及肌病，如达能氏(Danon)疾病
·细菌及病毒感染，包括结核分枝杆菌(M.tuberculosis)、A群链球菌、I型HSV、HIV感染
·神经纤维瘤，包括1型神经纤维瘤
·普兹-杰格斯(Peutz-Jeghers)症候群。
而且，“mTOR激酶依赖性疾病”包括增生性疾病，诸如癌症及其他相关恶性肿瘤。与病变mTOR信号转导级联有关的癌症的非限制性列表包括乳癌、肾细胞癌、胃瘤、神经内分泌瘤、淋巴瘤及前列腺癌。
增生性疾病的实例为例如良性或恶性肿瘤，脑癌、肾癌、肝癌、肾上腺癌、膀胱癌、乳癌、胃癌、胃瘤、卵巢癌、结肠癌、直肠癌、前列腺癌、胰腺癌、肺癌、阴道癌或甲状腺癌、肉瘤、神经胶母细胞瘤、多发性骨髓瘤或胃肠癌尤其结肠癌或结肠直肠腺瘤或头颈瘤及表皮过度增殖、牛皮癣、前列腺增生、赘瘤、上皮特性的赘瘤、淋巴瘤、乳癌或白血病。
在另一方面，本发明提供式(A)的化合物或具体言之(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(化合物I)，或其药学上可接受的盐及至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐制造用于治疗或预防mTOR激酶依赖性疾病的药物的用途。
在另一方面，本发明提供一种藉由施用式(A)的化合物或具体言之(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(化合物I)，或其药学上可接受的盐及至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐来治疗或预防mTOR激酶依赖性疾病的方法。
在另一方面，本发明提供一种式(A)的化合物或具体言之(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(化合物I)及选自由如下组成的群的至少一种mTOR抑制剂的组合：RAD雷帕霉素(西罗莫司)及其衍生物/类似物诸如依维莫司(RAD001)、替西罗莫司(CCI-779)、佐他莫司(ABT578)、SAR543、子囊霉素(FK506的乙基类似物)、地磷莫司(AP23573/MK-8669)、AP23841、KU-0063794、INK-128、EX2044、EX3855、EX7518、AZD08055、OSI-027、WYE-125132、XL765、NV-128、WYE-125132及EM101/LY303511，其中活性成分在各情形中以游离形式或药学上可接受的盐的形式存在，及视需要的至少一种药物上可接受的载体，以同时、分开或按序使用以治疗哺乳动物雷帕霉素靶(mTOR)激酶依赖性疾病。
本发明提供一种藉由mTOR抑制剂减少或阻断AKT的磷酸化及活化的方法，其包括对有此需要的温血动物施用式(A)的化合物或其药学上可接受的盐。在另一实施方案中，本发明提供一种在利用至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐的治疗期间，治疗对获得的AKT磷酸化及活化依赖的增生性疾病的方法，其包括对有此需要的温血动物施用治疗有效量的式(A)的化合物或其药学上可接受的盐。
在另一实施方案中，本发明涉及一种治疗对利用至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐的治疗产生抗性或降低敏感性的增生性疾病的方法，其包括对有此需要的温血动物施用治疗有效量的式(A)的化合物或其药学上可接受的盐。所述抗性例如归因于AKT的磷酸化及活化。
在另一方面，本发明提供一种提高利用至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐治疗增生性疾病的效果的方法，其包括对有此需要的温血动物施用式(A)的化合物，或具体言之(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(化合物I)或其药学上可接受的盐及至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐。
根据本发明所用的mTOR抑制剂可选自RAD雷帕霉素(西罗莫司)及其衍生物/类似物，诸如依维莫司(RAD001)、替西罗莫司(CCI-779)、佐他莫司(ABT578)、SAR543、子囊霉素(FK506的乙基类似物)、地磷莫司(AP23573/MK-8669)、AP23841、KU-0063794、INK-128、EX2044、EX3855、EX7518、AZD08055、OSI-027、WYE-125132、XL765、NV-128、WYE-125132及EM101/LY303511。根据本发明的特别优选mTOR抑制剂为西罗莫司及/或依维莫司。
可在临床研究中测试根据本发明的药物组合物或组合。适当临床研究可为例如患有增生性疾病的患者的标签公开、剂量递增研究。该类研究尤其证实本发明组合的活性成分的协同作用。对增生性疾病的有利效果可直接由本领域技术人员知晓的该类研究的结果确定。该类研究可特别适用于比较利用活性成分的单一疗法及本发明组合的效果。优选地，药物(a)的剂量可提升至达到最大耐受剂量，及药物(b)以固定剂量施用。或者，药物(a)可以固定剂量施用及药物(b)的剂量可以提升。各患者可每天或间歇地接受药物(a)的剂量。在该类研究中，例如在12、18或24周后，可通过评估每6周症状分数来确定治疗效果。
与仅应用本发明组合中所用的一种药物活性成分的单一疗法相比，本发明的药物组合的施用不仅可导致例如减缓、延迟进展或抑制症状的有利效果，例如协同治疗效果，而且进一步导致惊人的有益效果，例如较少副作用、改良生活质量或降低死亡率。
另一益处可为可使用较低剂量的本发明组合的活性成分，例如剂量需要不仅通常较少，而且使用频率较低，其可降低副作用的发生或严重性。此与待治疗患者的希望及要求一致。
本发明的一个目的在于提供一种药物组合物，其包括在靶向或预防温血动物的哺乳动物雷帕霉素靶(mTOR)依赖性疾病方面联合治疗有效的数量的(a)式(A)的化合物或其药学上可接受的盐及(b)至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐，及视需要的至少一种药物上可接受的载体。在此组合物中，组合伴侣(a)及(b)可以一种组合的单位剂型或两个分开的单位剂型一起、一个接一个或分开施用。单位剂型亦可为固定组合。
在一个方面，本发明提供一种包括(a)式(A)的化合物或其药学上可接受的盐及(b)至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐，及视需要的至少一种药物上可接受的载体的药物组合物。在一个实施方案中，该药物组合物包括一定数量的式(A)的化合物及至少一种mTOR抑制剂，其在靶向哺乳动物雷帕霉素靶(mTOR)依赖性疾病方面联合治疗有效的。
在另一方面，本发明提供一种包括(a)式(A)的化合物或其药学上可接受的盐及(b)至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐，及视需要的至少一种药物上可接受的载体的药物组合，以同时、分开或按序使用。组合伴侣(a)及(b)可一起或分开施用给有此需要的温血动物。
按照本发明，用于组合伴侣(a)及组合伴侣(b)的分开施用或以固定组合(即包括至少两种组合伴侣(a)及(b)的单一药局组合物)施用的药物组合物可以本身已知的方式制备并且是适合经肠诸如经口或直肠及非经肠施用至哺乳动物(温血动物，包括人)的那些，其包括治疗有效量的例如如上表明的仅至少一种药理活性组合伴侣，或与一或多种药物上可接受的载体或稀释剂，尤其适合经肠或非经肠应用的那些组合。
术语“载体”表示与化合物一起施用的稀释剂、佐剂、赋形剂或媒剂。该类药物载体可为无菌液体，诸如水及油类，包括石油、动物、植物或合成来源的那些，诸如花生油、豆油、矿物油、芝麻油等。水或水溶液、生理盐水及葡萄糖及甘油水溶液可优选地用作载体，尤其用于可注射溶液。适当的药物载体叙述于E.W.Martin的“Remington'sPharmaceutical Sciences”中。
用于经肠或非经肠施用的组合疗法的药物制剂为例如呈单位剂型的那些，诸如糖衣片剂、片剂、胶囊或栓剂或安瓿剂。若未另外阐述，这些是以本身已知方式，例如藉由常规混合、制粒、糖衣覆膜、溶解或冻干制程制备的。应理解，在每一剂型中的各剂量中包含的组合伴侣的单位含量就其自身不需要构成有效量，因为必要的有效量可以藉由施用多个剂量单元而实现。
