CN109022133A - 一种沙棘籽油及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种沙棘籽油的制备方法，以及该方法制得的沙棘籽油在制备辅助治疗化学性肝损伤产品中的应用。该沙棘籽油的制备方法，包括如下步骤：沙棘籽低温干燥；微波辐射处理10～15分钟；用榨油机压榨得沙棘籽粗油；采用超临界设备，对沙棘籽粗油进行CO2超临界萃取，萃取后得到萃取物；萃取物经一级分离和二级分离后得到沙棘籽油。该方法较传统方法能耗低，工时少，环保无污染，且该方法制得的沙棘籽油经过动物试验证明，较服用相同剂量现有技术制备的沙棘籽油具有更加显著的辅助治疗化学性肝损伤的功效。

Description

一种沙棘籽油及其制备方法
技术领域
本发明属于沙棘籽深加工技术领域，具体涉及一种沙棘籽油的制备方法及其在辅助治疗化学性肝损伤方面的应用。
背景技术
沙棘籽为胡颓子科沙棘属植物沙棘(Hippophae rhamnoides L.)的干燥成熟种子。沙棘起源于中国的青藏高原，主要分布在我国西北和东北地区，能耐旱抗风沙，并可在盐碱地上生存。沙棘籽油是一种高附加值产物，富含多种生物活性物质，如维生素E、类胡萝卜素、不饱和脂肪酸、黄酮类、氨基酸及微量元素等，对抗衰老、抗肿瘤、抗辐射损伤、心脑血管系统、机体免疫等方面均具有明显的药理效应，是现代医学中的一种天然抗氧化剂和珍贵药用油，并广泛应用于食品、化妆品和医药保健领域。近几年针对沙棘籽或沙棘果对化学性肝损伤的辅助治疗效果的研究日渐增多，但其效果参差不齐，这与沙棘籽或沙棘果的加工处理有着非常密切的关系。
目前沙棘籽油的提取主要采用机械法、有机溶剂法以及超临界流体萃取法。机械压榨法压榨时间长、出油率低、杂质含量高、油品质差，且色泽较深；有机溶剂萃取法存在萃取时间长、效率不高，溶剂消耗量大，且易造成产物中溶剂残留等一系列的弊端；而超临界流体萃取法对仪器设备要求高，工艺流程复杂，专利申请号为201610456200.7的发明名称为“沙棘籽油及其制备方法”的专利申请，公开了一种采用超临界设备制备沙棘籽油的方法，专利申请号为201510874833.5的发明名称为“一种沙棘油的制备方法”，亦公开了一种超临界CO2萃取精制沙棘籽油的方法，但在功效试验研究中发现其辅助治疗化学性肝损伤的效果不太理想。如何优化沙棘籽油的超临界萃取工艺，从而使其具有更加明显的辅助治疗化学性肝损伤的功效，成为本领域技术人员亟待解决的技术问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新的沙棘籽油的制备工艺，所述的工艺制得的沙棘籽油具有更好的辅助治疗化学性肝损伤的效果。
本发明的另一目的是提供一种新工艺制得的沙棘籽油在制备辅助治疗化学性肝损伤产品中的应用。
为达到上述目的，本发明采用下列技术方案实现。
一种沙棘籽油的制备方法，其步骤如下：
(1)沙棘籽低温干燥；
(2)微波辐射处理；
(3)用榨油机压榨得沙棘籽粗油；
(4)采用超临界设备，对沙棘籽粗油进行CO2超临界萃取，萃取后得到萃取物；
(5)萃取物经一级分离和二级分离后得到沙棘籽油。
为使后续的超临界处理效率及最终产品的质量更高，对沙棘籽的前处理进行了反复大量的试验摸索，步骤(1)沙棘籽使用干燥设备，在35～45℃干燥2～3小时为佳。
微波辐射具有加热速度快、热效率高、对营养物质破坏少等优点，所以采用微波辐射对沙棘籽油进行热处理，试验发现在特定功率条件下微波辐射一定时间可以改变功效成分的溶出特性。发明人经过经验及多次的试验，步骤(2)在微波功率550～600W条件下辐射10～15分钟效果更佳。
步骤(3)采用传统的压榨法进行压榨。
