CN103409287A - 一种利用北虫草培养残基发酵制酒的方法 - Google Patents
一种利用北虫草培养残基发酵制酒的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种利用北虫草培养残基发酵制酒的方法,步骤如下:将北虫草培养残基加水浸泡后,加入α-淀粉酶、糖化酶糖化,然后加入酵母发酵,期间添加蔗糖,前酵5-7天结束,控制最高温度不超过33度,得前酵后酒液,后酵,后酵完成后,压榨分离酒液,调整酒度为体积百分数为10%,于80-85度加热处理10-15min,即得利用北虫草培养残基制备的发酵酒。本发明方法制得的发酵酒清澈透明、味甘醇香、棉柔爽口,各项指标符合酒类的相关标准,实现了资源的重复利用,避免了资源的浪费,节约了企业的生产成本,提高了企业的经济效益,增加了养殖户的收入。
Description
技术领域
本发明属于酿酒技术领域,尤其是一种利用北虫草培养残基发酵制酒的方法。
背景技术
蛹虫草[Cordyceps militaris(LexFr.)Link],又名京都蛹虫草、北冬虫夏草、北虫草、蛹草、东北虫草,是药用食用真菌,属于子囊菌纲、肉座目、麦角菌科、虫草属,其食用和药用价值可与传统的冬虫夏草媲美,是野生冬虫夏草最理想的替代品。
目前蛹虫草的人工培植技术主要有液体发酵方式和以大米为基质的固体培养方式等,因蛹虫草固体培养方式所需投资较小、简便易行,目前已在国内许多地区得到应用。同时国内对于蛹虫草液体培养过程中,虫草多糖与虫草素等成份的提取也已进行了较深入的研究,但对于固体培养过程中的附属产物-富含菌丝体的固体培养残基,子实体采收后,培养残基中仍含有大量的菌丝体和营养成分,目前还没有对其进行系统地开发利用,仍当作废物弃掉,造成虫草资源的极大浪费。
通过检索,发现如下一篇与本发明专利申请相关的专利公开文献:
北虫草培养基酿制的虫草保健酒的制备方法(CN102888320A),涉及一种北虫草培养基酿制的虫草保健酒的制备方法,属于保健酒的酿造领域,其特征在于以下步骤:将北虫草培养基破碎,加入稻壳,搅拌均匀;上蒸锅蒸,蒸完后,出料;将上述物料加入酒曲,其中酒曲为糖化酶和酵母,先将糖化酶溶,加入葡糖糖,静置,加入酵母,摇匀并活化,再加入凉水,摇匀搅拌后,将其均匀撒入上述蒸料中;然后进酒池,压死,密封,上面覆盖稻壳,自然发酵,出池,经蒸馏提纯后,制得原酒,加入纯净水,调节酒精度数,放入纳米级北虫草粉,制得本产品。制得的保健酒清澈透明,味甘醇香,棉柔爽口,因其由虫草培养基酿制,它即含有大量的虫草的营养成分,又含有纯粮酒的营养风味,属于优良的保健酒。
通过对比,本发明专利申请与上述专利公开文献存在本质的不同。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处,提供一种有效利用北虫草培养基残基、成本低廉、方法简单、降低了生产成本,提高了企业的效益的利用北虫草培养残基发酵制酒的方法。
本发明实现目的的技术方案是:
一种利用北虫草培养残基发酵制酒的方法,其特征在于:步骤如下:
⑴北虫草培养残基的液化、糖化
将粉碎后北虫草培养残基按料水质量比1:5~7的比例加水室温浸泡25~35min后,加入5~15U/gα-淀粉酶于85~95℃水浴5~15min后,降温到55~65℃后,加入250~350U/g糖化酶于55~65℃水浴糖化0.5~1.5h,糖化结束后过滤冷却至室温,得糖化后北虫草培养残基液;
⑵制酒发酵