适宜的药物组合物可包含例如约0.1%至约99.9%、优选约1%至约60%的活性成分。按照本发明施用的式(A)的化合物及mTOR抑制剂的实际量将取决于诸多因素诸如待治疗疾病的严重性、个体的年龄及相关健康、所使用化合物的效力、施用途径及形式及其他因素。药物可以每天多于一次、优选每天一次或两次施用。所有该类因素属于主治医师的技术范围。
可以约0.05至约50mg/公斤服用者的体重/天，优选约0.1至25mg/kg/天，更优选约0.5至10mg/kg/天的范围内的治疗有效量，施用式(A)的化合物。因此，对于施用至70kg的个人，剂量范围最优选为约35至700mg/天。
可以0.5至1000mg的日剂量范围，优选0.5mg至15mg的范围，最优选0.5mg至10mg的范围施用mTOR抑制剂依维莫司(RAD001)至个人。
特定言之，治疗有效量的本发明的组合的各组合伴侣可以同时或按序及以任何顺序施用，且组分可以分开或作为固定组合施用。例如，根据本发明预防或治疗增生性疾病的方法可包括(i)施用呈游离或药学上可接受的盐形式的第一药物(a)及(ii)施用呈游离或药学上可接受的盐形式的药物(b)，其以联合治疗有效量，优选协同有效量(例如对应于文中所述量的每天或间歇剂量)同时或以任何顺序按序施用。本发明的组合的各组合伴侣可以在治疗过程期间的不同时间分开施用或以分开或单一组合形式并行施用。而且，术语施用亦涵盖使用在体内转换成这样的组合伴侣的组合伴侣的前药。本发明因而理解为包含所有该类同时或交替治疗方案及术语“施用”可做相应地解释。
在本发明的组合中所用的各组合伴侣的有效剂量会依据所用特定化合物或药物组合物、施用模式、待治疗病症、待治疗病症的严重性而变。因此，本发明的组合的剂量方案根据多种因素选择，其包括施用途径及患者的肾及肝功能。一般技术水平的临床医生或内科医生容易确定减缓、阻碍或抑制病症进展所需的单一活性成分的有效含量并开出药方。获得在产生疗效而无毒性的范围内的活性成分浓度的最佳精确度要求一种基于活性成分至靶点的有效性的动力学的方案。
本发明进一步包括下列实施方案：
·一种供人施用用的协同组合，其包括呈游离态或其盐形式的为(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)的式(A)的化合物及至少一种mTOR抑制剂，其组合范围分别对应于SKBR-3乳癌细胞模型或BT-474乳癌细胞模型中的约330nM至3μM及约1nM至27nM的协同组合范围。
·一种供人施用用的协同组合，其包括呈游离态或其盐形式的为(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)的式(A)的化合物及至少一种mTOR抑制剂，其组合范围分别对应于T47-D乳癌细胞模型中的约12nM至100nM及约1nM至27nM的协同组合范围。
·一种供人施用用的协同组合，其包括呈游离态或其盐形式的为(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)的式(A)的化合物及至少一种mTOR抑制剂，其组合范围分别对应于ZR-75-1乳癌细胞模型中的约3μM及约1nM至27nM的协同组合范围。
下列实施例仅为说明性而不欲限制。
实施例1：藉由蛋白质印迹分析法检测的依维莫司(RAD001)与化合物I的组合在BT474及MDA-MB-231乳肿瘤细胞中的效果
材料及方法
化合物的制法：藉由Novartis Pharma AG合成化合物依维莫司(RAD001)。在DMSO中制备20mM原液及储存在-20℃。在DMSO中制备10mM的(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(“化合物I”)的原液及储存在-20℃。
细胞及细胞培养条件：人乳癌BT474细胞(ATCCHTB-26)及MDA-MB-231(ATCC HTB-20)获自美国菌种保存中心(ATCC,Rockville,MD,USA)。
BT474细胞保持在补充有10体积%胎牛血清及2mM L-谷胺酰胺的Hybri-Care培养基(ATCC)中。MDA-MB-231细胞生长在补充有10体积%胎牛血清及2mM L-谷胺酰胺的RPMI1640培养基(Amimed,Allschwil,Switzerland)中。所有培养基补充有100μg/mL青霉素/链霉素及细胞保持在37℃、5%CO2下。
细胞处理及细胞提取：分别以3.3×104细胞/cm2及1.6×104细胞/cm2的密度接种BT474及MDA-MB-231细胞及在37℃及5%CO2中培养48h，然后利用DMSO媒剂、20nMRAD001及/或各种浓度的化合物I处理24h。
如下制备细胞裂解液。利用包含1mM PMSF的冰冷却的PBS洗涤培养板一次及利用冰冷却的提取缓冲剂[50mM羟乙哌嗪乙磺酸盐(Hepes)(pH7.4)、150mM NaCl、25mMβ-甘油磷酸酯、25mM NaF、5mM EGTA、1mM EDTA、15mMPPi、2mM原钒酸钠、10mM钼酸钠、亮肽素(10μg/mL)、抑肽酶(10μg/mL)、1mM DTT及1mM PMSF]洗涤培养板一次。蛋白酶抑制剂购自SIGMA Chemical,St.Louis,Mo。在包含1%NP-40(SIGMA Chemicals)的相同缓冲剂中提取细胞。提取物经均质化，藉由离心澄清，分液及在-80℃下冰冻。利用BCA蛋白质检测(Pierce,Rockford,IL,USA)确定蛋白质浓度。
免疫印迹：20mg细胞提取物在12%变性十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)上电泳解析及藉由湿法印迹(1h，250mA)转移至聚二氟乙烯过滤器(PVDF；MilliporeCorporation,Bedford,MA,USA)及利用下列一级抗体在4℃探测整夜：
(a)抗磷酸化Akt(S473)(克隆14-05；1:2000)获自DAKO(Glostrup,Denmark)及稀释于PBS、0.5体积%吐温、0.5%w/v乳液中；
(b)抗磷酸化MAPK(T202/Y204)(克隆ECA297；1:50)获自DAKO(Glostrup,Denmark)及稀释于PBS、0.5体积%吐温、0.5%w/v乳液中；
(c)抗磷酸化MEK1/2(S217/S221)(目录号9154；1:1000)获自Cell Signaling Technology及稀释于PBS、0.1体积%吐温、0.5%w/v乳液；
(d)抗肌动蛋白(目录号MAB1501；1:20,000)获自Chemicon(Billerica,MA,USA)及稀释于PBS、0.1体积%吐温中。
在利用适当的一级抗体(如上所列)培养后，利用辣根过氧化物酶共轭的抗鼠或抗兔免疫球蛋白接着藉由增强的化学发光(ECL Plus套组；Amersham Pharmacia Biotech,Buckinghamshire,UK)展现经装饰的蛋白质及利用QuantityOne软件(Bio-Rad,Munich,Germany)进行定量。
藉由反相蛋白质阵列法按如下所述的方式进一步定量各细胞提取物。
利用压电微分散基的非接触性纳米绘图机2.1(GeSiM,Grosserkmannsdorf,Germany)，在
Figure BDA0000402416040000241
PWG蛋白质微阵列芯片(Zeptosens,Witterswil,Switzerland)上点样各细胞提取物。在点样
Figure BDA0000402416040000242
蛋白质微阵列后，在37℃培养芯片1h。为获得均一封阻结果，经由超音波雾化器施用CeLyA封阻缓冲剂BB1(Zeptosens，目录号9040)。在封阻30分钟后，利用去离子水(Milli-Q质量，18M′Ωx cm)充分清洗芯片及在氮气流中干燥。
在样本点样及封阻步骤后，将
Figure BDA0000402416040000243