对沙棘籽粗油使用超临界设备进行CO2萃取的关键参数是萃取温度以及萃取压力，发明人经过大量的试验摸索，发现步骤(4)将沙棘籽粗油在温度为36～37℃、压力为24～26MPa下，采用超临界设备，进行CO2萃取1.5～2.0h，生产效率最高，生产出的终产品沙棘籽油具有更好的辅助治疗化学性肝损伤的功效。
步骤(5)中一级分离的温度为36℃，一级分离压力为18MPa为佳；二级分离的温度为36℃，二级分离压力为12MPa为佳。
本发明的组合物与任何一种或一种以上药剂学上辅料如淀粉、糊精、乳糖、微晶纤维素、羟丙甲基纤维素、聚乙二醇、硬脂酸镁、微粉硅胶、木糖醇、乳糖醇、葡萄糖、甘氨酸、甘露醇、甘氨酸等混合制成的各种剂型，例如，可制成片剂、缓释片、滴丸、颗粒剂、胶囊剂、软胶囊剂、微粒剂。优选剂型为滴丸或软胶囊剂。
本发明所述工艺较专利申请号为201610456200.7的发明名称为“沙棘籽油及其制备方法”、专利申请号为201510874833.5的发明名称为“一种沙棘油的制备方法”的专利申请的技术方案制得的沙棘籽油，具有更好的辅助治疗化学性肝损伤的效果。
试验例
以下通过一些具体的实验数据进一步说明本发明的有益效果，本发明所有的实施例均能做出与此相近的实验效果，以下数据只是举例说明。
本发明按照中华人民共和国卫生部《保健食品检验与评价技术规范》中对化学性肝损伤有辅助保护功能评价方法相关规定进行实验，以四氯化碳致小鼠化学性肝损伤为模型，灌胃小鼠，研究本发明技术方案制得的沙棘籽油对化学性肝损伤的辅助保健功效，为其在制备辅助治疗化学性肝损伤的产品中的应用提供了可靠的依据。
1材料与方法
1.1沙棘籽：市购所得
1.2试剂及仪器
四氯化碳：北京化工厂；T6紫外分光光度计：新世纪；TGL-16G离心机：上海安亭科学仪器厂；AL204分析天平；谷丙转氨酶(ALT)测定试剂盒、谷草转氨酶(AST)测定试剂盒：中生北控生物技术有限公司；灌胃针，眼科镊子等。
1.3实验动物及分组
SPF级雄性成年KM小鼠70只(北京市维通利华实验动物技术有限公司)，每只体重18～22g。将小鼠随机分成7组，每组10只，即空白对照组、CCl4模型对照组、对照1组(CCl4+专利申请号201610456200.7的实施例1)、对照2组(CCl4+专利申请号201510874833.5的
实施例4)、试验1组(CCl4+本发明实施例1)、试验2组(CCl4+本发明实施例2)和试验3组(CCl4+本发明实施例3)。各组小鼠分笼饲养于温度为18～20℃，相对湿度为55％～60％的动物实验室内，每天自由饮水和采食，适应环境1周后用于实验。
1.4试验方法
根据经验及文献记载，拟定成人每日沙棘籽油摄入量为6g/天，成人平均体重以60kg计，将此剂量扩大10倍后作为动物实验剂量，则大鼠沙棘籽油的剂量为1.0g/kg体重；沙棘籽油以食用花生油稀释至所需浓度，灌胃给予动物(2ml/kg体重)，空白对照组给予等体积蒸馏水灌胃，模型对照组给予等体积食用花生油灌胃，每日1次，每周称重2次调整灌胃量。于实验第30天将各组动物隔夜禁食16h，CCl4模型对照组及对照1组、对照2组、试验1组、试验2组、试验3组分别1次灌胃给予CCl4(200mg/kg体重)，对照1组、对照2组、试验1组、试验2组、试验3组继续灌胃给予沙棘籽油至实验结束(与CCl4灌胃时间间隔6h)，空白对照组及CCl4模型对照组给予等量食用花生油。同时禁食，自由饮水，禁食24h后摘除小鼠眼球取血，常规制备血浆，用离心机3000r/min离心15min后分离血清，并测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性。
1.5检测指标
采用速率法以谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)测定试剂盒及紫外分光光度计测定血清中ALT和AST活性。
1.6数据处理
