CN103340911A

CN103340911A - 抗视觉疲劳保健品

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Publication number: CN103340911A
Application number: CN2013102383494A
Authority: CN
Inventors: 杜琪珍; 何敏菲
Original assignee: Zhejiang Gongshang University
Current assignee: Zhejiang Gongshang University
Priority date: 2013-06-14
Filing date: 2013-06-14
Publication date: 2013-10-09
Anticipated expiration: 2033-06-14
Also published as: CN103340911B

Abstract

本发明公开了一种抗视觉疲劳保健品，其由以下重量含量的成分组成：茶氨酸30%，花色苷提取物69%，维生素C 1%。本发明还公开了利用上述抗视觉疲劳保健品制备而得的抗视觉疲劳保健胶囊，将1000g的抗视觉疲劳保健品在室温下用5L水溶解，并搅拌混合均匀，然后喷雾干燥成粉末，再用胶囊灌装机灌制成200mg/粒的胶囊。本发明的特点是，不含人工化学防腐剂、对身体无任何毒副作用，可以有效预防和辅助治疗青光眼、夜盲症、老年黄斑变性（AMD）及白内障等视网膜病变。

Description

抗视觉疲劳保健品

技术领域

本发明涉及一种抗视觉疲劳保健品，其可以抵抗视力疲劳，对于视网膜病变有一定的预防及辅助治疗作用。

背景技术

当今社会，人们工作压力与日俱增，生活节奏逐渐变快，而生活环境却日益恶劣。眼睛疾病如青光眼、夜盲症、老年黄斑变性（AMD）及白内障等发病率有着明显的上升趋势。

花色苷对于眼睛疾病的预防与治疗作用主要表现在：1）促进视网膜视紫红质的再生功能，从而增强人眼的视力，提高人眼视觉对明暗的敏锐程度，加强对黑暗环境的快速适应能力及提高暗视力，预防夜盲症。2）对视网膜上的细胞损伤有预防及修复的作用，如糖尿病导致的视网膜损伤，自由基导致的视网膜细胞损伤，对视网膜神经节细胞损伤的保护作用等。3）花色苷具有良好的抗氧化作用，可以清除由于视网膜细胞自身代谢及外界刺激所产生的有害细胞健康生长的自由基。美国生产的蓝莓提取物软胶囊“营养加”(Finefull)和深圳市康倍健生物科技有限公司生产的越橘（明目精）软胶囊，都声称具有缓解眼睛疲劳，提高视力的作用。

茶氨酸的生理功效：1）茶氨酸能影响脑内神经传达物质的变化，增强记忆力2）茶氨酸有镇静作用，可能预防神经失调症、失眠症、经期综合症等3）茶氨酸能保护神经细胞可能用于对脑栓塞、脑出血、脑中风、脑缺血以及老年痴呆等疾病的防治。但茶氨酸的抗视觉疲劳作用至今未有报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种能抵抗视力疲劳的抗视觉疲劳保健品。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种抗视觉疲劳保健品，其由以下重量含量的成分组成：

茶氨酸 30%，

花色苷提取物 69%，

维生素C 1%。

作为本发明的抗视觉疲劳保健品的改进：茶氨酸为茶叶中提取的天然茶氨酸，纯度为90-99%；该%为质量%。

作为本发明的抗视觉疲劳保健品的进一步改进：花色苷提取物中花色苷的质量含量为25-30%；

花色苷提取物为从黑米、越橘、桑葚、蓝莓或杨梅中提取的花色苷提取物。

本发明还同时提供了一种利用上述抗视觉疲劳保健品制备而得的抗视觉疲劳保健胶囊，将1000g的抗视觉疲劳保健品在室温（10~25℃）下用5L水溶解，并搅拌混合均匀，然后喷雾（50~60℃）干燥成粉末（能过100目的筛），再用胶囊灌装机灌制成200mg/粒的胶囊。

本发明利用从茶叶中提取的茶氨酸和从黑米以及越橘、桑葚、蓝莓、杨梅等水果中提取的花色苷提取物为主要的配伍原料，添加少量的维生素C作为花色苷稳定剂，制备成一种抗视觉疲劳保健品，该抗视觉疲劳保健品例如能以胶囊的形式存在。