芯片转移至ZeptoCARRIER(Zeptosens，目录号1100)，其6个流孔分别寻址在芯片上的6个阵列及利用200μl CAB1CeLyA分析缓冲剂(Zeptosens，目录号9032)洗涤两次。接着抽吸分析缓冲剂及利用100μl一级目标抗体(pAKT Ser473:CST#4060；pAKT Thr308:CST#2965,AKT1pan:Epitomics#1085-1)在RT过夜培养各小室。在培养后，移除一级抗体，利用CAB1缓冲剂洗涤阵列两次及进一步利用100μl Alexa fluor647标记的抗兔IgG Fib片段(氮气；#Z25305)在RT、黑暗中培养1h。培养后，利用200μl CAB1缓冲剂洗涤阵列两次。在ZeptoReader(Zeptosens,Witterswil,Switzerland)上利用激光器(激发波长635nm)及CCD照相机读取靶结合的Fib片段的荧光。根据信号强度，在1、3、5及10秒的暴露时间下评估荧光信号。
利用ZeptoVIEW Pro2.0软件(Zeptosens,Witterswil,Switzerland)分析各阵列的荧光图像并计算各信号的RFI。
在该实验中使用的抗体及抗体稀释：
Figure BDA0000402416040000251
结果：
藉由蛋白质印迹分析法所确定的依维莫司(RAD001)及依维莫司(RAD001)与化合物I的组合的存在下于BT474乳肿瘤细胞中的AKT(S473)、MAPK(T202/Y204)、MEK1/2(S217/S221)的磷酸化水平及总肌动蛋白水平描绘于图1中。
如藉由反相蛋白质阵列所定量的依维莫司(RAD001)及依维莫司(RAD001)与化合物I的组合的存在下于BT474乳肿瘤细胞下的AKT(S473)、AKT(T308)的磷酸化水平及总的AKT水平分别描绘于图2至4中。
藉由蛋白质印迹分析法所测定的依维莫司(RAD001)及依维莫司(RAD001)与化合物I的组合的存在下于MDA-MB231乳肿瘤细胞中的AKT(S473)、MAPK(T202/Y204)的磷酸化水平及总肌动蛋白水平描绘于图5中。
如藉由反相蛋白质阵列所定量的依维莫司(RAD001)及依维莫司(RAD001)与化合物I的组合的存在下于MDA-MB231乳肿瘤细胞中的AKT(S473)、AKT(T308)的磷酸化水平及总的AKT水平分别描绘于图6至8中。
在第二组实验中，藉由蛋白质印迹分析法测定及利用Quantity One软件定量的依维莫司(RAD001)及依维莫司(RAD001)与化合物I的组合的存在下于MDA-MB231乳肿瘤细胞中的AKT(S473)的磷酸化水平及总的AKT水平显示于图9中。
在第二组实验中，藉由反相蛋白质阵列定量的依维莫司(RAD001)及依维莫司(RAD001)与化合物I的组合的存在下于MDA-MB231乳肿瘤细胞中的AKT(S473)、AKT(T308)的磷酸化水平及总的AKT水平分别描绘于图10至12中。
实施例2：依维莫司(RAD001)与化合物I的组合在SKBR-3人乳癌细胞模型中的效果
材料及方法
人乳癌细胞系SKBR-3购自美国菌种保存中心。SKBR-3人乳癌细胞系系HER2扩增型。在37℃、5%CO2培养器中，于RPMI1640(ATCC#30-2001)中或补充有10%胎牛血清、2mmol/L谷胺酰胺及1%丙酮酸钠的其他建议的培养基中培养SKBR-3人乳癌细胞系。
细胞增殖分析：藉由按照制造商方案，利用
Figure BDA0000402416040000261
发光细胞活力分析(Promega#G7573)测量细胞ATP含量，来测定细胞活力。简言之，将1500至50000个细胞种于在25μl(384孔)或100μl(96孔)生长培养基中的384或96孔板中，容许细胞贴壁整夜及接着利用不同浓度的药物或药物组合培养72h，在药物处理结束时，将相同体积的CellTiter-Glo试剂添加至各孔以裂解细胞，及在Envision平板读数器中记录发光信号。
计算组合的效果的方法：为评估依维莫司(RAD001)及(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(“化合物I”)的组合效果及为确定在所有可能浓度下的潜在协同效果，利用“剂量矩阵”进行该组合研究，其中在系列稀释的依维莫司(RAD001)及化合物I单药剂剂量的所有可能排列下测试组合，在所有组合分析中同时使用化合物。利用Chalice软件(CombinatoRx,Cambridge MA)分析单药剂剂量反应曲线、IC50、IC90及协同作用。藉由比较组合的反应与其单药剂的反应，相对于药物本身剂量相加的参考模型，计算协同作用。剂量相加的偏差可以在等效线图(Isobologram)上以目视评估或用组合指数以数值评估。相比于相加的过量抑制作用亦可以绘制成全剂量-矩阵图以获悉何处发生协同作用。为了定量组合效果的总强度，亦在该数据与最高单药剂表面之间计算体积分数VHSA=ΣX,YlnfX lnfY(Idata-IHSA)，对单药剂稀释因子fX,fY标准化。
结果：
利用上述细胞滴定发光(CellTiter-Glo)(CTG)分析，评估单药剂及组合依维莫司(RAD001)/化合物I处理对细胞增殖的影响。将细胞种在384孔板中，每孔3000个细胞，三个重复，及在测量前用化合物处理72小时(图13)。在该“剂量矩阵”研究中，依维莫司(RAD001)处理为4剂量，3X系列稀释，其中高剂量为27nM及低剂量为1nM，及化合物I处理为7剂量，3X系列稀释，其中高剂量为3μM及及低剂量为约4nM。
此研究的结果阐明于图13中。仅化合物I导致具有0.40的最大抑制百分比Amax(与DMSO对照组相比，40%的生长抑制)的浓度依赖性细胞生长抑制；依维莫司(RAD001)作为单药剂显示对细胞增殖的相似程度的较小生长抑制效果，其从未达到IC50且Amax=0.32。组合的依维莫司(RAD001)/化合物I处理显著增加最大抑制程度，相比于任一单药剂(依维莫司(RAD001)的Amax=0.32及化合物I的Amax=0.40)，具有Amax=0.63。在整个剂量矩阵中，在所有剂量(1nM至27nM)的依维莫司(RAD001)及部分较高剂量范围的化合物I(330nM至3μM)中观察到提高的协同活性。在相对低的化合物I浓度(4nM至37nM)，相比于此实验中化合物I及依维莫司(RAD001)作为单药剂处理，该组合未显示其他益处。
实施例3：依维莫司(RAD001)与化合物I的组合在BT-474乳肿瘤细胞中的效果
材料及方法
人乳癌细胞系BT-474购自美国菌种保存中心。BT-474人乳癌细胞系包括PIK3CA突变细胞及HER2扩增细胞两种。在37℃、5%CO2培养器中，于RPMI1640(ATCC#30-2001)或补充有10%胎牛血清、2mmol/L谷胺酰胺及1%丙酮酸钠的其他建议的培养基中培养BT-474乳癌细胞系。
细胞增殖分析：藉由按照制造商方案，利用
Figure BDA0000402416040000281
发光细胞活力分析(Promega#G7573)测量细胞ATP含量，来测定细胞活力。简言之，将1500至50000个细胞种于在25μl(384孔)或100μl(96孔)生长培养基中的384或96孔板中，容许细胞贴壁整夜及接着利用不同浓度的药物或药物组合培养72h，在药物处理结束时，将相同体积的CellTiter-Glo试剂添加至各孔以裂解细胞，及在Envision平板读数器中记录发光信号。
组合效果的计算方法：为评估依维莫司(RAD001)及(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(“化合物I”)的组合效果及为确定在所有可能浓度下的潜在协同效果，该组合研究利用“剂量矩阵”进行，其中在系列稀释的依维莫司(RAD001)及化合物I单药剂剂量的所有可能排列下测试组合，在所有组合分析中同时使用该等化合物。利用Chalice软件(CombinatoRx,Cambridge MA)分析单药剂剂量反应曲线、IC50、IC90及协同作用。藉由比较组合的反应与其单药剂的反应，相对于药物本身剂量相加的参考模型，计算协同作用。剂量相加的偏差可以在等效线图上以目视评估或用组合指数以数值评估。相比于相加的过量抑制作用亦可以绘制成全剂量-矩阵图以获悉何处发生协同作用。为定量组合效果的总强度，亦在该数据及最高单药剂表面之间计算体积分数VHSA=ΣX,Y lnfX lnfY(Idata-IHSA)，对单药剂稀释因子fX,fY标准化。
结果：
利用上述细胞滴定发光(cell titer glow)(CTG)分析评估单药剂及组合依维莫司(RAD001)/化合物I处理对细胞增殖的影响。利用上述细胞滴定发光(CTG)分析评估单药剂及组合依维莫司(RAD001)/化合物I处理对细胞增殖的影响。实验设置与上述SKBR-3模型的实验程序一致(图14)。而且应用相同“剂量矩阵”(依维莫司(RAD001)：4剂量，3X，1nM至27nM；化合物I：7剂量，3X，4nM至3μM)。