计量资料用均数±标准差表示，采用t检验进行统计分析。
2结果与分析
本研究采用经典的四氯化碳化学性肝损伤动物模型来研究，此模型能真实准确地模拟肝细胞受到损伤时细胞结构和功能的变化。主要作用机理是四氯化碳使细胞形成大量的自由基，并且引发过氧化链式反应。过量的自由基作用于细胞的遗传物质DNA，导致DNA断裂或与蛋白质相结合，影响遗传信息的传递。另一方面脂质过氧化物导致细胞膜流动性降低，使代谢过程整体紊乱，进而引发更大范围的肝损伤。
谷丙转氨酶和谷草转氨酶主要在肝细胞浆中，当肝细胞发生异常时，即进入血液，这时血清中两种转氨酶的活性明显升高。小鼠正常ALT均值是16～42U/L，正常肝内转氨酶含量约为血中的100倍，所以肝脏实质性损害时，只要有l％的肝细胞坏死，就可使血清活性增加1倍。因此，血清中ALT含量被作为肝损伤的敏感标志，其升高在一定程度上反应肝细胞损害和坏死的程度。
表1各试验组对CCl4肝损伤小鼠血清ALT和AST水平的影响
注：*与CCl4模型对照组相比，P＜0.05；**与CCl4模型对照组相比，P＜0.01
##与空白对照组相比，P＜0.01
从表1可以看出，给予CCl4 24h后，模型对照组小鼠血清ALT和AST水平均明显高于空白对照组，差异具有统计学意义(P＜0.01)，表明CCl4肝损伤模型成立。与CCl4模型对照组比较，对照1组、对照2组小鼠血清ALT和AST水平均有明显下降(P＜0.05)；而试验1组、试验2组、试验3组小鼠血清ALT和AST水平均有极其显著下降(P＜0.01)。
3结论
本试验研究针对以本发明技术方案制得的沙棘籽油，与现有技术中专利申请号为201610456200.7的发明名称为“沙棘籽油及其制备方法”中的技术方案制得的沙棘籽油、专利申请号为201510874833.5的发明名称为“一种沙棘油的制备方法”中的技术方案制得的沙棘籽油，按照卫生部《保健食品检验与评价技术规范》中对化学性肝损伤有辅助保护功能评价方法相关规定进行试验，以四氯化碳致小鼠化学性肝损伤为模型，灌胃小鼠，结果表明，现有技术中两种技术方案制得的沙棘籽油对化学性肝损伤具有显著地辅助保护功能，而本发明技术方案制得的沙棘籽油对化学性肝损伤具有更加显著地辅助保护功能，其效果优于现有技术方法制备的沙棘籽油。
具体实施方式
实施例1
使用干燥设备，将沙棘籽在35℃干燥3小时；在微波功率550W条件下辐射10分钟；采用传统的压榨法进行压榨得沙棘籽粗油；将沙棘籽粗油在温度为36℃、压力为24MPa下，采用超临界设备，进行CO2萃取1.5h；萃取物经一级分离和二级分离后得到沙棘籽油，其中一级分离的温度为36℃，压力为18MPa；二级分离的温度为36℃，压力为12MPa。
实施例2
使用干燥设备，将沙棘籽在45℃干燥2小时；在微波功率600W条件下辐射15分钟；采用传统的压榨法进行压榨得沙棘籽粗油；将沙棘籽粗油在温度为37℃、压力为26MPa下，采用超临界设备，进行CO2萃取2.0h；萃取物经一级分离和二级分离后得到沙棘籽油，其中一级分离的温度为36℃，压力为18MPa；二级分离的温度为36℃，压力为12MPa。
实施例3
使用干燥设备，将沙棘籽在40℃干燥2.5小时；在微波功率580W条件下辐射13分钟；采用传统的压榨法进行压榨得沙棘籽粗油；将沙棘籽粗油在温度为36℃、压力为25MPa下，采用超临界设备，进行CO2萃取1.5h；萃取物经一级分离和二级分离后得到沙棘籽油，其中一级分离的温度为36℃，压力为18MPa；二级分离的温度为36℃，压力为12MPa。
实施例4
使用干燥设备，将沙棘籽在38℃干燥2小时；在微波功率560W条件下辐射15分钟；采用传统的压榨法进行压榨得沙棘籽粗油；将沙棘籽粗油在温度为37℃、压力为24MPa下，采用超临界设备，进行CO2萃取2.0h；萃取物经一级分离和二级分离后得到沙棘籽油，其中一级分离的温度为36℃，压力为18MPa；二级分离的温度为36℃，压力为12MPa。