在本发明中，茶氨酸为茶叶中提取的天然茶氨酸酸，例如可购自浙江衢州卓尔化学有限公司生产的食品级茶氨酸（纯度为90%）。

在本发明中，

当花色苷提取物为从黑米中提取的花色苷（亦称花青素）提取物时，例如可购自吉林市新星天然植物开发有限责任公司生产的黑米花青素（黑米花青素-30），该花色苷提取物的花色苷的质量含量为25%。

当花色苷提取物为从越橘中提取的花色苷提取物时，例如可购自陕西慈缘生物技术有限公司生产的越橘花色苷（越橘花色苷-30），花色苷提取物的花色苷的质量含量为28%。

当花色苷提取物为从桑葚中提取的花色苷提取物时，例如可购吉林省隆泽生物工程有限责任公司公司生产的桑葚提取物（桑葚花色苷-30），该花色苷提取物的花色苷的质量含量为26%。

当花色苷提取物为从蓝莓中提取的花色苷提取物时，例如可购自大兴安岭林格贝有机食品有限公司生产的蓝莓花青素（蓝莓花青素-30），该花色苷提取物的花色苷的质量含量为30%。

当花色苷提取物为从杨梅中提取的花色苷提取物时，例如可购自杭州沃腾膜工程有限公司生产的杨梅花色苷-25，该花色苷提取物的花色苷的质量含量为25%。

本发明的抗视觉疲劳保健品（胶囊状）的制备方法为：将抗视觉疲劳保健品（即茶氨酸、花色苷提取物、维生素C按照配比混合后而得）1000g在室温下用5L水溶解，并搅拌混合均匀，然后喷雾（50~60℃）干燥成粉末（能过100目的筛），再用胶囊灌装机灌制成200mg/粒的胶囊。此剂量方便成年人（每日2次，每次2粒）和儿童（每日2次，每次1粒）服用。实际食用时，成人每日早晚各服用2粒胶囊，儿童每日早晚各服用1粒胶囊。

本发明的抗视觉疲劳保健品（胶囊状）在室温放置9个月后都非常稳定(见图1)，内含茶氨酸、花色苷均没有显著改变。本发明制备的胶囊抗视觉疲劳效果良好，测试结果见图2。

发明人在大量实验的基础上得知：将茶氨酸与花色苷以本发明所述的比例关系配伍，并添加本发明所述比例关系的维生素C，能有效地防护氧化应激对视网膜神经节细胞的损伤、促进视神经节细胞的生长。因此，本发明的抗视觉疲劳保健品是一种极具开发潜力的抗视觉疲劳保健制品，其能抵抗视力疲劳，对于视网膜病变有一定的预防及辅助治疗作用。我们的研究表明，将茶氨酸与花色苷提取物以本发明所述的比例配伍，具有比花色苷更强的抗视觉疲劳作用。

综上所述，本发明的特点是，不含人工化学防腐剂、对身体无任何毒副作用，可以有效预防和辅助治疗青光眼、夜盲症、老年黄斑变性（AMD）及白内障等视网膜病变。

附图说明

下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。

图1为胶囊（实施例3所得）在室温放置3个月~9个月后，茶氨酸、花色苷的变化对比图。

图2 为不同来源花色苷提取物制备的胶囊抗视觉疲劳的效果对比图。

具体实施方式

以下结合实施例亦在进一步说明本发明，而非限制本发明。

实施例1、一种抗视觉疲劳保健胶囊，

配方：

茶氨酸(纯度90%)：30%

越橘花色苷提取物（花色苷含量28%）：69%

维生素C(纯度99%)：1%。

制备方法:称取茶氨酸(纯度90%)300g、越橘花色苷提取物（花色苷含量28%）690g、维生素C(纯度99%)10g, 在室温下用5L水溶解，并搅拌混合均匀，然后喷雾（50~60℃）干燥成粉末（能过100目的筛），再用胶囊灌装机灌制成200mg/粒的胶囊约5000粒。