此研究的结果阐明于图14中。仅化合物I导致具有约3μM的IC50及约0.53的Amax(与DMSO对照组相比，53%的生长抑制)的浓度依赖性细胞生长抑制；依维莫司(RAD001)作为单药剂显示对细胞增殖的较小生长抑制影响，从未达到IC50，且Amax=0.36。组合依维莫司(RAD001)/化合物I处理显著增加最大抑制程度，相比于任一单药剂(依维莫司(RAD001)的Amax=0.36，化合物I的Amax=0.53)，具有Amax=0.66。在整个剂量矩阵中，在所有剂量(1nM至27nM)的依维莫司(RAD001)及高剂量的化合物I(330nM至3μM)观察到提高协同活性。在较低化合物I浓度(4nM-37nM)，相比于此实验中化合物I及依维莫司(RAD001)作为单药剂处理，该组合未显示其他益处。
实施例4：依维莫司(RAD001)与化合物I的组合在T47-D人乳癌细胞模型中的效果
材料及方法
人乳癌细胞系T47-D购自美国菌种保存中心。T47-D人乳癌细胞系包括PIK3CA突变细胞。在37℃、5%CO2培养器中，于RPMI1640(ATCC#30-2001)中或补充有10%胎牛血清、2mmol/L谷胺酰胺及1%丙酮酸钠的其他建议的培养基中培养T47-D人乳癌细胞系。
细胞增殖分析：藉由按照制造商方案，利用
Figure BDA0000402416040000301
发光细胞活力分析(Promega#G7573)测量细胞ATP含量，来测定细胞活力。简言之，将1500至50000个细胞种于在25μl(384孔)或100μl(96孔)生长培养基中的384或96孔板中，容许细胞贴壁整夜及接着利用不同浓度的药物或药物组合培养72h，在药物处理结束时，将相同体积的CellTiter-Glo试剂添加至各孔以裂解细胞，及在Envision平板读数器中记录发光信号。
计算组合的效果的方法：为评估依维莫司(RAD001)及(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(“化合物I”)的组合效果及为发现在所有可能浓度下的潜在协同效果，利用“剂量矩阵”进行该组合研究，其中在系列稀释的依维莫司(RAD001)及化合物I单药剂剂量的所有可能的排列下测试组合，在所有组合分析中，同时使用该等化合物。利用Chalice软件(CombinatoRx,Cambridge MA)分析单药剂剂量反应曲线、IC50、IC90及协同作用。藉由比较组合的反应与其单药剂的反应，相对于药物本身剂量相加的参考模型，计算协同作用。剂量相加的偏差可以在等效线图上以目视评估或利用组合指数进行数值评估。相比于相加的过量抑制作用，亦可以绘制成全剂量-矩阵图以获悉何处发生协同作用。为定量组合效果的总强度，亦在数据与最高单药剂表面之间计算体积分数VHSA=ΣX,Y lnfXlnfY(Idata-IHSA)，对单药剂稀释因子fX,fY标准化。
结果：
利用上述细胞滴定发光(CTG)分析评估单药剂及组合依维莫司(RAD001)/化合物I处理对细胞增殖的影响。利用上述细胞滴定发光(CTG)分析评估单药剂及组合的依维莫司(RAD001)/化合物I处理对细胞增殖的影响。实验设置与上述SKBR-3模型的实验程序相同(图15)。而且应用相同“剂量矩阵”(依维莫司(RAD001)：4剂量，3X，1nM至27nM；化合物I：7剂量，3X，4nM至3μM)。
此研究的结果阐明于图15中。仅化合物I导致具有约330nM的IC50及约0.67的Amax(与DMSO对照组相比，67%的生长抑制)的浓度依赖性细胞生长抑制；依维莫司(RAD001)作为单药剂显示对细胞增殖的较小生长抑制效果，从未达到IC50且Amax=0.37。组合依维莫司(RAD001)/化合物I处理不增加最大抑制水平，相比于单药剂化合物I处理(Amax=0.67)，具有Amax=0.68。在整个剂量矩阵中，在所有剂量(1nM-27nM)的依维莫司(RAD001)及相对高剂量的化合物I(12nM-100nM)中观察到略微提高及弱的协同作用。在高浓度及低浓度的化合物I(4nM，330nM至3μM)，相比于此实验中化合物I及依维莫司(RAD001)作为单药剂处理，该组合未显示其他益处。
实施例5：依维莫司(RAD001)与化合物I的组合在ZR-75-1人乳癌细胞模型中的效果
材料及方法
人乳癌细胞系ZR-75-1购自美国菌种保存中心。ZR-75-1人乳癌细胞系包括PTEN突变细胞。在37℃、5%CO2培养器，于RPMI1640(ATCC#30-2001)中或补充有10%胎牛血清、2mmol/L谷胺酰胺及1%丙酮酸钠的其他建议的培养基中培养ZR-75-1人乳癌细胞系。
细胞增殖分析：藉由按照制造商方案，利用
Figure BDA0000402416040000311
发光细胞活力分析(Promega#G7573)测量细胞ATP含量，来测定细胞活力。简言之，将1500至50000个细胞种于在25μl(384孔)或100μl(96孔)生长培养基中的384或96孔板中，容许细胞贴壁整夜及接着利用不同浓度的药物或药物组合培养72h，在药物处理结束时，将相同体积的CellTiter-Glo试剂添加至各孔以裂解细胞，及在Envision平板读数器中记录发光信号。
计算组合的效果的方法：为评估依维莫司(RAD001)及(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(“化合物I”)的组合效果及为确定在所有可能浓度下的潜在协同效果，利用“剂量矩阵”进行该组合研究，其中在系列稀释的依维莫司(RAD001)及化合物I单药剂剂量的所有可能排列下测试组合，在所有组合分析中，同时使用该等化合物。利用Chalice软件(CombinatoRx,Cambridge MA)分析单药剂剂量反应曲线、IC50、IC90及协同作用。藉由比较组合的反应与其单药剂的反应，相对于药物本身剂量相加的参考模型，计算协同作用。剂量相加的偏差可以在等效线图上以目视评估或利用组合指数以数值评估。相比于相加的过量抑制作用亦可以绘制成全剂量-矩阵图以获悉何处发生协同作用。为定量组合效果的总强度，亦在该数据及最高单药剂表面之间计算体积分数VHSA=ΣX,Y lnfX lnfY(Idata-IHSA)，对单药剂稀释因子fX,fY标准化。
结果：
利用上述细胞滴定发光(CTG)分析评估单药剂及组合的依维莫司(RAD001)/化合物I处理对细胞增殖的效果。利用上述细胞滴定发光(CTG)分析评估单药剂及组合的依维莫司(RAD001)/化合物I处理对细胞增殖的效果。实验设置与以上针对SKBR-3模型所述的实验程序相同(图16)。且应用相同“剂量矩阵”(依维莫司(RAD001)：4剂量，3X，1nM至27nM，化合物I：7剂量，3X，4nM至3μM)。
该研究的结果阐明于图16中。仅化合物I未导致对细胞生长的显著抑制，其中Amax为约0.16(相比DMSO对照组，16%的生长抑制)；依维莫司(RAD001)作为单药剂展示对细胞增殖的较佳生长抑制效果，其中IC50为约15nM及Amax=0.55。组合的依维莫司(RAD001)/化合物I处理显著增加最大抑制水平，相比于任一单药剂(依维莫司(RAD001)的Amax=0.55及化合物I的Amax=0.16)，具有Amax=0.67。然而，在整个剂量矩阵中，在最高剂量的化合物I(3μM)中观察到显著及弱协同作用增强。在较低化合物I的浓度(4nM至1μM)，相比于此实验中化合物I及依维莫司(RAD001)作为单药剂处理，该组合未显示其他益处。
实施例6：依维莫司(RAD001)与化合物I的组合在DU145人前列腺癌裸鼠异种移植模型中的效果
方法及材料
在研究第1天，使用具有21.0至31.3g范围体重(BW)的8周龄、雄性裸鼠(nu/nu,Harlan)。动物随意饮用水(反渗透，1ppm Cl)及由18.0%粗蛋白质、5.0%粗脂肪及5.0%粗纤维组成的经NIH31改质及照射的实验室用饮食(R)。将小鼠关在具有12小时光周期、21至22℃及40至60%湿度的静态式微隔离器中的照射Enrich-o'cobs(TM)实验动物垫料上。
DU145人前列腺癌细胞系获自美国菌种保存中心(ATCC)。DU145细胞系作为指数型生长培养物保持在补充有10%胎牛血清、2mM谷胺酰胺、100单位/mL青霉素G钠、100μg/mL硫酸链霉素、2μg/mL庆大霉素、10mM HEPES及0.075%碳酸氢钠的RPMI-1640培养基中。在37℃、5%CO2及95%空气氛围的湿化培养器中的组织培养瓶中培养肿瘤细胞。