实施例5
使用干燥设备，将沙棘籽在42℃干燥2～3小时；在微波功率590W条件下辐射12分钟；采用传统的压榨法进行压榨得沙棘籽粗油；将沙棘籽粗油在温度为36℃、压力为25MPa下，采用超临界设备，进行CO2萃取1.5h；萃取物经一级分离和二级分离后得到沙棘籽油，其中一级分离的温度为36℃，压力为18MPa；二级分离的温度为36℃，压力为12MPa。
实施例6
使用干燥设备，将沙棘籽在45℃干燥3小时；在微波功率600W条件下辐射15分钟；采用传统的压榨法进行压榨得沙棘籽粗油；将沙棘籽粗油在温度为37℃、压力为26MPa下，采用超临界设备，进行CO2萃取2.0h；萃取物经一级分离和二级分离后得到沙棘籽油，其中一级分离的温度为36℃，压力为18MPa；二级分离的温度为36℃，压力为12MPa。
实施例7
使用干燥设备，将沙棘籽在35℃干燥2小时；在微波功率550W条件下辐射10分钟；采用传统的压榨法进行压榨得沙棘籽粗油；将沙棘籽粗油在温度为36℃、压力为24MPa下，采用超临界设备，进行CO2萃取1.5h；萃取物经一级分离和二级分离后得到沙棘籽油，其中一级分离的温度为36℃，压力为18MPa；二级分离的温度为36℃，压力为12MPa。
实施例8
使用干燥设备，将沙棘籽在43℃干燥2.5小时；在微波功率570W条件下辐射14分钟；采用传统的压榨法进行压榨得沙棘籽粗油；将沙棘籽粗油在温度为37℃、压力为24MPa下，采用超临界设备，进行CO2萃取2.0h；萃取物经一级分离和二级分离后得到沙棘籽油，其中一级分离的温度为36℃，压力为18MPa；二级分离的温度为36℃，压力为12MPa。

Claims (9)

1.一种沙棘籽油的制备方法，其步骤如下：
(1)沙棘籽低温干燥；
(2)微波辐射处理10～15分钟；
(3)用榨油机压榨得沙棘籽粗油；
(4)采用超临界设备，对沙棘籽粗油进行CO2超临界萃取，萃取后得到萃取物；
(5)萃取物经一级分离和二级分离后得到沙棘籽油。
2.一种权利要求1所述的沙棘籽油的制备方法，其特征在于，其制备方法步骤(1)中低温干燥为：使用干燥设备，在35～45℃干燥2～3小时。
3.一种权利要求1所述的沙棘籽油的制备方法，其特征在于，其制备方法步骤(2)中微波辐射选择微波功率为550～600W。
4.一种权利要求1所述的沙棘籽油的制备方法，其特征在于，其制备方法步骤(3)中采用传统的压榨法进行压榨。
5.一种权利要求1所述的沙棘籽油的制备方法，其特征在于，其制备方法步骤(4)中CO2超临界萃取的条件为：将沙棘籽粗油在温度为36～37℃、压力为24～26MPa下，采用超临界设备，进行CO2萃取1.5～2.0h。
6.一种权利要求1所述的骨钙素的制备方法，其特征在于，其制备方法步骤(5)中一级分离的温度为36℃，压力为18MPa；二级分离的温度为36℃，压力为12MPa。
7.一种沙棘籽油的制备方法，其特征在于，采用以下方法制备：使用干燥设备，将沙棘籽在35～45℃干燥2～3小时；在微波功率550～600W条件下辐射10～15分钟；采用传统的压榨法进行压榨得沙棘籽粗油；将沙棘籽粗油在温度为36～37℃、压力为24～26MPa下，采用超临界设备，进行CO2萃取1.5～2.0h；萃取物经一级分离和二级分离后得到沙棘籽油，其中一级分离的温度为36℃，压力为18MPa；二级分离的温度为36℃，压力为12MPa。
8.一种由权利要求1～7任一权利要求制备方法制得的沙棘籽油。
9.一种权利要求8所述的沙棘籽油在制备辅助治疗化学性肝损伤产品中的应用。
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