将糖化后北虫草培养残基液接入活化好的安琪黄酒高活性干酵母,接种量为4.5~5.5×106/(mL醪液),在20~30度进行发酵,期间按照计算的加糖量分两次添加蔗糖,每次添加量为:(100*希望酒度-潜在酒度)*17*糖化液体积/2,前酵5-7天结束,控制最高温度不超过33度,得前酵后酒液;
⑶后酵:
分离前酵后酒液得液体,进入后酵,后酵温度15-20度,时间25~35天,后酵完成后,压榨分离酒液,调整酒度为10±3%,于80-85度加热处理10-15min,即得利用北虫草培养残基制备的发酵酒。
而且,所述步骤⑴中糖化酶为250~350U/g。
而且,所述安琪黄酒高活性干酵母的接种量为5×106/(mL醪液)。
而且,所述后酵温度为20度。
本发明的优点和有益效果为:
本发明利用北虫草培养残基发酵制酒的方法制得的发酵酒清澈透明、味甘醇香、棉柔爽口,各项指标符合酒类的相关标准,因其由北虫草培养残基酿制,它即含有大量的冬虫草的营养成分,又含有纯粮酒的营养风味,属于优良的酒类;同时还解决了大量的冬虫草培养基残基的浪费问题,实现了资源的重复利用,避免了资源的浪费,节约了企业的生产成本,提高了企业的经济效益,增加了养殖户的收入。
附图说明
图1为本发明所使用的北虫草培养残基中的虫草素和腺苷的测定结果图;其中,峰1:腺苷,出峰时间:5.635min;峰2:虫草素,出峰时间:6.510min;
图2为本发明中虫草酸标准曲线图。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步详述,以下实施例只是描述性的,不是限定性的,不能以此限定本发明的保护范围。
如无特殊说明,本发明中所使用的试剂为常规试剂;如无特殊说明,所使用的方法为常规方法。
一、本发明中所使用的北虫草培养残基中主要成分的测定结果见表1:
表1北虫草培养残基中主要成分的含量表
成分 | 测定方法 | 含量(%) |
淀粉 | 斐林氏法 | 53.4% |
脂肪 | 索氏抽提法 | 1.39% |
蛋白质 | 凯氏定氮法 | 15.35% |
灰分 | 高温灼烧 | 1.87% |
还原糖 | 斐林氏法 | 2.16% |
上述北虫草培养残基中主要成分的含量的测定方法如下:
1、淀粉的测定:斐林氏法
淀粉经酸水解生成葡萄糖,用斐林氏法直接测定。
2、蛋白质的测定:凯氏定氮法
原理:利用硫酸及催化剂与试样一同加热消化,使蛋白质分解,其中C、H形成CO2及H2O逸出,而氮以氨的形式与硫酸作用形成硫酸铵留在酸液中。将消化液碱化,蒸馏,使氨游离,随水蒸气蒸出,被硼酸吸收。用盐酸标准液滴定所生成的四硼酸铵,从消耗的盐酸标准液的量计算出总氮量。
3、脂肪的测定:索氏抽提法
原理:将试样置于索氏脂肪抽提器中与乙醚接触,抽提一定时间,再驱逐乙醚,剩下的物质烘干,称重即得粗脂肪含量。
4、灰分的测定
原理:试样经高温灼烧后所残留的无机物质即为灰分。
二、本发明中所使用的北虫草培养残基中功能成分的测定
1、虫草素和腺苷(HPLC法)
(1)乙腈为色谱纯、甲醇为色谱纯、纯净水、虫草素标准品、腺苷标准品;
(2)色谱条件:
色谱柱:YMC-PackODS-A色谱柱(250×4.6mm,5μm),流动相:乙腈和水(体积比为9:91),流速:0.8ml/min,柱温:40℃,进样量5μl,使用紫外检测器,检测波长:258nm。
(3)虫草素、腺苷标准品溶液的制备:
用分析天平精密称取虫草素20.6mg和腺苷10.0mg标准品,置于容量瓶中,用甲醇定容至50ml,配成浓度分别为412mg/L和200mg/L的虫草素和腺苷标品储备液。