在指数型生长期间捕获DU145前列腺癌细胞及以5×107个细胞/mL浓度再悬浮于具有50%MatrigelTM(BDBiosciences)的冷PBS中。每只裸鼠在右侧皮下注射0.2mL该悬浮液(1×107个细胞)。当其平均体积达到所需的100至150mm3范围时，肿瘤在两个维度测径规以监测生长。以mm3表示的肿瘤大小由：肿瘤体积=(宽度2×长度)/2计算。可以利用1mg相当于1mm3的肿瘤体积的假定来评估肿瘤重量。在肿瘤移植7天后，在研究第1天，将具有144至196mm3的单个肿瘤大小的小鼠分成11组，每组10只小鼠，其中小组平均肿瘤体积为181至184mm3。
于室温下，将(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(“化合物I”)在N-甲基吡咯烷酮(NMP；10%的最终体积)中搅拌直至溶解。添加聚乙二醇300(PEG300)(30%的最终体积)，接着添加
Figure BDA0000402416040000341
HSS15(20%的最终体积)，及搅拌混合物直至均质化。最终体积藉由添加去离子水(40%的最终体积)而达成。化合物I媒剂，NMP:PEG300:
Figure BDA0000402416040000342
HS15:去离子水(10:30:20:60)指定为「媒剂1」。藉由利用媒剂1稀释高剂量溶液，制备用于更低剂量的溶液。新鲜给药溶液按每周制备及在4℃下，避光储存。
在包含2%(w/w)活性成分(20mg RAD001/g)的微乳液中调配依维莫司(RAD001)；该微乳液的密度为0.995g/cm3。RAD001微乳液经分液及最初在-20℃下储存。原液的分液经熔化，分成经称量的每日部分，在4℃下储存。在每个处理日，将RAD001分液移至室温下及利用葡萄糖水溶液(D5W)稀释以提供用于最高剂量的1mg/mL溶液。利用D5W稀释此原液以制备用于更低剂量的溶液。利用D5W稀释的安慰剂微乳液被指定为「媒剂2」。
处理计划：
化合物I、RAD001及其媒剂各藉由经口强饲法(p.o.)每天施用一次连续达21天(qd x21)。对于组合疗法，在第1至20天，RAD001在化合物I后30分钟内给药。在第10组，在第21天及在第7天，RAD001在一个接一个笼子的基础上紧随化合物I。太平洋紫杉醇经由团式尾静脉注射(i.v.)每天施用一次，隔天施用，施用5倍剂量(qod x5)。当周五BW进行时，给药体积(10mL/kg，0.2mL/20g小鼠))与如在给药天(周末除外)所测定的各动物的体重成比例。
11组裸鼠(n=10/组)处理如下：第1组小鼠接受媒剂1及媒剂2，及充当用于所有分析的对照组。第2至4组接受分别利用12.5、25及50mg/kg化合物I的单一疗法。第5至7组接受分别利用2.5、5及10mg/kg RAD001的单一疗法。第8组接受与10mg/kg RAD001组合的12.5mg/kg化合物I。第9组接受与5mg/kg RAD001组合的25mg/kg化合物I。第10组接受与2.5mg/kg RAD001组合的50mg/kg化合物I；因为毒性，在各药物的七次剂量(qd x7)后停止此处理。第11组接受25mg/kg太平洋紫杉醇。
肿瘤生长抑制：
在第21天确定处理效果。出于统计及图表分析的目的，对存活至第21天的各动物确定第1天(开始给药)与终点天之间的肿瘤体积差ΔTV。对于各处理组，藉由下列关系计算在终点天的反应：
T/C(%)=100×ΔT/ΔC，ΔT>0
其中ΔT=(处理组在终点天的平均肿瘤体积)-(处理组在第1天的平均肿瘤体积)，及ΔC=(对照组在终点天的平均肿瘤体积)-(对照组在第1天的平均肿瘤体积)。达到40%或更小的T/C值的处理可以分类为潜在治疗活性。
退化反应标准：
亦可从退化反应的数量确定治疗效果。处理可导致动物中teh肿瘤的部分退化(PR)或完全退化(CR)。PR表明对于在研究过程期间的三次连续测量，肿瘤体积为其第1天体积的50%或更小，及在所述三次测量中的一次或多次中肿瘤体积等于或大于13.5mm3。CR表明对于在研究过程期间的三次连续测量，肿瘤体积小于13.5mm3。
毒性：
在第1至5天及在每个处理天(周末除外)直至研究结束称量动物。最大耐受剂量的可接受毒性定义为在测试期间小于15%的小组平均BW损失，及在10只动物中，不超过1只治疗相关(TR)死亡。一次测量超过20%的BW损失的任何动物进行安乐死及分类为TR死亡，除非其为小组中首例死亡者。非治疗相关(NTR)死亡分类为NTRa(因为意外或失误)、NTRu(因为不明原因)或NTRm(尸体剖解证实藉由入侵及/或转移的肿瘤扩散)。为保护动物同时提供最大信息，小组中的首例死亡分类为NTRu，但如果随后小组表现显示该治疗具有毒性，则该死亡将再次分类为TR。
取样：
在第7天，第10组中的动物#1-4在藉由于CO2麻醉下的末端心穿刺给药后2小时进行安乐死。在第8天，在给药后24小时，动物#5按同样方式取样。从每个动物收集全体积血及利用K-EDTA作为抗凝血剂单个处理以获得血浆。在-80℃冷冻血浆样本。肿瘤被切除及在液态N2中急冻。在第21天，最终给药后2及24小时，在第1、4、6及9组中，在每个时间点，按前述方式对4只动物采集血液及肿瘤样本。
在原始数据中，第4组动物#2、6及7由于TR死亡退出研究；及第9组动物#4及10分别由于TR及NTR退出研究。此等动物实际上存活至第21天并取样。
统计及图表分析：
利用用于Windows的Prism3.03(Graph Pad)进行统计及图表分析。藉由方差分析(ANOVA)、Bartlett测试及事后Dunnett多项比较测试确定小鼠处理组与对照组的平均ΔTV值之间的差异的显著性。当Bartlett测试表明方差之间的显著性差异(P<0.0001)时，利用非参数Kruskal-Wallis测试分析结果，该测试表示中位数体积变化的显著性差异(P<0.0001)。小组之间的差别利用事后Dunn多项比较测试分析。Mann-Whitney U测试用于比较两组中的中位数体积变化。在P=0.05下进行双尾统计分析。Prism汇总测试结果：在P>0.05下为不显著(ns)，在0.01<P≤0.05下为显著(藉由“*”表征)，在0.001<P≤0.01下为非常显著(藉由“**”表征)，在P≤0.001下为极其显著(藉由“***”表征)。因为统计显著性测试不提供小组之间的差异量级的评估，故所有显著性水平被描述为显著或不显著。
绘制散点图以按小组显示各动物的ΔTV值。作为时间的线性函数，绘制小组平均值±平均值的标准偏差(SEM)或中位数肿瘤体积图。以自第1天的百分比变化±SEM，绘制在研究过程中的小组平均BW变化图。当TR死亡率超过10%时，肿瘤生长曲线被截去。
结果：
下列数据获自该研究：
Figure BDA0000402416040000371
研究终点=1000mm3；持续天数=21。
n=未死于治疗相关、意外或不明原因或因取样而进行安乐死的小组中的动物数。
平均体积变化=在第1天与第21天之间的小组平均体积变化。
T/C=100×(ΔT/ΔC)=在第1天与第21天之间，治疗组的平均肿瘤体积(ΔT)与对照组1的变化(ΔC)相比较的变化百分比。
统计显著性(利用事后Dunn多项比较测试的Kruskal-Wallis)：与指定组相比，ne=未评估，ns=不显著，*=P<0.05，***=P<0.001。
平均BW Nadir=作为从第1天至第21天的变化%的最低小组平均体重；--表明未观察到平均体重的减少。
ES=因取样而进行安乐死。
在该研究中，媒剂处理组1小鼠的宽范围的ΔTV值导致各动物之间多至9.9倍的差异。仍可观察到显著活性，所有处理产生表明潜在治疗活性的低于40%临界值的T/C值。
以12.5:10及25:5mg/kg的剂量比的化合物I/RAD001组合（第8和9组）分别导致29%及15%T/C，及统计上显著的活性(P<0.05及P<0.001)。以12.5:10mg/kg的比的组合疗法(第8组)分别改善第2及7组中的化合物I及RAD001的单一疗法；然而，第8组的ΔTV值位于第2及7组的数值范围内，却未观察到相比单一疗法的统计上显著的改善。
以25:5mg/kg的比的组合疗法(第9组)导致15%T/C，及因此略微改良第3组中的化合物I的单一疗法(16%T/C)。以50:2.5mg/kg的剂量比的化合物I/RAD001的组合在第5天导致19.4%小组平均BW损失；及截止第7天，当停止处理时，50%的死亡率。

