CN103461126A - 一种榈木的快速繁殖方法 - Google Patents

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杨存
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Abstract

本发明公开了一种榈木的快速繁殖方法，包括无菌芽的获得，丛生芽的诱导和四倍体的诱导，丛生芽的增殖，生根诱导，炼苗移栽。本发明方法建立了榈木的快速微繁体系，可以在短期内培育大量的榈木幼苗，且茎叶粗大，并用于大田生产。

Description

一种榈木的快速繁殖方法
技术领域
本发明涉及榈木组织培养的快繁方法，属于植物技术领域。
背景技术
榈木，（O.mollis Dumm；Fodorovia henryi（Prain）Yakov.）豆科，又名：花梨木，青皮树、青豆风柴、青龙捆地、相思树等，生于海拔100-1300m的山坡、溪谷两旁杂木林内，分布于陕西、江苏、安徽、浙江、江西、福建、湖北、湖南、广东、广西、四川、贵州、云南等地。是一种重要的药用植物，根皮茎叶均可药用，可用于祛风除湿；活血破瘀；解毒消肿。主要功能主治：风湿性关节炎；腰肌劳损；产后瘀血腹痛；赤白漏下；跌打损伤；骨折；感冒；毒蛇咬伤；无名肿毒。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种钩吻的组培微繁殖方法，由该方法所制备得到的榈木幼苗茎干粗壮，成活率高，可控性好，可以规模化的进行生产。
本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的：
将榈木茎段用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉侵泡三分钟，流水冲洗1h，超净工作台上70%酒精处理30s，氯化汞消毒处理12min，无菌水冲洗4-5次，然后用无菌的滤纸吸去茎段表面的水分，接种到丛芽诱导培养基WPM+KT 0.3mg/L+IAA 0.2mg/L+秋水仙素中进行丛生芽诱导，所得的榈木丛生芽接种到WPM+GA33mg/L+TDZ0.2mg/L+NAA 0.2mg/L+1g/L活性炭培养基中进行丛生芽增殖培养，继代培养3代，所得的榈木丛生芽接种在WPM+NAA0.1mg/L +2mg/LIBA+40mg/LB9培养基中进行生根诱导，组培幼苗长约5cm时，首先在培养室内，掀开封口膜，敞口放置一周，然后移栽入灭菌过的附加少量草炭的疏松肥沃土中，装盆，昼夜光照，温度25℃，30天后移栽入室外。
采用本发明培养出来的试管苗茎干粗壮，根系发达，成活率达95%，周期短，操作可控，可进行工业扩大化生产。
下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
实施例1
将榈木茎段用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉侵泡三分钟，流水冲洗1h，超净工作台上70%酒精处理30s，氯化汞消毒处理12min，无菌水冲洗4-5次，然后用无菌的滤纸吸去茎段表面的水分，接种到丛芽诱导培养基WPM+KT0.2mg/L+IAA0.1mg/L+秋水仙素中进行丛生芽诱导，所得的榈木丛生芽接种到WPM+GA33mg/L+TDZ0.1mg/L+NAA0.1mg/L+1g/L活性炭培养基中进行丛生芽增殖培养，继代培养3代，所得的榈木丛生芽接种在WPM+NAA0.1mg/L +2mg/LIBA+40mg/LB9培养基中进行生根诱导，组培幼苗长约5cm时进行室内驯化炼苗，室外移栽，成活率达87%。
实施例2
将榈木茎段用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉侵泡三分钟，流水冲洗1h，超净工作台上70%酒精处理30s，氯化汞消毒处理12min，无菌水冲洗4-5次，然后用无菌的滤纸吸去茎段表面的水分，接种到丛芽诱导培养基WPM+KT0.4mg/L+IAA0.2mg/L+秋水仙素中进行丛生芽诱导，所得的榈木丛生芽接种到WPM+GA33mg/L+TDZ0.2mg/L+NAA0.3mg/L+1g/L活性炭培养基中进行丛生芽增殖培养，继代培养3代，所得的榈木丛生芽接种在WPM+NAA0.1mg/L +2mg/LIBA+40mg/LB9培养基中进行生根诱导，组培幼苗长约5cm时进行室内驯化炼苗，室外移栽，成活率达90%。
实施例3
将榈木茎段用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉侵泡三分钟，流水冲洗1h，超净工作台上70%酒精处理30s，氯化汞消毒处理12min，无菌水冲洗4-5次，然后用无菌的滤纸吸去茎段表面的水分，接种到丛芽诱导培养基WPM+KT 0.3mg/L+IAA0.1mg/L+秋水仙素中进行丛生芽诱导，所得的榈木丛生芽接种到WPM+GA33mg/L+TDZ0.1mg/L+NAA0.3mg/L+1g/L活性炭培养基中进行丛生芽增殖培养，继代培养3代，所得的榈木丛生芽接种在WPM+NAA0.1mg/L +2mg/LIBA+40mg/LB9培养基中进行生根诱导，组培幼苗长约5cm时进行室内驯化炼苗，室外移栽，成活率达92%。
实施例4
将榈木茎段用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉侵泡三分钟，流水冲洗1h，超净工作台上70%酒精处理30s，氯化汞消毒处理12min，无菌水冲洗4-5次，然后用无菌的滤纸吸去茎段表面的水分，接种到丛芽诱导培养基WPM+KT0.4mg/L+IAA0.1mg/L+秋水仙素中进行丛生芽诱导，所得的榈木丛生芽接种到WPM+GA33mg/L+TDZ0.2mg/L+NAA 0.1mg/L+1g/L活性炭培养基中进行丛生芽增殖培养，继代培养3代，所得的榈木丛生芽接种在WPM+NAA0.1mg/L +2mg/LIBA+40mg/LB9培养基中进行生根诱导，组培幼苗长约5cm时进行室内驯化炼苗，室外移栽，成活率达93%。