实施例2、一种抗视觉疲劳保健胶囊，

配方：

茶氨酸(纯度90%)：30%

桑葚花色苷提取物（花色苷含量26%）：69%

维生素C(纯度99%)：1%。

制备方法:等同于实施例1。

实施例3、一种抗视觉疲劳保健胶囊，

配方：

茶氨酸(纯度90%)：30%

蓝莓花色苷提取物（花色苷含量30%）：69%

维生素C(纯度99%)：1%

制备方法:等同于实施例1。

实施例4、一种抗视觉疲劳保健胶囊，

配方：

茶氨酸(纯度90%)：30%

黑米花色苷提取物（花色苷含量25%）：69%

维生素C(纯度99%)：1%

制备方法:等同于实施例1。

实施例5、一种抗视觉疲劳保健胶囊，

配方：

茶氨酸(纯度90%)：30%

黑米、蓝莓、桑葚花色苷提取物的混合物（花色苷含量27%）：69%

维生素C(纯度99%)：1%

制备方法:等同于实施例1。

实验1、实施例3抗视觉疲劳保健胶囊中茶氨酸和花色苷随时间的变化

将常温下不同保存时间的实施例3制备而得的抗视觉疲劳保健胶囊的茶氨酸和花色苷按如下方法进行测定，结果如图1所示。

茶氨酸含量测定参照Baptista等的方法。采用柱前然生化-HPLC法进行测定。27 mg OPA 用500 μL 无水乙醇溶解，添加到含25 μLb-巯基乙醇的4.5 mL 0.4 M硼酸盐缓冲液(pH 9.5)反应4 min。然后添加 100 μL 0.4 M磷酸氢钾(pH 4.0)终止反应. 5μL反应液用HPLC进行分析。HPLC条件：色谱柱Omnisphere C18，150×4.6mm，5μm；流速1 ml/min；柱温25℃，进样量10μL。流动相的溶剂系统：A相，50 mM醋酸钠+50 mM Na₂HPO₄ (pH 7.5) : 甲醇: 四氢呋喃 = 96 : 2 : 25(V/V/V)； B相，甲醇 : 水= 70 : 305(V/V)； B相梯度洗脱程序为：0~10min, 25 B%；10~30min, 25%~40%；30~40min, 40%~100%。检测波长为338nm。

花色苷含量用HPLC进行测定，分析方法参照Baj等的方法。色谱柱YMC-Pack ODS-AQ C18，150×4.6mm，3μm；流速0.8ml/min；柱温25℃，进样量10μL。流动相的溶剂系统：A相，无水甲酸:水=8.5:91.5(V/V)； B相，无水甲酸:甲醇:乙腈:水=8.5:25:25:91.5(V/V/V/V)； B相梯度洗脱程序为：0~8min, 7%~20%；8~30min, 20%~45%；30~40min, 45%~70%；40~45min, 70%~7%；45~50min , 7%。检测波长为280nm。花色苷总量为各种花色苷之和。

实验2 、视杆细胞视紫红质复原测定：

将实施例1~实施例5所得的抗视觉疲劳保健胶囊按照如下方法进行检测，其结果如图2（a）所示。

1.将250~300g牛蛙先放置于暗处，暗适应3h，猝死，摘除眼球，取视网膜。将视网膜置于Ringer’s缓冲液中，用注射器片段化，尼龙网过滤，10000g离心20min，上层为rod细胞。再加等体积缓冲液，600g离心12s，3,000g离心4s，用葡萄糖酸钾缓冲液冲洗两遍，得到视紫红质。将其溶于葡萄糖酸钾缓冲液冲，-80℃储藏备用。以此作视紫红质作为外视紫红质复原实验的对照品。

2.将未进行暗适应处理的250~300g牛蛙猝死，摘除眼球，取视网膜。将视网膜置于Ringer’s缓冲液中，用注射器片段化，尼龙网过滤，10000g离心20min，上层为rod细胞。再加等体积缓冲液，600g离心12s，3000g离心4s，用葡萄糖酸钾缓冲液冲洗两遍，得到游离视蛋白。将其溶于葡萄糖酸钾缓冲液冲，-80℃储藏备用。

3.购买全反视黄醛，以4mg/ml的浓度溶于乙腈中，用436nm的光源距样15cm处照射2min，得到含11-顺式-视黄醛的混合液。再以逆流色谱法分离得到11-顺式-视黄醛。

4.取适量游离视蛋白，与待测的样品(实施例1~实施例5所得的抗视觉疲劳保健胶囊中的粉末配制的溶液)混合，在520nm处测吸光值，得出视紫红质的含量，观察体外视紫红质复原实验。

实验3、 H₂O₂损伤视网膜神经节细胞增殖测定：

将实施例1~实施例5制备所得的抗视觉疲劳保健胶囊按照如下方法进行检测， H₂O₂受损视网膜神经节细胞增殖的结果如图2（b）所示。

1、培养视网膜神经节细胞（RGC-5），在倒置显微镜下观察细胞数目，记录起始数；用H₂O₂（20μM）对细胞进行伤害，在倒置显微镜下观察细胞数目，当细胞成活率在65%时，添加样品进行细胞增殖测试；