Claims (14)

1.一种药物组合，其包括：
a)式(A)的化合物
Figure FDA0000402416030000011
或其盐，其中
A表示选自由如下组成的群的杂芳基：
Figure FDA0000402416030000012
R1表示一种下列取代基：(1)未经取代或经取代(优选经取代)的C1-C7-烷基，其中该等取代基独立地选自一或多个(优选1至9个)下列基团：氘、氟，或1至2个如下基团C3-C5-环烷基；(2)视需要经取代的C3-C5-环烷基，其中该等取代基独立地选自一或多个(优选1至4个)下列基团：氘、C1-C4-烷基(优选甲基)、氟、氰基、氨基羰基；(3)视需要经取代的苯基，其中该等取代基独立地选自一或多个(优选1至2个)下列基团：氘、卤素、氰基、C1-C7-烷基、C1-C7-烷基氨基、二(C1-C7-烷基)氨基、C1-C7-烷基氨基羰基、二(C1-C7-烷基)氨基羰基、C1-C7-烷氧基；(4)视需要经单或二取代的胺；其中该等取代基独立地选自下列基团：氘、C1-C7-烷基(其未经取代或经一或多个选自氘、氟、氯、羟基的群的取代基取代)、苯基磺酰基(其未经取代或经一或多个、优选一个C1-C7-烷基、C1-C7-烷氧基、二(C1-C7-烷基)氨基-C1-C7-烷氧基取代)；(5)经取代的磺酰基；其中该等取代基选自如下基团：C1-C7-烷基(其未经取代或经一或多个选自氘、氟的群的取代基取代)、吡咯烷基(其未经取代或经一或多个选自氘、羟基、氧基的群的取代基，尤其一个氧基取代)；(6)氟、氯；
R2表示氢；
R3表示(1)氢，(2)氟、氯，(3)视需要经取代的甲基，其中该等取代基独立地选自一或多个(优选1至3个)下列基团：氘、氟、氯、二甲基氨基；
排除(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({5-[2-叔丁基-嘧啶-4-基]-4-甲基-噻唑-2-基}-酰胺)，
及
b)至少一种mTOR抑制剂。
2.如权利要求1的药物组合，其中式(A)的化合物为(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)。
3.如权利要求1或2的药物组合，其中该mTOR抑制剂系选自RAD雷帕霉素(西罗莫司)及其衍生物/类似物，诸如依维莫司(RAD001)、替西罗莫司(CCI-779)、佐他莫司(ABT578)、SAR543、子囊霉素(FK506的乙基类似物)、地磷莫司(AP23573/MK-8669)、AP23841、KU-0063794、INK-128、EX2044、EX3855、EX7518、AZD08055、OSI-027、WYE-125132、XL765、NV-128、WYE-125132及EM101/LY303511。
4.如权利要求1或2的药物组合，其用于治疗或预防哺乳动物雷帕霉素靶(mTOR)激酶依赖性疾病。
5.一种药物组合物，其包括如权利要求1的式(A)的化合物或其药学上可接受的盐及至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐。
6.一种式(A)的化合物
Figure FDA0000402416030000031
或药学上可接受的盐；及
至少一种mTOR抑制剂制造用于治疗或预防哺乳动物雷帕霉素靶(mTOR)激酶依赖性疾病的药物的用途，其中
A表示选自由如下组成的群的杂芳基：
Figure FDA0000402416030000032
R1表示一种下列取代基：(1)未经取代或经取代(优选经取代)的C1-C7-烷基，其中该等取代基独立地选自一或多个(优选1至9个)下列基团：氘、氟，或1至2个如下基团C3-C5-环烷基；(2)视需要经取代的C3-C5-环烷基，其中该等取代基独立地选自一或多个(优选1至4个)下列基团：氘、C1-C4-烷基(优选甲基)、氟、氰基、氨基羰基；(3)视需要经取代的苯基，其中该等取代基独立地选自一或多个(优选1至2个)下列基团：氘、卤素、氰基、C1-C7-烷基、C1-C7-烷基氨基、二(C1-C7-烷基)氨基、C1-C7-烷基氨基羰基、二(C1-C7-烷基)氨基羰基、C1-C7-烷氧基；(4)视需要经单或二取代的胺；其中该等取代基独立地选自下列基团：氘、C1-C7-烷基(其未经取代或经一或多个选自氘、氟、氯、羟基的群的取代基取代)、苯基磺酰基(其未经取代或经一或多个、优选一个C1-C7-烷基、C1-C7-烷氧基、二(C1-C7-烷基)氨基-C1-C7-烷氧基取代)；(5)经取代的磺酰基；其中该等取代基选自如下基团：C1-C7-烷基(其未经取代或经一或多个选自氘、氟的群的取代基取代)、吡咯烷基(其未经取代或经一或多个选自氘、羟基、氧基的群的取代基，尤其一个氧基取代)；(6)氟、氯；
R2表示氢；
R3表示(1)氢，(2)氟、氯，(3)视需要经取代的甲基，其中该等取代基独立地选自一或多个(优选1至3个)下列基团：氘、氟、氯、二甲基氨基；
排除(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({5-[2-叔丁基-嘧啶-4-基]-4-甲基-噻唑-2-基}-酰胺)。
7.如权利要求6的用途，其中该式(A)的化合物为(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)。
8.如权利要求6或7的用途，其中该mTOR抑制剂选自RAD雷帕霉素(西罗莫司)及其衍生物/类似物，诸如依维莫司(RAD001)、替西罗莫司(CCI-779)、佐他莫司(ABT578)、SAR543、子囊霉素(FK506的乙基类似物)、地磷莫司(AP23573/MK-8669)、AP23841、KU-0063794、INK-128、EX2044、EX3855、EX7518、AZD08055、OSI-027、WYE-125132、XL765、NV-128、WYE-125132及EM101/LY303511。
9.如权利要求6或7的用途，其中待治疗的疾病为良性或恶性肿瘤；脑癌、肾癌、肝癌、肾上腺癌、膀胱癌、乳癌、肾细胞癌、神经内分泌肿瘤、前列腺癌、胃癌、胃瘤、卵巢癌、结肠癌、直肠癌、前列腺癌、胰腺癌、肺癌、阴道癌或甲状腺癌、肉瘤、神经胶母细胞瘤、多发性骨髓瘤或胃肠癌，尤其结肠癌或结肠直肠腺瘤，或头颈瘤，表皮过度增殖、牛皮癣、前列腺增生、赘瘤、上皮特性的赘瘤、淋巴瘤、乳癌或白血病；器官或组织移植排斥；再狭窄；结节性硬化症；考登氏疾病；淋巴管平滑肌增生症；色素性视网膜炎；自体免疫疾病；类固醇抗性的急性成淋巴细胞白血病；纤维化疾病；肺高血压；免疫调节；多发性硬化症；VHL症候群；卡尼症候群；家族性腺瘤息肉症；幼年型息肉症候群；伯特-霍格-杜克症候群；家族性肥厚性心肌病；沃尔夫-帕金森-怀特症候群；神经变性异常；湿及干黄斑变性；肌肉损耗(萎缩、恶病质)或肌病；细菌及病毒感染；神经纤维瘤或普兹-杰格斯症候群。
9.如权利要求1或2的药物组合物，其用于治疗或预防哺乳动物雷帕霉素靶(mTOR)激酶依赖性疾病。
10.一种治疗或预防雷帕霉素靶(mTOR)激酶依赖性疾病的方法，其藉由施用如权利要求1或2的式(A)的化合物或其药学上可接受的盐及至少一种mTOR抑制剂或其药学上可接受的盐。
11.一种在用至少一种mTOR抑制剂的治疗中治疗对获得的AKT的磷酸化及活化依赖的增生性疾病的方法，其包括对有此需要的温血动物施用治疗有效量的如权利要求1或2的式(A)的化合物或其药学上可接受的盐。
12.如权利要求11的方法，其中待治疗的疾病为良性或恶性肿瘤；脑癌、肾癌、肝癌、肾上腺癌、膀胱癌、乳癌、肾细胞癌、神经内分泌肿瘤、前列腺癌、胃癌、胃瘤、卵巢癌、结肠癌、直肠癌、前列腺癌、胰腺癌、肺癌、阴道癌或甲状腺癌、肉瘤、神经胶母细胞瘤、多发性骨髓瘤或胃肠癌，尤其结肠癌或结肠直肠腺瘤，或头颈瘤，表皮过度增殖、牛皮癣、前列腺增生、赘瘤、上皮特性的赘瘤、淋巴瘤、乳癌或白血病；器官或组织移植排斥；再狭窄；结节性硬化症；考登氏疾病；淋巴管平滑肌增生症；色素性视网膜炎；自体免疫疾病；类固醇抗性的急性成淋巴细胞白血病；纤维化疾病；肺高血压；免疫调节；多发性硬化症；VHL症候群；卡尼症候群；家族性腺瘤息肉症；幼年型息肉症候群；伯特-霍格-杜克症候群；家族性肥厚性心肌病；沃尔夫-帕金森-怀特症候群；神经变性异常；湿及干黄斑变性；肌肉损耗(萎缩、恶病质)或肌病；细菌及病毒感染；神经纤维瘤或普兹-杰格斯症候群。
13.一种治疗对于用至少一种mTOR抑制剂的治疗产生抗性或降低敏感性的增生性疾病的方法，其包括对有此需要的温血动物施用治疗有效量的如权利要求1或2的式(A)的化合物或其药学上可接受的盐。
14.一种提高利用至少一种mTOR抑制剂治疗增生性疾病靶标的效果的方法，其包括对有此需要的温血动物施用包括如权利要求1或2的式(A)的化合物及至少一种mTOR抑制剂的组合。
CN201280020528.4A 2011-04-25 2012-04-23 磷脂酰肌醇-3-激酶(pi3k)抑制剂及mtor抑制剂的组合 Expired - Fee Related CN103491955B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161478572P 2011-04-25 2011-04-25
US61/478,572 2011-04-25
PCT/US2012/034647 WO2012148846A1 (en) 2011-04-25 2012-04-23 Combination of a phosphatidylinositol-3-kinase (pi3k) inhibitor and a mtor inhibitor