分别取不同体积的各标品储备液用甲醇配成不同浓度梯度的虫草素和腺苷的混合标液,见表1,在上述色谱条件下进样分析。以各物质的浓度为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线。
分别吸取如表1中对应的虫草素和腺苷储备液,用甲醇定容至10mL,配成不同浓度梯度的标准溶液。
表1标品浓度表
上述条件下,本发明中所使用的北虫草培养残基中的虫草素和腺苷的测定结果见图1。从图1中可以看出,在上述色谱条件下虫草素和腺苷能较好的分开。
2、虫草酸(比色法)
(1)分别配置不同浓度的虫草酸标液10mg/L、20mg/L、30mg/L、40mg/L、50mg/L,按下述测定方法测定吸光度:
取待测液1mL至试管中,加1mL高碘酸钠溶液(0.015mol/L),混匀,室温反应10min;加入2mL0.1%的L-鼠李糖以除去过多的高碘酸钠,震荡混匀后加4mL新配制的Nash试剂53℃水浴15min,使其呈色之后快速冷却至室温,用分光光度计在412nm波长处,以蒸馏水代替待测样品液,用同样方法操作作为对照。
(2)冬虫草培养残基中虫草酸的测定:
称取北虫草培养残基4g,加一定体积蒸馏水80ml,沸水浴30min,过滤,洗残渣3次,将滤液、洗液并入100ml容量瓶中定容至刻度后按照以上方法测定,测得北虫草培养残基中虫草酸的含量为12-13mg/(g培养基)。
由以上结果可见北虫草培养残基中的主要成分及功能成分的含量较高,可以应用于下一步的发酵制酒。
三、发酵制酒工艺
实施例1
一种利用北虫草培养残基发酵制酒的方法,步骤如下:
⑴北虫草培养残基的液化、糖化
将粉碎后北虫草培养残基按料水质量比1:6加水室温浸泡30min后,加入10U/gα-淀粉酶于90℃水浴10min后,降温到约60℃后加入300U/g糖化酶于60℃水浴糖化1h,糖化结束后过滤冷却至室温,得糖化后北虫草培养残基液。
⑵制酒发酵及后酵条件
冷却后将糖化后北虫草培养残基液接入提前活化好的安琪黄酒高活性干酵母,接种量在5×106/(mL醪液)水平较好,在25度进行发酵,期间按照计算的加糖量分两次添加蔗糖(按希望酒度10%,分两次等量添加蔗糖,每次添加量为(10-潜在酒度)*17*糖化液体积/2),前酵约5-7天结束.;控制最高品温不超过33度,得前酵后酒液;
⑶分离前酵后酒液得液体,进入后酵,后酵温度15-20度(以较低为好,不应超过20度),时间30天左右。后酵完成后,压榨分离酒液,调整酒度为10%。80-85度加热处理10-15min,即得利用北虫草培养残基制备的发酵酒。
相关发酵酒的检测结果如下:
1、清汁与带渣发酵的比较
清汁的制备如前所述,发酵5-6天前酵结束。
带渣发酵是糖化完成后,不做分离,冷却后即加入酵母发酵约需要7-8天。
对于带渣发酵和清汁发酵,黄酒酵母接种量为5×106/(mL醪液)时,两种发酵方式的出酒率都较高。不同酵母接种量,清汁发酵普遍比带渣发酵虫草素含量高,而且清汁发酵前酵时间比带渣发酵短2天左右。
2、关于发酵酒产品的标准问题
通过查询,产品标准可参考《饮用酒国家标准中》:
4.1.4.3.2特型黄酒
或者
4.1.6其它发酵酒
现行黄酒标准有:
黄酒标准
绍兴酒标准
清爽型黄酒标准
经检测,本发明利用北虫草培养残基发酵制酒的方法所制备得到的酒符合饮用酒的相关标准,符合如下《饮用酒国家标准中》:
4.1.4.3.2特型黄酒
或者
4.1.6其它发酵酒
现行黄酒标准有:
黄酒标准
绍兴酒标准
清爽型黄酒标准。
实施例2
一种利用北虫草培养残基发酵制酒的方法,步骤如下:
⑴北虫草培养残基的液化、糖化