2. 将测试样品（实施例1~实施例5所得的抗视觉疲劳保健胶囊中的粉末配制的溶液）配制成10μg/ml的浓度，添加15μl到细胞培养液中，继续培养5小时，在倒置显微镜下观察细胞数目。

3. 根据（1）、（2）步骤观察的细胞数计算样品组和对照组的细胞成活率。

实验4、视网膜神经节细胞生长增殖测定：

将实施例1~实施例5制备所得的抗视觉疲劳保健胶囊按照如下方法进行检测，视网膜神经节细胞生长增殖的结果如图2（c）所示。

1. 培养视网膜神经节细胞（RGC-5），在倒置显微镜下观察细胞数目，记录起始数；在倒置显微镜下观察细胞数目，添加样品进行细胞增殖测试；

2. 将测试样品（实施例1~实施例5所得的抗视觉疲劳保健胶囊中的粉末配制的溶液）配制成1mg/ml的浓度，添加到细胞培养液中（5μl/ml），继续培养5小时，在倒置显微镜下观察细胞数目。

上文中涉及的参考文献如下：

[1] J Baptista, E Lima, L Paiva, AL Andrade, MG Alves. Comparison of Azorean tea theanine to teas fromother origins by HPLC/DAD/FD. Effect of fermentation, drying temperature, drying time and shoot maturity,Food Chemistry 132 (2012) 2181-2187.（茶氨酸的比较，采用高效液相色谱法测定）；

[2] J Baj, EBombardelli, B Gabetta. Qualitative andquantitative evaluation of vaccinium myrtillus Anthocyanin high resolution gas chromatography and high-perfomance liquid chromatograpy. Journal of Molecular Biology, 279 (1983) 365- 372.（定性和定量评价，花青素高分辨率，分子生物学杂志）；

[3] H Matsumoto, Y Nakamura, S Tachibanaki, S Kawamura, M Hirayama. Stimulatory Effect of Cyanidin 3-Glycosides on the Regeneration of Rhodopsin, J. Agric. Food Chem. 2003, 51, 3560-3563.（刺激效应在花青素，食品化学）；

[4] M He, W Du, Q Du, Y Zhang, B Li, C Ke, Y Ye, Q Du. Isolation of the retinal isomers from theisomerization of all-trans-retinal by flash countercurrent chromatography, Journal of Chromatography A, 1271(2013) 67-70.（同分异构体的异构化的所有反式视网膜，逆流色谱法）；

[5] P Maher, A Hanneken. Flavonoids protect retinalganglion cells from ischemia in vitro, Experimental Eye Research 86 (2008) 366-374.（类黄酮保护视网膜神经节细胞，在体外缺血实验中的研究）。

实验5 、对比实验

本发明所述的胶囊产品的配方是在大量实验的基础上通过不同配比茶氨酸与花色苷等的配比试验优化得到。改变实施例3中的茶氨酸：花色苷提取物：维生素C的配比关系，从而相应的获得对比例1~对比例4。

表1是5例配比不同的胶囊按上述视杆细胞视紫红质复原实验、H₂O₂损伤视网膜神经节细胞增殖实验、视网膜神经节细胞生长增殖实验方法测定的结果，说明最优的配方为本发明所述的茶氨酸：花色苷提取物（花色苷含量30%）：维生素C = 30:69:1；本发明的方法能体现协同增效的作用。

表1 、不同成分配比抗视觉疲劳评价测定结果

最后，还需要指出的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。

Claims

1.抗视觉疲劳保健品，其特征是：由以下重量含量的成分组成：

茶氨酸 30%，

花色苷提取物 69%，

维生素C 1%。

2.根据权利要求1所述的抗视觉疲劳保健品，其特征是：所述茶氨酸为茶叶中提取的天然茶氨酸，纯度为90-99%；该%为质量%。

3.根据权利要求1或2所述的抗视觉疲劳保健品，其特征是：所述花色苷提取物中花色苷的质量含量为25-30%；

所述花色苷提取物为从黑米、越橘、桑葚、蓝莓或杨梅中提取的花色苷提取物。

4.利用如权利要求1或2所述的抗视觉疲劳保健品制备而得的抗视觉疲劳保健胶囊，其特征是：将1000g的抗视觉疲劳保健品在室温下用5L水溶解，并搅拌混合均匀，然后喷雾干燥成粉末，再用胶囊灌装机灌制成200mg/粒的胶囊。