Claims (5)

1.一种榈木的快速繁殖方法，包括无菌芽的获得，丛生芽的诱导和四倍体的诱导，丛生芽的增殖，生根诱导，炼苗移栽，其主要步骤如下：
（1）按照常规植物组织培养的消毒方法对榈木带芽茎段进行消毒处理；
（2）将步骤（1）所获得的榈木带芽茎段接种到丛芽诱导培养基WPM+KT 0.2-0.4mg/L+IAA 0.1-0.2mg/L+秋水仙素中进行丛生芽诱导；
（3）将步骤（2）所得的榈木丛生芽接种到WPM+GA33mg/L+TDZ0.1-0.2mg/L+NAA 0.1-0.3mg/L+1g/L活性炭培养基中进行丛生芽增殖培养，继代培养3代；
（4）将步骤（3）所得的榈木丛生芽接种在下述培养基中进行生根诱导： WPM+NAA0.1mg/L +2mg/LIBA+40mg/LB9；
（5）将步骤（4）生根后大约5cm的榈木试管苗进行炼苗培养，进而进行大田种植。
2.按照权利要求1所述的一种榈木的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1）中所述无菌的榈木带芽茎段按下列消毒方法得到：将榈木茎段用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉侵泡三分钟，流水冲洗1h，超净工作台上70%酒精处理30s，氯化汞消毒处理12min，无菌水冲洗4-5次，然后用无菌的滤纸吸去茎段表面的水分。
3.按照权利要求1所述的一种榈木的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（3）中加入适量的GA3对不定芽的生长具有一定的促进作用，加入适量的活性炭既可以防止玻璃化现象，又可以防止褐化现象的发生。
4.按照权利要求1所述的一种榈木的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（4）中榈木生根诱导加入了适量的B9，可以使小苗叶色深绿，根发育粗壮。
5.按照权利要求1所述的一种榈木的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（5）中对榈木进行炼苗培养中，首先在培养室内，掀开封口膜，敞口放置一周，然后移栽入灭菌过的附加少量草炭的疏松肥沃土中，装盆，昼夜光照，温度25℃，30天后移栽入室外。
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