将粉碎后北虫草培养残基按料水质量比1:5的比例加水室温浸泡25min后,加入5U/gα-淀粉酶于85℃水浴5min后,降温到55℃后加入250U/g糖化酶于55℃水浴糖化0.5h,糖化结束后过滤冷却至室温,得糖化后北虫草培养残基液;
⑵制酒发酵及后酵条件
将糖化后北虫草培养残基液接入活化好的安琪黄酒高活性干酵母,接种量为4.5×106/(mL醪液),在25度进行发酵,期间按照计算的加糖量分两次添加蔗糖(按希望酒度10%,分两次等量添加蔗糖,每次添加量为(10-潜在酒度)*17*糖化液体积/2),前酵约5天结束.;控制最高品温不超过33度,得前酵后酒液;
⑶分离前酵后酒液得液体,后酵温度15度(以较低为好,不应超过20度),时间25天,后酵完成后,压榨分离酒液,调整酒度为10%,于80度加热处理10-15min,即得利用北虫草培养残基制备的发酵酒。
相关检测结果同实施例1。
实施例3
一种利用北虫草培养残基发酵制酒的方法,步骤如下:
⑴北虫草培养残基的液化、糖化
将粉碎后北虫草培养残基按料水质量比1:7的比例加水室温浸泡35min后,加入15U/gα-淀粉酶于95℃水浴15min后,降温到65℃后加入350U/g糖化酶于65℃水浴糖化1.5h,糖化结束后过滤冷却至室温,得糖化后北虫草培养残基液;
⑵制酒发酵及后酵条件
将糖化后北虫草培养残基液接入活化好的安琪黄酒高活性干酵母,接种量为5×106/(mL醪液),在25度进行发酵,期间按照计算的加糖量分两次添加蔗糖(按希望酒度10%,分两次等量添加蔗糖,每次添加量为(10-潜在酒度)*17*糖化液体积/2),前酵约5-7天结束.;控制最高品温不超过33度,得前酵后酒液;
⑶分离前酵后酒液得液体,进入后酵,后酵温度20度(以较低为好,不应超过20度),时间35天,后酵完成后,压榨分离酒液,调整酒度为10%,于85度加热处理10-15min,即得利用北虫草培养残基制备的发酵酒。
相关检测结果同实施例1。
Claims (4)
1.一种利用北虫草培养残基发酵制酒的方法,其特征在于:步骤如下:
⑴北虫草培养残基的液化、糖化
将粉碎后北虫草培养残基按料水质量比1:5~7的比例加水室温浸泡25~35min后,加入5~15U/gα-淀粉酶于85~95℃水浴5~15min后,降温到55~65℃后,加入250~350U/g糖化酶于55~65℃水浴糖化0.5~1.5h,糖化结束后过滤冷却至室温,得糖化后北虫草培养残基液;
⑵制酒发酵
将糖化后北虫草培养残基液接入活化好的安琪黄酒高活性干酵母,接种量为4.5~5.5×106/(mL醪液),在20~30度进行发酵,期间按照计算的加糖量分两次添加蔗糖,每次添加量为:(100*希望酒度-潜在酒度)*17*糖化液体积/2,前酵5-7天结束,控制最高温度不超过33度,得前酵后酒液;
⑶后酵:
分离前酵后酒液得液体,进入后酵,后酵温度15-20度,时间25~35天,后酵完成后,压榨分离酒液,调整酒度为10±3%,于80-85度加热处理10-15min,即得利用北虫草培养残基制备的发酵酒。
2.根据权利要求1所述的利用北虫草培养残基发酵制酒的方法,其特征在于:所述步骤⑴中糖化酶为250~350U/g。
3.根据权利要求1所述的利用北虫草培养残基发酵制酒的方法,其特征在于:所述安琪黄酒高活性干酵母的接种量为5×106/(mL醪液)。
4.根据权利要求1所述的利用北虫草培养残基发酵制酒的方法,其特征在于:所述后酵温度为20度。
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