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103491955A true CN103491955A (zh) 2014-01-01
CN103491955B CN103491955B (zh) 2015-12-23

Family

ID=46018130

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201280020528.4A Expired - Fee Related CN103491955B (zh) 2011-04-25 2012-04-23 磷脂酰肌醇-3-激酶(pi3k)抑制剂及mtor抑制剂的组合

Country Status (25)

Country Link
US (3) US20140066474A1 (zh)
EP (1) EP2701703A1 (zh)
JP (2) JP6086902B2 (zh)
KR (1) KR101925656B1 (zh)
CN (1) CN103491955B (zh)
AR (1) AR086481A1 (zh)
AU (2) AU2012250010A1 (zh)
BR (1) BR112013027486A2 (zh)
CA (1) CA2833962A1 (zh)
CL (1) CL2013003078A1 (zh)
CO (1) CO6801759A2 (zh)
EA (1) EA025948B1 (zh)
EC (1) ECSP13012994A (zh)
GT (1) GT201300263A (zh)
IL (1) IL229008A (zh)
MA (1) MA35038B1 (zh)
MX (1) MX2013012385A (zh)
NZ (1) NZ615593A (zh)
PE (1) PE20140601A1 (zh)
SG (1) SG193919A1 (zh)
TN (1) TN2013000392A1 (zh)
TW (1) TWI602567B (zh)
UA (1) UA110961C2 (zh)
WO (1) WO2012148846A1 (zh)
ZA (1) ZA201306973B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106061505A (zh) * 2014-02-11 2016-10-26 诺华股份有限公司 用于治疗癌症的含pi3k抑制剂的药物组合
CN107106497A (zh) * 2014-10-03 2017-08-29 诺华股份有限公司 含alpelisib的药物组合物

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2853582A1 (en) * 2011-11-02 2013-05-10 Novartis Ag 2-carboxamide cycloamino urea derivatives for use in treating vegf - dependent diseases
CN105246482A (zh) * 2013-03-15 2016-01-13 因特利凯有限责任公司 激酶抑制剂的组合及其用途
BR112016010716A8 (pt) * 2013-11-13 2020-04-22 Novartis Ag dose de reforço imunológico, baixa, de um inibidor de mtor, seu uso, e adjuvante de vacina
WO2015148626A1 (en) * 2014-03-26 2015-10-01 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Treatment of fibrotic disorders
US20160339030A1 (en) * 2015-05-19 2016-11-24 University Of Maryland, Baltimore Treatment agents for inhibiting hiv and cancer in hiv infected patients
GB202010627D0 (en) * 2020-07-10 2020-08-26 Qbd (Qs-Ip) Ltd Blocking method

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101360495A (zh) * 2005-11-14 2009-02-04 阿里亚德基因治疗公司 对癌症病人给药mTOR抑制剂
WO2010029082A1 (en) * 2008-09-10 2010-03-18 Novartis Ag Organic compounds

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT98990A (pt) 1990-09-19 1992-08-31 American Home Prod Processo para a preparacao de esteres de acidos carboxilicos de rapamicina
US5120842A (en) 1991-04-01 1992-06-09 American Home Products Corporation Silyl ethers of rapamycin
US5100883A (en) 1991-04-08 1992-03-31 American Home Products Corporation Fluorinated esters of rapamycin
US5118678A (en) 1991-04-17 1992-06-02 American Home Products Corporation Carbamates of rapamycin
US5118677A (en) 1991-05-20 1992-06-02 American Home Products Corporation Amide esters of rapamycin
US5151413A (en) 1991-11-06 1992-09-29 American Home Products Corporation Rapamycin acetals as immunosuppressant and antifungal agents
GB9125660D0 (en) 1991-12-03 1992-01-29 Smithkline Beecham Plc Novel compound
ZA935112B (en) 1992-07-17 1994-02-08 Smithkline Beecham Corp Rapamycin derivatives
ZA935111B (en) 1992-07-17 1994-02-04 Smithkline Beecham Corp Rapamycin derivatives
US5256790A (en) 1992-08-13 1993-10-26 American Home Products Corporation 27-hydroxyrapamycin and derivatives thereof
GB9221220D0 (en) 1992-10-09 1992-11-25 Sandoz Ag Organic componds
US5258389A (en) 1992-11-09 1993-11-02 Merck & Co., Inc. O-aryl, O-alkyl, O-alkenyl and O-alkynylrapamycin derivatives
WO1995014023A1 (en) 1993-11-19 1995-05-26 Abbott Laboratories Semisynthetic analogs of rapamycin (macrolides) being immunomodulators
CN1046944C (zh) 1993-12-17 1999-12-01 山道士有限公司 雷怕霉素类衍生物
CZ292233B6 (cs) 1995-06-09 2003-08-13 Novartis Ag Deriváty rapamycinu a jejich použití jako léčiv
WO1998002441A2 (en) 1996-07-12 1998-01-22 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Non immunosuppressive antifungal rapalogs
AU783158B2 (en) 1999-08-24 2005-09-29 Ariad Pharmaceuticals, Inc. 28-epirapalogs
TW200519106A (en) * 2003-05-02 2005-06-16 Novartis Ag Organic compounds
MX2011004585A (es) * 2008-10-31 2011-06-01 Novartis Ag Combinacion de un inhibidor de fosfatidilinositol-3-cinasa (p13k) y un inhibidor de mtor.

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101360495A (zh) * 2005-11-14 2009-02-04 阿里亚德基因治疗公司 对癌症病人给药mTOR抑制剂
WO2010029082A1 (en) * 2008-09-10 2010-03-18 Novartis Ag Organic compounds

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106061505A (zh) * 2014-02-11 2016-10-26 诺华股份有限公司 用于治疗癌症的含pi3k抑制剂的药物组合
CN107106497A (zh) * 2014-10-03 2017-08-29 诺华股份有限公司 含alpelisib的药物组合物

Also Published As

Publication number Publication date
TW201244716A (en) 2012-11-16
JP6086902B2 (ja) 2017-03-01
JP2017061527A (ja) 2017-03-30
ZA201306973B (en) 2014-06-25
CA2833962A1 (en) 2012-11-01
AR086481A1 (es) 2013-12-18
AU2016202372B2 (en) 2017-07-20
AU2016202372A1 (en) 2016-05-05
CN103491955B (zh) 2015-12-23
IL229008A (en) 2017-11-30
SG193919A1 (en) 2013-11-29
EA201391565A1 (ru) 2014-02-28
NZ615593A (en) 2015-05-29
JP2014513097A (ja) 2014-05-29
EP2701703A1 (en) 2014-03-05
WO2012148846A1 (en) 2012-11-01
TWI602567B (zh) 2017-10-21
CL2013003078A1 (es) 2014-05-30
AU2012250010A1 (en) 2013-10-10
US20180085362A1 (en) 2018-03-29
CO6801759A2 (es) 2013-11-29
BR112013027486A2 (pt) 2017-02-14
EA025948B1 (ru) 2017-02-28
GT201300263A (es) 2015-11-24
MX2013012385A (es) 2013-11-04
US20140066474A1 (en) 2014-03-06
MA35038B1 (fr) 2014-04-03
KR20140012147A (ko) 2014-01-29
TN2013000392A1 (en) 2015-01-20
US20170095463A1 (en) 2017-04-06
UA110961C2 (uk) 2016-03-10
ECSP13012994A (es) 2013-12-31
PE20140601A1 (es) 2014-05-24
KR101925656B1 (ko) 2018-12-05
IL229008A0 (en) 2013-12-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103491955B (zh) 磷脂酰肌醇-3-激酶(pi3k)抑制剂及mtor抑制剂的组合
Robichaux et al. Mechanisms and clinical activity of an EGFR and HER2 exon 20–selective kinase inhibitor in non–small cell lung cancer
Nadal et al. Efficacy and safety of mammalian target of rapamycin inhibitors in vascular anomalies: a systematic review.
Dutcher Mammalian target of rapamycin inhibition
Zheng et al. Nicotine stimulates human lung cancer cell growth by inducing fibronectin expression
US20140178366A1 (en) Preselection of subjects for therapeutic treatment based on hypoxic status
CN105030784A (zh) 磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)抑制剂和mTOR抑制剂的组合产品
JP6903055B2 (ja) Ｅｔｂｒ活性化に関連した癌を治療するための組成物及び方法
US20140024030A1 (en) Preselection of subjects for therapeutic treatment with oxygen sensitive agents based in hypoxic status
JP2021059548A (ja) Ｔｏｒキナーゼ阻害剤組み合わせ療法を使用して癌を治療する方法
EP3331558B1 (en) Combination therapies targeting mitochondrial biogenesis for cancer therapy
CN108348508A (zh) 治疗或预防皮肤障碍的新型组合物和方法
US20140348819A1 (en) Methods of Treating Cancer
CN103153305A (zh) 药物组合
CA2872942A1 (en) Pre-selection of subjects for therapeutic treatment with an hsp90 inhibitor based on hypoxic status
Kietzman et al. Short-and long-term effects of CDK4/6 inhibition on early-stage breast cancer
Smeester et al. The relationship of bone-tumor-induced spinal cord astrocyte activation and aromatase expression to mechanical hyperalgesia and cold hypersensitivity in intact female and ovariectomized mice
Fogli et al. The expanding family of c-Met inhibitors in solid tumors: a comparative analysis of their pharmacologic and clinical differences
Chen et al. The efficacies of esomeprazole‐versus pantoprazole‐based reverse hybrid therapy for Helicobacter pylori eradication
Algazi et al. A phase 1 study of triple‐targeted therapy with BRAF, MEK, and AKT inhibitors for patients with BRAF‐mutated cancers
Glavas et al. Effects of Postoperative Wound Infiltration Analgesia with Bupivacaine or Diclofenac on Long-Term Outcomes in Patients After Breast Cancer Surgery
Bakker et al. an, Stuurman, RE, Borghans, LG
Kum β-adrenergic receptor-dependent and-independent effects of propranolol in infantile hemangioma
TW202302109A (zh) 認知損傷之治療
WO2022208499A1 (en) Novel sulfonamide series of qr2 inhibitors to tackle oxidative stress and cognitive decline

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20151223

Termination date: 20190423